Submitted by ANNA CAROLINA MIOLA (anna_fmrp@yahoo.com.br) on 2017-10-25T13:27:30Z No. of bitstreams: 1 defesa-FINAL-repositorio.pdf: 1407690 bytes, checksum: 620d293167960fc67b1031c581f71462 (MD5) / Approved for entry into archive by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com) on 2017-10-31T16:10:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 miola_ac_me_bot.pdf: 1407690 bytes, checksum: 620d293167960fc67b1031c581f71462 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-31T16:10:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 miola_ac_me_bot.pdf: 1407690 bytes, checksum: 620d293167960fc67b1031c581f71462 (MD5) Previous issue date: 2017-08-24 / Fundamentos: Campo de cancerização cutâneo representa uma área com alterações genômicas induzidas pela radiação ultravioleta, cujo sinal de atividade são as queratoses actínicas (QA). Tratamentos que visem sua estabilização podem reduzir a incidência de QA e de tumores cutâneos não melanoma. Estudos em terapia fotodinâmica com metil aminolevulinato (TFD-MAL) no tratamento do campo de cancerização cutâneo mostram redução de até 89% na contagem de QA, já com colchicina tópica, há redução de até 78%. Até o momento, não há estudos comparando colchicina com TFD-MAL. Esse trabalho objetiva avaliar eficácia e segurança de colchicina 0,5% creme versus TFD-MAL no tratamento do campo de cancerização dos antebraços. Casuística e métodos: Ensaio clínico aberto, controlado, randomizado, envolvendo 36 pacientes do ambulatório de Dermatologia da UNESP-Botucatu, com 3-10 QAs em cada antebraço, tratados (cada antebraço) com creme de colchicina 0,5% (2x/dia por 10 dias) ou uma sessão de TFD-MAL; reavaliados após 60 dias. A avaliação clínica foi realizada pela contagem de QAs, seus subtipos clínicos, sua escala de gravidade e escala de fotoenvelhecimento dos antebraços. Avaliação histopatológica foi realizada pelo escore KIN (Keratinocyte Intraepithelial Neoplasia), atrofia epitelial e imunohistoquímica de p53 e Ki67. Todos os pacientes incluídos no estudo e randomizados fizeram parte da população ITT (intention to treat). Os dados do único dropout foram imputados como LOCF (last observed carried forward). Resultados: Foram incluídos 36 participantes: 50% eram do sexo masculino, com idade média (dp) de 70,9 (8,6) anos e predominância de pacientes fototipos I e II (89%). O clearance total de QAs ocorreu em 6 (17%) de COL e 7 (19%) de MAL-PDT (p=0,76), e clearance parcial (> 50%) foi alcançado em 16 (44%) dos antebraços COL e 24 (67%) MAL-PDT (p=0,07). Houve redução significativa no escore da escala de fotoenvelhecimento para COL e TFD-MAL (-6% vs -6%), escore de gravidade de QA (-65% vs -73%), subtipos clínicos das QAs presentes e contagem de QA (-45% vs -40%), após as intervenções (p<0,01), sem diferenças significativas entre os grupos. Houve redução no escore KIN em ambos os grupos (p<0,01), normalizado em 28% dos pacientes MAL-PDT e 20% em COL. Houve redução da atrofia epitelial após 60 dias (p<0,01), sem diferenças entre os tratamentos (p=0,58). Houve redução significativa do escore Ki67 em ambos os tratamentos: 15% em COL e 9% em MAL-PDT, sem diferença entre os grupos (p=0,32). Houve redução do escore de p53 em 27% no grupo COL, porém, um aumento de 4% na MAL-PDT (p<0,05). Efeitos adversos foram relatados em ambos os grupos: 69% em COL e 67% em TFD-MAL. Não houve evento adverso grave. Conclusão: Colchicina 0,5% creme e TFD-MAL são eficazes e seguros no tratamento do campo de cancerização cutâneo. / Background: Skin field cancerization is an area with genomic alterations induced by ultraviolet radiation, and actinic keratosis (AK) is a sign of its activity. Treatments to stabilize it may reduce the incidence of non-melanoma skin cancers and AK. Photodynamic therapy with methyl aminolevulinate (TFD-MAL) in the treatment of skin field cancerization shows a reduction of up to 89% in the AK count, and topical colchicine, up to 78% of reduction. To date, there are no studies comparing colchicine with PDT-MAL. The aim of this study was to evaluate the efficacy and safety of colchicine 0.5% cream versus PDT-MAL in skin field cancerization treatment of the forearms. Patients and methods: A randomized, controlled clinical trial involving 36 patients from the UNESP-Botucatu Dermatology outpatient clinic, with three to 10 AKs in each forearm, treated (each forearm) with colchicine cream (2x / day for 10 days) and one session of PDT-MAL. Reassessed after 60 days. Clinical evaluation was performed by AK count, its clinical subtypes, severity scale and forearm photoaging scale. Histopathological evaluation performed by KIN (Keratinocyte Intraepithelial Neoplasia), epithelial atrophy and immunohistochemistry of p53 and Ki67. All patients included in the study and randomized were part of the ITT population (intention to treat). The only dropout was analyzed through LOCF (last observation carried forward). Results: Thirty-six participants were included: 50% were males, mean age (SD) of 70.9 (8.6) years and predominance of phototype I and II patients (89%). Total clearance of AK occurred in 6 (17%) of COL and 7 (19%) of MAL-PDT (p = 0.76), and partial clearance (> 50%) was achieved in 16 (44%) of COL and 24 (67%) of MAL-PDT (p = 0.07). There was a significant reduction in the photodamage scale for COL and PDT-MAL (-6% vs -6%), AK severity score (-65% vs -73%), clinical subtypes of the present AK and AK (-45% vs -40%) after interventions (p <0.01), with no significant differences between the groups (p> 0.24). There was a reduction in KIN score in both groups (p <0.01), normalized in 28% of MAL-PDT patients and 20% in COL. There was reduction of epithelial atrophy after 60 days (p <0.01), with no differences between treatments (p = 0.58). There was a significant reduction of the Ki67 score in both treatments: 15% in COL and 9% in MAL-PDT, with no difference between groups (p = 0.32). There was a reduction of the p53 score in 27% in the COL group, but a 4% increase in MAL-PDT (p <0.05). Adverse effects were reported in both groups: 69% in COL and 67% in PDT-MAL. There was no serious adverse event. Conclusion: Colchicine 0.5% cream and TFD-MAL are effective and safe in skin field cancerization treatment.

A instabilidade genômica tem sido amplamente usada para caracterizar células cancerosas. Alterações genéticas em queratose actínica (QA) e carcinoma espinocelular (CEC) foram investigadas pelo método de random amplified polymorphic DNA (RAPD) e análise de microssatélites com o objetivo de encontrar marcadores moleculares para auxiliar o prognóstico e o diagnóstico médico. O DNA foi obtido de pacientes brasileiros cirurgiados e tratados no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, totalizando oito QAs, 24 CECs, e tecidos normais e/ou leucócitos correspondentes. Os microssatélites estudados foram D6S251, D6S252, D9S15, D9S50, D9S52, D9S180, D9S196, D9S280 e D9S287, tendo em vista a detecção de instabilidade genômica representada por perda de heterozigosidade (LOH) e instabilidade de microssatélites (MSI). Os \"primers\" usados para comparar os padrões de RAPD foram OPA-2, OPA-7, OPA-13, OPA-17, OPB-8, OPB-13, OPB-17 e OPB-19. Foi obtida correlação significativa na progressão de QA (1/8) para CEC (5/22) referente ao microssatélite D6S251. As diferenças nos padrões de DNA obtidos pelo método RAPD comparados aos controles foram maiores em lesões com maior grau de severidade segundo critério histológico. O mesmo padrão RAPD foi observado no controle e no tumor em 27% QA, 24% CEC I, 9% CEC II e 0% CEC III. Estes resultados mostram que o microssatélite D6S251 e o método de RAPD são informativos, podendo ser potenciais candidatos para auxílio no diagnóstico e prognóstico de QA e CEC. / Genomic instability has been widely used to characterize cancer cells. Genetic alterations in human actinic keratosis (AK) and squamous cell carcinomas (SCC) were investigated by the random amplified polymorphic DNA (RAPD) method, and microsatellite analysis. DNA was obtained from Brazilian patients diagnosed and treated in the School of Medicine of University of Sao Paulo out Clinics Hospital. Eight AKs, 24 SCCs, and 4 BCCs, matched to normal skin tissue and/or leukocytes were studied. Microsatellite patterns were obtained with primers specific to amplify D6S251, D6S252, D9S15, D9S50, D9S52, D9S180, D9S196, D9S280, and D9S287, in search of detection Loss of heterozygosity (LOH) and Microsatellite instability (MSI). The RAPD primers were: OPA-2, OPA-7, OPA-13, OPA-17, OPB-8, OPB-13, OPB-17, and OPB-19. A significant correlation was obtained regarding the progress of AK (1/8) to SCC (5/22) detected with the D6S251 microsatellite. DNA fingerprint obtained with RAPD primers were altered in increasing number of samples, according to their histological degree of differentiation. Similar RAPD patterns were observed in tumor and control in 27% AK, 24% SCC I, 9% SCC II, and zero SCC III. These results suggest microsatellite D6S251 and RAPD method to be potential tools in diagnosis and prognosis of AK and SCC.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-07-19T14:11:29Z No. of bitstreams: 1 marilhotadeudornelas.pdf: 12344431 bytes, checksum: 54c1201792fc2e6934f063da77401a72 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-09T12:10:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 marilhotadeudornelas.pdf: 12344431 bytes, checksum: 54c1201792fc2e6934f063da77401a72 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-09T12:10:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marilhotadeudornelas.pdf: 12344431 bytes, checksum: 54c1201792fc2e6934f063da77401a72 (MD5) Previous issue date: 2009-03-26 / O câncer de pele é o mais frequente tipo de câncer humano e mostra aumento de sua incidência nos últimos anos, o que o torna um crescente problema para a saúde pública mundial. Em muitos casos, antes do surgimento do carcinoma, instala-se uma lesão precursora, - a Ceratose Actínica, que pode evoluir para Carcinoma Espinocelular. Considerando o aumento de novos casos e recidivas frequentes, estudos tem sido intensificados no sentido de determinar os parâmetros com significado prognóstico na predição daqueles tumores que terão comportamento mais agressivo, que poderão recorrer e evoluir com metástases. O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão dos marcadores de proliferação celular (PCNA, Ki-67) e apoptose (p53, Bcl-2), em portadores de Carcinoma Espinocelular e Ceratose Actínica. Foram estudadas amostras de 30 pacientes, submetidos à cirurgia reparadora, sendo dez portadores do Carcinoma Espinocelular, dez de Ceratose Actínica e dez indivíduos livres de lesões submetidos à blefaroplastia. A proteína p53 foi expressa em todos os casos estudados, com padrões quantitativos diferentes. O Bcl-2 foi expresso em baixa intensidade em seis casos de Ceratose Actínica, também baixa nas peles de blefaroplastia e negativo nos casos de Carcinoma Espinocelular. O PCNA exibiu expressão intensa em todas as amostras estudadas. O Ki-67 apresentou expressão variável nos casos de carcinoma e de ceratose e negativo na pele de pálpebra. A intensidade da expressão de PCNA, Ki-67, p53 e Bcl-2, associada a outros indicadores, tais como a análise histopatológica e a apresentação clínica, fornece informações sobre a provável progressão, levando a um diagnóstico mais seguro da neoplasia. / The skin cancer is the most frequent type of human cancer and shows an increase in its incidence in recent years, making it an important public health problem worldwide. In many cases before the onset of carcinoma install a precursor lesion, actinic keratosis, which can develop into squamous cell carcinoma. Considering the increase of new cases and relapses frequent, studies have been intensified in order to determine the parameters with prognostic significance in predicting those tumors which have more aggressive behavior, and can develop metastases. The objective was to evaluate the expression of markers of cell proliferation (PCNA, Ki-67) and apoptosis (p53,Bc1-2) in patients with squamous cell carcinoma and actinic keratosis. We studied samples from 30 patients, ten patients of squamous cell carcinoma, ten with actinic keratosis and ten samples free of lesions underwent blepharoplasty. The p53 protein was expressed in all cases with different quantitative patterns. The Bcl-2 was expressed at low intensity in six cases of actinic keratosis in the skins of blepharoplasty and negative in cases of squamous cell carcinoma. The PCNA showed intense expression in all samples. The Ki-67 showed variable expression in cases of keratosis and carcinoma and negative in the skin of eyelid. In conclusion the intensity of expression of PCNA, Ki-67, P53 and Bcl-2, associated with other indicators such as histopathological analysis and clinical presentation, provides information on the likely progression, leading to a more secure diagnosis of malignancy.