Orientador: Marília Afonso Rabelo Buzalaf / Banca: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Banca: Robson Frederico Cunha / Banca: Lea Assed Bezerra da Silva / Banca: Marines Nobre dos Santos Uchôa / Resumo: Avaliou-se a incorporação de flúor (F) no biofilme dentário e fluido do biofilme após o uso de dentifrícios convencional(DC) e com concentração reduzida de F(DCR). A hipótese do estudo foi de que o uso do DCR levaria a uma incorporação proporcionalmente mais alta no biofilme, principalmente nas camadas mais profundas do mesmo, e que estes aumentos seriam refletidos no fluido do biofilme. Na primeira etapa, foram comparadas as concentrações de F e cálcio (Ca) presentes no biofilme após o uso de dentifrícios contendo 0 (dentifrício placebo-DP), 513(DCR) e 1.072(DC) ppm F, em crianças residentes em comunidades contendo 0,04(A), 0,72(B) e 3,36(C) ppm F na água de abastecimento. Seguindo um protocolo duplo-cego e cruzado, as crianças escovaram seus dentes 2 vezes ao dia, durante 7 dias. Amostras de biofilme foram coletadas 1 e 12 horas após a última escovação. Na segunda e terceira etapas, conduzidas somente na comunidade B, avaliou-se a incorporação de F em secções seriais de biofilme formado utilizando "dispositivos in situ de Leeds", bem como a concentração de F no fluido do biofilme, respectivamente, empregando o protocolo descrito anteriormente. As análises de F foram realizadas após extração ácida (biofilme total), por cromatografia iônica (secções de biofilme) e após tamponamento com TISAB III (fluido do biofilme). As análises de Ca foram realizadas por espectrometria de absorção atômica (primeira e segunda etapas) e por método colorimétrico (terceira etapa). Os dados foram analisados por ANOVA, testes de Tukey e Bonferroni e Análise de Regressão Linear (p<0,05). Na primeira etapa, as concentrações de F estavam diretamente relacionadas às concentrações de F na água de abastecimento, independentemente do dentifrício utilizado. O uso dos dentifrícios fluoretados levou a aumentos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated fluoride (F) uptake by dental biofilm and biofilm fluid after the use of conventional (CD) and low-fluoride (LFD) dentifrices. The hypothesis of the study was that the use of LDF would lead to a proportionally higher F uptake by the biofilm, mainly in the deepest layers of it, and that such increases would be reflected in the biofilm fluid. In the first phase, F and calcium (Ca) concentrations in the biofilm were compared after the use of dentifrices containing 0 (placebo dentifrice-PD), 513 and 1,072 ppm F, in children living in communities containing 0.04(A), 0.72(B) and 3.36(C) ppm F in the drinking water. Following a double-blind, crossover protocol, children brushed their teeth twice daily, during seven days. Samples of biofilm were collected on the seventh day, 1 and 12 h after the last use of the dentifrices. In the second and third phases, which were conducted only in the community B, we evaluated F uptake in serial sections of biofilms formed using the "Leeds in situ devices", as well as in the biofilm fluid, respectively, following the same protocol described for the first phase. F analyses were carried out after acid extraction (whole biofilm), by ion chromatography (sections of biofilm) and after buffering with TISAB III (biofilm fluid). Analyses of Ca were done by atomic absorption spectrometry (first and second phases) and colorimetrically (third phase). Results were analyzed by ANOVA, Tukey's and Bonferroni's tests, by linear regression analysis and by Pearson's correlation (p<0.05). For the first phase, mean biofilm F concentrations were directly related to F concentrations in water, regardless of the dentifrice used. The use of the fluoridated dentifrices led to significant increases in F concentrations in the biofilm 1 h after their use, in the communities A and B only. Virtually identical... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

O objetivo do presente estudo in vivo foi avaliar a associação de parâmetros obtidos por diferentes métodos baseados em fluorescência com a detecção da atividade de cárie em superfície oclusal de molares decíduos, incluindo a avaliação da fluorescência vermelha emitida pelo biofilme nesse processo diagnóstico. Para tanto, foram selecionadas 606 molares decíduos de 113 crianças entre 4 e 14 anos. As crianças foram avaliadas quanto à presença de biofilme, experiência de cárie e número de lesões ativas. A presença de biofilme fluorescente no vermelho foi também avaliada com um aparelho de quantificação da fluorescência induzida por luz (QLF do inglês, Quantitative Light-induced Fluorescence). Após profilaxia, também com o QLF, foram avaliados a fluorescência do dente no verde (F e Q) e no vermelho (R), além da avaliação com o DIAGNOdent pen. Para determinação do primeiro padrão de referência, todos os dentes foram avaliados por 2 examinadores utilizando o sistema ICDAS associado à avaliação da atividade de cárie baseado nas características clínicas das lesões. Para a segunda etapa da pesquisa, foram selecionados 50 molares decíduos exfoliados ou extraídos logo após os exames. Esse dentes foram seccionados e validados histologicamente por 2 examinadores de acordo com a profundidade e atividade das lesões, esse último avaliado com auxílio de um corante indicador de pH. Análises de regressão linear de multinível foram realizadas para a comparação entre as medidas obtidas com os métodos baseados na fluorescência nos dentes classificados pelo exame visual como sadios ou com lesões ativas ou inativas. Para avaliação da associação dos parâmetros avaliados pelos métodos baseados na fluorescência e de outras variáveis explanatórias, foram realizadas análises de multinível de Poisson. Na segunda etapa, após determinação dos melhores pontos de corte, valores de sensibilidade, especificidade, acurácia e as áreas sob as curvas ROC (Az) de cada método foram calculados em três limiares de detecção. Para avaliação do desempenho dos métodos em detectar a atividade de cárie, os parâmetros de Diagnostic Odds Ratio (DOR), acurácia e Az foram calculados. A reprodutibilidade das avaliações do padrão de referência obtiveram valores de kappa maiores que 0,86. Os valores de F e Q do QLF (fluorescência verde) foram significantemente maiores nas lesões inativas do que nas ativas, tanto em lesões não-cavitadas, como nas cavitadas. Com o DIAGNOdent pen, somente na avaliação de lesões cavitadas, as medidas em lesões ativas diferiram significantemente das lesões inativas. No geral, a presença de biofilme visível sobre a superfície oclusal dos molares decíduos e R do dente (fluorescência vermelha obtida com o QLF) mostraram associação significante com a atividade de cárie. O exame visual, o DIAGNOdent pen e os valores de Q mostraram maior sensibilidade na detecção de lesões iniciais em esmalte. Para lesões em dentina o QLF mostrou menor especificidade do que o exame de inspeção visual. Os valores de DOR e Az mostraram similaridade entre os métodos para diferenciação de lesões ativas e inativas. Embora o QLF e DIAGNOdent pen mostrem bom desempenho na avaliação da atividade de cárie em molares decíduos, não mostram vantagens quando comparados à utilização da inspeção visual ou à simples avaliação da presença de biofilme visível. / The aim of this in vivo study was to evaluate the association of parameters obtained with fluorescence-based methods and the assessment of caries lesions activity in occlusal surfaces of primary molars, including the evaluation of red fluorescence emitted by the biofilm in this diagnosis process. Occlusal surfaces of 606 primary molars from 113 children aged 4-14 years were selected. The presence of biofilm, caries experience and the number of active lesions were evaluated. The presence of red fluorescent biofilm was also assessed by QLF (Quantitative Light-induced Fluorescence). After dental cleaning procedure, the green (F e Q) and red (R) fluorescence were evaluated with the QLF. The DIAGNOdent pen was also employed. For the first reference standard, all teeth were evaluated by 2 examiners using ICDAS associated with the caries activity assessment based on clinical characteristics of the lesions. For the second phase, 50 exfoliated or extracted primary molars were selected. Then, these teeth were sectioned and histologically validated by 2 examiners regarding depth and activity of the lesions; the latter using a pH detector dye. Multilevel linear regression analyses were carried out to compare the values of the fluorescence-based methods on the teeth classified by visual inspection as sound, with active or inactive lesions. Multilevel Poisson analysis evaluated the association of the parameters assessed by the fluorescencebased methods and explanatory variables. On the second phase, after obtaining the best cut-off points, the sensitivity, specificity, accuracy and area under ROC curve (Az) were calculated at three thresholds. The performance of the methods in detecting caries activity was evaluated by Diagnostic Odds Ratio (DOR), accuracy and Az values calculated. The reference methods presented good reproducibility, with kappa values higher than 0.86. The F and Q values obtained with QLF (green fluorescence) were higher in inactive than in active lesions, at cavitated and non-cavitated lesions. Using the DIAGNOdent pen in cavitated lesions, the evaluations of active and inactive lesions were significantly different. In general, the presence of visible biofilm on occlusal surfaces of primary molars and the R values of the teeth (red fluorescence obtained with the QLF) were significantly associated with caries activity. The visual inspection, DIAGNOdent pen and Q values demonstrated higher sensitivities in detecting initial enamel lesions. Considering dentine lesions, the QLF presented lower specificity than the visual inspection. The DOR and Az values were similar for all methods in distinguishing active and inactive caries lesions. In conclusion, although the QLF and DIAGNOdent pen perform well in assessing the caries activity lesions in primary molars, they do not present any advantage when compared to the visual inspection or to the simple evaluation of the presence of visible biofilm.

Objetivos: Este trabalho é composto de seis estudos que têm como objetivos avaliar: (1) a eficácia de métodos caseiros e profissionais na limpeza de faces proximais intactas e com cavidade, em contato, (2) e após simulação da separação dentária; (3) a fluorescência intrínseca de materiais seladores e a capacidade desses materiais em bloquear a fluorescência do substrato subjacente; (4) o desempenho do exame de fluorescência a laser (FL) em detectar e quantificar lesões proximais de cárie em molares decíduos sob materiais seladores; (5) verificar a microinfiltração e capacidade de penetração do selante em lesões proximais com cavidade; e (6) avaliar clinicamente o sucesso do selamento proximal quando comparado ao tratamento restaurador convencional. Materiais e Métodos: Para os objetivos (1) e (2), oito pares de molares decíduos foram utilizados na avaliação da eficácia dos métodos de limpeza proximal. Para isso, dois dispositivos foram idealizados, um que simulava o contato proximal dos dentes e o outro que mimetizava a separação dentária com o espaço entre as faces proximais de 0,5 mm. Um marcador em spray foi aplicado nas faces proximais e os métodos foram realizados. Todos os métodos foram testados nos mesmos dentes, após total remoção do corante e nova aplicação do mesmo. Após o teste de cada método, as faces foram fotografadas em lupa e analisadas. Para o objetivo (3), cavidades padronizadas de 0,5 e 1 mm confeccionadas em placas de acrílico transparentes e preenchidas com diferentes materiais resinosos foram utilizadas na avaliação da fluorescência intrínseca e capacidade de bloqueio de fluorescência destes materiais. As cavidades foram medidas com o DIAGNOdent pen quando vazias (baseline) e logo depois de preenchidas. As medições foram repetidas 24h, uma semana e um mês após o preenchimento. Já para o objetivo (4), trinta molares decíduos com lesões de cárie proximais sem cavidade foram selecionados para a avaliação da influência de um selante e de um adesivo dentinário na detecção destas lesões. Para isso, os dentes foram montados em um dispositivo que permitiu o contato proximal, e as faces com lesões foram medidas com o DIAGNOdent pen após limpeza 11 (baseline) e logo após a aplicação do material. As medições foram repetidas 24h, uma semana e um mês após o selamento. Ao final, os dentes foram seccionados e analisados quanto à presença e profundidade da lesão de cárie. No objetivo (5), quarenta e cinco molares decíduos e quarenta molares permanentes com lesões de cárie proximais com cavidade (ICDAS 3, 4 ou 5) foram usados para avaliar a microinfiltração e habilidade de penetração de dois materiais seladores, com ou sem aplicação prévia de adesivo dentinário. Após o selamento, os dentes sofreram termociclagem (1000 ciclos) e microinfiltração com azul de metileno a 2% por 24h. Posteriormente os dentes foram seccionados e a microinfiltração e capacidade de penetração avaliadas. Para o objetivo (6), um estudo piloto in vivo comparou o sucesso do selamento de lesões de cárie proximais com cavidade em molares decíduos quando comparado ao tratamento restaurador convencional com resina composta. Foram incluídas 8 crianças com 22 lesões proximais, das quais 13 foram seladas e 9 foram restauradas após randomização simples por sorteio. Todas as lesões foram acompanhadas clinica e radiograficamente por 18 meses. Resultados: (1) Em molares decíduos em contato, o fio dental foi o método mais eficaz na área de interesse, removendo 83,1% do marcador. Nas ameias, a escova dental apresentou os melhores resultados, com remoção muito próxima a 100%. (2) Em molares decíduos simulando a separação temporária, as escovas interproximais média e grande foram capazes de remover a maior quantidade de marcador da área de interesse. A escova de Robinson se mostrou mais eficaz, removendo entre 84 e 100% do marcador das ameias e se estendendo à área abaixo do ponto de contato, removendo 48,2% do marcador. Os métodos falharam em remover placa do interior da cavidade. Mesmo com a separação temporária, as escovas interproximais maiores que o espaço removeram no máximo 20% do marcador. (3) Nas placas de acrílico, o adesivo dentinário de dois frascos apresentou-se mais estável, apresentando menos alterações de fluorescência intrínseca nas medições realizadas até um mês após o selamento e exercendo menor influência nas medições da fluorescência da superfície subjacente. Entre os selantes, o material transparente e com 58% de carga apresentou os resultados mais aceitáveis. (4) Nas lesões de mancha branca em molares decíduos seladas com o adesivo dentinário de dois frascos, as leituras de FL demonstraram boa correlação com a profundidade da lesão, verificada histologicamente. (5) No selamento de lesões proximais com cavidade em dentes permanentes e decíduos, o uso de uma camada intermediária de adesivo dentinário e a quantidade de carga do selante não exerceram 12 influência na microinfiltração e na capacidade de penetração dos materiais na cavidade. As lesões ICDAS 5 demonstraram menor capacidade serem preenchidas, quando comparadas às lesões de ICDAS 3 e 4. (6) No estudo in vivo, após 18 meses, 69,2% dos selantes havia falhado, contra 11,1% das restaurações, diferença que se mostrou estatisticamente significante. Com relação à progressão da lesão, 53,8% das lesões seladas progrediram, contra 11,1% das restaurações. Conclusões: Em lesões de cárie proximais com cavidade, métodos de limpeza interproximal falharam em remover a placa do interior da cavidade. Já em lesões sem cavidade, a escovação diária, pela técnica de Fones, associada ao uso do fio dental se mostrou a maneira mais eficaz de remover efetivamente o biofilme das faces proximais de molares decíduos. Os métodos de limpeza interproximal mais indicados na profilaxia das faces proximais pré-selamento em lesões de cárie com ou sem cavidade são a escova de Robinson associada a uma escova interproximal de diâmetro maior que o espaço obtido após a separação temporária. No selamento de manchas brancas, o adesivo dentinário de dois frascos permitiu uma correlação das leituras de FL com a profundidade das lesões, por apresentar menos alterações de fluorescência intrínseca com o envelhecimento e exercer menor influência nas medições da fluorescência da superfície subjacente, podendo assim, ser indicado no selamento de lesões iniciais de cárie proximal a serem controladas pelo o método de FL. Entretanto, quando um material com carga se faz necessário, selantes com opacificadores devem ser evitados, por exercerem maior influência nas medições da FL. No selamento de lesões proximais com cavidade, o uso de uma camada intermediária de adesivo dentinário e a quantidade de carga do selante não exerceram influência na microinfiltração e na capacidade de penetração dos materiais na cavidade, nos dentes decíduos e permanentes. O estudo clínico sugere que o selamento não é uma alternativa viável no tratamento de lesões proximais de cárie com cavidade, por apresentar maior tendência a falhas e ao insucesso. / Aim: This thesis is composed of six studies, which aimed at evaluating (1) the efficacy of prophylaxis methods used, professionally and at home, on approximal surfaces, in contact with the adjacent tooth, (2) and after simulation of tooth separation; (3) the intrinsic fluorescence of sealing materials and their ability of these materials to clock the fluorescence of the underlying surface; (4) the performance of a laser fluorescence (LF) device in detecting and quantifying approximal caries in primary molars under the sealant; (5) access the microleakage and penetration ability of sealing materials on cavitated approximal lesions; and (6) access, in vivo, the success rate of approximal sealant when compared to the conventional restorative procedure. Materials and Methods: For the aims (1) and (2), eight pairs of primary molars were used to evaluate the efficacy of prophylaxis methods on approximal surfaces. For that, two dispositives were idealized, one allowed the teeth to be in approximal contact and the other aimed to mimic the temporary tooth separation, which a 0,5mm space between the approximal surfaces. A marker, in form of spray, was applied on the approximal surfaces and the different methods were applied. All methods were tested on the same teeth, after complete removal of the marker and its re-application. Afterwards, the surfaces were photographed by an optic microscope and analyzed. For the aim (3), standardized cavities of 0,5 and 1 mm in depth, bored in clear acrylic boards and filled with different resinous materials, were used to evaluate their intrinsic fluorescence and their ability to block the fluorescence of the underlying surface. The cavities were accessed by the LF device (DIAGNOdent pen - DDpen) when empty, and right after filling. The subsequent measurements were done at 24 hrs, one week and one month after filling. For the aim (4), thirty primary molars with non-cavitated approximal caries lesions, scored ICDAS 1 and 2, were chosen for the evaluation of the influence of a fissure sealant and a dental adhesive on the detection of these lesions. For that, the teeth were mounted in a dispositive, which allows a close approximal contact, and the surfaces with caries were measured with the DDpen after cleaning (baseline) and right after sealing. The 14 measurements were repeated after 24 hrs, one week and one month. The teeth were, afterwards, sectioned and their histopathology analyzed. For the aim (5), forty-five primary molars and forty permanent molars with cavitated approximal caries lesions, scored ICDAS 3, 4 or 5, were sealed with or without an adhesive intermediate layer. After sealing, the teeth were thermocycled (1000 cycles) and inserted in methylene blue 2% for 24 hrs. Afterwards, the teeth were sectioned and microleakage and penetration ability were accessed. For the aim (6), an in vivo pilot study, which assessed the success rate of approximal sealant on cavitated lesions compared to the conventional restorative treatment. Eight children, aged 5-9 years, with 22 cavitated approximal lesions, were included in this study. Lesions treatment was raffled by the children, and therefore, 13 lesions were sealed and 9 were restored. All lesions were controlled radiograph and clinically up to 18 months. Results: (1) In primary molars in approximal contact, the dental floss was the most efficient method on cleaning the area of interest, removing 83,1% of the marker. On the buccal and lingual interdental spaces, the toothbrush presented the best results, removing approximately 100% of the marker. (2) On primary molars simulating tooth temporary separation, the median and large interdental brushes were able to remove more marker from the area of interest. The flat bristle brush was the most effective method, removing 84-100% of the marker from the buccal and lingual interdental spaces, and extending its efficacy to the area under the contact point, removing 48,2% of the marker. All methods failed at removing the marker from the cavity. Even with the tooth separation, the interdental brushes removed the marker to a maximum of 20%. (3) On the acrylic boards, the two-bottle dental adhesive was more stable, exhibiting less intrinsic fluorescence alterations on the reading up to one month after sealing, and influencing the least the measurement of the underlying surfaces fluorescence. Among the fissure sealants, the clear and highly filled material presented the most acceptable results. (4) On non-cavitated approximal lesions in primary molars sealed with the two-bottle dental adhesive, the LF reading showed a good correlation to lesion depth, histologically accessed. (5) On the sealing of cavitated approximal lesions in permanent and primary molars, the use of an adhesive intermediate layer and the filler content of the sealant did not influence the microleakage and penetration ability into the cavities. Lesions ICDAS 5 were less filled than lesions ICDAS 3 or 4. (6) On the in vivo study, after 18 months, 69,2% of the approximal sealants have failed, against to 11,1% of the restorations. This difference was shown to be statistically significant. Regarding progression, 53,8% of sealed 15 lesions have progressed, against 11,1% of the restored ones. Conclusions: In cavitated approximal caries lesions, the prophylaxis methods failed to remove the marker from the cavity. In non-cavitated lesions, the daily tooth brushing, by Fones method, associated with flossing, was shown to be the most efficacious method of removing effectively the biofilm from the approximal surfaces. The most efficacious methods indicated to the pre-sealing prophylaxis on approximal surfaces with or without cavitation are the flat bristle brush associated with an interdental brush larger than the space obtained after tooth separation, in diameter. On the approximal sealant of non-cavitated lesions, the two-bottle dental adhesive allowed a better correlation between LF readings and lesion depth, for exhibiting less intrinsic fluorescence alterations with aging and for exerting less influence on LF measurements from the underlying surface, and therefore, can be indicated for approximal sealant on non-cavitated lesions to be controlled by the LF method. However, when a filled material is needed, sealants with opacifiers should be avoided. When sealing cavitated lesions, the use of an adhesive intermediate layer and a highly filled sealant did not contribute to a decrease in microleakage and in an increase of penetration ability into the cavities. The in vivo study suggests that the sealant is not a viable alternative for the treatment of cavitated approximal lesions, for exhibiting higher failure rates.

O objetivo desse estudo in situ cruzado de duas fases foi avaliar a influência da presença de placa dentária fluorescente no vermelho na indução de lesões cariosas. Foram utilizados 272 blocos de esmalte bovino, que foram avaliados inicialmente em relação à microdureza superficial e quantificação da fluorescência verde com o QLF (Quantitative light-induced fluorescence). Dezessete voluntários utilizaram dispositivos palatais removíveis, com oito amostras cobertas com uma rede plástica para favorecer maior acúmulo de placa. No grupo experimental foi gotejada solução de sacarose a 20%, 8 X ao dia e no grupo controle, água destilada. Cada fase durou 14 dias com 7 dias de wash-out. Os blocos foram avaliados após 4, 7, 10 e 14 dias. Após cada período, a placa bacteriana presente sobre a superfície dos blocos foi analisada utilizando o QLF para a quantificação de fluorescência vermelha. Após cuidadosa limpeza da superfície, o bloco foi novamente avaliado para a perda de fluorescência verde (QLF) e perda de microdureza superficial. Foram realizadas análises de multinível para comparação entre os grupos, bem como análises de regressão linear de multinível entre as medidas de fluorescência vermelha e os desfechos relacionados à desmineralização. Em relação à microdureza de superfície, pode-se observar uma tendência de aumento da perda de dureza entre os diferentes períodos apenas no grupo experimental. Quanto à fluorescência vermelha da placa, houve aumento gradual de acordo com os diferentes períodos em ambos os grupos, sendo esse aumento mais pronunciado no grupo experimental. Houve associação significativa entre as medidas da fluorescência da placa e perda de dureza, independente dos grupos. Em conclusão, a fluorescência vermelha da placa bacteriana está relacionada à placa madura, independente da sua cariogenicidade. / The aim of this two-phase crossover in situ study was to evaluate the influence of presence of red bacterial plaque on the induction of carious lesions. We used 272 bovine enamel blocks, which were initially evaluated in relation to surface microhardness and quantification of green fluorescence using the QLF (Quantitative light-induced fluorescence). Seventeen volunteers to use removable intra-oral appliances were selected, containing eight specimens covered by a plastic net to promote plaque accumulation. 20% sucrose solution, 8 times per day, was dripped in the experimental group, and distilled water was dripped in the control group. Each phase lasted 14 days, with seven days of wash-out. The specimens were assessed after 4, 7, 10 and 14 days. After each period, bacterial plaque present on the blocks surface was analyzed using the QLF to quantify the red fluorescence. After careful cleanness, the block was evaluated again with QLF to assess the loss of green fluorescence and surface microhardness loss. Multilevel analyses were carried out to compare the groups, as well as multilevel linear regression analyses among the red fluorescence and outcomes related to the demineralization. With regard to the surface microhardness, we could observe a trend of hardness loss among the different periods only at the experimental group. In relation to the red fluorescence of plaque, there was a gradual increase according to the different periods in both experimental and control groups, being this increase more relevant in the experimental group. There was significantly association between red fluorescence measurements and microhardness loss, independently of the groups. In conclusion, the red fluorescence of bacterial plaque is related to the mature plaque, independently of its cariogenicity.

Diss. (sammanfattning) Umeå : Umeå universitet, 2010.

Sabe-se que o controle do biofilme supragengival por meio da escovação dentária é fundamental para prevenção de gengivite e cárie dentária. Entretanto, a literatura ainda é escassa quanto a características de um modelo de escova manual ideal, que seja t.1o efetiva no controle de placa, quanto segura. O objetivo desta dissertação foi avaliar a eficácia de duas escovas manuais na remoção do biofilme supragengival, bem como investigar a relação entre dureza de cerdas e formato da ponta de escovas manuais quanto a efeitos adversos da escovação. Esta dissertação é compost.'l por dois estudos, um ensaio clínico randomizado (ECR) e uma revisão sistemática da literatura. O ECR comparou a eficácia na remoção de biofilme supragengival de duas escovas macias em 70 voluntários que foram randomizados para os grupos Colgate SlimSoft ou Curaprox CS5460. O exame de placa por meio do Índice de Placa da Marinha, modificado por Rustogi foi realizado no momento inicial pré- e pósescovação supervisionada por 1 minuto, bem como após 7 dias de utilização da escova e dentifrício fornecidos. A escova SlimSoft apresentou uma maior redução de escores de placa interproximais e de boca toda, tanto na pós-escovação inicial (p<O.OS), quanto após 7 dias, em que houve um incremento na redução de placa dessas áreas, quando comparado a escova Curaprox (p<O.OS). Assim, a escova SlimSoft apresentou uma maior eficácia para remoção do biofilme supragengival quando comparada à Curaprox. A revisão sistemática da literatura investigou se a dureza e a ponta das cerdas de escovas manuais estão associadas com efeitos adversos da escovação. Para isso, três bancos de dados eletrônicos foram acessados utilizado uma estratégia de busca pré-estabelecida. Dois pesquisadores analisaram a inclusão dos títulos, resumos, leitura completa e extração de dados dos artigos e, se um consenso não fosse possível. um terceiro pesquisador estaria incluído neste processo. De 126 artigos lidos na íntegra, 11 foram elegíveis para inclusão. Cinco estudos analisaram ponta das certas das escovas, dois a dureza e quatro investigaram tanto a ponta da cerda quanto a dureza de escovas. Ainda, quatro estudos apresentaram efeito adverso como desfecho primário. Observou-se mais lesões gengivais quanto maior a dureza das cerdas das escovas. As lesões de recessão gengiva! permaneceram estáveis ao longo do tempo e o número de lesões de abrasão gengiva! foram semelhantes com o uso de escovas macias, tanto com cerdas afiladas, quanto arredondadas. Os estudos que tiveram segurança como desfechos secundários não reportaram efeitos adversos. Assim, sugeriu-se que o uso de escovas macias e extra-macias, independentemente da ponta da cerda, pareceram não apresentar riscos clínicos relevantes para os tecidos moles bucais. / Jt is known that toothbrushing is an excellent method for mechanical supragingival biofilm remova! and it is associated with prevention of both gingivitis and dental caries. However, the literature is still scarce regarding the characteristics of an ideal manual toothbrush, which is as effective in plaque contrai as safe. The aim o f this dissertation was to evaluate the efficacy oftwo manual toothbrushes in supragingival biofihn remova), as well as to investigate the relation of bristle stiffness and bristle end-shape with potential adverse effects. The present work is composed of two studies, a randomized controlled trial (RCT) and a systematic review of the literature. The RCT compared the efficacy in supragingival plaque remova! of two soft-bristle toothbrushes in 70 volunteers that were randomly allocated to the Colgate SlimSoft or Curaprox CS5460 toothbrush groups. Subjects underwent plaque examination using the Rustogi Modification of the Navy Plaque Index with pre- and post-brushing examinations under supervision at baseline and after 7 days of daily oral hygiene with their assigned toothbrush and dentifrice provided. The mean plaque score presented a greater reduction of whole-mouth and interproximal plaque scores in the SlimSoft group after a single toothbrushing at baseline (p<O.OS) and after 7 days compared to the Curaprox group (p<O.OS). Thus, the SlimSoft toothbrush presented greater efficacy in supragingival plaque remova) than did the Curaprox CS5460 toothbrush. The systematic review investigated if bristle stiffness and bristle end-shape of manual toothbrushes are associated with toothbrushing adverse effects. Three electronic data bases were searched and a pre-established search strategy was performed. Inclusion of titles, abstracts, full textanalysis and data extraction was dane by two reviewers, and when a consensus was not possible, a third researcher was included in this process. From 126 potentially relevant articles for full-text analysis, only 11 were included. Five studies analyzed toothbrush endendshape, two studies investigated toothbrnsh bristle stiffness and four articles examined both the end-shape and bristle stiffness ofmanual toothbrushes. Moreover, four studies presented safety as a primary outcome. Hard toothbrush appeared to produce more gingival lesions when compared to soft and medium bristles. The majority of gingival recessions remained stable over time and new gingival abrasion lesions were observed with the use of both endrounded and tapered toothbrushes. Nane of the studies that evaluated safety as a secondary outcome presented adverse effects. Thus, soft and extra-soft toothbrushes tended to be safe and both tapered and end-rounded bristles might not present a clinically relevant concern to oral soft tissues.

O objetivo do presente estudo clínico foi compreender o efeito do uso prévio de agentes antimicrobianos na diversidade e a estrutura do microbioma procariótico de saliva, biofilme supragengival e canal radicular de dentes com infecção endodôntica aguda. Realizaram-se coletas microbiológicas de saliva (S), biofilme supragengival (BS) e canal radicular (CR) de pacientes que não utilizaram antibióticos (G1: n=6) e de pacientes que utilizaram antibióticos (G2: n=6). Para a caracterização das comunidades de procariotos por meio de sequenciamento de alto rendimento, foram produzidos pools de seis amostras para cada um dos sítios. A região hipervariável V3-V4 do gene 16S rRNA foi amplificada e a plataforma Illumina MiSeq foi empregada para análise das sequências geradas. Foram determinadas a presença e abundância relativa das unidades taxonômicas operacionais (OTUs) em cada amostra. Procedeu-se a análise de alfa-diversidade para cada amostra, considerando-se as métricas de Simpson, dominância, estimativa de riqueza de Chao-I e o Índice de Shannon. Os valores obtidos foram comparados por meio de testes estatísticos. Para a análise dos índices de beta-diversidade, empregou-se o método de agrupamento UPGMA, com jackknifing e método de comparação UniFrac com peso. A representação gráfica tridimensional da beta-diversidade foi realizada por meio de análise de coordenadas principais. A técnica de PCR gene específico foi empregada para determinar a presença de genes relacionados à resistência bacteriana para agentes beta-lactâmicos (blaTEM, blaZ, ampC, mecA), macrolídeos (ermB, ermC, mefA), tetraciclinas (tetM, tetQ, tetW), lincosamidas (lnuB, lsaB) e vancomicina (vanA, vanD, vanE). A similaridade para a presença/ausência de genes de resistência nas amostras de S, BS e CR em G1 e G2 foi determinada por meio de coeficiente de agrupamento, utilizando-se o método UPGMA com distância Euclidiana. Todos os pacientes apresentavam infecção endodôntica aguda, caracterizada pela presença de dor espontânea, necrose pulpar e dor à percussão vertical. Aumento de volume foi observado em 8/12 pacientes. Os pacientes do Grupo 2 utilizaram beta-lactâmicos previamente à consulta (amoxicilina = 5; cefalexina = 1). Há predomínio de integrantes do domínio Bactéria em todas S, BS e CR. Archaea pertencentes ao gênero Methanobrevibacter foram encontradas apenas em amostras de CR, constituindo menos de 1% do total de OTUs (G1-CR = 0,319%; G2-CR = 0,014%). Há predomínio de bactérias dos filos Firmicutes e Bacteroidetes em amostras de S, BS e CR. Há redução intensa no percentual de OTUs pertencentes ao Filo Firmicutes em amostras de saliva, quando antibiótico foi utilizado (G1-S = 75,371; G2-S = 35,242). Comportamento oposto ocorreu neste ecossistema para integrantes do Filo Bacteroidetes (G1-S = 12,657; G2-S = 33,947). Tanto em G1 quanto em G2, bactérias do gênero Streptococcus predominam em amostras de S e BS. Em canais radiculares, maiores percentuais de OTUs foram observados para os gêneros Porphyromonas e Prevotella. As métricas de alfadiversidade indicam que o uso prévio de antimicrobiano parece oportunizar o estabelecimento de espécies antes menos abundantes, especialmente em saliva (dominância: G1-S>G2-S; índice de Shanon: G1-S<G2-S; índice de Simpson: G1- S<G2-S; índice de Chao-1: G1-S<G2-S). A análise de beta-diversidade mostra proximidade entre G1-BS e G2-BS; há distanciamento entre G1-S e G2-S. As amostras G1-CR e G2-CR estão mais distantes de S e BS, sugerindo maior seleção imposta pelo ecossistema do CR aos procariotos. Os genes de resistência mais frequentemente detectados foram tetM, tetQ, tetM, ermB e mefA. Não foram detectados genes vanA, vanD, vanE, blaZ, mecA, lnuB e ermC. O gene ermB foi frequentemente detectado em amostras de S, BS e CR em ambos os grupos. Em pacientes que não utilizaram antibiótico, o gene tetM e o gene tetQ foram detectados simultaneamente em S, BS e CR (tetM = 4/6; tetQ = 3/6). A análise multivariada não demonstrou nível de agrupamento alto entre amostras de um mesmo paciente, de um mesmo ecossistema, ou de um mesmo grupo. A partir dos resultados do presente estudo, observou-se que a utilização de agente antimicrobiano betalactâmico parece alterar parâmetros composicionais de comunidades de procariotos na cavidade bucal. Entretanto, particularidades relativas a cada ecossistema podem modular a extensão deste efeito, parecendo ser mais intensos em amostras de S do que em BS e CR. / The present clinical study aimed to assess the effect of antibiotics over the diversity and structure in prokaryotic communities of saliva, supragengival biofilm and root canal of teeth with acute primary infections. Samples of saliva (S), supragengival biofilm (BS) and root canal of teeth with acute primary infections (CR) were collected from patients, and were grouped according with the previous use of antibiotic (G1 = no antibiotics; G2 = antibiotics). Pooled samples for each community were evaluated. DNA sequencing was performed with MiSeq (Illumina). The V3-V4 hypervariable region from the 16S rRNA gene was amplified. The presence and relative abundance of the operational taxonomic units (OTUs) was determined for each sample. Alpha-diversity analysis was performed with the Simpson’s index, dominance, Chao-1 richness index and Shannon’s index. Statistical analysis was carried out to compare their values for each community.Beta-diversity was computed through UPGMA clustering and jackknifing. The principal coordinate analysis employed weighted UniFrac. Gene-specific PCR was employed to detect resistance genes to lactamics (blaTEM, blaZ, ampC, mecA), macrolides (ermB, ermC, mefA), tetracyclines (tetM, tetQ, tetW), lincosamides (lnuB, lsaB) e vancomycin (vanA, vanD, vanE). The UPGA clustering analysis with Euclidean distance was applied to investigate the existence of similar groups of samples. A dendrogram was constructed to show the arrangement of the sample groups produced by clustering. All the patients had primary acute endodontic infections, with spontaneous pain, pulp necrosis and tenderness on percussion. Swelling was observed for 8 out of 12 patients. Patients from G2 had lactamics before the urgency appointment (amoxicillin = 5; cephalexin = 1). Bacteria were predominant in S, BS and CR samples. Archaea belonging to the genus Methanobrevibacter were only detected in RC samples and comprised less than 1% of all the OTUs G1-CR = 0.319%; G2-CR = 0.014%). The great majority of the detected OTUs in S, BS, and CR belonged to the phyla Firmicutes and Bacteroidetes. Reduction in the percentage of Firmicutes was observed in G2-S (G1-S = 75.371%; G2-S = 35.242%). A distinct behavior was demonstrated by the Bacteroidetes (G1- S = 12.657%; G2-S = 33.947%). Components belonging to the genus Streptococcus were predominant in S and BS, for both G1 and G2. CR harbored high percentage of species belonging to the genus Porphyromonas and Prevotella. The alpha-diversity indexes demonstrated that the G2-S had an increase in low abundant species (dominance: G1- S>G2-S; Shanon index: G1-S<G2-S; Simpson index: G1-S<G2-S; Chao-1 index: G1-S<G2- S). Beta-diversity showed that G1-BS and G2-BS had close spatial distribution. G1-CR and G2-CR were more distant from S and BS samples. The RC may promote a most intense species selection, due to environmental conditions. The most frequently detected genes associated with resistance to antibiotics were tetM, tetQ, tetM, ermB, and mefA. The genes vanA, vanD, vanE, blaZ, mecA, lnuB, and ermC were not detected in the samples. The gene ermB was frequently detected in S, BS and CR samples. In patients from G1, tetM and tetQ were detected simultaneously in all the three environments (tetM = 4/6; tetQ = 3/6). There was no clustering behavior for samples belonging to different environments in the same patients and between the same environment samples from different groups. An overall analysis from the data allows for suggesting that the use of lactamic agents may alter compositional parameters from prokaryotic communities in the oral cavity to different extents. Specific environmental characteristics from each site may modulate the effect that seemed to be more intense for S than for BS and CR.

Resumo: Muito tem se avaliado a respeito das propriedades físicas e químicas dos selantes de fóssulas e fissuras, mas pouco sobre seus efeitos no biofilme dentário. O objetivo deste estudo foi analisar as características bioquímicas e microbiológicas do biofilme dentário formado in situ sobre materiais que liberam flúor ou cálcio e fosfato. Dez voluntários utilizaram dispositivo intrabucal palatino contendo corpos-de-prova de materiais (Fuji IX GP, Auralay XF e Aegis) ou blocos de esmalte bovino. A fase experimental consistiu de 4 etapas de 8 dias cada e a utilização de sacarose para formação do biofilme. No 7º dia dos períodos experimentais foi determinado o pH do biofilme e no 8º dia, o biofilme dentário formado foi coletado para determinação de flúor (F), cálcio (Ca), fósforo (P) e polissacarídeos extracelulares insolúveis (PEI) além da microbiota. Verificou-se a liberação de F, Ca e P de cada material e dos blocos de esmalte após ciclagem de pH. Após a verificação da homogeneidade dos dados, testes paramétricos e não-paramétricos foram realizados para análise dos resultados (p<0,05). O biofilme dentário formado sobre os materiais que liberam flúor apresentou maior presença de F, Ca e P e menor número de estreptococos do grupo mutans quando comparado ao bloco de esmalte. Após o uso da sacarose (7º dia), o pH do biofilme foi maior na presença do material ionomérico. O biofilme sobre o material que contém fosfato de cálcio amorfo mostrou similar concentração de Ca e P, quando comparado aos materiais que contém flúor, e uma ação tamponante no meio, sem efeito na microbiota. Concluiu-se que os materiais que liberam flúor aumentaram as concentrações de F, Ca e P e diminuíram a de PEI e a microbiota cariogênica do biofilme dentário; e o que contém fosfato de cálcio amorfo aumentou as concentrações de Ca e P / Abstract: The chemical and physical properties of the pit and fissures sealants have been widely evaluated but rare researches focus on the effects on dental plaque. The aim of this study was to evaluate the biochemical and microbiological characteristics of the in situ dental plaque formed on materials that release fluoride or calcium and phosphate. Ten volunteers wore an intraoral palatal device containing specimens of materials (Fuji IX GP, Auralay XF and Aegis) or bovine enamel blocks. The experimental phase consisted of 4 stages with duration of 8 days each and use of sucrose to form the dental plaque. The dental plaque pH was determined at the 7th day of the experimental periods and the dental plaque was collected at the 8th day to determine the fluoride (F), calcium (Ca), phosphorus (P), insoluble extracellular polysaccharides (EPS) and microbiota. It was observed release of F, Ca and P from each material and from the enamel blocks after pH cycling. After verification of data homogeneity, parametric and non-parametric tests were performed (p<0.05). The dental plaque formed on the materials that release fluoride presented more F, Ca and P and reduced number of Streptococcus mutans in comparison to the enamel block. After use of sucrose (7th day), the dental plaque pH was higher with the presence of ionomeric material. The dental plaque on the material containing amorphous calcium phosphate exhibited similar Ca and P concentration compared to the ones on fluoride materials, and buffering action with no effect on the microbiota. It was concluded that the materials that release fluoride increased F, Ca and P concentrations, decreased EPS concentration and the cariogenic microbiota of the dental plaque; the amorphous calcium phosphate material increased concentrations of Ca and P / Orientador: Denise Pedrini / Coorientador: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Banca: Cleide Cristina Rodrigues Martinhon / Banca: Stella Kossatz Pereira / Mestre

Sabe-se que o controle do biofilme supragengival por meio da escovação dentária é fundamental para prevenção de gengivite e cárie dentária. Entretanto, a literatura ainda é escassa quanto a características de um modelo de escova manual ideal, que seja t.1o efetiva no controle de placa, quanto segura. O objetivo desta dissertação foi avaliar a eficácia de duas escovas manuais na remoção do biofilme supragengival, bem como investigar a relação entre dureza de cerdas e formato da ponta de escovas manuais quanto a efeitos adversos da escovação. Esta dissertação é compost.'l por dois estudos, um ensaio clínico randomizado (ECR) e uma revisão sistemática da literatura. O ECR comparou a eficácia na remoção de biofilme supragengival de duas escovas macias em 70 voluntários que foram randomizados para os grupos Colgate SlimSoft ou Curaprox CS5460. O exame de placa por meio do Índice de Placa da Marinha, modificado por Rustogi foi realizado no momento inicial pré- e pósescovação supervisionada por 1 minuto, bem como após 7 dias de utilização da escova e dentifrício fornecidos. A escova SlimSoft apresentou uma maior redução de escores de placa interproximais e de boca toda, tanto na pós-escovação inicial (p<O.OS), quanto após 7 dias, em que houve um incremento na redução de placa dessas áreas, quando comparado a escova Curaprox (p<O.OS). Assim, a escova SlimSoft apresentou uma maior eficácia para remoção do biofilme supragengival quando comparada à Curaprox. A revisão sistemática da literatura investigou se a dureza e a ponta das cerdas de escovas manuais estão associadas com efeitos adversos da escovação. Para isso, três bancos de dados eletrônicos foram acessados utilizado uma estratégia de busca pré-estabelecida. Dois pesquisadores analisaram a inclusão dos títulos, resumos, leitura completa e extração de dados dos artigos e, se um consenso não fosse possível. um terceiro pesquisador estaria incluído neste processo. De 126 artigos lidos na íntegra, 11 foram elegíveis para inclusão. Cinco estudos analisaram ponta das certas das escovas, dois a dureza e quatro investigaram tanto a ponta da cerda quanto a dureza de escovas. Ainda, quatro estudos apresentaram efeito adverso como desfecho primário. Observou-se mais lesões gengivais quanto maior a dureza das cerdas das escovas. As lesões de recessão gengiva! permaneceram estáveis ao longo do tempo e o número de lesões de abrasão gengiva! foram semelhantes com o uso de escovas macias, tanto com cerdas afiladas, quanto arredondadas. Os estudos que tiveram segurança como desfechos secundários não reportaram efeitos adversos. Assim, sugeriu-se que o uso de escovas macias e extra-macias, independentemente da ponta da cerda, pareceram não apresentar riscos clínicos relevantes para os tecidos moles bucais. / Jt is known that toothbrushing is an excellent method for mechanical supragingival biofilm remova! and it is associated with prevention of both gingivitis and dental caries. However, the literature is still scarce regarding the characteristics of an ideal manual toothbrush, which is as effective in plaque contrai as safe. The aim o f this dissertation was to evaluate the efficacy oftwo manual toothbrushes in supragingival biofihn remova), as well as to investigate the relation of bristle stiffness and bristle end-shape with potential adverse effects. The present work is composed of two studies, a randomized controlled trial (RCT) and a systematic review of the literature. The RCT compared the efficacy in supragingival plaque remova! of two soft-bristle toothbrushes in 70 volunteers that were randomly allocated to the Colgate SlimSoft or Curaprox CS5460 toothbrush groups. Subjects underwent plaque examination using the Rustogi Modification of the Navy Plaque Index with pre- and post-brushing examinations under supervision at baseline and after 7 days of daily oral hygiene with their assigned toothbrush and dentifrice provided. The mean plaque score presented a greater reduction of whole-mouth and interproximal plaque scores in the SlimSoft group after a single toothbrushing at baseline (p<O.OS) and after 7 days compared to the Curaprox group (p<O.OS). Thus, the SlimSoft toothbrush presented greater efficacy in supragingival plaque remova) than did the Curaprox CS5460 toothbrush. The systematic review investigated if bristle stiffness and bristle end-shape of manual toothbrushes are associated with toothbrushing adverse effects. Three electronic data bases were searched and a pre-established search strategy was performed. Inclusion of titles, abstracts, full textanalysis and data extraction was dane by two reviewers, and when a consensus was not possible, a third researcher was included in this process. From 126 potentially relevant articles for full-text analysis, only 11 were included. Five studies analyzed toothbrush endendshape, two studies investigated toothbrnsh bristle stiffness and four articles examined both the end-shape and bristle stiffness ofmanual toothbrushes. Moreover, four studies presented safety as a primary outcome. Hard toothbrush appeared to produce more gingival lesions when compared to soft and medium bristles. The majority of gingival recessions remained stable over time and new gingival abrasion lesions were observed with the use of both endrounded and tapered toothbrushes. Nane of the studies that evaluated safety as a secondary outcome presented adverse effects. Thus, soft and extra-soft toothbrushes tended to be safe and both tapered and end-rounded bristles might not present a clinically relevant concern to oral soft tissues.

O objetivo do presente estudo clínico foi compreender o efeito do uso prévio de agentes antimicrobianos na diversidade e a estrutura do microbioma procariótico de saliva, biofilme supragengival e canal radicular de dentes com infecção endodôntica aguda. Realizaram-se coletas microbiológicas de saliva (S), biofilme supragengival (BS) e canal radicular (CR) de pacientes que não utilizaram antibióticos (G1: n=6) e de pacientes que utilizaram antibióticos (G2: n=6). Para a caracterização das comunidades de procariotos por meio de sequenciamento de alto rendimento, foram produzidos pools de seis amostras para cada um dos sítios. A região hipervariável V3-V4 do gene 16S rRNA foi amplificada e a plataforma Illumina MiSeq foi empregada para análise das sequências geradas. Foram determinadas a presença e abundância relativa das unidades taxonômicas operacionais (OTUs) em cada amostra. Procedeu-se a análise de alfa-diversidade para cada amostra, considerando-se as métricas de Simpson, dominância, estimativa de riqueza de Chao-I e o Índice de Shannon. Os valores obtidos foram comparados por meio de testes estatísticos. Para a análise dos índices de beta-diversidade, empregou-se o método de agrupamento UPGMA, com jackknifing e método de comparação UniFrac com peso. A representação gráfica tridimensional da beta-diversidade foi realizada por meio de análise de coordenadas principais. A técnica de PCR gene específico foi empregada para determinar a presença de genes relacionados à resistência bacteriana para agentes beta-lactâmicos (blaTEM, blaZ, ampC, mecA), macrolídeos (ermB, ermC, mefA), tetraciclinas (tetM, tetQ, tetW), lincosamidas (lnuB, lsaB) e vancomicina (vanA, vanD, vanE). A similaridade para a presença/ausência de genes de resistência nas amostras de S, BS e CR em G1 e G2 foi determinada por meio de coeficiente de agrupamento, utilizando-se o método UPGMA com distância Euclidiana. Todos os pacientes apresentavam infecção endodôntica aguda, caracterizada pela presença de dor espontânea, necrose pulpar e dor à percussão vertical. Aumento de volume foi observado em 8/12 pacientes. Os pacientes do Grupo 2 utilizaram beta-lactâmicos previamente à consulta (amoxicilina = 5; cefalexina = 1). Há predomínio de integrantes do domínio Bactéria em todas S, BS e CR. Archaea pertencentes ao gênero Methanobrevibacter foram encontradas apenas em amostras de CR, constituindo menos de 1% do total de OTUs (G1-CR = 0,319%; G2-CR = 0,014%). Há predomínio de bactérias dos filos Firmicutes e Bacteroidetes em amostras de S, BS e CR. Há redução intensa no percentual de OTUs pertencentes ao Filo Firmicutes em amostras de saliva, quando antibiótico foi utilizado (G1-S = 75,371; G2-S = 35,242). Comportamento oposto ocorreu neste ecossistema para integrantes do Filo Bacteroidetes (G1-S = 12,657; G2-S = 33,947). Tanto em G1 quanto em G2, bactérias do gênero Streptococcus predominam em amostras de S e BS. Em canais radiculares, maiores percentuais de OTUs foram observados para os gêneros Porphyromonas e Prevotella. As métricas de alfadiversidade indicam que o uso prévio de antimicrobiano parece oportunizar o estabelecimento de espécies antes menos abundantes, especialmente em saliva (dominância: G1-S>G2-S; índice de Shanon: G1-S<G2-S; índice de Simpson: G1- S<G2-S; índice de Chao-1: G1-S<G2-S). A análise de beta-diversidade mostra proximidade entre G1-BS e G2-BS; há distanciamento entre G1-S e G2-S. As amostras G1-CR e G2-CR estão mais distantes de S e BS, sugerindo maior seleção imposta pelo ecossistema do CR aos procariotos. Os genes de resistência mais frequentemente detectados foram tetM, tetQ, tetM, ermB e mefA. Não foram detectados genes vanA, vanD, vanE, blaZ, mecA, lnuB e ermC. O gene ermB foi frequentemente detectado em amostras de S, BS e CR em ambos os grupos. Em pacientes que não utilizaram antibiótico, o gene tetM e o gene tetQ foram detectados simultaneamente em S, BS e CR (tetM = 4/6; tetQ = 3/6). A análise multivariada não demonstrou nível de agrupamento alto entre amostras de um mesmo paciente, de um mesmo ecossistema, ou de um mesmo grupo. A partir dos resultados do presente estudo, observou-se que a utilização de agente antimicrobiano betalactâmico parece alterar parâmetros composicionais de comunidades de procariotos na cavidade bucal. Entretanto, particularidades relativas a cada ecossistema podem modular a extensão deste efeito, parecendo ser mais intensos em amostras de S do que em BS e CR. / The present clinical study aimed to assess the effect of antibiotics over the diversity and structure in prokaryotic communities of saliva, supragengival biofilm and root canal of teeth with acute primary infections. Samples of saliva (S), supragengival biofilm (BS) and root canal of teeth with acute primary infections (CR) were collected from patients, and were grouped according with the previous use of antibiotic (G1 = no antibiotics; G2 = antibiotics). Pooled samples for each community were evaluated. DNA sequencing was performed with MiSeq (Illumina). The V3-V4 hypervariable region from the 16S rRNA gene was amplified. The presence and relative abundance of the operational taxonomic units (OTUs) was determined for each sample. Alpha-diversity analysis was performed with the Simpson’s index, dominance, Chao-1 richness index and Shannon’s index. Statistical analysis was carried out to compare their values for each community.Beta-diversity was computed through UPGMA clustering and jackknifing. The principal coordinate analysis employed weighted UniFrac. Gene-specific PCR was employed to detect resistance genes to lactamics (blaTEM, blaZ, ampC, mecA), macrolides (ermB, ermC, mefA), tetracyclines (tetM, tetQ, tetW), lincosamides (lnuB, lsaB) e vancomycin (vanA, vanD, vanE). The UPGA clustering analysis with Euclidean distance was applied to investigate the existence of similar groups of samples. A dendrogram was constructed to show the arrangement of the sample groups produced by clustering. All the patients had primary acute endodontic infections, with spontaneous pain, pulp necrosis and tenderness on percussion. Swelling was observed for 8 out of 12 patients. Patients from G2 had lactamics before the urgency appointment (amoxicillin = 5; cephalexin = 1). Bacteria were predominant in S, BS and CR samples. Archaea belonging to the genus Methanobrevibacter were only detected in RC samples and comprised less than 1% of all the OTUs G1-CR = 0.319%; G2-CR = 0.014%). The great majority of the detected OTUs in S, BS, and CR belonged to the phyla Firmicutes and Bacteroidetes. Reduction in the percentage of Firmicutes was observed in G2-S (G1-S = 75.371%; G2-S = 35.242%). A distinct behavior was demonstrated by the Bacteroidetes (G1- S = 12.657%; G2-S = 33.947%). Components belonging to the genus Streptococcus were predominant in S and BS, for both G1 and G2. CR harbored high percentage of species belonging to the genus Porphyromonas and Prevotella. The alpha-diversity indexes demonstrated that the G2-S had an increase in low abundant species (dominance: G1- S>G2-S; Shanon index: G1-S<G2-S; Simpson index: G1-S<G2-S; Chao-1 index: G1-S<G2- S). Beta-diversity showed that G1-BS and G2-BS had close spatial distribution. G1-CR and G2-CR were more distant from S and BS samples. The RC may promote a most intense species selection, due to environmental conditions. The most frequently detected genes associated with resistance to antibiotics were tetM, tetQ, tetM, ermB, and mefA. The genes vanA, vanD, vanE, blaZ, mecA, lnuB, and ermC were not detected in the samples. The gene ermB was frequently detected in S, BS and CR samples. In patients from G1, tetM and tetQ were detected simultaneously in all the three environments (tetM = 4/6; tetQ = 3/6). There was no clustering behavior for samples belonging to different environments in the same patients and between the same environment samples from different groups. An overall analysis from the data allows for suggesting that the use of lactamic agents may alter compositional parameters from prokaryotic communities in the oral cavity to different extents. Specific environmental characteristics from each site may modulate the effect that seemed to be more intense for S than for BS and CR.