Spelling suggestions: "subject:"cytotoxins"" "subject:"phytotoxins""
1 |
Estudo da atividade citotÃxica de compostos obtidos do extrato acetÃnico das folhas de Annona muricata L. por fracionamento bioguiadoFrancisco StefÃnio Barreto 24 January 2014 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O cÃncer à uma complexa doenÃa de origem genÃtica, resultante de mutaÃÃes em proto-oncogenes e/ou genes supressores tumorais. à considerada uma das principais causas de morte por doenÃa no mundo. Estudos preliminares com o extrato acetÃnico e compostos isolados da espÃcie Annona muricata evidenciaram o seu potencial antitumoral. Annona muricata L. (Annonaceae) à popularmente conhecida como gravioleira; possui ampla distribuiÃÃo, principalmente em regiÃes tropicais. No Brasil, a espÃcie à utilizada como analgÃsico, hipoglicemiante, anti-inflamatÃrio, antitÃrmico, hepatoprotetor, antinevrÃlgico, antiparasitÃrio e antirreumÃtico. O presente trabalho descreve o isolamento de uma acetogenina, denominada anonacina, com anel mono-tetrahidrofurano, fÃrmula molecular C35H64O7 e massa de 596 u.m.a à partir do extrato acetÃnico das folhas da referida espÃcie, atravÃs de prospecÃÃo quÃmica bioguiada pela citotoxicidade usando o ensaio do MTT. Todas as fraÃÃes obtidas e a acetogenina isolada na prospecÃÃo apresentaram potencial citotÃxico nas linhagens tumorais testadas. Os valores de concentraÃÃo inibitÃria mÃdia dessa acetogenina, apresentaram-se na ordem de nano-molar. O ensaio de citotoxicidade mostrou que esse composto apresenta atividade antiproliferativa frente à todas as linhagens tumorais testadas, com CI50 variando de 3.280 nM a 1,56 nM em HL-60 e HCT-116, respectivamente apÃs 72 horas de incubaÃÃo, onde a substÃncia foi mais ativa frente Ãs linhagens HCT-116, OVCAR-8, SF-295 e PC-3M. Essa acetogenina nÃo foi capaz de inibir a proliferaÃÃo de cÃlulas mononucleares do sangue perifÃrico, embora tenha apresentado efeito hemolÃtico em eritrÃcitos de camundongos. A acetogenina AMFA-4, em linhagem de cÃlula de cÃncer colorretal, apresentou efeito citotÃxico dependente da dose e do tempo de incubaÃÃo, sendo capaz de alterar o nÃmero de cÃlulas viÃveis e nÃo-viÃveis apÃs 48 e 72 h de exposiÃÃo. Nesses dois tempos de incubaÃÃo, essa molÃcula foi capaz de alterar a morfologia das cÃlulas HCT-116, onde a mesma teve aumento do nÃcleo e citoplasma e aspecto fusiforme. O presente trabalho mostrou que o extrato acetÃnico das folhas de A. muricata à uma fonte promissora para obtenÃÃo de compostos pertencentes a classe das acetogeninas com atividade citotÃxica relevante em cÃlulas tumorais de origem humana. / Cancer is a complex disease of genetic origin, resulting from mutations in proto-oncogenes and / or tumor suppressor genes. It is considered one of the major causes of death in the world. Preliminary studies with the acetone extract and isolated compounds from the Annona muricata species demonstrated their antitumor potential. Annona muricata L. (Annonaceae), popularly known as soursop, has wide distribution, mainly in the tropical regions. In Brazil, the species is widely used as analgesic, hypoglycemic, anti-inflammatory, antipyretic, hepatoprotective, anti-neuralgic, anti-parasitic and anti-rheumatic. This study reports the isolation of an acetogenin, called Annonacin, with a mono-tetrahydrofuran ring, the molecular formula: C35H64O7 and a mass of 596 u.m.a from the acetone extract of Annona muricata leaves through a bioguided chemical prospecting by cytotoxicity using the MTT assay. All the obtained fractions and the isolated acetogenin showed a cytotoxic potential in the tested tumor cell lines. The values of the mean inhibitory concentration of this acetogenin, had an order of nano-molar. The cytotoxicity assay demonstrated that the compound has anti-proliferative activity against all the tested tumor cell lines, with an IC50 ranging from 3.280 nM to 1.56 nM in HL-60 and HCT-116, respectively, after 72 hours of incubation, where the substance was most active against the following tumor cell lines: HCT-116, OVCAR-8, SF-295 and PC-3M. This acetogenin was not able to inhibit the proliferation of normal peripheral blood cells, although it showed a hemolytic effect on mice erythrocytes. The Annonacin, in a colorectal cancer cell line, showed a cytotoxic effect strongly related to the dose and incubation time, being able to change the number of viable and non-viable cells after 48 and 72 h of exposure. In both incubation times, this molecule was able to modify the HCT-116 cell morphology, where it had an increase on the cytoplasm and nucleus size, besides a fusiform appearance. This study showed that the acetone extract from the A. muricata leaves is a promising source for obtaining compounds belonging to the acetogenins class with significant cytotoxic activity on tumor cells of human origin.
|
2 |
Estudo da atividade enzimÃtica e dos efeitos do veneno da serpente Bothropoides insularis sobre macrÃfagos RAW 264.7 in vitroRamon RÃseo Paula Pessoa Bezerra de Menezes 14 March 2013 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Em todo o mundo, sÃo registrados mais de 3 milhÃes de acidentes envolvendo picadas de animais peÃonhentos por ano, das quais 125 a 150 mil culminam em Ãbito. No Brasil, a maioria dos casos ocorre com serpentes dos gÃneros Bothrops e Bothropoides, provocando uma grande variedade de complicaÃÃes locais e sistÃmicas, dentre os quais se destacam efeito mionecrÃtico, coagulaÃÃo intravascular disseminada, citotoxicidade, insuficiÃncia renal aguda e sepse. A serpente Bothropoides insularis à uma espÃcie nativa da Ilha de Queimada Grande, cujo veneno apresenta efeito tÃxico acentuado em diversos modelos experimentais. Entretanto, pouco à conhecido a respeito do efeito dessa peÃonha sobre cÃlulas com funÃÃo de defesa, nem o quanto esse efeito pode influenciar na toxicidade observada in vivo. O presente trabalho teve como objetivo investigar as alteraÃÃes celulares induzidas pelo veneno total da serpente Bothropoides insularis (BinsVT) sobre macrÃfagos murinos da linhagem RAW 264.7. Nesse contexto, foi realizada a determinaÃÃo da atividade proteolÃtica e da produÃÃo de perÃxido de hidrogÃnio in vitro de BinsVT atravÃs de reaÃÃes colorimÃtricas. Os resultados demonstraram alta atividade catalÃtica em ambos os testes, sugerindo que os efeitos biolÃgicos desse veneno podem estar relacionados à presenÃa de enzimas como metaloproteinases (svMPs) e L-aminoÃcido oxidases (LAAOs) em concentraÃÃes relevantes nas condiÃÃes experimentais adotadas. A determinaÃÃo do potencial citotÃxico foi realizada pelo mÃtodo de reduÃÃo do MTT, um teste de avaliaÃÃo da capacidade oxirredutora das cÃlulas, apÃs 2, 6, 12 e 24 horas de incubaÃÃo. Foi observado efeito citotÃxico em altas concentraÃÃes de forma tempo-dependente, com morte celular mais pronunciada nas concentraÃÃes de 200 e 100 Âg/mL apÃs 12 e 24 horas de tratamento. Nas menores concentraÃÃes estudadas, ocorreu um aumento gradativo da viabilidade celular, com valores percentuais em torno de 200% em relaÃÃo ao grupo controle nos grupos tratados por 24 horas. Esse resultado sugere a presenÃa de efeito proliferativo de BinsVT sobre essa linhagem celular. Em seguida, a atividade da enzima lactato desidrogenase (LDH) no sobrenadante de cultivo dos grupos experimentais foi determinado para investigaÃÃo de lise celular induzida por BinsVT. Foi verificado aumento significativo da atividade dessa enzima em todos os grupos testados, sugerindo a coexistÃncia de fraÃÃes com efeito proliferativo e citotÃxico, e a concentraÃÃo e o tempo de exposiÃÃo do veneno determinam qual irà prevalecer. Para avaliaÃÃo morfolÃgica das cÃlulas RAW 264.7 apÃs exposiÃÃo à substÃncia em estudo, os experimentos foram realizados na superfÃcie de lamÃnulas, para coloraÃÃo com May-Grunwald Giemsa. Os grupos experimentais foram analisados por microscopia Ãptica e as caracterÃsticas morfolÃgicas mais representativas foram fotomicrografadas. Foram observadas diversas alteraÃÃes morfolÃgicas, tais como aparecimento de fragmentos celulares e nÃcleos desnudos, cÃlulas vacuolizadas, reduÃÃo do volume celular e aumento de projeÃÃes citoplasmÃticas. Por fim, o mecanismo de morte celular induzida por BinsVT foi avaliado por citometria de fluxo, pela marcaÃÃo com o iodeto de propÃdio (PI) e a anexina V-FITC. A anÃlise revelou a presenÃa de envolvimento necrÃtico e apoptÃtico no efeito citotÃxico da substÃncia, alÃm do aparecimento de cÃlulas marcadas duplamente com PI e anexina-FITC, indicando a ocorrÃncia de apoptose tardia. Em conclusÃo, BinsVT apresenta efeito citotÃxico sobre macrÃfagos RAW 264.7, com aparente envolvimento de necrose e apoptose, alÃm de provÃvel efeito estimulatÃrio sobre essas cÃlulas, de forma concentraÃÃo- e tempo-dependente. Esses efeitos podem estar relacionados Ãs atividades enzimÃticas encontradas in vitro. / Around the world, there are recorded over 3 million accident involving bites of venomous animals per year, of which 125 to 150 thousand culminate in death. In Brazil, most cases occur with snakes from Bothrops and Bothropoides genus, causing several local and systemic complications, such myotoxicity, disseminated intravascular coagulation, cytotoxicity, acute renal failure and sepsis. Bothropoides insularis is a snake from Queimada Grande Island, whose venom shows pronounced toxicity. However, its effect over cells with defense function remains unclear, as well as how these effects can influence the toxicity observed in vivo. The present study aimed to investigate the cellular changes induced by Bothropoides insularis whole venom (BinsVT) over murine macrophage from RAW 264.7 lineage. In this context, colorimetric tests were performed to determine proteolytic activity and the production of hydrogen peroxide in vitro. The results showed high catalytic activity in both tests, suggesting that the biological effects of this venom may be related to the presence of enzymes such metalloproteinases (svMPs) and L-amino acid oxidases (LAAOs) at concentrations relevant in these experimental conditions. The determination of the cytotoxic potential was conducted by MTT reduction assay, a method of assessing redox metabolism, after 2, 6, 12 and 24 hours of incubation. It was observed cytotoxic effect at high concentrations in a time-dependent way, with cell death more evident at 200 and 100 Âg/mL after 12 and 24 hours of treatment. In lower concentrations, there was a gradual increase in cell viability, reaching around 200% of cell viability in groups treated for 24 hours. This result suggests that BinsVT possess proliferative effect over these cells. Then, lactate dehydrogenase (LDH) activity was determined in culture supernatants from experimental groups for investigation of cell lysis induced by BinsVT. It was observed a significant increase in enzymatic activity in all groups, suggesting the coexistence of fractions with cytotoxic and proliferative effect and that concentration and exposure time determine its outcomes. For morphological evaluation of RAW 264.7 cells after exposure to BinsVT, the experiments were performed on the surface of coverslips for staining with May-Grunwald Giemsa method. The experimental groups were analyzed by optical microscopy and the most representative morphological characteristics were photographed. Various morphological changes were observed, such as appearance of cellular debris and bare nuclei, vacuolated cells, reduced cell volume and increased cytoplasmic projections. Finally, the mechanism of cell death induced by BinsVT was assessed by flow cytometry, by staining with propidium iodide (PI) and annexin V-FITC. The analysis revealed the presence of apoptosis and necrosis, and the appearance of doubly labeled cells with Annexin-FITC and PI, indicating the occurrence of late apoptosis. In conclusion, BinsVT has a cytotoxic effect on RAW 264.7 cell, which necrotic and apoptotic mechanisms, besides stimulatory effect on these cells in dose-and time-dependent ways. These effects may be related to the enzymatic activities found in vitro.
|
3 |
Synthetic studies on scytophycin C/total synthesis of swinholide AYeung, Kap-Sun January 1994 (has links)
No description available.
|
4 |
The total synthesis of (-)-pre-swinholide ASmith, J. D. January 1994 (has links)
No description available.
|
5 |
Novel analogues of CB 1954Somani, Hanif January 1996 (has links)
No description available.
|
6 |
Role of the host cell in the type III translocation of Pseudomonas aeruginosa exoenzyme SRucks, Elizabeth A. January 1900 (has links)
Thesis (Ph. D.)--West Virginia University, 2005. / Title from document title page. Document formatted into pages; contains xv, 205 p. : ill. (some col.). Vita. Includes abstract. Includes bibliographical references (p. 163-190).
|
7 |
Enterotoxina citotoxica termo estavel produzida por Aeromonas caviae isoladas de surto de diarreia aguda em crianças na cidade de São Bento do Una - PE / Eterotoxin cytotoxic thermo stables produced by Aeromanas caviae isolated from diarrheic stools in children on the city of São Bento do Una - PELopes, Ana Carolina Amaral 06 August 2009 (has links)
Orientador: Tomomasa Yano / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias / Made available in DSpace on 2018-08-13T16:19:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Lopes_AnaCarolinaAmaral_M.pdf: 3074203 bytes, checksum: 0f5613fc1b5f356261b1158697b4d8c1 (MD5)
Previous issue date: 2009 / Resumo: Neste estudo foram analisadas 20 amostras de Aeromonas caviae, isoladas no Estado de Pernambuco, de fezes diarréicas, quanto à produção de fatores de virulência. Os isolados bacterianos apresentaram atividade hemolítica quando crescidos em placas de ágar sangue, porém quando analisados os sobrenadantes de cultura destas bactérias, a presença de hemolisinas não foi detectada. Foram observadas entre as amostras as presenças de enterotoxinas em camundongos recém-nascidos e de citotoxinas em células Vero, HeLa e CaCo-2. Essas atividades biológicas foram mantidas após aquecimento à 100ºC por 30 minutos, mostrando ser termo-estável. Ensaios de viabilidade celular conduzidos com células Vero demonstraram, no ensaio com vermelho neutro, uma redução de 50% após 6 horas de exposição dos sobrenadantes de cultura. Nos ensaios com MTT e LDH, as reduções na viabilidade apresentaram-se após 4 e 2 horas respectivamente. O desarranjo do citoesqueleto foi verificado em ensaios onde a faloidina conjugada com fluoresceína (FITC) foi empregada, revelando que os sobrenadantes de cultura provocaram contração e desordenamento dos filamentos de actina. Através de PCR foi verificado que as amostras de A. caviae não apresentaram amplificação para o gene Aer, responsável pela codificação da aerolisina, uma toxina termo-lábil de Aeromonas, o que demonstra que a toxina termoestável e a aerolisina são fatores de virulência diferentes. / Abstract: In this study we worked with 20 Aeromonas caviae samples isolated in the state of Pernambuco and associated to diarrheic stools. The samples were analysed for the production of virulence factors, as the bacterial isolates showed haemolytic activity when grown on blood agar plates, but when analyzed the culture supernatants, the presence of haemolysin wasn't detected. The presence of enterotoxins were observed among the samples by suckling mouse test and cytotoxins on Vero cells, HeLa and CaCo-2. The biological activities were kept after the heat treatment at 100ºC for 30 minutes, showing it to be thermo stable. Cell viability tests conducted with neutral red dye on Vero cells demonstrated a 50% reduction on cell viability after 6 hours of toxin exposure, what was confirmed by the MTT and LDH assays, where the cell viability reduction was presented after 4 and 2 hours respectively. The cytoskeleton disorders provoked by the enterotoxin were observed in trials where the fluorescein conjugated phalloidine (FITC) was used, showing that the culture supernatants caused contraction and lack of actin filaments. Tests to "aerolysin" gene detection were performed with the samples, but the amplification of this gene has not been verified. According to these results and by the fact that aerolysin is a thermo labile toxin, it shows that aerolysin and the thermo stable toxin produced by A. caviae are different. / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica
|
8 |
Fator citotóxico vacuolizante (VCF) produzido por Aeromonas veronii biovar sóbria inibe o crescimento de células tumorais humanas / Vacuolating cytotoxic factor (VCF) produced by Aeromonas veronii biovar sóbrias inhibits growth of human tumor cellsOliveira, Luciana, 1982- 24 August 2018 (has links)
Orientador: Tomomasa Yano / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T08:32:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Oliveira_Luciana_M.pdf: 438742 bytes, checksum: a5f9e3b963ae7457238c742a983b8733 (MD5)
Previous issue date: 2013 / Resumo: Aeromonas são bacilos Gram-negativos, anaeróbios facultativos, ermentadores, oxidase e catalase positivos, ubíquos em ambientes aquáticos e capazes de causar uma variedade de doenças em humanos, principalmente gastroenterite. As espécies mais comumente associadas com infecções em humanos são A. hydrophila, A.caviae e A. veronii biovar sobria. Entre os vários fatores de virulência descritos, Aerolisina é considerada um dos principais fatores de virulência do genero Aeromonas, sendo esta além de provocar a lise em eritrócitos de carneiro tem atividade enterotóxica. Recentemente foi descrito pelo nosso uma enterotoxina citotóxica denominada Fator Citotóxico Vacuolizante (VCF), diferente de Aerolisina biologica e molecularmente, no sobrenadante da cultura de Aeromonas veronni biovar sobria, isoladas de casos clinicos. O VCF purificado apresentou atividade citotóxica em linhagens de células tumorais humanas tais como, HEp-2, Caco-2, HeLa e NCI-H 292. No ensaio de efeito anti-proliferativo o VCF apresentou potencial atividade de inibição de crescimento de células tumorais NCI-ADR/RES, uma linhagem celular com resistência a múltiplas drogas de quimioterapia e K562, uma linhagem de células leucêmicas. Estes resultados sugerem que o VCF apresenta potencial toxigênico sobre células tumorais de origem humana / Abstract: Aeromonas is a Gram-negative, facultative anaerobic rod, fermenting, oxidase and catalase positive ubiquitous in fresh and brackish water and capable of causing several human diseases, specially gastroenteritis. The most important pathogens species associated with human infections are A. hydrophila, A. caviae, and A. veronii biovar sobria. Between the several virulence factors described, Aerolisin is considered as one of the main virulence factors of the Aeromonas genus, this one causing lysis in lamb erythrocytes and has an enterotoxic activity. Was recently described by our a citotoxic enterotoxin named as Vacuolating Cytotoxic Factor (VCF), differing biologicaly and molecularly from the Aerolisin, at the supernatant of a culture of A. veronii biovar sobria, isolated from clinic cases. The purified VCF presented citotoxic activitiy on lineages of human tumorous cells such as , HEp-2, Caco-2, HeLa and NCI-H 292. On the test antiproliferative effect the VCF presented a potencial activity of growth inhibition on tumour cells NCI-ADR/RES, a cellular lineage with resistance to multiple chemotherapy drugs and K562, a lineage of leukemic cells. This results sugests that the VCF presents toxigenic potencial over human tumorous cells / Mestrado / Clinica Medica / Mestra em Clínica Médica
|
9 |
Caracterização de efeito causado por citotoxina secretada por Escherichia coli associada à sepse em células endoteliais humanas / Characterization of effect caused by cytotoxin secreted by sepsis associated Escherichia coli in human endotelial cellsTibo, Luiz Henrique Soares, 1985- 03 May 2015 (has links)
Orientador: Tomomasa Yano / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-27T12:09:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Tibo_LuizHenriqueSoares_M.pdf: 5939486 bytes, checksum: b93497f16ad2e0392928acc05650e417 (MD5)
Previous issue date: 2015 / Resumo: O sobrenadante de cultivo de Escherichia coli isolada de pacientes com sepse (SEPEC) causou alongamento e perda de junção intercelular em células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC) em menos de 18 horas de incubação. O fator citotóxico envolvido foi purificado em sistema de cromatografia líquida (FPLC) a partir do sobrenadante da amostra SEPEC 15 e, através de eletroforese desnaturante (SDS-PAGE), foi observado que este fator tem massa molecular de aproximadamente 150kDa e é formado por pelo menos duas subunidades. Ensaios de transcitose em Transwell e a monitoração da permeabilidade de monocamada de células HUVEC, por meio de medições da resistência elétrica transendotelial (TEER), indicaram que este fator citotóxico auxilia a passagem de SEPEC através de monocamada de células HUVEC, cultivadas em insertos Transwell, no período de 30 minutos. Porém, quando incubadas com a citotoxina por mais de 30 minutos, as células HUVEC morrem devido à citotoxicidade do fator citotóxico. Estes resultados sugerem que esta citotoxina pode ser um importante fator de virulência de SEPEC, auxiliando o acesso deste patógeno à corrente sanguínea / Abstract: The culture supernatant of Escherichia coli isolated from patients with sepsis (SEPEC) caused elongation and loss of intercellular junction in endothelial cells of human umbilical vein (HUVEC) in less than 18 hours of incubation. The cytotoxic factor involved was purified by liquid chromatography system (FPLC) from the SEPEC 15 sample supernatant and, by denaturing electrophoresis (SDS-PAGE), it was found that this factor has a molecular mass of approximately 150kDa and is formed by the least two subunits. Transwell Transcytosis assays and monitoring the permeability of HUVEC monolayer by measurements of transendothelial electrical resistance (TEER) indicated that this cytotoxic factor helps SEPEC passing through HUVEC monolayer cells cultured in Transwell inserts, in a 30 minutes period. However, when incubated with cytotoxin for more than 30 minutes, the HUVEC cells die due to the cytotoxicity of the cytotoxic factor. These results suggest that this cytotoxin can be an important virulence factor of SEPEC, assisting this pathogen access to the bloodstream / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Genética e Biologia Molecular
|
10 |
Type III secretion mediated translocation of effector exoenzymes by Pseudomonas aeruginosa /Sundin, Charlotta, January 2003 (has links)
Diss. (sammanfattning) Umeå : Univ., 2003. / Härtill 6 uppsatser.
|
Page generated in 0.0454 seconds