O treinamento físico aeróbico induz atenuação de disfunções cardiometabólicas que acometem mulheres menopausadas e/ou diabéticas. Entretanto, estudos envolvendo treinamento resitido ou combinado (aeróbio + resistido) são escassos e controversos. Dessa forma, os objetivos do presente estudo foram avaliar os efeitos metabólicos, cardiovasculares e autonômicos da privação dos hormônios ovarianos na presença ou não de diabetes induzido por estreptozotocina em ratas, bem os efeitos do treinamento físico aeróbio dinâmico, resistido dinâmico, ou combinado nesta condição. Ratas Wistar (200-220g) foram dividas em um grupo controle sedentário (ES), um grupo diabético sedentário (DS) e 5 grupos ooforectomizados (retirada bilateral dos ovários) (n=8), sendo um euglicêmico sedentário (EOS) e os demais diabéticos (estreptozotocina, 50 mg/kg, iv): sedentário (DOS), submetido a treinamento físico (TF) aeróbio em esteira (DOTA), a TF resistido em escada (DOTR), ou a TF combinado, em escada e esteira em dias alternados (DOTC). Após as 8 semanas de TF, a função e a morfometria cardíaca foram avaliadas pelo ecocardiograma e, no dia seguinte, os animais foram canulados para registro da pressão arterial (PA) e avaliação da sensibilidade barorreflexa (SB). A análise da variabilidade da frequência cardíaca (FC) e da PA sistólica (PAS) foi realizada no domínio do tempo e da frequência. Os resultados demonstraram aumento de 9% no peso corporal e 10% na PA, e redução de SB (21% nas respostas taquicárdicas) no grupo EOS. Os animais diabéticos apresentaram redução de 19% no peso corporal e na capacidade física (22% no teste máximo em esteira e 19% na carga máxima na escada); redução de 8% na massa e 18% na espessura relativa da parede do ventrículo esquerdo (VE), aumento de 11% na cavidade do VE, de 31% no tempo de relaxamento isovolumétrico e 34% no índice de desempenho miocárdico; além de redução de na PA, na FC, na SB e na banda AF-IP. A associação de diabetes com ooforectomia induziu exacerbação de algumas disfunções, como aumento de 9% na glicemia e de 20% no índice de desempenho miocárdico (IDM); redução de 14% na velocidade de encurtamento do VE e 14% na FC (DOS vs. DS). O treinamento induziu aumento de 77% na capacidade de corrida no grupo DOTA, aumento de 60% na carga máxima no DOTR, e aumento em ambos os parâmetros no DOTC (75% na corrida e 58% na carga máxima). Todos os animais treinados apresentaram reversão da hipotensão e da bradicardia de repouso, associadas a aumento na VAR-IP (DOTA: 79%, DOTR: 79%, DOTC: 65%), normalização da banda de BF-IP, e redução no índice de desempenho miocárdico (DOTA: 16%, DOTR: 15%, DOTC: 31%) (vs. DOS). Os grupos DOTA e DOTC (mas não o DOTR) apresentaram maior SB (respostas taquicárdicas e bradicárdicas), atenuação das alterações morfométricas do VE, e na variabilidade da PA sistólica (vs. DOS). Além disso, o grupo DOTR apresentou aumento de 14% na massa, e redução de 14% na velocidade de encurtamento do VE e de 15% no IDM em relação ao grupo DOS. O grupo DOTC demonstrou redução adicional de 18% no IDM e em relação ao DOTA. A mortalidade foi maior no grupo DOS em comparação aos grupos treinados. Concluindo, os resultados evidenciam que o treinamento físico dinâmico aeróbio, resistido ou combinado induziu benefícios na capacidade física, cardíacos, hemodinâmicos e autonômicos após a privação dos hormônios ovarianos em ratas diabéticas. No entanto, o treinamento físico combinado promoveu efeitos adicionais em relação aos treinamentos aeróbio ou ao resistido nesta condição. / Aerobic exercise training induces attenuation of cardiometabolic disorders that affect postmenopausal and/or diabetic women. However, there few and controversial studies involving resistance or combined training (aerobic + resistance) in these conditions. Thus, the objectives of this study were to evaluate the metabolic, cardiac, hemodynamic and autonomic effects of ovarian hormones deprivation in the healthy and streptozotocin-induced diabetic rats, as well as the effects of dynamic aerobic, resistance or combined exercise training in this condition. Female Wistar rats (200-220g) were divided into (n = 8 each group) a sedentary control group (ES), a sedentary diabetic group (SD) and 5 ovariectomized groups (bilateral ovaries removal): sedentary euglycemic (EOS), sedentary diabetic (DOS), trained diabetic by an aerobic protocol on a treadmill (DOTA), by a resistance protocol in ladder (DOTR), or by a combined protocol in ladder+treadmill on alternate days (DOTC). After 8 weeks of training, cardiac morphometric and function were evaluated by echocardiography. On the next day, the animals were cannulated to arterial pressure (AP) recording and baroreflex sensitivity (BS) evaluation. Heart rate (HR) and systolic AP variability were analyzed in the time and frequency domains. The results showed increased of 9% in body weight and 10% in AP, and BS (21% in tachycardic responses) reduction in the EOS group. Diabetic animals showed a reduction of 19% in body weight and in physical capacity (22% in the maximal test on a treadmill and 19% in the maximum load on the ladder), reduction of 8% in mass and of 18% in relative wall thickness of the left ventricle (LV), increase of 11% in LV cavity, 31% in the isovolumetric relaxation time and 34% in myocardial performance index (MPI); in addition to reduction in AP, in HR, BS, and in PI-HF band. The association of diabetes with ovariectomy induced exacerbation of some dysfunctions, such as increased of 9% in blood glucose and 20% in MPI, reduction of 14% in the LV velocity of shortening and 14% in HR (DOS vs. DS). Exercise training induced an increase of 77% in the run capacity in the DOTA group, 60% in the maximum load in DOTR group, and increases in both parameters in DOTC (75% in run and 58% in the maximum load). All trained animals showed reversal of hypotension and bradycardia at rest DOTA: 79%, DOTR: 79%, DOTC: 65%), associated with increased HR variance and normalization of the LF band of pulse interval (PI), and reduced MPI (DOTA: 16%, DOTR: 15%, DOTC: 31%) (vs. DOS). The DOTA and DOTC groups (but not DOTR) had higher BS (tachycardic and bradycardic responses), and attenuation in the LV morphometric changes and in SAP variability (vs. DOS). Furthermore, the DOTR group showed an increase of 14% in mass and a reduction of 14% in LV velocity of shortening and of 15% in MPI in relation to DOS group. The DOTC group showed additional reduction of 18% in MPI and in relation to DOTA. Mortality was higher in DOS group when compared to trained group. In conclusion, the results showed that dynamic aerobic, resistance or combined exercise training induced benefits in physical capacity, cardiac, hemodynamic and autonomic parameters after ovarian hormone deprivation in diabetic rats. However, the combined exercise training promoted additional effects than aerobic or resistance training in this condition.

Essa pesquisa foi realizada com o objetivo de avaliar os componentes da matriz extracelular da cartilagem, ligamentos, tendão e sinóvia em modelo experimental de diabetes. Metodologia: Ratos Wistar jovens foram divididos em grupo diabético (DG n = 15) induzido por estreptozotocina (STZ, 35 mg / kg) e grupo controle (CG, n = 15). Foram avaliados o peso, a glicemia e o anticorpo anticarboximetil-lisina plasmática, durante o experimento e após 70 dias da indução. As articulações do joelho, os ligamentos colateral lateral, colateral medial e tendão calcâneo foram isoladas, corados com hematoxilina-eosina e Picrosírius. O teor de colágeno total foi determinado por morfometria. Avaliamos ainda a metaloproteinase 9 e os inibidores de metaloproteinases (TIMP) 1 e 2 da cartilagem articular. Na sinóvia analisamos a expressão de endotelina-1. Os colágenos dos tipos I, III, V nos ligamentos e tecido sinovial e II e XI na cartilagem foram avaliados pela técnica de imunofluorescência. Resultados: Os níveis elevados de glicemia e anticorpo anticarboximetil-lisina plasmática foram observados no GD quando comparado com o CG. O peso final foi menor nos ratos GD do que nos ratos do CG. Avaliação histomorfométrica mostrou uma grande quantidade de fibras colágenas finas fibrilas, mais grossa nos ligamentos e cartilagens da GD ratos, bem como o aumento de colágeno e diminuição da espessura das fibras colágenas finas do tecido sinovial. Houve uma diminuição no proteoglicanos na DG ratos, quando comparados com os ratos do GC. Imunofluorescência demonstrou um aumento de colágeno III e V em ligamentos, colágeno XI em cartilagem, e colágeno I no tecido sinovial de ratos DG comparados com ratos do GC. Conclusão: O diabetes está fortemente relacionado com a remodelação do colágeno e ocorre de formas diferentes nos componentes articulares. Estes resultados podem contribuir para o desenvolvimento de novas terapias correlacionadas com as complicações articulares em pacientes diabéticos / The aim of this study was to evaluate the extracellular matrix components in cartilage, ligaments and synovia in experimental model of diabetes. In this way Young Wistar rats were divided into diabetic group (DG; n = 15) induced by streptozotocin (STZ; 35 mg/kg) and control group (CG; n=15). Weight, blood glucose and plasmatic anti-carboxymethyllysine were measured 70 days after STZ. Knee joints, patellar, collateral lateral, and collateral medial ligaments were isolated, stained with hematoxylin-eosin and Picrosírius. The total collagen content was determined by morphometry. The types I, III, and V collagens in ligaments and synovial tissue and II and XI in cartilage were evaluated by immunofluorescence. Higher blood glucose levels and plasmatic anti-carboxymethyllysine were observed in DG rats when compared with CG rats. The final weight was lower in DG rats than in CG rats. Histomorphometric evaluation depicted a large quantity of thin collagen fibers over thick fibrils in ligaments and cartilage in DG rats as well as increased thick collagen and decreased thin collagen fibers in synovial tissue. There was a decrease in proteoglycans in DG rats when compared with CG rats. Immunofluorescence demonstrated increases of collagen III and V in ligaments, collagen XI in cartilage and collagen I in synovial tissue of DG rats compared with CG rats. In conclusion diabetes is strongly related with collagen remodeling and occurs differently in joint components. These results may contribute to the development of new therapies correlated with joint complications in diabetic patients

Diss. (sammanfattning) Linköping : Linköpings universitet, 2006. / Härtill 4 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2004. / Härtill 4 uppsatser.

O treinamento físico aeróbico induz atenuação de disfunções cardiometabólicas que acometem mulheres menopausadas e/ou diabéticas. Entretanto, estudos envolvendo treinamento resitido ou combinado (aeróbio + resistido) são escassos e controversos. Dessa forma, os objetivos do presente estudo foram avaliar os efeitos metabólicos, cardiovasculares e autonômicos da privação dos hormônios ovarianos na presença ou não de diabetes induzido por estreptozotocina em ratas, bem os efeitos do treinamento físico aeróbio dinâmico, resistido dinâmico, ou combinado nesta condição. Ratas Wistar (200-220g) foram dividas em um grupo controle sedentário (ES), um grupo diabético sedentário (DS) e 5 grupos ooforectomizados (retirada bilateral dos ovários) (n=8), sendo um euglicêmico sedentário (EOS) e os demais diabéticos (estreptozotocina, 50 mg/kg, iv): sedentário (DOS), submetido a treinamento físico (TF) aeróbio em esteira (DOTA), a TF resistido em escada (DOTR), ou a TF combinado, em escada e esteira em dias alternados (DOTC). Após as 8 semanas de TF, a função e a morfometria cardíaca foram avaliadas pelo ecocardiograma e, no dia seguinte, os animais foram canulados para registro da pressão arterial (PA) e avaliação da sensibilidade barorreflexa (SB). A análise da variabilidade da frequência cardíaca (FC) e da PA sistólica (PAS) foi realizada no domínio do tempo e da frequência. Os resultados demonstraram aumento de 9% no peso corporal e 10% na PA, e redução de SB (21% nas respostas taquicárdicas) no grupo EOS. Os animais diabéticos apresentaram redução de 19% no peso corporal e na capacidade física (22% no teste máximo em esteira e 19% na carga máxima na escada); redução de 8% na massa e 18% na espessura relativa da parede do ventrículo esquerdo (VE), aumento de 11% na cavidade do VE, de 31% no tempo de relaxamento isovolumétrico e 34% no índice de desempenho miocárdico; além de redução de na PA, na FC, na SB e na banda AF-IP. A associação de diabetes com ooforectomia induziu exacerbação de algumas disfunções, como aumento de 9% na glicemia e de 20% no índice de desempenho miocárdico (IDM); redução de 14% na velocidade de encurtamento do VE e 14% na FC (DOS vs. DS). O treinamento induziu aumento de 77% na capacidade de corrida no grupo DOTA, aumento de 60% na carga máxima no DOTR, e aumento em ambos os parâmetros no DOTC (75% na corrida e 58% na carga máxima). Todos os animais treinados apresentaram reversão da hipotensão e da bradicardia de repouso, associadas a aumento na VAR-IP (DOTA: 79%, DOTR: 79%, DOTC: 65%), normalização da banda de BF-IP, e redução no índice de desempenho miocárdico (DOTA: 16%, DOTR: 15%, DOTC: 31%) (vs. DOS). Os grupos DOTA e DOTC (mas não o DOTR) apresentaram maior SB (respostas taquicárdicas e bradicárdicas), atenuação das alterações morfométricas do VE, e na variabilidade da PA sistólica (vs. DOS). Além disso, o grupo DOTR apresentou aumento de 14% na massa, e redução de 14% na velocidade de encurtamento do VE e de 15% no IDM em relação ao grupo DOS. O grupo DOTC demonstrou redução adicional de 18% no IDM e em relação ao DOTA. A mortalidade foi maior no grupo DOS em comparação aos grupos treinados. Concluindo, os resultados evidenciam que o treinamento físico dinâmico aeróbio, resistido ou combinado induziu benefícios na capacidade física, cardíacos, hemodinâmicos e autonômicos após a privação dos hormônios ovarianos em ratas diabéticas. No entanto, o treinamento físico combinado promoveu efeitos adicionais em relação aos treinamentos aeróbio ou ao resistido nesta condição. / Aerobic exercise training induces attenuation of cardiometabolic disorders that affect postmenopausal and/or diabetic women. However, there few and controversial studies involving resistance or combined training (aerobic + resistance) in these conditions. Thus, the objectives of this study were to evaluate the metabolic, cardiac, hemodynamic and autonomic effects of ovarian hormones deprivation in the healthy and streptozotocin-induced diabetic rats, as well as the effects of dynamic aerobic, resistance or combined exercise training in this condition. Female Wistar rats (200-220g) were divided into (n = 8 each group) a sedentary control group (ES), a sedentary diabetic group (SD) and 5 ovariectomized groups (bilateral ovaries removal): sedentary euglycemic (EOS), sedentary diabetic (DOS), trained diabetic by an aerobic protocol on a treadmill (DOTA), by a resistance protocol in ladder (DOTR), or by a combined protocol in ladder+treadmill on alternate days (DOTC). After 8 weeks of training, cardiac morphometric and function were evaluated by echocardiography. On the next day, the animals were cannulated to arterial pressure (AP) recording and baroreflex sensitivity (BS) evaluation. Heart rate (HR) and systolic AP variability were analyzed in the time and frequency domains. The results showed increased of 9% in body weight and 10% in AP, and BS (21% in tachycardic responses) reduction in the EOS group. Diabetic animals showed a reduction of 19% in body weight and in physical capacity (22% in the maximal test on a treadmill and 19% in the maximum load on the ladder), reduction of 8% in mass and of 18% in relative wall thickness of the left ventricle (LV), increase of 11% in LV cavity, 31% in the isovolumetric relaxation time and 34% in myocardial performance index (MPI); in addition to reduction in AP, in HR, BS, and in PI-HF band. The association of diabetes with ovariectomy induced exacerbation of some dysfunctions, such as increased of 9% in blood glucose and 20% in MPI, reduction of 14% in the LV velocity of shortening and 14% in HR (DOS vs. DS). Exercise training induced an increase of 77% in the run capacity in the DOTA group, 60% in the maximum load in DOTR group, and increases in both parameters in DOTC (75% in run and 58% in the maximum load). All trained animals showed reversal of hypotension and bradycardia at rest DOTA: 79%, DOTR: 79%, DOTC: 65%), associated with increased HR variance and normalization of the LF band of pulse interval (PI), and reduced MPI (DOTA: 16%, DOTR: 15%, DOTC: 31%) (vs. DOS). The DOTA and DOTC groups (but not DOTR) had higher BS (tachycardic and bradycardic responses), and attenuation in the LV morphometric changes and in SAP variability (vs. DOS). Furthermore, the DOTR group showed an increase of 14% in mass and a reduction of 14% in LV velocity of shortening and of 15% in MPI in relation to DOS group. The DOTC group showed additional reduction of 18% in MPI and in relation to DOTA. Mortality was higher in DOS group when compared to trained group. In conclusion, the results showed that dynamic aerobic, resistance or combined exercise training induced benefits in physical capacity, cardiac, hemodynamic and autonomic parameters after ovarian hormone deprivation in diabetic rats. However, the combined exercise training promoted additional effects than aerobic or resistance training in this condition.

Orientador: Juliana Trindade Clemente Napimoga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-24T14:35:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freitas_FabianaFurtado_M.pdf: 645432 bytes, checksum: e82ee77ed413f662feeacfa6a76c4c23 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O diabetes induz resposta inflamatória acentuada resultando em maior movimentação dental por dispositivos ortodônticos. Sendo assim, este estudo teve como objetivo avaliar se o aumento da resposta inflamatória, decorrente do tracionamento dental por um dispositivo ortodôntico, induzido pelo diabetes altera a excitabilidade neuronal no gânglio trigeminal. Para este estudo foram utilizados ratos Wistar (±150 g, n= 4-6/grupo) tratados com injeção intraperitoneal de tampão citrato (veículo; Normoglicêmicos ¿ NG), estreptozotocina 75 mg/kg (Diabético ¿ DG), ou estreptozotocina 75 mg/kg + injeção subcutânea de insulina (Diabético tratado com insulina ¿ IG). Vinte e oito dias após o tratamento foi instalado um dispositivo ortodôntico e a movimentação dentária foi avaliada nos dias 0, 1, 3, 6 ou 12. Após o tempo correspondente, os animais foram anestesiados e a maxila, gânglio trigeminal e tecido gengival removidos e submetidos à análise para quantificação da movimentação dentária e análise bioquímica (ELISA) para avaliação da liberação de glutamato, Fator de Necrose Tumoral-alfa (TNF-?), Interleucina 1-beta (IL-1?), Substância P (SP) e Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina (CGRP). Os resultados demonstraram que o diabetes aumentou significativamente o movimento dental induzido pelo tracionamento ortodôntico nos dias 1, 3 e 6 quando comparado aos animais NG e IG (p<0.05: Two-way ANOVA, Teste de Bonferroni). Corroborando com esses resultados, os animais DG demonstraram maior liberação de TNF-? e IL-1? no tecido gengival em relação aos animais NG e IG (p<0.05). No entanto, apesar do acentuado processo inflamatório nos animais DG, a liberação de glutamato (gânglio trigeminal), SP e CGRP (tecido gengival) foi significativamente reduzida (p<0.05). Os resultados sugerem que a ativação neuronal no gânglio trigeminal é reduzida no diabetes / Abstract: Diabetes is known to result in a greater inflammatory response that in turn accentuated orthodontic tooth movement. Thus, this study aimed to evaluate if the higher inflammatory response induced by the orthodontic tooth movement in diabetic animals changes the neuronal excitability in the trigeminal ganglia. For that, Wistar rats (± 150 g, n=4-6/group) were treated with an intraperitoneal injection of citrate buffer (vehicle; Normoglycemic ¿ NG), streptozotocin 75 mg/kg (Diabetic ¿ DG) or streptozotocin 75 mg/kg + subcutaneous injection of insulin (Diabetic treated with insulin ¿ IG). Twenty-eight days after the treatment, an orthodontic appliance was placed and the tooth movement was evaluated at days 0, 1, 3, 6 and 12. After the corresponding time, the animals were terminally anesthetized and their maxillae, trigeminal ganglia and gingival tissue were removed and submitted to analyze the amount of tooth movement and biochemical analysis (ELISA) to measure the release of glutamate, Tumor Necrose Factor-alpha (TNF-?), Interleukin 1-beta (IL-1?), Substance P (SP) and Calcitonin Gene-Related Peptide (CGRP). The results demonstrated that diabetes accentuated orthodontic tooth movement at days 1, 3 and 6 when compared with NG and IG (p<0.05: Two-way ANOVA, Bonferroni¿s test). Corroborating these results, DG rats demonstrated higher release of TNF-? and IL-1? than that observed for the NG and IG rats (p<0.05). Although the greater inflammatory response induced in DG rats, the release of glutamate, SP and CGRP were significantly reduced (p<0.05). The results suggest that neuronal activation in trigeminal ganglia is reduced in diabetes / Mestrado / Odontopediatria / Mestra em Odontologia

Orientador: Rejane Maira Góes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-26T11:01:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_CarolinaFrandsenPereirada_M.pdf: 27859071 bytes, checksum: f28a294dc38f78fd1d16827f7aee8c54 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Existem inúmeras evidências de que o diabetes afeta a função reprodutiva masculina, provocando danos aos parâmetros espermáticos, e portanto, influenciando a fertilidade dos indivíduos afetados. A melatonina é um hormônio secretado pela glândula pineal que apresenta uma extensa gama de atuações, dentre elas um papel fundamental no controle da esteroidogênese e na proteção contra radicais livres. O objetivo deste estudo foi avaliar se a melatonina oferecida oralmente, em baixas doses, concomitante à maturação sexual, afeta os parâmetros reprodutivos de ratos saudáveis na idade adulta, e se interfere nos danos reprodutivos induzidos pelo diabetes experimental. Ratos Wistar machos com 4 semanas de idade foram divididos em oito grupos (n=15/grupo): os quatro primeiros foram eutanaziados com 14 semanas de idade, sendo respectivamente - controle (CS), tratados com melatonina (MS), diabéticos (DS) e tratados com melatonina submetidos ao diabetes (MDS); por sua vez, os quatro últimos foram eutanasiados na 21ª semana de vida- controle (CL), tratados com melatonina (ML), diabéticos não tratados (DL) e diabéticos tratados com melatonina (MDL). A melatonina foi disponibilizada na água de beber (10 µg/Kg p.c. em 0,001% etanol/dia) diariamente à partir da 5ª semana de idade, enquanto o diabetes foi induzido na 13a semana de vida com uma dose única de estreptozotocina (4,5mg/100g p.c., i.p.) nos grupos DS, DL, MDS e MDL. No primeiro conjunto de subgrupos (Grupos S), o período diabético correspondeu a uma semana, enquanto no segundo conjunto (Grupos L), este período se referiu a dois meses. Ratos diabéticos apresentaram hiperglicemia, redução marcante no peso corpóreo, queda acentuada nos níveis circulantes de testosterona, e em condições tardias da doença, atrofia do epidídimo. Análises histológicas e estereológicas indicaram alterações no compartimento intersticial do testículo, descolamento prematuro de células germinativas e vacuolização de células de Sertoli, porém lesões mais severas, como a depleção do epitélio germinativo, foram observadas em apenas um animal após dois meses de doença. Além disso, não houve prejuízos à produção diária de espermatozoides. Por outro lado, as contagens espermáticas foram reduzidas na cauda do epidídimo, e o tempo de trânsito foi acelerado em todos os seus segmentos à longo termo. A motilidade espermática foi prejudicada, e o número de células aberrantes no lúmen dos duetos do epidídimo foi acentuadamente maior do que em animais saudáveis. Houve um espessamento do tecido estromal em alguns segmentos, com aumento da frequência de fibras colágenas e musculatura lisa. O diabetes levou a um aumento sistêmico nos níveis de glutationa peroxidase (GPx) e níveis de malonaldeído (MDA), os quais não foram restaurados pela ingestão de melatonina. A atividade da glutationa transferase (GST), por sua vez, foi reduzida no sangue de animais diabéticos, independente do tratamento com melatonina. No testículo, houveram alterações marginais no sistema antioxidante relacionadas à condição diabética, o que não ocorreu no epidídimo. O tratamento de animais saudáveis com melatonina desde a idade pré-púbere não provocou disfunções reprodutivas na idade adulta, apesar de levar à uma redução na testosterona sérica, e não alterou os biomarcadores relacionados à resposta antioxidante. Porém, o tratamento com melatonina anterior e concomitante à condição diabética evitou alguns danos associados a esta desordem, particularmente ao que se refere ao epidídimo, pois à curto prazo impediu a redução da reserva espermática, e atenuou os danos à motilidade espermática em ambos os períodos, apesar de não impedir a atrofia observada no segmento distal. Em relação à histologia do órgão, a melatonina pareceu evitar o desenvolvimento de fibrose no estroma do epidídimo, embora esta resposta tenha sido confinada à sub-regiões particulares. A ingestão de melatonina também evitou lesões severas ao epitélio germinativo, e preveniu alterações morfológicas nas células de Leydig. A esteroidogênese não foi tão prejudicada quanto nos diabéticos não-tratados, e este padrão foi acompanhado por um aumento expressivo de células AR-positivas no testículo de diabéticos tratados à longo termo. Portanto, nossas evidências permitem sugerir que a ingestão diária de 10 µg/Kg p.c. de melatonina oferecida desde a fase pré-púbere não compromete a função testicular ou do epidídimo, mas apresenta um efeito positivo sobre a secreção de testosterona, que é afetada pelo diabetes. Como a redução na esteroidogênese provocada pela ingestão de melatonina foi permanente, nossos dados sugerem que seu consumo prolongado leva a uma reprogramação das células de Leydig ou do eixo hipotálamo-hipófise-gônada. A ingestão de melatonina também preserva a motilidade espermática, porém sem restaurar a atrofia epididimal ou a reserva espermática nos animais diabéticos. Comparando os efeitos de longo termo aos efeitos agudos do diabetes experimental de uma semana, infere-se que a melatonina age de maneira diferencial de acordo com o desenvolvimento da doença / Abstract: There are numerous evidence that diabetes affects male reproductive function, causing damage to sperm parameters, and thus influencing the fertility of the affected individuais. Melatonin is a hormone secreted by the pineal gland and presents a wide range of actions, among them a key role in the control of steroidogenesis and in the protection against free radicais. The aim of this study was to evaluate whether melatonin offered orally at low doses, concomitant with sexual maturity, affects the reproductive parameters in healthy adult rats, and interfere with reproductive damage induced by experimental diabetes. Male Wistar rats were divided into eight groups (n = 15/group) at their fourth week of age: the first four were euthanized when they were 14 weeks old, being respectively- Control (CS) treated with melatonin (MS), diabetic (DS) and treated with melatonin subjected to diabetes (MDS); in turn, the last four were studied until they were 21 weeks-old - control (CL), treated with melatonin (ML), untreated diabetics (DL) and diabetics treated with melatonin (MDL). Melatonin was provided daily in drinking water (10 mg/kg b.w. in 0.001o/o ethanol/day) since the 5th week of age, while diabetes was induced at 13 weeks of age with a single dose of streptozotocin (4.5 mg I 100g bw, ip) in groups DS, DL, MDS and MDL. Subgroups from the first experimental design(Groups S) had a diabetic period accounting for one week, while subgroups from the second one (Groups L) were submitted to two months of the disease. Diabetic rats presented hyperglycemia, marked reduction in body weight, strongly decreased circulating levels of testosterone, and at late disease conditions, epididymal atrophy. Histological and stereological analysis indicated alterations in the interstitial compartment of the testis, premature germ cell detachment and vacuolization of Sertoli cells, but more severe injuries, such as depletion of the germinal epithelium were observed in only one animal after two months of illness. Furthermore, there was no damage to the daily sperm production. Sperm counts were reduced at the epididymis distal segment, and transit time was accelerated in all segments after the progression of the disease. Sperm motility was impaired, and the number of aberrant cells in the lumen of the epididymal duct was markedly higher than in healthy animais. There was a thickening of the stromal tissue in some segments, with increased frequency of collagen fibers and smooth muscle. Diabetes has led to an increase in systemic leveis of glutathione peroxidase (GPx) and malondialdehyde (MDA) levels, which were not restored by melatonin supplementation. The activity of glutathione transferase (GST), in turn, was reduced in the blood of diabetic animais regardless of the treatment with melatonin. ln the testis, there were marginal changes in antioxidant systems related to diabetic condition, which did not occur in the epididymis. Treatment of healthy animais with melatonin from pre-pubertal age did not cause reproductive disorders in adulthood, although it lead to a reduction in serum testosterone levels, and did not alter biomarkers related to antioxidant response. However, melatonin treatment previous and concomitant with the diabetic condition prevented some damages associated with this disorder, particularly in what refers to the epididymis, since the short-term ingestion prevented sperm reserve impaiments, and attenuated damage to sperm motility in both periods, although it did not prevent the atrophy observed in the distal segment. Regarding the histology of the organ, melatonin seemed to prevent the development of flbrosis in its stroma, although this response was conflned to particular sub-regions. The ingestion of melatonin also avoided severe injury to the germinal epithelium, and prevented morphological changes in Leydig cells. Steroidogenesis was not as impaired as in untreated diabetics, and this pattern was accompanied by a signiflcant increase of AR-positive cells in the testis of diabetic individuais treated in long term. Therefore, our evidence suggests that the daily intake of 10 mg/kg b.w. melatonin offered from pubertal period on does not impair testicular or epididymal functions, but has a positive effect on the secretion of testosterone, which is affected by diabetes. The reduction in steroidogenesis caused by ingestion of melatonin was permanent, therefore our data suggest that prolonged MLT consumption leads to a reprogramming of Leydig cells or hypothalamic-pituitarygonadal axis. The ingestion of melatonin also preserves sperm motility, but nor epididymal atrophy or restores sperm reserves. Comparing the long term effects with the acute experimental diabetes, it appears that melatonin acts differentially in accordance with the development of the disease / Mestrado / Biologia Celular / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Essa pesquisa foi realizada com o objetivo de avaliar os componentes da matriz extracelular da cartilagem, ligamentos, tendão e sinóvia em modelo experimental de diabetes. Metodologia: Ratos Wistar jovens foram divididos em grupo diabético (DG n = 15) induzido por estreptozotocina (STZ, 35 mg / kg) e grupo controle (CG, n = 15). Foram avaliados o peso, a glicemia e o anticorpo anticarboximetil-lisina plasmática, durante o experimento e após 70 dias da indução. As articulações do joelho, os ligamentos colateral lateral, colateral medial e tendão calcâneo foram isoladas, corados com hematoxilina-eosina e Picrosírius. O teor de colágeno total foi determinado por morfometria. Avaliamos ainda a metaloproteinase 9 e os inibidores de metaloproteinases (TIMP) 1 e 2 da cartilagem articular. Na sinóvia analisamos a expressão de endotelina-1. Os colágenos dos tipos I, III, V nos ligamentos e tecido sinovial e II e XI na cartilagem foram avaliados pela técnica de imunofluorescência. Resultados: Os níveis elevados de glicemia e anticorpo anticarboximetil-lisina plasmática foram observados no GD quando comparado com o CG. O peso final foi menor nos ratos GD do que nos ratos do CG. Avaliação histomorfométrica mostrou uma grande quantidade de fibras colágenas finas fibrilas, mais grossa nos ligamentos e cartilagens da GD ratos, bem como o aumento de colágeno e diminuição da espessura das fibras colágenas finas do tecido sinovial. Houve uma diminuição no proteoglicanos na DG ratos, quando comparados com os ratos do GC. Imunofluorescência demonstrou um aumento de colágeno III e V em ligamentos, colágeno XI em cartilagem, e colágeno I no tecido sinovial de ratos DG comparados com ratos do GC. Conclusão: O diabetes está fortemente relacionado com a remodelação do colágeno e ocorre de formas diferentes nos componentes articulares. Estes resultados podem contribuir para o desenvolvimento de novas terapias correlacionadas com as complicações articulares em pacientes diabéticos / The aim of this study was to evaluate the extracellular matrix components in cartilage, ligaments and synovia in experimental model of diabetes. In this way Young Wistar rats were divided into diabetic group (DG; n = 15) induced by streptozotocin (STZ; 35 mg/kg) and control group (CG; n=15). Weight, blood glucose and plasmatic anti-carboxymethyllysine were measured 70 days after STZ. Knee joints, patellar, collateral lateral, and collateral medial ligaments were isolated, stained with hematoxylin-eosin and Picrosírius. The total collagen content was determined by morphometry. The types I, III, and V collagens in ligaments and synovial tissue and II and XI in cartilage were evaluated by immunofluorescence. Higher blood glucose levels and plasmatic anti-carboxymethyllysine were observed in DG rats when compared with CG rats. The final weight was lower in DG rats than in CG rats. Histomorphometric evaluation depicted a large quantity of thin collagen fibers over thick fibrils in ligaments and cartilage in DG rats as well as increased thick collagen and decreased thin collagen fibers in synovial tissue. There was a decrease in proteoglycans in DG rats when compared with CG rats. Immunofluorescence demonstrated increases of collagen III and V in ligaments, collagen XI in cartilage and collagen I in synovial tissue of DG rats compared with CG rats. In conclusion diabetes is strongly related with collagen remodeling and occurs differently in joint components. These results may contribute to the development of new therapies correlated with joint complications in diabetic patients

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karolinska institutet, 2002. / Härtill 6 uppsatser.

Thesis (M.S.)--University of Michigan, 1975.