PORTELA, A. M. L. R. Efeito da lectina Concanavalina A (CON A) sobre a ativação in vitro de folículos primordiais caprinos. 2013. 90 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Campus de Sobral, Universidade Federal do Ceará, Sobral, 2013 / Submitted by Djeanne Costa (djeannecosta@gmail.com) on 2016-04-01T12:35:12Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_amlrportela.pdf: 1263988 bytes, checksum: 5ba44fa2ebbd589c7c4c8cfd41dddd43 (MD5) / Approved for entry into archive by Djeanne Costa(djeannecosta@gmail.com) on 2016-04-01T12:36:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_amlrportela.pdf: 1263988 bytes, checksum: 5ba44fa2ebbd589c7c4c8cfd41dddd43 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-01T12:36:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_amlrportela.pdf: 1263988 bytes, checksum: 5ba44fa2ebbd589c7c4c8cfd41dddd43 (MD5) Previous issue date: 2013 / The aim of this study were to evaluate the effect of different concentrations of Concanavalin A (Con A) and FSH on activation, and survival in vitro growth of goat primordial follicles, as well as investigating the effects of Con A and FSH on the expression of mRNA for PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 and GDF-9. For this, ovarian cortex fragments were in vitro cultured for 1 to 6 days in α-MEM+ supplemented with 0, 5, 10, 20 or 40 μg/mL of Con A lectin (experiment 1). At the end of the growing period, the fragments of ovarian cortex were fixed for histology. Next, we evaluated the percentage of primordial follicles or under development. After determination of the concentration of Con A more efficient (10 μg/mL), fragments of ovarian cortex were cultured in situ for 6 days in α-MEM+ alone or supplemented with 50 ng/mL of FSH, 10 μg/mL of Con A or both (experiment 2). Tissues from the control uncultured or after culture in different treatments were fixed for histology or stored at -80ºC to assess the expression profile of mRNA for PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 and GDF-9. The results of Experiment 1 demonstrated that after 6 days of culture, the percentage of developing follicles was significantly higher in samples cultured with α-MEM+ supplemented with 10 and 40 μg/mL Con A, when compared to the other treatments (P <0.05). In experiment 2, the presence of FSH, or both Con A promoted a reduction in the percentage of primordial follicles and increase developing follicles compared to control medium (α-MEM+). After 6 days of culture, the presence of FSH promoted an increase in mRNA levels for PCNA, but this effect was blocked by Con A. Moreover, the Con A increased mRNA levels for c-KIT compared to the control not grown, but Con A or Con A and FSH both reduced the levels of mRNA for KL. Furthermore, a reduction of BMP-15 mRNA was observed in follicles cultured in control medium, but the presence of FSH inhibited this reduction. Furthermore, Con A promoted an increase in levels of GDF-9 mRNA after in vitro culture. In conclusion, the Con A alone or in combination with FSH promote activation of primordial follicles goat after 6 days of in vitro culture and regulate the expression of mRNA for PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 and GDF-9 / Os objetivos deste estudo foram avaliar o efeito de diferentes concentrações de Concanavalina A (Con A) e do FSH sobre a ativação, sobrevivência e crescimento in vitro de folículos primordiais caprinos, bem como investigar os efeitos da Con A e do FSH sobre a expressão de RNAm para PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 e GDF-9. Para isto, fragmentos de córtex ovariano foram cultivados in vitro por 1 ou 6 dias em α-MEM+ suplementado com 0, 5, 10, 20 ou 40 μg/mL da lectina Con A (experimento 1). No final do período de cultivo, os fragmentos de córtex ovariano foram fixados para histologia clássica. Em seguida, avaliou-se a percentagem de folículos primordiais ou em desenvolvimento. Após a determinação da concentração de Con A mais eficiente (10 μg/mL), os fragmentos do córtex ovariano foram cultivados in situ por 6 dias em α-MEM+ sozinho ou suplementado com 50 ng/mL de FSH, 10 μg/mL de Con A ou ambos (experimento 2). Os tecidos provenientes do controle não cultivado ou após cultivo nos diferentes tratamentos foram fixados para histologia clássica ou armazenados a -800C para avaliar o perfil de expressão de RNAs mensageiros para PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 e GDF-9. Os resultados do experimento 1 demonstraram que após 6 dias de cultivo, a percentagem de folículos em desenvolvimento foi significativamente maior nos fragmentos cultivados com α-MEM+ suplementado com 10 e 40 μg/mL de Con A, quando comparado aos demais tratamentos (P <0,05). No experimento 2, a presença de FSH, Con A ou ambos promoveram uma redução na percentagem de folículos primordiais e aumento de folículos em desenvolvimento em relação ao meio controle (α-MEM+). Após 6 dias de cultivo, a presença de FSH promoveu um aumento nos níveis de RNAm para PCNA, mas este efeito foi bloqueado pela Con A. Por outro lado, a Con A aumentou os níveis de RNAm para c-kit em comparação ao controle não cultivado, mas Con-A ou ambos Con A e FSH reduziram os níveis de RNAm para KL. Além disso, uma redução dos RNAm para BMP-15 foi observado em folículos cultivados no meio controle, mas a presença de FSH inibiu esta redução. Além disso, a Con A promoveu um aumento nos níveis de RNAm para GDF-9 após cultivo in vitro. Em conclusão, a Con A sozinha ou em combinação com FSH promovem a ativação de folículos primordiais caprinos após 6 dias de cultivo in vitro e regulam a expressão de RNAm para PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 e GDF-9.

Orientador: Glaci Ribeiro da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-20T13:46:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_MariaHelenadeMelo_M.pdf: 1177488 bytes, checksum: fcb33a1d9193a1cb31495c51cbb79d0f (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9229_1.pdf: 1205063 bytes, checksum: 602c978879d1db816d3c1b7a7f552bfb (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O estudo do processo de adsorção espontânea de proteínas vem sendo abordado nas últimas décadas por vários pesquisadores. Esta tendência de pesquisa é motivada com base na possibilidade de aplicar tais estudos nas áreas analítica, industrial e médica. Na tentativa de contribuirmos para esta linha de pesquisa, estudamos o processo de adsorção da lectina concanavalina A sobre diferentes superfícies sólidas. Este estudo foi dividido em duas partes. Na primeira, investigamos a adsorção da proteína sobre as superfícies de ouro e carbono vítreo, onde foram utilizadas as técnicas de voltametria cíclica e espectroscopia de impedância eletroquímica. Na segunda, realizamos uma modelagem cinética dos dados da variação da impedância (freqüência fixa de 100 Hz), em função do tempo de adsorção de proteína na superfície de platina, sendo estes resultados fornecidos por Roselí R. Ueta. Como resultados da primeira parte, mostramos que a lectina apresenta uma maior afinidade pela superfície do eletrodo de ouro. Esta afinidade foi associada ao fato da superfície de ouro ser carregada mais positivamente que a de carbono vítreo. Na superfície de carbono vítreo observamos que a proteína na forma desativada adsorve em dois estados diferentes. Observamos ainda que a presença dos íons Ca++ e Mn++ na estrutura da proteína (proteína ativada) promove uma diminuição na adsorção da mesma sobre ambas as superfícies. Na segunda parte do trabalho, mostramos que é possível modelar resultados cinéticos da impedância a uma freqüência intermediária (100 Hz), além de mostrarmos que a cinética de adsorção da concanavalina A sobre eletrodo de platina está de acordo com um modelo que considera um processo de adsorção seguido de uma modificação da camada protéica. Também observamos que a proteína na forma ativada sofre modificaçôes mais lentas ao adsorver do que na forma desativada

In this thesis, glucose responsive hydrogels based on cross-linked dextran molecules were studied to determine the diffusion rate of an insulin analogue. Investigations of the interaction between concanavalin A and dextran, both in free solution and in the form of glucose responsive hydrogels were conducted. The free solution results have shown that there is an increase of association constant between concanavalin A and dextran when the molecular mass of the dextran is increased. Free solution viscometric tests have shown that increasing the molecular mass or the concentration of the dextran increases the viscosity. The hydrogels have been shown to form for dextrans of molecular mass 43kD or greater. Experiments conducted with hydrogel membranes in a diffusion cell have shown that the batch to batch reproducibility of hydrogel transport properties is low. However, clear evidence of glucose enhanced transport was obtained and these results were compared with predictions obtained from a theoretical model of gel permeability that accounts for competitive displacement of affinity cross links. Oscillatory rheological tests of gelation mixtures which showed an increase in complex viscosity at the gel point with increasing molecular mass of dextran were in agreement with empirical observations that gels formed from the highest molecular mass dextrans were more physically robust and easier to handle. Swelling rate experiments have shown that the rate of hydration of a hydrogel in the presence of glucose is decreased due to the osmotic pressure of the glucose. This work has shown that the multivalent nature of concanavalin A may not be a necessary pre-requisite for this type of hydrogel due to spatial constraints decreasing the number of potential affinity bonds per tetramer. In-house production of more tightly defined dextrans might be expected to reduce heterogeneity and improve the reproducibility of this type of hydrogel membrane.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:51:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5270_1.pdf: 6694120 bytes, checksum: 2f38ffe6a04cc43f85b6cbf0b87edb3d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Biosensor é um dispositivo no qual o material de origem biológica, tais como enzima, organela, tecido animal ou vegetal, microrganismo, antígeno ou anticorpo, ácidos nucléicos, lectina, entre outros, é imobilizado junto a um transdutor adequado. Portanto, o estudo da interface eletrodo/biomolécula/solução consiste em uma das principais etapas para o desenvolvimento de biosensores. O objetivo deste trabalho foi estudar a interface ouro/lectina utilizando as técnicas de Espectroscopia de Impedância Eletroquímica (EIS) e Ressonância de Plásmons de Superfície (SPR), como meios de transdução para a confecção de um futuro biosensor. Contudo, as lectinas pertencem a um grupo de proteínas com especificidade a carboidratos, característica que ampliou o foco da dissertação para a interação entre a lectina Concanavalina A e os carboidratos glicogênio e galactose. Neste trabalho foi montado um sistema de SPR acoplado ou não a um sistema eletroquímico, com o intuito de monitorar e caracterizar a adsorção da proteína em diferentes potenciais e sua interação com carboidratos. Com base nos resultados obtidos, a proteína na configuração desativada adsorveu mais que a forma ativada na superfície do eletrodo de filme fino de ouro, porém, foi a configuração ativada que melhor reconheceu o glicogênio e ambas não se ligaram à galactose. Além disso, foi verificado que a proteína, em ambas as configurações, não reconheceu a galactose e adsorveu mais facilmente em potenciais mais positivos, devido a um maior contraste de cargas entre o eletrodo e a proteína

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:00:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6565_1.pdf: 3397227 bytes, checksum: 460e0a823d65ddc3c9b179ed89a4acb0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho descreve o estudo espectroscópico de tecidos de mama humana sadios e com neoplasias maligna (Carcinoma Ductal Infiltrante - CDI) e benigna (Fibro- adenoma - FIB) submetidos à histoquímica com lectina, utilizando-se para tal finalidade conjugados obtidos a partir da interação entre a Concanavalina A (Con A) e criptatos de Lantanídeos(III) (criptatos de Ln(III)). Inicialmente foram sintetizados e caracterizados criptatos de fórmula geral Ln(III) µ [(bipy)2py(CONHCH2CH2NH2)2], onde Ln(III)= Tb(III) ou Eu(III), de acordo com metodologia descrita na literatura. A Con A foi conjugada aos criptatos de Ln(III) e a conjugação foi verificada via teste de atividade hemaglutinante. Amostras de tecidos mamários humanos normais e diagnosticados com CDI e FIB foram marcados com os conjugados Con A-criptato de Ln(III) e uma amostra de tecido com CDI foi marcada simultaneamente com o conjugado Con A-criptato de Eu e hemato- xilina/eosina (H.E.). As amostras foram, então, submetidas a medidas de espectroscopia de emissão. Os dados obtidos foram comparados em termos das intensidades de emissão das bandas de emissão característica para cada íon lantanídeo e tratados via Análise de Componentes Principais (PCA), que mostraram razoável separação dos casos por diagnós- tico. A análise da amostra marcada concomitantemente com o conjugado Con A-criptato de Eu(III) e H.E. mostrou ser possível submeter uma mesma amostra a duas metodolgias diferentes de marcação, sem perdas de informação

Orientador: Glaci Ribeiro da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-19T04:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zambelli_JoseErnani_M.pdf: 1595685 bytes, checksum: 3713bf0fa22b5c84f667a72389567a69 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: A Con A administrada em ratos induziu alterações glicêmicas sexo-dependentes. Estas alterações variaram de acordo com o esquema de administração usado. No esquema AGUDO ratos fêmeas apresentaram hipoglicemia, enquanto que no esquema CRÔNICO ratos machos apresentaram, hiperglicemia. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Com A administration inrats produced sex-dependent glycemic changes which varied according to the protocol employed. Following acute treatment with Con A, female rats developed hypoglycemia while chronic treatment resulted in male animals which were hyperglycemic. Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / The aim of this study were to evaluate the effect of different concentrations of Concanavalin A (Con A) and FSH on activation, and survival in vitro growth of goat primordial follicles, as well as investigating the effects of Con A and FSH on the expression of mRNA for PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 and GDF-9. For this, ovarian cortex fragments were in vitro cultured for 1 to 6 days in &#945;-MEM+ supplemented with 0, 5, 10, 20 or 40 &#956;g/mL of Con A lectin (experiment 1). At the end of the growing period, the fragments of ovarian cortex were fixed for histology. Next, we evaluated the percentage of primordial follicles or under development. After determination of the concentration of Con A more efficient (10 &#956;g/mL), fragments of ovarian cortex were cultured in situ for 6 days in &#945;-MEM+ alone or supplemented with 50 ng/mL of FSH, 10 &#956;g/mL of Con A or both (experiment 2). Tissues from the control uncultured or after culture in different treatments were fixed for histology or stored at -80ÂC to assess the expression profile of mRNA for PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 and GDF-9. The results of Experiment 1 demonstrated that after 6 days of culture, the percentage of developing follicles was significantly higher in samples cultured with &#945;-MEM+ supplemented with 10 and 40 &#956;g/mL Con A, when compared to the other treatments (P <0.05). In experiment 2, the presence of FSH, or both Con A promoted a reduction in the percentage of primordial follicles and increase developing follicles compared to control medium (&#945;-MEM+). After 6 days of culture, the presence of FSH promoted an increase in mRNA levels for PCNA, but this effect was blocked by Con A. Moreover, the Con A increased mRNA levels for c-KIT compared to the control not grown, but Con A or Con A and FSH both reduced the levels of mRNA for KL. Furthermore, a reduction of BMP-15 mRNA was observed in follicles cultured in control medium, but the presence of FSH inhibited this reduction. Furthermore, Con A promoted an increase in levels of GDF-9 mRNA after in vitro culture. In conclusion, the Con A alone or in combination with FSH promote activation of primordial follicles goat after 6 days of in vitro culture and regulate the expression of mRNA for PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 and GDF-9 / Os objetivos deste estudo foram avaliar o efeito de diferentes concentraÃÃes de Concanavalina A (Con A) e do FSH sobre a ativaÃÃo, sobrevivÃncia e crescimento in vitro de folÃculos primordiais caprinos, bem como investigar os efeitos da Con A e do FSH sobre a expressÃo de RNAm para PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 e GDF-9. Para isto, fragmentos de cÃrtex ovariano foram cultivados in vitro por 1 ou 6 dias em &#945;-MEM+ suplementado com 0, 5, 10, 20 ou 40 &#956;g/mL da lectina Con A (experimento 1). No final do perÃodo de cultivo, os fragmentos de cÃrtex ovariano foram fixados para histologia clÃssica. Em seguida, avaliou-se a percentagem de folÃculos primordiais ou em desenvolvimento. ApÃs a determinaÃÃo da concentraÃÃo de Con A mais eficiente (10 &#956;g/mL), os fragmentos do cÃrtex ovariano foram cultivados in situ por 6 dias em &#945;-MEM+ sozinho ou suplementado com 50 ng/mL de FSH, 10 &#956;g/mL de Con A ou ambos (experimento 2). Os tecidos provenientes do controle nÃo cultivado ou apÃs cultivo nos diferentes tratamentos foram fixados para histologia clÃssica ou armazenados a -800C para avaliar o perfil de expressÃo de RNAs mensageiros para PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 e GDF-9. Os resultados do experimento 1 demonstraram que apÃs 6 dias de cultivo, a percentagem de folÃculos em desenvolvimento foi significativamente maior nos fragmentos cultivados com &#945;-MEM+ suplementado com 10 e 40 &#956;g/mL de Con A, quando comparado aos demais tratamentos (P <0,05). No experimento 2, a presenÃa de FSH, Con A ou ambos promoveram uma reduÃÃo na percentagem de folÃculos primordiais e aumento de folÃculos em desenvolvimento em relaÃÃo ao meio controle (&#945;-MEM+). ApÃs 6 dias de cultivo, a presenÃa de FSH promoveu um aumento nos nÃveis de RNAm para PCNA, mas este efeito foi bloqueado pela Con A. Por outro lado, a Con A aumentou os nÃveis de RNAm para c-kit em comparaÃÃo ao controle nÃo cultivado, mas Con-A ou ambos Con A e FSH reduziram os nÃveis de RNAm para KL. AlÃm disso, uma reduÃÃo dos RNAm para BMP-15 foi observado em folÃculos cultivados no meio controle, mas a presenÃa de FSH inibiu esta reduÃÃo. AlÃm disso, a Con A promoveu um aumento nos nÃveis de RNAm para GDF-9 apÃs cultivo in vitro. Em conclusÃo, a Con A sozinha ou em combinaÃÃo com FSH promovem a ativaÃÃo de folÃculos primordiais caprinos apÃs 6 dias de cultivo in vitro e regulam a expressÃo de RNAm para PCNA, KL, c-Kit, BMP-15 e GDF-9.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:53:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5166_1.pdf: 1713007 bytes, checksum: 77d8ae84cbc92d3cb44120576648c8fa (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / Lipossomas são vesículas aquosas formadas por bicamadas de fosfolipídios e constituem excelentesformas farmacêuticas de liberação controlada de fármacos devido à sua flexibilidade estrutural em termos de tamanho, composição, fluidez da bicamada lipídica e capacidade para incorporar tanto compostos hidrofílicos quanto lipofílicos. As lectinas, proteínas de reconhecimento a carboidratos com capacidade para ligar-se a glicoconjugados de membranas biológicas, podem ser utilizadas como moléculas sinalizadoras na superfície de lipossomas tornando-os sítio-específicos (lipossomas lectina-conjugada). O objetivo desta tese foi desenvolver lipossomas lectina-conjugada e lipossomas convencionais para o direcionamento de fármacos anticancerígenos à células antitumorais. A doxorrubicina (DOX) e o ácido úsnico (AU), um antitumoral de origem liquênica, foram utilizados como fármacos modelos a serem nanoencapsulados em lipossomas. A lectina Concanavalina A (Con A) foi conjugada a lipossomas contendo DOX (Con A-lipossomas) para liberação sítio-específica do fármaco. Adicionalmente, o AU foi encapsulado em lipossomas convencionais. Con Alipossomas foram preparados por incubação da lectina modificada (SATA-Con A) com DOXlipossomas (DPPE-MBS lipossomas) previamente preparados. A atividade biológica da lectina foi monitorada antes e após conjugação aos lipossomas por ensaio de hemaglutinação. Lipossomas contendo AU foram preparados pelo método de hidratação do filme lipídico seguido de sonicação. As propriedades físico-químicas e a estabilidade dos lipossomas foram avaliadas. A citotoxicidade de DOX encapsulada em Con A-lipossomas e do AU lipossomal foi avaliada em termos de inibição da proliferação celular em linhagens humanas NCI-H292 e HEp-2 utilizando o método do MTT. A citotoxicidade dos fármacos encapsulados foi comparada com aquela dos fármacos nas suas formas livres em solução. Lipossomas sítioespecíficos contendo DOX (1 mg/ml), com superfície modificada pela Con A, foram obtidoscom tamanho de partículas de 172,6 ± 12,7 nm e com atividade hemaglutinante parcialmente preservada. A encapsulação de DOX em Con A-lipossomas promoveu uma inibição de aproximadamente 70% da proliferação das células HEp-2 nas concentrações testadas (0,63-5 mg/ml). Uma inibição de 50% da proliferação das células NCI-H292 foi observada para a concentração de 1,25 mg/ml (CI50), enquanto que a DOX livre apresentou uma CI50 de 5 mg/ml. DOX em solução foi capaz de inibir apenas 20% da proliferação das células HEp-2. Con A-lipossomas não carregados com fármaco não apresentaram citotoxicidade em nenhuma das células testadas. Lipossomas (42 &#956;mol/10&#956;l) contendo 1,5 mg/ml de AU foram obtidos e a formulação mais resistente permaneceu estável por mais de 100 dias em suspensão. A citotoxicidade do AU livre e encapsulado em células HEp-2 foi de 20 e 5 &#956;g/ml, respectivamente, e de 20 &#956;g/ml para ambas as formas livre e encapsulada testadas em células NCI-H292. A encapsulação de DOX em Con A-lipossomas levou a um melhoramento na penetração do fármaco nas células, e como conseqüência ao aumento da citotoxicidade, especialmente em células HEp-2. A nanoencapsulação de fármacos anticancerígenos em lipossomas convencionais ou sítio-específico promove um aumento na eficácia do fármaco constituindo, portanto, uma forma potencial de administração de tais fármacos

O polissacarídeo quitosana é usado em aplicações biológicas, tais como entrega de drogas e engenharia de tecidos como matriz para o crescimento celular, devido à sua biocompatibilidade e biodegradabilidade. Uma das suas utilizações mais frequentes é na forma de membranas obtidas por casting com poli (etileno glicol) (PEG). Neste trabalho, membranas de quitosana-PEG foram modificadas e otimizadas com filmes nanoestruturados de concanavalina A (Con A) e jacalina. O processo de purificação não afetou as propriedades da quitosana, tais como cristalinidade, tamanho de cristalitos, grupos funcionais e grau de acetilação. A única exceção foi a diminuição da massa molecular, provavelmente pela quebra de cadeias por adição de ácido acético à solução. As membranas fabricadas com mistura de quitosana e PEG exibiram superfície mais rugosa, porosa, com energia de superfície mais elevada do que aquelas com quitosana pura. Misturas com 20 e 30% de PEG foram testadas, sendo as que contêm 20% mais adequadas para a funcionalização, devido ao maior tamanho dos poros, de acordo com imagens de microscopia de força atômica. Na funcionalização das membranas de quitosana-PEG com proteínas, o objetivo é obter a cobertura mais uniforme com maior energia de superfície. No processo de otimização, a deposição do filme nanoestruturado de proteína foi confirmada com PM-IRRAS, espectroscopia de fluorescência e dicroísmo circular, e a energia de superfície foi calculada usando o modelo de Owens- Wendt-Rabel-Kaelble a partir dos ângulos de contato para diferentes líquidos. Para Con A e jacalina, propriedades otimizadas foram obtidas com a menor concentração de proteína testada, 0,1 mg/mL, para um tempo de adsorção de 90 minutos. Além disso, o filme de jacalina levou à maior energia de superfície, ou seja, 56,7 mJ/m², comparado com 55,9 mJ/m² para amostras modificadas com Con A. Além disso, sob essas condições de otimização, a atividade da proteína foi mantida por 4 semanas para membranas armazenadas a 4ºC. Portanto, as membranas funcionalizadas são promissoras para crescimento celular e aplicações de engenharia de tecidos / The polysaccharide chitosan is used in various biological applications such as drug delivery and especially in tissue engineering as a matrix for cell growth due to its biocompatibility and biodegradability. One of its most frequent uses is in the form of membranes made via casting blended with poly(ethylene glycol) (PEG). In this work, chitosan-PEG membranes were optimized and modified with nanostructured films of concanavalin A (Con A) and jacalin. The purification process did not affect the chitosan properties, such as crystallinity, crystallite size, functional groups and degree of acetylation. The only exception was a decrease in the molecular mass, probably owing to chain scission by addition of acetic acid to the solution. The membranes made with chitosan and PEG exhibited a rougher, porous surface, with higher surface energy than those with neat chitosan. Blends with 20 and 30% PEG were tested, and those with 20% were considered as more suitable for functionalization owing to the larger size of the pores, according to atomic force microscopy images. The functionalization of the chitosan-PEG membranes with the proteins is aimed at achieving the most uniform coverage with the highest surface energy. In the optimization procedure, the deposition of the protein nanostructured film was confirmed with PM-IRRAS, fluorescence spectroscopy and circular dichroism, while the surface energy was calculated using the Owens-Wendt-Rabel-Kaelble model and the measured contact angles for several liquids. For both Con A and jacalin, optimized properties were obtained with the lowest protein concentration tested, viz. 0.1 mg/mL, for an adsorption time of 90 min. Furthermore, the jacalin film led to the highest surface energy, namely 56.7 mJ/m², to be compared with 55.9 mJ/m² for samples modified with Con A. Under these optimized conditions, the protein activity was kept for ca. 4 weeks if the coated membranes were stored at 4ºC. Therefore, the functionalized membranes are promising for cell growth and tissue engineering applications