Orientador: Maria Aparecida Marin Morales / Coorientador: Carlos Renato Corso / Banca: Daniela Morais Leme / Banca: Dejanira de Franceschi de Angelis / Resumo: As indústrias têxteis têm contribuído para a contaminação dos corpos d'água, por descartar seus efluentes no meio ambiente. Essas indústrias utilizam uma grande diversidade de corantes em seus processos de tingimento, dentre eles, os azocorantes. Estes corantes azóicos, pela sua característica molecular de difícil remoção ou degradação, somado ao seu amplo uso, são considerados altamente detrimentais ao ambiente. O corante Acid Red 114, pertencente a classe dos azocorantes, é o agente químico alvo deste trabalho. Este estudo tem como proposta, investigar a possibilidade de degradação por microrganismos isolados do lodo de uma indústria têxtil e avaliar as toxicidades do corante Acid Red 114 e dos subprodutos gerados na sua biodegradação. Para avaliação da toxicidade deste corante, foram considerados os parâmetros de genotoxicidade e mutagenicidade. Para análise da genotoxicidade, foram utilizados o ensaio do cometa em cultura de hepatoma humano (HepG2). Para avaliar o potencial mutagênico, foram realizados os testes do micronúcleo (MN) em cultura de células HepG2 e o teste de Salmonella/microssoma. A comprovação da biodegradação foi feita por meio do método físico-químico de Espetrofotometria UV-Vis e FTIR. De acordo com os resultados obtidos, o corante Acid Red 114 mostrou-se genotóxico e também mutagênico para as células HepG2, mas não mutagênico para Salmonella typhimurium. O biodegradado gerado pelas bactérias Enterococcus faecalis e Alcaligenes faecalis foi genotóxico e mutagênico para a cultura celular HepG2, mas não foi mutagênico no teste com Salmonella/microssoma. O biodegradado gerado pela bactéria Achromobacter nitridificans apresentou, em células HepG2, potencial genotóxico, mas não foi mutagênico para HepG2 nem para o teste de Salmonella/microssoma. Estes resultados de toxicidade mostraram que o uso deste corante requer bastante cautela, pois ele pode ter ação adversa nos... / Abstract: Textile industries have contributed to the contamination of water bodies by disposing their effluents into the environment. These industries use a wide variety of dyes in dyeing processes, among them, the azo dyes. These azo dyes due to their molecular characteristics of difficult removal or degradation and their extensive use, are considered highly detrimental to the environment. The dye Acid Red 114, is included in the class of azo dyes, and it is the chemical agent target of this study. This study is proposed to investigate the possibility of degradation by microorganisms isolated from the sludge of a textile industry and evaluate the toxicity of the Acid Red 114 dye and by-products generated in its biodegradation. To evaluate the toxicity of this dye parameters of genotoxicity and mutagenicity were considered. For the genotoxicity analysis, the comet assay in cultured human hepatoma (HepG2) was used. To evaluate the mutagenic potential, the micronucleus test (MN) in HepG2 cultured cells and Salmonella/microsome test were performed. Evidence of biodegradation was taken by physicochemical method of spectrophotometry UV-Vis and FTIR. According to the results, the Acid Red 114 dye showed to be genotoxic and mutagenic to HepG2 cells but not mutagenic to Salmonella typhimurium. The biodegraded generated by the bacteria Enterococcus faecalis and Alcaligenes faecalis was genotoxic and mutagenic to HepG2 cells, but not mutagenic to Salmonella/microsome test. The biodegraded generated by the bacterium Achromobacter nitridificans showed in HepG2 cells, genotoxic potential, but was not mutagenic to HepG2 or Salmonella/microsome test. These toxicity results showed that the use of this dye requires great caution, as it can have adverse action in living beings, including humans, either by direct contact to the dye (e.g. occupational via or use of confectioned products) or by the inadequate treatment of textile effluents or water treatments that use... / Mestre

Orientador: Carmem Silvia Fontanetti Christofoletti / Banca: Paula Suares Rocha / Banca: Sarah Arana / Banca: Elaine Cristina Mathias da Silva Zacarin / Banca: Thaisa Cristina Roat / Resumo: A aplicação indiscriminada de agrotóxicos constitui uma das maiores preocupações na atualidade, sendo o Brasil um dos países que mais uso faz destes produtos. O imidacloprido (IMI) é um dos inseticidas mais utilizados no mundo, principalmente nas culturas de cana-de-açúcar, citros, algodão e café. Apesar de seus benefícios, pode apresentar potencial tóxico e genotóxico em organismos não alvo. O uso de bioindicadores permite o estudo dos possíveis riscos destas substâncias nos organismos. Entre estes, plantas superiores e organismos aquáticos são considerados excelentes para avaliar efeitos de agrotóxicos no ambiente. Neste estudo, foram avaliados os efeitos de IMI em organismos não alvos (Allium cepa, Tradescantia pallida e Oreochromis niloticus) expostos a diferentes concentrações, baseadas na aplicação deste inseticida na cultura de cana-de-açúcar, por meio de ensaios celulares e moleculares. Foram testadas concentrações equivalentes à dose do produto recomendada para esta cultura (400 g/ha), a metade (200 g/ha) para simulação da diluição natural e o dobro (800 g/ha) para simulação do uso indiscriminado. O teste de aberrações cromossômicas e de micronúcleos (MN) em A. cepa e T. pallida foram utilizados para avaliar a toxicidade e genotoxicidade. Ensaio do cometa e teste do MN em eritrócitos de O. niloticus, avaliaram danos em nível primário e cromossômico. Análise das alterações histopatológicas no fígado de O. niloticus e localização in situ das proteínas de choque térmico... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The indiscriminate application of pesticides is a major concern nowadays, and Brazil is one of the countries which use these products heavily on agriculture. The imidacloprid (IMI) is an insecticide sold worldwide, being widely used on sugar cane, citrus, cotton and coffee crops. Despite its benefits, IMI may have potential for inducing genetic changes in non-target organisms. In this sense, the use of bioindicators like higher plants and fishes allow the assessment of possible effects and risks to the environment derived from the use of this insecticide in agriculture. In this study, we evaluated the effects of IMI on non-target organisms (Allium cepa, Tradescantia pallida and Oreochromis niloticus) exposed to different concentrations, based on the application of this insecticide in the sugarcane culture, through cellular and molecular assays. A concentration equivalent to the recommended dose of the product for this culture (400 g/ha), the half (200 g/ha) for simulation of natural dilution and double (800 g/ha) that simulates the indiscriminate use. Chromosomal aberrations and micronucleus test (MN) in A. cepa and T. pallida were analyzed for toxicity and genotoxicity study. Comet assay and MN test in O. niloticus erythrocytes assess damage to primary and chromosomal level. Analysis of histopathological changes in the O. niloticus liver and in situ localization of heat shock protein (HSP70) were analyzed by light microscopy and immunohistochemistry, respectively, were perfo... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Aparecida Marin-Morales / Banca: Silvia Tamie Matsumoto / Banca: Maria Izabel Souza Camargo / Banca: Grasiela de C. S. Aguiar / Banca: Mario Sergio Palma / Resumo: A exposição do homem às substâncias danosas, sejam estas substâncias de origem natural ou sintética, vem crescendo durante as últimas décadas. Esta exposição é capaz de induzir diversos efeitos deletérios nos organismos expostos, provocando diversas doenças e até mesmo a morte. Da mesma forma que aumenta a quantidade de substâncias promotoras de impactos ambientais, também crescem as pesquisas que buscam por novas substâncias que sejam capazes de proteger os organismos destes efeitos deletérios. Esse trabalho tem como objetivo avaliar a atividade citotóxica, genotóxica e antigenotóxica, mutagênica e antimutagênica de venenos de Hymenoptera (especificamente da abelha Apis mellifera e da vespa Polybia paulista), em diferentes concentrações, utilizando para essa avaliação o sistema teste de HepG2. Foi utilizado o ensaio do MTT para se avaliar a citotoxicidade tanto do veneno de A. mellifera como de P. paulista. As concentrações consideradas não citotóxicas (1, 5 e 10μg/mL de veneno de vespa e 0,1, 0,05 e 0,01 μg/mL do veneno de abelha) foram utilizadas para se avaliar o potencial genotóxico (ensaio do cometa) e mutagênico (teste do micronúcleo). Estas concentrações não citotóxicas mostraram-se genotóxicas e mutagênicas para o sistema teste utilizado. Foram utilizadas outras concentrações, mais baixas que as utilizadas nos testes de genotoxicidade e mutagenicidade (1ng/mL, 100pg/mL e 10pg/mL de veneno de vespa e 10pg/mL, 1pg/mL e 0,1pg/mL para o veneno de abelha), para a realização dos testes de antigenotoxicidade e antimutagenicidade com células HepG2. As concentrações utilizadas nesses ensaios mostraram que ambos os venenos, ao invés de inibirem e/ou diminuirem o efeito genotóxico e mutagênico da substância metilmetano sulfonato, aumentaram ainda mais os danos causados por esta substância... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Human exposure to harmful substances, natural or synthetic, is increasing in the last decades. This exposure is able to induce several deleterious effects on the exposed organisms, causing several diseases and even death. As the amount of substances that promote environmental impacts increases, researches seeking for new substances that are able to protect the organisms against these deleterious effects have also increased. This study aimed to evaluate the cytotoxic, genotoxic and antigenotoxic, mutagenic and antimutagenic of Hymenoptera venoms (specifically of the bee Apis mellifera and the wasp Polybia paulista), in different concentrations, using for this evaluation the HepG2 test system. The MTT assay was used to assess the cytotoxicity the venom of A. mellifera and P. paulista. The concentrations considered non cytotoxic (1, 5 and 10μg/mL of the wasp venom and 0.1, 0.05 and 0.01 μg/mL of the bee venom) were used to evaluate the genotoxic (comet assay) and mutagenic potential (micronucleus test). These non cytotoxic concentrations were genotoxic for the test system used. Other concentrations were used, lower than the ones used in the genotoxicity and mutagenicity tests (1ng/mL, 100pg/mL and 10pg/mL of the wasp venom and 10pg/mL, 1pg/mL and 0,1pg/mL for the bee venom), in order to perform the antigenotoxicity and antimutagenicity tests with HepG2 cells. The concentrations used in these assays showed that both venoms, instead of inhibiting and/or decreasing the gentoxic and mutagenic effects of the substance methylmethane sulfonate, increased even more the damages caused by this substance. In order to verify which would be the compound responsible for the effects registered for the venoms, it was also evaluated the effect of phospholipase A2 (PLA2 from A. mellifera)... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Camila Renata Corrêa Camacho / Coorientador: Vania dos Santos Nunes / Banca: Renato Paschoal Prado / Banca: Silvia Papini / Banca: Igor Otavio Minatel / Banca: Erick Prado de Oliveira / Resumo: Não disponível / Abstract: Not available / Doutor

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:18:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoanaCMT.pdf: 30865 bytes, checksum: 27f51c3cbcadb5a4ec7e07d9182ea1aa (MD5) Previous issue date: 2008-03-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / O Tit?nio (Ti) ? atualmente o material mais utilizado para fabrica??o de implantes ortop?dicos e dentais. Altera??es na superf?cie de tit?nio comercial puro (TiCP) podem determinar a reposta funcional das c?lulas, sendo um fator cr?tico para o sucesso do implante. Entretanto, a genotoxicidade de superf?cies de tit?nio tem sido pouco estudada. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial genot?xico de uma nova superf?cie de tit?nio porosa desenvolvida por plasma comparada com uma superf?cie somente polida. Para tanto, foram realizados os ensaios cometa, aberra??es cromoss?micas (CAs) e micron?cleo (MN), utilizando c?lulas CHO-K1 (c?lulas do ov?rio de hamster Chin?s). Nossos resultados revelaram que a superf?cie de tit?nio polida foi capaz de induzir um aumento significativo dos danos no DNA, no n?mero das CAs, na tetraploidia e na freq??ncia de micron?cleos comparada ao controle. A superf?cie tratada por plasma, n?o promoveu efeito genot?xico significativo para todos os ensaios realizados. Estes resultados sugerem que a nova superf?cie de tit?nio tratada por plasma pode ser um material biologicamente seguro para sua utiliza??o em implantes ou futura aplica??o na terapia de regenera??o ?ssea-guiada, ao menos no que se refere ? sua genotoxicidade

Introdução: Toda a exposição à radiação ionizante envolve um benefício e um risco inerente. O tratamento com radioterapia utiliza feixes de alta energia que tem como finalidade destruir o tumor, atingindo também áreas adjacentes e podendo causar dano celular, não visível macroscopicamente. Objetivos: O objetivo principal deste projeto é avaliar o índice de dano em células nucleadas do sangue periférico de pacientes diagnosticadas com câncer de mama em tratamento com radioterapia, através das técnicas de micronúcleo e ensaio cometa. O objetivo específico é avaliar a percepção de risco e coerção de pacientes diagnosticadas com câncer de mama em relação ao seu tratamento com radioterapia. Métodos: A metodologia consiste em dois sub-estudos, um com delineamento longitudinal, do tipo estudo de casos incidentes, composto por pacientes com câncer de mama em tratamento no Serviço de Radioterapia. Foram realizadas quatro coletas de sangue em diferentes momentos para a realização das duas técnicas: (1) antes do início do tratamento, (2) na segunda semana, (3) no final e (4) aproximadamente um mês após o seu término. O segundo sub-estudo, com delineamento transversal, foi realizado no período antes do tratamento radioterápico. As pacientes que foram submetidas à radioterapia foram pareadas com outro grupo de participantes voluntárias que não têm diagnóstico de câncer e nem indicação de radioterapia. Cada sub-estudo foi formado por 18 indivíduos do sexo feminino, totalizando 36 sujeitos de pesquisa. Utilizando-se a técnica de micronúcleo, foram analisadas três tipos de alterações celulares: micronúcleo, buds e pontes nucleoplasmáticas. Durante a segunda coleta de sangue um questionário contendo a percepção de coerção e de risco foi aplicado às pacientes. Resultados: Em relação ao estudo longitudinal houve diferença significativa na alteração nuclear de micronúcleo entre as coletas realizadas antes e após um mês de tratamento com radioterapia. Em relação à alteração nuclear buds não houve diferença significativa e em relação à alteração nuclear pontes nucleoplasmáticas houve diferença significativa, mas não foi possível verificar entre quais momentos da coleta de sangue. Houve diferença significativa na técnica ensaio cometa comparando as coletas realizadas duas semanas após o início da radioterapia e no final da mesma. Em relação ao estudo transversal, os resultados da técnica de micronúcleo mostraram que não há diferença significativa entre as pacientes com câncer e sem câncer. A percepção de coerção obteve um valor médio de 0,79, com desvio padrão de 0,91. Quanto à percepção de risco em relação ao seu tratamento, as pacientes inferiram um risco médio de 5,4% e um desvio padrão de 11,9%. A maioria das pacientes, 84% da amostra, teve uma percepção de risco que não ultrapassou 10%. Conclusão: A radioterapia induziu danos celulares, ou seja, houve efeito biológico causado pelo tratamento com radioterapia evidenciado pela alteração nuclear de micronúcleo. A técnica ensaio cometa evidenciou, que o sistema de reparo foi eficiente, pois, o dano celular induzido na segunda semana de tratamento diminuiu no final do mesmo. Com base na avaliação das percepções de coerção e de risco, em relação à radioterapia, foi possível verificar que: a) A percepção de risco obteve valores baixos, sendo que na maioria da amostra o risco percebido foi igual a zero; b) A baixa percepção de coerção evidencia que as pacientes tiveram liberdade para optar pelo tratamento proposto pela equipe assistencial com reduzida pressão de fatores externos. / Background: Benefits and inherent risks are involved in any exposure to ionizing radiation. Treatment with radiation therapy uses high energy beams that aim to destroy the tumor, affecting also adjacent areas and potentially causing cell damage, in a macroscopic view. Objective: The main objective of this research was to evaluate the damage index in nucleated cells from peripheral blood of breast cancer patients receiving treatment with radiotherapy through the techniques micronucleus and comet assay. The specific objective is to evaluate the risk perception and coercion of patients diagnosed with breast cancer about their treatment with radiotherapy. Methods: The methodology consists of two sub-studies, the first one is a longitudinal study of incident cases, comprising patients with breast cancer undergoing treatment at the Radiotherapy Service. Four blood samples were taken at different times to the achievement of both techniques: (1) before starting treatment, (2) in the second week, (3) at the end and (4) a month after finished the treatment. The second sub-study, with cross-sectional design was carried out before radiotherapy. The patients who underwent radiotherapy were paired with another group of voluntary participants who have no diagnosis of cancer and are not using any radiation. Each sub-study consisted of 18 females, making 36 research subjects. Using the micronucleus assay, we analyzed three types of cellular changes: micronuclei, buds and nucleoplasmatic bridges. During the second blood collection a perception of coercion and risk perception questionnaire was applied to patients. Results: The longitudinal study showed a significant difference in the nuclear micronuclei changes between samples taken before and after a month of radiotherapy. Regarding amendment nuclear buds there was no significant difference and in relation to amendment nuclear nucleoplasmatic bridges there was a significant difference, but it was not possible to verify what time between blood collection. There were significant differences in the comet assay comparing the samples taken two weeks after the start of radiotherapy and at the end of treatment. Regarding the cross-sectional study, the micronucleus assay results showed no significant difference between patients with cancer and without cancer. The perception of coercion obtained an average value of 0.79 with a standard deviation of 0.91. Regarding the risk perception in relation to their treatment, patients inferred an average risk of 5.4% and a standard deviation of 11.9%. Most patients, 84% of the sample had a risk perception that did not exceed 10%. Conclusion: The radiation induced cell damage, there was biological effect caused by radiotherapy and evidenced by changes in nuclear micronuclei. The comet assay showed that the repair system was efficient, because cellular damage in the second week of treatment decreased at the end of it. Based on the assessment of the perceptions of coercion and risk in relation to radiotherapy, we found that: a) risk perception obtained low values, and in most of the sample perceived risk was zero, b) Low perception of coercion shows that the patients were free to choose the treatment proposed by the treatment team with a reduced pressure of external factors.

Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-06-27T14:01:23Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Gabriel Qualhato - 2018.pdf: 4517101 bytes, checksum: 7e23af60d803b2f275d7d9babce3cc73 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-06-28T10:51:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Gabriel Qualhato - 2018.pdf: 4517101 bytes, checksum: 7e23af60d803b2f275d7d9babce3cc73 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-28T10:51:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Gabriel Qualhato - 2018.pdf: 4517101 bytes, checksum: 7e23af60d803b2f275d7d9babce3cc73 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / The environmental risk of nanomaterials (NMs) designed and used in nanoremediation process is of emerging concern, but their ecotoxilogical effects to aquatic organism remains unclear. In this present study, the citrate-coated (maghemite) nanoparticles (IONPs) were synthesized and its genotoxic, mutagenic, the melanomacrophage centers (MMC) response and hepatic histopathological biomarkers were investigated in female guppy. Fish were exposed to IONPs at environmentally relevant iron concentration (0.3 mg L-1) during 21 days and the animals were collected at the beginning of the experiment and after 3, 7, 14 and 21 days of exposure. The genotoxicity and mutagenicity were evaluated in terms of DNA damage (comet assay), micronucleus (MN) test, erythrocyte nuclear abnormalities (ENA) frequency and the liver were dissected and fixed dehydrated through increasing ethanol gradient, immersed in xylene PA, embedded in paraffin, performed of liver sections (5 μm thick) (3 sections per animal) in the microtome, stained by Mallory’s Trichrome and H. E. and analyzed. Results showed differential genotoxic and mutagenic effects of IONPs in the P. reticulata according to exposure time. The IONP induced DNA damage in P. reticulata after acute (3 and 7 days) and long-term exposure (14 and 21 days), while the mutagenic effects were observed only after long-term exposure. The DNA damage and the total ENA frequency increase linearly over the exposure time, indicating a higher induction rate of clastogenic and aneugenic effects in P. reticulata erythrocytes after long-term exposure to IONPs. Guppies exposed to IONPs showed increasing in the number, area and perimeter of MMC when compared to the unexposed ones, especially after 7 days of exposure. The results showed an increase in the frequency of histopathological changes in fish after the 7 days of exposure to IONPs, such micro- and macro-vesicular steatosis, melanomacrophage aggregates, exudate and haemorrhagic foci. The acute (3 and 7 days) and long-term (14 and 21 days) exposure of P. reticulata to IONPs induced high histopathological indexes associated with circulatory disorders and inflammatory responses. Results indicated that blood system and liver tissue of P. reticulata are excellent target organs to studies the ecotoxicity of IONPs. Confirming that P. reticulata is a biomonitor specie indicated for studies of ecotoxicity of IONPs. / O risco ambiental dos nanomateriais projetados e utilizados para nanoremediação se mostram hoje de grande interesse econômico e ambiental, mas seus efeitos ecotóxicológicos para os organismos aquáticos ainda permanecem obscuros. Neste presente estudo, as nanopartículas de oxido de ferro funcionalizadas com citrato (maghemita) (NOFs) foram sintetizadas e seus efeitos genotóxicos, mutagênicos, e histopatológicos foram investigados em fêmeas de Poecilia reticulata. Os peixes foram expostos a maghemita em concentrações de ferro ambientalmente relevantes (0,3 mg.L-1) durante 21 dias e os animais foram coletados no início do experimento e após 3, 7, 14 e 21 dias de exposição. A genotoxicidade e a mutagenicidade foram avaliadas por meio do dano causado ao DNA (Ensaio cometa), o teste do micronúcleo (MN) e anormalidades nucleares de eritrócitos (ANE) avaliaram o potencial mutagênico. Os fígados foram dissecados, fixados, desidratados em etanol, imersos em xilol, embebidos em parafina, e seccionados com 5 μm de espessura, os cortes corados em H.E. e Tricrômico de Mallory foram analisados e obtidos dados histomorfométricos. Os resultados mostraram efeitos genotóxicos e mutagênicos diferenciais das NOFs em P. reticulata de acordo com o tempo de exposição. As NOFs induziram danos ao DNA após exposição aguda (3 e 7 dias) e de longo prazo (14 e 21 dias), enquanto os efeitos mutagênicos foram observados somente para a exposição prolongada. O dano no DNA e a frequência total de ANE aumentaram linearmente ao longo do tempo de exposição, indicando uma maior taxa de indução de efeitos clastogênicos e aneugênicos em eritrócitos de P. reticulata após exposição prolongada a NOFs. Os guppies expostos também mostraram aumento do número, área e perímetro dos MMC quando comparados ao grupo controle, especialmente após 7 dias de exposição. Os resultados mostraram um aumento na frequência de alterações histopatológicas em peixes após os 7 dias de exposição as NOFs, tais como esteatose micro- e macro-vesicular, aumento dos MMC, exsudatos e focos hemorrágicos. A exposição aguda (3 e 7 dias) e a longo prazo (14 e 21 dias) de P. reticulata a NOFs induziu índices histopatológicos elevados associados a distúrbios circulatórios e respostas inflamatórias. Os resultados indicaram que os tecidos sanguíneo e hepático dos guppies são excelentes órgão alvo para estudar a ecotoxicidade das NOFs, confirmando que o P. reticulata é uma espécie biomonitora indicada para estudos sobre a ecotoxicidade das NOFs.

O presente estudo teve por objetivo avaliar o desempenho do Teste do Cometa em confronto com métodos convencionais de avaliação de frescor e qualidade higiênica e sanitária de filés de Tilápia (Oreochromis niloticus - LINNAEUS, 1758) refrigerados, durante a vida útil comercial, correlacionando os seus resultados com aqueles obtidos nas análises físico-químicas, microbiológicas e sensorial. As análises foram realizadas nos dias zero - cinco - nove - 12 - 14 pós-processamento dos filés. Em cada dia de estudo foram processados três filés diferentes, pertencentes ao mesmo lote de produto. O protocolo foi repetido em três momentos diferentes, completando 45 amostras. Nos resultados encontrou-se no dia zero e no quinto dia útil do produto, condições impróprias para consumo com relação aos microrganismos psicrotróficos e mesófilos, respectivamente, e o tipo de cometa predominante foi o tipo 3. Aos nove dias de vida útil dos filés, a média dos parâmetros Trimetilamina, Odor e Intenção de Compra indicavam produto impróprio e no teste do cometa predomina o tipo 5. Aos 12 dias de vida útil dos filés de Tilápia, refrigerados, bases voláteis nitrogenadas totais e textura obtiveram resultados impróprios, enquanto que a aparência se revelou imprópria a partir do 14º dia. Concluiu-se que o teste do cometa se presta para o estudo de vida útil de filés de Tilápia refrigerados e apresentou correlação com os métodos convencionais de avaliação de frescor e qualidade higiênica e sanitária do pescado. A partir do 9º dia de estudo predominavam cometas do tipo 5, indicativos do grau máximo de dano celular e fragmentação de DNA das células, pelo teste do cometa, o que coincidiu com a rejeição da Intenção de Compra na análise sensorial. / The present study aimed to evaluate the performance of the Comet assay in comparison with conventional methods of assessing freshness and hygienic and sanitary quality of chilled Tilapia (Oreochromis niloticus - Linnaeus, 1758) fillets, over the shelf-life, correlating their results with those obtained in the physical-chemical, microbiological and sensory. The analyzes were performed on days zero - 5 - 9 - 12 - 14 post-processing of the fillets. In each study day were processed three different fillets, belonging to the same batch of product. The protocol was repeated at three different times, completing 45 samples. The results showed that at the zero and fifth day of the product, improper conditions for consumption, with respect to psychrotrophic and mesophilic microorganisms, respectively, and the predominant type of comet was the type 3. At nine days of the fillets shelf-life, the average of the parameters trimethylamine, odor and purchase intent indicate improper product, and at the comet assay predominate type 5. At 12 days of the shelf-life of chilled tilapia fillets, total volatile basic nitrogen and texture results obtained improper conditions, while appearance showed improper at the 14th day. It was concluded that the comet assay lends itself to the study of shelf-life of chilled tilapia fillets and correlated with conventional methods of assessing freshness and hygienic and sanitary qualities of fishery. From the 9th day of study, predominated comets type 5, indicative of maximum degree of cell damage and DNA fragmentation of the cells by the comet assay, which coincided with the rejection of Purchase Intent at sensory analysis.

Introdução: Toda a exposição à radiação ionizante envolve um benefício e um risco inerente. O tratamento com radioterapia utiliza feixes de alta energia que tem como finalidade destruir o tumor, atingindo também áreas adjacentes e podendo causar dano celular, não visível macroscopicamente. Objetivos: O objetivo principal deste projeto é avaliar o índice de dano em células nucleadas do sangue periférico de pacientes diagnosticadas com câncer de mama em tratamento com radioterapia, através das técnicas de micronúcleo e ensaio cometa. O objetivo específico é avaliar a percepção de risco e coerção de pacientes diagnosticadas com câncer de mama em relação ao seu tratamento com radioterapia. Métodos: A metodologia consiste em dois sub-estudos, um com delineamento longitudinal, do tipo estudo de casos incidentes, composto por pacientes com câncer de mama em tratamento no Serviço de Radioterapia. Foram realizadas quatro coletas de sangue em diferentes momentos para a realização das duas técnicas: (1) antes do início do tratamento, (2) na segunda semana, (3) no final e (4) aproximadamente um mês após o seu término. O segundo sub-estudo, com delineamento transversal, foi realizado no período antes do tratamento radioterápico. As pacientes que foram submetidas à radioterapia foram pareadas com outro grupo de participantes voluntárias que não têm diagnóstico de câncer e nem indicação de radioterapia. Cada sub-estudo foi formado por 18 indivíduos do sexo feminino, totalizando 36 sujeitos de pesquisa. Utilizando-se a técnica de micronúcleo, foram analisadas três tipos de alterações celulares: micronúcleo, buds e pontes nucleoplasmáticas. Durante a segunda coleta de sangue um questionário contendo a percepção de coerção e de risco foi aplicado às pacientes. Resultados: Em relação ao estudo longitudinal houve diferença significativa na alteração nuclear de micronúcleo entre as coletas realizadas antes e após um mês de tratamento com radioterapia. Em relação à alteração nuclear buds não houve diferença significativa e em relação à alteração nuclear pontes nucleoplasmáticas houve diferença significativa, mas não foi possível verificar entre quais momentos da coleta de sangue. Houve diferença significativa na técnica ensaio cometa comparando as coletas realizadas duas semanas após o início da radioterapia e no final da mesma. Em relação ao estudo transversal, os resultados da técnica de micronúcleo mostraram que não há diferença significativa entre as pacientes com câncer e sem câncer. A percepção de coerção obteve um valor médio de 0,79, com desvio padrão de 0,91. Quanto à percepção de risco em relação ao seu tratamento, as pacientes inferiram um risco médio de 5,4% e um desvio padrão de 11,9%. A maioria das pacientes, 84% da amostra, teve uma percepção de risco que não ultrapassou 10%. Conclusão: A radioterapia induziu danos celulares, ou seja, houve efeito biológico causado pelo tratamento com radioterapia evidenciado pela alteração nuclear de micronúcleo. A técnica ensaio cometa evidenciou, que o sistema de reparo foi eficiente, pois, o dano celular induzido na segunda semana de tratamento diminuiu no final do mesmo. Com base na avaliação das percepções de coerção e de risco, em relação à radioterapia, foi possível verificar que: a) A percepção de risco obteve valores baixos, sendo que na maioria da amostra o risco percebido foi igual a zero; b) A baixa percepção de coerção evidencia que as pacientes tiveram liberdade para optar pelo tratamento proposto pela equipe assistencial com reduzida pressão de fatores externos. / Background: Benefits and inherent risks are involved in any exposure to ionizing radiation. Treatment with radiation therapy uses high energy beams that aim to destroy the tumor, affecting also adjacent areas and potentially causing cell damage, in a macroscopic view. Objective: The main objective of this research was to evaluate the damage index in nucleated cells from peripheral blood of breast cancer patients receiving treatment with radiotherapy through the techniques micronucleus and comet assay. The specific objective is to evaluate the risk perception and coercion of patients diagnosed with breast cancer about their treatment with radiotherapy. Methods: The methodology consists of two sub-studies, the first one is a longitudinal study of incident cases, comprising patients with breast cancer undergoing treatment at the Radiotherapy Service. Four blood samples were taken at different times to the achievement of both techniques: (1) before starting treatment, (2) in the second week, (3) at the end and (4) a month after finished the treatment. The second sub-study, with cross-sectional design was carried out before radiotherapy. The patients who underwent radiotherapy were paired with another group of voluntary participants who have no diagnosis of cancer and are not using any radiation. Each sub-study consisted of 18 females, making 36 research subjects. Using the micronucleus assay, we analyzed three types of cellular changes: micronuclei, buds and nucleoplasmatic bridges. During the second blood collection a perception of coercion and risk perception questionnaire was applied to patients. Results: The longitudinal study showed a significant difference in the nuclear micronuclei changes between samples taken before and after a month of radiotherapy. Regarding amendment nuclear buds there was no significant difference and in relation to amendment nuclear nucleoplasmatic bridges there was a significant difference, but it was not possible to verify what time between blood collection. There were significant differences in the comet assay comparing the samples taken two weeks after the start of radiotherapy and at the end of treatment. Regarding the cross-sectional study, the micronucleus assay results showed no significant difference between patients with cancer and without cancer. The perception of coercion obtained an average value of 0.79 with a standard deviation of 0.91. Regarding the risk perception in relation to their treatment, patients inferred an average risk of 5.4% and a standard deviation of 11.9%. Most patients, 84% of the sample had a risk perception that did not exceed 10%. Conclusion: The radiation induced cell damage, there was biological effect caused by radiotherapy and evidenced by changes in nuclear micronuclei. The comet assay showed that the repair system was efficient, because cellular damage in the second week of treatment decreased at the end of it. Based on the assessment of the perceptions of coercion and risk in relation to radiotherapy, we found that: a) risk perception obtained low values, and in most of the sample perceived risk was zero, b) Low perception of coercion shows that the patients were free to choose the treatment proposed by the treatment team with a reduced pressure of external factors.

A doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) é uma doença inflamatória com participação de macrófagos, neutrófilos e linfócitos CD8, associada a estímulos oxidantes diretamente nas estruturas pulmonares, causada mais comumente pelo tabagismo. Recentemente foi demonstrado que o teste de caminhada dos seis minutos (TC6) é capaz de aumentar a inflamação e gerar o aumento de espécies reativas de oxigênio. O presente estudo teve como objetivo avaliar os níveis de dano e reparo de DNA em portadores de DPOC, quando submetidos ao TC6. Para avaliar o dano de DNA, amostras de sangue periférico foram coletadas antes e imediatamente após o TC6. Para avaliar a capacidade de reparo, foi analisada uma amostra coletada 48 horas após o TC6. Todas as amostras foram processadas pela técnica do cometa. Vinte e sete pacientes portadores de DPOC foram avaliados, sendo 59% homens. A média de idade foi de 64,7 ± 8,4 anos. A média do VEF1 foi de 40,3% ± 18,4% do previsto, com relação média de VEF1/CVF de 52,5% ± 11,9%. Todos fumaram em média 36,7 ± 17,0 anos, uma média de 48,1 ± 37,5 maços/ano. As médias das variáveis obtidas no início e no final do TC6 foram: SpO2 (92,0 ± 4,5 vs. 91,4 ± 4,6), percepção da dispnéia pela escala de BORG (1,2 ± 1,0 vs. 2,4 ± 1,7) e a distância percorrida foi em média de 380,1± 84,4 m. As taxas médias de dano de DNA antes do TC6 (27,9 ± 19,2) e imediatamente após (29,6±29,6) não apresentaram diferenças significativas (p=0,904). A análise realizada 48 horas após o TC6 demonstrou uma redução não significativa deste dano (18,3 ± 13,0, p=0,099). Conclui-se neste estudo que o esforço físico realizado durante o TC6 não provoca aumento imediato nas taxas de dano de DNA, nem estimula os mecanismos de reparo do DNA em portadores de DPOC. / Chronic obstructive pulmonary disease is an inflammatory disease in which macrophages, neutrophils and CD8 T lymphocytes play an important role. It is associated with direct oxidant stimuli of lung structures, which are most frequently triggered by smoking. A recent study showed that the 6-minute walk test (6MWT) increases inflammation and reactive oxygen species. This study evaluated DNA damage and repair in patients with COPD that took the 6MWT. To evaluate DNA damage, peripheral blood samples were collected before and immediately after 6MWT. To evaluate repair, a sample was collected 48 hours after the 6MWT. All samples were prepared for the comet assay. Twenty-seven patients with COPD were evaluated; 59% were men and mean age was 64.7 ± 8.4. Mean FEV1 was 40.3% ± 18.4% of predicted value, and mean FEV1/FVC was 52.5% ± 11.9%. Mean values before and after 6MWT were: SpO2 = 92.0 ± 4.5 vs. 91.4 ± 4.6; Borg score for dyspnea = 1.2 ± 1.0 vs. 2.4 ± 1.7; and mean distance walked – 380.1 ± 84.4 m. Mean DNA damage values before (27.9 ± 19.2) and immediately after (29.6 ± 29.6) 6MWT were not significantly different (p = 0.904). The analysis performed 48 hours after 6MWT showed a nonsignificant reduction of damage (18.3 ± 13.0; p = 0.099). Conclusions The physical effort during 6MWT did not cause an immediate increase in DNA damage, and did not stimulate DNA repair mechanisms in patients with COPD.