Introdução: Nos últimos anos têm-se demonstrado que a vitamina D desempenha um papel crucial em muitas doenças agudas e crônicas, não só afetando as condições ósseas, mas também aumentando o risco de fraturas, doenças auto-imunes e câncer. A influência da vitamina D nas doenças do fígado tem sido amplamente discutida já que esta sofre metabolismo hepático. Indivíduos com doenças hepáticas, e em especial com hepatite C crônica, apresentam maior prevalência de deficiência de vitamina D. Objetivos: Avaliar, em duas amostras distintas, a influência dos níveis séricos de vitamina D e/ou dos polimorfismos envolvidos na sua rota metabólica na progressão da doença hepática crônica causada pelo vírus C. Métodos: A primeira amostra consistiu de um estudo transversal com 132 pacientes com hepatite C crônica genótipo 1 do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Foi avaliada a influência de níveis séricos de vitamina D e dos polimorfismos rs7041 e rs4588 do gene GC no grau de fibrose hepática (escore METAVIR). As genotipagens foram feitas com ensaio TaqMan e as análises estatísticas foram realizadas no programa SPSS v.20.0. A segunda amostra consistiu da análise de dados extraídos da plataforma dbGaP. Foram investigados 681 pacientes com hepatite C crônica da coorte americana HALT-C, acompanhados pelo período quatro anos. Avaliou-se a relação de 40 polimorfismos dos genes DHCR7, GC, CYP2R1, CYP24A1, CYP27B1, VDR, SMAD3 e TGFB1 nos seguintes desfechos: piora da fibrose hepática; descompensação hepática (escore Child Pugh-Turcotte>7, ascite, encefalopatia hepática, peritonite bacteriana espontânea e/ou sangramento de varizes gastroesofágicas); desenvolvimento de carcinoma hepatocelular e morte do fígado. Os polimorfismos que não se encontravam disponíveis no banco de dados foram imputados com o programa Mach-Admix 2.0.203 e as análises foram no programa Plink 1.07 e foi realizada correção de Bonferroni. Nesta amostra, resultados com P<0,05 foram considerados 2 como tendência à associação. Resultados: Na amostra do HCPA, níveis diminuídos de vitamina D, bem como a deficiência grave de vitamina D, foram mais frequentes entre pacientes com fibrose intermediária/avançada (METAVIR 3 e 4). Embora os polimorfismos rs7041 e rs4588 e seus haplótipos tenham apresentado relação com os níveis séricos de vitamina D, estes não apresentaram associação com a gravidade da fibrose hepática. Na segunda amostra estudada, onze polimorfismos tiveram tendência à associação (P<0,05) com os desfechos analisados: quatro SNPs no gene DHCR7 com descompensação hepática (rs4944957, rs12800438, rs3829251 e rs4945008); dois no gene GC com piora da fibrose e morte do fígado (rs7041 e rs222020); dois no gene CYP2R1 com ascite ou carcinoma hepatocelular (rs7116978 e rs1562902); dois no gene VDR com sangramento de varizes gastresofágicas e carcinoma hepatocelular (rs4516035 e rs2239186); e um no gene SMAD3 com piora da fibrose e encefalopatia (rs2118610). Apenas um polimorfismo, rs1800469no gene TGFB1, apresentou associação com descompensação hepática após correção de Bonferroni (P<0,05/40). Conclusões: Nossos resultados demonstraram que níveis séricos menores de vitamina D estão associados à progressão da fibrose hepática na hepatite C crônica genótipo 1. Além disso, os onze polimorfismos da rota da vitamina D que apresentaram tendência à associação estatística, indicam que variantes genéticas da rota metabólica da vitamina D possuem fraca ou nenhuma relação com a progressão da hepatite C crônica, merecendo análises futuras. Já o polimorfismo rs1800469, do gene TGFB1, demonstrou potencial utilidade para auxiliar na identificação de pacientes com maior chance de descompensação hepática. / Introduction: In the past years it has been demonstrated that vitamin D plays a crucial role in many acute and chronic diseases, not only affecting bone conditions but increasing the chance of fractures, autoimmune diseases and cancer. Vitamin D influence in liver disease is also widely discussed since it undergoes trough hepatic metabolism. Subjects with liver diseases, especially chronic hepatitis C, present higher rates of vitamin D deficiency. Objectives: Evaluate, in two different samples, the influence of vitamin D serum levels and/or polymorphisms of vitamin D metabolic pathway in liver disease progression in patients with chronic hepatitis C. Methods: The first sample consisted of a transversal study with 132 patients from Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) with chronic hepatitis C genotype 1. We evaluated the influence of serum levels of vitamin D and rs7041 and rs4588 GC polymorphisms over liver fibrosis (METAVIR scoring). Genotyping was performed with TaqMan probes and statistical analyses were conducted using SPSS v.20.0. The second sample was extracted from HALT-C cohort available in dbGap plataform. It included 681 patients with chronic hepatitis C, followed for 4 years. Forty polymorphisms in DHCR7, GC, CYP2R1, CYP24A1, CYP27B1, VDR, SMAD3 and TGFB1 genes were analyzed with the following outcomes: worsening of fibrosis; hepatic decompensation (gastric/esophageal bleeding, CTP > 7, ascites, spontaneous bacterial peritonitis, and/or encephalopathy); development of hepatocellular carcinoma; and liver death. Polymorphisms not available in dbGaP data were imputed using Mach-Admix 2.0.203 software and analyses were performed in Plink v.1.07 and a Bonferroni’s correction was performed. Results with P<0.05 were considered as having tendency towards association. Results: In HCPA sample low serum vitamin D, as well as severe vitamin D deficiency, were more frequent among patients with intermediate/severe fibrosis (METAVIR 3 and 4). Although rs7041 and rs4588 4 polymorphisms and its haplotypes presented association with serum levels of vitamin D, they were not associated with severity of liver fibrosis. In sample two, eleven polymorphisms presented tendency towards association (P<0.05) with the studied outcomes: four SNPs in DHCR7 with hepatic decompensation (rs4944957, rs12800438, rs3829251 and rs4945008); two in GC with worsening of fibrosis and liver death (rs7041 and rs222020); two in CYP2R1 with ascites or hepatocellular carcinoma (rs7116978 and rs1562902); two in VDR with gastric/esophageal bleeding and hepatocellular carcinoma (rs4516035 and rs2239186); and one in SMAD3 with worsening of fibrosis and encephalopathy (rs2118610). Only one polymorphism, rs1800469 in TGFB1, showed statistical significance with hepatic decompensation after Bonferroni’s correction (P<0.05/40). Conclusions: Our results demonstrated that low serum vitamin D has association with fibrosis progression in chronic hepatitis C genotype 1. Also, the eleven polymorphisms with tendency towards association indicate that genetic variants in vitamin D pathway possess weak or none relation with progression of chronic hepatitis C, deserving future analyses. Finally, polymorphism rs1800469 in TGFB1 demonstrated potential utility to help identify patients with higher odds of hepatic decompesantion.

Orientador : Prof. Dr. Jaime Kulak Junior / Coorientador : Prof. Dr. Almir Antônio Urbanetz / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Tocoginecologia. Defesa : Curitiba, 02/06/2017 / Inclui referências : f. 73-80 / Resumo: A hipovitaminose D é um problema de saúde mundial, atingindo todas as faixas etárias e diversos grupos de risco. Em gestantes baixas concentrações séricas de vitamina D (Vit.D) estão associadas a possíveis complicações materno-fetais. No Brasil, a avaliação da concentração sérica de Vit.D não faz parte da rotina de exames do pré-natal. Este estudo teve como objetivo principal avaliar as concentrações séricas de Vit.D em gestantes de Curitiba e região metropolitana, atendidas em hospitais terciários. Realizou-se um estudo observacional transversal analítico, coletando dados sociodemográficos, epidemiológicos e clínicos. Foram coletadas amostras de sangue de 520 gestantes atendidas nos ambulatórios de pré-natal do Complexo Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná e do Hospital Universitário Evangélico de Curitiba, sendo 256 delas coletadas no verão e 264 no inverno, em 2016. As gestantes foram divididas em grupos de risco gestacional: Doença hipertensiva específica da gestação (DHEG), diabetes mellitus gestacional (DMG) e soropositivas ao vírus da imunodeficiência humana (HIV+) e um grupo controle de baixo risco composto de gestantes sem enfermidades. As amostras de sangue coletadas foram analisadas pelo método de quimioluminescência (Architect i2000SR Abbott, Illinois, USA). Para classificação das concentrações séricas de Vit.D foram utilizados os critérios da Endocrine Society. Os dados foram analisados estatisticamente com auxílio dos programas Stata v.13.1. (Texas, EUA). A idade média das gestantes foi de 29,5 ± 6,1 anos, a maioria multíparas, a idade gestacional média foi de 32,1 ± 6,4 semanas, 57,8% das gestantes com ensino médio completo, 57,6% com renda familiar mensal de 1 a 3 salários mínimos, 52,1% se autodeclararam da etnia branca e 45,5% das gestantes foram classificadas com o tipo de pele tipo II segundo Fitzpatrick. Na população estudada, em geral a média da concentração sérica de Vit.D foi de 22,5 ± 8,7 ng/ml, sendo de 26,7 ± 7,8 ng/mL no verão e de 18,3 ± 7,5 ng/mL no inverno (p<0,001). Os resultados demonstraram que a prevalência de hipovitaminose D durante o verão e inverno foi de 71,2% e 92,4% respectivamente para o grupo de alto risco (p<0,001) e de 64,7% e 87,0% (p<0,011) para o grupo de baixo risco. Encontramos uma alta prevalência de hipovitaminose D na população estudada: 69,9% no verão e com aumento significativo no inverno de 91,3% (p<0,001). Palavras-chave: Vitamina D. Insuficiência. Deficiência. Gestação. / Abstract: Hypovitaminosis D is a global health problem reaching all age groups and several at-risk populations. Low vitamin (Vit.D) concentrations in pregnant women are associated with possible maternal-fetal complications. In Brazil, the evaluation of serum Vit.D concentration is not part of routine prenatal examinations. The objective of this study was to evaluate serum concentrations of Vit.D in pregnant women in the city of Curitiba-Brazil and metropolitan region, in tertiary hospitals. An observational cross-sectional study was carried out, collecting demographic, epidemiological and clinical data. Blood samples were collected from 520 pregnant women attended at the prenatal outpatient clinics of the Complexo Hospital de Clínicas of the Federal University of Paraná and the Hospital Universitário Evangélico de Curitiba, of which 256 were collected in the summer and 264 in the winter, in 2016. The pregnant women were divided into gestational risk groups: preeclampsia (PE), gestational diabetes mellitus (GDM) and seropositive human immunodeficiency virus (HIV+), and a low-risk control group composed of pregnant women without diseases. The blood samples collected were analyzed by the chemiluminescence method (Architect i2000SR Abbott, Illinois, USA). The Endocrine Society criteria were used to classify Vit.D serum concentrations. The data were statistically analyzed using Stata v.13.1 (Texas, USA). The mean age of the pregnant women was 29.5 ± 6.1 years, the majority of them multiparous, the mean gestational age was 32.1 ± 6.4 weeks, 57.8% of the pregnant women with full high school educational level, 57.6% with monthly family income of 1 to 3 minimum wages, 52.1% declared themselves to be white and 45.5% of pregnant women were classified as type II skin according to Fitzpatrick. In the studied population, the mean serum concentration of Vit.D was 22.5 ± 8.7 ng/mL, being 26.7 ± 7.8 ng/mL in the summer and 18.3 ± 7.5 ng/mL in the winter (p<0.001). The results showed that the prevalence of hypovitaminosis D during summer and winter was 71.2% and 92.4% respectively for the high-risk group (p<0.001) and 64.7% and 87.0% (p<0.011) for the low-risk group. We found a high prevalence of hypovitaminosis D in the study population, 69.9% in the summer and with a significant increase in the winter 91.3% (p<0.001). Key-words: Vitamin D. Insuficiency. Deficiency. Pregnancy.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2015. / Submitted by Guimaraes Jacqueline (jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2016-03-15T14:11:59Z No. of bitstreams: 1 2015_ViniciusMedinaLopes.pdf: 1095876 bytes, checksum: 0ea020807ed4a39d86ba901916cbe944 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2016-03-15T14:12:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_ViniciusMedinaLopes.pdf: 1095876 bytes, checksum: 0ea020807ed4a39d86ba901916cbe944 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-15T14:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_ViniciusMedinaLopes.pdf: 1095876 bytes, checksum: 0ea020807ed4a39d86ba901916cbe944 (MD5) / Introdução. A literatura médica é escassa no que se refere à avaliação da prevalência de hipovitaminose D no Brasil. Esta vitamina apresenta importante função em diversos processos metabólicos e lhe foi atribuída uma possível influência no processo reprodutivo e, em especial, na fisiologia reprodutiva da mulher. Não está esclarecido, entretanto, se existe associação entre concentrações séricas baixas de vitamina D e infertilidade feminina. Objetivos. Avaliar a prevalência de hipovitaminose D em mulheres inférteis e a relação da concentração sérica da vitamina D com os fatores de infertilidade. Métodos. Este é um estudo transversal de caso-controle. Os resultados das dosagens de vitamina D, realizadas entre primeiro de janeiro de 2012 e quinze de maio de 2012, foram o objeto desse estudo. A dosagem da vitamina D foi solicitada na primeira consulta para todas as pacientes inférteis em investigação, em um centro privado de reprodução assistida em Brasília, DF, Brasil. O grupo controle foi formado por mulheres atendidas nesta mesma clínica, sem queixas de infertilidade. Foi considerada deficiência de vitamina D quando a concentração da mesma estava abaixo de 20 ng/mL e insuficiência entre 20 e 30 ng/mL. Para analisar a influência da idade sobre a comparação entre as médias da concentração de vitamina D nos grupos foi realizado regressão logística de multivariáveis. Resultados. Entre as 369 mulheres avaliadas em idade fértil, 81,1% apresentaram algum grau de hipovitaminose D e, 32%, deficiência da vitamina. Não foi encontrada diferença entre a prevalência de deficiência de vitamina D nas pacientes inférteis (30,2%) e no grupo controle (35%) (p=0,33). Não se observaram diferenças significativas entre as médias das concentrações da vitamina D entre os grupos de inférteis (24,3 ± 7,9 ng/mL) e controles (23,8 ± 8,7 ng/mL) (p = 0,51). Não houve influência da idade nesse resultado. Não foi encontrada diferença estatística, quando se comparou as médias das concentrações de vitamina D de pacientes inférteis, de acordo com o fator de infertilidade, ou quando estas médias foram comparadas com o grupo controle. Conclusão. Concluímos que existe alta prevalência de hipovitaminose D nas mulheres inférteis consultadas. Não houve diferença na média das concentrações séricas entre as mulheres inférteis avaliadas e das mulheres sem esta queixa. Nenhum fator de infertilidade se associou a maior risco para que a mulher apresentasse concentrações mais baixas de vitamina D. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction. Publications about the prevalence of vitamin D deficiency in Brazilian population are rare. Vitamin D plays an important role in several metabolic processes, including a possible influence on women's reproductive physiology. Therefore, it is expected that the inadequate serum concentration of vitamin D might be involved with infertility factors. Objective. The aim of this study was to determine the prevalence of hypovitaminosis D in infertile patients that were examined at a clinic specialized in assisted reproduction in Brasilia, DF, Brazil. Our secondary objectives were to verify if serum concentrations of vitamin D in infertile women differ from those without infertility and to assess whether vitamin D serum concentration is influenced by the infertility factor. Methods. This is a cross-sectional case-control study. Vitamin D was measured from 01/01/2012 to 05/05/2012 in infertile women and in those without this complaint, who served as the control group. Subjects came from a private center of assisted reproduction, in Brasília-DF. Levels of vitamin D below 20 ng/mL were considered as deficiency, between 21 and 30 ng/mL as insufficiency, and normal when it was over 30 ng/mL. To analyze the vitamin D levels between controls and infertile women, adjusted by age, multivariate logistic regression was obtained. Results. Among the 369 women evaluated, 81.1% of them shown hypovitaminosis D and 32%, deficiency. There was no difference between the prevalence of vitamin D deficiency in infertile patients (30.2%) and in the control group (35%) (p = 0.33). The same occurred relatively to the mean vitamin D concentrations in infertile women (24.3 ± 7.9 ng/mL) and in the control group (23.8 ± 8.7 ng/mL) (p = 0.51), even when adjusted by age. Besides, there were no statistical differences in the mean vitamin D concentrations in infertile women when infertility factors were compared among them and also between each infertility factor group and the control group. Conclusions. It was observed a high proportion of infertile women with vitamin D deficiency. There was no difference between the prevalence of vitamin D deficiency in infertile patients and in the control group. There wasn’t an infertility factor associated to lower levels of vitamin D.

Introdução: Nos últimos anos têm-se demonstrado que a vitamina D desempenha um papel crucial em muitas doenças agudas e crônicas, não só afetando as condições ósseas, mas também aumentando o risco de fraturas, doenças auto-imunes e câncer. A influência da vitamina D nas doenças do fígado tem sido amplamente discutida já que esta sofre metabolismo hepático. Indivíduos com doenças hepáticas, e em especial com hepatite C crônica, apresentam maior prevalência de deficiência de vitamina D. Objetivos: Avaliar, em duas amostras distintas, a influência dos níveis séricos de vitamina D e/ou dos polimorfismos envolvidos na sua rota metabólica na progressão da doença hepática crônica causada pelo vírus C. Métodos: A primeira amostra consistiu de um estudo transversal com 132 pacientes com hepatite C crônica genótipo 1 do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). Foi avaliada a influência de níveis séricos de vitamina D e dos polimorfismos rs7041 e rs4588 do gene GC no grau de fibrose hepática (escore METAVIR). As genotipagens foram feitas com ensaio TaqMan e as análises estatísticas foram realizadas no programa SPSS v.20.0. A segunda amostra consistiu da análise de dados extraídos da plataforma dbGaP. Foram investigados 681 pacientes com hepatite C crônica da coorte americana HALT-C, acompanhados pelo período quatro anos. Avaliou-se a relação de 40 polimorfismos dos genes DHCR7, GC, CYP2R1, CYP24A1, CYP27B1, VDR, SMAD3 e TGFB1 nos seguintes desfechos: piora da fibrose hepática; descompensação hepática (escore Child Pugh-Turcotte>7, ascite, encefalopatia hepática, peritonite bacteriana espontânea e/ou sangramento de varizes gastroesofágicas); desenvolvimento de carcinoma hepatocelular e morte do fígado. Os polimorfismos que não se encontravam disponíveis no banco de dados foram imputados com o programa Mach-Admix 2.0.203 e as análises foram no programa Plink 1.07 e foi realizada correção de Bonferroni. Nesta amostra, resultados com P<0,05 foram considerados 2 como tendência à associação. Resultados: Na amostra do HCPA, níveis diminuídos de vitamina D, bem como a deficiência grave de vitamina D, foram mais frequentes entre pacientes com fibrose intermediária/avançada (METAVIR 3 e 4). Embora os polimorfismos rs7041 e rs4588 e seus haplótipos tenham apresentado relação com os níveis séricos de vitamina D, estes não apresentaram associação com a gravidade da fibrose hepática. Na segunda amostra estudada, onze polimorfismos tiveram tendência à associação (P<0,05) com os desfechos analisados: quatro SNPs no gene DHCR7 com descompensação hepática (rs4944957, rs12800438, rs3829251 e rs4945008); dois no gene GC com piora da fibrose e morte do fígado (rs7041 e rs222020); dois no gene CYP2R1 com ascite ou carcinoma hepatocelular (rs7116978 e rs1562902); dois no gene VDR com sangramento de varizes gastresofágicas e carcinoma hepatocelular (rs4516035 e rs2239186); e um no gene SMAD3 com piora da fibrose e encefalopatia (rs2118610). Apenas um polimorfismo, rs1800469no gene TGFB1, apresentou associação com descompensação hepática após correção de Bonferroni (P<0,05/40). Conclusões: Nossos resultados demonstraram que níveis séricos menores de vitamina D estão associados à progressão da fibrose hepática na hepatite C crônica genótipo 1. Além disso, os onze polimorfismos da rota da vitamina D que apresentaram tendência à associação estatística, indicam que variantes genéticas da rota metabólica da vitamina D possuem fraca ou nenhuma relação com a progressão da hepatite C crônica, merecendo análises futuras. Já o polimorfismo rs1800469, do gene TGFB1, demonstrou potencial utilidade para auxiliar na identificação de pacientes com maior chance de descompensação hepática. / Introduction: In the past years it has been demonstrated that vitamin D plays a crucial role in many acute and chronic diseases, not only affecting bone conditions but increasing the chance of fractures, autoimmune diseases and cancer. Vitamin D influence in liver disease is also widely discussed since it undergoes trough hepatic metabolism. Subjects with liver diseases, especially chronic hepatitis C, present higher rates of vitamin D deficiency. Objectives: Evaluate, in two different samples, the influence of vitamin D serum levels and/or polymorphisms of vitamin D metabolic pathway in liver disease progression in patients with chronic hepatitis C. Methods: The first sample consisted of a transversal study with 132 patients from Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) with chronic hepatitis C genotype 1. We evaluated the influence of serum levels of vitamin D and rs7041 and rs4588 GC polymorphisms over liver fibrosis (METAVIR scoring). Genotyping was performed with TaqMan probes and statistical analyses were conducted using SPSS v.20.0. The second sample was extracted from HALT-C cohort available in dbGap plataform. It included 681 patients with chronic hepatitis C, followed for 4 years. Forty polymorphisms in DHCR7, GC, CYP2R1, CYP24A1, CYP27B1, VDR, SMAD3 and TGFB1 genes were analyzed with the following outcomes: worsening of fibrosis; hepatic decompensation (gastric/esophageal bleeding, CTP > 7, ascites, spontaneous bacterial peritonitis, and/or encephalopathy); development of hepatocellular carcinoma; and liver death. Polymorphisms not available in dbGaP data were imputed using Mach-Admix 2.0.203 software and analyses were performed in Plink v.1.07 and a Bonferroni’s correction was performed. Results with P<0.05 were considered as having tendency towards association. Results: In HCPA sample low serum vitamin D, as well as severe vitamin D deficiency, were more frequent among patients with intermediate/severe fibrosis (METAVIR 3 and 4). Although rs7041 and rs4588 4 polymorphisms and its haplotypes presented association with serum levels of vitamin D, they were not associated with severity of liver fibrosis. In sample two, eleven polymorphisms presented tendency towards association (P<0.05) with the studied outcomes: four SNPs in DHCR7 with hepatic decompensation (rs4944957, rs12800438, rs3829251 and rs4945008); two in GC with worsening of fibrosis and liver death (rs7041 and rs222020); two in CYP2R1 with ascites or hepatocellular carcinoma (rs7116978 and rs1562902); two in VDR with gastric/esophageal bleeding and hepatocellular carcinoma (rs4516035 and rs2239186); and one in SMAD3 with worsening of fibrosis and encephalopathy (rs2118610). Only one polymorphism, rs1800469 in TGFB1, showed statistical significance with hepatic decompensation after Bonferroni’s correction (P<0.05/40). Conclusions: Our results demonstrated that low serum vitamin D has association with fibrosis progression in chronic hepatitis C genotype 1. Also, the eleven polymorphisms with tendency towards association indicate that genetic variants in vitamin D pathway possess weak or none relation with progression of chronic hepatitis C, deserving future analyses. Finally, polymorphism rs1800469 in TGFB1 demonstrated potential utility to help identify patients with higher odds of hepatic decompesantion.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-10-06T19:45:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação SEM ASSINATURAS digital 15 agosto.pdf: 2546414 bytes, checksum: 1e36b1b598390d7b76a91504316b19ff (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-06T19:45:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação SEM ASSINATURAS digital 15 agosto.pdf: 2546414 bytes, checksum: 1e36b1b598390d7b76a91504316b19ff (MD5) Previous issue date: 2016-05-31 / Avaliar associação de deficiência de vitamina D com risco cardiovascular e risco de insuficiência cardíaca em idosos atendidos em ambulatório de cardiologia. Estudo de corte transversal com abordagem analítica. Foram coletados dados de prontuários de pacientes com idade a partir dos 60 anos, no Núcleo de Atenção ao Idoso e no ambulatório de cardiologia, do Hospital das Clínicas da UFPE do período de agosto a novembro de 2015. As variáveis dependentes (Sheffield e o risco de insuficiência cardíaca avaliado pelo questionário ABC), e a independente, a deficiência de vitamina D. A idade, sexo, escolaridade, etnia, hipertensão, diabetes mellitus, hipotireoidismo, insuficiência renal, demência, acidente vascular cerebral, dislipidemia, depressão, tabagismo, etilismo, obesidade, andropausa, arritmia cardíaca foram consideradas intervenientes. Na análise dos dados, para testar a associação entre as variáveis foram empregados o teste Qui-quadrado de Pearson e o teste exato de Fisher. Na análise logística multivariada admitiu-se ponto de corte p-valor≤ 0,20, fornecido pela análise bivariada. No modelo de regressão logística foi utilizado o método stepwise. Para análise da significância das variáveis foi feita utilizando-se o teste Wald e para a associação entre o risco cardiovascular e o de insuficiência cardíaca foi utilizado o teste Qui-quadrado. Dentre os 137 idosos, mulheres (75,9%), sobrepeso (48,2%) ou obesidade (30,6%); aumento do índice cintura/quadril (88,3%) e dislipidemia (94,2%). Identificou-se 91,2% hipertensos; 35,0% com doença coronariana definida ou possível e 27,7% com arritmia cardíaca ou hipertrofia de ventrículo esquerdo. 65% dos idosos tinham deficiência de vitamina D, com maiores riscos: sexo masculino (OR: 3,94; IC 95%=1,41-11,04; p=0,006), faixa etária ≤70 anos (OR:2,06; IC 95% =1,01-4,20; p=0,04); tabagistas (OR: 5,0; IC95% =2,02-12,34; p=0,000); obesos (OR: 8,19; IC95%=2,71-24,78; p=0,000); diabéticos (OR: 3,39; IC 95%=1,50-7,64; p=0,002), com pontuação compatível com demência (OR: 4,79; IC 95% =1,56-14,66; p= 0,003); depressão (OR: 2,679; IC 95% =1,155-6,214; p=0,02), arritmia cardíaca (OR: 2,54; IC 95%=1,05-6,11; p=0,034), doença coronariana (OR:15,34; IC 95%=4,43-53,03; p=0,000); hipertrofia ventricular esquerda ou redução da fração de ejeção ventricular esquerda (OR: 33,44; IC95%= 4.41-253,37; p=0,000). 56,9% dos idosos apresentaram risco aumentado de insuficiência cardíaca e 67,2% tinham alto risco cardiovascular. Houve associação entre ambos os riscos (p<0,001). O risco de insuficiência cardíaca esteve associado significativamente à deficiência de vitamina D (OR:4,53; IC95%=1,94-10,59; p=0,000); sexo masculino (OR: 15,32; IC 95%=3,39-69,20; p=0,000); obesidade (OR: 4,17; IC95%=1,36-12,81; p= 0,012); arritmia cardíaca (OR 3,69; IC 95% = 1,23-11,11; p=0,020). O risco cardiovascular foi fortemente associado com deficiência de vitamina D (OR: 4,53; IC95% = 1,94-10,59; p=0,000); baixa escolaridade (OR: 1,91;IC 95%=0,81-4,48; p=0,134); depressão (OR:3,22;IC95%=1,14-9,09; p=0,027) e obesidade (OR: 3,03;IC95%=0,98-9,37;p=0,054). Houve alta prevalência de deficiência de vitamina D nos idosos e forte associação entre deficiência de vitamina D e aumento dos riscos cardiovascular e de insuficiência cardíaca nesta população. / To assess vitamin D deficiency associated with cardiovascular risk and risk of heart failure in elderly patients in outpatient cardiology clinics. Cross-sectional study with analytical approach. Data were obtained from files of patients older than 60, in the Care Center for Aged People and in the Cardiology Ambulatory of the Clinic Hospital of the Federal University of Pernambuco, the period from August to November 2015. The dependent variables (Sheffield and risk of heart failure as appraised by the ABC questionnaire), while the independent variable is the vitamin D deficiency. Age, gender, level of education, ethnic group, hypertension, diabetes mellitus, hypothyroidism, renal failure, dementia, stroke, dyslipidemia, cardiac arrhythmia, depression, smoking, alcoholism, obesity, andropause were intervening variables. In the data analysis, to test the association between variables were used the chi-square test of Pearson and Fisher's exact test. In multivariate logistic analysis was admitted to p-point valor≤ 0.20 cut, provided by bivariate analysis. In the logistic regression model was used the stepwise method. To analyze the significance of the variables was made using the Wald test and the association between cardiovascular risk and heart failure was performed using Chi-square test. Of the 137 elderly women (75.9%), overweight (48.2%) or obese (30.6%); increasing the index waist / hip (88.3%) and lipids (94.2%). It was identified 91.2% hypertensive; 35.0% with definite or possible coronary artery disease and 27.7% with cardiac arrhythmia or left ventricular hypertrophy. 65% of the elderly were deficient in vitamin D, with higher risks: males (OR: 3.94; 95% CI = 1.41 to 11.04, p = 0.006), age ≤70 years (OR: 2.06; 95 % = from 1.01 to 4.20; p = 0.05); smokers (OR: 5.0; 95% CI = 2.02 to 12.34, p = 0.000); obese (OR: 8.19, 95% CI 2.71 to 24.78; p = 0.000); diabetes (OR: 3.39; 95% CI = 1.50 to 7.64; p = 0.003), with scores compatible with dementia (OR: 4.79; 95% CI = 1.56 to 14.66; p = 0.003); depression (OR: 2.679; 95% CI = 1.155 to 6.214; p = 0.02), cardiac arrhythmia (OR: 2.54; 95% CI = 1.05 to 6.11; p = 0.045), coronary heart disease ( OR: 15.34; 95% CI = 4.43 to 53.03, p = 0.000); left ventricular hypertrophy or reduced left ventricular ejection fraction (OR: 33.44; 95% CI = 4.41-253,37; p = 0.000). The sample revealed 56,9% of the aged with increased risk of heart failure and 67,2% with high cardiovascular risk. Association between both risks became clear (p < 0.001). The risk of heart failure was significantly associated with vitamin D deficiency (OR 12.19, 95% CI 4.23 - 35.16; p = 0.000); male (OR: 15.32; 95% CI = 3.39 - 69.20, p = 0.000); obese (OR: 4.17, 95% CI 1.36- 12.81; p = 0.012); cardiac arrhythmia (OR 3.69, 95% CI = 1.23 to 11.11, p = 0.020). Cardiovascular risk was strongly associated with vitamin D deficiency (OR: 4.53, 95% CI 1.94 - 10.59; p = 0.000); low educational level (OR: 1.91; 95% CI = 0.81- 4.48; p = 0.134); depression (OR: 3.22; 95% CI = 1.14 - 9.09; p = 0.027) and obesity (OR: 3.03; 95% CI = 0.98 - 9.37; p = 0.054). There was a high prevalence of vitamin D deficiency in the elderly and strong association between vitamin D deficiency and increased cardiovascular risk and heart failure in this population.

Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T00:52:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ramenzoni_LizaLima_D.pdf: 1680205 bytes, checksum: 6080ff087e6c9a65c1f6a082b0ad1d36 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O gene PAX9, pertencente à família Pax, é amplamente expresso em vários tecidos craniofaciais durante o desenvolvimento. Sabe-se que mutações neste gene em humanos causam fenótipo de oligodontia, afetando os dentes molares e segundos pré-molares. Grande variedade de agentes fisiológicos e farmacológicos externos podem ter impacto relevante na regulação da atividade transcricional de genes modulando fatores de transcrição. A presente tese focaliza o estudo da região 5'do gene PAX9 humano e tem como objetivo analisar a influência da dexametasona, ácido retinóico e ergocalciferol (vitamina D2) na atividade transcricional de sua região promotora, utilizando construções em vetor plasmideano que dirige a transcrição do gene da luciferase de vagalume (Photinus pyralis, pGL3 basic vector). Para ensaios de transcrição, foram amplificados através de ensaios com transcriptase reversa, transcritos do gene PAX9 de células mamárias de adenocarcinoma MCF-7 e células odontoblastóides de camundongo MDPC23. Estes transcritos foram quantificados através de PCR quantitativo. Fragmentos da região promotora do gene PAX9 humano de 1198pb (-1106 - +92), 843pb (-751- +92) e 691bp (-1106 - +92 com deleção de 507pb nos sítios -645 e -138) foram recombinados com vetor de expressão pGL3Basic e denominados PAX9-pGL3B1, PAX9-pGL3B2 e PAX9-pGL3B3, respectivamente. As contruções foram transfectadas em cultura de células mamárias de adenocarcinoma MCF-7 e células odontoblastóides de camundongo MDPC23. Todas as placas de cultura foram submetidas à ação de três drogas: dexametasona (DEX), ácido retinóico (RE) e ergocalciferol (VITD2). Após lise das células, os níveis relativos de expressão da proteína luciferase foram analisados com o uso do kit Dual-Glo Luciferase em luminômetro. Os resultados referentes às células mamárias de adenocarcinoma MCF-7 mostraram que: 1) Altas concentrações de ácido retinóico aumentaram a síntese de RNA mensageiro transcrito. 2) Fragmentos do promotor PAX9 de 1198pb (PAX9-pGL3B1) e 843pb (PAX9-pGL3B2) foram ativados na presença de ácido retinóico mas suas transcrições desestimuladas na presença da dexametasona e ergocalciferol. 3) A atividade da luciferase na construção PAX9-pGL3B2 foi mais fraca que outras duas construções, indicando que a sequência -1106 and -751 ou 355pb era importante para a atividade transcricional. 4) Fragmento do promotor clivado nos sítios -645 e -138 com deleção de 507pb (PAX9-pGL3B3) foi ativado negativamente somente na presença do ergocaciferol, enquanto que com a dexametasona e ácido retinóico o mesmo não foi afetado. Quanto às células odontoblastóides de camundongo MDPC23, os resultados mostraram que: 1) Todas as concentrações de ergocalciferol influenciaram positivamente a síntese de RNA mensageiro transcrito. 2) A atividade promotora das construções PAX9-pGL3B1 e PAX9-pGL3B2 foi aumentada com baixa concentração de dexametasona e ergocaciferol enquanto que alta concentração diminuiu esta atividade. 3) Na construção PAX9-pGL3B3, todas concentrações de ergocaciferol influenciaram a transcrição do promotor negativamente, enquanto que com a dexametasona e ácido retinóico, a mesma não foi afetada. Concluímos que as drogas dexametasona, ácido retinóico e ergocalciferol podem modular a expressão do gene PAX9. A região de 507pb deletada do promotor do gene PAX9 humano pode conter sítios de ligação para receptores do ácido retinóico e dexametasona. / Abstract: PAX9, member of the family homeobox, has important functions in embryogenesis and it is widely expressed in various craniofacial tissues during development. PAX9 mutations in human families cause autosomal dominant oligodontia, characterized by the absence of permanent molars and pre-molars. A great variety of physiological or pharmacological environmental factors may have impact on downstream signaling cascades and transcriptional regulation of gene modulating transcription factors. This work focused on the analysis on the 5'-flanking region of the PAX9 gene studying the influence of retinoic acid, dexamethasone and vitamin D on the expression of PAX9 by expression constructs that carry the reporter gene luciferase (Photinus pyralis, pGL3 basic vector). In the present study, we have PCR amplified cDNAs encoding mouse Pax9 from Mouse Odontoblast Cell-Like-23 (MDPC23) and PAX9 from Human breast adenocarcinoma (MCF-7) and quantified by Quantitative PCR. We examined the transcriptional activity of human PAX9 promoter from constructions: 1) PAX9-pGL3B1 construct clone PAX9 gene promoter 1198bp from -1106 upstream to +92 downstream of translation start site (ATG). 2) PAX9-pGL3B2 construct clone PAX9 gene promoter 843bp from -751 upstream of translation start site (ATG) to +92 downstream of translation start site (ATG). 3) PAX9-pGLB3 construct clone PAX9 gene promoter 691bp from -1106 upstream of translation start site (ATG) to +92 downstream of translation start site (ATG) using deletion of 507bp in restriction sites (-645 and -138) of ApaI enzyme. These constructions were transfected into Mouse Odontoblast Cell-Like-23 (MDPC23) and PAX9 from Human breast adenocarcinoma (MCF-7). Cell cultures were all submitted to selective regulation of tree drugs: dexamethasone (DEX), retinoic acid (RE) and ergocalciferol (VITD2). Relative luciferase expression units were obtained by dual luciferase assay kit. The results in Human breast adenocarcinoma (MCF-7) showed that retinoic acid and dexamethasone influenced negatively the expression of PAX9 promoter. PAX9-pGL3B1 and PAX9-pGL3B2 promoter was inhibited under the treatment of dexamethasone and ergocalciferol. Retinoic acid and dexamethasone did not altered PAX9-pGL3B3 (-1106 to +92, 507bp deleted with ApaI digest) behavior. Luciferase activity in plasmid PAX9-pGL3B2 was always weaker than the other two constructions indicating that sequence present between -1106 and -751 or 355bb were important for the transcriptional activity of PAX9 promoter. The results in Mouse Odontoblast Cell-Like-23 (MDPC23) showed that it PAX9-pGL3B1 and PAX9-pGL3B2 promoter activity was increased by the treatment of lower concentration of dexamethasone and ergocalciferol, whereas higher concentration of the same drugs decreased this activity. The effect of the retinoic acid in the luciferase activity of PAX9-pGL3B1 has the same pattern but for the PAX9-pGL3B2, all concentrations increased the promoter activity. For the PAX9-pGL3B3 construction, concentrations of ergocalciferol had a statistically significance decreasing the activity of the promoter and no effect of the activity was observed in the dexamethasone and retinoic acid treatment. In conclusion, dexamethasone, retinoic acid and ergocalciferol may bind to PAX9 gene promoter and up or down-regulate PAX9 transcriptional activity. A 507bp region (-645 and -138) within PAX9 promoter may harbor biding sites for dexamethasone and retinoic acid since none of concentrations of these reagents influenced changes in promoter activity. / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

Orientador: Jose Eduardo Tanus dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T08:46:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rezende_VaniaBraghinide_M.pdf: 3064536 bytes, checksum: de50c064d7a27c30aff305d7d7bbaa05 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O receptor da vitamina D (VDR) possui um importante papel na toxicidade do chumbo (Pb). Poucos trabalhos avaliaram o efeito dos polimorfismos VDR sobre as concentrações circulantes do metal em populações expostas ambientalmente. Além disso, nenhum estudo avaliou o efeito da combinação desses polimorfismos (haplótipos) sobre os mesmos parâmetros. A análise de haplótipos (combinação de marcadores genéticos dentro de uma determinada região no cromossomo) tem demonstrado ser uma melhor ferramenta em comparação com a análise de polimorfismos (SNPs) vistos isoladamente. Nesse estudo, avaliamos o efeito dos haplótipos estimados a partir dos polimorfismos BsmI , ApaI e FokI do VDR sobre os níveis de Pb-S (chumbo no sangue), Pb-P (chumbo no plasma) e na fração %Pb-P/Pb-S (chumbo no plasma/chumbo no sangue) em 150 voluntários expostos ambientalmente ao chumbo (65 homens e 85 mulheres; idade: 18 a 57 anos). Os genótipos para todos os polimorfismos do VDR foram determinados por PCR seguido por digestão com enzimas de restrição (RFLP). Pb-P e Pb-S foram determinados por espectrometria de massas com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS) e espectrometria de absorção atômica com forno de grafite, respectivamente. Os resultados mostraram que os polimorfismos do VDR estão associados às concentrações de Pb circulantes e que o haplótipo H8, formado pelos alelos a, b e f, está associado com menores concentrações de Pb-S, Pb-P e %Pb-P/Pb-S. Estes achados podem apresentar importantes implicações toxicogenéticas, sendo necessários estudos posteriores para elucidar os mecanismos responsáveis por tais efeitos. / Abstract: The Vitamin D Receptor (VDR) plays an important role in the toxicity of lead (Pb). Genetic factors, i.e polymorphisms, influence blood lead (Pb-B) concentrations in lead exposed subjects. However, only a few research studies have evaluated the effect of VDR polymorphism on the lead concentration in environmentally. Also, no studies have evaluated the combinatorial effect of these polymorphisms on the same parameters. The haplotype analysis (combination of genetic indicators in a certain region of the chromossome) has been shown to be a better tool if compared with the analyses of single polymorphisms. This study aimed at examining the combined effects (haplotype analysis) of three polymorphisms (BsmI , ApaI and FokI) in vitamin D receptor ( VDR) gene on Pb-B and on the concentrations of lead in plasma (Pb-P), which is more relevant to lead toxicity, in 150 environmentally exposed subjects (65 mens and 85 women). Genotypes were determined by RFLP, and Pb-P and Pb-B were determined by inductively coupled plasma mass spectrometry and by graphite furnace atomic absorption spectrometry, respectively. Subjects with the bb (BsmI ) or ff (FokI) genotypes have lower B-Pb than subjects in the other genotype groups. Subjects with the aa (ApaI ) or ff genotypes have lower P-Pb than subjects in the other genotype groups. Lower Pb-P, Pb-B, and %Pb-P/Pb-B levels were found in subjects with the haplotype combining the a, b, and f alleles for the ApaI , BsmI , and FokI polymorphisms, respectively, compared with the other haplotype groups. These findings may have important toxicogenetic implications and their molecular basis needs to be addressed in further studies. / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Doctorat en sciences médicales / info:eu-repo/semantics/nonPublished

ANALYSIS OF PREVALENCE OF VITAMIN D DEFICIENCY IN ADULTS Author: Jana Nováková Supervisor: PharmDr. Eva Zimčíková, PhD. INTRODUCTION Estimated vitamin D deficiency occurs in up to 1/3 of the population. Vitamin D deficiency occurs in a number of diseases and in different countries of the world. AIMS The aim of the theoretical part of the diploma thesis was to get acquainted with vitamin D and its deficit in general. The objective of the practical part was to map vitamin D levels in adults, to assess prevalence of vitamin D deficiency, to determine if vitamin D levels fluctuate over the course of the year depending on age or gender and how they are related to individual illnesses. METHODS PubMed and Embase database search was performed to find evidence on vitamin D deficiency in adults. Only studies in humans, published in English in the period from 2000 to 2016 were included. Non-systematic review was provided, the quality of the studies was not evaluated. RESULTS Overall, 84 studies were included. Most of the studies enrolled healthy adults (n = 34). Among the studies concerning various diseases, musculoskeletal disorders were the most prevalent (n = 13). The highest prevalence of vitamin D deficiency was seen in the study from USA (in healthy adults) using cut-off value for deficiency ≤ 50...

La Cathepsine D (CathD) est une protéase lysosomale surexprimée et sécrétée par de nombreuses tumeurs solides. Cette enzyme favorise la prolifération tumorale et le processus métastatique, faisant d’elle une cible intéressante pour la thérapie anticancéreuse. Il existe un très bon inhibiteur de la CathD, la pepstatine, mais celui-ci traverse trop difficilement la membrane cellulaire pour être actif. C’est pourquoi des vecteurs de pénétration cellulaire, basés sur l’oligomérisation de mimes contraints de dipeptide, ont été développés au laboratoire. De ce travail, un bioconjugué, le JMV4463, a été développé. Composé d’un vecteur AMPA4 (tétramère de l’acide 2-(aminométhyl)phénylacétique), de la pepstatine, et d’une partie hydrophile aidant à la solubilisation du conjugué, ce bioconjugué est capable d’entrer dans les cellules et possède une activité antiproliférative sur différentes lignées de cellules cancéreuses. Partant de ce travail, la synthèse de nouveaux vecteurs potentiels de pénétration cellulaire, oligomères de mimes contraints de dipeptide, a été réalisée. Leur capacité d’internalisation a été établie sous la forme de conjugués avec la pepstatine. Les monomères envisagés étaient des analogues des motifs AMPA et acide (S)-2-(3-amino-4-oxo-3,4-dihydrobenzo[b][1,4]thiazépin-5(2H)-yl)acétique (DBT), motif ayant également montré une importante capacité d’internalisation. Ainsi, des analogues de l’AMPA en série indole, pyrrole et cyclohexane ont été préparés. De plus, la synthèse d’analogues de l’AMPA possédant différentes substitutions a été réalisée, tels que les méta- et para-AMPA, un homologue inférieur ou les 4,5-diméthoxy-, 4,5-dihydroxy- et 4-bromo-AMPA. Un analogue en série benzodiazépine du DBT a également été étudié. Tous les vecteurs correspondants sont capables d’internaliser la pepstatine dans les cellules mais, de façon surprenante, aucun des conjugués n’a montré d’activité anti-proliférative, indiquant un rôle essentiel du vecteur AMPA4. Une étude des relations structure / activité du JMV4463 a confirmé que le vecteur AMPA4 possédait un mode d’action unique mais celui-ci n’a pu être identifié à ce jour. Dans cette étude, il a également été montré qu’il était possible de simplifier la structure de la pepstatine, en remplaçant un de ses motifs statine par un motif gamma-alanine, permettant un coût de production réduit. Enfin, une étude in vivo sur un modèle xénogreffé de souris a montré un fort potentiel anti-tumoral du conjugué JMV4463. / Cathepsin D (CathD) is an overexpressed lysosomal protease secreted by several solid tumors. This enzyme is involved in tumor proliferation and metastasis, which makes it a promising target for cancer therapy. There exists a potent CathD inhibitor called Pepstatin, but it presents a too poor ability to cross the plasmic membrane in order to be active. To overcome this drawback, the development of cell penetrating vectors based on the oligomerization of constrained dipeptide mimetics has been undertaken in our lab. From this work, the bioconjugate JMV4463 has been developed. This bioconjugate is made of an AMPA4 (2-(aminomethyl)phenylacetic acid) vector, the pepstatin and a hydrophilic part which increases its solubility. This bioconjugate is able to penetrate the cells and has an antiproliferative effect on different cancer cell lines. Based on this work, synthesis of new potential cell penetrating vectors, oligomers of constrained dipeptide mimetics, was performed. Their internalization ability was established as their conjugate with pepstatin. We developed analogues of AMPA scaffold and (S)-2-(3-amino-4-oxo-3,4-dihydrobenzo[b][1,4]thiazépin-5(2H)-yl)acetic acid (DBT), which showed an important internalization ability. Thus, AMPA derivatives in indole, pyrrole and cyclohexane series were prepared. Furthermore, the synthesis of AMPA analogues having different substitutions on its aromatic part was performed, such as meta- and para- AMPA, an inferior homologue or 4,5-dimethoxy-, 4,5-dihydroxy- and 4-bromo-AMPA. An analogue of DBT in the benzodiazepin series has also been studied. All the corresponding vectors were able to internalize the pepstatin into the cells. Surprisingly, none of the conjugates showed an anti-proliferative activity, indicating the essential role of the AMPA vector. A structure/activity relationships study was performed for JMV4463. The obtained results confirmed that the AMPA vector has a unique mode of action that has not been identified yet. Furthermore, it has been demonstrated that it was possible to simplify the pepstatin structure by replacing one of its statin residues by a gamma alanine, which allows decreasing the production cost. Finally, an in vivo study on a xenografted mouse model showed a high anti-tumour potential for the JMV4463 conjugate.