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Estudo do perfil temporal na liberação de neurotrofinas em ratos Wistar submetidos a sutura término-terminal imediata após lesão do nervo mediano

Santos, Marcos Antonio dos 24 October 2012 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-24T23:17:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 287243.pdf: 5088883 bytes, checksum: b94ed2b232417a37bf4d239f2c8e2c90 (MD5) / As neurotrofinas regulam a plasticidade do sistema nervoso adulto, promovendo a sobrevivência de neurônios e estimulando sua regeneração após lesão. Meta: Este trabalho foi focado em avaliar a expressão de RNA-m das neurotrofinas (Fator de Crescimento de Nervo - NGF, Fator Neurotrófico Cerebral - BDNF e neurotrofina 3 - NT-3) no nervo mediano de ratos Wistar submetidos à sutura término-terminal imediata após neurotmese. Material e métodos: Ratos Wistar foram usados no experimento. O nervo mediano foi seccionado e os animais receberam três pontos de sutura epiperineural após a neurotmese. O estudo do RNA-m para BDNF, NT-3 e NGF no nervo mediano foi analisado nos períodos de 2, 7, 14, 30 e 60 dias após o procedimento cirúrgico usando RT-PCR. Também foi feita a análise histológica do nervo mediano usando coloração por hematoxilina-eosina - HE. Análise estatística: A diferença estatística entre os grupos foi conduzida com a análise de variância (ANOVA), seguida por teste t de "Student's" e/ou Dunnett's ou teste de correlação de Pearson. Para todos os testes foi utilizada análise bicaudal. Valores de p menor que 0,05 foram considerados estatisticamente significativos. Resultados: Os resultados mostraram um aumento da expressão do nível de RNA-m para BDNF e NT-3 60 dias após o procedimento cirúrgico (P=0,03). Houve também aumento na expressão de RNA-m para NGF, que foi detectado aos 7 dias e manteve-se elevado até 60 dias após o procedimento cirúrgico (p=0,0004). Conclusão: Estes resultados confirmam e aumentam a evidência de que a sutura imediata término-terminal é eficiente na recuperação funcional do nervo mediano lesado, uma vez que esta técnica induz a liberação de RNA-m para neurotrofinas que estão relacionadas à regeneração do nervo. / Neurotrophins regulate the adult nervous system plasticity promoting the survival of neurons and stimulating nerve regeneration after injury. Aim: This work aimed to evaluate the neurotrophins (nerve growth factors (NGF), brain derived nerve factor (BDNF) and neurotrophin-3 (NT-3)) in the timing of RNAm expression in the median nerve in Wistar rat submitted to primary end-to-end repair after neurotmesis. Material and Methods: Wistar rat were used thought the experiments. The rat median nerve was sectioned and the animals received primary end-to-end sutures with three epiperineurial stitches after neurotimesis. The study of RNAm to BDNF, NT-3 and NGF in the median nerve was analised 2 to 60 days after surgical procedure using the RT-PCR. Also histological analysis of the median nerve was performed using hematoxilin-eosin (HE) Statistical analysis. Statistical differences between groups were conducted with the analysis of variance (ANOVA), following by Dunnett's and/or Student's t-tests or Pearson rank correlation test. P-values of less than 0.05 were considered statistically significant, and all tests were two-tailed. Results: The results showed an enhancement of mRNA expression levels to BDNF and NT-3 at 60 days after surgical procedure (P = 0.03). Also an increase of RNAm for NGF was detected at 7 to 60 days (p = 0.0004). Conclusion: These results confirm and extend the evidence that the immediate end-to-end suture procedure is efficient in the functional recovery of the injured median nerve, because this technique induces the neurotrophins RNAm release that are related to the nerve regeneration.
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Avaliação das repercussões do exercício físico sobre a regeneração nervosa de ratos Wistar submetidos a axonotmese do nervo isquiático

Guedert, Denis Guilherme January 2014 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-02-05T20:46:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 328356.pdf: 18028503 bytes, checksum: 7a18bfa5b94836f29501d5f050b34ba1 (MD5) Previous issue date: 2014 / Lesões do sistema nervoso periférico são comuns e acarretam perdas tanto sensitivas quanto motoras, tais lesões interferem na vida do indivíduo devido a diminuição do rendimento profissional. O exercício físico é um dos meios empregados no tratamento das lesões nervosas periféricas. No entanto, a grande quantidade de dados conflitantes a respeito do tema estimula a realização de mais experimentos e o uso de novas técnicas de análise que possam nos ajudar a entender os efeitos reais do exercício sobre o processo de regeneração nervosa periférica. Neste estudo utilizamos quatro grupos de animais (G1 a G4), submetidos a um protocolo de treinamento (nado forçado) nas seguintes condições: G1 Â grupo controle sedentário, G2 Â Grupo submetido ao exercício diariamente durante 21 dias 24 horas após a lesão nervosa, G3 Â grupo submetido ao exercício 7 dias após a lesão durante 14 dias, G4 Â grupo submetido ao exercício 24 horas após a lesão porém realizando em dias alternados, dia sim, dia não. Todos os animais foram submetidos a uma lesão nervosa tipo axonotmese, pelo estrangulamento do nervo isquiático. As variáveis estudadas foram funcionais, eletromiográficas, biomoleculares e morfológicas. Nossos dados apontam para uma melhora funcional observada através do índice funcional do isquiático nos grupos exercitados, é possível constatar também um incremento na produção de fatores neurotróficos (BDNF e NGF) coincidindo com a diminuição da expressão da enzima iNOS e da citocina TNF Â a nos grupos exercitados. Nossos dados eletromiográficos mostram um padrão semelhante de recuperação em todos os grupos. Os dados morfológicos mostram que ao 21º dia os músculos gastrocnêmios provenientes do lado experimenal encontram-se com grandes áreas de atrofia, os nevos isquiáticos tanto no coto proximal quanto distal mostram áreas extensamente desnervadas. Em suma acreditamos que o exercício da maneira que foi proposto possa contribuir de forma positiva com o processo de regeneração nervosa periférica.<br> / Abstract : Lesions of the peripheral nervous system are common and carry both sensory and motor losses, such lesions interfere with the individual's life due to decreased job performance. Exercise is one of the means employed in the treatment of peripheral nerve injuries. However, the large amount of conflicting data regarding the subject stimulates performing more experiments and the use of new analytical techniques that can help us understand the real effects of exercise on the process of peripheral nerve regeneration. In this study we used four groups of animals (G1 to G4), underwent a training protocol (forced swim) as follows: G1 - control sedentary group , G2 - Group submitted to exercise daily for 21 days 24 hours after nerve injury, G3 - group submitted to exercise 7 days after injury for 14 days , G4 - the group submitted to exercise 24 hours after injury but performing on alternate days , day in, day out . All animals underwent a nerve injury Axonotmesis sort by strangulation of the sciatic nerve. The variables studied were functional , electromyographic, biomolecular and morphological . Our data point to a functional improvement observed through the sciatic functional index in the exercised groups, you can also see an increase in production of neurotrophic factors ( BDNF and NGF ) coinciding with the decreased expression of iNOS and cytokine TNF - a in exercised groups . Electromyographic data show a similar pattern of recovery in all groups. The morphological data show that after 21 days the gastrocnemius muscles from the side experimenal are with large areas of atrophy, the sciatic nevi in both proximal and distal stump show extensively denervated areas . In short we believe that exercise the way it was proposed to contribute positively to the process of peripheral nerve regeneration.
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QUANTIFICAÇÃO DE BIOMASSA E DE CARBONO ORGÂNICO NA REGENERAÇÃO NATURAL DE FLORESTA OMBRÓFILA MISTA - NOVA PRATA, RS / BIOMASS AND ORGANIC CARBON QUANTIFICATION IN THE NATURAL REGENERATION OF MIXED SHADE TOLERANT FOREST NOVA PRATA, RS

Medeiros, Janize Augusta Ferro de 26 July 2004 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This work had as objectives to ajust mathematical models that describe, through equations, the biomass volume and the concentration of organic carbon of the natural regeneration of Mixed Shade Tolerant Forest. To reach the objectives two sample units of 10m of width by 50m of length had been installed, totaling 1000m2.Each unit was subdivided in 5 subunits of 10 x 10m. The biomass was quantified by sampled area and the individuals had been divided in three categories: plantule (plants with superior height to 0,50m, and that to 1,30m having less than 3cm of CAP), regeneration 1 (CAP ≥ 3 and <15cm) and regeneration 2 (CAP ≥ 15 and < 30cm).The data had been collected in a destructive way. Besides the weights of each fraction (stem, branches, leaves, roots and miscellany), CAP, total heights and first alive branch were measured, cup diameter and the procedure of cubic measure stem had been done. The fine litter was determined in areas of 1m2, and the thick in 9m2 in each subunit. In the determination of the dry biomass and carbon contents, it had been collected samples of each fraction, and dried up in greenhouses with temperature of 75ºC until obtaining constant weight. To verify the relationships between the humid biomass and the dendrometric variables it had been used the Pearson Correlation Coefficient and graphic analysis. In the verification of the adequacy of the humid biomass models, the determination coefficient statistics had been analyzed, estimate standard error, F significant value, t value for the coefficients and the residues distribution. In the model construction for the dry biomass quantification, the weight of the humid biomass had been used as an independent variable. In the verification of the adequacy of the dry biomass models, the determination coefficient statistics, estimate standard error and graphic analysis for the residues had been analyzed. For the models construction (humid and dry biomass), the procedure statistical stepwise had been adopted, in which the potentials independent variables had been selected in 5% level of error. In the verification of the observed values had been significantly difference from the estimated values, the χ2 test had been used. The equations to esteem the humid biomass presented good adjustment with high values of determination coefficient, low estimate standard error and good residues distribution. The dry biomass had been presented linear or quadratic relationship in relation to the humid biomass and the equations presented good adjustment, with high values of determination coefficient, low estimate standard error and good distribution between the observed and fitting values. In the organic carbon estimate it had been used the medium contents found in the samples as multiplication factor. The total of the natural regeneration biomass had been 31.629,600 kg/ha, (regeneration 2 represented 46%, regeneration 1 45% and plantules 9%) and the litter had been accumulated 26.606,000 kg/ha, (54% corresponded to fine litter and 46% thick litter). The regeneration had been accumulated 7.517,869 kg/ha of organic carbon, (regeneration 2 contributed with 46,61%, regeneration 1 with 44,41% and plantules with 8,98%) and the litter had been stocked 5.509,067 kg/ha. The analysis of the three strata with the stem fraction had been contributed with 52,43% of the stocked organic carbon, branches 22,66%, roots 17,39%, leaves 5,27% and miscellany 2,25%. / Este trabalho teve como objetivos desenvolver modelos matemáticos que descrevam, através de equações, o volume de biomassa e a concentração de carbono orgânico da regeneração natural de Floresta Ombrófila Mista. Para alcançar os objetivos foram instaladas duas unidades amostrais de 10m de largura por 50m de comprimento, totalizando 1000m2. Cada unidade foi subdividida em 5 subunidades de 10 x 10m. A biomassa foi quantificada por área amostrada, sendo que os indivíduos foram divididos em três categorias: plântula (plantas com altura superior a 0,50m, CAP < 3cm), regeneração 1 (CAP ≥ 3 e <15cm) e regeneração 2 (CAP ≥15 e < 30cm). Os dados foram coletados de forma destrutiva. Além dos pesos de cada fração (fuste, galhos, folhas, raízes e miscelânea), foram mensurados o CAP, alturas total e do primeiro galho vivo, diâmetro da copa e a cubagem do fuste. A serapilheira fina foi determinada em áreas de 1m2, e a grossa em 9m2 em cada subunidade. Para a determinação da biomassa seca e do teor de carbono, foram coletadas amostras de cada fração, que foram secas em estufas com temperatura de 75oC até atingirem peso constante. Para verificar as relações entre as variáveis de biomassa úmida e as dendrométricas, foram utilizados o Coeficiente de Correlação de Pearson e a análise gráfica. Na verificação da adequacidade dos modelos de biomassa úmida, foram analisadas as estatísticas do coeficiente de determinação, erro padrão da estimativa, valor de significância de F, valor de t para os coeficientes e distribuição dos resíduos. Na construção de modelos para quantificação da biomassa seca, utilizou-se o peso da biomassa úmida como variável independente. Na verificação da adequacidade dos modelos de biomassa seca, foram analisadas as estatísticas do coeficiente de determinação, erro padrão da estimativa e análise gráfica dos resíduos. Para a construção dos modelos (biomassa úmida e seca), adotou-se o procedimento estatístico stepwise, no qual as variáveis independentes potenciais foram selecionadas para um nível de 5% de probabilidade. Para verificar se os valores observados diferiram significativamente dos valores estimados, utilizou-se o teste do χ2. As equações para estimar a biomassa úmida apresentaram bom ajuste com altos valores de coeficiente de determinação, baixo erro padrão da estimativa e boa distribuição dos resíduos. A biomassa seca apresentou relação linear ou quadrática em relação à biomassa úmida e as equações apresentaram bom ajuste, com altos valores de coeficiente de determinação, baixo erro padrão da estimativa e boa distribuição entre os valores observados e ajustados. Na estimativa do carbono orgânico utilizaram-se os teores médios encontrados nas amostras como fator de multiplicação. O total de biomassa da regeneração natural foi de 31.629,600 kg/ha, (regeneração 2 representou 46%, regeneração 1, 45% e plântulas, 9%), e a serapilheira acumulou 26.606,000 kg/ha, (54% corresponde à serapilheira fina e 46% á grossa). A regeneração acumulou, 7.517,869 kg/ha de carbono orgânico, (regeneração 2 contribuiu com 46,61%, regeneração 1 com 44,41% e plântulas com 8,98%) e a serapilheira estocou 5.509,067 kg/ha. Analisando-se os três estratos conjuntamente, a fração do fuste contribui com 52,43% do carbono orgânico estocado; galhos 22,66%; raízes 17,39%; folhas 5,27%; e miscelânea com 2,25%.
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[en] FOREST WARS: A TRILOGY ON COMBATING DEFORESTATION IN THE BRAZILIAN AMAZON / [pt] GUERRA NA FLORESTA: UMA TRILOGIA SOBRE O COMBATE DO DESMATAMENTO NA AMAZÔNIA

CLARISSA COSTALONGA E GANDOUR 18 January 2019 (has links)
[pt] Esta tese avalia políticas de conservação adotadas no âmbito do plano de ação federal para combate ao desmatamento na Amazônia brasileira. O Capítulo 1 descreve as principais mudanças institucionais e discute suas avaliações de efetividade. A revisão de literatura corrobora a eficácia das medidas para a redução do desmatamento, mas indica também que efeitos indiretos das políticas de conservação foram pouco estudados. Os demais capítulos conduzem análises empíricas sobre efeitos diretos e indiretos dessas políticas, utilizando um painel de dez anos de dados georreferenciados para contemplar dinâmicas espaciais ao longo do tempo. O Capítulo 2 testa se proteção territorial legal confere real proteção contra desmatamento. Tomando a intensidade do desmatamento no entorno de uma área como uma medida do risco de desmatamento local, o estudo compara a perda florestal em territórios protegidos e não protegidos sujeitos a riscos de desmatamento equivalentes. Aproveitando o formato raster dos dados, a estratégia empírica inclui efeitos fixos de célula para mitigar preocupações sobre possível viés oriundo de não-observáveis. Os resultados documentam a eficácia da proteção: células protegidas tiveram significativamente menos perda florestal do que células não protegidas, mesmo quando expostas ao mesmo risco de desmatamento. Contudo, ainda que o território protegido sirva como um escudo contra o avanço do desmatamento, a perda florestal por ele desviada parece seguir para áreas não protegidas. A proteção, portanto, afeta a dinâmica regional do desmatamento, mas não seu nível agregado. O Capítulo 3 investiga se variações na regeneração tropical configuram uma externalidade de medidas de aplicação da lei voltadas para o desmatamento. A vegetação secundária esteve vulnerável durante a primeira década do plano de ação, que não direcionou esforços para a promoção da regeneração tropical e tampouco para a conservação de vegetação secundária existente. Além disso, a regeneração permaneceu invisível ao sistema de monitoramento da floresta. Mesmo assim, a área de vegetação secundária na Amazônia aumentou em 7 milhões de hectares durante esse período. A última parte desta tese averigua se a aplicação da lei contribuiu para esse fenômeno, ainda que não intencionalmente. Os resultados são robustos à inclusão de uma série de controles em nível da célula, que mitigam preocupações sobre viés de variável omitida. A análise indica que uma maior intensidade de aplicação da lei no entorno de um local está associada a maior probabilidade de expansão da vegetação secundária e também maior área por ela coberta naquele local. Isso apoia a hipótese de que infratores ambientais, diante dos maiores custos associados à atividade ilegal, abandonaram as regiões onde operavam e, assim, permitiram que ocorresse um processo natural de regeneração. A força dessa externalidade varia conforme o grau de desmatamento local: regiões mais desmatadas provavelmente abrigam atividades não florestais mais consolidadas, dificultando o ressurgimento da floresta; regiões menos desmatadas ainda oferecem uma área relativamente pequena para regeneração em escala. Exercícios contrafatuais ilustram a magnitude desse efeito, mostrando que melhorias no sistema de monitoramento do desmatamento resultariam em quase 300 mil hectares adicionais de vegetação secundária. / [en] This dissertation assesses policy effects of conservation efforts adopted within the scope of the federal action plan to combat Amazon deforestation in Brazil. Chapter 1 provides a description of key policy changes and surveys the associated effectiveness literature. It finds evidence that supports the action plan s efficacy in reducing aggregate deforestation levels, but notes that indirect impacts of conservation policies have received little attention. The remaining chapters explore direct and indirect impacts of action plan policies using a georeferenced ten-year panel dataset to account for spatial dynamics. Chapter 2 tests whether legal territorial protection grants actual protection against advancing deforestation. Using a measure of neighboring clearing activity to capture local deforestation risk, the analysis compares forest clearing outcomes in unprotected and protected territory under equivalent deforestation pressures. The empirical strategy draws on the dataset s raster structure to mitigate concerns of potentially confounding unobservables via the use of raster cell fixed effects. Results document protection s efficacy in a high-risk context, with significantly less forest being cleared in protected cells than in unprotected ones. Yet, although protected territory effectively shields vegetation under its domain from advancing deforestation, it appears to deflect clearings to unprotected areas. Protection therefore affects regional forest clearing dynamics, but not the overall level of deforestation. Chapter 3 investigates whether changes in tropical regeneration constituted a spillover effect from law enforcement targeting forest loss. Secondary vegetation was vulnerable during the first decade of the action plan, which neither promoted tropical regeneration nor sought to conserve existing secondary vegetation. Moreover, regeneration remained undetected in satellite-based forest monitoring systems. Still, during this period, the extent of Amazon secondary vegetation increased by nearly 7 million hectares. The final part of this dissertation examines whether law enforcement contributed to this growth, albeit unintentionally. The empirical strategy uses a ten-year cross-sectional difference in observed regeneration outcomes to address the intrinsically time-consuming nature of this phenomenon. Results are shown to be robust to the inclusion of a host of raster cell-level controls, mitigating concerns about omitted variable bias. Findings indicate that the intensity of enforcement in a location s close surroundings is associated with both increased probability of secondary vegetation expansion and increased area of secondary vegetation in that location. This lends support to the hypothesis that environmental offenders, once faced with a higher perceived cost of engaging in illegal deforestation, abandoned the area they were operating in and thereby allowed a natural process of forest regrowth to occur. The spillover effect of enforcement on regeneration appears largest in places that have undergone neither too much nor too little deforestation: in the former, forest clearings and non-forest land use are probably more consolidated, and regrowth is therefore less likely; in the latter, there is still relatively little area for the forest to grow back in. Counterfactual exercises shed light on the magnitude of this effect. An enhanced satellite-based monitoring system for targeting enforcement would have resulted in nearly 300 thousand additional hectares of secondary vegetation.

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