Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-06. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:48:36Z : No. of bitstreams: 1 000849664.pdf: 1189084 bytes, checksum: cbc1fe6d442a04c2f695f228e768b010 (MD5) / Em camundongo, estudos recentes demonstraram que o precursor do peptídeo natriurético tipo C (NPPC) e o seu receptor do tipo 2 (NPR2) são essenciais para a manutenção do bloqueio da meiose I no oócito. Além disso, fatores parácrinos secretados pelo oócito, como a proteína morfogenética óssea (BMP15), podem modular esse bloqueio pelo estímulo da expressão do gene NPR2 nas células do cumulus de camundongos. Em recente estudo na espécie bovina, o fluido folicular bovino (FFb), quando adicionado ao meio de maturação, interferiu na maturação nuclear do oócito e, como resultado, melhorou a produção in vitro de embriões. Contudo, não são conhecidos quais os fatores, presentes no FFb, que são responsáveis por esse efeito podendo inclusive haver participação das microvesículas presentes neste. Além de ser um componente do FFb, foi demonstrado que o estradiol pode participar diretamente da estimulação do NPR2. Portanto, os objetivos gerais do presente trabalho envolvem a elucidação do sistema NPPC-NPR2 no ovário bovino e a investigação da influência do NPPC exógeno, do estradiol e das vesículas extracelulares sobre a expressão do gene da PDE3 no oócito bovino e sobre a concentração de nucleotídeos cíclicos nos complexos cumulus-oócito. Foram realizado s quatro experimentos: 1) Ensaio imunoenzimático (ELISA) para investigar a presença e a concentração do NPPC no fluido folicular, no lisado de células da granulosa mural e nas vesículas extracelulares, de acordo com a classe de diâmetro folicular (3 a 6 mm; 6 a 8 mm e >8 mm); 2) Imunolocalização do receptor NPR2 no folículo antral bovino; 3) Expressão do gene da PDE3 no oócito bovino, mediante RT - PCR em tempo real, em CCOs im aturos e maturados in vitro por 6 horas com NPPC exógeno, estradiol e vesículas extracelulares; 4) Mensuração da concentração de AMPc e GMPc, em oócitos e células... / In mice, recent studies have demonstrated that the natriuretic peptide precursor C (NPPC) and its type - 2 - receptor (NPR2) are essential for the maintenance of meiosis I arrest in the oocyte. Moreover, paracrine factors secreted by the oocyte such as bone mo rphogenetic protein 15 (BMP15) can modulate this arrest through the expression of the NPR2 gene in cumulus cells of mice. In a recent study in cattle, the bovine follicular fluid (bFF) added to the maturation medium was able to interfere with the oocyte nu clear maturation resulting in higher embryo yield in vitro . However, it is not known what factors present in bFF might be responsible for this effect and one candidate could be the presence of microvesicles in the bFF. Additionally, the estradiol hormone i s component of the bFF and was demonstrated to directly stimulate NPR2 expression. Therefore, the objectives of this work includes the investigation of the NPPC - NPR2 system in the bovine ovary and the assessment of the effects of exogenous NPPC, estradiol and extracellular vesicles on the expression of the PDE3 gene in bovine oocytes and the concentrations of cyclic - nucleotides in cumulus - oocyte complexes. We designed four experiments: 1) enzyme - linked immunosorbent assay (ELISA) for the presence and concen tration of the NPPC in follicular fluid, in the lysate of mural granulosa cells and in the extracellular vesicles, according to follicular diameter (3 to 6 mm, 6 to 8 mm, >8 mm); 2) Immunolocalization of NPR2 receptor in bovine antral follicles; 3) PDE3 ge ne expression in bovine oocyte by RT - PCR in real time, in immature COCs and in COCs in vitro matured for 6 h with exogenous NPPC, estradiol and extracellular vesicles; 4) Measurement of the concentration of cAMP and cGMP in oocytes and cumulus cells, respectively, either immature or matured in vitro for 6 h with exogenous NPPC or extracellular vesicles through specific...

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2007. / Submitted by Aline Jacob (alinesjacob@hotmail.com) on 2010-02-08T15:11:54Z No. of bitstreams: 1 2007_MarcosRollembergMollo.pdf: 283662 bytes, checksum: dcca5145710f6f1453651e222f89d7ee (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-02-09T00:13:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_MarcosRollembergMollo.pdf: 283662 bytes, checksum: dcca5145710f6f1453651e222f89d7ee (MD5) / Made available in DSpace on 2010-02-09T00:13:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_MarcosRollembergMollo.pdf: 283662 bytes, checksum: dcca5145710f6f1453651e222f89d7ee (MD5) Previous issue date: 2007-07-03 / Este trabalho avaliou o efeito da nutrição na função ovariana e produção de embriões em novilhas da raça Nelore. Novilhas púberes foram submetidas a alta (A, n=20) ou baixa (B, n=19) ingestão, recebendo alimentação à vontade (170%) ou 70% da dieta de manutenção, respectivamente. Foram realizados acompanhamento através de ultra-sonografia trans-retal e coletas de sangue para dosagens hormonais diariamente, durante um ciclo estral completo. Em seguida, as novilhas foram superovuladas e os embriões coletados e avaliados. Na análise estatística, utilizou-se o teste t de Student. As novilhas do grupo A apresentaram duração de estro mais curta e comportamento estral menos intenso. Apesar das novilhas do grupo A terem ovulado folículos maiores (14,0±0,2 vs 11,8±0,2 mm), os grupos não diferiram quanto ao pico de estradiol sérico. A taxa de crescimento do folículo ovulatório foi maior no grupo A, podendo estar associada às maiores concentrações séricas de insulina detectadas neste grupo. Não foi detectada diferença nas concentrações séricas de IGF-I total entre os grupos durante o período peri-ovulatório. O volume luteal máximo durante o ciclo estral também foi maior no grupo A, entretanto não houve diferença nas concentrações séricas de progesterona. Apesar das novilhas do grupo A terem apresentado concentrações séricas de insulina mais altas, a resposta superovulatória e o número de estruturas coletadas foram superiores no grupo B. Pelos resultados obtidos, concluiu-se que diferentes níveis de ingestão de matéria seca afetam consideravelmente a fisiologia reprodutiva de fêmeas bovinas, podendo refletir em alterações comportamentais, de ciclicidade e de fertilidade dos animais. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This study aimed to investigate the effect of nutrition on ovarian function and embryo production in Nelore heifers. Pubertal heifers were kept in a feedlot and fed high (H, n=20) or low (L, n=19) energy diets, receiving diet ad libitum (~170%) and 70% of a maintenance diet, respectively. Transrectal ultrasound examinations of ovaries and blood sample collections for hormone assays were performed daily during a complete estrous cycle. After that, heifers were superovulated and embryos were collected and evaluated. The Student t test was used for statistical analysis. Heifers from group H showed shorter estrus duration and less intense estrous behavior. Although group H heifers had ovulated greater follicles (14.0±0.2 vs. 11.8±0.2 mm), the groups did not differ in regard to the estradiol surge. Growth rate of the ovulatory follicle was greater in H heifers and that may have been associated with the greater serum insulin concentration observed in this group. There was no difference in serum concentrations of total IGF-I between groups during the periovulatory period. The maximum volume achieved by the corpus luteum during the cycle was also greater in H heifers, however there was no difference between groups in serum progesterone concentrations. Although heifers from group H had shown greater serum insulin concentrations, the superovulatory response and the number of recovered embryos/ova were superior in heifers from group L. Based on the results obtained, we can conclude that different levels of feed intake can affect the reproductive physiology of bovine females, causing alteration in behavior, estrous cycle patterns and fertility in the animals.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-26Bitstream added on 2014-06-13T18:48:59Z : No. of bitstreams: 1 marques_c_me_jabo.pdf: 2705491 bytes, checksum: 9eb6728095c91ad9d6421e78934e954a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi caracterizar o desenvolvimento embrionário e larval do Zungaro jahu, peixe nativo do Brasil, conhecido popularmente como jaú, pertencente à ordem Siluriforme e ameaçado de extinção. As coletas foram realizadas na Usina Hidrelétrica Engenheiro Souza Dias – Jupiá (CESP – Castilho,SP). As amostras foram coletadas em tempos pré-determinados da extrusão até à absorção total do vitelo, e destinadas ao processamento para análise em microscopia de luz, eletrônica de varredura e transmissão. O desenvolvimento embrionário do Z. jahu foi dividido em 7 estágios: zigoto, clivagem, mórula, blástula, gástrula, organogênese e eclosão. Durante o período larval observou-se o desenvolvimento dos principais órgãos, dentre eles: órgãos do sistema digestório, coração, arcos branquiais, sistema nervoso/sensorial, tireóide, pronefro e bexiga gasosa. Os ovos na extrusão apresentaram diâmetro médio de 1,38±0,06 mm, e as larvas eclodidas 3,79±0,11 mm. Os ovócitos e ovos, após a fertilização, apresentaram formato discóide, coloração amarela e uma única micrópila. Aos 10 min pós-fertilização (mpf) houve diferenciação dos pólos animal e vegetativo. A formação da célula-ovo ocorreu aos 15 mpf. Dos 20 aos 75 mpf ocorreram sucessivas clivagens até a fase de mórula observada entre 90 e 105 mpf. Em seguida identificaram-se as fases de blástula e gástrula, com 120 e 180 mpf, respectivamente. O final da fase de gástrula, 360 mpf, caracterizou-se pela formação do tampão vitelino. A partir disso, iniciou-se a diferenciação das regiões cefálica e caudal, o alongamento do embrião, culminando na eclosão de larvas transparentes com pontos de pigmentação após 780 mpf. A absorção total do vitelo foi observada com 60 horas pós-eclosão (hpe) a uma temperatura média de 28,75±0,59 °C.... / The aim of this study was to describe the early embrionary and larval development of Zungaro jahu, a Brazilian fish, commonly known as Jaú belonging to Siluriform Order and in danger of extinction. The collections were carried out at the Usina Hidrelétrica Engenheiro Souza Dias – Jupiá (CESP – Castilho/SP). The samples were collected in pre-established times at eggs extrusion until the yolk absorption and processed to analysis by light, scanning and transmission electron microscopy. Early embrionary development of Z. jahu was divided in seven stages: zygote, cleavage, morula, blastula, gastrula, organogenesis and hatching. During the larval period the main organs development was noted: digestive tract, heart, gills arches, nervous/sensorial systems, thyroid, kidney and swim bladder. The eggs dimensions in average diameters at extrusion were 1.38±0.06 mm and the larvae were 3.79±0.11 mm. The fertilized oocytes and eggs presented a discoid shape, yellowish colour and a single micropyle. At 10 minutes after fertilization (maf) there was the differentiation of animal and vegetative poles. The egg cell formation occurred at 15 maf. At 20 to 75 maf occurred successive cleavages until morula phase seen at 90 and 105 maf. Then blastula and the gastrula phases were identified at 120 and 180 maf, respectively. The end of gastrula phase at 360 maf was characterized by formation of the yolk plug. From this there was the differentiation of cephalic and caudal regions, embryo elongation, ending in the hatching of transparent larvae with pigmentation sites at 780 maf. The total yolk absorption was noted at 60 hours after hatching (hah) to an average temperature of 28.75±0.59 ºC. The newly hatched larvae presented a rudimentary digestive tract, developed eyes and first swimming movements. The mouth opening ...(Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-08-12T18:48:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-16. Added 1 bitstream(s) on 2016-08-12T18:51:12Z : No. of bitstreams: 1 000866510.pdf: 827590 bytes, checksum: fc70eac380732c705a4371c1c5a5773c (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente estudo avaliou a atividade enzimas gástrica (pepsina), intestinal (aminopeptidase e fosfatase alcalina) e pâncreas (tripsina, amilase, lipase, protease) no desenvolvimento embrionário e larval de tilápia do Nilo, Oreochromis niloticus obtido a partir de reprodutores alimentados com dietas contendo quatro níveis de proteína bruta. O experimento foi realizado no período de janeiro a junho/2014, utilizando 144 fêmeas e 48 machos (3: 1) distribuídas em 16 hapas (12 peixes/hapa). Foram utilizados quatro tratamentos, composto pelos seguintes níveis de proteína bruta (PB): 32, 38, 44 e 50%, com quatro repetições. Os ovos foram pesados (mg), quantificados, mantidos em incubadoras (2,0 L), e separadas de acordo com o tratamento. Vinte e quatro (24) amostras (300,0 mg) por tratamento e quatro (4) amostras por estágio de desenvolvimento embrionário e larval [clivagem S0-, S1- blastula, S2- gastrula, S3- eclosão, S4- sete dias após o nascimento e S5- 10 dias após o nascimento] foram recolhidos, mantidos em tubos criogénicos e colocado em azoto líquido (-196.0ºC) até ao momento em que as enzimas digestivas foram analisados. Não houve diferenças entre os valores (P> 0,05) de pepsina, aminopeptidase, tripsina e amilase. No entanto, observaram-se valores diferentes (P <0,05) para a fosfatase alcalina (7 dias pós-nascimento), da lipase (blastula) e protease (blastula e incubação) no que diz respeito aos quatro tratamentos. Os resultados mostraram que dietas com níveis de proteína bruta oferecida a reprodutores de tilápia do Nilo influenciaram a atividade de enzimas digestivas durante períodos embrionário e larval, enfatizando que os nutrientes ingeridos pela mãe foram transferidos para a prole. Assim, mais estudos sobre dietas de reprodutores devem ser conduzidos a fim de fornecer informações adicionais, não só no que diz respeito aos níveis de proteína, mas também de energia, vitaminas e minerais, bem como, a... / The present study assessed the activity of gastric (pepsin), intestinal (aminopeptidase and alkaline phosphatase) and pancreatic (trypsin, amylase, lipase, protease) enzymes on the embryonic and larval development of Nile tilapia, Oreochromis niloticus, obtained from broodstock fed diets with four levels of crude protein. The experiment was carried out from January to June/2014, using 144 females and 48 males (3:1) distributed in 16 hapas (12 fish/hapa). Four treatments were used, composed of the following levels of crude protein (CP): 32, 38, 44 and 50 %, with four replications. The eggs were weighed (mg), quantified, kept in hatcheries (2.0 L), and separated according to treatment. Twenty-four (24) samples (300.0 mg) per treatment and four (4) samples per stage of embryonic and larval development [S0- cleavage, S1- blastula, S2- gastrula, S3- hatching, S4- 7 days posthatch and S5- 10 days posthatch] were collected, kept in cryogenic tubes and placed in liquid nitrogen (-196.0ºC) until the moment the digestive enzymes were analyzed. There were no differences between the values (P>0.05) of pepsin, aminopeptidase, trypsin, and amylase. However, different values were observed (P<0.05) for alkaline phosphatase (7 days posthatch), lipase (blastula), and protease (blastula and hatching) with regard to the four treatments. The results showed that diets with levels of crude protein offered to Nile tilapia broodstock influenced the activity of digestive enzymes during embryonic and larval periods, emphasizing that the nutrients ingested by the broodfish were transferred to the progeny. Thus, more studies on diets of broodstock should be conducted in order to provide additional information, not only with regard to levels of protein, but also energy, vitamins and minerals, as well as the interaction between them, and the use of physiological biomarkers for a successful fish farming / FAPESP: 2013/22570-3

Orientador: Marcelo Fábio Gouveia Nogueira / Co-orientador: José Celso Rocha / Banca: Fernando Frei / Banca: Andrea Cristina Basso / Resumo: A classificação morfológica embrionária possui grande importância para inúmeras técnicas laboratoriais (desde pesquisas básicas às aplicadas na reprodução assistida). Entretanto, o método utilizado para realizar a classificação dos embriões em diferentes graus de qualidade sempre foi baseado na subjetividade do avaliador e, por mais que sejam estabelecidos padrões de graus de qualidade e descrições das características morfológicas que categorizam um embrião em cada grau, não há atualmente um método preciso que possa gerar resultados consistentes e confiáveis. Assim, nosso trabalho resultou no desenvolvimento de um software capaz de realizar a classificação da qualidade morfológica de blastocistos bovinos. Utilizamos como base de funcionamento técnicas de inteligência artificial (mais especificamente de Redes Neurais Artificiais e Algoritmos Genéticos). Resultados indicam uma taxa de acerto global de 79,2% na classificação de blastocistos bovinos em 3 graus de qualidade, sendo que para os blastocistos classificados como Excelentes ou Bons (Classe 1) a taxa de acerto é de 82,6%, para os blastocistos classificados como Regulares (Classe 2) é de 16,7% e para os blastocistos classificados como Pobres (Classe 3) a taxa de acerto é de 91,7% / Abstract: Embryonic morphological classification has great importance for numerous laboratory techniques (from basic to applied research in assisted reproduction). However, the method used to perform the classification of embryos in varying degrees of quality has always been based on the subjectivity of the evaluator. Although quality standards and descriptions of morphological characteristics that categorize an embryo in each grade are established, currently there is not an accurate method that can generate consistent and reliable results. Thus, our work resulted in the development of a software able to perform the classification of morphological quality of bovine blastocysts. Artificial Intelligence techniques (such as Artificial Neural Networks and Genetic Algorithms) were used in the development. Results indicate an overall accuracy of 79.2% in the classification of bovine blastocysts in 3 degrees of quality. For blastocysts classified as Excellent or Good (Class 1) the hit rate is 82.6%, for blastocysts classified as Regular (Class 2) is 16.7% and for blastocysts classified as poor (Class 3) the hit rate is 91.7% / Mestre

Orientador: Edmundo Medici Filho / Banca: Emiko Saito Arita / Banca: Luiz Cesar de Moraes / Resumo: A erupção dentária é um fator que ao longo de muitos anos mereceu pesquisas para o conhecimento de suas variações. Dentre as variações, a diferença de erupção entre os lados esquerdo e direito dos arcos superior e inferior, é a que menos foi analisada detalhadamente. O autor comparou a erupção alveolar dos dentes caninos, primeiros e segundos premolares, entre os lados esquerdo e direito dos arcos superior e inferior, na faixa etária de sete a 11 anos, nos sexos masculino e feminino, pelo método radiográfico. Analisando 450 radiografias panorâmicas do arquivo da Disciplina de Radiologia do Departamento de Diagnóstico e Cirurgia da Faculdade de Odontologia do Campus de São José dos Campos - UNESP, verificou que: existe precocidade de erupção alveolar nos indivíduos do sexo feminino; a seqüência de erupção alveolar para a maxila e para a mandíbula foi - primeiro premolar, segundo premolar e canino e não existe diferença estatisticamente significante na cronologia de erupção alveolar entre os lados esquerdo e direito da maxila e da mandíbula para os dentes estudados / Abstract: The tooth eruption have been studied for many years about the knowledge of its variations. From these variations the difference between the eruption of the superior and inferior archs, and also the right and left sides have been poorly analysed. The author compared the alveolar eruption of the permanents canines, first and second premolars between the right and left sides of the superior and inferior archs, from 7 and 11 years of age, in males and females, by radiographic method. By the Discipline of Radiology of the Diagnosis and surgery Departament of the School of Dentistry of São José dos Campos - UNESP, observed that: there is early eruption in female; the alveolar eruption sequence in maxillar and mandibular was: first premolar, second premolar e canino. There wasn't statiscally significant difference of the alveolar eruption between the right and left sides of maxillar and mandibular archs / Mestre

Orientadora: Isabel Cristina Cherici Camargo / Banca: Luiz Gustavo de Almeida Chuffa / Banca: Regildo Márcio Gonçalves da Silva / Resumo: A utilização de extratos de Cordia ecalyculata está crescendo devido ao seu potencial em inibir o apetite. Seus efeitos colaterais na reprodução são desconhecidos. Então, o estudo avaliou o potencial tóxico reprodutivo de diferentes doses do extrato de C. ecalyculata e m ratos adultos. Os animais (n= 12 /grupo) receberam água destilada (grupo Controle) ou o extrato hidroetanólico de C. ecalyculata em diferentes concentrações de 1,5 ml (20, 100 e 400 mg/kg de peso corpóreo). Os tratamentos foram administrados por via oral (gavage), única dose/dia, durante 60 dias consecutivos. Ao final do tratamento, a massa corpórea dos animais que receberam o extrato foi similar ao grupo controle, demonstrando a ineficácia do fitoterápico na redução do peso corporal. O peso dos testículos, vesícul as seminais e próstata nã o foi afetados pelos tratamentos (p>0 ,05), mas houve aumento significativo no peso dos epidídimos na dose de 400 mg/kg do extrato. Em todas as doses, os testículos e epidídimos apresentaram alterações histopatológicas, houve aumento significativo no percen tual de gametas anormais na cauda do epidídimo e a taxa de fertilidade dos animais foi reduzida (p<0,05) . Concluiu - se que o extrato de Cordia ecalyculata promoveu toxicidade reprodutiva, porém com ausência de efeito dose - dependente / Abstract: The use of extracts from Cordia ecalyculata is growing due to their potential to inhibit appetite. Its side effects on reproduction are unknown. Then , the study evaluated the reproductive toxic potential of different doses of the extract of C. ecalyculata in adult rats. The animals (n = 12/group) received distilled water (control group) and the hydroethano lic extract of C. ecalyculata in different doses (20, 100 and 400 mg / kg body weight). Treatments were administered orally (gavage), single dose/day for 60 consecutive days. At the end of treatment, the body weight of the animals that received the extract was similar to the control group, demonstrating the ineffectiveness of this herbal medicine in reducing body weight. The weight of the testes, seminal glands and prostate were no affected by treatments (p>0.05), but increased there was (p < 0.05) on the epididymis weight at a dose of 400 mg / kg of the extract. At all doses, the testes and epididymides showed histopathological changes, increased (p <0.05) the percentage of abnormal gametes in the epididymal tail and fertility of anim als was reduced (p<0.0 5). In conclusion that the extract of Cordia ecalyculata promoted re productive toxicity, but without dose - dependent effect / Mestre

Orientador: Elizabeth Romagosa / Banca: Maria Célia Portella / Banca: Jaqueline Dalbello Biller-Takahashi / Resumo: O presente estudo avaliou a atividade enzimas gástrica (pepsina), intestinal (aminopeptidase e fosfatase alcalina) e pâncreas (tripsina, amilase, lipase, protease) no desenvolvimento embrionário e larval de tilápia do Nilo, Oreochromis niloticus obtido a partir de reprodutores alimentados com dietas contendo quatro níveis de proteína bruta. O experimento foi realizado no período de janeiro a junho/2014, utilizando 144 fêmeas e 48 machos (3: 1) distribuídas em 16 hapas (12 peixes/hapa). Foram utilizados quatro tratamentos, composto pelos seguintes níveis de proteína bruta (PB): 32, 38, 44 e 50%, com quatro repetições. Os ovos foram pesados (mg), quantificados, mantidos em incubadoras (2,0 L), e separadas de acordo com o tratamento. Vinte e quatro (24) amostras (300,0 mg) por tratamento e quatro (4) amostras por estágio de desenvolvimento embrionário e larval [clivagem S0-, S1- blastula, S2- gastrula, S3- eclosão, S4- sete dias após o nascimento e S5- 10 dias após o nascimento] foram recolhidos, mantidos em tubos criogénicos e colocado em azoto líquido (-196.0ºC) até ao momento em que as enzimas digestivas foram analisados. Não houve diferenças entre os valores (P> 0,05) de pepsina, aminopeptidase, tripsina e amilase. No entanto, observaram-se valores diferentes (P <0,05) para a fosfatase alcalina (7 dias pós-nascimento), da lipase (blastula) e protease (blastula e incubação) no que diz respeito aos quatro tratamentos. Os resultados mostraram que dietas com níveis de proteína bruta oferecida a reprodutores de tilápia do Nilo influenciaram a atividade de enzimas digestivas durante períodos embrionário e larval, enfatizando que os nutrientes ingeridos pela mãe foram transferidos para a prole. Assim, mais estudos sobre dietas de reprodutores devem ser conduzidos a fim de fornecer informações adicionais, não só no que diz respeito aos níveis de proteína, mas também de energia, vitaminas e minerais, bem como, a... / Abstract: The present study assessed the activity of gastric (pepsin), intestinal (aminopeptidase and alkaline phosphatase) and pancreatic (trypsin, amylase, lipase, protease) enzymes on the embryonic and larval development of Nile tilapia, Oreochromis niloticus, obtained from broodstock fed diets with four levels of crude protein. The experiment was carried out from January to June/2014, using 144 females and 48 males (3:1) distributed in 16 hapas (12 fish/hapa). Four treatments were used, composed of the following levels of crude protein (CP): 32, 38, 44 and 50 %, with four replications. The eggs were weighed (mg), quantified, kept in hatcheries (2.0 L), and separated according to treatment. Twenty-four (24) samples (300.0 mg) per treatment and four (4) samples per stage of embryonic and larval development [S0- cleavage, S1- blastula, S2- gastrula, S3- hatching, S4- 7 days posthatch and S5- 10 days posthatch] were collected, kept in cryogenic tubes and placed in liquid nitrogen (-196.0ºC) until the moment the digestive enzymes were analyzed. There were no differences between the values (P>0.05) of pepsin, aminopeptidase, trypsin, and amylase. However, different values were observed (P<0.05) for alkaline phosphatase (7 days posthatch), lipase (blastula), and protease (blastula and hatching) with regard to the four treatments. The results showed that diets with levels of crude protein offered to Nile tilapia broodstock influenced the activity of digestive enzymes during embryonic and larval periods, emphasizing that the nutrients ingested by the broodfish were transferred to the progeny. Thus, more studies on diets of broodstock should be conducted in order to provide additional information, not only with regard to levels of protein, but also energy, vitamins and minerals, as well as the interaction between them, and the use of physiological biomarkers for a successful fish farming / Mestre

Resumo: Croton agrupa cerca de 1.200 espécies portadoras de flores bissexuais e representa um grupo complexo, sob o ponto de vista taxonômico e morfológico. Astraea, recentemente separada de Croton e com quem divide inúmeras características morfológicas, é um gênero pouco estudado. A natureza dos verticilos florais, especialmente nectários e estruturas filamentosas das flores pistiladas, é um assunto bastante controvertido, nos dois gêneros. Estudos com as flores de Croton mostram o desenvolvimento do óvulo e da semente e outros apenas descrevem a morfologia do grão de pólen maduro. Entretanto, para o gênero Astraea nada se conhece até o momento. Analisando o desenvolvimento, a vascularização e a morfologia de flores estaminadas e pistiladas, de Croton e Astraea, verificou-se que as estruturas filamentosas das flores pistiladas correspondem às pétalas presentes nas flores estaminadas, e que os nectários representam estames transformados; observou-se, inclusive, que flores pistiladas podem desenvolver estames em substituição aos nectários. Também foi possível apontar caracteres que apóiem a segregação de Astraea e Croton, embora os dois gêneros compartilhem inúmeras características morfológicas. O estudo do desenvolvimento da antera e óvulo de duas espécies de Astraea e de sete de Croton mostrou a ocorrência de cristais estilóides, no tapete, e de idioblastos portadores de drusa, no endotécio; mostrou também, a presença de óvulos com os dois tegumentos de origem epidérmica e a diferenciação de megásporo funcional em posição micropilar. Esses aspectos, descritos pela primeira vez para a família, precisam ser melhor investigados a fim de se determinar sua ocorrência e distribuição, dentro do grupo, e avaliar melhor seu potencial taxonômico. / Abstract: Croton comprises approximately 1,200 species with bisexual flowers and is a taxonomically and morphologically complex group. Astraea, which was recently separated from Croton and shares innumerous morphological characteristics, is still a poorly studied genus. The nature of the floral whorls, especially the nectaries and the filamentous structures of the pistillate flowers, is a controversial subject in both genera. Some studies with Croton flowers have examined the development of ovules and seeds, while others have only described the morphology of mature pollen grains. Very little is currently known about Astraea. Analyses of the development, vascularization, and morphology of the staminate and pistillate flowers of Croton and Astraea demonstrated that the filamentous structures of the pistillate flowers represent transformed petals, and that nectaries represent transformed stamens in pistillate flowers; stamens were occasionally observed in place of nectaries. Many characteristics were observed that support the segregation of Astraea from Croton, although the two genera do share numerous morphological features. An examination of the development of the anthers and ovules of two species of Astraea and seven species of Croton demonstrated the presence of styloid crystals in the tapetum as well as idioblasts with druses in the endothecia; ovules with two teguments of epidermal origin and the differentiation of a functional megaspore in a micropylar position were also observed. These aspects, described here for the first time for the family, need to be further investigated to determine their occurrence and distribution within the taxon, and to evaluate their taxonomic potential. / Orientador: Maria das Graças Sajo / Coorientador: Inês Cordeiro / Banca: Adelita Aparecida Sartori Paoli / Banca: Denise Maria Trombert Oliveira / Banca: Silvia Rodrigues Machado / Banca: Lygia Dolores Ribeiro de Santiago Fernandes / Doutor

No gineceu, ocorre o desenvolvimento de esporos e de gametófitos femininos no ovário, e as várias especializações do gineceu promovem sua interação com o gametófito masculino até a fecundação. Pouco se conhece sobre essas interações na porção ovariana do gineceu. Em Bromeliaceae, o detalhamento histológico do estigma e do estilete é inexistente. Para Billbergia, não existem dados embriológicos. Billbergia nutans (Bromeliaceae, Poales) é uma espécie importante como fonte de alimento para os polinizadores durante o inverno e apresenta ameaça de extinção em nível estadual. Este estudo visa ampliar o conhecimento sobre as modificações histológicas do gineceu em angiospermas, em preparação à polinização e fecundação; contribuir para o conhecimento da embriologia de Bromeliaceae; e verificar a presença de limitações ou vantagens reprodutivas durante o desenvolvimento embriológico de B. nutans. As análises foram executadas em Microscopia de Luz, em campo claro e epifluorescência, e em Microscopia Eletrônica de Varredura. Foram realizados testes histoquímicos e a marcação com anticorpos monoclonais para a detecção de compostos químicos. São registrados dados inéditos sobre a embriologia do gênero, a estrutura histológica do gineceu na família, a reconstrução tridimensional do gametófito feminino em monocotiledôneas e a imunolocalização de determinadas pectinas no ovário de angiospermas. A arquitetura do estigma espiral-conduplicado resulta de vários eventos ao longo do desenvolvimento. Os tricomas estigmáticos, o tecido transmissor e o obturador produzem secreção polissacarídica. Os tricomas estigmáticos armazenam sua secreção em bolsões pécticos no interior da parede periclinal externa. As paredes celulares labirínticas caracterizam as células do tecido transmissor e obturador de B. nutans como células de transferência, de composição pecto-celulósica. Há uma dinâmica de amido associada à secreção no gineceu, regulada pelo desenvolvimento. Os grãos de amido são considerados como fonte de moléculas para a produção da secreção, e os inúmeros campos primários de pontoação devem facilitar esse transporte. O obturador de Bromeliaceae é semelhante ao de espécies de Liliaceae e Asparagaceae. Os rudimentos seminais de Bromeliaceae são anátropos, bitegumentados e crassinucelados, com gametófito do tipo Polygonum. Muitos caracteres são sugeridos como úteis para a taxonomia da família. A morfologia do apêndice calazal pode ser um caráter inapropriado para aplicação taxonômica, devido à variabilidade encontrada em B. nutans. Quanto à evolução do rudimento seminal em Bromeliaceae, a subfamília que divergiu mais cedo mostra estados reduzidos de vários caracteres. Alguns caracteres parecem ser homoplásicos na família, podendo ser relevantes se aplicados em níveis taxonômicos inferiores. Em Poales, os tegumentos compostos por duas camadas celulares e o reduzido número de rudimentos seminais são, provavelmente, estados de caráter plesiomórficos. Não foram observadas limitações reprodutivas significativas durante o desenvolvimento do rudimento seminal de B. nutans. A modulação espacial encontrada entre arabinanos, galactanos e proteínas arabinogalactanos (AGPs) no ovário demarca a trajetória porogâmica do tubo polínico em direção ao gametófito feminino. A produção dessas moléculas é regulada pelo desenvolvimento. Possíveis funções das pectinas e AGPs nesses tecidos são discutidas, como a flexibilidade e expansibilidade da parede celular, sinalização e adesão celular, nutrição e atração do tubo polínico. A detecção química dessa trajetória tem sido observada em outras angiospermas, principalmente com relação às AGPs. Contudo, cada espécie possui um conjunto específico de moléculas, aparentemente não relacionado à posição filogenética. Este estudo mostra que o tubo polínico, possivelmente, aproxima-se do rudimento seminal por sinais direcionais sucessivos do gineceu. / In the gynoecium, the development of spores and female gametophytes occurs within the ovary, and the various specializations of the gynoecium promote its interaction with the male gametophyte until fertilization. Little is known about these interactions in the ovarian portion of the gynoecium. In Bromeliaceae, the histological detailing of the stigma and style is unknown. There are no embryological data for Billbergia. Billbergia nutans (Bromeliaceae, Poales) is an important species as a source of food for pollinators during winter and is under threat of extinction at the state level. This study aims to expand the knowledge about the histological changes of the gynoecium in preparation for pollination and fertilization in angiosperms; to contribute to knowledge of the embryology of Bromeliaceae; and to verify the presence of reproductive limitations or advantages in the embryological development of B. nutans. The analyses were performed with Light Microscopy, under bright field and epifluorescence, and in Scanning Electron Microscopy. Histochemical tests and labelling with monoclonal antibodies were performed for the detection of chemical components. Unpublished data are recorded on the embryology of the genus, the histological structure of the gynoecium in the family, the three-dimensional reconstruction of the female gametophyte in monocotyledons and the immunolocalization of certain pectins in the ovary of angiosperms. The architecture of the conduplicate-spiral stigma results from several events throughout the development. The stigmatic trichomes, the transmitting tissue and the obturator produce a polysaccharidic secretion. The stigmatic trichomes store the secretion in pectic pockets inside its outer periclinal wall. The labyrinthic cell walls are composed by cellulose and pectins and characterize the cells of the transmitting tissue and obturator of B. nutans as transfer cells. Starch dynamics associated with secretion are observed in the gynoecium, and are developmentally regulated. The starch grains are considered as a source of molecules for the production of secretion and many primary pit fields may facilitate such transport. The obturator of Bromeliaceae is similar to those of Liliaceae and Asparagaceae species. The ovules of Bromeliaceae are anatropous, bitegmic and crassinucellate, with a Polygonum-type gametophyte. Many characters are suggested as useful for the taxonomy of the family. The morphology of the chalazal appendage may not be an appropriate character for taxonomic use, due to the variability found in B. nutans. Regarding the evolution of the ovule in Bromeliaceae, the earliest-divergent subfamily shows a reduced state of several characters. Some characters appear homoplasious in the family and may be relevant when applied to lower taxonomic levels. Within Poales, the two-layered integuments and the small number of ovules are probably plesiomorphic character states. Reproductive limitations during ovule development of B. nutans were not found to be significant. The spatial modulation found between arabinan, galactan and arabinogalactan proteins (AGPs) in the ovary delineates the porogamic pollen tube pathway into the female gametophyte. The production of these molecules is developmentally regulated. Possible roles for pectins and AGPs in these tissues are discussed, such as the flexibility and expansibility of the cell wall, cell signaling, cell adhesion, nutrition and attraction of the pollen tube. The chemical detection of this pathway has been observed in other angiosperms, especially with respect to AGPs. However, each species has a specific set of molecules, apparently unrelated to the phylogenetic position. This study shows that the pollen tube possibly approaches the ovule by successive directional cues from the gynoecium.