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Avaliação da expressão gênica da toxina da soja (SBTX) por indutores da defesa de plantas / Evaluation of gene expression of the toxin in soybean (SBTX) inducers of plant defense

Morais, Vanessa Duarte de January 2012 (has links)
MORAIS, Vanessa Duarte de. Avaliação da expressão gênica da toxina da soja (SBTX) por indutores da defesa de plantas. 2012. 92 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2012. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-15T13:11:16Z No. of bitstreams: 1 2012_dis_vdmorais.pdf: 9943329 bytes, checksum: 9b36af801a5a86f10c3a4153e39f1e80 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T20:24:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_dis_vdmorais.pdf: 9943329 bytes, checksum: 9b36af801a5a86f10c3a4153e39f1e80 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T20:24:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_dis_vdmorais.pdf: 9943329 bytes, checksum: 9b36af801a5a86f10c3a4153e39f1e80 (MD5) Previous issue date: 2012 / Soybean is a legume most commonly utilized in the world, whose use is justified by the high nutritional content of its grain, consisting mainly of proteins and lipids. The current estimate of global soybean production is 250,000 tons/year, but there are limiting factors of this production, such as the pest attack. The fungal diseases, for example, cause losses in soybeans around 4%, where 20% of these are derived from infection by Septoria glycines and Cercospora kikuchii. Thus, the search for alternative measures is increasing, particularly in reducing the use of pesticides, but for this it is important to understand the plant defense mechanisms. Soybean toxin (SBTX) is a protein purified from soybean seeds with activity against plant and human pathogenic fungi and neurotoxic action to rats and mice, hence the reason it received the name of toxin. SBTX shows a molecular mass of 44 kDa, composed of two subunits (17 and 27 kDa) encoded by distinct genes and it has been detected seeds, roots, stems and leaves. This study aimed to evaluate the gene expression profile of SBTX in soybean plants whose primary leaves were treated with elicitors (biotic and abiotic), using the real-time PCR technique, in an attempt to strength the physiological role of defense proposed for this protein. Therefore, salicylic acid, mechanic injury and Cercospora kikuchii spores were used as elicitors and it was measured the transcript levels of SBTX subunits. Induction responses were observed for both subunits of SBTX, but the gene expression profiles were different. For SBTX 27 kDa gene, the highest transcript level was detected when the treatment involved mechanic injury associated to salicylic acid, an increase of about 100 fold after 12 hours of treatment application. Nevertheless, for SBTX 17 kDa gene the induction response was much smaller, it was only around 10 times. The data together show that SBTX is an inducible protein by biotic and abiotic elicitors, reinforcing its physiological role of defense, which could eventually be used as biotechnological tool in order to mitigate losses caused by fungi. / A soja é uma das leguminosas mais utilizadas no mundo, sendo o uso justificado pelo elevado teor nutricional de seus grãos, constituídos, principalmente, por proteínas e lipídios. A estimativa atual da produção mundial de soja é de 250.000 toneladas/ano, porém há fatores limitantes dessa produção, como o ataque de pragas. As doenças causadas por fungos, por exemplo, causam na soja perdas em torno de 4%, sendo 20% destas causadas por Septoria glycines e Cercospora kikuchii. Assim, a busca por medidas alternativas de controle é crescente, particularmente em diminuição ao uso de agrotóxicos, mas, para isso, é importante o entendimento dos mecanismos de defesa vegetal. Das sementes de soja foi purificada uma proteína, denominada toxina da soja (SBTX), que é ativa contra diversos fungos de plantas e do homem e, também, é neurotóxica para ratos e camundongos, razão pela qual recebeu o nome de toxina. A SBTX apresenta massa molecular de 44 kDa, constituída por duas subunidades (17 e 27 kDa) codificadas por genes distintos e já foi identificada nas sementes, raízes, caules e folhas. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o perfil de expressão gênica da SBTX em plantas cujas folhas primárias foram tratadas com elicitores (biótico e abiótico), usando a técnica de PCR em tempo real, na tentativa de reforçar o papel fisiológico de defesa proposto para proteína. Assim sendo, ácido salicílico, injúria mecânica e esporos do fungo Cercospora kikuchii foram utilizados como elicitores e os níveis de transcritos para as duas subunidades proteicas de SBTX avaliados. Respostas de indução foram verificadas para ambas as subunidades da SBTX, porém os perfis de expressão gênica foram diferenciados. Para o gene SBTX 27 kDa, o maior nível de transcritos foi detectado quando o tratamento envolveu injúria mecânica associada ao ácido salicílico, correspondendo a um aumento de cerca de 100 vezes após 12 horas de aplicação do tratamento. Já para o gene SBTX 17 kDa este aumento não foi verificado na mesma intensidade, tendo sido apenas em torno de 10 vezes. Os dados em conjunto mostram que SBTX é uma proteína passível de indução por elicitores bióticos e abióticos, reforçando o seu papel fisiológico de defesa, podendo vir a ser utilizada como ferramenta biotecnológica no sentido de amenizar as perdas causadas por fungos.
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Controle da antracnose pós-colheita do mamão com leveduras killer / Control of post-harvest anthracnose papaya with yeast killer

Lima, Jaqueline Rabelo de January 2013 (has links)
LIMA, Jaqueline Rabelo de. Controle da antracnose pós-colheita do mamão com leveduras killer. 2013. 135 f. : Tese (doutorado) - Universidade Federal do Ceará, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Renorbio, Fortaleza-CE, 2013. / Submitted by demia Maia (demiamlm@gmail.com) on 2016-05-23T14:38:07Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_jrlima.pdf: 3900571 bytes, checksum: 4b74f4790b64e178ecb28e6fbdaeb326 (MD5) / Approved for entry into archive by demia Maia (demiamlm@gmail.com) on 2016-05-23T14:44:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_jrlima.pdf: 3900571 bytes, checksum: 4b74f4790b64e178ecb28e6fbdaeb326 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-23T14:44:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_jrlima.pdf: 3900571 bytes, checksum: 4b74f4790b64e178ecb28e6fbdaeb326 (MD5) Previous issue date: 2013 / This study aimed to isolate yeast able to produce and excrete the toxin from killer tropical fruits, to act in the biological control of plant pathogens in postharvest. A total of 580 yeasts strains, isolated from Ceara State of Brasil, were evaluated for their ability to produce killer toxin. Of these strains, 29 tested positive for the killer phenotype and were further evaluated for their ability to control Colletotrichum gloeosporioides germination in vitro. All yeast strains that expressed the killer phenotype were characterized by sequencing the D1/D2 regions of the large subunit of the rRNA gene. Five yeast strains provided a significant reduction in mycelial growth and conidial germination of C. gloeosporioides in vitro, especially Meyerozyma guilliermondii, which was able to reduce the fungal mycelial growth on solid medium (PDA) by 60% and block 100% of conidia germination in liquid media (PDB). Filtering and autoclaving the liquid cultures had no effect on the growth of the pathogen. These results indicate the potential use of antagonist yeasts isolated from tropical fruits in the control of anthracnose caused by C. gloeosporioides in papaya. Further elucidation of main mechanisms involved on anthracnose control by these yeasts could be helpful for the development of biocontrol techniques related to the management of this disease in tropical fruits. The efficiency of two killer yeast strains, with better results in vitro were tested in vivo against C. gloeosporioides, Wickerhamomyces anomalus (strain 422) and Meyerozyma guilliermondii (strain 443), as biocontrol agents against C. gloeosporioides, a postharvest anthracnose agent of papaya and other tropical fruits, was assessed. These strains were previously selected through in vitro assays, but in the present study, their in vivo action was assessed. In addition, the influence of phytopathogen inoculation time on the fruit in combination with the use of the biocontrol agent was also assessed. Through the use of scanning electron microscopy (SEM), we assessed mycoparasitism as an antagonistic mechanism of action. In addition, two hydrolytic enzymes, chitinase and β-1, 3 glucanase, were assayed. Our results indicated that W. anomalus (strain 422) and M. guilliermondii (strain 443) reduced the disease occurrence by 24.62% and 20.68%, respectively, for up to 6 days after inoculation, when applied 3 hours before the phytopathogen and incubated in a wet chamber (95% relative humidity) at 28°C. The time of yeast inoculation had a significant effect on its antagonistic action. Application of the yeasts 12 or 24 hours before the phytopathogen inoculation resulted in 13.75% and 30% of disease reductions for W. anomalus (strain 422) and 31.35% and 41.17% reductions for M. guilliermondii (strain 443), respectively. Electron micrographs confirmed mycoparasitism by clearly indicating the interaction of the yeasts with C. gloeosporioides hyphae, causing, in some cases, a loss of turgor and yeast penetration of walls with marked concavity formation on hypha cell walls. The efficiency of two killer yeasts, Wickerhamomyces anomalus (strain 422) and Meyerozyma guilliermondii (strain 443), which showed better results in tests in vtro and in vivo, associated with five different application vehicles was assessed for the protection of papayas postharvest. In this study, after 90 days of incubation at 4°C, W. anomalus (strain 422) and M. guilliermondii (strain 443) were viable with all application vehicles tested. Fruits treated with different formulations (yeasts + application vehicles) had a decreased incidence of disease (by at least 30%) compared with untreated fruits. The treatment of W. anomalus (strain 422) + 2% starch lowered disease occurrence by 48.3%. The most efficient treatments using M. guilliermondii (strain 443) were those with 2% gelatin or 2% liquid carnauba wax, both of which reduced anthracnose by 50% in postharvest papayas. Electron micrographs of the surface tissues of the treated fruits showed that all application vehicles provided excellent adhesion of yeast to the surface. The formulations based on starch (2%), gelatin (2%) and carnauba wax (2%) were the most efficient at controlling fungal diseases in postharvest papayas / Este trabalho objetivou isolar leveduras capazes de produzir e excretar a toxina killer a partir de frutos tropicais, para atuarem no controle biológico de fitopatogenos em pós-colheita. Inicialmente, foram isoladas 580 leveduras a partir de 87 amostras de frutos tropicais (mamão, caju, sapoti, murici, manga e acerola), dentre as quais 29 exibiram o fenótipo killer. Todas as cepas killer foram identificadas pelo sequenciamento da região D1/D2 do 28S rRNA, em que ficou demonstrada a presença de Candida aaseri, Wickerhamomyces anomalus, Pichia kluyveri, Meyerozyma guilliermondii, Kodamaea ohmeri. Cinco leveduras foram capazes de inibir em 100% a germinação de conídios em meio líquido e reduzir o crescimento micelial, em meio sólido de Colletotrichum gloeosporioides in vitro, com destaque para M. guilliermondii (cepa 443) que foi capaz de reduzir o crescimento micelial do fitopatogeno em 60% em meio sólido. As duas leveduras com melhores resultados in vitro foram testadas in vivo, contra C. gloeosporioides, agente da antracnose em pós-colheita de mamão e outros frutos tropicais, W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443). Também foi investigada a ocorrência de micoparasitismo como mecanismo de ação do antagonista por meio de microscopia eletrônica de varredura – MEV e detecção das enzimas hidrolíticas, quitinase e β-1-3 glucanase. Os resultados demonstraram que, quando aplicada simultaneamente ao fitopatógeno e incubadas em câmara úmida (95% U.R.) a 28 °C, as leveduras W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443) foram capazes de reduzir a ocorrência da doença em 24,62%, 7,0% e 20,68%, respectivamente, até 06 dias após a inoculação. Verificou-se que o tempo de inoculação da levedura teve significativa influência sobre sua ação antagonista; a aplicação dos agentes com 24 ou 12 horas de antecedência em relação ao fitopatógeno resultou em redução de 30% e 13,75% para W. anomalus (cepa 422), em 40% e 35% para W. anomalus (cepa 440) e em, 41,17 e 31,35% para M. guilliermondii (cepa 443) respectivamente. A ocorrência de micoparasitismo foi confirmada através de eletromicrografias que evidenciaram a união das leveduras às hifas do C. gloeosporioides, provocando, em alguns casos, perda de turgidez e até ruptura dessas; tudo isso associado à produção de β 1-3-glucanase. As leveduras killer, W. anomalus (cepa 422) e M. guilliermondii (cepa 443) que apresentaram melhores resultados nos testes in vivo foram testadas associação com cinco diferentes veículos de aplicação na proteção em pós-colheita de mamão. Após 90 dias de incubação a 4 °C, essas leveduras mantiveram-se viáveis em todos os veículos de aplicação testados e durante todo o período de incubação, frutos tratados com formulações (leveduras + veículos de aplicação) apresentaram incidência de doença, pelo menos 30% menores, quando comparadas aos frutos não tratados. Para W. anomalus (cepa 422), o tratamento que utilizou amido (2%) reduziu em 48,3% a ocorrência de doenças, já para M. guilliermondii, (cepa 443), os tratamentos mais eficientes no controle da doença foram os que utilizaram gelatina e cera líquida de carnaúba (2%) como veículos de aplicação, ambos foram capazes de reduzir em 50% a ocorrência de doenças em pós-colheita de mamões. Eletromicrograficas revelaram que todos os veículos de aplicação foram eficientes em permitir a fixação das leveduras na superfície do fruto. Leveduras killer podem atuar no biocontrole em pós-colheita de mamão e estes microrganismos atuam através de uma variedade de mecanismos de ação, o que potencializa seu efeito protetor e amplia sua eficiência de ação.
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Distribuição vertical e temporal de ovos de Alabama argillacea e de Heliothis virescens (Lepidoptera: Noctuidae) e parasitismo natural por Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae)

Fraga, Diego Felisbino [UNESP] 16 February 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-16Bitstream added on 2014-06-13T20:32:40Z : No. of bitstreams: 1 fraga_df_me_jabo.pdf: 1036947 bytes, checksum: 765bfbd32f9b458cda31ae6bb29934a4 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O conhecimento do comportamento de infestação dos insetos em sistemas agrícolas facilita as amostragens, economiza tempo sem perder a confiabilidade para a tomada de decisões no sistema de manejo de pragas. Assim o objetivo foi estudar a distribuição vertical e temporal de ovos de Alabama argillacea e de Heliothis virescens, e o parasitismo de ovos por Trichogramma pretiosum em cultivares de algodoeiro. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso, com cinco tratamentos (cultivares DeltaOPAL, FMX-933, FMT-701, FMX-910 e NuOPAL), com oito repetições. As avaliações foram semanais, a partir da emergência das plantas. Para a distribuição vertical, as plantas foram avaliadas nas partes superior, média e inferior, anotando-se o número de ovos. Os ovos de A. argillacea e de H. virescens foram parasitados por Trichogramma pretiosum. Não houve preferência para oviposição por A. argillacea e por H. virescens durante os estágios fenológicos das plantas, tal como o grau de parasitismo por T. pretiosum também não foi influenciado. Quanto à distribuição vertical dos ovos, o terço superior e o médio das plantas foram os mais preferidos para oviposição por A. argillacea nas cultivares NuOPAL, DeltaOPAL e FMX-910, enquanto que H. virescens preferiu ovipositar no terço superior das plantas. T. pretiosum preferiu ovipositar em ovos de A. argillacea presentes no terço superior e médio das plantas, sendo que ovos de H. virescens presentes no terço superior das plantas foram mais parasitados por T. pretiosum / The knowledge of a pest infestation behavior on agricultural areas help the sampling and reduce time without lose confidence on decisions in integrated pest management. This work aimed to study the vertical and temporal distribution of Alabama argillacea and Heliothis virescens eggs, as well as parasitism of its eggs by Trichogramma pretiosum in cotton cultivars. The experimental design was randomized blocks with five treatments with five treatments (cultivars DeltaOPAL, FMX-933, FMT-701 and FMX-910 and NuOPAL) and with eight replicates. Evaluations were performed weekly since plant emergence. For the vertical distribution, plants were divided into three parts, upper, middle and bottom. The number of eggs present in plants was recorded. A. argillacea and H. virescens eggs were parasitized by Trichogramma pretiosum. There was no preference for oviposition by A. argillacea and H. virescens during the plants phenological stages, as well as T. pretiosum parasitism. Concerning the vertical distribution of eggs, the upper and middle parts of the plants were the most preferred for oviposition by A. argillacea on cultivars NuOPAL, DeltaOPAL and FMX-910, and H. virescens preferred to oviposit in the upper part of the plants. T. pretiosum preferred to oviposit in A. argillacea eggs on the upper and middle parts of the plants, and in H. virescens on the upper part of the plants
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Genótipos de feijoeiro, silício e nim no controle de Bemisia tabaci (Gennadius, 1889) biótipo B (Hemiptera: Aleyrodidae)

Peixoto, Marília Lara [UNESP] 11 October 2012 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-10-11Bitstream added on 2014-06-13T20:22:56Z : No. of bitstreams: 1 peixoto_ml_dr_jabo.pdf: 356167 bytes, checksum: 00f6eeb32ee82f02a8220b70f6eed68f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A mosca-branca Bemisia tabaci biótipo B se destaca como uma das pragas mais importantes na cultura do feijoeiro. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi avaliar a resistência de feijão comum associado a doses de nim e silício no desenvolvimento e oviposição de mosca-branca assim como o teor de fenóis e lignina em plantas tratadas com esses produtos. Os experimentos foram conduzidos em casa de vegetação no Departamento de Fitossanidade da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, UNESP/Campus de Jaboticabal-SP. Foram realizados testes para oviposição, com e sem chance de escolha e antibiose. Para a seleção inicial avaliou-se onze genótipos de feijoeiro. De acordo com os dados obtidos pode-se concluir que o genótipo IAC-Harmonia apresentou resistência do tipo não preferência para alimentação e/ou antibiose; o genótipo Pérola foi o mais suscetível, e o genótipo IAC-Carioca Tybatã intermediário. Os genótipos testados foram igualmente ovipositados. Os três genótipos selecionados na antibiose foram associados a diferentes doses de óleo de nim e silício. De acordo com os dados obtidos pode-se concluir que o silício reduziu o número de ovos em teste com chance de escolha e o nim reduziu em ambos os testes. O óleo de nim proporcionou alta mortalidade ninfal. No segundo teste de não preferência para oviposição para o teste com chance o menor número de ovos foi na dose de nim 0,75% e na dose nim 1% para o teste sem chance. O maior teor de fenóis foi obtido no genótipo Pérola e entre os tratamentos para o silício via solo 1%. O maior teor de lignina foi no genótipo IAC-Harmonia e entre os tratamentos não houve diferença exceto para a testemunha / Whitefly Bemisia tabaci biotype B stands out as one of the major pests of bean crop. Thus, the aim of this work was to evaluate the resistance of common bean associated to doses of neem and silicon on the development and oviposition of the whitefly as well as the content of phenols and lignin in plants treated with these products. The assays were carried out in greenhouse in the Departamento de Fitossanidade of Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, UNESP/Campus of Jaboticabal-SP. Free-choice and non-choice for oviposition and antibiosis tests were performed. For the initial screening, 11 bean genotypes were assessed. According to the obtained data we can conclude the genotype IAC-Harmonia showed nonpreference for feeding and/or antibiosis-type resistance; the genotype Pérola was the most susceptible; and the genotype IAC-Carioca Tybatã was intermediate. Tested genotypes were equally oviposited. The three screened genotypes from antibiosis test were associated to different doses of neem oil and silicon. From the obtained data we concluded silicon reduces the number of eggs in free-choice test and neem reduces it in both tests. Neem oil provided high mortality of nymphs. In the second non-preference for oviposition assay, for free-choice test, the lower number of eggs was found for neem dose at 0.75% and for non-choice test, neem in the dose of 1%. The highest content of phenols was obtained in the genotype Pérola and among treatments for silicon in the soil at 1%. The highest content of lignin was found in the genotype IAC-Harmonia and among treatments there were no differences except for the control treatment
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Resistência de cultivares de algodoeiro sobre Spodoptera frugiperda e Alabama argillacea (Lepdoptera: Noctuidae) e efeito na biologia e comportamento de Podisus nigrispinus (Hemiptera: Pentatomidae)

Jesus, Flávio Gonçalves de [UNESP] 16 October 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-10-16Bitstream added on 2014-06-13T21:03:19Z : No. of bitstreams: 1 jesus_fg_dr_jabo.pdf: 806356 bytes, checksum: 3ea30c1231f1105f6658f6ecf33cd0d7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho teve como objetivos estudar os tipos de resistência de cultivares de algodoeiro sobre Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) e Alabama argillacea (Hubner, 1818) (Lepidoptera: Noctuidae) e efeito na biologia de Podisus nigrispinus (Dallas, 1851) (Hemiptera: Pentatomidae) alimentados com S. frugiperda. Os experimentos foram conduzidos no Departamento de Fitossanidade da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Câmpus de Jaboticabal/SP, sendo os testes realizados no Laboratório de Resistência de Plantas a Insetos, sob condições ambientais controladas (temperatura: 27±2 ºC, 70±10% de U.R. e fotofase de 12 horas). Nos experimentos para avaliar a resistência de algodoeiro (Gossypium hirsutum L.), utilizou-se as cultivares DeltaOpal, NuOpal, FMX 993, FMT 701, FMX 910 e FMX 996 para S. frugiperda, enquanto que para A. argillacea as cultivares DeltaOpal, NuOpal, FMT 701, FMX 910 e FMX 996. Foi avaliada a não-preferência para oviposição e alimentação em teste com chance de escolha, adotando-se o delineamento estatístico em blocos casualizados e no teste sem chance para oviposição e alimentação o inteiramente casualizado. Para avaliar a antibiose, folhas das mesmas cultivares foram fornecidas as larvas de S. frugiperda e A. argillacea diariamente, verificando-se a duração de cada fase do inseto, avaliando-se a massa de larvas aos dez dias de idade, massa de pupas com 24 horas, período larval e pupal, longevidade de adultos, viabilidade total e fecundidade. No estudo da influência de cultivares de algodoeiro sobre a biologia de P. nigrispinus em relação à presa S. frugiperda, foram utilizados as cultivares DeltaOpal, NuOpal, FMX 910 e FMX 996. Para o teste de atratividade, utilizou-se um olfatômetro o qual constou de quatro compartimentos, no interior dos quais se colocou uma lagarta de S. frugiperda com 15 dias de idade alimentada com as... / This work aimed to study the resistance of cotton cultivars on Spodoptera frugiperda (JE Smith, 1797) and Alabama argillacea (Hubner, 1818) (Lepidoptera: Noctuidae) on the biology of Podisus nigrispinus (Dallas, 1851) (Hemiptera: Pentatomidae) fed with S. frugiperda. The experiments were conducted at the Departamento de Fitossanidade da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Câmpus de Jaboticabal/SP, and the tests were carried out at the Laboratório de Resistência de Plantas a Insetos, under controlled conditions (temperature: 27 ± 2 º C, 70 ± 10 % RH and photophase of 12 hours). In experiments to evaluate the cotton resistance (Gossypium hirsutum L.) was used the cultivars DeltaOpal, NuOpal, FMX 993, FMT 701, FMX 910 and FMX 996 to S. frugiperda, while to A. argillacea were used the cultivars DeltaOpal, NuOpal, FMT 701, FMX 910 and FMX 996. The non-preference for oviposition and feeding was evaluated in test-choice, adopting the randomized block design, and testing without chance for oviposition and feeding completely randomized. To assess the antibiosis, leaves of those cultivars were provided larvae of A. argillacea and S. frugiperda, daily, checking for the duration of each insect stage, evaluating the mass of larvae to ten days old, mass of pupae at 24 hours, larval and pupal stages, adult longevity, total survival and fecundity. In the study influence of cotton cultivars on the behavior and biology of P. nigrispinus in relation to prey S. frugiperda, were used the cultivars DeltaOpal, NuOpal, FMX 910 and FMX 996. For the attractive test used an olfactometer, which consisted of four compartments, inside which stood a larvae S. frugiperda 15 days of age fed cultivars, then released in the middle of this, 12 adults of the predator. This procedure consisted of 5 repetitions, adopting the randomized block design, evaluating the number of insects attracted to the cavity ... (Complete abstract click electronic access below)
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Espécies de Bacillus no controle de Meloidogyne incógnita e Meloidogyne javanica in vitro e na cana-de-açúcar

Ferreira, Rivanildo Junior [UNESP] 20 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-20. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:06Z : No. of bitstreams: 1 000829026.pdf: 336457 bytes, checksum: 8b02bbfade913853e331d4f14b9e3cc1 (MD5) / A cultura de cana-de-açúcar é de grande importância para a economia brasileira. Os fitonematoides são um dos fatores limitantes na maioria dos canaviais causando grandes perdas à cultura. O manejo dos nematoides é feito através de nematicidas químicos que são prejudiciais ao homem, meio ambiente e produtos colhidos, devido sua alta toxicidade. O controle biológico tem sido uma alternativa viável e sustentável para o manejo dos nematoides. O objetivo do presente trabalho foi avaliar espécies de Bacillus no controle de Meloidogyne incognita e M. javanica in vitro e na cana-de-açúcar. Foram instalados experimentos em condições de laboratório com delineamento inteiramente casualizado com os tratamentos: Cadusafós 200 CS (14 L/ha); B. subtillis; B. firmus e B. amyloliquefaciens (1 e 10 L/ha), além de uma testemunha (água). Os ensaios em vasos, à céu aberto, tiveram delineamento inteiramente casualizado, com os tratamentos B. subtilis (10 L/ha), B. firmus (10 L/ha), B. amyloliquefaciens (10 L/ha), Carbofurano 350 SC (5 L/ha - tratamento padrão) e uma testemunha, com cinco repetições e duas avaliações (100 e 150 dias após inoculação e aplicação dos tratamentos). No ensaio in vitro, B. firmus (10 L/ha) é o mais eficiente para diminuir a eclosão de J2 de M. javanica, sendo estasticamente semelhante ao produto químico testado. Quanto a motilidade de J2 de M. javanica, B. subtilis (10 L/ha) e B. amyloliquefaciens (1 e 10 L/ha), causam a mortalidade do nematoide, porém inferior ao padrão químico testado. Para M. incognita, B. firmus (10 L/ha) proporciona maior eclosão de J2. Quanto a motilidade de J2 de M. incognita, Cadusafós 200 CS (14 L/ha) causou a maior mortalidade. Nos ensaios em vasos, todos os tratamentos aumentam o número de perfilhos, mas não controlam os nematoides / The sugar-cane crop is very important to Brazilian economy. Phytonematodes are among the main limitating factors of such culture causing great losses. Chemical nematicides are harmful to humans, environment, harvested products, and are the main method used to manage the populations of these nematodes. Biological control have been a sustainable alternative to manage these nematodes. The aim of the present study was to evaluate Bacillus species for control Meloidogyne incognita and M. javanica in vitro and in sugar cane plants. We set assays in laboratory conditions in a completely random design with the treatments: Cadusafós 200 CS (14 L/ha), B. subitilis, B. firmus, B. amyloliquefaciens (1 and 10 L/ha) and a control (water). The pot assay, in a semi-field condition, had a completely random design with the treatments: B. subtilis (10 L/ha), B. firmus (10 L/ha), B. amyloliquefaciens (10 L/ha), Carbofurano 350 SC, with five replicates and two evaluation periods (100 and 150 days after inculation and application of treatments). At laboratory assay B. firmus (10 L/ha) was the most efficient in decreasing the M. javanica J2 eclosion and were statistically similar to the chemical nematicide tested. For M. javanica J2 mobility, B. subtilis (10 L/ha) and B. amyloliquefaciens (1 and 10 L/ha) cause nematode mortality, but lower than that presented by the chemical. To M. incognita, B. firmus (10 L/ha) provides higher J2 eclosion. For the M. incognita J2 mobility, Cadusafos 200CS (14 L/ha) caused higher mortality. In the pot assay, all treatments increase the number of tillers but do not control the nematodes
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Aspectos fisiológicos e bioquímicos da resistência do cafeeiro à ferrugem potencializados por triazol e estrobilurina / Physiological and biochemical aspects of resistance in coffee to rust potentiated by triazole and strobilurin

Honorato Júnior, Jaime 28 February 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T12:42:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1359880 bytes, checksum: 75e8020a52662b6da6545e57d6103547 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Coffee is the most traded commodity in the world and Brazil is the largest producer. Coffee leaf rust, caused by the biotrophic fungus Hemileia vastatrix is the most important coffee disease reducing coffee yield by 35 to 50%. Too little is known about this pathosystem as well as the pathogen impacts on plant photosynthesis, defense enzymes activities, concentration of plant pigments and chlorophyll a fluorescence parameters under different fungicides sprayed treatments. To contribute with new knowledge generation, this study aimed: 1) to evaluate the Fv/Fm (Maximal photosystem II quantum yield) chlorophyll a fluorescence imaging parameter as tool to differentiate pre-symptomatic coffee leaf rust infections in plants sprayed with pyraclostrobin and epoxiconazole and 2) to investigate the relationships between photosynthetic pigments, defense enzymes activities and some chlorophyll a fluorescence parameters on leaves of coffee plants sprayed with epoxiconazole and pyraclostrobin and inoculated or non-inoculated with Hemileia vastatrix. Experiments in a completely randomized design were performed in greenhouse and coffee plants were inoculated with urediniospores. Epoxiconazole and pyraclostrobin were sprayed in coffee plants in order to study the Fv/Fm chlorophyll a fluorescence parameter, coffee leaf rust severity, defense enzymes activities, photosynthetic pigments concentration and other chlorophyll a fluorescence parameters. Results from the present study showed that the different fungicides application on soil and/or leaves of triazoles and strobilurins were efficient to control coffee leaf rust. There was a significant linear relationship between the areas of real severity and visual severity and for each additional unit in the visual severity there was an increase of 53% on the real severity. For the epoxiconazole and pyraclostrobin treatments, the coffee leaf rust symptoms decreased based on both visual and Fv/Fm images. Pustules on leaves sprayed with epoxiconazole were smaller in size than the ones on leaves of plants from the control treatment, but bigger than pyraclostrobin. Reduction on Fv/Fm values at the pustules epicenter on leaves of plants sprayed with epoxiconazole and pyraclostrobin were lower than those of the control treatment. Coffee leaf rust severity decreased until 40 days after inoculation on plants sprayed with epoxiconazole and pyraclostrobin. Catalase, peroxidases, β-1,3-glucanases and chitinases activities were different among treatments with inoculated and non-inoculated plants. There was a significant reduction in pigments concentration between non-inoculated and inoculated treatments but not, in plants sprayed with epoxiconazole and pyraclostrobin. Chlorophyll a fluorescence parameters were different between non-inoculated and inoculated plants and non- sprayed and fungicides sprayed plants. Hemileia vastatrix affected the photosynthetic capacity of Coffea arabica and the Fv/Fm parameter was able to show this effect before the appearance of visual symptoms. Changes on photosynthesis were detected in non- inoculated and inoculated plants sprayed with epoxiconazole and pyraclostrobin. Also, the effect of fungicides on photosynthesis should be studied to provide more opportunities to understanding the impacts on plant defense mechanisms that lead to reduced coffee leaf rust symptoms. / O café é a commodity mais negociada no mundo sendo o Brasil seu maior produtor. A ferrugem do cafeeiro, causada pelo fungo biotrófico Hemileia vastatrix é a doença mais importante do cafeeiro e pode causar redução em sua produtividade entre 35 a 50%. Muito pouco se sabe sobre este patossistema, bem como os impactos do patógeno sobre a fotossíntese da planta, a atividade de enzimas de defesa, a concentração de pigmentos vegetais e os parâmetros de fluorescência clorofila a sob diferentes tratamentos com fungicidas. Para contribuir com a geração de novos conhecimentos, este estudo teve como objetivos: 1) avaliar a variável Fv/Fm (Rendimento quântico máximo do fotossistema II) obtida através da imagem da fluorescência da clorofila a como ferramenta para diferenciar infecções pré-sintomáticas em plantas pulverizadas com epoxiconazol e piraclostrobina e 2) investigar as relações entre pigmentos fotossintéticos, atividade de enzimas de defesa e alguns parâmetros de fluorescência da clorofila a em folhas de café pulverizadas com epoxiconazol e piraclostrobina e inoculadas ou não-inoculadas com Hemileia vastatrix. Os experimentos seguiram delineamento inteiramente casualizado e foram conduzidos em casa de vegetação. As plantas de café foram cultivadas em estufa e inoculadas com urediniósporos. Epoxiconazol e piraclostrobina foram pulverizadas sobre as plantas, a fim de estudar o parâmetro Fv/Fm de fluorescência da clorofila a, a severidade da ferrugem do cafeeiro, a atividade de enzimas de defesa, a concentração de pigmentos fotossintéticos e outros parâmetros de fluorescência da clorofila a. Houve uma relação linear significativa entre severidade real e visual das áreas foliares estimadas pelo parâmetro Fv/Fm e para cada unidade adicional na severidade visual, houve um aumento de 53% na severidade real. Para os tratamentos com epoxiconazol e piraclostrobina, os sintomas da ferrugem do cafeeiro diminuíram tomando como base as imagens visual e as geradas a partir do parâmetro Fv/Fm da fluorescência da clorofila a. Pústulas nas folhas pulverizadas com epoxiconazol foram menores nas folhas do tratamento controle mas, maiores do que piraclostrobina. A redução nos valores do parâmetro Fv/Fm no epicentro das pústulas das folhas pulverizadas com epoxiconazol e piraclostrobina foram menores do que os do tratamento controle. A severidade da ferrugem do cafeeiro diminuiu até 40 dias após a inoculação nas plantas pulverizadas com epoxiconazol e piraclostrobina. As atividades de catalase, peroxidases, β-1,3-glucanases e quitinases foram diferentes entre os tratamentos com plantas inoculadas e não-inoculadas. Houve redução significativa na concentração de pigmentos entre as plantas não-inoculadas e inoculadas mas, não entre as plantas pulverizadas com epoxiconazol e piraclostrobina. Os parâmetros de fluorescência da clorofila a foram diferentes entre plantas não-inoculadas e inoculadas e não-pulverizadas e pulverizadas com fungicidas. Hemileia vastatrix afetou a capacidade fotossintética de Coffea arabica e o parâmetro Fv/Fm de fluorescência da clorofila a foi capaz de mostrar esse efeito antes do aparecimento dos sintomas visuais. Alterações na fotossíntese foram detectadas em plantas não-inoculadas e inoculadas pulverizadas com epoxiconazol e piraclostrobina. Além disso, o efeito dos fungicidas sobre a fotossíntese deve ser estudado, para proporcionar mais oportunidades para a compreensão dos impactos sobre os mecanismos de defesa da planta, que levam à redução de sintomas da ferrugem do cafeeiro.
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Espécies de Bacillus no controle de Meloidogyne incógnita e Meloidogyne javanica in vitro e na cana-de-açúcar /

Ferreira, Rivanildo Junior. January 2015 (has links)
Orientador: Pedro Luiz Martins Soares / Coorientador: Jaime Maia dos Santos / Banca: Bruno Flávio Figueiredo Barbosa / Banca: Rita de Cássia Panizzi / Resumo: A cultura de cana-de-açúcar é de grande importância para a economia brasileira. Os fitonematoides são um dos fatores limitantes na maioria dos canaviais causando grandes perdas à cultura. O manejo dos nematoides é feito através de nematicidas químicos que são prejudiciais ao homem, meio ambiente e produtos colhidos, devido sua alta toxicidade. O controle biológico tem sido uma alternativa viável e sustentável para o manejo dos nematoides. O objetivo do presente trabalho foi avaliar espécies de Bacillus no controle de Meloidogyne incognita e M. javanica in vitro e na cana-de-açúcar. Foram instalados experimentos em condições de laboratório com delineamento inteiramente casualizado com os tratamentos: Cadusafós 200 CS (14 L/ha); B. subtillis; B. firmus e B. amyloliquefaciens (1 e 10 L/ha), além de uma testemunha (água). Os ensaios em vasos, à céu aberto, tiveram delineamento inteiramente casualizado, com os tratamentos B. subtilis (10 L/ha), B. firmus (10 L/ha), B. amyloliquefaciens (10 L/ha), Carbofurano 350 SC (5 L/ha - tratamento padrão) e uma testemunha, com cinco repetições e duas avaliações (100 e 150 dias após inoculação e aplicação dos tratamentos). No ensaio in vitro, B. firmus (10 L/ha) é o mais eficiente para diminuir a eclosão de J2 de M. javanica, sendo estasticamente semelhante ao produto químico testado. Quanto a motilidade de J2 de M. javanica, B. subtilis (10 L/ha) e B. amyloliquefaciens (1 e 10 L/ha), causam a mortalidade do nematoide, porém inferior ao padrão químico testado. Para M. incognita, B. firmus (10 L/ha) proporciona maior eclosão de J2. Quanto a motilidade de J2 de M. incognita, Cadusafós 200 CS (14 L/ha) causou a maior mortalidade. Nos ensaios em vasos, todos os tratamentos aumentam o número de perfilhos, mas não controlam os nematoides / Abstract: The sugar-cane crop is very important to Brazilian economy. Phytonematodes are among the main limitating factors of such culture causing great losses. Chemical nematicides are harmful to humans, environment, harvested products, and are the main method used to manage the populations of these nematodes. Biological control have been a sustainable alternative to manage these nematodes. The aim of the present study was to evaluate Bacillus species for control Meloidogyne incognita and M. javanica in vitro and in sugar cane plants. We set assays in laboratory conditions in a completely random design with the treatments: Cadusafós 200 CS (14 L/ha), B. subitilis, B. firmus, B. amyloliquefaciens (1 and 10 L/ha) and a control (water). The pot assay, in a semi-field condition, had a completely random design with the treatments: B. subtilis (10 L/ha), B. firmus (10 L/ha), B. amyloliquefaciens (10 L/ha), Carbofurano 350 SC, with five replicates and two evaluation periods (100 and 150 days after inculation and application of treatments). At laboratory assay B. firmus (10 L/ha) was the most efficient in decreasing the M. javanica J2 eclosion and were statistically similar to the chemical nematicide tested. For M. javanica J2 mobility, B. subtilis (10 L/ha) and B. amyloliquefaciens (1 and 10 L/ha) cause nematode mortality, but lower than that presented by the chemical. To M. incognita, B. firmus (10 L/ha) provides higher J2 eclosion. For the M. incognita J2 mobility, Cadusafos 200CS (14 L/ha) caused higher mortality. In the pot assay, all treatments increase the number of tillers but do not control the nematodes / Mestre
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Resistência de cultivares de algodoeiro sobre Spodoptera frugiperda e Alabama argillacea (Lepdoptera: Noctuidae) e efeito na biologia e comportamento de Podisus nigrispinus (Hemiptera: Pentatomidae) /

Jesus, Flávio Gonçalves de. January 2009 (has links)
Orientador: Arlindo Leal Boiça Júnior / Banca: Marcos Donisete Michelotto / Banca: José Roberto Scarpellini / Banca: Antonio Carlos Busoli / Banca: Júlio Cesar Galli / Resumo: O presente trabalho teve como objetivos estudar os tipos de resistência de cultivares de algodoeiro sobre Spodoptera frugiperda (J.E. Smith, 1797) e Alabama argillacea (Hubner, 1818) (Lepidoptera: Noctuidae) e efeito na biologia de Podisus nigrispinus (Dallas, 1851) (Hemiptera: Pentatomidae) alimentados com S. frugiperda. Os experimentos foram conduzidos no Departamento de Fitossanidade da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Câmpus de Jaboticabal/SP, sendo os testes realizados no Laboratório de Resistência de Plantas a Insetos, sob condições ambientais controladas (temperatura: 27±2 ºC, 70±10% de U.R. e fotofase de 12 horas). Nos experimentos para avaliar a resistência de algodoeiro (Gossypium hirsutum L.), utilizou-se as cultivares DeltaOpal, NuOpal, FMX 993, FMT 701, FMX 910 e FMX 996 para S. frugiperda, enquanto que para A. argillacea as cultivares DeltaOpal, NuOpal, FMT 701, FMX 910 e FMX 996. Foi avaliada a não-preferência para oviposição e alimentação em teste com chance de escolha, adotando-se o delineamento estatístico em blocos casualizados e no teste sem chance para oviposição e alimentação o inteiramente casualizado. Para avaliar a antibiose, folhas das mesmas cultivares foram fornecidas as larvas de S. frugiperda e A. argillacea diariamente, verificando-se a duração de cada fase do inseto, avaliando-se a massa de larvas aos dez dias de idade, massa de pupas com 24 horas, período larval e pupal, longevidade de adultos, viabilidade total e fecundidade. No estudo da influência de cultivares de algodoeiro sobre a biologia de P. nigrispinus em relação à presa S. frugiperda, foram utilizados as cultivares DeltaOpal, NuOpal, FMX 910 e FMX 996. Para o teste de atratividade, utilizou-se um olfatômetro o qual constou de quatro compartimentos, no interior dos quais se colocou uma lagarta de S. frugiperda com 15 dias de idade alimentada com as ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work aimed to study the resistance of cotton cultivars on Spodoptera frugiperda (JE Smith, 1797) and Alabama argillacea (Hubner, 1818) (Lepidoptera: Noctuidae) on the biology of Podisus nigrispinus (Dallas, 1851) (Hemiptera: Pentatomidae) fed with S. frugiperda. The experiments were conducted at the Departamento de Fitossanidade da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Câmpus de Jaboticabal/SP, and the tests were carried out at the Laboratório de Resistência de Plantas a Insetos, under controlled conditions (temperature: 27 ± 2 º C, 70 ± 10 % RH and photophase of 12 hours). In experiments to evaluate the cotton resistance (Gossypium hirsutum L.) was used the cultivars DeltaOpal, NuOpal, FMX 993, FMT 701, FMX 910 and FMX 996 to S. frugiperda, while to A. argillacea were used the cultivars DeltaOpal, NuOpal, FMT 701, FMX 910 and FMX 996. The non-preference for oviposition and feeding was evaluated in test-choice, adopting the randomized block design, and testing without chance for oviposition and feeding completely randomized. To assess the antibiosis, leaves of those cultivars were provided larvae of A. argillacea and S. frugiperda, daily, checking for the duration of each insect stage, evaluating the mass of larvae to ten days old, mass of pupae at 24 hours, larval and pupal stages, adult longevity, total survival and fecundity. In the study influence of cotton cultivars on the behavior and biology of P. nigrispinus in relation to prey S. frugiperda, were used the cultivars DeltaOpal, NuOpal, FMX 910 and FMX 996. For the attractive test used an olfactometer, which consisted of four compartments, inside which stood a larvae S. frugiperda 15 days of age fed cultivars, then released in the middle of this, 12 adults of the predator. This procedure consisted of 5 repetitions, adopting the randomized block design, evaluating the number of insects attracted to the cavity ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Controle de viroses em alface por meio de métodos integrados de manejo da cultura /

Borges, Luciana Maestro, 1972- January 2006 (has links)
Orientador: Marcelo Agenor Pavan / Banca: Rumy Goto / Banca: Norberto da Silva / Banca: Alexandre de Moura Guimarães / Banca: Eliezer Rodrigues de Souto / Resumo: O trabalho teve como objetivos avaliar diversas progenies de alface da geracao [(Brasil 303 x Tinto) Elisa] F5 RC1, previamente selecionadas para tolerancia a "Lettuce mosaic virus" - (LMV-II), "Lettuce mottle virus" (LeMoV) e Tospovirus e o efeito de diferentes praticas culturais no controle de fitovirus na cultura da alface, em duas epocas do ano (outono/inverno e primavera/verao). Os fatores avaliados foram: cobertura do solo (palha de arroz e sem cobertura), cultivo protegido (tunel coberto com filme PEBD aditivado antivirus de 150 æm e tunel coberto com tela anti-afideo) e 18 progenies, avaliando os seguintes aspectos agronomicos: area de projecao da copa, massa fresca da parte aerea da planta, produtividade, fechamento de "cabeça", tempo de inicio do pendoamento e incidencia de fitoviroses. A avaliacao da incidencia de fitovirus na cultura foi realizada atraves de observacao visual dos sintomas, sendo que amostras de plantas que apresentavam sintomas foram coletadas e examinadas atraves de testes moleculares de diagnose especificos para LMV-II, LMV-IV, LeMoV e Tospovirus. Para algumas amostras sintomaticas negativas ainda foram realizados testes de RT-PCR para possivel deteccao de "Cucumber mosaic virus". (CMV), testes de inoculacao mecanica em hospedeiras diferenciadoras e analises de microscopia eletronica. Quanto aos aspectos agronomicos das progenies, observou-se que o tratamento "palha de arroz"apresentou resultado superior aos demais tratamentos para as caracteristicas massa fresca e produtividade e igual desempenho ao tratamento "solo nu" para as caracteristicas fechamento de "cabeça" e tempo de inicio de pendoamento. Dentre as 2 progenies testadas, se destacaram as de numero 6 e 7 por apresentarem maior tolerancia a viroses e caracteristicas agronomicas equivalentes a cultivar comercial utilizada como controle. Na avaliacao visual de fitoviroses... / Abstract: The research aimed to evaluate various progenies, obtained from the crossing of [(Brasil 303 x Tinto) Elisa] F5 RC1, previously selected for tolerance to "Lettuce mosaic virus" - (LMV-II), "Lettuce mottle virus" (LeMoV) and tospovirus and the effect of different phytovirus control practices in lettuce, in two periods of the year (autumn/winter and spring/summer). The factors evaluated were: soil covering (straw of rice and bare soil); protected development with a tunnel covered with an anti-virus PEBD treated film of 150 ìm and a tunnel covered with anti-aphid screen; and 18 progenies, evaluating the following agronomic aspects: area of top projection, fresh mass of the aerial part of the plant, productivity, closing of "head" and time at the beginning of tasselling and incidence of phytovirosis. The evaluation of phytovirus incidence in the crop was accomplished through visual observation of symptoms. Samples of plants showing symptoms were collected and taken to the laboratory for molecular tests to specifically detect LMV-II, LMV-IV, LeMoV and tospovirus. For some negative symptomatic samples, tests of RT-PCR were accomplished to detect possible infection by "Cucumber mosaic virus"- (CMV), and mechanical inoculation tests in differential plant, and electronic microscopic analysis. As for the agronomic aspects of the progenies, it was observed that the "rice straw" treatment presented better results than other the treatments for the fresh mass and productivity parameters, and equal performance on the "bare soil" treatment for the parameters closing of "head" and time at the beginning of tasseling. Among the tested progenies, number 6 and 7 were distinguished for presenting better tolerance to phytovirosis and agronomic characteristics equivalent to the commercial cultivar used as control. In the visual evaluation of phytovirosis, it was verified that 3,65%... / Doutor

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