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Identificação de um peptideo antifúngico em sementes de Passiflora alata Curtis com similaridade à albumina 2S

Ribeiro, Suzana Meira 12 June 2010 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-20T12:27:34Z No. of bitstreams: 1 suzanameiraribeiro.pdf: 1332777 bytes, checksum: b4c35efe19a33f78ca2cec41c685e844 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-26T20:24:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 suzanameiraribeiro.pdf: 1332777 bytes, checksum: b4c35efe19a33f78ca2cec41c685e844 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-26T20:24:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 suzanameiraribeiro.pdf: 1332777 bytes, checksum: b4c35efe19a33f78ca2cec41c685e844 (MD5) Previous issue date: 2010-06-12 / Doenças causadas por patógenos, incluindo bactérias e fungos podem gerar muitos problemas à saúde humana e à agricultura. Em cultivares economicamente importantes, tais patógenos podem contribuir para perdas significativas no rendimento da produção agrícola. Um fator agravante para esses dois cenários é o uso intensivo de compostos convencionais para combater esses patógenos, levando à seleção de microrganismos extremamente resistentes. Além disso, tais compostos podem trazer severas conseqüências ao meio ambiente bem como à saúde humana e animal. Desta forma, a busca por novos compostos capazes de controlar efetivamente bactérias e fungos patogênicos resistentes, têm sido prioritária. Por estas razões, este trabalho reporta o isolamento de uma nova proteína heterodimérica (Pa-AFP1) de sementes de Passiflora alata com propriedades antifúngicas. Pa-AFP1 foi purificada utilizando precipitação com sulfato de amônio 70-100%, subseqüente cromatografia de troca aniônica em Q-Sepharose e cromatografia de HPLC fase reversa em coluna C4. Análise da massa molecular por meio de gel Tricina-SDS-PAGE revelou uma massa molecular de aproximadamente 4.500 Da para a cadeia menor e cerca de 7.000 Da para cadeia maior totalizando um heterodímero com cerca de 11.500 Da. A massa da forma oligomérica também foi obtida por espectrometria de massa (11569. 63 Da). Análise da seqüência N-terminal mostrou alta identidade entre Pa-AFP1 e albuminas 2S, adicionando assim uma nova proteína à pequena lista de albuminas 2S com atividade antimicrobiana. Além disso, Pa-AFP1 foi capaz de inibir eficientemente o fungo filamentoso Colletotrichum gloeosporiodes, mas foi incapaz de inibir bactérias e fungos leveduriformes. Em suma, Pa-AFP1 poderá futuramente contribuir para o desenvolvimento de produtos biotecnológicos contra fungos fitopatogênicos. / Diseases caused by pathogens, including bacteria and fungi can generate many problems to human health and agriculture. In important economically cultivars, such pathogens may contribute to significant losses in yield of agricultural production. The aggravating factor for these two scenarios is the intensive use of conventional compounds to combat these pathogens, leading to selection of highly resistant microorganisms. Furthermore, these compounds can bring severe consequences to the environment, human and animal health. Thus the search for new compounds capable of effectively controlling bacteria and fungi resistant has been a priority. In this report a heterodimeric antifungal protein named Pa-AFP1, showing higher identity with the 2S albumin family, was purified by using 70-100% ammonium sulfate saturation and further purification steps such as anionic exchange Q-Sepharose chromatography associated with HPLC reversed-phase C4 chromatography. Analysis by Tricine-SDS-PAGE revealed two peptide molecular masses of approximately 4,500 Da and 7,000 Da, in the presence of β-mercapthoetanol, while by removing the reducing agent, a single protein with molecular mass of about 11,500 Da was obtained. Moreover, dimeric mass was confirmed by MALDI-TOF analyses (11,569.76 Da). The antifungal protein, named Pa-AFP1, efficiently inhibited the growth of filamentous fungi Colletotrichum gloeosporiodes, and was added to a short list of 2S albumins with antimicrobial properties. Otherwise, this same peptide showed no activity toward bacteria and yeasts. In summary, this compound could be used in the future to develop biotechnological products for the control of phytopathogenic fungi.
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Eficiência de diferentes produtos fungicidas no controle da antracnose em manga / Efficiency of different fungicides to control anthracnosis in mangos

Silva, George Fagner da 13 April 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GEORGE FAGNER.pdf: 234473 bytes, checksum: 5420749a8c2e87f6e7ab26164467f3ca (MD5) Previous issue date: 2008-04-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Anthracnosis is a serious disease that limits the production of healthy and marketable mangos (Mangifera indica). Due to the serious nature of this disease, a study was undertaken to test the efficacy of azoxystrobin as compared to different fungicides commonly utilized for the control of this disease, in two experiments. Each experiment consisted of ten treatments with four replicates. The plots were consisted of three plants of cv. Tommy Atkins. The products tested were azoxystrobin + difenoconazole WG (200; 300; 400 e 600 mL ha-1p.c.); azoxystrobin (120 mL ha-1p.c.); chlorothalonil WP (1500 e 2000 mL ha-1p.c.); difenoconazole (300 e 500 mL ha-1p.c.), and an unsprayed control. A total of four applications were performed at 15 days intervals, the first one performed at panicle plain flux. 40 days after the last application were collected 25 fruits for plot. The same ones were conditioned in cardboard boxes and stored at ambient temperature during 15 days, when the evaluated of anthracnosis incidence was accomplished. In the first experiment, the with azoxystrobin in its composition didn t differ between then. In the second experiment, the treatments with fungicides were similars, althought these had differed from the unsprayed control. The analysis of regression pointed azoxystrobin + difenoconazole 600 mL ha-1p.c. as the most efficient in the control of anthracnosis in both experiments / A antracnose da mangueira (Mangifera indica), causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides, é um dos fatores limitantes à produção de frutos sadios e comercializáveis. Conhecendo-se o problema e consciente das perdas resultantes do ataque do fungo na cultura, avaliou-se a eficiência de diferentes fungicidas no manejo da antracnose da manga, em dois ensaios. Cada ensaio constou de dez tratamentos, com quatro repetições. Sendo que as unidades experimentais foram constituídas por três plantas de manga da cv. Tommy Atkins. Os produtos utilizados foram Azoxystrobin + difenoconazole SC 200 + 125 (200; 300; 400 e 600 mL.ha-1p.c.) Azoxystrobin GrDa 500 (120 mL.ha-1p.c.); Chlorothalonil SC 720 (1.500 e 2.000 mL.ha-1p.c.); Difenoconazole CE 250 (300 e 500 mL.ha-1p.c.), e uma testemunha absoluta. Foi realizado um total de quatro aplicações com intervalos de 15 dias, sendo estas iniciadas no momento da floração plena da panícula. Aos 40 dias após a última pulverização foram coletados 25 frutos por parcela. Os mesmos foram acondicionados em caixas de papelão e armazenados a temperatura ambiente durante 15 dias, quando foi realizada a avaliação de incidência de antracnose. No primeiro ensaio os tratamentos que apresentaram azoxystrobin na sua composição não diferem entre si, já no segundo ensaio não houve diferença significativa entre os tratamentos com aplicação de fungicidas, tendo estes diferido datestemunha. A análise de regressão apontou Azoxystrobin + difenoconazole na dosagem 600 mL.ha-1p.c. como o mais eficiente no controle da antracnose nos dois ensaios
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Eficiência de diferentes produtos fungicidas no controle da antracnose em manga / Efficiency of different fungicides to control anthracnosis in mangos

Silva, George Fagner da 13 April 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GEORGE FAGNER.pdf: 234473 bytes, checksum: 5420749a8c2e87f6e7ab26164467f3ca (MD5) Previous issue date: 2008-04-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Anthracnosis is a serious disease that limits the production of healthy and marketable mangos (Mangifera indica). Due to the serious nature of this disease, a study was undertaken to test the efficacy of azoxystrobin as compared to different fungicides commonly utilized for the control of this disease, in two experiments. Each experiment consisted of ten treatments with four replicates. The plots were consisted of three plants of cv. Tommy Atkins. The products tested were azoxystrobin + difenoconazole WG (200; 300; 400 e 600 mL ha-1p.c.); azoxystrobin (120 mL ha-1p.c.); chlorothalonil WP (1500 e 2000 mL ha-1p.c.); difenoconazole (300 e 500 mL ha-1p.c.), and an unsprayed control. A total of four applications were performed at 15 days intervals, the first one performed at panicle plain flux. 40 days after the last application were collected 25 fruits for plot. The same ones were conditioned in cardboard boxes and stored at ambient temperature during 15 days, when the evaluated of anthracnosis incidence was accomplished. In the first experiment, the with azoxystrobin in its composition didn t differ between then. In the second experiment, the treatments with fungicides were similars, althought these had differed from the unsprayed control. The analysis of regression pointed azoxystrobin + difenoconazole 600 mL ha-1p.c. as the most efficient in the control of anthracnosis in both experiments / A antracnose da mangueira (Mangifera indica), causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides, é um dos fatores limitantes à produção de frutos sadios e comercializáveis. Conhecendo-se o problema e consciente das perdas resultantes do ataque do fungo na cultura, avaliou-se a eficiência de diferentes fungicidas no manejo da antracnose da manga, em dois ensaios. Cada ensaio constou de dez tratamentos, com quatro repetições. Sendo que as unidades experimentais foram constituídas por três plantas de manga da cv. Tommy Atkins. Os produtos utilizados foram Azoxystrobin + difenoconazole SC 200 + 125 (200; 300; 400 e 600 mL.ha-1p.c.) Azoxystrobin GrDa 500 (120 mL.ha-1p.c.); Chlorothalonil SC 720 (1.500 e 2.000 mL.ha-1p.c.); Difenoconazole CE 250 (300 e 500 mL.ha-1p.c.), e uma testemunha absoluta. Foi realizado um total de quatro aplicações com intervalos de 15 dias, sendo estas iniciadas no momento da floração plena da panícula. Aos 40 dias após a última pulverização foram coletados 25 frutos por parcela. Os mesmos foram acondicionados em caixas de papelão e armazenados a temperatura ambiente durante 15 dias, quando foi realizada a avaliação de incidência de antracnose. No primeiro ensaio os tratamentos que apresentaram azoxystrobin na sua composição não diferem entre si, já no segundo ensaio não houve diferença significativa entre os tratamentos com aplicação de fungicidas, tendo estes diferido datestemunha. A análise de regressão apontou Azoxystrobin + difenoconazole na dosagem 600 mL.ha-1p.c. como o mais eficiente no controle da antracnose nos dois ensaios

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