Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-11-17T03:11:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 335947.pdf: 1599167 bytes, checksum: afcd4b3088be34fe3f642cf6549642a4 (MD5) Previous issue date: 2015 / O glicocorticoide (GC) é amplamente aplicado na clínica para o tratamento de doenças inflamatórias. Seu uso prolongado repercurte sobre a homeostase glicêmica podendo levar a resistência periférica à insulina (RI). Mulheres na transição de segunda para a terceira idade iniciam um processo natural de falha ovariana, a menopausa. Na menopausa há ganho de peso e modificações na distribuição da gordura, especialmente na região visceral. A associação entre GCs e menopausa não está bem estabelecida na literatura. Assim, avaliamos as repercussões da perda de função ovariana associada ao tratamento com GC sobre parâmetros relacionados à homeostase glicêmica. Para tanto, ratas Wistar (28 dias de vida) foram submetidas à falha ovariana por meio da administração de 4-vinilciclohexeno diepóxido (4-VCD), i.p. (VCD) ou receberam somente veículo (CTL) e 168 dias após foram tratadas com dexametasona (1 mg/kg, p.c., i.p.) por 5 dias consecutivos (DEX e VCD+DEX) ou veículo (CTL e VCD). O grupos DEX e VCD+DEX demonstraram redução da massa corporal e da ingestão alimentar durante tratamento com dexametasona (p<0,05). As ratas tratadas com dexametasona apresentaram aumento na glicemia, insulinemia, triacilgliceridemia e conteúdo de glicogênio hepático vs. seus respectivos grupos controles (p<0,05) não havendo nenhum efeito do tratamento com 4-VCD per se. O tratamento com 4-VCD não alterou a sensibilidade à insulina, enquanto que os grupos tratados com dexametasona apresentaram redução da sensibilidade comparada aos seus respectivos controles (p<0,05). O grupo VCD exibiu intolerância à glicose (GTT i.p.) vs. grupo CTL (p<0,05) e a intolerância presente no grupo DEX não foi potencializada pelo tratamento com o 4-VCD (VCD+DEX). No desafio glicêmico oral o tratamento com 4-VCD não promoveu nenhuma alteração nos grupos VCD e VCD+DEX em relação aos seus respectivos controles. O tratamento com o 4-VCD não causou nenhuma alteração na massa de células ß no grupo VCD, porém impediu a compensação do incremento compensatório (grupo VCD+DEX) ocorrido no grupo DEX. O tratamento com GC resultou em marcante elevação dos valores de progesterona plasmática vs. grupo CTL (p<0,05). Concluímos que o tratamento com o 4-VCD não promove alterações nos parâmetros metabólicos basais, mas causa intolerância à glicose. O tratamento com o 4-VCD não predispõe às ratas a maiores disfunções metabólicas causadas pelo tratamento com GC, exceto pela atenuação do incremento da massa de células ß induzida pela administração de dexametasona.<br> / Abstract : Glucocorticoids (GC) are widely applied in clinic for the treatment of inflammatory diseases. Its prolonged use influences the glucose homeostasis and may lead to insulin resistance (IR). Women in transition from natural reproductive life to menopause begin a natural process of ovarian failure. In this case, there are weight gain and changes in fat distribution, especially in the visceral region. The association between GCs and menopause is not well established in the literature. We evaluated the impact of the loss of ovarian function associated with GC treatment on parameters related to glucose homeostasis. Wistar rats (28 days old) underwent ovarian failure by administration of 4-vinylcyclohexene diepoxide (4-VCD) i.p. (VCD), while controls received vehicle (CTL). After 168 days rats were treated with dexamethasone (1 mg / kg bw, i.p.) for 5 consecutive days (DEX and VCD+DEX) or vehicle (CTL and VCD). The DEX and VCD+DEX groups showed reduced body weight and food intake during treatment with dexamethasone (p<0.05). The rats treated with dexamethasone showed an increase in glycemia, insulinemia, triglyceridemia and hepatic glycogen content vs. their respective control groups (p<0.05) and there is no effect of treatment with 4-VCD per se. Treatment with 4-VCD does not alter insulin sensitivity, whereas the groups treated with dexamethasone showed a reduction in insulin sensitivity compared to their respective controls (p<0.05). The VCD group exhibited impaired glucose tolerance (GTT ip.) vs. CTL group (p<0.05) and intolerance present in the DEX group was not enhanced by treatment with 4-VCD (VCD+DEX). In oral glucose challenge treatment with 4-VCD did not promote changes in VCD and VCD+DEX groups compared to their respective controls. Treatment with 4-VCD caused no change in the mass of ß cells in the VCD group, but prevented the compensatory increase (VCD+DEX group) occurred in the DEX group. The GC treatment resulted in a marked increase in plasma progesterone values vs. CTL (p<0.05) group. We conclude that treatment with 4-VCD does not cause alterations in the basal metabolic parameters, but causes glucose intolerance. Treatment with 4-VCD dos not predisposes rats to additional metabolic dysfunctions caused by the GC treatment, except for the attenuation of the increase in mass of ß cells induced by administration of dexamethasone.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-15T04:06:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334380.pdf: 811694 bytes, checksum: 14e211161e048a85b98f534600de4953 (MD5) Previous issue date: 2015 / Os esteróides ovarianos promovem neuroproteção a diversos sistemas como o serotonérgico e noradrenérgico, que são importantes na modulação dos transtornos de humor e em processos cognitivos. Sabe-se que na menopausa, ocorre um declínio dos níveis circulantes de estrógeno e progesterona, predispondo as mulheres a aumentos de ansiedade e a déficits de memória. A droga ovotóxica 4-vinilciclohexano diepoxido (VCD) produz falha ovariana precoce em roedores e tem sido utilizada como ferramenta para o estudo das alterações neuroendócrinas e comportamentais decorrentes da menopausa. Os objetivos do presente trabalho foram estudar os efeitos da falha ovariana causada pelo VCD sobre comportamentos relacionados à ansiedade e depressão, e sobre aspectos cognitivos. Ratas Wistar foram tratadas com VCD (160 mg/Kg peso corpóreo) ou veículo por 15 dias consecutivos a partir do 28º dia de vida e estudadas 80 ou 150 dias após o início do tratamento, períodos equivalentes à perimenopausa e menopausa, respectivamente. Foram aplicados os testes comportamentais de ingestão alimentar em ambiente não-familiar, para avaliação do comportamento ansioso; de preferência entre estímulos apetitivo e social, para avaliação de possíveis alterações psicossociais; e o teste de reconhecimento de objetos, para análise da memória, no período de 80 dias após o tratamento com VCD. O teste de memória foi realizado também quando as fêmeas completaram 150 dias após o tratamento com VCD. Foi administrado um ansiolítico (Dormonid injetável, Roche) para verificação da reversão de possíveis efeitos ansiogênicos. Tanto ratas controle quanto tratadas com VCD apresentaram inibição da ingestão no ambiente não-familiar, ou seja, as flutuações hormonais resultantes da falha ovariana não afetaram esta resposta. Ratas tratadas com VCD apresentaram aumento na frequência de imobilização e na latência para investigar a fêmea co-específica, indicando que este possa ter exercido um efeito aversivo, confirmado pela reversão desta resposta pelo ansiolítico. A falha ovariana não levou a déficit de memória, seja no período relativo à perimenopausa ou à menopausa precoce e o comportamento exploratório geral das ratas também não foi afetado significativamente pelo VCD. Assim, pode-se concluir que a falha ovariana não leva a aumento dos níveis de ansiedade, pelo menos no contexto estudado, ou a déficits de memória, mas o desequilíbrio hormonal na perimenopausa parece aumentar a reatividade aversiva das ratas à presença de co-específicos familiares. Assim, o desequilíbrio hormonal das fêmeas tratadas com VCD parece afetar um conjunto complexo de fatores cognitivos envolvidos com o processo de socialização, mas as respostas são dependentes não só das áreas cerebrais em que atuam, mas também do tipo de teste comportamental que se utiliza para estudá-los.<br> / Abstract : The ovarian steroids promote neuroprotection to the serotonergic and noradrenergic systems, which are important to modulate mood disorders and cognitive processes. During menopause, there is a decrease in estrogen (E) and progesterone (P) circulating levels, predisposing women to increased levels of anxiety and memory deficits. The drug 4-vinylcyclohexane diepoxide (VCD) is toxic to the ovaries, producing premature ovarian failure in rodents, and has been used as a tool to study neuroendocrine and behavioral changes due to menopause. We aimed to study the effects of ovarian failure caused by VCD on behavioral categories related to anxiety and depression, as well as on cognitive aspects. Female Wistar rats (28 days old) were treated with VCD (160 mg / kg body weight) or vehicle for 15 consecutive days and studied 80 and 150 days after the onset of the treatment. The following behavioral tests were applied: food intake in unfamiliar environment, in order to assess the anxiety behavior; preference test, between appetitive and social stimuli, to assess possible psychosocial changes; and the object recognition test, to analyze memory. An anxiolytic drug (Midazolam,, Roche) was administered to the rats in order to verify the reversion of possible anxiogenic effects. Both rats, treated with VCD and controls, showed inhibition of food intake in the unfamiliar environment, suggesting that hormonal fluctuations resulted from ovarian failure do not seem to affect this response. VCD rats showed an increase in the frequency of immobilization and latency to investigate the female co-specific, indicating that they may have had an aversive effect. This data was confirmed by the reversion of this response by the anxiolytic drug. Ovarian failure did not lead to memory deficits, either in the period related to perimenopause or early menopause. General exploratory behavior was not significantly affected by the VCD. Thus, it can be concluded that ovarian failure does not lead to increased levels of anxiety or memory deficits, at least in the context studied. However, perimenopausal hormonal imbalance seems to lead to an aversive reaction to familiar co-specifics. Thus, the hormonal imbalance of VCD females appears to affect a complex set of cognitive factors involved in the process of socialization. The behavioral responses are dependent not only on the brain areas where these hormones operate, but also on the type of test that is used as a tool.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas / Made available in DSpace on 2013-06-25T21:55:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 310920.pdf: 1788072 bytes, checksum: aa50009d05793a445b8c2cfb8ed03ceb (MD5) / O consumo de dietas com alto teor de açúcar é conhecido por sua potencialidade em promover o aumento de doenças cardiovasculares e obesidade, bem como por ter potencial para causar modificações na bioquímica cerebral induzindo a comportamentos depressivos. Além disso, alguns estudos demonstraram que o consumo de açúcar pode alterar a sensibilidade à dor. Com base nesses dados, o objetivo deste trabalho foi verificar em ratos a relação entre o consumo crônico de açúcar e os efeitos comportamentais tanto no que diz respeito ao limiar nociceptivo, através do teste com filamentos de Von Frey, quanto a um possível comportamento tipo-depressivo em ratos, utilizando como modelo comportamental o Teste do Nado Forçado (TNF). Para isto, utilizamos ratos Wistar machos (n=40), entre 60-80 dias de idade, alojados em ciclo claro/escuro de 12h (4-16h) e divididos em cinco grupos, sendo 1 grupo Controle alimentado apenas com ração padrão umedecida em água, e 4 grupos experimentais. Estes grupos possuíam a escolha entre ração sem açúcar e ração com tipos diferentes de açúcares, assim distribuídos: grupo Sacarose (ração com 10% de sacarose); grupo branco (ração com 10% de açúcar branco refinado); grupo Mascavo (ração com 10% de açúcar mascavo) e; grupo Escolha (ração com 10% de açúcar branco refinado e ração com 10% de açúcar mascavo). Todos foram mantidos em dieta diária de privação por 12 horas, seguido por 12h de acesso alimentar a partir de 4 horas após o início da fase escura, e água disponível ad libitum. Após 28 dias os animais foram submetidos aos testes de TNF e de Von Frey para serem avaliados quanto aos comportamentos tipo-depressão e limiar nociceptivo, respectivamente. Foi realizada ainda, uma análise imunoistoquímica da ativação neuronal pela expressão da proteína Fos no Locus coeruleus (LC), núcleo magno da rafe (NMR) e hipocampo, utilizando 4 animais de cada grupo, selecionados aleatoriamente dentre os ratos que participaram da dieta com açúcar. Os resultados mostraram uma redução do limiar nociceptivo para os grupos Branco e Mascavo, bem como a presença de comportamentos tipo-depressivo nos grupos que ingeriram dieta açucarada, como menor tempo de latência para a imobilidade, maior frequência no comportamento de imobilidade e menor tempo de mergulho no TNF. A diminuição da expressão da proteína Fos no LC de todos os grupos que ingeriam açúcar, e no giro denteado do hipocampo do grupo Branco, indicam uma relação entre o consumo de açúcar com a nocicepção e os comportamentos tipo-depressivo. / The consumption of diets high in sugar is known for its potential to promote, among others, an increase of cardiovascular diseases, obesity and diabetes, as well as for the potential to cause alterations in the brain chemistry inducing depressive behavior. Besides, some studies demonstrated that the consumption of sugar can alter sensitivity to pain. Based on these facts, the goal of this study was to verify in rats the relation between the chronic consumption of sugar and the behavioral effects of nociceptive threshold using the Von Frey test as well as investigating a depressive-type behavior in rats, using the Forced Swimming Test (FST) model. For this, we used forty male Wistar rats, between 60-80 days old that were housed individually on a reversed 12-h light/dark schedule (4-16h) and were divided into five groups. One control group was fed only with standard chow moisted with water, and 4 experimental groups. These groups could choose between chow without sugar and chow with different types of sugars distributed in the following way: Sucrose group (chow with 10% of sucrose); White group (chow with 10% of white sugar); Brown Sugar group (chow with 10% of brown sugar); and the Choice group (chow with 10% of white sugar and chow with 10% of brown sugar). The rats were kept on a daily diet of 12 h deprivation, followed by 12-h access to food, starting 4 h after the dark phase. All rats had water available ad libitum. After 28 days, the animals were submitted to FST and Von Frey test to be evaluated concerning the depression-type behavior and nociceptive threshold, respectively. Furthermore, immunohistochemical analysis of neuronal activation was made for the expression of the Fos protein in the locus coeruleus (LC), rafe magnus nuclei (NMR), and hippocampus, using 4 animals of each group, selected at random from the rats that received the diet with sugar. The results showed reduction of the nociceptive threshold for the groups White and Brown, as well as the presence of depressive-type behavior in the groups that consumed sugar diet, with a lower latency period for immobility, higher frequency in the immobility behavior and shorter time of diving in the FST. The decrease of the expression of the Fos-protein in the locus coeruleus (LC) of all the groups that consumed sugar, and in the dentate gyrus of the hippocampus of the White group indicates a link between sugar consumption with nociception and depressive-type behavior.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:39:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 318324.pdf: 11262181 bytes, checksum: 5a40328ce61f91e1b767c67ce984c616 (MD5) Previous issue date: 2013 / O enriquecimento ambiental e o tratamento com fármacos antidepressivos são capazes de provocar efeitos comportamentais em ratos e camundongos expostos ao teste do nado forçado (TNF), bem como alterações na morfologia do sistema nervoso central. Objetivos: nosso objetivo foi avaliar os efeitos do tratamento crônico com imipramina, associado ao enriquecimento ambiental, sobre o comportamento no TNF-repetido e sobre a proliferação celular no giro denteado do hipocampo de ratos adultos. Metodologia: ratos machos Wistar (n=80) foram alojados por 40 dias, desde o 21° dia pós-natal, em ambiente padrão (AP) ou em ambiente enriquecido (AE). Após este período foram submetidos ao pré-teste (15min). No dia seguinte, os animais de cada ambiente foram subdivididos em quatro grupos e, 1 hora antes do Teste, receberam injeção intraperitoneal de: salina (SAL); imipramina (IMI 2,5 mg/kg ou 5mg/kg) ou fluoxetina (FLX 2,5 mg/kg). A partir do dia seguinte ao teste, foram administradas uma injeção diária destas substâncias nos animais dos respectivos grupos até o dia reteste 2. Teste e retestes foram filmados para posterior avaliação da latência, frequência e duração dos comportamentos. Após o reteste 2, os ratos foram sacrificados e foi realizada a imunoistoquímica para a detecção da proteína Ki-67 e doublecortina (DCX) no giro denteado (GD) do hipocampo. Resultados: O enriquecimento ambiental não afetou o comportamento durante o pré-teste, entretanto, ele foi capaz de reverter os efeitos da reexposição sobre a imobilidade. A dose de 5 mg/kg de imipramina e de 2,5 mg/kg de fluoxetina diminuiram o tempo e a frequencia da de imobilidade ("desespero comportamental") após 14 dias de tratamento dos animais alojados em ambiente padrão. Estes tratamentos não afetaram as contagens de Ki-67 e DCX no GD. Os efeitos da imipramina na dose de 5 mg/kg se potencializaram com o AE enquanto que a fluoxetina mostrou-se eficaz independente do tipo de alojamento. Estes tratamentos diminuíram as contagens de Ki-67 no GD. O tratamento com as duas doses de imipramina aumentaram as contagens de DCX no GD. Não houve nenhuma correlação entre as contagens de ki-67 ou de DCX com os comportamentos no TNF-repetido. Conclusão: Tanto o enriquecimento ambiental como a imipramina, em doses subefetivas no TNF, inibiram o desespero comportamental no TNF-repetido. Estes efeitos parecem não depender do aumento da neurogenese hipocampal, <br>

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T14:57:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 291585.pdf: 604068 bytes, checksum: 0a6742d6e0e08b0ff1b51bdfe46e228c (MD5) / Os mecanismos fisiológicos da analgesia produzida pela acupuntura foram extensamente explorados nas últimas décadas e evidências mostram o envolvimento de opióides endógenos e seus receptores neste efeito analgésico. Em paralelo, estudos apontam dimorfismo sexual na sensibilidade a estímulos dolorosos e na resposta analgésica aos opióides. O objetivo deste estudo foi investigar se os efeitos antinociceptivos e anti-hiperalgésicos da acupuntura são sensíveis às diferenças sexuais. Foram utilizados 275 ratos Wistar adultos, fêmeas (200-250g) e machos (300-350g). Hiperalgesia e inflamação foram induzidos por 0,05ml de solução de 1,0% de formaldeído em salina (0,9%) (solução de formalina), injetada (sc) na superfície plantar da pata posterior direita. Para controle da solução de formalina, grupos de animais foram injetados (sc) somente com salina. Depois de injetados com salina ou formalina, os grupos de animais aguardavam por 10 min e eram submetidos aos seguintes procedimentos: contenção (controle) ou contenção + acupuntura no ponto análogo ST36 ou contenção + acupuntura no ponto sham. A acupuntura manual no ponto análogo ao ST36 ou no ponto sham foi realizada por 20 min e os animais permaneciam livres para se mover na caixa de observação. Os comportamentos nociceptivos induzidos pela solução de formalina foram avaliados, subseqüentemente, por 30 min e utilizados para o cálculo do índice de dor. O limiar de retirada da pata em resposta a estímulo mecânico (filamentos de Von Frey) e a latência de retirada da pata em resposta a estímulo térmico (calor radiante) foram determinados 90 min após a injeção de formalina ou salina. Não houve diferença no índice de dor entre ratos machos e fêmeas controles, injetados com formalina. O limiar basal de retirada da pata em resposta a estímulo mecânico foi menor em ratos fêmeas em estro quando comparados aos ratos machos e fêmeas em diestro e proestro, já a latência basal de retirada da pata foi maior em ratos machos quando comparados às fêmeas em qualquer fase do ciclo estral. No entanto, ratos machos e fêmeas controles não apresentaram diferença no limiar de retirada da pata em resposta a estímulo mecânico e na latência de retirada da pata em resposta a estímulo térmico quando avaliados 90 min após injeção de formalina. A acupuntura manual no ponto análogo ao ST36 não produziu efeito antinociceptivo no teste da formalina, porém produziu um aumento no limiar de retirada da pata em resposta a estímulo mecânico em ratos fêmeas em diestro e em estro e um aumento na latência de retirada da pata em resposta a estímulo térmico, somente em ratos machos, ambos avaliados 90 min pós-formalina. Este efeito não foi observado nos grupos submetidos à acupuntura manual no ponto sham, demonstrando ser específico à acupuntura manual no ponto análogo ao ST36. Estes resultados sugerem que os hormônios gonadais podem estar envolvidos na nocicepção e no aumento de limiares nocifensivos provocados pela acupuntura no ponto análogo ao ST36, porém estes efeitos parecem ser dependentes do teste nociceptivo utilizado.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2014 / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:41:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 329869.pdf: 1529858 bytes, checksum: 4b10ecec8cf1737337330d36fc9276a3 (MD5) Previous issue date: 2014 / A serotonina (5HT) é um neurotransmissor envolvido no controle da ingestão de alimentos. O tronco encefálico é uma região importante para a produção da 5HT, sendo que, uma região de concentração desses neurônios são os núcleos da rafe. Dados da literatura apontam o núcleo mediano da rafe (MnR) como uma região de neurônios serotoninérgicos. Estes neurônios projetam-se para o hipotálamo, região de controle importante para o controle ingestivo. Dados de nosso laboratório revelam que a ativação de receptores adrenérgicos no MnR produz diferentes resultados dependendo do status energético. Injeções de adrenalina no MnR em animais com livre acesso ao alimento provocou o aumento da ingestão de alimentos. Enquanto que a injeção de adrenalina no MnR de animais com alimentação restrita provocou diminuição da ingestão. Essas ações são mediadas por receptores alfa 1 e alfa 2 presentes no MnR. Este trabalho se propõe ao estudo da participação dos subtipos de receptores alfa (a1A, a1B e a1D) na ingestão de alimentos e comportamento em 1 hora ou sobre a ingestão de alimentos em 4 horas após a injeção de antagonista específic no MnR, avaliar a expressão de proteína Fos por imunohistoquímica após injeção de antagonista a1 no MnR em regiões do hipotálamo e amígdala e identificar o tipo de célula da área hipotalâmica lateral está expressando a proteína Fos. Animais saciados receberam injeção intra-MnR de diferentes doses de RS100329, um antagonista específico do receptor a1A, de Rec 15/2615, um antagonista específico de receptores a1B ou de BMY 7378 um antagonista a1D. A dose de 20 nmol de RS100329 aumentou a ingestão de alimentos e a duração e frequência, bem como diminuiu a latência, do comportamento de comer. A injeção de Rec 15/2615 aumentou, na dose de 4 nmol, a duração do comportamento de comer e a ingestão de alimentos na segunda hora de avaliação. A injeção de BMY 7378 aumentou a ingestão de alimentos na primeira hora e também diminui latência e aumentou frequência e duração do comportamento de comer, bem como diminuiu a ingestão de água na segunda hora de experimento. A injeção de prazosina aumentou a ingestão de alimentos e a expressão de proteína Fos na área hipotalâmica lateral e amígdala basolateral. O aumento de expressão de proteína Fos se deu em neurônios orexina reativos. Em conjunto esses dados corroboram os encontrados em trabalhos anteriores da nossa linha de pesquisa, mostrando que a ação da prazosina se dá através de receptores a1A e a1D, uma resposta hiperfágica mais lenta envolvendo o receptor a1B, e ainda que o bloqueio dos receptores a1D diminui a ingestão de água 2h após a injeção. Os dados de imunohistoquimica sugerem que a hiperfagia gerada pelo bloqueio adrenérgico a1 é gerada a partir de regiões relacionadas ao controle motivacional da ingestão de alimentos.<br> / Abstract: The serotonin (5HT) is a neurotransmiter enrolled in the control of food intake. The brainstem is an important site for the production of 5HT, particularly the raphe nuclei. According to literature the median raphe nucleus (MnR) is an important source of prosencephalic 5HT. Data from our laboratory revealed that activation of adrenergic receptors in the MnR evoke different results depending on nutritional status. Adrenaline injections into the MnR in free feeding animals results in hyperphagia. While in food restricted animals adrenaline injections into the MnR evoked hypophagia. This actions seem to be mediated by alfa receptors in the MnR. The purpose of this work is to study the participation of alfa1 subtypes (a1A, a1B e a1D) in food intake and behavior (for 1h after injection) and food intake for up 4h after injection. Also, we proposed to evaluate Fos protein expression after a1 antagonist injection into the MnR on regions of hypothalamus and amygdala, and identify the type of cell in the hypothalamic area to express the Fos protein. Free feeding animals received intra-MnR injection of different doses of RS100329, an a1A antagonist, Rec 15/2615 an a1B antagonist or BMY 7378 an a1D antagonist. The 20 nmol dose of RS 100329 increased food intake, duration and frequency of eating and decreased latency to start eating. The 4 nmol dose of Rec 15/2615 increased the duration of eating behavior and food intake 2h after injection. BMY 7378 increased food intake during the first hour and decreased latency, and increased duration and frequency, of eating behavior. BMY 7378 also decreased water intake 2h after the injection. Prazosin injection into MnR increased food intake and Fos protein expression in lateral hypothalamic area and basolateral amygdala. The increase of Fos protein was specifically higher in orexin reactive neurons. Collectively, our results corroborates data from previous work, showing that prazosin actions occur through a1A and a1D receptors, that a1B blockade is responsible for a slowly hyperphagic response and that blockade of a1D receptor is involved in the decreased water intake. Immunohistochemistry data suggest that hyperphagia observed by a1 blockade is related to motivational control of food intake.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T05:47:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 291256.pdf: 1148218 bytes, checksum: e96961ced447701e3f55deb3b79e5b0a (MD5) / Estudos prévios do nosso laboratório mostraram que a injeção de clonidina (CLON), agonista de receptor .-2 adrenérgico no núcleo mediano da rafe (NMR) provoca aumento da ingestão de alimento em ratos saciados. Por outro lado, a administração de fenilefrina (FEN), agonista de receptor .-1 adrenérgico, no NMR, não provoca alteração no consumo alimentar, provavelmente devido a presença de elevada atividade adrenérgica e manutenção de um tônus inibitório persistente (possivelmente serotonérgico) sobre a ingestão de alimento em animais saciados. O objetivo do presente trabalho foi investigar os efeitos da injeção de FEN no NMR em ratos que exibem menos influências centrais inibitórias sobre a ingestão de alimento, como é o caso da privação de alimento. Em adição os efeitos da CLON no NMR também foram investigados. Foram utilizados 165 ratos Wistar (Rattus norvergicus), peso entre 270-310g com cânulas guia cronicamente implantadas 2 mm acima no NMR e divididos em dois grupos experimentais: ratos em restrição de 15g de ração/dia durante 7 dias e ratos submetidos a jejum noturno. Após a injeção intra NMR de FEN ou CLON o rato foi colocado na caixa de ingestão contendo ração granulada e água previamente pesados. Os comportamentos ingestivos e não ingestivos foram registrados digitalmente por 30 minutos. Os comportamentos foram analisados através do programa Etholog 2.25 e classificados conforme Halford (1998). O posicionamento da agulha injetora no NMR foi verificado por análise histológica. Os resultados mostraram que o tratamento com FEN (6 e 20 nM/L) nos ratos em jejum noturno provocou redução na ingestão de alimento, aumento na latência para iniciar o consumo e redução na duração da resposta de ingestão de alimento. Nos ratos em restrição de alimento de 15g de ração/dia por 7 dias a injeção de FEN (6 e 20 nM/L) induziu a redução na ingestão de alimento e a dose de 6 nM/L também causou diminuição na freqüência da ingestão de alimento. Esses dados reforçam a hipótese que a ativação de receptores adrenérgicos do NMR estimula uma influência inibitória sobre a ingestão de alimento que é menos ativa durante a privação de alimento. / Previous studies from our laboratory showed that clonidine (CLON) injection, á-2 adrenergic receptor agonist, into the median raphe nucleus (NMR) provoduced increased food intake in satiated rats. Moreover, phenylephrine (PHE) administration, á-1 adrenergic receptor agonist, into the NMR did not change feeding behavior, may be due to the presence of a high adrenergic activity and maintenance of persistent inhibitory tone (possibly serotonergic) on food intake in satiated animals. The purpose of this study was to investigate PHE effects into NMR in animals that exhibit less central inhibitory influences on food intake, such as food deprivation. In addition CLON effects into NMR investigated too. Was used 165 male Wistar Rats (Rattus norvegicus) weighing 270-310g with guide cannula chronically implanted 2mm above of NMR and divided in two experimental groups: rats maintained with 15g of lab chow/day during 7 days and rats submitted to overnight fasting. After PHE or CLON injection into the NMR the rat was placed in feeding chamber containing rodent chow and water measured previously. Ingestive and non-ingestive behaviors were recorded digitally for 30 minutes. The behaviors was analyzed with EthoLog 2.25 program and classified according to Halford (1998). The Cannula placement into the NMR was observed by histological analysis. The results showed in overnight fast group, the PHE treatment (6 and 20 nM/L) into NMR caused reduction in food intake, increase latency to start feeding and decrease in feeding duration. In rats maintained with 15g of lab chow/day during 7 days the PHE injection (6 and 20 nM/L) induced reduction in food intake and 6 nM/L dose caused also a decrease in food intake frequency. These data confirm the hypothesis that adrenergic receptors activation of NMR stimulates an inhibitory influence on food intake that is less present during food deprivation.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:56:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326328.pdf: 2019637 bytes, checksum: d942bf130a8793b2f4c7885aa06efef3 (MD5) Previous issue date: 2014 / É sabido que os glicocorticoides (GCs) podem diminuir a sensibilidade periférica à insulina, termo que é aplicado como resistência à insulina (RI), fato que parece ser decorrente de alterações em eventos pós-receptores de insulina. A RI está presente nos indivíduos obesos e uma possível explicação para a RI nesses indivíduos se deve a ativação subclínica de vias de sinalização inflamatórias que incluem as cinases c-jun-N-terminal (JNK) e a cinase do IkB (IKKß). Quando ativadas, estas cinases fosforilam o IRS-1 no resíduo serina e atenuam a sinalização insulínica. A fim de verificar se há alguma similaridade entre esse processo e a RI induzida pela administração de GCs, verificamos o conteúdo e o grau de fosforilação de proteínas chaves das vias insulínica e inflamatórias no tecido adiposo branco (TAB) de ratos tratados com dexametasona (DEX). Para tal, ratos Wistar receberam injeção diária de DEX (1 mg/kg de peso corpóreo) durante 5 dias consecutivos, enquanto animais controle receberam solução salina (CTL). Foram analisados o peso corpóreo e consumo de ração, glicose sanguínea, componentes plasmáticos (triaciglicerol, insulina, lactato, TNF-a, IL-6, IL-1ß e IL-10), conteúdo de glicogênio hepático, liberação de glicerol, tolerância à glicose, à insulina e ao piruvato. Também foram avaliados o conteúdo de proteínas envolvidas na sinalização insulínica (IRS-1 e Akt) e na sinalização inflamatória (JNK, IKKß, TLR-4 e NFkB) além do receptor de glicocorticoide (GR) e da enzima 11ß-HSD1 no TAB. Os ratos DEX apresentaram redução do peso corpóreo (17%) e do consumo de ração (58%), aumento das concentrações de glicose (25%), insulina (500%), lactato (80%) e de triacilglicerol (190%) (p<0,05). O conteúdo de glicogênio hepático bem como da liberação basal de glicerol ex vivo foram 250% e 50% maiores nos ratos DEX, em relação aos ratos CTL (p<0,05). Os testes in vivo revelaram a presença de intolerância à glicose (GTT), redução da sensibilidade à insulina (ITT) bem como aumento da gliconeogênese (PTT), provavelmente de origem hepática, nos animais DEX (p<0,05). Os ratos DEX tiveram redução no conteúdo total (46%) e fosforilado (44%) da Akt, aumento da fosforilação em serina do IRS-1 (63%), redução no conteúdo do GR (47%) e aumento do conteúdo da enzima 11ß-HSD1 (69%) em TAB em relação ao grupo CTL (p<0,05). A fosforilação das proteínas-cinases JNK e IKKß foi46% e 52% menor no TAB de ratos DEX, respectivamente (p<0,05), enquanto das proteínas TLR-4 e NFkBp65 mantiveram-se similares aos do grupo CTL. As concentrações plasmáticas de TNF-a e IL-1ß também estiveram diminuídas nos ratos DEX (p<0,05). Com base em nossos resultados concluímos que o tratamento com DEX por 5 dias consecutivos reproduz a atenuação da sinalização insulínica (redução da fosforilação de Akt e aumento da fosforilação do IRS-1 em serina) em TAB de ratos. Essa atenuação da sinalização insulínica parece não ser resultante de uma ativação exacerbada dos componentes da via inflamatória já que o tratamento com o GC esta associado à redução ou inalteração do conteúdo e/ou da atividade das proteínas JNK, IKKß, TNF-a, TLR-4 e NFkBp65.<br> / Abstract : It is known that glucocorticoids (GCs) may decrease peripheral insulin sensitivity, which means insulin resistance (IR), and appears to be a consequence of changes in the insulin post-receptor events. IR is present in obese individuals and a possible explanation for the IR in these individuals is due to the subclinical activation of inflammatory pathways including the c-jun N-terminal (JNK) and IkB kinase (IKKß) kinases. When activated, these kinases phosphorylate IRS-1 at serine residues attenuating the insulin signaling. To elucidate if there is a similarity between this process and the GCs induced-IR, we evaluated the content and the activity of key proteins of the insulin and inflammatory pathways in white adipose tissue (WAT) of rats treated with dexamethasone (DEX). For this purpose, Wistar rats received daily injection of DEX (1 mg / kg body weight) for 5 consecutive days, while control animals received saline (CTL). Body weight and food intake, blood glucose, plasma components (triacyglycerol, insulin, lactate, TNF-a, IL-6, IL-1ß and IL-10), hepatic glycogen content, glycerol release and glucose, insulin and pyruvate tolerance were analyzed. We also evaluated the content of proteins involved in the insulin pathway (Akt, and IRS-1) and in the inflammatory pathway (JNK, IKKß, NFkB and TLR-4), as well as the glucocorticoid receptor (GR) and the enzyme 11ß-HSD1 in the WAT. DEX rats showed reduced body weight (17%) and food intake (58%), increased blood glucose values (25%) and augmented circulating insulin (500%), lactate (80%) and triacylglycerol (190%) (p<0.05). The hepatic glycogen content as well as the ex vivo glycerol release were 250% and 50% higher in DEX, compared to CTL rat, respectively (p<0.05). In vivo tests revealed impaired glucose tolerance (GTT), decreased insulin sensitivity (ITT) and increased hepatic gluconeogenesis (PTT), probably of hepatic origin, in DEX rats (p<0.05). DEX rats showed reduced Akt content (46%) and phosphorylation (44%), increased IRS-1 serine phosphorylation (63%), reduced GR content (47%) and augmented 11ß-HSD1 content (69%) in WAT, compared to CTL group (p<0.05). The JNK and IKKß phosphorylation was 46% and 52% lower in WAT from DEX rats, respectively (p<0.05), whereas the TLR-4 and NFkBp65 protein contents remained similar between the groups. Plasma concentrations of TNF-a and IL-1ß were also reduced in DEX rats (p<0.05). Based on our results we conclude that dexamethasone treatment for 5 consecutive days reproduces the attenuation of the insulin signaling (reduction of Akt phosphorylation and increase of IRS-1 serine phosphorylation) in WAT of rats. This attenuation of insulin pathway does not seem to be a result of an exacerbation of the inflammatory pathway activation, considering the GC treatment is associated to a reduction or no change in the content and/or activity of the JNK , IKKß , TNF-a , TLR-4 and NFkBp65 proteins.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2014-08-06T18:09:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 325331.pdf: 3140065 bytes, checksum: 7d0bcc46e48292ab4c04e32222948c8e (MD5) Previous issue date: 2014 / A hipóxia intermitente (HI), condição comumente observada em situações patológicas, promove aumentos na atividade simpática e na pressão arterial (PA), bem como elevação persistente na ventilação, por mecanismos ainda não completamente elucidados. No presente estudo, mostramos com detalhes as alterações cardiorrespiratórias induzidas pela HI aguda (HIA; 10 episódios 6-7% O2 por 45 s, intercalados por 5 min de normóxia/hiperóxia) em ratos adultos (290-300 g) não anestesiados ou anestesiados com uretana (1,2 g/Kg, i.p.). Nos animais não anestesiados, a HIA promoveu uma elevação persistente da PA (n=9, P<0,05) associado ao aumento das modulações simpática (n=9, P<0,05) e respiratória (n=9, P<0,05) sobre a PA, obtidas pela análise de variabilidade da PA. Nestes animais também houve redução da frequência respiratória (n=5, P<0,05). Em ratos anestesiados, a HIA resultou em aumento das atividades motoras inspiratória (diafragma-DIA; n=12, P<0,05) e expiratória (abdominais-ABD; n=8, P<0,05). Tanto o aumento na PA e no ABD induzidos pela HIA foram abolidos após a inibição bilateral do núcleo retrotrapezoide (RTN) com muscimol (1mM, 50 nL), indicando importante participação deste núcleo nas alterações cardiorrespiratórias induzida pela HIA. Considerando estudos mostrando envolvimento serotoninérgico no contexto da HIA, verificamos que microinjeções intermitentes (MI) de 5-HT (1mM, 50 nL, com 5 minutos de intervalo) no RTN de animais anestesiados (n=7, P<0,05), induziu aumento significativo e sustentado da atividade ABD (padrão expiratório ativo), por pelo menos 60 min após a última microinjeção, de forma semelhante àquele observado após a HIA. Tal elevação da atividade ABD não foi observada após a realização de MI veículo ou únicas de 5-HT no RTN. O aumento promovido pela MI de 5HT no RTN foi associado a facilitação das respostas ventilatórias à hipercapnia (n=7, P<0,05), sugerindo uma possível sensibilização dos quimiorreceptores centrais localizados no RTN. Ademais, a resposta de ativação expiratória induzida pela MI de 5-HT no RTN foi potencializada após a realização da vagotomia bilateral (n=6, P<0,05), indicando um possível função inibitória das aferências vagais sobre o processamento da resposta ABD ao nível do RTN. Em conjunto, nosso resultados mostram que a HIA, tanto em condições anestesiadas como, principalmente, em condições não anestesiadas, promove facilitação a longo prazo das atividades simpática e motoras inspiratória e expiratória. A ativação intermitente de mecanismos serotoninérgicos no RTN promove alterações do padrão respiratório, com o aparecimento da expiração ativa em condições basais, semelhante aos animais expostos à HIA, associado a potencialização das repostas ventilatórias à hipercapnia. Tais observações sugerem que os mecanismos serotoninérgicos do RTN podem desempenhar função modulatória importante na sensibilização dos quimiorreceptores centrais do RTN, fato que pode contribuir para o aparecimento das alterações cardiorrespiratórias após a exposição à HIA.<br> / Abstract : Intermittent hypoxia (HI), a condition commonly observed in pathological conditions, promotes increases in sympathetic activity and arterial blood pressure (BP) as well as a persistent increase in ventilation, by mechanisms not yet fully elucidated. In the present study, we explored in details the cardiorespiratory changes elicited by acute HI (HIA; 10 episodes 6-7 % O2 for 45 s, interspersed by 5 min of normoxia/hyperoxia) in adult rats (290-300 g) unanesthetized or anesthetized with urethane (1.2 g/kg, ip). In unanesthetized animals, the HIA promoted a sustained raise in BP (n=9 , P <0.05) associated with increased sympathetic (n=9 , P <0.05) and respiratory (n=9 , P < 0 05) modulations on BP, obtained by analyses of BP variability. In these animals, we also observed a reduction in respiratory frequency (n=5 , P <0.05). In anesthetized rats, HIA resulted in increased inspiratory (diaphragm-DIA, n=12 , P<0.05) and expiratory (abdominal-ABD, n=8, P<0.05) motor activities. Both HIA-induced increases of BP and ABD activity were abolished after bilateral inhibition retrotrapezoid nucleus (RTN) with muscimol microinjections (1 mM, 50 nL), suggesting an important role of this nucleus in cardiorespiratory changes induced by HIA. Based on studies showing an important serotonergic role in the scenario of HIA, in another experimental protocol we found that intermittent microinjections (IM) of 5-HT (1 mM, 50 nL) in the RTN of anesthetized animals (n=7, P< 0.05), administered with 5 minutes apart, induced a significant and sustained increase of ABD activity (active expiratory pattern) for at least 60 min after the last microinjection, similar to that observed after HIA. This increase of ABD activity was not observed after single MI of 5-HT or vehicle in the RTN. Importantly, the ABD increase elicited by 5-HT MI in RTN was associated with a facilitation of ventilatory responses to hypercapnia (n=7, P<0.05), suggesting a possible sensitization of central chemoreceptors located in the RTN. In addition, the expiratory motor activation induced by 5-HT MI in the RTN was enhanced after the bilateral vagotomy (n=6, P<0.05), suggesting possible inhibitory role of vagal afferents on the processing of the ABD response to the RTN level. Together, our results show that HIA exposure, in both anesthetized and unanesthetized conditions, elicits long-term facilitations of sympathetic and inspiratory and expiratory motor activities. Furthermore, intermittent activation of serotonergic mechanisms in RTN promotes changes in breathing pattern, with the emergence of active expiration at basal conditions, similarly to animals exposed to HIA, associated with a potentiation of ventilatory responses to hypercapnia. These observations suggest that serotonergic mechanisms RTN may play an important modulatory role in increasing the sensitivity of the RTN central chemoreceptors, which may contribute to the onset of cardiorespiratory alterations induced by HIA.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:46:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 328356.pdf: 18028503 bytes, checksum: 7a18bfa5b94836f29501d5f050b34ba1 (MD5) Previous issue date: 2014 / Lesões do sistema nervoso periférico são comuns e acarretam perdas tanto sensitivas quanto motoras, tais lesões interferem na vida do indivíduo devido a diminuição do rendimento profissional. O exercício físico é um dos meios empregados no tratamento das lesões nervosas periféricas. No entanto, a grande quantidade de dados conflitantes a respeito do tema estimula a realização de mais experimentos e o uso de novas técnicas de análise que possam nos ajudar a entender os efeitos reais do exercício sobre o processo de regeneração nervosa periférica. Neste estudo utilizamos quatro grupos de animais (G1 a G4), submetidos a um protocolo de treinamento (nado forçado) nas seguintes condições: G1 Â grupo controle sedentário, G2 Â Grupo submetido ao exercício diariamente durante 21 dias 24 horas após a lesão nervosa, G3 Â grupo submetido ao exercício 7 dias após a lesão durante 14 dias, G4 Â grupo submetido ao exercício 24 horas após a lesão porém realizando em dias alternados, dia sim, dia não. Todos os animais foram submetidos a uma lesão nervosa tipo axonotmese, pelo estrangulamento do nervo isquiático. As variáveis estudadas foram funcionais, eletromiográficas, biomoleculares e morfológicas. Nossos dados apontam para uma melhora funcional observada através do índice funcional do isquiático nos grupos exercitados, é possível constatar também um incremento na produção de fatores neurotróficos (BDNF e NGF) coincidindo com a diminuição da expressão da enzima iNOS e da citocina TNF Â a nos grupos exercitados. Nossos dados eletromiográficos mostram um padrão semelhante de recuperação em todos os grupos. Os dados morfológicos mostram que ao 21º dia os músculos gastrocnêmios provenientes do lado experimenal encontram-se com grandes áreas de atrofia, os nevos isquiáticos tanto no coto proximal quanto distal mostram áreas extensamente desnervadas. Em suma acreditamos que o exercício da maneira que foi proposto possa contribuir de forma positiva com o processo de regeneração nervosa periférica.<br> / Abstract : Lesions of the peripheral nervous system are common and carry both sensory and motor losses, such lesions interfere with the individual's life due to decreased job performance. Exercise is one of the means employed in the treatment of peripheral nerve injuries. However, the large amount of conflicting data regarding the subject stimulates performing more experiments and the use of new analytical techniques that can help us understand the real effects of exercise on the process of peripheral nerve regeneration. In this study we used four groups of animals (G1 to G4), underwent a training protocol (forced swim) as follows: G1 - control sedentary group , G2 - Group submitted to exercise daily for 21 days 24 hours after nerve injury, G3 - group submitted to exercise 7 days after injury for 14 days , G4 - the group submitted to exercise 24 hours after injury but performing on alternate days , day in, day out . All animals underwent a nerve injury Axonotmesis sort by strangulation of the sciatic nerve. The variables studied were functional , electromyographic, biomolecular and morphological . Our data point to a functional improvement observed through the sciatic functional index in the exercised groups, you can also see an increase in production of neurotrophic factors ( BDNF and NGF ) coinciding with the decreased expression of iNOS and cytokine TNF - a in exercised groups . Electromyographic data show a similar pattern of recovery in all groups. The morphological data show that after 21 days the gastrocnemius muscles from the side experimenal are with large areas of atrophy, the sciatic nevi in both proximal and distal stump show extensively denervated areas . In short we believe that exercise the way it was proposed to contribute positively to the process of peripheral nerve regeneration.