Thesis (doctoral)--Lund University, 1997. / Added t.p. with thesis statement inserted.

Thesis (Ph. D.)--Florida State University, 2004. / Advisor: Dr. John G. Dorsey, Florida State University, College of Arts and Sciences, Dept. of Chemistry and Biochemistry. Title and description from dissertation home page (viewed Jan. 19, 2005). Includes bibliographical references.

Thesis (doctoral)--University of Göteborg, 1994.

Thesis (doctoral)--Lund University, 1997. / Added t.p. with thesis statement inserted.

Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 2006. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 116-131).

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-30 / Procuramos neste projeto de tese de Doutorado, manter a estratégia de anos, relacionado com o objetivo duplo de aquisição de autonomia na síntese de alguns tipos de materiais poliméricos e ao mesmo tempo, de aprimoramento da metodologia da síntese peptídica nestes suportes sólidos. Dentre os sub-tópicos ainda não desenvolvidos, a tecnologia da síntese de copolímeros de partida para a obtenção de derivados e posterior emprego em síntese de peptídeos e outras aplicações foi escolhida como item principal desta tese. Copolímeros com base em estruturas de poliestireno mas, alterando-se os grupos responsáveis pelo intercruzamento da matriz polimérica [divinilbenzeno (DVB), diacrilato de tetraetilenoglicol (TEG) ou diacrilato de 1,6-hexanodiol (HD)], foram estudados quanto à sua parte sintética e de algumas propriedades estruturais e físico-químicas. Fixando-se uma determinada condição de polimerização, obtiveram-se diversos lotes de copolímeros denominados respectivamente de DVB, TEG e HD, variando-se o grau de intercruzamento ou a condição de síntese (sem solvente, com tolueno, n-heptano ou a mistura 1:1 de ambos). Grãos dos copolímeros observados por microscopia, indicaram a obtenção de tamanhos na faixa de 125 a 600 μm e com variadas porcentagens de estruturas rompidas. Dos três, o TEG se mostrou no geral, o mais frágil, principalmente quando sintetizado em n-heptano, com ausência quase total de grãos íntegros em diferentes situações sintéticas. Por outro lado, o DVB e o HD apresentaram resultados sintéticos razoavelmente equivalentes, embora grãos maiores (de 600 μm) tenham surgido mais durante a síntese do primeiro em tolueno. Não se observou uma clara influência do grau de intercruzamento no tamanho ou integridade dos grãos das resinas obtidas. Mas no geral, grãos menores foram observados mais em copolímeros com teor de intercruzamento maiores. Alterações específicas em algumas condições de polimerização deverão ser futuramente testadas para um conhecimento mais claro das regras que governam a obtenção de copolímeros com diferentes tamanhos ou integridade de sua estrutura. A fase seguinte desta tese envolveu a síntese, estudos de alguns derivados destes copolímeros e suas aplicações biológicas. A partir do DVB de 2% de intercruzamento, obtiveram-se quatro lotes de benzidrilamino-resina (BAR), após inserção de grupamentos XIV fenilmetilamínicos. Estes quatro lotes apenas se distinguiram quanto ao tipo de solvente eluente utilizado para a obtenção dos copolímeros correspondentes. Surpreendentemente, apenas o lote de BAR proveniente do DVB sintetizado com a mistura 1:1 de tolueno e nheptano apresentou um ótimo rendimento da síntese de um octapeptídeo-modelo (cerca de 90%). Ainda do DVB, um derivado contendo grupamento sulfônico também foi obtido e ensaios iniciais de matriz como trocadora catiônica em cromatografia em coluna foram efetuados. A partir de um dos lotes de BAR anteriormente obtido, assimilamos também a técnica de introdução do grupamento polietilenoglicol (50 e 70% de acoplamento dos grupos amínicos da resina). Avaliação do grau de solvatação, efetuada por microscopia dos grãos, indicaram alterações significativas, com mudança do perfil de inchamento, de solventes mais apolares para polares, em função da inserção de grandes quantidades destes grupos polihidroxilados na estrutura da resina. Quanto aos copolímeros de TEG e HD, também foram alterados quimicamente em protocolos que introduziam inicialmente, grupamentos clorometílicos e posteriormente, aminometílicos. As respectivas resinas derivadas (ATEG e AHD) também foram, comparativamente à BAR, avaliadas em termos de grau de solvatação de suas matrizes, dependente do sistema de solvente empregado. Esta investigação foi efetuada, via acoplamento de uma marcador paramagnético do tipo aminoácido (9- fluorenilmetiloxicarbonil-2,2,6,6-tetrametilpiperidina-1-oxil-4-amino-4-carboxílico ou abreviadamente, Fmoc-TOAC) nos sítios amínicos destas resinas. Posterior investigação, via ressonância paramagnética eletrônica (RPE), indicaram uma diferenciação da ATEG em relação às outras resinas. Esta resina apresentou ótima solvatação (maior mobilidade de sua estrutura polimérica) tanto em solvente apolar (DCM) quanto nos polares (DMF e DMSO). Como aplicação prática destas duas resinas, o octapeptídeo modelo testado com os quatro lotes de BAR também foi sintetizado em ambas e o rendimento do material bruto obtido ficou ao redor de 70%. Em suma, o escopo deste projeto objetivando a aquisição da tecnologia de síntese de copolímeros e alguns de seus derivados foi o de aumentarmos o grau de autonomia de nosso grupo neste campo, evitando-se a importação dos mesmos. Por outro lado, fica em aberto a possibilidade de diferentes tipos de estudos físico-químicos e de aplicações tecnológicas dos mesmos, não somente restrito à síntese de peptídeos mas de XV outras moléculas de interesse biológico e também com inserções no campo da cromatografia em coluna. Um tópico final, aparentemente dissociado dos demais mas ainda relacionado com o uso alternativo de derivados poliméricos, envolveu a aplicação da resina comercial de troca aniônica DEAE-Macroprep (BioRad Co.). Baseado em estudos prévios de nosso grupo, esta resina de uso cromatográfico foi empregada para a síntese de um pentadecapeptídeo e o derivado obtido (peptidil-DEAE-Macroprep) foi posteriormente utilizado para a purificação de heparinas e outros glicosaminoglicanos, através da cromatografia de afinidade. Os dados iniciais desta estratégia cromatográfica diferenciada e inovadora, mostraram-se promissores para a separação deste tipo de macromoléculas complexas, ainda não totalmente estabelecido na literatura. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Human chorionic gonadotropin (HCG), a glycoprotein hormone with two nonidentical subunits, is produced by chorionic tissue in pregnant women and by neoplastic tissue containing chorionic elements. It is used in the treatment of male hypogonadism and female sub-fertility. Quantitation of HCG is used to monitor therapy, diagnose various disease states and diagnose and monitor pregnancy. Low levels of HCG in the early and late stages of pregnancy and in various disease states has prompted the development of extremely sensitive assay procedures. Clinically, radioimmunoassay methods are most frequently used due to their precision, sensitivity and cost. However, problems with specificity have been noted. Commercial preparations of HCG must meet the standards outlined in the United States Pharmacopeia (USP). The assay procedure involves a rat uterine weight bioassay. This protocol is lengthy to perform (5 days), requires the sacrifice of a large number of animals (minimum of 60 female rats per assay) and may need to be repeated if the results do not meet the statistical requirements of the assay. Due to the use of animals and the animal care facilities required, this is an expensive assay. In addition, the bioassay is not specific for HCG. Therefore, this thesis reports the analysis of two commercial preparations of HCG, as well as USP Reference Standard HCG and commercially available purified intact HCG and purified individual subunits. Various HPLC assay procedures were evaluated to determine if HPLC would be a viable alternative to the official USP bioassay. Size exclusion HPLC, using one Protein Pak 125 sw column and two Protein Pak 300 sw columns individually and in various combinations, was used to assess all the samples of HCG. Attempts to increase resolution of HCG from interfering components found in these preparations included using both 208 nm and 278 nm for ultraviolet detection, evaluation of 32 buffers as mobile phases with the Protein Pak 300 sw column, fluorescamine derivatization of HCG followed by fluorescence detection, connection of two size exclusion columns in series, and recycling on a Protein Pak 300 sw column. Further attempts to isolate HCG from its protein contaminants involved using ion exchange HPLC with a Protein Pak DEAE 5 pw column with 20 different buffers as mobile phases as well as reversed-phase HPLC with an Ultrasphere ODS column. The greatest resolution was obtained with one Protein Pak 300 sw column with a phosphate buffer (0.15 M, pH 7.0) for the mobile phase and ultraviolet detection. Latex agglutination inhibition slide tests and electrophoresis techniques were used to evaluate commercial samples of HCG and chromatographic peak eluates. Commercial HCG samples appear to contain the individual subunits of HCG and intact HCG along with impurities. The USP Reference Standard HCG contains intact HCG but also contains other ultraviolet absorbing components that were partially separated by HPLC. Electrophoresis also indicated that this HCG sample contained impurities. In addition, the purified intact HCG and purified subunit samples contained impurities, as shown by HPLC. The size exclusion HPLC assay developed using one Protein Pak 300 sw column was unable to resolve intact HCG from the beta-subunit. This assay would be useful for a qualitative assay for purity of HCG preparations. However, at present, HPLC is not a viable alternative to the USP bioassay. / Pharmaceutical Sciences, Faculty of / Graduate

Lipids are important for the structural and physiological functions of neuronal cell membranes. Alterations in their lipid composition may result in membrane dysfunction and subsequent neuronal deficits that characterise various disorders. This study focused on profiling lipids of aged and LPS-treated rat brain and liver tissue with a view to explore the effect of atorvastatin in neuroinflammation, and examining lipid changes in different areas of rat brain of the Flinders Sensitive Line (FSL) rats, a genetic model of depression. Lipids and other analytes extracted from tissue samples were analysed with proton nuclear magnetic resonance spectroscopy (1H-NMR), gas chromatography (GC) and liquid chromatography-tandem mass spectroscopy (LC/ESI-MS/MS). Changes in the lipid profiles suggested that brain and liver responded differently to ageing and LPS-induced neuroinflammation. In the aged animals, n-3 PUFA were reduced in the brain but were increased in the liver. However, following treatment with LPS, these effects were not observed. Nevertheless, in both models, brain concentration of monounsaturated fatty acids was increased while the liver was able to maintain its monounsaturated fatty acid concentration. Atorvastatin reversed the reduction in n-3 PUFA in the aged brain without reducing brain and liver concentration of cholesterol. These findings further highlight alterations in lipid metabolism in agerelated neuroinflammation and show that the anti-inflammatory actions of atorvastatin may include a modulation of fatty acid metabolism. When studying the FSL model, there were differences in the lipid profile of different brain areas of FSL rats compared to Sprague-Dawley controls. In all brain areas, arachidonic acid was increased in the FSL rats. Docosahexaenoic acid and ether lipids were reduced, while cholesterol and sphingolipids were increased in the hypothalamus of the FSL rats. Furthermore, total diacylglycerophospholipids were reduced in the prefrontal cortex and hypothalamus of the FSL rats. These results show differences in the lipid metabolism of the FSL rat brain and may be suggestive of changes occurring in the brain tissue in depression.

Thesis (Ph. D.)--Ohio University, March, 2001. / Title from PDF t.p.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2004. / Härtill 5 uppsatser.