Made available in DSpace on 2014-10-09T12:26:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:50:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Uma lectina da entrecasca de Sebastiania jacobinensis (SejaBL) foi isolada por combinação de precipitação acetônica, fracionamento salino, cromatografia de troca iônica e gel filtração. A massa molecular de SejaBL foi determinada por SDS-PAGE e gel filtração, sendo de 52,0 kDa e 50,0 kDa, respectivamente. A lectina é uma glicoproteína com teor de carboidrato neutro de 6,94%, composta por duas subunidades com mesma massa molecular de 24 kDa. A lectina purificada hemaglutinou hemácias de coelho e humana. Glicoproteínas inibiram a hemaglutinação. SejaBL apresentou atividade máxima na faixa de pH 3,0-7,5, estabilidade térmica até 70 °C e é potencial inibidor da atividade da tripsina. Espectroscopia de fluorescência indicou a existência de superfícies hidrofóbicas. Lectina inibiu o crescimento micelial de Fusarium moniliforme e Fusarium oxysporum com um IC50 de 123±0,5&#956;g e 303±0,9&#956;g, respectivamente. Organismos não alvos, larvas Artemia salina e embriões de Biomphalaria glabrata, não foram afetados, indicando baixa toxicidade ambiental. Como modelo experimental, a lectina purificada de S. jacobinensis (SejaBL) foi utilizada como prova de que mudanças no centro hidrofóbico, causados pela irradiação gama, alteram estruturalmente proteínas. Para elucidar o efeito dos radicais livres nas propriedades moleculares de SejaBL atividade, estrutura terciária (intrínseca e bis-ANS fluorescência), massa molecular e perfil cromatográfico foram examinados após - irradiação em várias doses (0,020 a 35kGy). Atividade hemaglutinante específica (AHE), na lectina irradiada, mostrou perda significativa (p<0,05) acima de 12,5kGy e aumento significativo (p<0,05) em 0,1, 0,8 e 1kGy. Espectroscopia de fluorescência indicou supressão da emissão de fluorescência quando excitado a 280 e 295nm, com elevada ligação do bis-ANS, após altas doses. SDS-PAGE e HPLC-RP mostraram fragmentação polipeptídica. Mudança significativa na superfície hidrofóbica indicou captação de hidrogênio radical em aminoácidos, causando desorganização estrutural da lectina. Flavonóides são produtos secundários de plantas com capacidade para capturar radicais livres. A lectina da entrecasca de S. jacobinensis (SejaBL), proteína capaz de ligar a carboidrato, tem sua superfície hidrofóbica modificada por radicais livres produzidos pela água radiólise. No presente estudo, o efeito protetor sobre a proteína pela estabilidade antioxidante de flavonóides da entrecasca de S. jacobinensis (SejaBF), após irradiação gama, foi investigada. Dois flavonóides foram isolados com rápida recuperação da capacidade para capturar radical mensurado pelo 2,2-difenil-1-picrilhidracilo radical (DPPH) a 0,5 mg/mL, após alta dose de irradiação. Os danos causados por irradiação na AH foi minimizado em 55% na presença dos flavonóides. Os resultados mostraram radioestabilidade da capacidade antioxidante de SejaBF, protegendo a lectina de radicais livres após irradiação

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:26:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A erva-mate (Ilex paraguariensis), espécie nativa da América do Sul, é consumida principalmente na forma de bebidas típicas denominadas chimarrão e tererê. Um problema que tem afligido este setor é a contaminação fúngica responsável por afetar suas qualidades físicas, sanitárias e nutricionais. No intuito de melhorar a qualidade deste produto, o processamento por radiação pode ser eficiente no combate de agentes patogênicos, pouco comprometendo seus valores nutricionais e propriedades sensoriais. O objetivo desse estudo foi avaliar a eficácia da radiação gama de 60Co em doses de 0, 3, 5, 7 e 10kGy na redução da microbiota fúngica presentes na erva-mate, assim como analisar suas características nutricionais e sensoriais. Este trabalho teve como metodologia: análise de bolores e leveduras, compostos fenólicos totais, análise antioxidante, quantificação de compostos fenólicos e xantinas através de cromatografia líquida e análise sensorial. A análise microbiológica mostrou uma diminuição no desenvolvimento de bolores e leveduras com doses de radiação crescentes. Independentemente da dose de radiação aplicada não houve diminuição de compostos fenólicos totais em ambas as infusões. Ocorreu um decréscimo na capacidade de seqüestrar radicais livres (DPPH) nas doses de 7 e 10kGy para o chimarrão, já para o tererê, a diferença não foi significativa. Quanto ao perfil cromatográfico do chimarrão, não foi observado variações das xantinas, porém ocorreu alteração no perfil quantitativo de compostos fenólicos na dose de 10kGy. No tererê não foi observada diferença significativa para nenhum dos compostos analisados. A análise sensorial não mostrou diferença significativa entre o produto irradiado e não irradiado. Conclui-se que o processamento de erva-mate por radiação gama pode ser uma alternativa viável para as indústrias, uma vez que houve a redução da contaminação fúngica, sem alterações das qualidades sensoriais e com mínimas alterações no perfil qualiquantitativo dos compostos bioativos. / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Os chás destacam-se como a segunda bebida mais consumida no mundo. Além disso, seu consumo tem se modernizado, adequando-se aos anseios dos consumidores. São uma boa fonte de compostos com atividade antioxidante, os quais podem trazer benefícios à saúde humana pelo retardamento do processo de envelhecimento, assim como pela prevenção de doenças crônicas, tais como o câncer e doenças cardiovasculares. Infusões de ervas processadas e frescas foram estudadas quanto a teor de compostos fenólicos totais, perfil de flavonóides e atividade antioxidante. Os teores de compostos fenólicos totais, determinados pelo método de Folin&#150;Ciocalteu, variaram de zero a 46,46 mg/g. Os flavonóides miricetina, quercetina e campferol foram identificados e quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) nos chás preto, verde e de camomila. A atividade antioxidante foi avaliada pelo método do seqüestro do radical 2,2&#39;-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e pelo sistema modelo &#946;-caroteno/ácido linoléico (BCAL), usando hidroxitolueno butilado (BHT) e &#945;- tocoferol como padrões. As maiores atividades encontradas pelo sistema modelo BCAL foram para as infusões de chá preto, mate, capim-limão, camomila e funcho, enquanto as infusões de ervas frescas apresentaram as menores atividades. Entretanto, quando a atividade antioxidante foi avaliada pelo método do DPPH, as infusões de ervas frescas de menta e funcho foram as que apresentaram as maiores atividades. Os chás processados que apresentaram os menores valores de IC50 foram verde e preto (147,63 &#181;g/mL e 288,60 &#181;g/mL, respectivamente). Os resultados obtidos demonstraram que as infusões analisadas são boas fontes de compostos com atividade antioxidante. / Teas are the second most consumed beverage in the world. Besides this, their consumption has been modernized to suit the consumers? desires. They are a good source of compounds presenting antioxidant activity, which can bring benefits to human health by retarding the process of aging, as well as by preventing chronic diseases, such as cancer and cardiovascular diseases. Processed teas and herbal infusions were studied for their total polyphenol content, flavonoid profile, and antioxidant activity. Total phenolics, determined by Folin?Ciocalteu procedure, ranged from zero to 46.46 mg/g. Flavonoids myricetin, quercetin, and kaempferol were identified and quantified by High Efficiency Liquid Chromatography (HPLC) in black, green, and chamomile tea. Antioxidant activity was evaluated using 2,2 Diphenyl-1-picryl-hydrazyl method (DPPH) and &#946;-carotene bleaching test (BCB), with butylated hydroxytoluene (BHT) and &#945;-tocopherol as reference substances. The highest activities using BCB were found for infusions of black tea, maté, lemongrass, chamomile, and fennel, whereas fresh herbal infusions presented the lowest activities. However, when the antioxidant activity was evaluated by DPPH, fresh herbal infusions of mint and fennel presented the highest activities. Processed teas with the lowest IC50 values were green and black (147.63 &#181;g/mL and 288.60g/mL and 288.60 &#181;g/mL, respectively). The results obtained demonstrate that the infusions analyzed are good sources of compounds presenting antioxidant activity.

This thesis deals with determination of content of vitamin C in various types of cornelian cherry (Cornus mas L.). Some basic information about Cornus mas L. and its various types are described in the literary part of this thesis. The summary of important components present at fruit and some possibilities of processing and utilization are described here too. Various methods of determination of vitamin C are presented at the end of the literary part. The main result of the experimental part of this thesis is the comparison of content of vitamin C in various types of cornelian cherry (Cornus mas L.). Reversed Phase-High Performance Liquid Chromatography was used as the main method. HPLC method of determination of vitamin C in various types of Cornus mas L. was completed with the orientation titration. Then total antioxidant capacity of fruit was evaluated by using of reaction of extracts of fruit with stable radical DPPH. The biggest amount of vitamin C was determined in the Fruchtal variety. The biggest total antioxidant capacity was determined in the Vydubecký variety.

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology & Toxicology Student: Jana Kucková Supervisor: PharmDr. Marie Vopršalová, CSc. Title of diploma thesis: Testing antioxidant properties of selected acetylcholinesterase inhibitors Very widespread Alzheimer's disease is typical by a complex pathology. Its causality is not clearly understood. There is increasing discussion due to the negative impact of free radicals on this disease formation. There are testing new substances that have also antioxidant properties, in addition to their classical effects. The aim of this diploma thesis is spectrophotometric testing of antioxidant properties of selected acetylcholinesterase inhibitors. It is based on DPPH test where the presence of antioxidants with antiradical activity causes the reduction of the color stable 2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl (DPPH) radical to a colorless molecule. The principle of the method is the measurement of decrease in absorbance (decolorization) of selected substances that are directly proportional to the antioxidant (antiradical) efficacy of the analyzed inhibitors. It focuses on twelve samples, Phenothiazine, which is the leader structure of new inhibitors synthesis, and two standards. Antioxidant activity is expressed as the effective...

Algae extracts are used as cosmetic products and used as additives in specific foods because of their antioxidant activity. Reactive oxygen species (ROS) such as hydrogen peroxide and superoxide radicals are toxic on the skin and can be scavenged by antioxidants, which are abundant in microalgae. Antioxidant substances protect the skin against external factors such as ultraviolet light (UV). Many creams that are concerned with treating the skin have antioxidant molecules. Researchers are performing many studies to achieve natural and non-chemical skin maintenance for the skin. Conducting in vivo studies to analyze the antioxidant potential of extracts on skin needs ethical permission to recruit a specific number of people. In this study, pig ear skin was used with the help of a skin-membrane-covered oxygen electrode (SCOE) to analyze the antioxidant effect of an extract from the microalgae Chlamydomonas reinhardtii. A study proved that this method was effective in measuring other antioxidants. Hydroquinone was used as a control to see if the system worked correctly. Hydroquinone showed that it could penetrate the skin and give antioxidant activity. When the algae extract was used, the same effect as for hydroquinone could not be detected. With a 2,2-diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) assay, the algae extract was analyzed for its antioxidant capacity, and the assay revealed a positive antioxidant effect of the extract. The spectrophotometric measurement of the amount of bioactive antioxidant molecules in the extract in different solutions suggested that the one resuspended in ethanol presented a higher amount of carotenoids and chlorophylls than the extract resuspended in an aqueous buffer. Additional research will be needed to characterize the antioxidant potential of the extract from the microalgae Chlamydomonas reinhardtii.

Há, no Brasil, uma enorme diversidade de espécies vegetais, e um conhecimento popular de várias propriedades medicinais das mesmas. Dentre os estudos realizados com extratos de plantas, há um interesse especial na atividade antioxidante. Este trabalho, focado em atividade antioxidante, é dividido em duas partes: a primeira, utiliza a técnica de RPE para estudar a ação dos antioxidantes neutralizando os radicais livres, enquanto que a segunda utiliza a TFD para, em simulação computacional, ajudar a entender os resultados obtidos na primeira parte. Foram analisados 10 extratos vegetais: Swartzia langsdorffii, Machaerium villosum, Pterogyne nitens, Maytenus ilicifolia (casca de raiz), Pera glabrata, Aegiphyla sellowiana, Copaifera langsdorffii, Chrysophyllum inornatum, Iryanthera juruensis (folhas e sementes), Didymopanax vinosum. O estudo da atividade antioxidante com RPE utiliza dois métodos diferentes: o primeiro método mede a atividade antioxidante por meio do controle da quantidade de radicais livres, TEMPOL e DPPH, em contato com o extrato vegetal, enquanto que o segundo método utiliza o spin trap DMPO em conjunto com a reação de Fenton (Fe2+ + H2O2 => Fe3+ + HO- + HO) para analisar a ação dos extratos vegetais contra o radical hidroxila (OH?). A simulação computacional dos compostos TEMPOL, DPPH e DMPO é realizada em um método de primeiros princípios na Teoria do Funcional da Densidade, com uso de pseudopotenciais. O código utilizado é o SIESTA. As conclusões indicam que o extrato de Iryanthera juruensis, tanto de folhas quanto de sementes, exibe atividades antioxidantes bastante acentuadas, em todos os métodos utilizados. A simulação computacional aponta o TEMPOL menos reativo que o DPPH, devido a menor energia liberada em sua reação de redução. Sabendo que algumas destas espécies já são usadas popularmente por propriedades medicinais, estudos futuros para a correta identificação do agente antioxidante e seu possível uso, tanto na indústria alimentícia quanto na farmacêutica, deverão ser realizados. / There is, in Brazil, a great diversity of vegetable species, and a popular knowledge of several medicinal properties of the some of them. In studies carried out with plants? extracts, there is special interest in antioxidant activities. This work, focused in antioxidant activity, is divided in two parts: the first uses EPR technique to study the antioxidant activities neutralizing free radicals, while the second one uses DFT, in computational simulation, to understand the results obtained from the first part. Ten vegetable extracts were analyzed: Swartzia langsdorffii, Machaerium villosum, Pterogyne nitens, Maytenus ilicifolia (bark root extracts), Pera glabrata, Aegiphyla sellowiana, Copaifera langsdorffii, Chrysophyllum inornatum, Iryanthera juruensis (leaves and seeds), Didymopanax vinosum. The study with EPR uses two different methods: the first method measures the antioxidant activity by monitoring the amount of free radicals, DPPH and TEMPOL, that are in contact with the plant extract, the second method uses spin trap DMPO with Fenton reaction (Fe2+ + H2O2 => Fe3+ + HO- + HO) for the study of the plant extract antioxidant activity against the hydroxyl radical (OH?). The computational simulation of TEMPOL, DPPH and DMPO is carried out using a method of first principles within the Density Functional Theory and pseudopotentials. The code is SIESTA. The conclusions indicate that the Iryanthera juruensis extract, as of leaves as of seeds, exhibits accentuated antioxidants activities, in all of the used methods. The computational simulation indicated that the TEMPOL is less reactive than the DPPH, because the lower energy in its reduction reaction. As some of these species are already used popularly by medicinal properties, future studies for correct identification of the antioxidant compounds and its possible use, as in the food industry as in the pharmaceutical industry, should be realized.

<p>Etanolni ekstrakti tropa odabranih sorti cvekle (Detroit, Cardeal-F1, Egipatska, Bikor i Kestrel) preči&scaron;ćeni su primenom ekstrakcije na čvrstoj fazi (SPE). Sadržaj ukupnih<br />fenolnih jedinjenja, flavonoida i betalaina u preči&scaron;ćenim ekstraktima određeni su spektrofotometrijskim metodama. HPLC analizom utvrđen je kvalitativni i kvantitativni sastav fenolnih jedinjenja i betalaina ekstrakata tropa odabranih sorti cvekle. ESR spektroskopijom ispitana je antiradikalska aktivnost ekstrakata topa cvekle na stabilne DPPH i reaktivne superoksid anjon i hidroksil radikale.<br />Spektrofotometrijski je određena antioksidativna aktivnost na DPPH radikale i redukciona sposobnost po Oyaizu u ekstraktima odabranih sorti cvekle. Ispitana je in vitro<br />antiproliferativna aktivnost frakcija ekstrakata, njihovim delovanjem na rast tri histolo&scaron;ki različite humane ćelijske linije: MCF-7 (adenokarcinom dojke), HeLa (epitelni karcinom cerviksa)i MRC-5 (fetalni fibroblastni karcinom pluća). U zavr&scaron;noj fazi rada određena je antimikrobna aktivnost ekstrakata tropa odabranih sorti cvekle.</p> / <p> Beetroot (Detroit, Cardeal-F1, Egipatska, Bikor i Kestrel)<br /> pomace ethanol extracts were purified using solid phase<br /> extraction (SPE). Contents of total phenols, flavonoids and<br /> betalains in purified extracts were determined by spectrophotometric<br /> methods. HPLC analysis were used for quantitative<br /> and qualitative characterization of phenolic compounds<br /> and betalains in investigated extracts. ESR spectroscopy<br /> was used for investigation of antiradical activity of<br /> beetroot pomace extracts on stable DPPH and reactive<br /> superoxide anion and hydroxyl radicals. Antioxidant activity<br /> was determined spectrophotometrically on DPPH radicals<br /> and reducing power according to Oyaizu in the beetroot pomace<br /> extracts. Antiproliferative activity of investigated extracts<br /> was determined in vitro, testing their influence on the<br /> growth of three histologically different human cell lines:<br /> MCF-7 (breast adenocarcinoma), HeLa (cervix epithelioid<br /> carcinoma) and MRC-5 (fetal lung). Also, antimicrobial activity<br /> of beetroot pomace extracts was determined.</p>

<p>Acetonski ekstrakti bobičastog voća iz familija Ericaceae<br />(borovnica,<em> Vaccinium myrtillus</em> L., i brusnica, <em>Vaccinium<br />macrocarpon</em> L.) i Rosaceae (&scaron;ipak, <em>Rosa canina</em> L., i glog,<br /><em>Crataegus oxyacantha</em> L.) preči&scaron;ćeni su i frakcionisani<br />primenom ekstrakcije na čvrstoj fazi (SPE). Sadržaj ukupnih<br />polifenolnih jedinjenja, flavonoida i antocijana u preči&scaron;ćenim<br />ekstraktima određeni su spektrofotometrijskim metodama.<br />HPLC analizom utvrđen je kvalitativni i kvantitativni<br />sastav frakcija ekstrakata ispitivanih bobica. ESR spektroskopijom<br />ispitana je antiradikalska aktivnost frakcija ekstrakata<br />bobica na stabilne DPPH^● i reaktivne superoksid anjon i<br />hidroksil radikale. ESR spektroskopijom ispitano je i<br />prisustvo slobodnih radikala antioksidanata nastalih tokom<br />reakcije frakcija ekstrakata bobica sa superoksid anjon<br />radikalima. U zavr&scaron;noj fazi rada ispitana je<em> in vitro</em><br />antiproliferativna aktivnost frakcija ekstrakata bobica, njihovim<br />delovanjem na rast tri histolo&scaron;ki različite humane ćelijske<br />linije: HeLa (epitelni karcinom cerviksa), HT-29 (adenokarcinom<br />debelog creva) i MCF-7 (adenokarcinom dojke).</p> / <p>Acetone extracts of berries form Ericaceae (bilberry, <em>Vaccinium<br />myrtillus</em> L., and cranberry, <em>Vaccinium macrocarpon</em><br />L.) and Rosaceae (rose hip, <em>Rosa canina</em> L., and hawthorn,<br /><em>Crataegus oxyacantha </em>L.) families were purified and fractionated<br />using solid phase extraction (SPE). Contents of total<br />polyphenols, flavonoids and anthocyanins in purified extracts<br />were determined by spectrophotometric methods.<br />HPLC analysis were used for quantitative and qualitative<br />characterization of investigated berry extracts fractions. ESR<br />spectroscopy was used for investigation of antiradical activity<br />of berry extracts fractions on stable DPPH^● and<br />reactive superoxide anion and hydroxyl radicals. The<br />presence of antioxidant free radicals formed during reaction<br />of investigated berry extracts fractions with superoxide<br />anion radicals was also investigated by ESR. Antiprolixferative<br />activity of investigated berry extracts fractions was<br />determined<em> in vitro</em>, testing their influence on the growth of<br />three histologically different human cell lines: HeLa (cervix<br />epithelioid carcinoma), HT-29 (colon adenocarcinoma) i<br />MCF-7 (breast adenocarcinoma).</p>