Orientador: Frab Norberto Boscolo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-24T06:35:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lourenco_RobertoMartins_M.pdf: 5754536 bytes, checksum: fc2e23dc38345e966ecb757fdf24ca07 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O presente trabalho teve por finalidade pesquisar o efeito de baixas doses de radiação X no processo de reparação tecidual em feridas suturadas e não suturadas na região dorsal de ratos. Para tanto, os animais sofreram um procedimento cirúrgico, sendo efetuada uma ferida de forma retangular com as dimensões de 20 mm. x 5 mm. na porção anterior direita numa profundidade aproximada de 2 mm., sendo retirado o tecido incisado. Este procedimento foi repetido em 84 animais, os quais foram divididos em 7 tempos de avaliação do tecido de granulação aos 2,4,7,11,14,17 e 21 dias, sendo cada tempo composto de 4 grupos assim denominados: grupo 1- controle sem sutura, grupo 2- irradiado sem sutura, grupo 3- controle com sutura e grupo 4- irradiado com sutura, possuindo 3 animais cada grupo. Os animais dos grupos 2 e 4 no momento da irradiação tiveram os corpos protegidos com um protetor de chumbo de 2 mm de espessura com uma abertura permitindo que fosse exposta somente a ferida cirúrgica. Cada animal sofreu 18 segundos de irradiação, totalizando 7,4 rad. O processo de reparação tecidual foi avaliado pelos seguintes métodos: Coloração por hematoxilina-eosina, que possibilitou verificar a morfologia do tecido de granulação e a impregnação argêntica onde foi observada a síntese de colágeno, através da microscopia de polarização (birrefringência). Os resultados encontrados mostraram que a radiação, apesar de ter causado atraso, não impediu a reparação tecidual, sendo que, o grupo que sofreu irradiação e não foi suturado, mostrou maior retardo quando comparado aos outros grupos / Abstract: The present study had as goal to evaluate the effect of low doses of Xradiation on tissue repairing process in sutured and non-sutured wounds performed on the dorsal skin of rats. Therefore, the rats underwent a surgical proceeding, doing a rectangular wound measuring 20 x 5 milimeters on the fore part of the right side of the backbone, approximately 2 milimeters deep, and the inner skin rectangle was removed. This procedure was repeated on eighty-four animais, which were divided onto four groups: group 1, control without suture; group 2, irradiated withouth suture; group 3, control with suture, and group 4, irradiated with suture, represented by three animais each group. The granulation tissue was evaluated at 2,4, 7, 11, 14, 17, and 21 days for each studied group. The animais belonging to groups 1 and 3 did not undergo irradiation, and were used as controls for groups 2 and 4. The animais of groups 2 and 4, at the moment of irradiation, had their bodies protected with a lead cover 2 milimeters thick with an aperture allowing the exposure of the surgical wound. Each animal underwent eighteen seconds of irradiation, resulting in eight rads. The tissue repairing process was evaluated by the following methods: staining with Hematoxylin-Eosin, wich allowed to check the granulation tissue morphology, and silver staining, to observe the collagen synthesis by polarizing microscopy (birefringence). The obtained results showed that radiation, although had caused a delay, did not stop the tissue repairing, as the i rrad i ated , non-sutured group showed a longer delay when compared withe the others / Mestrado / Radiologia / Mestre em Ciências

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:04:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Angela Lima Pereira.pdf: 480813 bytes, checksum: f5a203942dab231833de507a6d931a03 (MD5) Previous issue date: 2006-03-02 / Every day an increasing volume of publications has been produced being necessary that these information are analyzed in order to make their application useful becoming the produced knowledge more easily used The systematic review of literature answers the necessity to synthesize the produced knowledge and to separate the excellent studies to the determined clinical question A great diversity of products for the treatment of wounds exists During practical ours we live deeply the difficulty of the professionals in deciding which is the best treatment which product will have greater effectiveness and associating the studies developed concerning the treatment of wounds to the practical clinic In order to contribute for the theoretical recital of taking care of nursing in the treatment of wounds we believe to be necessary to investigate in the scientific literature of the health area which are the best evidences gotten concerning the treatment of wounds The results of this research will be able to direct the assistance and education of nursing concerning the thematic one as well as generating new questions of research Thus we consider as objective to identify and to analyze scientific evidences concerning some products used in the treatment of wounds in human beings in published scientific articles in the languages Portuguese English or Spanish the 2004 enter the years of 1995 in the following database of the Virtual Library of Health (VLH): ADOLEC BDENF MEDCARIB MEDLINE This study is about the research of Systematic Revision of Literature Defined the object of the study tests of relevance had been elaborated (TR) After that by means of consultation to the DECs there had been adopted to unitermos and carried through search in literature in VLH The preliminary election of the references and summaries gotten in the search in database was carried through by means of the application of TRI for one of the researches considering criteria of inclusion and exclusion previously determined. Later TRII was applied to the references and summaries of articles and after that to articles in the complete one for two research of independent form To enclosed articles in this phase TRII was applied for two researchers of independent form and requested evaluation of two consultants for analysis of articles in which had disagreement between the researchers The decision of the consultants about the inclusion or exclusion of articles was sovereign Finally the enclosed articles had been submitted to the script of extraction of information of each article was constructed and later the general map of evidences identified for the diverse uses of the studied products was elaborated The total amount of joined article references was of 2906 With the application of the TRI it had a total of 1234 exclusions and 1672 inclusions The application of TRII resulted in a total of 1413 exclusions and 159 inclusions It was note possible to apply TRII in 100 articles for not having been joined in the national territory TR III resulted in 142 exclusions and 17 inclusions The joined evidences denote positive effect of the use of these products; being the majority of them classified them as evidence IB or either strong recommended for implementation in the studied circumstances / Na área da saúde há uma grande diversidade de produtos para o tratamento de feridas contribuindo para a dificuldade dos profissionais em decidir qual a melhor opção Por outro lado diariamente um volume crescente de publicações tem sido disponibilizado na área sendo necessário que estas informações sejam analisadas quanto à sua aplicação tornando o conhecimento produzido mais facilmente utilizado Assim no intuito de contribuir para a fundamentação teórica do cuidar de enfermagem acreditamos ser necessário investigar na literatura científica da área de saúde quais são as melhores evidências obtidas acerca do tratamento de feridas A finalidade desta pesquisa é contribuir para o direcionamento da assistência e do ensino de enfermagem acerca da temática bem como gerar novas questões de pesquisa Assim propomos como objetivo geral: analisar a produção do conhecimento científico publicado entre os anos de 1995 a 2004 sobre a utilização de alguns produtos utilizados no tratamento de feridas em seres humanos Este estudo foi realizado por meio de Revisão Sistemática da Literatura nas seguintes bases de dados da Biblioteca Virtual de Saúde (BVS): ADOLEC BDENF MEDCARIB e MEDLINE Mediante consulta aos Descritores em Ciências da Saúde foram adotados unitermos e realizada busca na BVS A seleção preliminar das referências e resumos obtidos foi realizada por meio da aplicação do Teste de Relevância (TR) I, por um dos pesquisadores, considerando critérios de inclusão e exclusão Posteriormente foi aplicado o TR II aos resumos e em seguida aos artigos na íntegra por dois pesquisadores de forma independente Aos artigos incluídos nesta fase foi aplicado o TRIII por dois pesquisadores de forma independente e solicitada avaliação de um consultor para análise dos artigos nos quais houve desacordo entre os pesquisadores Finalmente os artigos incluídos foram examinados seguindo-se um roteiro de extração de informações Esses dados foram apresentados num quadro sinóptico com informações de cada artigo e posteriormente foi elaborado o mapa geral de evidências identificadas para os diversos usos dos produtos estudados A quantidade total de referências de artigos encontrados inicialmente foi de 2906 Com a aplicação do TRI houve um total de 1234 exclusões e 1672 inclusões A aplicação do TR II resultou em um total de 1413 exclusões e 159 inclusões Não foi possível aplicar TRII em 100 artigos, por não terem sido encontrados em território nacional O TR III resultou em 142 exclusões e 17 inclusões A utilização de produtos que apresentaram evidência IB ou seja fortemente recomendada para implementação nas circunstâncias encontradas foram: alginato de cálcio em feridas doadoras de enxerto de pele; filme transparente em feridas cirúrgicas abdominais e em área de inserção de cateter epidural; hidrogel na pele íntegra e em arranhão; hidrocolóide no tratamento de psoríase feridas induzidas por radiação em perfuração de membrana timpânica úlcera de perna e de pressão; mel em queimaduras superficiais; membrana amniótica em ferida cirúrgica na superfície ocular; sulfadiazina de prata em queimaduras superficiais Conclusões: As evidências encontradas segundo os critérios adotados neste estudo fornecem uma base segura para a utilização destes produtos nas circunstâncias mencionadas

Objetivo: Avaliar a eficiência da Triancinolona Acetonida como agente modulador da resposta inflamatória e cicatricial em coelhos submetidos a cirurgia de músculo extra-ocular. Método: Foi realizado estudo prospectivo, mascarado, em dois estádios. No primeiro estádio, dez coelhos foram submetidos a retrocesso do músculo reto superior em ambos os olhos. Aplicouse, em um deles, 0,15 cc de Triancinolona Acetonida (40mg/cc) nos tecidos circunjacentes ao local de reinserção muscular e, como controle, 0,15cc de solução de cloreto de sódio a 0,9% no local equivalente no olho contra-lateral. Quinze dias após, cinco coelhos foram submetidos a exenteração das órbitas e os restantes dos animais tiveram o mesmo procedimento realizado após trinta dias. O material do sítio de reinserção muscular foi avaliado por meio de análise histopatológica qualitativa e quantitativa (morfometria). No segundo estádio, com incrementação da agressão cirúrgica, dezesseis coelhos foram submetidos aos mesmos procedimentos com exenteração das órbitas após quinze dias, e posterior análise histopatológica dos tecidos. Resultados: Houve efeito inibitório sobre a intensidade da resposta inflamatória nos olhos tratados em comparação com os olhos controle. Conclusão: Nas condições de realização do presente estudo o uso per-operatório da triancinolona acetonida foi efetivo no controle da resposta inflamatória em olhos de coelhos submetidos a cirurgia de músculo extra-ocular. / Purpose: To evaluate the efficiency of triamcinolone acetonide (TRI) in limiting the postoperative inflammatory response and scarring following strabismus surgery. Methods: A prospective, two-stage, masked, controlled trial was conducted. In the first stage, the inflammatory response at the extraocular reattachment site was analyzed following superior rectus recession in ten rabbits. One eye had 0,15 cc of triamcinolone acetonide (40mg/cc) applied around the new insertion site and, similarly, 0,15 cc of isotonic saline solution (0,9%) was applied to the fellow eye following the same procedure, thus serving as a control. Fifteen days later, orbital exenteration was performed in five rabbits and the remaining five were exenterated thirty days later. The reattachment site tissues were submitted to qualitative and quantitative histological examinations. In the second stage 16 rabbits were submitted to amplified surgical trauma, after which the aforementioned steps were also carried out. Granuloma total area at the extraocular muscle reattachment sites of control and treated eyes were compared. Results: There was an inhibitory effect of TRI on the inflammatory response of treated eyes as compared to control eyes. Conclusions: TRI was effective in controlling the postoperative inflammatory response in rabbit eyes submitted to traumatic recession of the superior rectus muscle.

O laser de baixa potência tem sido utilizado após procedimentos cirúrgicos visando acelerar o processo de reparo tecidual. No entanto, embora esse tipo de tratamento ofereça pouco ou nenhum risco à saúde do paciente, sua eficácia ainda é controversa na literatura. Este estudo foi desenvolvido para avaliar o efeito do laser de baixa potência (100 mW) sobre o processo de reparo de incisões cutâneas em dorso de ratos. Incisões de 2 cm de extensão foram confeccionadas no dorso de cinquenta e seis ratos Wistar. Após a sutura, metade dos animais recebeu laser de baixa potência em 3 pontos de aplicação, um no centro e um em cada extremidade da ferida. Em cada ponto, foi administrada uma dose de 35 J/cm2 (laser de InGaAlP, 660 nm, vermelho visível). A outra metade dos animais serviu como controle. Os tecidos incisados foram avaliados microscopicamente, de forma descritiva, em períodos de 6 horas, 2, 7 e 14 dias, levando em consideração o aspecto do revestimento epitelial e do tecido conjuntivo e a magnitude da resposta inflamatória, quando presente. Para os dois primeiros períodos, foi feita também uma avaliação morfométrica, que mensurou a densidade de fibroblastos, fibras colágenas, vasos sanguíneos e células inflamatórias no tecido conjuntivo. Na análise descritiva, as maiores diferenças foram encontradas no período de 6 horas, seguido pelo de 2 dias. Em 6 horas, o grupo tratado com laser apresentou menor resposta inflamatória que o controle e, em alguns espécimes, foi possível evidenciar início de proliferação das células do epitélio nas bordas da ferida. Em 2 dias, alguns espécimes do grupo controle ainda apresentavam células inflamatórias remanescentes, não evidenciadas no grupo laser. Nesse período, foi possível evidenciar também, em alguns espécimes do grupo laser, proliferação de fibroblastos junto às bordas da ferida. Nos períodos de 7 e 14 dias, não foram encontradas diferenças entre os grupos. Na análise morfométrica, a densidade de fibras colágenas e vasos sanguíneos foi maior para o grupo laser do que para o grupo controle em ambos os períodos avaliados, com diferença estatisticamente significante. Com base nos resultados obtidos, concluiu-se que o laser de baixa potência foi capaz de controlar a resposta inflamatória e estimular o processo de reparo tecidual em feridas cutâneas em dorso de ratos. / Low-power laser therapy has been used after surgical procedures to improve wound healing. However, although such kind of treatment offers little or no risk to the patient\'s health, its effectiveness remains controversial. This study was developed to evaluate the effect of low-power laser (100 mW) on the healing of skin incisions in rats. Two centimeters incisions were made on the back of fifty-six Wistar rats. After suturing, half of the animals received low-power laser application on three points, one on center and one on each end of the wound. For each point, a dose of 35 J/cm2 (InGaAIP laser, 660 nm, visible red) was administered. The other half of the animals served as control. The incised tissues were evaluated microscopically in a descriptive way in periods of 6 hours, 2, 7 and 14 days, considering the aspects of epithelium and connective tissue and the magnitude of inflammatory response, when present. For the first two periods, it was also done a morphometric evaluation, which measured the density of fibroblasts, collagen fibers, blood vessels and inflammatory cells in the connective tissue. In descriptive analysis, the greatest differences were found in the period of 6 hours, followed by the period of 2 days. In 6 hours, the laser-treated group showed less inflammatory response than control and, in some specimens, it was possible to see the beginning of epithelium proliferation on the edges of the wound. In two days, some specimens of the control group still showed remaining inflammatory cells, not observed in the laser group. In this period, it was also possible to see, in some specimens of the laser group, proliferation of fibroblasts along the edges of the wound. In the periods of 7 and 14 days, no differences were found between the groups. In morphometric analysis, density of collagen fibers and blood vessels was higher for the laser group in both evaluated periods, with statistically significant difference. Based on these results, it was concluded that low-power laser was able to control inflammatory response and stimulate tissue repair in skin wounds in rats.

A terapia de perdas ósseas constitui um dos grandes desafios da área médico-odontológica. Apesar de o enxerto autógeno ainda ser considerado o \"gold standart\", apresenta limitações como a necessidade de um segundo sítio cirúrgico, limitação da quantidade de osso disponível e falta de previsibilidade. A Bioengenharia surgiu como um elemento promissor no tratamento de defeitos ósseos críticos conjugando três elementos principais: as células do paciente, um material carreador e moléculas sinalizadoras. Os materiais carreadores devem ser biocompatíveis, possibilitar a proliferação e diferenciação dos tipos celulares desejados, além de apresentar baixo potencial em desencadear resposta inflamatória. O colágeno tipo I constitui um dos principais produtos da matriz extracelular (MEC) do tecido ósseo sendo, posteriormente, mineralizada. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial carreador de matrizes de colágeno, obtidas de pericárdio bovino submetido a diferentes tempos de hidrólise (24h e 48h). A hipótese foi de que os tempos de hidrólise, a que foram submetidos os materiais, gerando matrizes colagênicas aniônicas, pudessem interferir nos processos de proliferação, diferenciação e mineralização. O potencial em desencadear resposta inflamatória foi avaliado após 24h, 48h e 72h de contato entre as diferentes membranas e macrófagos humanos. As dosagens de mediadores inflamatórios (IL-10, TNF-alfa, TGF-beta e Óxido Nítrico -NO), demonstraram aumento significativo de TGF-beta, em relação ao controle, que desativa macrófagos e estimula proliferação de células e cicatrização. A análise ao microscópio eletrônico de varredura (MEV) e ao microscópio de luz (ML) mostrou que as células osteoprogenitoras, provenientes do endósteo de fêmur de camundongo Balb/c (FOST), proliferaram ao longo dos tempos experimentais sobre a superfície das matrizes colagênicas estudadas. Entretanto, não foram observadas células no interior destas ao longo de todos os tempos experimentais estudados. A observação de picos na dosagem da atividade da fosfatase alcalina (membrana nativa, 28 dias para membrana hidrolisada por 24h e por 48h) e dosagem da presença de cálcio nas membranas (28 dias para membrana nativa e 21 dias para as hidrolisadas), assim como a observação por MET de vesículas compatíveis com o processo de mineralização (21 dias), indicam que houve a diferenciação das células osteoprogenitoras ao longo dos tempos experimentais estudados. Verificou-se maior produção de fosfatase alcalina e cálcio nos materiais hidrolisados em relação à membrana não hidrolisada. A análise por infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) mostrou a presença de ligações fosfato em membranas sem células, independente do tempo experimental, indicando que podem ser decorrentes do tratamento químico necessário para sua obtenção e não do processo de mineralização. A avaliação da capacidade biomimética por espectroscopia de energia dispersiva (EDS) das membranas indicou presença de P e Ca nas membranas avaliadas, mas estes podem não estar associados ao processo de mineralização fisiológica. Concluiu-se que as membranas de pericárdio bovino são biocompatíveis, permitem a proliferação de células osteoprogenitoras em sua superfície. Há indícios de diferenciação celular, mineralização e nucleação de Ca e P. Entretanto, a deficiência na formação de uma porosidade interconectada nas matrizes colagênicas limita a indicação dessas matrizes como carreadores para a bioengenharia óssea. / The therapy of bone defects constitutes one of the great challenges of the medicine and dentistry. Although autogenous is considered \"gold standart\", presents limitations as the necessity of second surgical site, limitation of bone availability and lack of previsibility. Tissue bioengineering appeared as a promising treatment for critical bone defects conjugating three main elements: the patient\'s cells, a scaffold and sinalizing molecules. The biomaterials used as scaffolds must be biocompatible to possibilite proliferation and differentiation of desired cell types, besides presenting low potential to promote inflammatory response. Collagen type I constitutes one of the main products of the extracellular matrix (ECM) of bone tissue, being later mineralized. The objective of this work was to evaluate the carrier potential of anionic collagen matrices, obtained of bovine pericardium submitted to different hydrolysis times (24h and 48h). The hypothesis was that the hydrolysis times, could influence the processes of proliferation, differentiation and mineralization. The potential activation of inflammatory response was evaluated after 24h, 48h and 72h of contact among the different membranes and human macrophages. The quantification of inflammatory mediators (IL-10, TNF-alpha, TGF-beta and NO-2) demonstrated significant TGF-beta increase in relation to the control, that disactivates macrophages and stimulates proliferation of cells and wound healing. Scaning electron microscope (SEM) and light microscope (LM) showed that osteoprogenitor cells, obtained from the endosteum of femur of Balb/c mouse (FOST), had proliferated on the surface of the studied collagenic matrices. However, at the studied experimental times, cells were not observed in the pores of these matrices. The peaks in the quantification of alkaline phosphatase (native membrane, 28 days for matrices hydrolysed for 24h e48h) and quantification of calcium in the membranes (28 days for native membrane and 21 days for the hydrolysed), and vesicles compatible with the mineralization process by transmission electron microscopy - TEM (21 days) indicated differentiation of the FOST cells at the studied experimental times. It was verified higher amount of alkaline phosphatase and calcium in hydrolysed materials in relation to the not hydrolysed. The analysis of Fourier transformed infra red (FTIR) showed phosphate peaks in cell-free membranes, independent of the experimental time, indicating that phosphate could be from membrane chemical treatment and not by mineralization process. The evaluation of biomimetic capacity of the membranes by spectroscopy of dispersive energy (EDS) indicated presence of P and Ca in the evaluated membranes, but they can not be associate to biomineralization. It was concluded that the biomembranes are biocompatible and allow FOST proliferation in its surface. There was an indication of cellular differentiation, mineralization and nucleation of Ca and P. However, the deficience in interconnected porosity in the collagenic matrices limits its indication as scaffolds for tissue bioengineering.

Introdução: A cicatrização subconjuntival excessiva é a maior causa de falha cirúrgica no glaucoma. Uma vez que o ácido rosmarínico apresenta ação antifibrótica, é interessante avaliar seu uso como adjuvante na cirurgia filtrante do glaucoma. Objetivos: Comparar os achados clínicos e histopatológicos e a expressão gênica de fatores relacionados à cicatrização tecidual entre coelhos submetidos à cirurgia antiglaucomatosa experimental (CAGE) e tratados com injeções subconjuntivais de ácido rosmarínico ou com injeções de solução salina 0,9%. Material e Métodos: Estudo experimental intervencionista, do tipo ensaio clínico randomizado, no qual 41 coelhos New Zealand foram submetidos à CAGE no olho direito e divididos em dois grupos de tratamento: grupo A (n=21), tratados com injeções subconjuntivais de 0,1 ml de solução salina 0,9% e grupo B (n=20), tratados com injeções subconjuntivais de 0,1 ml de ácido rosmarínico 15 mg/ml (3 dias antes da cirurgia, ao final desta e a cada 3 dias até a eutanásia). Os efeitos do tratamento foram avaliados com cinco dias (grupos A1 e B1) e com 15 dias (grupos A2 e B2) por meio da avaliação da pressão intraocular (PIO) com Tonopen, de aspectos da ampola filtrante com base no Moorfields Bleb Grading System, do estudo histopatológico (contagem de neutrófilos/campo, vasos/campo, densidade de colágeno corado com Sirius Red, imuno-histoquímica anti--actina e anti-VEGF) e do RT-PCR (colágeno tipo 1 alfa-1 COL1A1 e TGF-2). As fotomicrografias foram avaliadas quantitativamente com o software ImageJ® 1.36 (Sirius Red, -actina e VEGF) e os dados comparados por testes não paramétricos, sendo p<0,05 considerado estatisticamente significativo. Resultados: Não houve diferença significativa nas comparações da PIO entre os grupos. Nas avaliações da ampola filtrante, apenas o grupo B2 apresentou maiores escores de área central (p=0,0004), área máxima (p=0,0007) e altura (p=0,0239). Os grupos B1 (p<0,0001) e B2 (p=0,0011) apresentaram escores significativamente menores no parâmetro vascularização que os seus respectivos controles. Houve diminuição significativa de neutrófilos/campo somente no grupo B2 (p=0,0159). O número de vasos/campo também foi significativamente menor nos grupos B1 e B2, em comparação aos seus respectivos controles (p=0,0079 e p=0,0345, respectivamente). Não foram observadas diferenças significativas na coloração com Sirius Red e na imuno-histoquímica para anti--actina entre os grupos, porém o grupo B1 apresentou menor marcação anti-VEGF (p=0,0190). As análises por RT-PCR para TGF-2 e COL1A1 não demonstraram diferenças entre os grupos, com exceção do grupo B2, que apresentou maior expressão de COL1A1 quando comparado ao seu controle (p=0,0159). Conclusões: Os resultados apontaram para os potenciais efeitos anti-inflamatórios e moduladores da neovascularização do ácido rosmarínico em cirurgias antiglaucomatosas. Apesar do grupo B demonstrar melhor aspecto clínico (exceto a PIO, que não demonstrou diferença entre os grupos), a ação antifibrótica do ácido rosmarínico não pôde ser comprovada. / Introduction: Excessive subconjunctival scarring is a major cause of surgical failure in glaucoma. Since rosmarinic acid has antifibrotic action, we evaluate its usage as an adjunctive treatment to glaucoma filtration surgery. Objectives: To compare clinical, histopathological and expression of factors related to the healing process between rabbit underwent experimental glaucoma surgery (EGS) and treated with subconjunctival injections of rosmarinic acid or with saline solution 0.9%. Methods: Interventional experimental study (randomized clinical trial) in which 41 New Zealand rabbits were submitted to EGS in the right eye and divided into two treatment groups: group A (n=21) - eyes treated with subconjunctival injections of 0.1 ml of saline solution 0.9% and B (n=20) - eyes treated with subconjunctival injections of 0.1 ml of rosmarinic acid 15mg/ml (three days prior to surgery, at the end of surgery and every three days until euthanasia). Treatment effects were assessed after five days (groups A1 and B1) and 15 days (groups A2 and B2) by evaluation of intraocular pressure (IOP) with Tonopen and bleb characteristics based on the Moorfields Bleb Grading System, as well as histopathology analysis (neutrophil/field count; vessels/field count; collagen density after stained with Sirius Red; and anti--actin and anti-VEGF immunohistochemistry) and by RT-PCR (for collagen type 1 alpha 1 - COL1A1 and TGF-2). The photomicrographs were evaluated quantitatively with ImageJ® 1.36 software (Sirius Red, -actin and VEGF) and data were compared through non-parametric tests, considering p<0.05 as statistically significant. Results: No significant difference was observed in IOP measurements between groups. Group B2 displayed significant higher scores of bleb central area (p=0.0004), maximum area (p=0.0007) and height (p=0.0239). Both B1 (p<0.0001) and B2 (p=0.0011) groups presented significantly lower vascularization scores than their respective controls. A significant decrease in neutrophils/field counting was observed only in group B2 (p=0.0159), however vessels/field counting was significantly lower in groups B1 and B2, compared to their controls (p=0.0079 and p=0.0345, respectively). No significant differences were observed in the collagen staining with Sirius Red and in the anti--actin immunohistochemistry between the all groups comparison, but group B1 displayed lower anti-VEGF measurement (p=0.0190) than group A1. RT-PCR analysis for TGF-2 and COL1A1 showed no difference between groups, except by group B2, which presented higher expression of COL1A1, compared to its control (p=0.0159). Conclusions: The findings point to the potential anti-inflammatory and anti-neovascular effects of rosmarinic acid in glaucoma surgery. Although group B show better clinical aspect (except IOP, which showed no difference between groups), the antifibrotic action of rosmarinic acid could not be proved.

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:54:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LARA CANDIDA DE SOUSA MACHADO.pdf: 3187014 bytes, checksum: c478f4284cb57a232b5b7079c413a8db (MD5) Previous issue date: 2012-12-19 / INTRODUCTION: The herbal and other natural products are widely used therapeutic resources to aid the healing of skin wounds of early civilization to the present. Among the plants used for treatment of infected wounds, the Croton urucurana stands out for being a healing plant that accelerates the healing process. OBJECTIVE: To evaluate the healing activity of extracts of the stem bark of Croton urucurana skin wounds in mice, induced by Bothrops moojeni. METHODOLOGY: The ethanolic extract from the stem bark of Croton urucurana (EECC) obtained through a maceration dynamic process, was diluted in saline to obtain concentrations of 10%, 20% and 40%. It was stablished a pilot experiment to determine the minimum dose necrotizing using mice (n = 5) of Swiss lineage, males with body mass index ranging from 18 to 25g. To evaluate the healing activity, it was performed in mice (n = 60) of the same type and with the same characteristics were randomly divided into five groups of twelve animals each (n = 12): GC - Control Group, GS - Group Soro, GT1 - Group Treatment with 10% EECC, GT2 - Group Treatment EECC to 20% and GT3 - Group Treatment EECC to 40%. For induction of the wound, the animals were anesthetized intramuscularly with sodium thiopental at the dose of 40mg/kg. After shaving the dorsum of the mice,it was inoculated intradermally 120&#956;g/50µL of saline in order to obtain a necrose. RESULTS: The minimum necrotic dose of venom from Bothrops moojeni in mice is 120 mg of venom diluted into 50 uL intradermally saline in the dorsal region. There was a significant decrease of skin wounds of the GT1 group in 7th and 12th days compared to the GC. There was a significant decrease of skin wounds of the group GT2 and GT3 on the 12th day compared to the GC.The Histological analysis of the groups GT1, GT2 and GT3 allows to conclude that the skin wounds show a process of evident scarring at 12 days of treatment compared to the GC, by stimulating angiogenesis, neoformation of hair follicles and fibrous repair. CONCLUSION: The skin wounds in mice induced by the venom of Bothrops moojeni when treated with EECC (10%, 20% and 40%), have a more rapid healing process in the control group. / INTRODUÇÃO: As plantas medicinais e outros produtos naturais são recursos terapêuticos amplamente utilizados no auxílio da cicatrização de feridas cutâneas dos primórdios da civilização até a atualidade. Dentre as plantas utilizadas para tratamento de feridas infectadas, a Croton urucurana se destaca, por ser uma planta com poderes curativos e que aceleram o processo de cicatrização. OBJETIVO: Avaliar a atividade cicatrizante de extratos das cascas do caule de Croton urucurana nas feridas cutâneas de camundongos, induzidas pelo veneno de Bothrops moojeni. METODOLOGIA: O extrato etanólico das cascas do caule da Croton urucurana (EECC) obtido através de um processo de maceração dinâmica, foi diluído em solução salina para obtenção das concentrações de 10%, 20% e 40%. Foi realizado um experimento piloto para determinação da dose mínima necrosante, utilizando camundongos (n=5) da linhagem Swiss, machos, com massa corpórea variando de 18 a 25g. Para avaliação da atividade cicatrizante foram utilizados camundongos (n=60) da mesma espécie e com as mesmas características, distribuídos aleatoriamente em cinco grupos de doze animais cada (n=12): GC Grupo Controle, GS Grupo Soro, GT1 Grupo Tratamento com EECC a 10%, GT2 Grupo Tratamento com EECC a 20% e GT3 Grupo Tratamento com EECC a 40%. Para indução da ferida, os animais foram anestesiados via intramuscular com tiopental sódico na dose de 40 mg/Kg. Após a tricotomia no dorso do camundongo, foi inoculado intradermicamente 120 µg/50 µL de salina, afim de se obter uma necrose.RESULTADOS: A dose mínima necrosante do veneno de serpente Bothrops moojeni em camundongo é de 120 µg de peçonha diluída em 50 µL salina intradermicamente da região dorsal. Houve retração significativa das feridas cutâneas do grupo GT1 nos dias 7º e 12º em relação ao grupo GC. Houve retração significativa das feridas cutâneas do grupo GT2 e GT3 no 12º dia em relação ao grupo GC. A análise histológica dos grupos GT1, GT2 e GT3 permitem concluir que as feridas cutâneas apresentam processo de cicatrizações evidentes em 12 dias de tratamento em relação ao grupo GC, por estimular a angiogênese, neoformação dos folículos pilosos e reparação fibrosa. CONCLUSÃO: As feridas cutâneas em camundongos induzidos pela peçonha de Bothrops moojeni quando tratadas com EECC (10%, 20% e 40%), apresentam um processo de cicatrização mais acelerado em relação ao grupo controle.

Os fatores bioquímicos de cronicidade de úlceras venosas ainda não estão totalmente esclarecidos, porém, sabe-se que há desequilíbrio entre produção de metaloproteinases de matriz (MMPs) e fatores de inibição tissular de metaloproteinases (TIMPs), metabolismo anormal de colágeno, senescência de fibroblastos e alterações na ação de fatores de crescimentos, tais como fator transformador de crescimento beta (TGF-?). Diante das falhas no processo de reparo tecidual, várias terapias têm sido desenvolvidas com destaque para celulose oxidada regenerada (oxidized regenerated cellulose - ORC)/colágeno e ORC/colágeno/prata cuja função é alterar o microambiente diminuindo MMPs/TIMPs presente no leito da ferida. Nesse estudo, objetivamos avaliar o comportamento in vitro de fibroblastos oriundos de leito de úlcera venosa (VUF) na presença de ORC/colágeno, associada ou não à prata, quanto aspectos morfofuncionais celulares e síntese de MMPs, TIMPs, TGF beta, colágeno tipo I e colágeno tipo III. Após padronização do tempo de exposição e concentração de ORC/colágeno e ORC/colágeno/prata, foi realizada avaliação dos sinalizadores de interação celular utilizando-se imunoensaio Multiplex bead-based nos sobrenadantes da cultura de VUFs e imunofluorescência indireta nas células cultivadas. Como resultado, os estímulos ORC2 (correspondente à 2.8 mg/mL) e 4.2 mg/mL (ORC3+Ag) foram os que apresentaram maior homogeneidade proliferativa. A ORC/colágeno interferiu positivamente na síntese de MMP1, já a presença de prata interferiu negativamente na síntese de MMP2, MMP10, MMP13, TIMP1, TIMP 2 e TIMP3 e positivamente no colágeno tipo III, as sínteses de TGFbeta e colágeno tipo I não sofreram interferência dos estímulos. Tais achados sugerem que a presença de celulose oxidada regenerada pode modular a formação de fibrose no leito da ferida. Quando há presença de prata, nota-se tendência anti-inflamatória sobre a célula com maior síntese de colágeno tipo III / The biochemical factors of chronicity of venous ulcers are not yet fully understood, however, it is known that there is imbalance between producing matrix metalloproteinases (MMPs) and tissue inhibition factors of metalloproteinases (TIMPs), abnormal collagen metabolism, fibroblastic senescence and changes in growth factors action, such as transforming growth factor beta (TGF-?). In the face of failures in the tissue repair process, many therapies have been developed. The use of oxidized regenerated cellulose (ORC)/collagen and ORC/collagen/silver, to modify the microenvironment by decreasing MMPs/TIMPs present in the wound bed, has been emphasized. In the present study, we aimed to evaluate the in vitro behavior of fibroblasts derived from venous ulcer (venous ulcer fibroblasts - VUF) in the presence of ORC/collagen associated or not to silver with regard to cellular morph functional aspects and synthesis of MMPs, TIMPs, TGFbeta, type I and type III collagen. After standardization of the exposure time and concentration of ORC/collagen and ORC/collagen/silver stimulation, an evaluation of cell interaction signaling was performed by using a bead-based multiplex immunoassay in cells supernatants and indirect immunofluorescence in cultured cells. We demonstrated that the ORC2 (corresponding to 2.8 mg/mL) and 4.2 mg/mL (ORC3+Ag) stimuli had the highest proliferative homogeneity. The ORC/collagen interfered positively in the synthesis of MMP1, since the presence of silver interfered negatively in the synthesis of MMP2, MMP10, MMP13, TIMP1, TIMP2 and TIMP3 and positively in type III collagen, the synthesis of TGFbeta and type I collagen did not suffer interference. Such findings suggest that the presence of regenerated oxidized cellulose may modulate the formation of fibrosis in the wound bed. When silver is associated antiinflammatory tendency is observed on fibroblasts with increased type III collagen synthesis

Introdução: A cicatrização subconjuntival excessiva é a maior causa de falha cirúrgica no glaucoma. Uma vez que o ácido rosmarínico apresenta ação antifibrótica, é interessante avaliar seu uso como adjuvante na cirurgia filtrante do glaucoma. Objetivos: Comparar os achados clínicos e histopatológicos e a expressão gênica de fatores relacionados à cicatrização tecidual entre coelhos submetidos à cirurgia antiglaucomatosa experimental (CAGE) e tratados com injeções subconjuntivais de ácido rosmarínico ou com injeções de solução salina 0,9%. Material e Métodos: Estudo experimental intervencionista, do tipo ensaio clínico randomizado, no qual 41 coelhos New Zealand foram submetidos à CAGE no olho direito e divididos em dois grupos de tratamento: grupo A (n=21), tratados com injeções subconjuntivais de 0,1 ml de solução salina 0,9% e grupo B (n=20), tratados com injeções subconjuntivais de 0,1 ml de ácido rosmarínico 15 mg/ml (3 dias antes da cirurgia, ao final desta e a cada 3 dias até a eutanásia). Os efeitos do tratamento foram avaliados com cinco dias (grupos A1 e B1) e com 15 dias (grupos A2 e B2) por meio da avaliação da pressão intraocular (PIO) com Tonopen, de aspectos da ampola filtrante com base no Moorfields Bleb Grading System, do estudo histopatológico (contagem de neutrófilos/campo, vasos/campo, densidade de colágeno corado com Sirius Red, imuno-histoquímica anti--actina e anti-VEGF) e do RT-PCR (colágeno tipo 1 alfa-1 COL1A1 e TGF-2). As fotomicrografias foram avaliadas quantitativamente com o software ImageJ® 1.36 (Sirius Red, -actina e VEGF) e os dados comparados por testes não paramétricos, sendo p<0,05 considerado estatisticamente significativo. Resultados: Não houve diferença significativa nas comparações da PIO entre os grupos. Nas avaliações da ampola filtrante, apenas o grupo B2 apresentou maiores escores de área central (p=0,0004), área máxima (p=0,0007) e altura (p=0,0239). Os grupos B1 (p<0,0001) e B2 (p=0,0011) apresentaram escores significativamente menores no parâmetro vascularização que os seus respectivos controles. Houve diminuição significativa de neutrófilos/campo somente no grupo B2 (p=0,0159). O número de vasos/campo também foi significativamente menor nos grupos B1 e B2, em comparação aos seus respectivos controles (p=0,0079 e p=0,0345, respectivamente). Não foram observadas diferenças significativas na coloração com Sirius Red e na imuno-histoquímica para anti--actina entre os grupos, porém o grupo B1 apresentou menor marcação anti-VEGF (p=0,0190). As análises por RT-PCR para TGF-2 e COL1A1 não demonstraram diferenças entre os grupos, com exceção do grupo B2, que apresentou maior expressão de COL1A1 quando comparado ao seu controle (p=0,0159). Conclusões: Os resultados apontaram para os potenciais efeitos anti-inflamatórios e moduladores da neovascularização do ácido rosmarínico em cirurgias antiglaucomatosas. Apesar do grupo B demonstrar melhor aspecto clínico (exceto a PIO, que não demonstrou diferença entre os grupos), a ação antifibrótica do ácido rosmarínico não pôde ser comprovada. / Introduction: Excessive subconjunctival scarring is a major cause of surgical failure in glaucoma. Since rosmarinic acid has antifibrotic action, we evaluate its usage as an adjunctive treatment to glaucoma filtration surgery. Objectives: To compare clinical, histopathological and expression of factors related to the healing process between rabbit underwent experimental glaucoma surgery (EGS) and treated with subconjunctival injections of rosmarinic acid or with saline solution 0.9%. Methods: Interventional experimental study (randomized clinical trial) in which 41 New Zealand rabbits were submitted to EGS in the right eye and divided into two treatment groups: group A (n=21) - eyes treated with subconjunctival injections of 0.1 ml of saline solution 0.9% and B (n=20) - eyes treated with subconjunctival injections of 0.1 ml of rosmarinic acid 15mg/ml (three days prior to surgery, at the end of surgery and every three days until euthanasia). Treatment effects were assessed after five days (groups A1 and B1) and 15 days (groups A2 and B2) by evaluation of intraocular pressure (IOP) with Tonopen and bleb characteristics based on the Moorfields Bleb Grading System, as well as histopathology analysis (neutrophil/field count; vessels/field count; collagen density after stained with Sirius Red; and anti--actin and anti-VEGF immunohistochemistry) and by RT-PCR (for collagen type 1 alpha 1 - COL1A1 and TGF-2). The photomicrographs were evaluated quantitatively with ImageJ® 1.36 software (Sirius Red, -actin and VEGF) and data were compared through non-parametric tests, considering p<0.05 as statistically significant. Results: No significant difference was observed in IOP measurements between groups. Group B2 displayed significant higher scores of bleb central area (p=0.0004), maximum area (p=0.0007) and height (p=0.0239). Both B1 (p<0.0001) and B2 (p=0.0011) groups presented significantly lower vascularization scores than their respective controls. A significant decrease in neutrophils/field counting was observed only in group B2 (p=0.0159), however vessels/field counting was significantly lower in groups B1 and B2, compared to their controls (p=0.0079 and p=0.0345, respectively). No significant differences were observed in the collagen staining with Sirius Red and in the anti--actin immunohistochemistry between the all groups comparison, but group B1 displayed lower anti-VEGF measurement (p=0.0190) than group A1. RT-PCR analysis for TGF-2 and COL1A1 showed no difference between groups, except by group B2, which presented higher expression of COL1A1, compared to its control (p=0.0159). Conclusions: The findings point to the potential anti-inflammatory and anti-neovascular effects of rosmarinic acid in glaucoma surgery. Although group B show better clinical aspect (except IOP, which showed no difference between groups), the antifibrotic action of rosmarinic acid could not be proved.

Submitted by Márcio Ropke (ropke13marcio@gmail.com) on 2017-06-19T13:24:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Comparação entre os marcadores inflamatórios no fluido crevicular periimplantar.pdf: 1235020 bytes, checksum: 767b18e33dcb6901781fc3f790872fc4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-19T13:24:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Comparação entre os marcadores inflamatórios no fluido crevicular periimplantar.pdf: 1235020 bytes, checksum: 767b18e33dcb6901781fc3f790872fc4 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Este estudo investigou parâmetros clínicos, a estabilidade do implante e as concentrações de citocinas relacionadas ao processo inflamatório no fluido crevicular peri-implantar (PICF) após a instalação de implantes durante o período de cicatrização óssea. Um total de 60 implantes instalados na região anterior de mandíbula de 30 pacientes desdentados totais (idade média 67,23 ±7,66 anos) foram monitorados até a osseointegração. O tipo ósseo, o torque de inserção e a estabilidade primária foram registrados durante o processo cirúrgico. O registro de escores clínicos de saúde peri-implantar (índice de placa visível, presença de cálculo, grau de inflamação, profundidade de sondagem e índice de sangramento a sondagem), a estabilidade secundária dos implantes e coletas de amostras de PICF foram realizados nos períodos de 1, 2, 4, 8 e 12 semanas após a cirurgia. Os níveis de IL-1ß, IL-6, IL-10 e TNF-a no PICF foram analisados por ensaio por enzimas imuno-adsorvidas (ELISA). A estabilidade do implante foi mensurada pelo método de análise de frequência de ressonância (RFA). O tempo médio de edentulismo na mandíbula foi 24,53 (±13,29) anos e atrofia óssea mandibular foi diagnosticada em 15 pacientes. Um total de 12 implantes falharam em diferentes períodos da osseointegração. Nos implantes saudáveis, o índice inflamação gengival apresentou resultados significativamente diferentes entre a primeira semana e a seguinte (p = 0,05). Foi observado um aumento significativo no índice de placa entre as semanas 4-8 e 8-12. Já a profundidade sondagem teve diferenças significativas em todos os intervalos de avaliação. Após a quarta semana a estabilidade secundária reduziu significativamente ao longo do tempo. Níveis significativamente elevados de TNF-a foram registrados na segunda semana, em pacientes não-atróficos, e na quarta semana (em pacientes atróficos); após estes períodos suas concentrações diminuíram (p<0,05). Entretanto, pacientes com atrofia óssea tinham níveis significativamente mais elevados de TNF-a nas semanas 4 e 8. As concentrações de IL-1ß aumentaram somente após 12 semanas (p=0,003), e os níveis de IL-1ß foram significativamente maiores para os pacientes com atrofia óssea durante as primeiras duas semanas. O pico de concentração de IL-6 foi observado na primeira semana (p<0,05; p=0,005) e foi significativamente mais elevado em pacientes com atrofia óssea nas semanas 1, 2 e 4. As concentrações de IL-10 aumentaram progressivamente ao longo do tempo, sendo a concentração mais elevada no 12ª semana (p<0,005). O hábito de fumar, o quadro de atrofia óssea mandibular e o tipo ósseo, parecem influenciar de diferentes formas as concentrações de citocinas durante o período de cicatrização. Embora as medidas clínicas apresentarem diferenças entre os períodos de avaliação, eles não foram indicativos de falha precoce do implante ou de doenças peri-implantares. As variações nas concentrações das citocinas e as características predominantes para cada uma podem ser atribuídas ao equilíbrio de cicatrização em diferentes períodos de tempo. / To investigate the clinical parameters, implant stability and the cytokine levels in peri-implant crevicular fluid (PICF) during the early bone healing process after implant placement. A total of 60 narrow implants were placed in the anterior region of the mandible in 30 edentulous patients (aged 67.23 ±7.66 years). Bone type, insertion torque and primary stability were registered during surgery. Clinical measurements of peri-implant health were recorded and samples from the peri-implant crevicular fluid (PICF) were collected 1, 2, 4, 8 and 12 weeks after the surgery. Levels of IL-1ß, IL-6, IL-10 and TNF-a in the PICF were analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Implant stability was assessed by resonance frequency measurements (RFA). Mean time of edentulism in the mandible was 24.53 (±13.29) years and mandibular bone atrophy was diagnosed in 15 patients. A total of 12 implants failed at different periods of osseointegration. In the healthy implants, the gingival index displayed significantly different outcomes between the first week the following period (p= 0.05). Significant increasing in the plaque index was observed only between the week 4-8 and 8-12. Significant differences in Probing on Depth (PD) were observed at all intervals. The RFA reduced significantly over time after the 4th week. The highest levels of TNF-a were recorded in the first 2 weeks (non-atrophic patients) and 4 weeks (atrophic patients), after which the concentrations declined (p<0.05). Patients with bone atrophy had significantly higher TNF-a levels in weeks 4 and 8, compared to their non-atrophic counterparts. IL-1ß concentrations increased only after 12 weeks (p=0.003), and IL-1ß levels were significantly higher for patients with atrophy during the first two weeks. IL-6 concentrations peaked in the first week (p<0.05; p=0.005) and were significantly higher for patients with bone atrophy in weeks 1, 2 and 4. IL- 10 concentrations progressively increased over time, with the highest concentration in the 12th week (p < 0.005). Smoking, bone atrophy and bone type seems differently influence the cytokines concentrations during the healing time. Although the clinical measurements presented differences between the evaluation periods, they were not indicative of early dental implant failure or peri-implant diseases. The variations in the cytokine concentrations and their predominant role can be attributed to healing balance in different periods of time.