Orientador: Prof. Dr. Daniel Carneiro Carrettiero / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2014. / As inclusões de Tau fosforilada são o principal marcador das doenças neurodegenerativas classificadas como taupatias, sendo a doença de Alzheimer (DA) a forma mais prevalente. A presença de ubiquitina nas inclusões de Tau é uma evidência para um defeito em sua degradação, pois proteínas ubiquitinadas são prontamente degradadas pelo proteassoma. A proteína BAG2 é um co-chaperona conhecida por ter como alvo a degradação da Tau por uma via mais eficiente que a via dependente da ubiquitina. Sabendo que a redução da temperatura leva a fosforilação de Tau, o presente estudo investiga se a co-chaperona BAG2, em condição de hipotermia, tem participação no aumento da Tau fosforilada. Utilizando a linhagem de células SH-SY5Y não diferenciadas e diferenciadas (expressão do gene MAP2 como controle) como um modelo, nós demonstramos o efeito da redução de temperatura, de 37°C a 34°C, sobre a expressão do mRNA BAG2 via PCR em tempo real. Para confirmar o efeito de BAG2 na degradação de Tau fosforilada (pTau), foram avaliados os níveis de Tau fosforilada através de Western blot. Ao comparar a expressão de BAG2 entre células indiferenciadas e diferenciadas, verificamos uma redução da expressão de BAG2 mRNA, sugerindo que BAG2 tem sua expressão suprimida na diferenciação. A redução de temperatura causou uma redução significativa da expressão de BAG2 em células não diferenciadas, enquanto em células diferenciadas não demonstrou nenhuma diferença. Este resultado sugere a existência de um limiar de expressão de BAG2. Tal como esperado, a redução de temperatura em células não diferenciadas, que mostraram a maior inibição de BAG2, causou um aumento significativo na fosforilação de Tau. Da mesma forma, nenhum efeito sobre células diferenciadas foi visto ao reduzir a temperatura, pois não haviam demonstrado diminuição significativa na expressão BAG2. Curiosamente, embora BAG2 seja sempre reduzida em células diferenciadas em relação a não diferenciadas, independentemente da temperatura, a 37°C não existe nenhuma diferença nos níveis de pTau entre as células indiferenciadas e diferenciadas. Além disso, a diminuição dos níveis de pTau entre as células não diferenciadas e diferenciadas em 34°C sugere que a fosforilação da Tau é regulada de modo diferente em células diferenciadas, de forma que pode ser desvinculada expressão de BAG2. Foi observado também em células não diferenciadas que a super expressão de BAG2 submetida a redução de temperatura resgatou o aumento na fosforilação da Tau. Este resultado sugere uma relação direta entre a redução da temperatura, a redução da expressão BAG2 e o aumento nos níveis de proteína Tau fosforilada em células indiferenciadas. Estes dados suportam a hipótese de que as mudanças na temperatura podem conduzir a uma modificação condicional de vias celulares relacionados com a progressão das taupatias. / The presence of inclusions of phosphorylated Tau is a hallmark of many neurodegenerative disorders classified as "tauopathy," of which Alzheimer's disease (AD) is the most prevalent form. The abundance of ubiquitin on Tau inclusions points to a defect in Tau protein clearance since ubiquitinated proteins are promptly degraded by proteasome. The BAG2 protein is a co-chaperone that targets phosphorylated Tau for degradation by a more-efficient ubiquitin-independent pathway. Given that temperature reduction leads to Tau hyperphosphorylation, the present study investigates if the co-chaperone BAG2 participates in the cold-induced up-regulation of phosphorylated Tau. Using undifferentiated and differentiated MAP2-expressing SH-SY5Y cells as a model, we demonstrated the effects of temperature reduction, from 37°C to 34°C, on BAG2 mRNA expression via realtime PCR. To confirm an effect of BAG2 at the protein level, we tested levels of phosphorylated Tau via Western blot. When comparing BAG2 expression between differentiated cells and undifferentiated cells, a decrease in BAG2 mRNA suggests that BAG2 is downregulated on differentiation. Cold treatment of undifferentiated cells caused a significant decrease in BAG2 expression, while cold treatment of differentiated cells did not yield a significant decrease. This result suggests that inhibition of BAG2 expression via either of these mechanisms approaches a limiting threshold. As expected, cold treatment of undifferentiated cells, which showed the greatest inhibition of BAG2, caused a significant increase in phosphorylated Tau protein. Similarly, no effect on Tau phosphorylation was seen on cold treatment of differentiated cells, which had shown no significant decrease in BAG2 expression. Interestingly, although BAG2 is always reduced in differentiated cells relative to undifferentiated, irrespective of temperature, at 37°C there is no difference in pTau levels between undifferentiated and differentiated cells. Further, a decrease in pTau levels between undifferentiated and differentiated cells at 34°C suggests that Tau phosphorylation is differently regulated in differentiated cells, in a manner that may be uncoupled to BAG2 expression. Next, we overexpressed BAG2 in undifferentiated cells that were next subjected to cold treatment, and observed that BAG2 overexpression was able to rescue the increase in Tau phosphorylation that accompanied the temperature-dependent decrease in BAG2. This result suggests a direct link between temperature-dependent inhibition of BAG2 expression and an increase in levels of phosphorylated Tau protein in undifferentiated cells. These data support the hypothesis that changes in temperature can lead to a conditional modification of cellular pathways related to tauopathies progression.

Orientadora: Profa. Dra.Maria Camila Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2014. / Diante da influência da temperatura sobre processos fisiológicos, fisiopatológicos e psicológicos (comportamentais), o presente estudo visou estudar como a temperatura ambiente (Ta) influencia o comportamento termorregulatório e social de ratos, bem como estudar o envolvimento dos canais sensíveis ao calor, TRPV3, nestes processos. O presente estudo teve como objetivo testar os efeitos da exposição à diferentes temperaturas ambientes (Tas) na interação social e comportamento termorregulatório (grooming e escolha entre duas Tas) em ratos, bem como a influência dos canais termo-TRP sobre estas respostas. Os animais foram expostos a 18, 22, 26, 29 e 32°C, de Ta e foram observados a interação social e o grooming (utilizada como um índice de comportamento de termorregulação). A 32°C, os animais apresentaram um aumento significativo no tempo gasto em grooming, sem diferença nas interações sociais. O tratamento tópico com cânfora, um agonista TRPV3 (receptor calor), a uma Ta de 26ºC levou a um aumento no tempo gasto em grooming e diminuição do tempo gasto em interação social. Nas Tas mais frias (18 e 22°C), a estimulação química do TRPV3 com cânfora produziu respostas semelhantes ao observado a 26ºC de Ta. O grooming induzido pelo calor e pela cânfora foram bloqueados pelo antagonista não seletivo de canais TRPV, vermelho de rutênio (RR). Para excluir a participação de TRPV4 (outro receptor calor) nestas respostas, os animais foram tratados com antagonista seletivo do TRPV4, RN1734, que por sua vez, não afetou os efeitos do calor no grooming e na interação social. A temperatura corporal (Tc) não foi significativamente alterada pela cânfora, mas os animais apresentaram comportamente termorregulatório de preferência por Tas mais frias após tratamento com cânfora. Não houve diferença significativa na temperatura da pele (Tp) entre os diferentes estímulos térmicos (exposição ao calor) e químico (tratamento com cânfora) indicando que o calor e a cânfora induzem comportamento de grooming termorregulatório e procura por frio independentemente de mudanças de temperatura da pele e Tc, mas possivelmente dependente da percepção do estímulo seja ele térmico (calor) ou químico (cânfora). O canal TRPV3 é o principal candidato envolvido na percepção destes estímulos.

Orientador: Prof. Dr. Marcelo Bussotti Reyes / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2014. / A maneira com que humanos e outros animais percebem o tempo é constante alvo de estudos, onde o papel do sistema dopaminérgico na percepção do tempo é frequentemente debatido em estudos farmacológicos. Tarefas comportamentais como o procedimento de pico e a bissecção temporal dominam esta literatura, entretanto, devido à complexidade do tema, é necessário o desenvolvimento e aprimoramento de tarefas que possam explorar outras facetas da percepção temporal. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a influência do sistema dopaminérgico na tarefa Differential Reward of Response Duration (DRRD), ainda pouco explorada, através de injeções intraperitoneais de 1 agonista (apomorfina) e 2 antagonistas (haloperidol e olanzapina) dopaminérgicos com maior seletividade para o receptor D2. O haloperidol já foi amplamente utilizado em outras tarefas, enquanto as demais drogas ainda foram pouco exploradas na literatura de percepção de intervalos de tempo. Os resultados apontaram efeitos de todas as drogas na percepção temporal, onde os picos das curvas de distribuição deslocaram-se para a direita em pelo menos uma dose de todas as drogas. Observa-se, portanto, a influência da dopamina na percepção do tempo, conforme esperado, porém com um efeito pouco intuitivo, com drogas agonistas e antagonistas produzindo efeitos semelhantes. Além destes resultados, durante a etapa de treinamento dos animais, foram feitas alterações no protocolo de treinamento que diminuíram significativamente o número de sessões necessárias para o treinamento dos animais. / The way humans and other animals perceive time is frequently a target of several studies, where the role of the dopaminergic system in the perception of time is constantly debated in pharmacological studies. Peak interval and temporal bisection procedures dominate this literature, however, due to the complexity of this issue, the development and improvement of other tasks that may explore other aspects of time perception is required. The objective of this study was to characterize the influence of the dopaminergic system in the Differential Reward of Response Duration task (DRRD), through intraperitoneal injections of 1 agonist (apomorphine) and 2 antagonists (haloperidol and olanzapine) with higher selectivity for the dopamine D2 receptor. Haloperidol has widely been used in other tasks, while other drugs have still been little explored in the literature of timing. The results showed effects of all drugs on time perception, where the distribution peaks showed a rightward shift at least one dose of all drugs. It is observed, therefore, the influence of dopamine in the perception of time as expected, but in a counterintuitive way, where agonist and antagonist drugs produce similar effects. In addition to these results, changes were made to the training protocol which significantly reduced the number of sessions required for training the animals.

Orientadora: Profa. Dra. Maria Camila Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2014. / A ansiedade é uma emoção normal em circunstâncias de ameaça e é considerada uma reação de sobrevivência. Entretanto, há casos em que a ansiedade acontece de forma irracional, frente a situações que não estão relacionadas a ameaças concretas, de forma persistente, constituindo uma desordem psiquiátrica. Sabe-se que os organismos vivos estão constantemente expostos a variações da temperatura ambiente e que a temperatura pode influenciar uma série de funções fisiológicas, fisiopatológicas e, além disso, diversos estudos na literatura demonstram que a temperatura pode influenciar estados psicológicos e comportamentos variados. Diante disto, foram investigados comportamentos relacionados à ansiedade após exposição aguda ao frio e ao calor, comportamentos relacionados à ansiedade induzida por estresse de contenção, e avaliada a participação de canais ativados por frio (TRPM8) nessas respostas. Foram utilizados ratos Wistar de oito semanas, expostos a temperatura fria (18ºC), neutra (26ºC) e quente (32ºC), expostos ou não ao estresse de contenção e submetidos ao labirinto em cruz elevado e campo aberto. Em outro grupo experimental foram realizadas manipulações farmacológicas (agonistas) dos canais TRPM8. No labirinto em cruz elevado, os ratos aclimatados ao frio ficaram menos tempo no braço aberto do que animais expostos ao calor, sem alteração da atividade locomotora no campo aberto, evidenciando comportamento ansioso nesse grupo de animais. Entretanto, os ratos submetidos ao estresse de contenção e a estimulação dos canais de frio TRPM8 não produziram alterações comportamentais relacionadas com ansiedade. Nossos dados indicam que temperaturas mais quentes são ansiolíticas, enquanto temperaturas mais frias são ansiogênicas no nosso modelo experimental. / Anxiety is a normal emotion under threatening circumstances and it is considered a survival reaction. In some circumstances, however, occurs unreasonable anxiety, it may be response to stressful situations. It is known that living organisms are constantly exposed to changes in ambient temperature and that the ambient temperature influence different physiological and pathophysiological functions and, moreover, a number of studies in literature demonstrates that the temperature can influence psychological states and behaviors. Hence, the present study aims at investigating the effects of acute exposure to cold and heat on the state of anxiety of rats, restraint stress-induced anxiety, and to assess the involvement of TRP channels thermo- M8 in these responses. We used Wistar rats (8-weeks old), exposed to cold (18ºC), neutral (26ºC) or warmth (32ºC) ambient temperature, submitted or not to restraint-stress. In another experimental group rats were treated with menthol, a cold TRPM8 channel agonist. All animals were evaluated at the elevated plus-maze and open field. At the elevated plus-maze rats acclimated to cold spent less time in the open arm than rats exposed to warmth, without locomotor activity change in the open field, indicating anxiety-related behavior in these animals. Temperature acclimation did not affect restraint stress-induced anxiety. TRPM8 stimulation did not induce behavioral alterations related to anxiety. Our data indicate that warmth temperatures are anxyolitic, while cold temperatures are anxiogenic in our experimental model.

Orientador: Prof. Raphael Yokoingawa de Camargo / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2014. / Nowadays, utilizing co-processors, accelerators and specially GPGPU computation are widely accepted as a new paradigm of High Performance Computing (HPC). However, developing softwares that can utilize available resources still remains a challenging task. In other side, scientist have used legacy CPU-based simulators for decades and many of them are still the main tools in different fields of science. In fact, any activity that can combine the legacy simulators with powerful co-processors devices is in the main interest. In this project, we design and develop a simulation engine, Parallel Neural Network Simulator (PN2S), to communicate with MOOSE simulator (A well-known tools by Neuroscientists) and provide CUDA based execution for simulating realistic neural network models. The simulation engine maps the voltage distribution in neuron¿s body to sets of linear systems and solve them on GPU. To provide usable functionality, we also developed solver for active channels which support Hodgkin-Huxley model of ionic channels. We compared the engine with CPU version for both homogeneous simple models and randomly generated heterogeneous network. The evaluation focused on performance and also covered the accuracy of the simulation. The experimental results, showed that by facilitating PN2S engine, we can significantly increase the performance of a simulation engine, since its execution is quite transparent to the users and major parts of the host simulator.

Orientadora: Profª Drª Paula Ayako Tiba / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2014. / A ayahuasca é um bebida de origem indígena amplamente utilizado em rituais xamânicos, cerimônias de cura e práticas místico-religiosas na América do Sul. Sua preparação é feita, em geral, a partir da decocção de duas plantas nativas da região amazônica, a Banisteriopsis caapi ePsychotria viridis. A N,N-dimetiltriptamina e as beta-carbolinas (tetrahidroharmina, harmina e harmalina) são os principais componentes psicoativos do chá e agem de maneira difusa no Sistema Nervoso Central. Dentre os efeitos da ayahuasca constam relatos de atenuação de comportamentos nocivos como abuso de drogas e conflitos familiares, além de melhora nas relações sociais. Uma das formas de estudar a interação social é determinar a habilidade de identificar expressões emocionais de faces. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a identificação de emoções faciais por usuários de ayahuasca fora do contexto ritualístico, de modo a determinar se seus efeitos psicológicos resultam apenas da ação farmacológica do chá. Para tanto, foram estudados 17 usuários saudáveis experientes no uso da ayahuasca de ambos os sexos. Os voluntários participaram de duas sessões experimentais, antes e cinco horas depois de passarem pela experiência com ayahuasca. Os estímulos (fotografias do conjunto NimStim) foram apresentados na tela de um computador e consistiram de faces que expressam 6 emoções (felicidade, tristeza, medo, nojo, raiva e surpresa) que foram fundidas com expressões neutras com o uso de um programa específico, de modo que foram apresentadas faces com 25%, 50%, 75% e 100% das emoções máximas. Os participantes deveriam indicar qual a emoção de cadaface e quanto da emoção indicada percebiam usando uma escala analógica visual, a fim de que pudéssemos determinar erros na identificação de expressões faciais bem como alterações na intensidade das emoções percebidas. Foram avaliadas por meio de questionário eventuais alterações de humor, que poderiam interferir na identificação de expressões faciais. Foram encontradas diferenças significativas entre as sessões experimentais na acurácia dos voluntários para identificar tristeza, o que pode estar relacionado com a melhora no comportamento social e com a perspectiva otimista que os usuários regulares de ayahuasca relataram em estudos anteriores. / Ayahuasca is an indigenous beverage widely used in shamanic rituals, healing cerimonies and mystical practices in South America. The decoction is prepared using two species of plants, specially Banisteriopsis caapi and Psychotria viridis. The main psychoactive principles are N,Ndimethyltryptamine and beta-carbolines (tetrahydroharmine, harmine and harmaline) and they have a wide range of effects in the Central Nervous System. Among the reported effects of ayahuasca are reduction of harmful behavior such as drug abuse and family conflicts, and also the improvement insocial relations. One way of assessing social interactions is to determine people¿s ability to identify emotional facial expressions. Therefore, the goal of this study was to evaluate the identification of facial emotion expressions in ayahuasca users out of the ritualistic context so as to determine whether the alleged social alterations result from the pharmacological activity of the tea. To this end, 17 experienced and healthy ayahuasca users of both genders were studied. The volunteers took part of two experimental sessions, before and five hours after going through an experience with ayahuasca. The stimuli (pictures of the NimStim set) were presented on a computer screen and consisted of faces expressing the 6 basic emotions (happiness, sadness, fear, disgust, anger and surprise) which were morphed with neutral expressions so as to result in faces showing 25%, 50%, 75% and 100% of the maximum emotion. The participants had to indicate which emotion each face expresses and how much emotion they attribute tothe face using a visual analogue scale. This enabled the determination of errors of emotional identification as well as possible changes in the intensity of the detected emotions. Mood alterations were also determined as they could have interfered with identification of facial expressions. Significantdifferences were observed between the sessions regarding the accuracy of the volunteers to identify sadness, which could be related with the improvement in social behavior and the optimistic perspective that the regular users of ayahuasca reported on previous studies.

Orientadora: Profª Dra Alexandre Hiroaki Kihara / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2014. / No desenvolvimento pós-natal do Sistema Nervoso Central (SNC), a formação do bulbo olfatório ocorre a partir da zona subventricular (ZSV) próxima ao ventrículo lateral, por meio da proliferação e migração dos neurônios formados nestas regiões em idade pós-natal. As atividades das células das ZSV são moduladas pela variação da concentração de cálcio intracelular, que por sua vez é dependente do cálcio externo e de estoques intracelulares deste íon localizados em organelas como o retículo endoplasmático e mitocôndria. Estas organelas expressam receptores de rianodina (RyRs) que controlam a liberação do cálcio para o citosol. O objetivo deste projeto foi verificar a expressão destes receptores e, consequentemente, a participação do cálcio intracelular no desenvolvimento das células da ZSV de ratos da cepa Wistar. Para este fim, primeiramente foi realizada análise da expressão gênica dos RyRs na ZSV de ratos neonatos no dia do nascimento (P0) e animais adultos (P60), além da distribuição proteica dos RyRs em ratos P0; posteriormente, foi realizado o bloqueio in vitro dos RyRs em células da ZSV, extraídas de animais P0, com dantrolene por um período de 4 horas. Após o bloqueio, foram avaliadas possíveis alterações i) na morfologia das células; ii) desenvolvimento de neuritos. Para isto, foram utilizadas técnicas combinadas como imuno-histoquímica, PCR em tempo real, além de avaliações morfológicas. Na parte descritiva, verificamos menor expressão gênica em neonatos em relação aos animais adultos e acumulo proteico das três isoformas de RyRs na ZSV de neonatos, enquanto que o bloqueio das células em meio de cultura inibiu a formação de neuritos assim como as células mantiveram-se com morfologia circular, diferentemente de células controle, que apresentaram morfologia diferencial e maior arborização dendrítica. Assim, podemos concluir que os RyRs participam do processo de desenvolvimento das células da ZSV, as quais migram e formam as circuitarias do bulbo olfatório. / During the development of the central nervous system (CNS), the formation of the olfactory bulb occurs through the proliferation and migration of postnatal differentiated neurons from the subventricular zone (SVZ) close to the lateral ventricle. The activity of SVZ cells is modulated by the variation of intracellular calcium concentration, which in turn depends on external calcium and intracellular stores, localized in organelles such as mitochondria and endoplasmic reticulum. These organelles accumulate ryanodine receptors (RyRs) that control the release of calcium into the cytosol. The aim of this project was to verify the role of these receptors and, consequently, the participation of intracellular calcium in the development of the SVZ cells from Wistar rats. To this end, we first analyzed gene expression of these receptors in neonates animals (P0) and adult animals (P60) and also descriptive analysis related to the protein distribution in the SVZ of neonate animals in the day of birth (P0). Then we performed in vitro blockade of RyRs in SVZ cells, isolated from P0 animals with dantrolene during 4 hours. After the blockade, possible alterations were evaluated i) cell morphology; ii) neurite growth. For this, combined techniques such as immunohistochemistry and real time PCR were used, besides morphological evaluations. We observed gene expression of the three isoforms of RyRs in neonates lower than in adults, and protein accumulation of these proteins in all SVZ from neonates. In vitro blockade of RyRs in primary cell culture from SVZ inhibited the neurite growth, as well as preserved the circular morphology of the treated cells, contrary to the observed in control cells, which showed differentiated shape and increased dendritic branching. Thus, we are able to disclose that RyRs participate in the development of the cells from SVZ, which migrate and participate the olfactory bulb circuitries.

Orientadora: Profa Dra Maria Teresa Carthery-Goulart / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2014. / O Eye-Tracking ou Rastreador Ocular permite analisar e caracterizar comportamento oculomotor durante a leitura, o que permite realizar inferências sobre os processos cognitivos envolvidos nesta habilidade. O presente estudo teve como objetivo avaliar o comportamento oculomotor durante a leitura de pseudopalavras e palavras reais organizadas por diferentes propriedades psicolinguísticas: frequência, extensão e regularidade, verificando sua relação com variáveis sociodemográficas, hábitos de leitura e de escrita e o desempenho em testes neuropsicológicos em vinte e um adultos, com média de idade de 20,9 anos. Todos eram alunos universitários do Bacharelado de Ciência e Tecnologia da UFABC. Os participantes responderam a questionários para caracterização sociodemográfica e dos hábitos de leitura e de escrita e realizaram testes de fluência verbal e de memória operacional. A tarefa de leitura incluiu palavras e pseudopalavras apresentadas em listas. Foram estudados a duração da primeira fixação, da fixação total, das re-fixações intra-palavras e o número de visitas à palavra. As durações das fixações foram significativamente menores (p <0.05) para palavras em relação às pseudopalavras (efeito de lexicalidade) e para palavras frequentes, curtas e irregulares. Além disso, foram encontradas interações significativas entre o desempenho na fluência verbal e a duração da primeira fixação e das re-fixações à palavra e entre a dominância motora, o gênero e o comportamento oculomotor na leitura de palavras irregulares.

Orientador: Prof. Dr. Raphael Yokoingawa de Camargo / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2014.

Orientador: Prof. Dr. Daniel Carneiro Carrettiero / Tese (doutorado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Neurociência e Cognição, 2015. / A doenca de Alzheimer (AD) e a mais diagnosticada de todas as demencias e afeta aproximadamente 12,5% das pessoas com idade superior a 65 anos. A doenca piora progressivamente, causando um alarmante declinio na funcao cognitiva e eventualmente a morte. Duas caracteristicas histopatologicas da doenca sao presenca das placas do peptideo beta-amiloide (AB) e emaranhados neurofibrilares da proteina tau hyperphosphorilada. A hipotese amiloide da AD propoe que o beta-amiloide (AB) induz a fosforilacao da tau, resultando na formacao de agregados toxicos, perda da funcao neuronal e morte neuronal. Curiosamente, em neuronios nao-diferenciados AB e neuroprotetora em vez de neurotoxica. Em neuronios diferenciados, a neurotoxicidade de AB e dependente da expressao da proteina tau. A co-chaperona BAG2 foi identificada como capaz de estimular a degradacao da proteina tau fosforilada, sugerindo que pode reverter a eventual agregacao de tau hiperfosforilada citotoxica. A relevancia da BAG2 nos processos neurotoxicos induzidos pela AB, dentro de um contexto de maturac.o neuronal, nao foi anteriormente pesquisada e representa uma interessante hipotese no quanto possa ajudar a elucidar os mecanismos celular-moleculares responsaveis pela patologia da doenca de Alzheimer. O objetivo deste estudo foi caracterizar a funcao e regulacao de BAG2 no contexto da morte celular induzida por AB em neuronios nao-diferenciados e diferenciados. A expressao de BAG2 em celulas SH-SY5Y foi analisada sob condicoes de nao-diferenciacao e diferenciacao. O BAG2 foi superexpressada em celulas SH-SY5Y nao-diferenciadas, que foram depois tratadas 15 com o peptido AB. A morte celular foi avaliada por exclusao de azul de tripano. A regiao do promotor de BAG2 foi analisada para avaliar a frequencia e distribuicao de sitios-alvo de varios fatores de transcricao para identificar fatores que regulam a expressao do BAG2. Os niveis de expressao de BAG2 foram determinados utilizando RT-PCR. Nos mostramos que a expressao de BAG2 aumenta com a diferenciacao das celulas SH-SY5Y. AB e neurotrofico para as celulas SH-SY5Y nao-diferenciadas, porem e neurotoxica de celulas diferenciadas. A superexpressao da co-chaperona BAG2 foi suficiente para causar uma mudanca na sinalizacao de AB de neurotrofico para neurotoxico em celulas nao-diferenciadas. A superexpressao de BAG2, na ausencia de AB, nao teve efeito na morte celular ou no grau de diferenciacao em celulas SH-SY5Y nao-diferenciadas. Em seguida analisamos a regiao do promotor de BAG2 e descobrimos uma prevalencia de sitios do NF .kB, os quais co-localizavam com o sitio de iniciacao da transcricao do BAG2. O tratamento das celulas, tanto com ativadores e inibidor do NF-kB, revelou que o BAG2 e reprimido pela atividade do NF- kB. Em conjunto, estes dados sugerem que a ausencia de BAG2 em celulas nao-diferenciadas e suficiente para lhes conferir resistencia a morte induzida por AB. Assim, sugerimos que a inducao da expressao de BAG2 atraves da interrupcao ou alteracao de sinalizacao de NF-kB pode criar um ambiente celular em neuronios maduros que e sensivel, em vez de resistente, a morte celular induzida por AB. / Alzheimer¿s disease (AD) remains the most-diagnosed of all dementias, affecting approximately 12.5% of persons over 65 years of age. The disease progressively worsens causing an alarming decline in cognitive function, often culminating in death. Two histopathological hallmarks of Alzheimer¿s disease are beta-amyloid (AB) peptide plaques and neurofibrillary tangles of hyperphosphorylated tau protein. According to the amyloid hypothesis of AD, AB induces tau phosphorylation which results in the formation of toxic protein aggregates, loss of neuron function, and neuronal death. Interestingly, AB has been shown to be neurotrophic rather than neurotoxic to neural precursors in animal and cell culture models, and the neurotoxicity of AB in differentiated neurons has been found to be dependent upon tau protein expression. The co-chaperone BAG2 has recently been shown to stimulate the degradation of accumulated phosphorylated tau protein, suggesting that it may abrogate aggregation of tau into cytotoxic neurofibrillary tangles. The relevance of BAG2 to AB-induced neurotoxicity within the context of neuron maturation is not presently understood, and may help to further elucidate the cell-molecular mechanisms responsible for Alzheimer¿s disease pathology. The aim of this study was to characterize the function and regulation of BAG2 within AB-induced cell death in undifferentiated and differentiated neurons. BAG2 expression in SH-SY5Y cells was analyzed under undifferentiated and differentiated conditions. BAG2 was overexpressed in undifferentiated SH-SY5Y cells, which were then treated with AB peptide. 13 Cell death was evaluated by Trypan blue exclusion. The BAG2 promoter region was analyzed for the frequency and distribution of various transcription factor regulatory motifs to identify BAG2-regulating factors. BAG2 expression levels were determined using RT-PCR. We show that BAG2 expression increases on differentiation of SH-SY5Y cells. AB is neurotrophic to undifferentiated SH-SY5Y cells, while it is neurotoxic to differentiated cells. Overexpression of the co-chaperone BAG2 was sufficient to cause a switch in AB signaling from neurotrophic to neurotoxic in undifferentiated cells. BAG2 overexpression, in the absence of AB, had no effect on cell death or degree of differentiation in undifferentiated SH-SY5Y cells. We next analyzed to putative BAG2 promoter region and discovered a preponderance of NF-kB binding motifs that co-localized to the BAG2 transcription start site. Treatment of cells with NF-kB activators and inhibitor reagents revealed that BAG2 is repressed by NF-kB signaling. Together, these data suggest that the absence of BAG2 in undifferentiated cells is sufficient to render them refractive to AB-induced death. We thus suggest that the expression of BAG2 expression via the disruption or modification of NF-kB signaling may create a cellular environment in mature neurons that is sensitive rather than resistant to AB-induced cell death.