Spelling suggestions: "subject:"ere rekombinase"" "subject:"ere rekombinasie""
1 |
Directed evolution of an HIV-1 LTR specific recombinase for anti-retroviral therapy- a proof of concept studySarkar, Indrani 17 January 2007 (has links) (PDF)
The prospect of the work presented in this thesis has been to engineer Cre recombinase to recognize and recombine a sequence from an HIV-1 Long Terminal Repeat (LTR), characterize the recombination proficiency of the evolved recombinase in mammalian cells and explore the potential of the recombinase for a novel antiretroviral strategy.
|
2 |
Directed evolution of an HIV-1 LTR specific recombinase for anti-retroviral therapy- a proof of concept studySarkar, Indrani 26 September 2006 (has links)
The prospect of the work presented in this thesis has been to engineer Cre recombinase to recognize and recombine a sequence from an HIV-1 Long Terminal Repeat (LTR), characterize the recombination proficiency of the evolved recombinase in mammalian cells and explore the potential of the recombinase for a novel antiretroviral strategy.
|
3 |
Ko-Expression des astroglialen GFAP- und des oligodendrozytären PLP-Promotors in Müllerzellen der Retina: Aktivierung durch LäsionenLycke, Christian 07 January 2015 (has links) (PDF)
Die Dissertation befasst sich mit der Untersuchung der Ko-Expression des GFAP- und des PLP-Promotors in Müllerzellen der Netzhaut transgener Mäuse. Die verwendete Mauslinie ist tripel-transgen für den GFAP- und den PLP-Promotor sowie für einen ROSA26-Reporter.
Durch die Quantifizierung der EYFP-Expression in Müllerzellen konnte gezeigt werden, dass es nach akuter ischämischer Schädigung sowie einer angeborenen retinalen Degeneration in Müllerzellen zu einer Aktivierung des oligodendrozytären PLP-Promotors kommt. Weiterhin wurde festgestellt, dass die Aktivierung des Transkriptionsfaktors Sox-9, der sowohl für die Entwicklung der Müllerzellen als auch für die Oligodendrogenese von entscheidender Rolle ist, mit dieser Promotoraktivierung korreliert. Diese Ergebnisse implizieren, dass Müllerzellen im Rahmen ihrer Stammzelleigenschaften in der Lage sind, auf embryonale
Entwicklungsprozesse, die auch die oligodendrozytäre Zellreihe beinhalten, zurückgreifen zu können.
|
4 |
Ko-Expression des astroglialen GFAP- und des oligodendrozytären PLP-Promotors in Müllerzellen der Retina: Aktivierung durch Läsionen: Ko-Expression des astroglialen GFAP- und desoligodendrozytären PLP-Promotors in Müllerzellen der Retina:Aktivierung durch LäsionenLycke, Christian 26 June 2014 (has links)
Die Dissertation befasst sich mit der Untersuchung der Ko-Expression des GFAP- und des PLP-Promotors in Müllerzellen der Netzhaut transgener Mäuse. Die verwendete Mauslinie ist tripel-transgen für den GFAP- und den PLP-Promotor sowie für einen ROSA26-Reporter.
Durch die Quantifizierung der EYFP-Expression in Müllerzellen konnte gezeigt werden, dass es nach akuter ischämischer Schädigung sowie einer angeborenen retinalen Degeneration in Müllerzellen zu einer Aktivierung des oligodendrozytären PLP-Promotors kommt. Weiterhin wurde festgestellt, dass die Aktivierung des Transkriptionsfaktors Sox-9, der sowohl für die Entwicklung der Müllerzellen als auch für die Oligodendrogenese von entscheidender Rolle ist, mit dieser Promotoraktivierung korreliert. Diese Ergebnisse implizieren, dass Müllerzellen im Rahmen ihrer Stammzelleigenschaften in der Lage sind, auf embryonale
Entwicklungsprozesse, die auch die oligodendrozytäre Zellreihe beinhalten, zurückgreifen zu können.:Inhaltsverzeichnis ....................................................................................................................... 3
Bibliographische Darstellung ..................................................................................................... 5
Abkürzungsverzeichnis und Erläuterungen ................................................................................ 6
1 Einleitung ............................................................................................................................ 8
1.1 Die Retina als Teil des Auges ................................................................................................. 8
1.1.1 Aufbau .............................................................................................................................. 8
1.2 Die gliale Müllerzelle ............................................................................................................ 12
1.2.1 Definition und Morphologie der Müllerzellen ............................................................... 12
1.2.2 Funktion .......................................................................................................................... 13
1.2.3 Ursprung und Ontogenese der Müllerzelle ..................................................................... 14
1.3 Erkrankungen der Netzhaut .................................................................................................. 15
1.3.1 Akute Läsionen ............................................................................................................... 15
1.3.2 Chronische Erkrankungen der Netzhaut ......................................................................... 15
1.3.3 Die Rolle der Müllerzelle in der erkrankten Retina ....................................................... 16
1.4 Mausgenetik .......................................................................................................................... 18
1.4.1 Das Cre-loxP-System ..................................................................................................... 18
1.5 Pax-6 und Sox-9: Transkriptionsfaktoren spezifizieren das Zellschicksal ........................... 24
1.5.1 Die PAX-Familie ............................................................................................................ 24
1.5.2 SOX-9-Gene ................................................................................................................... 25
2 Ziele .................................................................................................................................. 26
3 Material und Methoden ..................................................................................................... 27
3.1 Material ................................................................................................................................. 27
3.1.1 Chemikalien .................................................................................................................... 27
3.1.2 Antikörper ....................................................................................................................... 27
3.1.3 Größenstandards ............................................................................................................. 28
3.1.4 Mauslinien ...................................................................................................................... 29
3.1.5 Geräte ............................................................................................................................. 31
3.2 Methoden .............................................................................................................................. 31
3.2.1 Genotypisierung transgener Mäuse ................................................................................ 31
3.2.2 Akute retinale Läsion durch Anlegen eines erhöhten Augeninnendrucks („high
intraocular pressure“, HIOP) .......................................................................................... 37
3.2.3 Herstellung und Fixierung der retinalen Gewebsproben ................................................ 37
3.2.4 Immunhistochemische Färbungen .................................................................................. 38
3.2.5 Mikroskopische Auswertung .......................................................................................... 39
3.2.6 Datenverarbeitung und Statistik ..................................................................................... 41
4 Ergebnisse ......................................................................................................................... 42
4.1 Technische Aspekte: Vergleich der Quantifizierung in Ganzpräparate und Querschnitte ... 42
4.1.1 Vergleich der Abbildungen ............................................................................................ 42
4.1.2 Auszählung Retina-Ganzpräparate ................................................................................. 43
4.1.3 Auszählung der Zellen in Querschnitten der Netzhaut ................................................... 45
4.1.4 Vergleich der Quantifizierung von Ganzpräparaten und Querschnitten ........................ 46
4.1.5 Quantifizierung ............................................................................................................... 48
4.2 Analyse der Reporterexpression in der Retina tripel-transgener Mäuse ............................... 49
4.2.1 Quantitative Auswertung GS-positiver Müllerzellen ..................................................... 49
4.2.2 Quantitative Auswertung EYFP-positiver Müllerzellen ................................................ 51
4.2.3 Auswertung des prozentualen Anteils der EYFP-positiven Müllerzellen ...................... 53
4.3 Auswertung der Transkriptionsfaktorexpression von Pax-6 und Sox-9 ............................... 56
4.3.1 Auswertung der Pax-6-positiven Müllerzellen ............................................................... 57
4.3.2 Auswertung der Sox-9-positiven Müllerzellen .............................................................. 60
5 Diskussion ......................................................................................................................... 63
5.1 Die GFAP-Expression in der Müllerzellgliose ..................................................................... 63
5.2 Auswertung und Vergleich der retinalen Ganzpräparate und Querschnitte ......................... 64
5.3 Die Untersuchung der Promotoraktivität nach retinaler Ischämie ........................................ 65
5.4 Die Untersuchung der Promotoraktivität bei angeborener retinaler Degeneration ............... 66
5.5 Die Rolle der Transkriptionsfaktoren Pax-6 und Sox-9 ........................................................ 68
5.5.1 Pax-6 ............................................................................................................................... 68
5.5.2 Sox-9 ............................................................................................................................... 69
5.6 Einordnung der Ergebnisse in die Zellbiologie der Müllerzelle ........................................... 72
6 Zusammenfassung ............................................................................................................. 74
7 Literaturverzeichnis .......................................................................................................... 77
8 Lebenslauf ......................................................................................................................... 83
9 Danksagung ....................................................................................................................... 84
10 Eigenständigkeitserklärung ............................................................................................... 85
|
Page generated in 0.0531 seconds