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Perfil metabólico energético e enzimático hepático e sua influência no retorno à ciclicidade e ocorrência de infecções uterinas pós-parto em vacas leiteiras cruzadas Gir x Holandês.SANTOS, J. D. 27 February 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-02-27 / Desordens metabólicas e reprodutivas afetam vacas leiteiras no pós-parto
apresentando relevante importância econômica, pois reduzem a produção.
Objetivou-se verificar a influência das alterações clínicas e reprodutivas, escore de condição corporal (ECC), perfil metabólico energético e enzimático hepático no retorno à ciclicidade ovariana e ocorrência de infecções uterinas pós-parto em fêmeas leiteiras. Foram utilizadas 53 fêmeas cruzadas Gir x Holandês, provenientes de propriedades do Sul do Espírito Santo, subdivididas em dois grupos: Primíparas, com 19 fêmeas de primeira cria e; Multíparas, com 34 fêmeas com mais de dois partos. Avaliou-se os seguintes momentos: 15 dias pré-parto e, 15, 30, 45 e 60 dias pós-parto. No exame físico avaliou-se as frequências cardíaca (FC) e respiratória (FR), temperatura retal (TºR), peso e ECC. Foram coletadas amostras sanguíneas por meio de venopunção da veia coccígea para avaliação das concentrações séricas de β-hidroxibutirato, colesterol total e lipoproteínas (perfil energético) e alanina aminotransferase (ALT), gama glutamiltransferase (GGT) e fosfatase alcalina (FA) (perfil enzimático hepático). O exame ginecológico foi realizado por meio de palpação e ultrassonografia transretal. O útero foi avaliado quanto ao tamanho, posição, consistência e simetria de cornos uterinos para acompanhamento do processo de involução uterina e os ovários, quanto ao tamanho e presença de estruturas ovarianas para determinação do retorno à atividade ovariana luteal cíclica. Realizou-se o exame de vaginoscopia para avaliação da presença e características das secreções vaginais. As infecções uterinas foram classificadas como metrite clínica e puerperal e endometrite clínica de acordo com a característica e tempo da secreção liberada e; endometrite subclínica quando diagnosticada por citologia endometrial. As variáveis paramétricas foram submetidas ao teste de Tukey e variáveis não paramétricas, ao teste de Kruskall-Wallis. Para correlação, utilizou-se o teste de correlação de Spearman; todos com nível de significância de 5%. Os parâmetros clínicos de FC, FR e TºR encontraram-se dentro dos limites de normalidade estabelecidos para a espécie. O ECC variou de 4 a 2,5 e o peso, de 273 a 315kg; observou-se diminuição nos dois parâmetros do momento D-15 para os demais, indicando a importância da adoção de estratégias que minimizem os efeitos da perda de condição corporal pós-parto.; sendo observadas diferenças entre os grupos em todos os momentos avaliados para o peso. Aos 60 dias pós-parto 33,96%(18/53) dos animais haviam retomado a atividade ovariana. Não observou-se diferença no tamanho dos ovários entre momentos e grupos. Em relação ao tamanho de útero e cérvix notou-se diminuição entre D-15 e os demais, entretanto, não observou-se diferenças entre grupos. A incidência de infecções uterinas foi de 33,96%(18/53), sendo que 27,78%(5/18) dos animais que cursaram a enfermidade eram primíparas.
Dos animais que apresentaram infecção uterina, 50%(9/18) apresentaram metrite clínica, dos quais 33,33% eram primíparas e 50%(9/18) apresentaram endometrite clínica, sendo 22,22% primíparas. Nenhum animal apresentou endometrite subclínica. A perda de ECC pós-parto não influenciou na ocorrência de infecções uterinas e no retorno à ciclicidade. Não houve correlação entre a ocorrência de cetose e infecções uterinas nem com o tempo de retorno ao cio pós-parto. Não foram observadas alterações no perfil metabólico enzimático hepático.
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Avaliação da influência de cetose em vacas leiteiras / Incidence of ketosis in dairy cows: evaluationLago, Ernani Paulino do 30 April 1997 (has links)
Um estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar a incidência de cetose em vacas leiteiras no início da lactação através da análise de beta-hidroxibutirato (BHBA), glicose e aspartato-aminotransferase (AST) no plasma. Os efeitos de BHBA, condição corporal e perda de condição corporal sobre a perfomance lactacional e o uso de testes de campo para monitorar vacas com cetose também foram avaliados. Cento e dezoito vacas holandesas de um rebanho comercial, que pariram entre 5 de fevereiro a 24 de junho de 1996, foram estudadas com relação à ordem de lactação, produção de leite, teor de gordura e presença de corpos cetônicos (CC) no leite, peso e condição corporal, níveis plasmáticos de BHBA, glicose e AST durante as oito primeiras semanas de lactação. Também foram observadas as doenças que ocorreram neste período. A cetose subclínica foi observada em 16 animais, representando 13,5% da amostra, sendo que apenas um caso evoluiu para a forma clínica. O pico de incidência ocorreu na primeira e segunda semanas de lactação com tendência a ser maior em vacas mais velhas. Os testes de campo foram eficientes para detectar a maioria dos animais com cetose, exceto na primeira semana de lactação. O escore de condição corporal (ECC) ao parto não afetou a produção de leite e a incidência de doenças o período pós-parto. Todavia as vacas que tiveram intensa mobilização de reservas corporais (avaliada através da perda de mais de 40 kg de peso vivo e 1 ECC), tiveram significativamente menor produção de leite e maior incidência de cetose e problemas de casco sendo esta portanto, mais prejudicial do que a própria condição corporal ao parto, BHBA maior que 10 mg/dl afetou negativamente a produção de leite no início da lactação porém seus níveis não estiveram associados às doenças que ocorreram neste período. Em conclusão, o ECC ao parto não afetou a performance das vacas no pós-parto, entretanto grande mobilização de reservas ) aumentou a incidência de cetose e reduziu a produção e leite. Assumiu-se que a cetose esteja ocorrendo com incidência semelhante em vários outros rebanhos que adotam o mesmo nível no manejo, conforto e práticas de alimentação que o do rebanho estudado, e foi sugerido que o supercondicionamento das vacas ao parto deve ser evitado / A survey was conducted to determine the incidence of energetic metabolic disorders in dairy cows on early lactation using blood levels of βHidroxibutiric acid (BHBA), glycose, and Aspartate-aminotransferase (AST). The effects of BHBA levels, body condition score (BCS) and body condition loss on lactation performance were determined. A field test to identify ketotic animals was also used. One hundred and eighteen Holstein cows from a commercial heard, calving from February 5 and June 24 of 1996 were used during the first 8 weeks post partum. Data was collected for parity, milk production, milk fat content, ketones in milk, body wight and condition score, plasma levels of BHBA, glycose e AST. The incidence of diseases was also monitored. Subclinical ketosis was observed in 16 (13.5%) animals. One animal developed clinical signs. Peak incidence occurred in the first two weeks of lactation with older cows being the most affected. The field test was efficient in detecting most ketotic animals except in the first week post partum. BCS at parturition did not affect milk production nor incidence of diseases post partum. However cows with high mobilization of body reserves produced less milk and had a higher incidence of ketosis, and hoof problems indicating that BCS loss is a better predictor of the incidence of disorders then the absolute value. BHBA values grater then 10 mg/dl decreased milk production on early lactation but was not associated to other problems during the period. In conclusion, BCS at parturition did not affect cows performance pospartum; however, mobilization of body reserves (>40 kg and > 1 BCS), increased incidence of ketosis and reduced milk production. Was assumed that incidence of ketosis are similar to other herds with similar management, nutrition and animals comfort, and was suggest that overconditioned cows at parturition must be avoided
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Acidose metabólica agrava a lesão renal aguda isquêmica em ratos / Metabolic acidosis exacerbates ischemic acute renal injury in ratsMagalhães, Patrícia Andréa da Fonseca 18 February 2016 (has links)
MAGALHÃES, P. A. F. Acidose metabólica agrava a lesão renal aguda isquêmica em ratos. 2016. 110 f. Tese (Doutorado em Ciências Farmacêuticas) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2016-03-29T13:57:35Z
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Previous issue date: 2016-02-18 / Lesão renal por isquemia/reperfusão (I/R) e acidose metabólica (MA) são duas condições críticas que podem ocorrer simultaneamente na prática clínica. O resultado dessa combinação pode ser prejudicial para os rins, mas esta questão não tem sido exaustivamente estudada até hoje. O presente estudo avaliou em ratos a influência do baixo pH sistêmico em vários parâmetros da função renal mediante lesão renal por I/R. A acidose metabólica foi induzida em ratos Wistar machos através da ingestão de cloreto de amônio (NH4CI) dissolvido em água da torneira, começando 2 dias antes da agressão isquêmica e mantida durante todo o estudo. Isquemia/reperfusão renal foi induzida por clampeamento de ambas as artérias renais durante 45 min, seguido por 48 h de reperfusão. Foram estudados quatro grupos de animais: controle (submetido à cirurgia sham, n = 8), I/R (n = 8), acidose metabólica (AM; solução de NH4CI 0,28 M e cirurgia sham, n = 6), e AM+I/R (solução de NH4CI 0,28 M + I/R, n = 9). Em comparação com grupo I/R, ratos AM+I/R exibiram redução significativa de pH sanguíneo, bicarbonato plasmático (pBic), e excesso de base (SBE), com declínio no ritmo de filtração glomerular e função tubular. Foram detectados sinais de lesão tubular microscópica. Imunofluorescência mostrou que a combinação entre acidose metabólica e isquemia/reperpusão renal aumentou nitidamente a expressão do fator nuclear kappa B (NF-B) e da heme oxigenase-1 (HO-1), mas não interferiu na diminuição da expressão da óxido nítrico sintase endotelial (eNOS) causada por I/R. Os resultados sugerem que a lesão renal induzida por isquemia/reperfusão é agravada pela acidose.
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Características clínicas, contribuintes e taxa de mortalidade no desenvolvimento da síndrome da infusão do propofol meta-análise de série e relato de casos /Pires, Michelle Catarina January 2016 (has links)
Orientador: Norma Sueli Pinheiro Módolo / Resumo: Há vinte e cinco anos, o primeiro caso de síndrome da infusão do propofol foi descrito e, até hoje, são ainda desconhecida às verdadeiras razões para seu desenvolvimento. O objetivo desta revisão sistemática e meta-análise proporcional é avaliar os fatores contribuintes, sinais clínicos e taxa de mortalidade relacionada à ocorrência da síndrome da infusão do propofol. Métodos: Revisão sistemática da literatura e meta-análise proporcional de relatos e série de casos de pacientes com síndrome da infusão do propofol. A meta-análise foi realizada avaliando o desfecho morte associada com dose (< 240mg/Kg versus ≥ 240mg/Kg) ou tempo de infusão (< 48h contra ≥ 48h) usando um modelo de efeito randômico. Os intervalos de confiança de 95% também foram calculados. Resultados: Foram incluídos 59 relatos e série de casos com um total de 75 pacientes. Acidose metabólica e doenças cardíacas foram associadas com aumento das taxas de mortalidade. Houve uma diferença estatisticamente significante favorecendo a dose total propofol inferior a 240mg/Kg 31% (IC 95% 16% a 49%) em comparação com ≥ 240mg/Kg 66% (lC 95% 52% a 79%) na redução das taxas de mortalidade. Houve também uma proporção estatisticamente maior de morte no período de administração de propofol ≥ 48h 64% (IC de 95% 51% a 76%) em comparação com < 48h 20% (IC 95% 14% a 48%). Conclusão: Estes dados sugerem que tanto a acidose metabólica, quanto os distúrbios cardíacos podem ser preditores da mortalidade em pacientes com síndrome da in... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Twenty-five years ago the first case of propofol infusion syndrome was described and, until today, it is yet unknown the true reasons for it’s develop. The aim of this systematic review and proportional meta-analysis is to evaluate the contributing factors, clinical signs and mortality rate related to the occurrence of the propofol infusion syndrome. Methods: Literature review and proporcional meta-analysis of both, reports and case series of all patients with propofol infusion syndrome undergoing either general surgey or ICU. The meta-analysis was performed on death associated with either dose (< 240mg/Kg versus ≥ 240 mg/Kg) or infusion time (< 48h versus ≥ 48h) using a radom-effect model. The 95% confidential intervals were also calculed. Results: 59 studies were included with a total of 75 patients. Metabolic acidosis and cardiac disorders were associated with increase rates of mortality. There was a statistically significance difference favoring propofol total dose less than 240mg/Kg 31% (CI 95% 16% to 49%) compared to ≥ 240mg/Kg 66% (CI 95% 52% to 79%) in the reduction of mortality rates. There was also a statistically higher proportion of death in the infusion propofol period ≥ 48h 64% (CI 95% 51% to 76%) compared to < 48h 29% (CI 95% 14% to 48%). Conclusion: These data suggests that both metabolic acidosis and cardiac disorders might be predictors of the development of mortality in patients with propofol infusion syndrome. Furthermore, our data showed that higher infus... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Perfil metabólico de vacas receptoras e de bezerros da raça Nelore produzidos por fertilização in vitro (FIV) / Metabolic profile of recipient cows and Nelore calves produced by in vitro fertilization (IVF)Paiola, Igor Augusto Andreta 17 September 2018 (has links)
A biotecnologia de fertilização in vitro (FIV) de embriões aplicadas a reprodução em bovinos permitiu grandes avanços genéticos para a pecuária mundial, particularmente no Brasil. A massificação do uso comercial da FIV no Brasil se deve, em parte, ao predomínio da raça Nelore na pecuária de corte nacional, devido às características da fisiologia reprodutiva. Entretanto as condições sub-ótimas no ambiente embrionário in vitro, geram distúrbios no desenvolvimento do embrião, da placenta e do feto, resultando em morte embrionária, abortamentos e falhas na adaptação neonatal a vida extrauterina. Distúrbios cardio-respiratórios com hipóxia, hipercapnia e acidose, hipoglicemia e hipotermia associados a macrossomia são frequentemente diagnosticados nesses neonatos. Para caracterizar as diferenças do metabolismo energético de bezerros da raça Nelore produzidos por fertilização in vitro daqueles produzidos por inseminação artificial (IA); as possíveis repercussões da hipóxia sobre o metabolismo energético no final da gestação; da macrossomia sobre o metabolismo energético materno no final da gestação; documentar o controle glicêmico dos fetos e das vacas durante o último mês de gestação; a determinação da existência ou não de resistência à insulina nos bezerros recém-nascidos de FIV, o presente projeto compreendeu: No primeiro experimento, avaliar o último mês de gestação de 8 vacas receptoras de embriões de FIV da raça Nelore e 12 vacas Nelores com gestações por IA submetidas a cesariana sendo colhido amostras de sangue venoso em 5 momentos (270, 280 dias de gestação, antes da indução do parto, 12 horas após a indução do parto e 24 horas após a indução, antes da cesariana), para determinação dos teores séricos de ureia, creatinina, proteína, albumina, γ-glutamil transferase, colesterol, triglicérides, BHB, NEFA, teores plasmáticos de glicose e lactato. Nos respectivos bezerros obtidos por cesariana foram avaliados e colhidos sangue venoso em 11 momentos (0, 3, 6, 12,24, 48, 72 horas após o nascimento, 5, 7, 15 e 30 dias após o nascimento) para determinação dos teores séricos de ureia, creatinina, proteína, albumina, γ-glutamil transferase, colesterol, triglicérides, BHB, NEFA e, teores plasmáticos de glicose e lactato, frutosamina ao nascimento e insulina sérica nos momentos (0, 12, 24 horas e 7 dias após o nascimento) . No segundo experimento foram avaliadas 17 e 16 vacas receptoras de embriões de FIV da raça Nelore com bezerros de peso padrão e de peso elevado, respectivamente e 16 vacas Nelores com gestações por IA com parto natural e colhido amostras de sangue venoso em 2 momentos (288 dias de gestação e após o parto), sendo realizado as determinações supracitadas das vacas do experimento 1. Nos respectivos bezerros nascidos naturalmente foram avaliados e colhidos sangue venoso em 2 momentos (até 6 horas de vida e entre 24 a 36 horas de vida) para realização das determinações dos teores séricos de ureia, creatinina, proteína, albumina, γ-glutamil transferase, colesterol, triglicérides, BHB, NEFA, insulina e teores plasmáticos de glicose e lactato. / The objective of this study was to evaluate the effects of giant calf syndrome (macrossomia) on the metabolic profile and glycemic control of IVF recipients or AI pregnant cows and their calves. This investigation includes four experiments in which venous blood was collected from all animals to determine serum levels of urea, creatinine, protein, albumin, GGT, cholesterol, triglycerides, β-HBO, NEFA, glucose and lactate. In the first experiment Nelore embryo recipient cows were used for IVF (n = 8) and AI pregnant Nelore cows submitted to cesarean section (n = 12). Five moments were evaluated: 270, 280 gestation days, before labor induction, 12 and 24 hours after induction. In the second experiment the cesarean section obtained calves were evaluated in 11 moments: 0, 3, 6, 12, 24, 48, 72 hours and 5, 7, 15 and 30 days after birth. Besides the birth measured fruitosamine and serum insulin at the moments: 0, 12, 24 hours and 7 days after birth. In the third experiment, Nelore IVF embryo recipient cows were evaluated for standard weight calves (n = 17), high weight (n = 16) and natural calving AI gestation Nelore cows (n = 16) as control group. The evaluated moments were 288 gestation days and up to 6 hours after the natural calving. Two moments were determined: 288 gestation days and after calving. In the fourth experiment, newborn Nelore calves (n = 76) were used, divided in three groups: Nelore calves by term AI (n=27), Nelore calves by term IVF with standard breed weight (n = 32) and Nelore calves by term with macrosomia (n = 17, weight>45 kg). The evaluated moments were up to 6 hours and between 24 and 36 hours of life. In addition to the fruitosamine measured at the first moment. For statistical analysis in experiments 1 and 2, Tukey\'s test was used for time and Student for treatment effect, in experiments 3 and 4, Tukey\'s test was used for treatment effect and Paired t-test for time effect, using the statistical program Sigma Stat 3.5. IVF calves with macrosomia were 33% (16/48). Regarding the urea of the IVF recipient or AI pregnant cows, there was statistical difference between the treatments within each time (cesarean section). Regarding kidney function, there was a statistical difference between urea and creatinine in the first and fourth experiment, respectively. In the evaluation of energy metabolism there was a difference in cholesterol, triglycerides and plasma glucose among the animals of the first and second experiments. Also, in the penultimate there was statistical relevance of the non-esterified fatty acid. In the comparison between the third experiment animals there was difference for cholesterol and triglycerides. In the fourth experiment, there was a difference in cholesterol and plasma lactate (P <0.05). Therefore, it is suggested that the renal and metabolic profile are similar between IVF recipient and AI pregnant cows, as well as among their calves. In addition, it is recommended to monitor IVF calves during the first week of life due to hypoglycaemia and hyperinsulinemia.
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Perfil metabólico de vacas receptoras e de bezerros da raça Nelore produzidos por fertilização in vitro (FIV) / Metabolic profile of recipient cows and Nelore calves produced by in vitro fertilization (IVF)Igor Augusto Andreta Paiola 17 September 2018 (has links)
A biotecnologia de fertilização in vitro (FIV) de embriões aplicadas a reprodução em bovinos permitiu grandes avanços genéticos para a pecuária mundial, particularmente no Brasil. A massificação do uso comercial da FIV no Brasil se deve, em parte, ao predomínio da raça Nelore na pecuária de corte nacional, devido às características da fisiologia reprodutiva. Entretanto as condições sub-ótimas no ambiente embrionário in vitro, geram distúrbios no desenvolvimento do embrião, da placenta e do feto, resultando em morte embrionária, abortamentos e falhas na adaptação neonatal a vida extrauterina. Distúrbios cardio-respiratórios com hipóxia, hipercapnia e acidose, hipoglicemia e hipotermia associados a macrossomia são frequentemente diagnosticados nesses neonatos. Para caracterizar as diferenças do metabolismo energético de bezerros da raça Nelore produzidos por fertilização in vitro daqueles produzidos por inseminação artificial (IA); as possíveis repercussões da hipóxia sobre o metabolismo energético no final da gestação; da macrossomia sobre o metabolismo energético materno no final da gestação; documentar o controle glicêmico dos fetos e das vacas durante o último mês de gestação; a determinação da existência ou não de resistência à insulina nos bezerros recém-nascidos de FIV, o presente projeto compreendeu: No primeiro experimento, avaliar o último mês de gestação de 8 vacas receptoras de embriões de FIV da raça Nelore e 12 vacas Nelores com gestações por IA submetidas a cesariana sendo colhido amostras de sangue venoso em 5 momentos (270, 280 dias de gestação, antes da indução do parto, 12 horas após a indução do parto e 24 horas após a indução, antes da cesariana), para determinação dos teores séricos de ureia, creatinina, proteína, albumina, γ-glutamil transferase, colesterol, triglicérides, BHB, NEFA, teores plasmáticos de glicose e lactato. Nos respectivos bezerros obtidos por cesariana foram avaliados e colhidos sangue venoso em 11 momentos (0, 3, 6, 12,24, 48, 72 horas após o nascimento, 5, 7, 15 e 30 dias após o nascimento) para determinação dos teores séricos de ureia, creatinina, proteína, albumina, γ-glutamil transferase, colesterol, triglicérides, BHB, NEFA e, teores plasmáticos de glicose e lactato, frutosamina ao nascimento e insulina sérica nos momentos (0, 12, 24 horas e 7 dias após o nascimento) . No segundo experimento foram avaliadas 17 e 16 vacas receptoras de embriões de FIV da raça Nelore com bezerros de peso padrão e de peso elevado, respectivamente e 16 vacas Nelores com gestações por IA com parto natural e colhido amostras de sangue venoso em 2 momentos (288 dias de gestação e após o parto), sendo realizado as determinações supracitadas das vacas do experimento 1. Nos respectivos bezerros nascidos naturalmente foram avaliados e colhidos sangue venoso em 2 momentos (até 6 horas de vida e entre 24 a 36 horas de vida) para realização das determinações dos teores séricos de ureia, creatinina, proteína, albumina, γ-glutamil transferase, colesterol, triglicérides, BHB, NEFA, insulina e teores plasmáticos de glicose e lactato. / The objective of this study was to evaluate the effects of giant calf syndrome (macrossomia) on the metabolic profile and glycemic control of IVF recipients or AI pregnant cows and their calves. This investigation includes four experiments in which venous blood was collected from all animals to determine serum levels of urea, creatinine, protein, albumin, GGT, cholesterol, triglycerides, β-HBO, NEFA, glucose and lactate. In the first experiment Nelore embryo recipient cows were used for IVF (n = 8) and AI pregnant Nelore cows submitted to cesarean section (n = 12). Five moments were evaluated: 270, 280 gestation days, before labor induction, 12 and 24 hours after induction. In the second experiment the cesarean section obtained calves were evaluated in 11 moments: 0, 3, 6, 12, 24, 48, 72 hours and 5, 7, 15 and 30 days after birth. Besides the birth measured fruitosamine and serum insulin at the moments: 0, 12, 24 hours and 7 days after birth. In the third experiment, Nelore IVF embryo recipient cows were evaluated for standard weight calves (n = 17), high weight (n = 16) and natural calving AI gestation Nelore cows (n = 16) as control group. The evaluated moments were 288 gestation days and up to 6 hours after the natural calving. Two moments were determined: 288 gestation days and after calving. In the fourth experiment, newborn Nelore calves (n = 76) were used, divided in three groups: Nelore calves by term AI (n=27), Nelore calves by term IVF with standard breed weight (n = 32) and Nelore calves by term with macrosomia (n = 17, weight>45 kg). The evaluated moments were up to 6 hours and between 24 and 36 hours of life. In addition to the fruitosamine measured at the first moment. For statistical analysis in experiments 1 and 2, Tukey\'s test was used for time and Student for treatment effect, in experiments 3 and 4, Tukey\'s test was used for treatment effect and Paired t-test for time effect, using the statistical program Sigma Stat 3.5. IVF calves with macrosomia were 33% (16/48). Regarding the urea of the IVF recipient or AI pregnant cows, there was statistical difference between the treatments within each time (cesarean section). Regarding kidney function, there was a statistical difference between urea and creatinine in the first and fourth experiment, respectively. In the evaluation of energy metabolism there was a difference in cholesterol, triglycerides and plasma glucose among the animals of the first and second experiments. Also, in the penultimate there was statistical relevance of the non-esterified fatty acid. In the comparison between the third experiment animals there was difference for cholesterol and triglycerides. In the fourth experiment, there was a difference in cholesterol and plasma lactate (P <0.05). Therefore, it is suggested that the renal and metabolic profile are similar between IVF recipient and AI pregnant cows, as well as among their calves. In addition, it is recommended to monitor IVF calves during the first week of life due to hypoglycaemia and hyperinsulinemia.
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Estudo do perfil bioquímico, hormonal e anatomopatológico do parênquima hepático e renal em cabras e ovelhas com diagnóstico de toxemia da prenhez.SOUTO, Rodolfo José Cavalcanti 25 February 2013 (has links)
Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-10T13:39:50Z
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Previous issue date: 2013-02-25 / Pregnancy disease (PD) occurs mainly in sheep and goats, supplemented with concentrate, whose expression is due to negative energy balance during the transition period in which the females present in the clinical hyperketonemia, hypoglycemia, ketonuria, anorexia and signs neurological can progress to death. This paper aims to conduct a study of the biochemical and hormonal profile in sheep and goats, and pathology of the liver parenchyma and renal function in sheep with PD diagnosis. We used data (case report forms) and biological materials (serum, plasma and tissue) of 45 sheep and 22 goats that were answered in Bovine Clinic, Campus Garanhuns / UFRPE, diagnosed with PD, from January 2007 to October 2012 . The blood analyzes were: urea, creatinine, albumin, total protein, globulin, β-hydroxybutyrate, non-esterified fatty acids (NEFA), glucose, fructosamine, amylase, aspartate aminotransferase (AST), gamma glutamyl transferase (GGT), vitamin B12 , folic acid, cortisol, insulin, and total ionized Ca, P, Ca: P ratio, Mg, Na, K. Cl. Besides the characterization of macro and histopathological findings of the liver and kidneys of sheep that died. Urine was examined in the presence of ketones employing the reagent strip commercial. Sheep subjected to necropsy were collected fragments of liver and kidneys for histopathological analysis. Marked clinical abnormalities were observed in goats with high values for urea, creatinine, NEFA, β-hydroxybutyrate, amylase and cortisol, while total protein, albumin, total calcium, ionized calcium, phosphorus, the calcium and phosphorus, sodium and insulin were found below the reference values for the species. As for glucose, 77.28% of goats were normoglycemic TP and / or hyperglycemic, while only 22.72% were hypoglycemic. The results of the sheep revealed elevated levels of urea, creatinine, glucose, fructosamine, NEFA's, β-hydroxybutyrate, cortisol, chlorine, AST, GGT amylase and folic acid as the variable insulin, total calcium, ionized calcium and potassium were values below the reference values for the species. As for glucose, 82.90% of the sheep were normoglycemic with PD and / or hyperglycemic, while only 17.10% were hypoglycemic. With regard to the macroscopic group of sheep with lower body score showed an increase of the liver, and yellowing and the cutting surface, while the sheep with higher body score these findings were more intense. Kidney was observed on the surface in some pallor of lean animals and light yellowish in animal fat. Regarding histological alterations, it was found in animals with lower body condition, liver vacuolated ranging from rare discreet. As the renal injury, rare tubular vacuolation of epithelial cells were observed in 28,57%. In sheep with higher body condition scores greater percentage of vacuolation in the liver was observed and ranged from moderate to severe. Regarding renal lesions, 33.33% of the animals showed severe lesion vacuolization of tubular epithelial cells. Marked clinical and metabolic changes were observed in goats and sheep PD, in which the increase of the energy profile certain metabolites and hormones are important diagnostic tools for assessing the magnitude of negative energy balance and the clinical condition of the animals. In sheep PD causes significant changes in renal parenchyma, characterized by vacuolization of cells that are associated tubular body condition score of the animal. / A toxemia da prenhez (TP) ocorre principalmente em ovelhas e cabras, suplementadas com concentrado, cuja manifestação se deve a um balanço energético negativo durante o período de transição, no qual as fêmeas apresentam quadro clínico de hipercetonemia, hipoglicemia, cetonúria, anorexia e sinais neurológicos que pode evoluir para a morte. Este trabalho se propõe a realizar um estudo do perfil bioquímico e hormonal em cabras e ovelhas, e anatomopatológico do parênquima hepático e renal em ovelhas com diagnóstico de TP. Foram utilizados dados (fichas clínicas) e material biológico (soro, plasma e tecido) de 45 ovelhas e 22 cabras que foram atendidas na Clínica de Bovinos, Campus Garanhuns/UFRPE, diagnosticadas com TP, no período de janeiro de 2007 a outubro de 2012. As análises realizadas no sangue foram: uréia, creatinina, albumina, proteína total, globulina, β-hidroxibutirato, ácidos graxos não esterificados (AGNE), glicose, frutosamina, amilase, aspartato aminotransferase (AST), gama glutamiltransferase (GGT), vitamina B12, ácido fólico, cortisol, insulina, Ca total e ionizável, P, relação Ca:P, Mg, Na, K. Cl. Além da caracterização dos achados macro e histopatológicos do fígado e rins das ovelhas que vieram a óbito. Na urina foi examinada a presença de corpos cetônicos empregando-se a fita reagente comercial. Das ovelhas submetidas à necropsia foram coletados fragmentos de fígado e rins para análise histopatológica. Marcadas alterações clínicas foram observadas nas cabras, com valores elevados para ureia, creatinina, AGNE, β-hidroxibutirato, amilase e cortisol, enquanto que a proteína total, albumina, cálcio total, cálcio ionizado, fósforo, a relação cálcio e fósforo, o sódio e a insulina encontraram-se abaixo dos valores de referência para a espécie. Quanto à glicemia, 77,28% das cabras com TP eram normoglicêmicas e/ou hiperglicêmicas, enquanto apenas 22,72% eram hipoglicêmicas. Os resultados obtidos das ovelhas revelaram valores elevados de ureia, creatinina, glicose, frutosamina, AGNE’s, β-hidroxibutirato, cortisol, cloro, AST, GGT amilase e ácido fólico enquanto que a variável insulina, cálcio total, cálcio ionizado e potássio estavam com valores abaixo dos valores de referência para a espécie. Quanto à glicemia, 82,90% das ovelhas com TP eram normoglicêmicas e/ou hiperglicêmicas, enquanto apenas 17,10% eram hipoglicêmicas. Quanto aos achados macroscópicos no grupo de ovelhas com menor escore corporal, foi observado aumento do fígado, além de coloração amarelada na superfície e ao corte, enquanto que nas ovelhas com maior escore corporal estes achados foram mais intensos. Nos rins foi observada palidez na superfície em alguns dos animais magros e leve coloração amarelada em animais gordos. Quanto às alterações histológicas, verificou-se, nos animais com menor escore corporal, fígado com vacuolização que variou de rara a discreta. Quanto às lesões renais, raras vacuolizações em células epiteliais tubulares foram observadas em 28,57%. Nas ovelhas com maior escore corporal maior percentual de vacuolização no fígado foi observada e variou de moderada a acentuada. Quanto às lesões renais, 33,33% dos animais apresentaram lesão acentuada de vacuolizações em células epiteliais tubulares. Marcadas alterações clínicas e metabólicas foram observadas em cabras e ovelhas com TP, em que o aumento de certos metabólitos do perfil energético e hormonal tornam-se importantes ferramentas de diagnóstico para avaliar o balanço energético negativo e a magnitude da condição clínica dos animais. Em ovelhas a TP provoca alterações significativas no parênquima renal, caracterizadas por vacuolização de células tubulares e que estão associados ao escore corporal dos animais.
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Mecanismo de oxidação aeróbica de acetoacetato e 2-metilacetoacetato catalisada por mioglobina: implicações em desordens cetogênicas / Mechanism of the aerobic oxidation of acetoacetate and 2- methylacetoacetate catalyzed by Mb: implications for ketogenic disordersSilva, Douglas Ganini da 20 April 2011 (has links)
Acetoacetato (AA) e 2-metilacetoacetato (MAA) são compostos β-cetoácidos acumulados em diversas desordens metabólicas como no diabetes e na isoleucinemia, respectivamente. Examinamos o mecanismo de oxidação aeróbica de AA e MAA iniciada por intermediários reativos de mioglobina de coração de cavalo (Mb) gerados pela adição de H2O2. Uma rota quimioluminescente que envolve um intermediário dioxetânico cuja termólise gera espécies α-dicarbonílicas (metilglioxal e biacetilo) foi proposta e estudada. Emissão de luz ultra fraca acompanha a reação, e sua intensidade aumenta linearmente pelo aumento da concentração tanto de Mb (10-500 µM) quando AA (10-100 mM). Estudos de consumo de oxigênio mostraram que MAA é, como esperado, quase uma ordem de grandeza mais reativo que AA. Estudos de EPR com captação de spin, utilizando MNP, possibilitaram detectar adutos de MAA atribuíveis a um radical centrado no Cα (aN = 1.55 mT) e ao radical acetila (aN = 0.83 mT). O sinal do radical acetila é totalmente suprimido por sorbato, um conhecido e eficiente supressor de espécies tripletes, o que é consistente com uma rota reacional envolvendo um intermediário dioxetânico. Clivagem-α da ligação carbonila-carbonila do produto biacetilo triplete produziria, de fato, radicais acetila. Além disso, utilizando AA como substrato para Mb/H2O2, um sinal de EPR atribuível ao aduto MNP-AA• (aN = 1.46 mT e aH = 0.34 mT) foi observado e confirmado por efeito isotópico. O consumo de oxigênio e o rendimento de compostos α-dicarbonílicos foram dose-dependentes à concentração de AA ou MAA (1-50 mM) bem como à concentração de H2O2 adicionado às misturas de reação contendo Mb (até 1:10 quando medido o consumo de oxigênio, e até 1:25 quando medido o rendimento de compostos α-dicarbonílicos) e tert-butilhidroperóxido (até 1:200). Os perfis de pH (5,8-7,8) para consumo de oxigênio e rendimento de compostos α-dicarbonílicos mostraram maiores rendimentos para baixos valores de pH, indicativo de ferrilMb formada no ciclo peroxidático da proteína. Avaliando os níveis de lesão de Mb, os β-cetoácidos diminuíram o nível de desorganização protéica na estrutura secundária e terciária elicitada por H2O2. Ainda, houve maior preservação da estrutura primária da proteína, sendo que MAA protegeu mais em comparação a AA, embora quando utilizado este último composto, foi mostrado que há acetilação dose-dependente de Mb. Acetoacetato aumentou a velocidade de descoramento da hemeproteína, provavelmente por ataque de espécies tripletes geradas no sistema. Músculos de rato, plantar e sóleo, expostos ex vivo a concentrações citotóxicas de glicose oxidase (GOX, gera H2O2 em fluxo), foram protegidas pelos ésteres etílicos AAE e MAAE. Foi detectado biacetilo no meio intracelular em músculos expostos a MAAE e GOX. A concentração deste composto α-dicarbonílico é claramente relacionada à abundância de Mb em cada um dos tipos de músculos estudados. Em resumo, Mb tratada com metabólitos β-cetoácidos (AA e MAA) gera radicais centrados em carbono e produtos α-dicarbonílicos altamente reativos no estado triplete. Experimentos realizados com tecido muscular ex vivo sugerem que esta reação possivelmente ocorra in vivo. Levantamos a hipótese de que a geração de espécies carbonílicas reativas e seus adutos em condições de desbalanço metabólico possam contribuir para a compreensão das bases moleculares de desordens cetogênicas. / Acetoacetate (AA) and 2-methylacetoacetate (MAA) are β-ketoacids accumulated in several metabolic disorders such as diabetes and isoleucinemia, respectively. Here we examine the mechanism of AA and MAA aerobic oxidation initiated by the reactive enzyme intermediates formed by the reaction of muscle horse myoglobin (Mb) with H2O2. A chemiluminescent route involving a dioxetane intermediate whose thermolysis yields triplet α-dicarbonyl species (methylglyoxal and diacetyl) is envisaged. Accordingly, the ultraweak light emission that accompanies the reaction increases linearly by raising the concentration of both Mb (10-500 µM) and AA (10- 100 mM). Oxygen uptake studies revealed that MAA is, expectedly, almost one order of magnitude more reactive than AA. EPR spin-trapping studies with MNP detected spin adducts from MAA attributable to an α-carbon-centered radical (aN = 1.55 mT) and to an acetyl radical (aN = 0.83 mT). As the acetyl radical signal is totally suppressed by sorbate, a well-known efficient triplet species quencher, the dioxetane hypothesis seems to be reliable. The α-cleavage of the carbonyl-carbonyl bond of a putative excited triplet diacetyl product would, in fact, leads to an acetyl radical. Furthermore, using AA as substrate for Mb/H2O2, an EPR signal assignable to a MNP-AA• adduct (aN = 1.46 mT and aH = 0.34 mT) was observed and confirmed by isotope effect. Oxygen consumption and α-dicarbonyl yield were also dependent on AA or MAA concentrations (1-50 mM) as well as on the concentration of peroxide added to the Mb-containing reaction mixtures: H2O2 (up to 1:10 when measuring oxygen uptake and up to 1:25 when measuring the α-dicarbonyl yield) and t-butOOH (up to 1:200). The pH profiles (5.8-7.8) of oxygen consumption and α-dicarbonyl yield show higher reaction rates at lower pHs, indicative of a ferrylMb intermediate. Evaluating Mb lesion, both β-ketoacids reduced disorganization of the secondary and tertiary protein structure elicited by H2O2. Therefore, Mb primary structure was more preserved, and MAA was more protective than AA. Moreover using the later compound, it was shown that Mb acetylation is dose-dependent. Acetoacetate increased the rate of the hemeprotein bleaching, probably due to the attack of triplet products generated in the system. Plantaris and soleous rat muscles exposed to damaging concentrations of glucose oxidase (GOX, generates H2O2 in flux), was cytoprotected by AAE and MAAE. Intracellular diacetyl was detected in muscle samples exposed to MAAE and GOX. The α-dicarbonyl concentration is clearly related to the Mb abundance in the muscle types. In summary, Mb treated with peroxides reacts with β-ketoacid metabolites (AA and MAA), yielding carbon-centered radicals and highly reactive α-dicarbonyl products in the triplet state. Experiments carried out ex vivo with muscle tissue showed that this reaction possibly occurs in vivo. A new route for generation and accumulation of carbonyl reactive species and adducts is here proposed to occur in unbalanced metabolic situations, such as is the case of ketogenic disorders.
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Comparacão entre vacas da raça Holandesa e mesticas das raças Holandesa x Jersey quanto a sanidade, imunidade e facilidade de partoPizzol, Jean Gabriel Dal 16 February 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2012-02-16 / The crossbreed with the Jersey breed has been used mainly as an alternative to
increasing the concentration of milk solids in Holstein herds, and the production
capacity of these animals the focus of several studies. However, there are still limited
information on many relevant factors to making decision and management of crossbreed
herds, such as disease resistance and calving easy, and this is the motivation of this
work, which aimed to evaluate the health, immunity and calving difficulty in Holstein x
Jersey crossbred cows compared to pure Holstein cows. Data were obtained from a farm
located in Carambeí-PR, which has purebred Holstein and crossbred Holstein x Jersey
in different proportions of each breed. Data of calving difficulty, retained placenta,
gestation length, blood indicators for postpartum metabolic diseases (ketosis and
hypocalcemic puerperal paresis) and immunity were collected from July 2010 to June
2011 and data from Somatic Cell Count (SCC) obtained from the official milk recording
in the period 2005 to 2010. For calving easy was adopted a scale ranging from 1
(unassisted births) to 5 (extreme difficulty, cesarean or death) and retained placenta
when 24 hours elapsed the calving without of the fetal membranes detachment.
Concentration of β-hydroxybutyrate (BHBA) in blood as an indicator of ketosis, total
and ionic calcium in blood serum as an indicator of hypocalcemic puerperal paresis, and
indicators of immunity immunoglobulin G (IgG) and total protein in serum were
determined from blood samples collected at calving, being repeated in the ninth week
after calving for BHBA. The variables calving easy and retained placenta were
evaluated using a generalized linear model with binomial distribution (logistic
regression). Variables BHBA, gestation length, total and ionized calcium, total protein
and IgG were evaluated using a randomized experimental design, and data subjected to
analysis of variance. The CCS data were transformed to somatic cell score (ECS) and
subjected to analysis of variance with repeated measures in time. The genetic groups did
not affect the calving easy (P = 0.4376), retained placenta (P = 0.7074) and gestation
length (P=0.2812). Crossbred cows had higher concentrations of IgG (1.776 versus
1.456 mg / dL) and total protein (7.019 versus 6.525 mg / dL). For the concentration of
BHBA, differences occurred only at calving, with higher values for crossbred cows
(0.580 versus 0.427 mmol / L). Difference was observed between genetic groups for
concentration of ionized calcium (P = 0.082), with crossbred cows presented lower
concentration (4.3 versus 3.92 mg / dL). Adult crossbred cows (from 3 years of age at
calving), had lower ECS (P <0.0001). It is concluded that crossbred cows have superior
performance compared to Holstein cows for somatic cells in milk and immunity
indicators and lower for hypocalcemic puerperal paresis and ketosis indicators on the
day of calving. Crossbred cows do not have an increased risk of dystocia in relation to
pure Holstein cows when mated with pure Holstein bulls / O cruzamento com a raça Jersey vem sendo utilizado principalmente como
alternativa para o aumento da concentração de sólidos do leite em rebanhos da raça
Holandesa, sendo a capacidade de produção destes animais fruto de diversos estudos.
Entretanto, ainda existem limitadas informações sobre diversos fatores relevantes para a
tomada de decisão e para o manejo de rebanhos cruzados, tais como resistência a
doenças e facilidade de parto, sendo esta a motivação do presente trabalho, o qual
objetivou avaliar a sanidade, imunidade e dificuldade de parto de vacas mestiças
Holandês x Jersey em relação a vacas puras da raça Holandesa. Os dados foram obtidos
de uma propriedade localizada no município de Carambeí PR, a qual possui vacas
puras da raça Holandesa e mestiças Holandês x Jersey em diferentes proporções de cada
raça. Dados de dificuldade de parto, duração da gestação, retenção de placenta,
indicadores sanguíneos para doenças metabólicas pós-parto (cetose e paresia puerperal
hipocalcêmica) e de imunidade foram coletados no período de julho de 2010 a junho de
2011 e os dados de Contagem de Células Somáticas (CCS) obtidos do controle leiteiro
oficial, no período de 2005 a 2010. Para facilidade de parto adotou-se uma escala de
variando de 1 (partos sem auxílio) a 5 (extrema dificuldade, cesariana ou morte) e a
retenção de placenta quando transcorridos 24 horas do parto sem desprendimento dos
envoltórios fetais. Concentração de β-hidroxibutirato (BHBA) no sangue, como
indicador de cetose, cálcio total e iônico no soro sanguíneo, como indicador de paresia
puerperal hipocalcêmica, e os indicadores de imunidade Imunoglobulina G (IgG) e
proteína total no soro, foram determinados a partir de amostras de sangue coletadas no
dia do parto, sendo repetido na nona semana após o parto para BHBA. As variáveis
facilidade de parto e retenção de placenta foram avaliadas através de um modelo linear
generalizado, com distribuição binomial (regressão logística) As variáveis duração da
gestação, BHBA, cálcio total e iônico, IgG e proteína total foram avaliadas através de
delineamento experimental inteiramente casualizado, sendo os dados submetidos à
análise de variância. Os dados de CCS foram transformados para Escore de Células
Somáticas (ECS) e submetidos à análise de variância através de medidas repetidas no
tempo. O grupamento genético não afetou a facilidade de parto (P=0,4376), a retenção
de placenta (P=0,7074) e a duração da gestação (P=0,2812). Vacas mestiças
apresentaram maiores concentrações de IgG (1,776 contra1,456 mg/dL) e de proteína
total (7,019 contra 6,525 mg/dL). Quanto à concentração de BHBA, ocorreu diferença
somente no dia do parto, com valores mais altos para as vacas mestiças (0,580 contra
0,427 mmol/L). Observou-se diferença entre grupamentos genéticos para concentração
de cálcio iônico (P=0,082), com vacas mestiças apresentando concentração mais baixa
(4,3 contra 3,92 mg/dL). Vacas mestiças adultas (a partir de 3 anos de idade no
momento do parto), apresentaram menor ECS (P<0,0001). Conclui-se que vacas
mestiças apresentam desempenho superior em relação às vacas da raça Holandesa para
células somáticas no leite e indicadores de imunidade e inferior para os indicadores de
paresia puerperal hipocalcêmica e cetose no dia do parto. Vacas mestiças não
apresentam risco maior de distocia em relação às puras quando acasaladas com touros
da raça Holandesa
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Mecanismo de oxidação aeróbica de acetoacetato e 2-metilacetoacetato catalisada por mioglobina: implicações em desordens cetogênicas / Mechanism of the aerobic oxidation of acetoacetate and 2- methylacetoacetate catalyzed by Mb: implications for ketogenic disordersDouglas Ganini da Silva 20 April 2011 (has links)
Acetoacetato (AA) e 2-metilacetoacetato (MAA) são compostos β-cetoácidos acumulados em diversas desordens metabólicas como no diabetes e na isoleucinemia, respectivamente. Examinamos o mecanismo de oxidação aeróbica de AA e MAA iniciada por intermediários reativos de mioglobina de coração de cavalo (Mb) gerados pela adição de H2O2. Uma rota quimioluminescente que envolve um intermediário dioxetânico cuja termólise gera espécies α-dicarbonílicas (metilglioxal e biacetilo) foi proposta e estudada. Emissão de luz ultra fraca acompanha a reação, e sua intensidade aumenta linearmente pelo aumento da concentração tanto de Mb (10-500 µM) quando AA (10-100 mM). Estudos de consumo de oxigênio mostraram que MAA é, como esperado, quase uma ordem de grandeza mais reativo que AA. Estudos de EPR com captação de spin, utilizando MNP, possibilitaram detectar adutos de MAA atribuíveis a um radical centrado no Cα (aN = 1.55 mT) e ao radical acetila (aN = 0.83 mT). O sinal do radical acetila é totalmente suprimido por sorbato, um conhecido e eficiente supressor de espécies tripletes, o que é consistente com uma rota reacional envolvendo um intermediário dioxetânico. Clivagem-α da ligação carbonila-carbonila do produto biacetilo triplete produziria, de fato, radicais acetila. Além disso, utilizando AA como substrato para Mb/H2O2, um sinal de EPR atribuível ao aduto MNP-AA• (aN = 1.46 mT e aH = 0.34 mT) foi observado e confirmado por efeito isotópico. O consumo de oxigênio e o rendimento de compostos α-dicarbonílicos foram dose-dependentes à concentração de AA ou MAA (1-50 mM) bem como à concentração de H2O2 adicionado às misturas de reação contendo Mb (até 1:10 quando medido o consumo de oxigênio, e até 1:25 quando medido o rendimento de compostos α-dicarbonílicos) e tert-butilhidroperóxido (até 1:200). Os perfis de pH (5,8-7,8) para consumo de oxigênio e rendimento de compostos α-dicarbonílicos mostraram maiores rendimentos para baixos valores de pH, indicativo de ferrilMb formada no ciclo peroxidático da proteína. Avaliando os níveis de lesão de Mb, os β-cetoácidos diminuíram o nível de desorganização protéica na estrutura secundária e terciária elicitada por H2O2. Ainda, houve maior preservação da estrutura primária da proteína, sendo que MAA protegeu mais em comparação a AA, embora quando utilizado este último composto, foi mostrado que há acetilação dose-dependente de Mb. Acetoacetato aumentou a velocidade de descoramento da hemeproteína, provavelmente por ataque de espécies tripletes geradas no sistema. Músculos de rato, plantar e sóleo, expostos ex vivo a concentrações citotóxicas de glicose oxidase (GOX, gera H2O2 em fluxo), foram protegidas pelos ésteres etílicos AAE e MAAE. Foi detectado biacetilo no meio intracelular em músculos expostos a MAAE e GOX. A concentração deste composto α-dicarbonílico é claramente relacionada à abundância de Mb em cada um dos tipos de músculos estudados. Em resumo, Mb tratada com metabólitos β-cetoácidos (AA e MAA) gera radicais centrados em carbono e produtos α-dicarbonílicos altamente reativos no estado triplete. Experimentos realizados com tecido muscular ex vivo sugerem que esta reação possivelmente ocorra in vivo. Levantamos a hipótese de que a geração de espécies carbonílicas reativas e seus adutos em condições de desbalanço metabólico possam contribuir para a compreensão das bases moleculares de desordens cetogênicas. / Acetoacetate (AA) and 2-methylacetoacetate (MAA) are β-ketoacids accumulated in several metabolic disorders such as diabetes and isoleucinemia, respectively. Here we examine the mechanism of AA and MAA aerobic oxidation initiated by the reactive enzyme intermediates formed by the reaction of muscle horse myoglobin (Mb) with H2O2. A chemiluminescent route involving a dioxetane intermediate whose thermolysis yields triplet α-dicarbonyl species (methylglyoxal and diacetyl) is envisaged. Accordingly, the ultraweak light emission that accompanies the reaction increases linearly by raising the concentration of both Mb (10-500 µM) and AA (10- 100 mM). Oxygen uptake studies revealed that MAA is, expectedly, almost one order of magnitude more reactive than AA. EPR spin-trapping studies with MNP detected spin adducts from MAA attributable to an α-carbon-centered radical (aN = 1.55 mT) and to an acetyl radical (aN = 0.83 mT). As the acetyl radical signal is totally suppressed by sorbate, a well-known efficient triplet species quencher, the dioxetane hypothesis seems to be reliable. The α-cleavage of the carbonyl-carbonyl bond of a putative excited triplet diacetyl product would, in fact, leads to an acetyl radical. Furthermore, using AA as substrate for Mb/H2O2, an EPR signal assignable to a MNP-AA• adduct (aN = 1.46 mT and aH = 0.34 mT) was observed and confirmed by isotope effect. Oxygen consumption and α-dicarbonyl yield were also dependent on AA or MAA concentrations (1-50 mM) as well as on the concentration of peroxide added to the Mb-containing reaction mixtures: H2O2 (up to 1:10 when measuring oxygen uptake and up to 1:25 when measuring the α-dicarbonyl yield) and t-butOOH (up to 1:200). The pH profiles (5.8-7.8) of oxygen consumption and α-dicarbonyl yield show higher reaction rates at lower pHs, indicative of a ferrylMb intermediate. Evaluating Mb lesion, both β-ketoacids reduced disorganization of the secondary and tertiary protein structure elicited by H2O2. Therefore, Mb primary structure was more preserved, and MAA was more protective than AA. Moreover using the later compound, it was shown that Mb acetylation is dose-dependent. Acetoacetate increased the rate of the hemeprotein bleaching, probably due to the attack of triplet products generated in the system. Plantaris and soleous rat muscles exposed to damaging concentrations of glucose oxidase (GOX, generates H2O2 in flux), was cytoprotected by AAE and MAAE. Intracellular diacetyl was detected in muscle samples exposed to MAAE and GOX. The α-dicarbonyl concentration is clearly related to the Mb abundance in the muscle types. In summary, Mb treated with peroxides reacts with β-ketoacid metabolites (AA and MAA), yielding carbon-centered radicals and highly reactive α-dicarbonyl products in the triplet state. Experiments carried out ex vivo with muscle tissue showed that this reaction possibly occurs in vivo. A new route for generation and accumulation of carbonyl reactive species and adducts is here proposed to occur in unbalanced metabolic situations, such as is the case of ketogenic disorders.
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