Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-16T14:53:59Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1733396 bytes, checksum: 7de22856c8dfc9063275c0a8b3ddea0d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-16T14:53:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1733396 bytes, checksum: 7de22856c8dfc9063275c0a8b3ddea0d (MD5) Previous issue date: 2008-10-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O tratamento de escolha para as lesões de menisco é a sutura, mas esta não pode ser realizada em todos os casos. Uma alternativa seria a retirada do menisco lesionado, o que ocasiona sérias alterações degenerativas na articulação. Assim, a procura de um substituto para este tecido fibrocartilaginoso, com o intuito de evitar lesões degenerativas articulares, permanece como um desafio para a cirurgia ortopédica. Uma opção é a substituição do menisco por um aloenxerto meniscal. Nas últimas décadas, as próteses biológicas passaram a ser utilizadas com maior freqüência nos processos de reparação de tecidos, principalmente pelas facilidades de obtenção, conservação, implantação no leito receptor e pelo baixo custo. Nesta pesquisa foram conduzidos três experimentos, com meniscos mediais de coelhos da raça Nova Zelândia, objetivando a avaliação dos efeitos da preservação em glicerina 98% sobre as fibras colágenas, arquitetura tecidual, a celularidade e a resistência meniscal. No primeiro e segundo experimentos foram utilizados 21 meniscos, distribuídos em três grupos de sete; e no terceiro experimento foram utilizados 30 meniscos, distribuídos em três grupos de dez. Em cada experimento, um grupo foi composto por meniscos frescos - MF e correspondeu ao grupo controle; um por meniscos preservados em glicerina 98%, por 30 dias - MG; e outro grupo foi composto por meniscos preservados em glicerina 98%, por 30 dias, e reidratados em NaCl 0,9%, por 12 horas - MR. No primeiro trabalho, foi realizada avaliação histológica do colágeno, por meio da quantificação dos tipos e análise da disposição das fibras colágenas, além da avaliação do tamanho e do aspecto macroscópico do menisco. No segundo, avaliou-se a arquitetura tecidual, a população celular, assim como a integridade e a distribuição dos tipos celulares presentes: fibroblastos/fibrócitos e condrócitos. No terceiro, os meniscos foram submetidos a testes de resistência à compressão, sendo avaliada a força e deformação ao limite de elasticidade, tensão ao ponto de ruptura e ao limite de elasticidade e o índice de rigidez. Foram realizados testes de Duncan ou Tuckey, conforme a instabilidade da variável. Todos os meniscos do grupo MF apresentaram fibras dispostas obliquamente, nos meniscos dos grupos MG e MR, 42,8% e 14,3% respectivamente, apresentaram desorganização das fibras colágenas em pequenas áreas. O grupo MF apresentou maior x concentração de colágeno tipo I e menor concentração de colágeno tipo III em relação aos grupos MG e MR, isto pode ter ocorrido devido à redução no tamanho dos meniscos e conseqüente retração das fibras de colágeno dos meniscos destes grupos, causada pela desidratação. O grupo de meniscos em glicerina - MG apresentou uma redução significativa no tamanho em relação ao grupo MF. No grupo MR, 85,7% dos meniscos retornaram ao seu tamanho inicial após a reidratação em solução salina. Não houve diferença significativa entre os tamanhos dos meniscos reidratados - MR e dos meniscos do grupo controle - MF. A população celular foi estatisticamente semelhante nos três grupos de meniscos, sendo que todos os meniscos preservados, grupos MG e MR, apresentaram sinais de lise celular. Nos meniscos dos grupos preservados (MG e MR) observou-se retração das fibras colágenas, menor intensidade na coloração do tecido, e diminuição de volume e maior intensidade de coloração dos núcleos (condensação da cromatina), em relação aos meniscos frescos (MF), caracterizando o fenômeno de lise celular. A matriz fibrocartilaginosa dos meniscos dos grupos MG e MR revelou-se bem preservada mantendo a arquitetura tecidual e assim, as propriedades mecânicas do menisco. Quanto à resistência, os meniscos dos grupos preservados - MG e MR tiveram a capacidade de suportar, significativamente, a mesma força do grupo de meniscos frescos - MF, antes de sofrer ruptura total. Os meniscos em glicerina - MG apresentaram estatisticamente, menor capacidade de deformação elástica e maior rigidez que os meniscos do grupo MF e MR (p<0,05), provavelmente devido a desidratação promovida pela glicerina. A glicerina 98% demonstrou ser uma opção de meio de preservação para aloenxertos meniscais com matriz colágena desvitalizada. Este meio aumentou a resistência dos meniscos à compressão, sem alterar o colágeno tipo I e assim a arquitetura tecidual. Os capítulos apresentados como parte integrante desta tese estão seguindo as normas de publicação da Pesquisa Veterinária Brasileira/Brazilian Journal of Veterinary Research, editada pelo Colégio Brasileiro de Patologia Animal (CBPA). / The treatment used for meniscus lesions is the suture, procedure which cannot be applied in other cases. An alternative would be the removal of the meniscus with lesions, which may cause serious degenerative alterations in the articulations. Thus, the search for a substitute for the fibercartilage tissue which would avoid the degenerative lesions remains a challenge for orthopedic surgery. In the last decades, biological prosthesis started to be applied more often in the repair processes, especially because of how easy it can be to obtain, conserve and implant the latter in the receptor and also because of low cost. Another option would be to replace the meniscus by a meniscus allograft. Three experiments were conducted in this piece of research with medial meniscus from New Zealand rabbits. The objective was to evaluate the effects of the meniscus preservation in glycerin 98% on collagen fibers, tissue architecture, cellularity and meniscal resistance. 21 meniscuses were used in the first and second experiments. They were distributed in three groups of seven. In the third experiment 30 meniscuses were used and they were divided into three groups of ten. In each experiment one group was composed by fresh meniscus - MF and therefore corresponded to the control group; the second group was composed by meniscuses preserved in glycerin 98% for the period of 30 days - MG; and, the third was composed by meniscuses preserved in glycerin 98% for 30 days also, but these were rehydrated in NaCl 0,9%, for 12 hours - MR. First, a histological evaluation of the collagen was carried out through the quantification of the collagen types and through the analyses of their fiber arrangement. The analyses of the size and macroscopic aspect of the meniscuses were also accomplished. In the second, evaluate the architecture tissue, the cell population, as well as the integrity and distribution of cell types found: fibroblasts/fibrocytes and chondrocytes. On the third part of the experiment, the meniscuses were submitted to oppression resistance tests. The strength and the elasticity limit were evaluated as well as the deformation at the elasticity limit, the rupture stress and the elasticity limit stress and stiffness index. Duncan or Tuckey tests were applied according to the instability of the variable. All the meniscuses from group MF presented organized fibers; among the meniscuses from groups MG and MR, 42,8% and 14,3% respectively, presented xii unorganized collagen fibers in small areas. The group MF presented higher type I collagen concentration and lower type III collagen concentration when compared to groups MG and MR, this was due to the reduction in size and subsequent retraction of the fibers of collagen of the meniscus from this groups, caused by dehydration. The group of meniscuses in glycerin - MG presented a significant decrease (p<0,05) in size when compared to the MF group. In the MR group, 85,7% of the meniscus went back to their original size after rehydration. The MR group presented significant increase in the meniscuses size when compared to the MG group. The percentage of cell population was statistically similar in all groups of meniscus, and that all meniscus preserved - MG and MR showed signs of cell lysis. In the meniscus of the groups preserved (MG and MR) were observed a lower intensity of color and shrinkage of collagen fibers, reduced volume and higher intensity of staining of nucleus (chromatin condensation), as compared to fresh meniscus (MF), featuring the phenomenon of cell lysis. The matrix fibrocartilaginosa of meniscus preserved proved to be well preserved by maintaining the tissue architecture and thus, the mechanical properties of the meniscus. As for resistance, the meniscuses from the preserved groups, MG and MR, were able to significantly withstand the same strength as the fresh meniscus group MF before going through total rupture. The meniscuses in glycerin - MG presented, statistically, a lower capacity of elastic deformation than the groups MF and MR (p<0,05). The meniscuses from the MG group presented significantly higher stiffness than the ones form the groups MF and MR (p<0,05), probably because of the dehydration promoted by the glycerin. The glycerin 98% proved to be a choice of means of preservation for meniscal allografts with collagenous matrix devitalized. This means increased resistance to compression of the meniscus, without changing the collagen type I and thus the architecture tissue.

Submitted by Emanoel Martins Filho (emanoelfilho@ufba.br) on 2016-09-13T01:18:45Z No. of bitstreams: 1 Carlos_Humberto_Vieira.pdf: 3115604 bytes, checksum: 185acb42af9a3986d42a53be2fc6f05a (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2016-09-13T20:37:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Carlos_Humberto_Vieira.pdf: 3115604 bytes, checksum: 185acb42af9a3986d42a53be2fc6f05a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T20:37:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carlos_Humberto_Vieira.pdf: 3115604 bytes, checksum: 185acb42af9a3986d42a53be2fc6f05a (MD5) / O infiltrado inflamatório no microambiente tumoral, em especial nos tumores mamários, tem despertado grande interesse na oncologia, por desempenhar diferentes funções na progressão ou regressão tumoral a depender dos tipos e subtipos celulares envolvidos. O presente estudo objetivou avaliar (1) a presença e intensidade de infiltrado macrofágico no microambiente tumoral; (2) a expressão das proteínas SOCS1 e SOCS3 nos macrófagos; e (3) a possível relação destes parâmetros com a evolução tumoral e a sobrevida, como um possível fator prognóstico em cadelas portadoras de carcinomas mamários. Foram estudadas 22 cadelas com diagnóstico histopatológico de carcinoma em tumor misto benigno de mama (CaTMB), divididas em dois grupos, sendo G1 constituído por cadelas sem metástase (11) e G2 com metástase (11); em G1 e G2 os animais foram subclassificados de acordo com a utilização ou não do tratamento quimioterápico. As cadelas foram submetidas a análise clínico-patológica (tamanho do tumor; presença de metástase em linfonodo; estadiamento clínico; graduação histológica; distribuição e intensidade do infiltrado inflamatório; quantificação e verificação do estado de ativação de macrófagos no infiltrado por análise imunoistoquímica da expressão de SOCS1 e SOCS3), imunofenotipagem de leucócitos do sangue periférico por citometria de fluxo com marcadores celulares CD14, MHCI e MHCII, e avaliação da taxa de sobrevida. A morfometria do infiltrado inflamatório associado ao tumor revelou, em todos os grupos, predominância da distribuição multifocal e intensidade moderada. A maior proporção de macrófagos no infiltrado inflamatório (≥400) foi associada a uma maior taxa de sobrevida. A imunomarcação revelou maiores proporções de macrófagos SOCS3 positivos nas cadelas que não apresentavam metástases para linfonodo, enquanto que os macrófagos SOCS1 positivos predominaram nas cadelas com metástase (p<0,05). Adicionalmente, a análise multivariada revelou associações entre estadiamento clínico, graduação histológica, sobrevida, tratamento quimioterápico e expressão de moléculas MHCI em monócitos circulantes. Os resultados das análises quantitativa e qualitativa dos macrófagos no infiltrado inflamatório indicam que o estado de ativação, sugerido pela maior expressão das proteínas SOCS3 e 1, define a relação do infiltrado macrofágico com a resposta imune antitumoral ou com a progressão tumoral associada ao desenvolvimento de metástases, respectivamente. / The inflammatory infiltrate in the tumor microenvironment, particularly in breast tumors, has aroused great interest in oncology due to their different roles in tumor progression or regression depending on the types and cell subsets involved. The objective of this study was to evaluate the presence and intensity of macrophage infiltrate in the tumor microenvironment; the expression of SOCS1 and SOCS3 proteins in these macrophages; and the relation of the former parameters to tumor development and survival, as possible prognostic factors of breast carcinomas evolution in female dogs. Were studied 22 female dogs with histopathological diagnosis of carcinoma in benign mixed tumor (CaTMB), divided into two groups consisting of animals without metastasis (G1=11) and animals with metastasis (G2=11); in G1 and G2, the dogs were graded according with the use or not of chemotherapy. All animals underwent clinicopathological analysis (tumor size, lymph node metastasis, clinical stage, histological grade, distribution and intensity of the inflammatory infiltrate, especially macrophages, as well as their possible activation state by immunohistochemical analysis anti-SOCS1 and anti-SOCS3) immunophenotyping by flow cytometry of PBMC for cell markers CD14, MHCI and MHCII, and assessment of survival rate. The morphology of the inflammatory infiltrate associated with tumor showed, in all groups, prevalence of multifocal distribution and moderate intensity. The higher intensity of the macrophage infiltrate (≥400) was associated with a higher survival rate. The immunostaining revealed a higher proportion of positive macrophages for SOCS3 in dogs who had no metastasis to lymph node, while the positive SOCS1 macrophages predominated in animals with metastases (p <0.05). In addition, the multivariate analysis revealed associations between clinical staging, graduation, survival, chemotherapy and expression of MHCI molecules in circulating monocytes. The results obtained in the present study indicated that the activation state, suggested by expression of SOCS3 and 1 proteins, defines the relationship of the macrophage infiltration with antitumor or immune response to tumor progression associated with the development of metastasis, respectively.

Submitted by Emanoel Martins Filho (emanoelfilho@ufba.br) on 2016-09-13T01:03:30Z No. of bitstreams: 1 Marília_Carneiro.pdf: 2404154 bytes, checksum: 37e73c60cfe65d02e9218e87bda6a10c (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2016-09-13T20:37:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Marília_Carneiro.pdf: 2404154 bytes, checksum: 37e73c60cfe65d02e9218e87bda6a10c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T20:37:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marília_Carneiro.pdf: 2404154 bytes, checksum: 37e73c60cfe65d02e9218e87bda6a10c (MD5) / CONS NAC DE DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLOGICO - CAPES / É crescente o número de estudos que buscam novas abordagens terapêuticas para o carcinoma em tumor misto benigno (CaTMB), neoplasia mamária mais frequente na cadela e que apresenta variável potencial de malignidade. Neste contexto, objetivou-se a partir da realização deste trabalho avaliar o efeito da naltrexona em doses baixas (NDB) sobre a resposta imune de cadelas com CaTMB submetidas à mastectomia, seguido por tratamento quimioterápico com carboplatina e verificar sua associação com a qualidade de vida e a sobrevida. Foram estudadas 30 cadelas, todas com diagnóstico histopatológico de CaTMB, divididas em três grupos experimentais: Grupo 1: Controle, constituído por animais submetidos apenas a mastectomia subdivididos em pacientes sem metástase regional (CaTMB(-)) e com metástase regional (CaTMB(+)); Grupo 2, todos sem metástase e Grupo 3 todos com metástase. Os grupos 2 e 3 também foram subdivididos, mas de acordo com o tratamento: tratados com quimioterapia (CaTMB(-) Q/CaTMB(+) Q e tratados com quimioterapia e NDB (CaTMB(-) Q+NDB / CaTMB(+) Q+NDB). Todos os animais foram submetidos à avaliação clínica, mastectomia, imunofenotipagem dos linfócitos T CD4+ e CD8+ circulantes no sangue periférico, dosagem de beta-endorfina e meta-encefalina, além da avaliação da taxa de sobrevida e dos escores de qualidade de vida, periodicamente. Os resultados revelaram maior porcentagem de células T e T CD8+ nos animais do grupo CaTMB(-) Q+NDB (p<0,05), maiores concentrações séricas de beta-endorfina e meta-encefalina, redução dos efeitos colaterais relacionados a quimioterapia, bem como melhor qualidade de vida e sobrevida nos grupos tratados com NDB em relação aos grupos não tratados. A avaliação dos parâmetros clínico-patológicos, tanto na análise univariada quanto na multivariada, indicaram a associação significativa da utilização do NDB com a condição vivo, utilização da quimioterapia, maior sobrevida e qualidade de vida. Estes resultados associados indicam que a NDB representa uma alternativa viável de tratamento adjuvante à quimioterapia em cadelas com CaTMB, pois aumenta as concentrações de beta-endorfina e meta-encefalina e estimula a resposta dos linfócitos CD8+, proporcionando manutenção da qualidade de vida e contribuindo para o aumento na taxa de sobrevida destes pacientes. / Recently, it can be noticed an increasing number of scientific reports on dog benign mixed carcinoma tumor (CaTMB), mainly focusing on new therapeutic approaches. This is the most frequent breast tumor in female dogs and presents a variable malignant potential. In this context, the objective of this study was to evaluate the effect of low dose naltrexone (LDN) on the immune response of female dogs with CaTMB after mastectomy and chemotherapy with carboplatin, and to verify its association with quality of life and survival rates. 30 female dogs were included in this study, all of them with histopathological diagnosis of CaTMB; they were divided into three experimental groups: Group 1: Control, consisting of animals submitted to mastectomy and with or without regional metastasis; Group 2, composed of animals that did not presented metastasis; and Group 3, including dogs that presented metastasis. Groups 2 and 3 also were subdivided according to the treatment performed: chemotherapy alone (CaTMB(-) Q / CaTMB(+) Q), and LDN-associated chemotherapy (CaTMB(-) Q+LDN / CaTMB(+) Q+LDN). All animals were subjected to clinical evaluation, mastectomy, immunophenotyping of peripheral blood lymphocytes, beta-endorphin and meta-enkephalin dosage, and evaluation of the survival rates and quality of life scores. The results showed a higher percentage of CD3+ and CD3+/ CD8+ in the CaTMB(-) Q+LDN (p<0,05) group, higher serum concentrations of beta-endorphin and met-enkephalin, decreased chemotherapy related side effects, as well as better quality of life and survival rates, when comparing the group treated with LDN to the LDN-untreated group. The evaluation of clinical and pathological parameters indicated a significant association between the use of LDN with the use of chemotherapy, prolonged survival and quality of life. These results indicate that LDN is a viable chemotherapy-associated treatment in female dogs with CaTMB, providing maintenance of life quality and prolonged survival rates.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-07-14T12:02:06Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2779756 bytes, checksum: 37870637a8a01cd286e606554504636c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T12:02:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2779756 bytes, checksum: 37870637a8a01cd286e606554504636c (MD5) Previous issue date: 2016-03-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Terapias com células indiferenciadas são uma promissora ferramenta para aprimorar a reparação de diversos tecidos e órgãos. Muitos benefícios já foram demonstrados in vitro, entretanto, esforços têm sido dedicados para manter as células aplicadas in vivo no sítio em que se deseja a reparação, e, nesse contexto, biomateriais têm sido desenvolvidos. Assim, o objetivo do presente trabalho foi dispobilizar um método completo para obtenção, expansão e caracterização de células mesenquimais estromais (CME) oriundas da medula óssea de coelhos e avaliar o potencial de reparação óssea destas células quando utilizadas em associação com um novo biomaterial composto de hidroxiapatita e fibroína de seda (HAP/FS). Células mononucleares da medula óssea (CMMO) do úmero e fêmur de coelhos foram obtidas e, para avaliar sua taxa de proliferação, três meios de cultura diferentes foram testados. As CMMO também foram cultivadas em meios de indução osteogênico, condrogênico e adipogênico para comprovar a sua multipotencialidade. Em seguida, o biomaterial proposto foi caracterizado por difração de raios-x e microscopia eletronica de varredura, e seus efeitos na viabilidade celular e na ativação de leucócitos foram investigados. Finalmente, foi avaliada a habilidade deste biomaterial em atuar como um carreador de CME e o efeito da associação das CME ao biomaterial na reparação de defeitos ósseos na calvaria de coelhos também foi investigado. Os resultados mostraram que as técnicas aqui apresentadas fornecem um método completo para obtenção, expansão e caracterização de CME da medula óssea de coelhos de forma adequada e que a utilização destas células em associação com o compósito de HAP/SF teve um efeito benéfico na reparação dos defeitos em calvaria de coelhos. / Therapies based on undifferentiated cells has been shown to be a promising tool to improve the repair of various tissues and organs. Many benefits have been demonstrated in vitro already, however, efforts have been addressed to maintain the cells applied in vivo at the site where the reparation is desired, and, in this context, biomaterials have been developed. Therefore, the aim of this study was to provide a full method to harvest, expand and characterize mesenchymal stromal cells (MSCs) from rabbits’ bone marrow and to assess the bone repair potential of these cells when applied in combination to a new biomaterial composed of hydroxyapatite and silk fibroin (HAP/SF). Bone marrow mononuclear cells (BMMCs) were harvested from rabbits’ humerus and femur and their proliferation rate were tested using three different culture media. BMMCs were also cultured in osteogenic, chondrogenic and adipogenic media to prove their multipotentiality. Next, the biomaterial proposed was characterized by x-ray diffraction and scanning electron microscopy, and its effects on cell viability and leukocytes activation were assessed. Finally, the biomaterial ability to act as MSCs carrier was evaluated, and its effect, in combination with the proposed biomaterial, on the repair of bone defects in rabbits’ calvaria was also investigated. The results showed that the techniques presented here provide a full method for successful isolation, expansion and characterization of MSCs from rabbits’ bone marrow and the utilization of these cells combined to the HAP/SF composite have had a benefic effect on the defects repair in calvaria of rabbits.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:37:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_4659_.pdf: 6592458 bytes, checksum: d82d5f62895e63aad50d1e24af49819f (MD5) Previous issue date: 2010-09-10 / Objetivou-se avaliar placas de osso bovino conservadas em solução saturada de sal, com ou sem tratamento químico, como estabilizador articular após desmotomia do ligamento cruzado cranial (LCCr) em cães ex vivo, sob os aspectos mecânicos, microbiológicos e microscópicos. Para tal, 34 placas foram usinadas e distribuídas em dois grupos: GS (n=17) - foram conservadas em solução saturada de sal a 150% por 45 dias; GPS (n=17) - foram submetidas a um tratamento químico anteriormente à conservação. Após, realizou-se desmotomia do LCCr, osteotomia da tuberosidade da tíbia, e avanço e fixação desta com as placas ósseas. Para a avaliação mecânica, realizou-se o ensaio de compressão nos espécimes (tíbia + placa). Observou-se presença de microorganismo nas placas do GS. No GPS verificou-se desnaturação do colágeno ósseo. Em ambos os grupos, as forças máximas suportadas excederam as forças fisiológicas estimadas para 110% do peso dos animais. Conclui-se que a solução saturada de sal promove lise nuclear sem afetar a disposição das fibras ósseas, sugerindo diminuição da antigenicidade do osso cortical bovino; o processamento químico é um método eficiente de esterilização de material cortical ósseo bovino; a placa óssea como estabilizador articular suporta aforça vertical máxima de compressão calculada para 110% do peso vivo sobre a tuberosidade da tíbia após o seu avanço. / The objective of this study was to evaluate bovine cortical bone plates preserved in over-satured salt solution associated or not with chemical treatment, as a joint stabilization method after desmotomy of the cranial cruciate ligament (CrCL) in dogs ex vivo, as for mechanics, microbiologic and microscopic aspects. For this proposal, 34 bone plates were manufactured and distributed in two groups: GS (n=17) – preserved in 150% over-saturated salt solution for 45 days; GPS (n=17) – underwent to chemical treatment before preservation. Later, the CrCL desmotomy, tibial tuberosity osteotomy and advancement and fixation of the tuberosity with the bone plates were performed. Then, compression tests of the specimes (tibia + bone plates) were performed for mechanical evaluation. Contamination was observed in group GS. It was observed collagen denaturation in GPS. In both groups the maximum supported force exceeded the physiologic load estimated in 110% of the living weight. We concluded that over-saturated salt solution may reduce cortical bone antigenicity; the chemical treatment is an effective sterilization method of cortical bone; and the bone plates as a joint stabilization method supports compressive forces applied on tibial tuberosity after its advancement.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-11-17T13:56:21Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2138386 bytes, checksum: 3aebcacc72eafc8089742b514c82fa88 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-17T13:56:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2138386 bytes, checksum: 3aebcacc72eafc8089742b514c82fa88 (MD5) Previous issue date: 2015-07-31 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As lesões ou perdas de tecido ósseo são condições que afetam diretamente a qualidade de vida dos seres humanos e animais. Os processos de reparação podem não ocorrer de maneira eficiente quando existirem condições clínicas desfavoráveis. Alguns compósitos, polímeros e proteínas são utilizados na formação de matrizes por promover maior eficiência nesse processo reparador. Entretanto, os biomateriais utilizados hoje no tratamento dessas afecções ainda apresentam algumas propriedades que devem ser adequadas ao uso do mesmo. Assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial reparador do compósito constituído de hidroxiapatita (HAP) e fibroína da seda (FS) na presença de ácido hialurônico (AH) em diferentes concentrações, utilizado para o tratamento de defeitos ósseos experimentais realizados na ulna de coelhos. Primeiramente, foram realizadas análises de difração de raios-X e microscopia eletrônica de varredura com o objetivo de caracterizar a topografia de superfície, porosidade e grau de cristalinidade de cada compósito. Posteriormente, foram realizados testesin vivode biocompatibilidade e biodegradabilidade do compósito. Para tal, foram utilizados três coelhos que receberam, cada um, quatro implantes no subcutâneo de um mesmo compósito. O coelho numero 1 recebeu quatro implantes referentes ao compósito 1 (HAP+FS). O coelho numero 2 recebeu quatro implantes referentes ao compósito 2 (HAP+FS+1%AH). E por fim, o coelho número 3 recebeu quatro implantes referentes ao compósito 3 (HAP+FS+3%AH). Uma amostra de cada animal foi coletada em cada um dos dias 15, 30, 60 e 90 dias, após a cirurgia e processadas para avaliação histológica.Por fim, avaliou-se também a capacidade de osteocondução e osseointegração através da implantação dos compósitos 1, 2 e 3 em um defeito previamente criado no olecrano dos animais. As cirurgias de implantação no olecranoforam realizadas após divisão dos grupos experimentais, contendo 10 animais cada, em grupo tratado e controle, sendo o grupo controle não recebendo nenhum tipo de tratamento.As avaliações clínicas foram realizadas durante os sete dias e depois aos 30 dias de pós-operatório. Radiografias dos membros operados foram realizadas no pós-operatório imediato, após sete e 30 dias de tratamento.Atomografia microcomputadorizada e as análises histológicasforam realizadas coletando-se as amostras aos sete e 30 dias de implantação do compósito no tecido ósseoe a microscopia eletrônica de varredura somente após 30 dias de implantação. Os resultados das análises de difração de raios-X revelaram três compósitos de alta cristalinidade, e as imagens de microscopia eletrônica de varredura demonstraram que o compósito HAP+FS+3%AH possuía uma topografia mais complexa e porosa, em relação aos outros dois compósitos HAP+FS e HAP+FS+1% AH, demonstrando ser uma superfície ideal para a adesão e proliferação celular. Ao teste de biocompatibilidade, os três compósitos apresentaram integração com o tecido, com proliferação tecidual, fragmentação do compósito e, ao final da avaliação, observou-se a formação de um tecido fibroso organizado ao redor do biomaterial. As avaliações clínicas demonstraram um compósito biocompatível e tolerado pelos animais, e as radiografias dos grupos tratados demonstraram diminuição da radiopacidade óssea, tornando-se semelhante ao osso adjacente aos 30 dias de pós-operatório. A tomografia microcomputadorizada demonstrou, através de imagens tridimensionais, uma perda maior na regularidade da borda do defeito no grupo tratado com HAP+FS+3%AH em comparação com os outros grupos, sugestivo de crescimento de tecido ósseo e demonstrando ser o melhor compósito para o tratamento do ponto de vista dessa análise. A histopatologia e a microscopia eletrônica de varredura revelaram uma interação compósito e tecido, com a formação de tecido ósseo ao redor do implante e a análise histomorfométrica revelou quantidade maior de trabéculas ósseas jovens no grupo tratado com HAP+FS+3%HA, demonstrando ser o melhor tratamento utilizado neste estudo para os defeitos criados nos olecranos de coelhos. / The lesions or bone loss are conditions that directly affect the quality of life of humans and animals. The repair process may not occur efficiently when there are unfavorable conditions. Some composites, polymers, and proteins are used to form matrices to promote higher efficiency in this repairing process. However, the biomaterials used today in the treatment of these diseases still have some properties so that these biomaterials could suitable for use. The objective of this work was to evaluate the reparative potential of the composite consisting of hydroxyapatite (HAP) and fibroin silk (FS) in the presence of hyaluronic acid (HA) in different concentrations used for the treatment of experimental bone defects made in the rabbits ulna. First, diffraction of X-rays and scanning electron microscopy analyzes were performed in order to characterize the surface topography, porosity and degree of crystallinity of each composite. Later, in vivo biocompatibility and biodegradability of the composite tests were performed. To this end, three rabbits were used who received each four implants into the subcutaneous tissue of the same composite. The number one rabbit received four implants for the composite 1 (HAP + FS). The number 2 rabbit received four implants for the composite 2 (HAP + FS + 1% AH). Finally, the rabbit number 3 received four implants for the composite 3 (HAP + FS + 3% AH). A sample of each animal was collected in each of days 15, 30, 60 and 90 days after surgery and processed for histological evaluation. Finally, we assessed whether her ability to osteoconductive and osseointegration through the deployment of composite 1, 2 and 3 in a defect previously created in the olecranon animals. The implementation of the olecranon surgeries were performed after division of experimental groups of 10 animals each, in treated and control group, and the control group not receiving any kind of treatment. Clinical evaluations were performed 7 days and then at 30 days postoperatively. X-rays of operated limbs were performed in the immediate postoperative period, after 7 and 30 days of treatment. The microcomputadorizada tomography and histological analyzes were performed by collecting samples at seven and 30 days of composite implantation into bone tissue and scanning electron microscopy only after 30 days of implantation. The results of the analysis of diffraction X-rays revealed three composite of high crystallinity, and scanning electron microscopy pictures show that the composite HAP + FS + 3% HA had a more complex porous topography another two composites HAP + FS e HAP+FS+ 1% AH, proving to be an ideal surface for cell adhesion and proliferation. When biocompatibility test, the three composites showed integration with the tissue with tissue proliferation, composite fragmentation and at the end of the evaluation was observed the formation of an organized fibrous tissue around the biomaterial. Clinical evaluations demonstrated a biocompatible composite tolerated by the animals, and radiographs of the treated groups showed decreased bone radiopacity, making it similar to the adjacent bone at 30 days postoperatively. The microcomputadorizada tomography demonstrated by means of three-dimensional images, a greater loss in the defect edge regulariy in the group treated with HAP + FS + 3% HA in comparison with other groups, suggestive of bone growth and demonstrated to be the best composite to treating point of view this analysis. Histopathology and scanning electron microscopy revealed a compositeand tissue interaction with the formation of bone tissue around the implant and histomorphometric analysis revealed a greater number of young trabecular bone in the group treated with PAH + FS + 3% HA, proving to be the best treatment used in this study for defects created in rabbits ulna.