Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-19Bitstream added on 2014-06-13T20:26:21Z : No. of bitstreams: 1 romero_lr_dr_botfm.pdf: 456798 bytes, checksum: 12d198981db3d29e3da98567e20b8729 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / A adolescência caracteriza-se por mudanças intensas no aspecto físico, emocional e social. Soma-se o fato de que a influência do grupo de amigos neste momento da vida parece ganhar força e interferir ou determinar o comportamento, sobretudo, relacionado à saúde. O uso de substâncias psicoativas e do comportamento sexual de risco, nessa fase da vida, situa-se como preocupação crescente na literatura. Embora importante para diminuição de práticas sexuais de risco, entre os adolescentes, o conhecimento sobre a prevenção das doenças sexualmente transmissíveis e Aids (DST/Aids), tem dividido atenções com outras variáveis do modo de viver do adolescente. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo estudar a associação de conhecimentos sobre a prevenção das DST/Aids, a prevalência de práticas sexuais de risco, uso de drogas, desempenho escolar, o nível de atividade física habitual e a quantidade e formas de utilização do tempo livre e lazer entre estudantes do ensino fundamental e médio de escolas públicas e privadas de um município do interior paulista. Teve como população alvo os alunos de 7a e 8a séries do ensino fundamental, assim como estudantes do 1o, 2o e 3o ano do ensino médio. Foi conduzido um estudo do tipo transversal com aplicação de questionário estruturado, previamente testado, individual, anônimo e de autopreenchimento. O teste Qui-quadrado foi aplicado para avaliar as diferenças entre as freqüências e o teste de Regressão Logística passo-a-passo para trás para identificar os possíveis fatores preditores de conhecimento sobre prevenção das DST/Aids e prática sexual sem o uso de preservativo. Todos os testes tiveram nível de significância de 5%. Dentre os resultados, cerca de 50% pertence ao sexo masculino, faixa etária de 12 a 19 anos, com idade média... / Adolescence is characterized by deep changes in the physical, emotional and social. Added to the fact that the influence of the group of friends at this time of life seems to gain strength and interfere or determine the behavior, especially related to health. The use of psychoactive substances and sexual risk behavior in this phase of life, stands as growing concern in the literature. While important to decrease risky sexual practices among adolescents, knowledge about the prevention of sexually transmitted diseases and AIDS (STD / AIDS), has shared stage with other variables in the way of life of adolescents. Thus, this work aimed to study the association of knowledge about STD / AIDS, the prevalence of risky sexual practices, drug use, school performance, level of physical activity and the amount and ways of using free time and leisure among students in elementary and secondary education in public and private schools from a city in São Paulo. Target population had students 7th and 8th-graders, as well as students first, second and third years of high school. We conducted a cross-sectional study with a structured questionnaire, previously tested, individual anonymous self-completion. The chi-square test was applied to assess differences between frequencies and logistic regression test step by step back to identify possible predictors of knowledge about STD / AIDS and sexual intercourse without condom use. All tests had a significance level of 5%. Among the results, about 50% are male, aged 12 to 19 years, mean age 15 years (± 1.5 years), and just over 50% enrolled in primary education. Individuals with less knowledge about the prevention of STD / AIDS more frequently reported not having free time during the week, driving for pleasure and go to church or religious service, and sex without... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-07Bitstream added on 2015-04-09T12:47:20Z : No. of bitstreams: 1 000811503_20160307.pdf: 224941 bytes, checksum: 0f2f860ed1d045cc0cf630d167f85703 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-07T11:06:09Z: 000811503_20160307.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T11:07:03Z : No. of bitstreams: 1 000811503.pdf: 508154 bytes, checksum: 8b96a194847aef41b3eb5e7279600c50 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A papilomatose respiratória recorrente (PRR) é uma doença caracterizada pela formação de papilomas benignos no trato respiratório superior. A infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV) é a principal causa da doença, principalmente os tipos 6 e 11, que são considerados de baixo risco oncogênico. A região promotora LCR (long control region) contêm elementos cis-reguladores para fatores transcricionais (FTs) celulares e virais que controlam a expressão gênica precoce e a replicação viral. Alterações nucleotídicas dentro da LCR podem sobrepor sítios de ligação de FTs e influenciar a afinidade de ligação, a atividade transcricional e o curso clínico das doenças associadas á infecções por HPV. Os objetivos deste trabalho foram caracterizar as variantes moleculares de HPV entre os indivíduos com diagnóstico de PRR e analisar o impacto da variabilidade nucleotídica da LCR sob a transcrição viral. O sequenciamento da LCR de amostras HPV-6 positivas revelou cinco variantes genômicas não descritas anteriormente. Por meio de análise computacional, observou-se que as alterações nucleotídicas detectadas sobrepõem potenciais sítios de ligação para alguns fatores de transcrição. A variante HPV-6vc foi a mais prevalente dentre as amostras analisadas (69,2%), sendo mais prevalente nos casos de papilomatose juvenil. Com relação à atividade transcricional, a variante HPV-6vc é mais ativa que a variante molecular HPV-6a. Além disso, observou-se que outras alterações observadas influenciaram na atividade transcricional que foi indiretamente medida por ensaios de luciferase. Vale ressaltar que este é o primeiro trabalho que descreve as diferenças de atividade do promotor entre variantes naturais de HPV-6. Esta pesquisa é de extrema relevância, pois fornece informações importantes sobre a função biológica de variabilidade genômica intratípica de HPV-6 / Recurrent respiratory papillomatosis (RRP) is a disease characterized by the formation of benign papillomas in the upper respiratory tract. Human Papillomavirus infection (HPV) is the main cause of the disease, particularly types 6 and 11 which are considered low-risk oncogenic HPV. The promoter region LCR (Long Control Region) contains cis-regulatory elements for cellular and viral transcription factors (TF) that control viral early gene expression and replication. Nucleotide alterations within the LCR may overlap TFs elements and impact upon the binding affinity, the transcriptional activity and ultimately on the clinical outcome associated to HPV infections. Our aim was to characterize molecular variants of HPV among individuals diagnosed with RRP and to analyze the impact of LCR nucleotide divergence upon viral early transcription. LCR sequencing of the HPV-6 positive samples revealed five genomic variants not previously described. Through computational analysis, we found that nucleotide changes detected overlapps potential binding sites for several transcription factors. HPV-6vc-related variant was the most prevalent among the samples analyzed (69.2%) and more prevalent in cases of juvenile papillomatosis. Concerning transcriptional activity, HPV-6vc-related variant is more active than HPV-6a molecular variant. Further, we observed that other alterations observed strongly impacts transcriptional activity indirectly measured by luciferase assays. To our knowledge, this is the first report describing differences in promoter activity among naturally occurring variants of HPV-6. Research in this area is anticipated to provide important information concerning the biological significance of HPV-6 intratype genomic variability

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-20Bitstream added on 2014-06-13T19:26:44Z : No. of bitstreams: 1 fonseca_ls_me_botfmvz.pdf: 501874 bytes, checksum: ffd7b262eaa39347b2a7567e533cc4a6 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O Tumor Venéreo Transmissível (TVT) é uma das neoplasias mais antigas e em contínua propagação entre hospedeiros. É a segunda neoplasia mais diagnosticada em cães no Serviço de Patologia de Botucatu Dentre as alterações moleculares mais encontradas no TVT está o rearranjo do protooncogene c-MYC resultante da inserção do segmento de DNA repetitivo conhecido como LINE (Long Interspersed Element). O objetivo deste trabalho foi a identificação dos critérios citopatológicos de malignidade nos grupos linfocítóide e plasmocitóide pela técnica de Papanicolaou, a detecção do rearranjo LINE-1/c-MYC nas células do TVT e a realização do sequenciamento genético. Com a coloração de Papanicolaou, os critérios de malignidade nucleares mais observados foram espessamento da membrana nuclear, ranhura nuclear, nucléolo angular e halo perinucleolar. A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) amplificou um produto de 340pb em 100% das amostras analisadas e o sequenciamento genético confirmou a presença do rearranjo LINE-1/c-MYC. Concluiu-se que a especificidade desta alteração genética é indiscutível corroborando para mais estudos que permitirão o melhor entendimento quanto ao mecanismo de formação deste rearranjo. A coloração de Papanicolaou constituiu uma grande contribuição não apenas para o diagnóstico citológico do TVT, como também, ferramenta valiosa para evidenciação de critérios de malignidade que normalmente não são visualizados quando se utiliza corantes tipo Romanowsky. Para futuras investigações, este estudo poderá servir de esteio para correlacionar morfologia, critérios de malignidade e estudos moleculares ainda não realizados em conjunto para o TVT. / The Transmissible Venereal Tumor disease (TVT) is one of the neoplasias oldest and in continuous propagation between hosts and the second neoplasia more frequent diagnosed in dogs of in the Service of Pathology of Botucatu. Amongst the molecular alterations more frequently found in the TVT c-MYC resultant of the insertion of the repetitive segment of known DNA is the rearrangement of proto-oncogene as LINE (Long Interspersed Element). The objective of this work was the identification of the cytopathology criteria of malignancy in the groups linfocitóide and plasmocitóide for the technique of Papanicolaou, the detention of the LINE-1/c-MYC rearrangement in the cells of the TVT, and the accomplishment of the genetic sequencing. With the coloration of Papanicolaou, the observed nuclear criteria of malignancy more had been thicking of the nuclear membrane, nuclear groove, angular nucleolar and halo perinucleolar. The Reaction in Chain of Polimerase (PCR) amplified a product of 340pb in 100% of the analyzed samples and the genetic sequencing confirmed the presence of the LINE-1/c-MYC rearrangement and the degree of identity between the samples that 94% varied of 96%. Concluded that the especificidade of this genetic alteration is unquestionable corroborating for more studies that will allow optimum agreement how much to the mechanism of formation of this rearrangement. The Papanicolaou staining not only constituted a great contribution for the cytological diagnosis of the TVT, as well as, valuable tool for evideciacion of malignancy criteria that normally they are not visualized when Romanowsky type is used. For future inquiries, this study it will be able to serve of esteio to correlate morphology, criteria of malignidade and molecular studies not yet carried through in set for the TVT.

Orientador: Ana Maria Faccioli de Camargo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Educação / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:36:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pimenta_SoniadeAlmeida_D.pdf: 1832388 bytes, checksum: 1ce83cbb2df421630ebdc953c81e6e59 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Esta tese de doutorado corresponde à pesquisa intitulada ¿Educação em saúde: um estudo de caso na prevenção da aids¿, cujo objetivo é o de discutir, a luz dos Estudos Culturais, a educação em saúde para a prevenção da aids. Partindo de uma leitura do fenômeno social da doença, buscamos relacionar as formas de entendimento e de enfrentamento do mesmo, sobretudo no que diz respeito aos discursos elaborados para a prevenção. Verificamos que o discurso da prevenção, para ser efetivo e assim promover o cuidado de si, deve ser elaborado contemplando as formas como a população a que ele se dirige apreende e representa o fenômeno d aids. Dedicamo-nos, então à análise dos discursos da prevenção, tendo como referencial parte da obra de Michel Foucault, e à contribuição que a educação, face ao fenômeno de incorporação de diversas culturas, pode trazer para a prevenção. Neste processo, destacamos a importância que as Organizações Não Governamentais trazem para o enfrentamento da epidemia, na medida em que elas se tornaram executoras dos programas de prevenção. Para a compreensão das formas como a população apreende os discursos de prevenção, optamos por avaliar um programa de prevenção elaborado pelo Centro Corsini, uma ONG/Aids situada em Campinas, voltado para mulheres de baixa renda e baixa escolaridade. Como resultado, apontamos a importância dos processos de representação sobre a epidemia por estas mulheres na construção de discursos que sejam efetivos para a prevenção / Abstract: This Doctorate Thesis corresponds to a research entitled ¿Education for Health: a case study in the prevention AIDS¿, whose objective is discussing, in light of cultural studies, the education in health for the prevention of AIDS. Starting from a reading of the disease¿s social phenomenon, we seek to relate the forms of understanding and facing the phenomenon itself, especially regarding the elaborate discourse for the prevention, to be effective and thus to promote the self care, must be elaborated including the ways how the population to which it is addressed apprehends and represents the AIDS phenomenon. We have dedicated ourselves then, to the analysis of the prevention discourses, having as reference part of Michel Foucault¿s work, and the contribution that education, regarding the phenomenon of incorporation of the various cultures, can bring to the prevention. In this process, we give special importance to that the Non Governmental Organizations bring to the face of epidemics, as they have carried out the prevention programs to understand the ways how the populations apprehends the discourses of prevention, we have opted to evaluate a prevention program elaborated by the Centro Corsini, a NGO/AIDS located in Campinas/SP dedicated to low-income women whit low-schooling as a result, we point out the importance of the processes of the representation about the epidemics by these women in the construction of discourses which are effective for the prevention / Doutorado / Educação, Conhecimento, Linguagem e Arte / Doutor em Educação

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-15Bitstream added on 2014-06-13T18:07:59Z : No. of bitstreams: 1 000736208.pdf: 2053203 bytes, checksum: c82376b5cb193316a011e2008b18d737 (MD5) / A infecção pelo HPV é a DST mais comum no mundo. Dos 630 milhões de casos novos anuais, trinta milhões são relacionados a verrugas anogenitais. Embora a forma subclínica seja mais comum, o aparecimento de condilomas também está associado à diminuição da imunidade causada pelo HIV. Tendo em vista as altas taxas de prevalência da coinfecção HPV/HIV, principalmente entre homens que fazem sexo com homens, os objetivos deste trabalho foram analisar a prevalência de verrugas anogenitais em homens portadores de HIV/aids e identificar fatores associados. Estudo transversal, descritivo e analítico com 159 homens atendidos em serviço de referência de Botucatu (SP). Dados sociodemográficos, comportamentais e clínicos foram relacionados ou não à presença de verrugas anogenitais. Após análise hierárquica dos dados, as variáveis com valor de p menor do que 0,2 foram incluídas no modelo logístico multivariado não condicional. Foram diagnosticados 49 (31,0%) pacientes HIV+ com verrugas anogenitais, cuja média de idade foi de 44,6 ± 9,6 anos. Os principais fatores associados às verrugas foram: escolaridade menor que ou igual a oito anos; maior tempo de diagnóstico do HIV; tratamento antirretroviral irregular; baixas contagens de linfócitos T CD4+. Verrugas anogenitais são prevalentes e relacionadas à imunossupressão da infecção pelo HIV. Ações como o cuidado integral do paciente e educação e prevenção em saúde colaboram para diagnóstico precoce e diminuição da vulnerabilidade a DSTs / HPV infection is the most usual STD in the world responsible for 630 million new cases annually, of which 30 million are related with anogenital warts. Although subclinical form is the most common, warts are also associated with reduction of HV-related immunity. There are high rates involving prevalence of the association HIV/HPV around the world. Following this point of view the aim of this study was analyze the prevalence of wart in HIV-infected men and describe the associated factors. cared by a reference service in the Botucatu city – São Paulo/Brazil. Sociodemographic, behavioral and clinical data were collected by an individual interview and medical records. There were 49 (31,0%) HIV-infected men with anogenital warts with mean age of 44,6 ± 9,6 years. The main associated factors were: have up to 8 years of study; longer duration of HIV-infection; irregular treatment to HIV-infection; lower counts of lymphocytes T CD4+. Genital warts are prevalent and are associated with HIV- infection magnitude. Actions such as the complete care over the patients, increasing the education and prevention in health system could help to do a previously, diagnosis and decreasing the vulnerability to STD

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-07Bitstream added on 2014-08-13T18:00:23Z : No. of bitstreams: 1 000760135.pdf: 830596 bytes, checksum: 8c3565a481de70c89a306a9843d85c24 (MD5) / A pesquisa teve como objetivo conhecer sobre a condição epidemiológica de idosos em relação às DSTs/aids e hepatite C, do município de Botucatu. Estudo quantitativo, do tipo transversal. A amostra por conveniência foi composta de 382 idosos convidados na sala de espera de todas as unidades de saúde do município. Realizou-se entrevista, com itens elaborados mediante a ficha de atendimento do CTA e outros referentes à sexualidade e coleta de sorologias de HIV, sífilis e hepatite B e C. A maior parte dos idosos estudados era do sexo feminino (61,8%), na faixa etária de 70 anos ou mais (50,8%). A população economicamente ativa foi de 14,3% e a maioria (85,9%) encontram-se fora da força de trabalho. Tinham relação sexual 45% dos idosos; 7,1% tinham parceria eventual; dois idosos referiram a bissexualidade e 11,8% revelaram história prévia de DST, sendo a gonorreia a mais citada. Os idosos não possuem o hábito de utilizar o preservativo, a confiança no parceiro foi a justificativa relatada pelos idosos (42,7%). Dos idosos, um apresentou sorologia positiva para HIV e dez tiveram diagnóstico para sífilis, dois para hepatite B e três para hepatite C. Houve significância entre sexo e DST/aids p<0,05, sendo que o feminino tem 94,9% das sorologias positivas. Também ocorreu significância entre DST/Aids e atividade sexual (p<0,05). Não houve associação entre hepatite C e essas duas variáveis. Devido à significância em análise univariada, foi realizada análise multivariada com regressão logística e constatou que as variáveis perderam significância. Porém não se pode afirmar que o número de mulheres influencia na univariada. Vale ressaltar que este estudo foi extremamente importante, por possibilitar a oferta de sorologias, o que proporcionou o conhecimento do diagnóstico das DSTs/aids e hepatite C, viabilizando o tratamento e consequentemente melhorando a qualidade de vida. Os resultados do presente estudo, ... / The purpose of this research was to know the epidemiological condition of the elderly in relation to STD/aids and hepatitis C, in Botucatu-SP. It was a quantitative and cross-sectional study. The convenience sample consisted of 382 elderly guests in the waiting room of all health units of the municipality. The interviews were made with items produced by the patient chart and other collection related to sexuality and serology for HIV, syphilis and hepatitis B and C. Most patients were female (61.8%) aged 70 years or older (50.8%). The economically active population was 14.3% and the majority (85.9%) is outside the labor force. Sexual intercourse was reported by 45% of the elderly, 7.1% had eventual partnership, two reported bisexuality and 11.8% reported a history of STDs, gonorrhea being the most cited. The elderly do not have the habit of using condoms and the confidence in the partner was reported as justification (42.7%). One patient had positive HIV serology; ten were diagnosed with syphilis and two patients for hepatitis B and three for hepatitis C. There was significance between sex and STD/aids (p <0.05), and the female has 94.9% of positive tests. There was also significant between STD/aids and sexual activity (p <0.05). There was no association between hepatitis C and these two variables. Due to the significance in univariate analysis, multivariate analysis was performed with logistic regression and the variables lost significance. However that is not possible to say that the number of women had influences in univariate. This study was extremely important, as it enables the provision of serology, which provided knowledge of the diagnosis of STDs/aids and hepatitis C, allowing the treatment and consequently improving the quality of life. The results of this study possibly changes the look of health professionals to the vulnerability of the elderly against STDs/aids and hepatitis C, and also leads managers to promote ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-04-16Bitstream added on 2014-06-13T20:08:50Z : No. of bitstreams: 1 000749088.pdf: 2884185 bytes, checksum: 7b3dbfabfdaeaf228b68393fedd5e4fd (MD5) / O Papiloma Vírus Humano (HPV), é considerado um problema mundial de saúde pública, sendo a doença sexualmente transmissível mais prevalente. Guarda uma relação direta com o risco e a incidência do câncer do canal anal. Seu diagnóstico, tratamento e seguimento são de extrema importância. Neste sentido o escovado do canal anal tem um papel fundamental no rastreamento e seguimento das lesões HPV induzidas e consequente evolução para o câncer anal. Determinar a ocorrência de lesão HPV induzida em mulheres que participam dos programas de prevenção do câncer de colo uterino nas Unidades Básicas de Saúde (UBS) no município de Botucatu. Trata-se de um estudo transversal observacional que teve 228 mulheres submetidas ao escovado do canal anal a fim de estabelecer a ocorrência de lesão HPV induzida e suas correlações com dados sociais e comportamentais. Os 11 casos que apresentaram alteração de ASCUS e LSIL no escovado do canal anal traziam relação com estado civil, baixa escolaridade, não prática do sexo seguro, e a prática do sexo anal / Human Papillomavirus (HPV) has been a world concern in Public Health, and it is the most prevalent sexually transmitted disease. It has a direct association with the risk and incidence of cancer in the anal canal. Its diagnosis, treatment and follow-up are extremely important. Using this approach, the smear of the anal canal has a crucial role in the screening and follow up of HPV-induced lesions and in the resulting development of anal cancer. To determine the occurrence of HPVinduced lesions in women who attended programs of uterine cervix cancer prevention in Basic Health Units (BHU) in Botucatu city. It is a cross sectional observational study, in which 228 women underwent brushing of the anal canal in order to establish the occurrence of HPV-induced lesion and its correlation with social and behavioral data. The 11 cases which had ASCUS and LSIL changes in the smear of the anal canal were associated with marital status, low education level, practice of unsafe intercourse and anal intercourse

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Introduction: HPV infection is the most common sexually transmitted disease in humans, which can cause benign diseases (warty lesion) or malignant as the anogenital cancer, oral cancer and, with the highest incidence, cervical cancer. Overall, the main HPV detection method is based on cytological evaluation of Papanicolaou; however, false-negative results and unsatisfactory sampling complicate the disease diagnosis and prevention. In this context, the investigation of new diagnosis platforms and prophylaxys has great interest. Objectives: The aim of this study was to conduct an epidemiological study of HPV infection in the women population of southeastern Brazil and then propose new diagnostic and vaccine approaches. Methodology: Genital samples of 5,223 women were evaluated by a new molecular tool based on PCR (Nested Multiplex PCR - NMPCR), using a cocktail of primers for simultaneous detection of 38 different HPV types, in single tube. Another molecular approach was proposed by Phage Display technique to select the IgA binding peptides from cervical samples of patients with HPV infection. In silico (Linear and 3D bioinformatics) and in vitro (ELISA, Slot blot and Bioelectrode) analysis were performed to validate the selected phages and synthetic peptides in cervical (n=91) and salivary specimens (n=66). The sensitivity and specificity parameters of HPV diagnosis were determined by ROC curve. To test the vaccine potential of synthetic peptides, in silico (3D bioinformatic), in vivo (female BALB/c mice immunization) or in vitro analyzes (MTT, ELISA, splenocytes culture, CBA and Neutralization assay) were carried out. Results: Among the 5,223 women evaluated, there was a prevalence of 58.9% of HPV infection, especially the types 53, 52 and 06, showing the relevance to propose new alternatives for HPV detection and prevention. In molecular approach of Phage Display, thirty-two distinct phage clones were selected against IgA from positive HPV cervical samples. Phage C.B1 showed higher reactivity against HPV samples compared to the negative control group by ELISA. This peptide is a putative epitope of HPV major capsid protein (L1) and has distinguished efficiently infection from HPV controls in cervical and saliva samples (p <0.0001), with high sensitivity (above 95%) and specificity (above 71%) in both fluids. The C.B1 peptide was also successfully incorporated (p<0.05) onto a graphite bioelectrode for HPV direct diagnosis in saliva. In the vaccine approach, three peptides (PEP1, PEP3 and PEP4) showed no toxicity in murine macrophages. Immunizations showed potent induction of serum IgG antibodies production by PEP3, and increase in IgA titer in the vaginal mucosa under PEP1 and PEP3 stimuli. The evaluation of cellular immune response indicated that the PEP1 and, particularly, the PEP3 chimeric peptide were able to polarize the immune response towards to Th1 profile and sensitize the cells to a pro-inflammatory \"status\", suitable for antiviral activity. The HPV-16 PsVs neutralization assay showed that PEP3 was able to reduce the infection by 49%. Conclusions: Overall, the studies presented here showed a high prevalence of HPV among Brazilian women by viral types still little explored in the literature. We selected mimotopes by Phage Display tool capable of detecting HPV in both saliva samples as in the cervical secretion, providing a low cost, simple and non-invasive diagnostics for population screening. In addition, the mimotopes selected have attractive applicability in vaccine formulations, but further studies are still needed. / Introdução: A infecção por HPV é a doença sexualmente transmissível mais comum em humanos, que pode causar doenças benignas (lesões verrucosas) ou malignas como o câncer anogenital, câncer oral e, com maior incidência, o câncer do colo uterino. Globalmente, o principal método de detecção do HPV baseia-se na avaliação citopatológica de Papanicolaou, entretanto, resultados falsonegativos e obtenção de amostras insatisfatórias dificultam o diagnóstico e a prevenção da doença. Neste contexto, a busca por novas plataformas diagnósticas e profiláticas para o HPV é de grande interesse. Objetivos: O objetivo do presente estudo foi realizar um levantamento epidemiológico da infecção por HPV na populacão feminina da região Sudeste do Brasil e, a partir de então, propor novas abordagens diagnósticas e vacinais. Metodologia: Amostras genitais de 5.223 mulheres foram avaliadas por uma nova ferramenta molecular baseada em PCR (Nested Multiplex PCR - NMPCR), utilizando-se um coquetel de primers para detecção simultânea de 38 diferentes tipos virais de HPV, em um único tubo. Outra abordagem molecular foi proposta através da técnica de Phage Display, a fim de selecionar peptídeos ligantes a anticorpos IgA oriundos de amostras cervicas de pacientes com infecção por HPV. Análises in silico (Bioinformática linear e 3D) e in vitro (ELISA, Slot blot e Bioeletrodo) foram realizadas para a validação dos fagos selecionados e dos peptídeos sintetizados em espécimes cervicais (n=91) e salivares (n=66). Os parâmetros de sensibilidade e especificidade do diagnóstico do HPV foram determinados pela curva ROC. Para testar o potencial vacinal dos peptídeos sintéticos, análises in silico (Bioinformática 3D), in vivo (imunização em camundongos fêmeas BALB/c) e in vitro (MTT, ELISA, Cultura de esplenócitos, CBA e Ensaio de Neutralização) foram conduzidas. Resultados: Dentre as 5.223 mulheres avaliadas, houve uma prevalência de 58,9% de infecção por HPV, com predominância dos tipos 53, 52 e 06, evidenciando a relevância de se propor novas alternativas de detecção e profilaxia do HPV. Na abordagem molecular de Phage Display trinta e dois clones de fagos distintos foram selecionados contra a IgA de amostras cervicais positivas para o HPV. O fago C.B1 apresentou maior reatividade contra amostras de HPV em comparação ao grupo controle negativo, por ELISA. Este peptídeo é um epítopo putativo da proteína principal do capsídeo do HPV (L1) e tem discriminado eficientemente amostras HPV de controles, em amostras cervicais e salivares (p<0,0001); com alta sensibilidade (acima de 95%) e especificidade (acima de 71%) em ambos fluidos. O peptídeo C.B1 também foi incorporado com sucesso (p<0,05) em um bioeletrodo de grafite para o diagnóstico do HPV direto na saliva. Na abordagem vacinal, três peptídeos (PEP1, PEP3 e PEP4) não apresentaram toxicidade em macrófagos murinos. As imunizações revelaram potente indução na produção de anticorpos séricos IgG pelo PEP3, e aumento nos títulos de IgA na mucosa vaginal sob estímulo dos PEP1 e PEP3. A avaliação da resposta imune celular indicou que o PEP1 e, sobretudo o peptídeo quimérico PEP3, foram capazes de polarizar a resposta imune para o perfil Th1 e sensibilizar as células a um status pró-inflamatório, propício para atuação antiviral. O ensaio de neutralização de PsVs do HPV-16 mostrou que o PEP3 foi capaz de reduzir a infecção em 49%. Conclusões: De maneira geral, os estudos aqui apresentados evidenciaram uma alta prevalência de HPV em mulheres brasileiras por tipos virais ainda pouco explorados na literatura mundial. Nós selecionamos mimotopos pela ferramenta de Phage Display capazes de detectar o HPV tanto em amostras de saliva quanto em secreção cervical, possibilitando um diagnóstico simples, de baixo custo, e não invasivo para rastreios populacionais. Além disso, os mimotopos aqui selecionados possuem atraente aplicabilidade em formulações vacinais, porém estudos adicionais ainda são necessários. / Doutor em Genética e Bioquímica

Orientador: Maria Rita de Camargo Donalisio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T02:24:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_TiagoFeitosade_M.pdf: 646726 bytes, checksum: 4689e80905264ac5b08fc1258252b586 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A oferta de testes sorológicos tem sido colocada como uma das estratégias de combate à epidemia de HIV/aids. Inicialmente a testagem dava-se apenas nos serviços especializados, os chamados COAS ou CTA mas, devido à magnitude alcançada pela epidemia de HIV/aids, bem como a necessidade de diagnóstico precoce dos casos, fez-se necessário a disponibilização do teste anti-HIV na rede básica de saúde. O aconselhamento tem sido apontado como uma técnica a ser aplicada na oferta e na entrega do resultado do teste. Este se baseia na mudança de comportamento de pessoas e grupos sociais, proporcionando-lhes a oportunidade de adotarem práticas sexuais mais seguras ou reduzindo o dano de um determinado comportamento de risco. Através de pesquisa qualitativa, analisamos a oferta do teste para detecção do HIV nas Unidades de Saúde da Família da rede municipal de saúde de Recife-PE, sob a ótica dos profissionais de saúde. Verificamos que a indicação do referido teste se dá, quase sempre no consultório, durante a consulta clínica. O que motiva a oferta do teste é, geralmente um quadro sindrômico compatível com a aids ou o programa de assistência ao pré-natal. Os profissionais revelaram dificuldades em absorver a demanda espontânea pelo teste. A maioria dos entrevistados desconhece o aconselhamento, quanto técnica para ofertar o exame, reverter comportamentos de risco e dar o resultado do teste anti-HIV. Isso aponta para a necessidade urgente de qualificar a oferta do teste na rede básica, fazendo com que ela seja, de fato, instrumento de combate ao avanço da epidemia do HIV/aids / Abstract: The offering of serologic tests has been placed as one of the strategies in the HIV/AIDS epidemic disease combat. At first, the testate were applied in the specialized services only, the called COAS or CTA, however, with the magnitude reached by the HIV/AIDS epidemy, as well the necessity of a precocious diagnostic to the cases, the availability at the health public service of the anti-HIV test was necessary. The counselling has been pointed as a technique to be applied in the offering and delivery of the test result. That is based in the behaviour changed of social groups and people, providing them the opportunity to adopt safe sexual practices or reducing the damage of determinate risk behaviour. Through the qualitative search, we analyse the test offering to detect the HIV in the Family Health Units in the municipal public health of Recife-PE, under the health professional¿s optics. We realised that the indication of the referred test happens, almost often, in the doctor¿s office during the procedure. What motivate the test offering is, in general, a syndromic diagnostic compatible with AIDS or the pre-natal assistance program. The professions revelled some difficult in absolving the spontaneous demand for the test. The majority of the interviewed does not know the counselling as a technique to offer the exam, revert behaviour risks and give the anti-HIV result. This points to the urgent necessity of qualify the test offering into the public service, turning it to a combative instrument against the HIV/AIDS epidemy advance, indeed. / Mestrado / Saude Coletiva / Mestre em Saude Coletiva