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Elastografia hepática em pacientes com carcinoma hepatocelular em triagem para transplante de fígado / Liver elastography in patients with hepatocellular carcinoma in screening for liver transplantationNacif, Lucas Souto 15 December 2014 (has links)
INTRODUÇÃO: A cirrose é a oitava causa de mortalidade no mundo, e sua progressão e estadiamento são de extrema importância nos pacientes com doença terminal do fígado. A presença de cirrose é reconhecida como risco aumentado de carcinoma hepatocelular (CHC) e o seu aparecimento está diretamente relacionado ao grau de fibrose do fígado. Na última década, notou-se o desenvolvimento e aperfeiçoamento dos métodos de predição do grau de fibrose e cirrose, através de métodos não-invasivos, com o objetivo de substituir a biópsia hepática. A população em lista de espera para transplante de fígado apresenta graus diferentes de fibrose hepática, que pode não estar diretamente relacionada ao MELD. Além disso, esses pacientes apresentam CHC no momento da triagem para transplante de fígado. Não existe avaliação desta população por elastografia. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi avaliar os pacientes em triagem para transplante de fígado, com e sem carcinoma hepatocelular, pela elastografia hepática com Fibroscan® e ARFI. MÉTODO: Foram estudados 103 pacientes adultos do ambulatório de triagem da Disciplina de Transplante de Órgãos do Aparelho Digestivo HC/FMUSP, no período de outubro de 2012 à dezembro de 2013. A amostragem foi por conveniência e foram avaliados dados clínicos, epidemiográficos, laboratoriais, imagem, elastográficos e o desfecho. Análise de elastografia transitória (ET) foi feita pelo Fibroscan® TM (Echosens, França) e força impulso por radiação acústica (ARFI) (Siemens Acuson S2000, Alemanha) nos grupos com e sem CHC comprovados de acordo com orientação de diagnóstico pelas diretrizes européias (EASL) e americanas (AASLD). Para a análise estatística foi realizado o teste de Mann-Whitney, teste não paramétrico aplicado para duas amostras independentes; o teste de Fisher e o método ANOVA através do teste de Kruskal-Wallis ou teste de Tukey para comparações múltiplas. Foi realizado também a curva ROC para avaliação dos testes diagnósticos e ponto de corte. O valor considerado de p significativo foi <0,05. RESULTADOS: Entre os pacientes avaliados, a maioria foi de homens (68%), com idade média de 53 ± 11,5 anos. A etiologia mais comum foi o vírus da hepatite C (VHC) em 34,9%. A classificação pelo escore Child-Turcotte-Pugh (CTP) mostrou: pacientes classe A em 38,4%, classe B em 47,2% e classe C em 14,2%. O valor do MELD médio dos pacientes foi de 14,75 (± 6,45) e a mediana de 14 (variando, 6 - 32). Na população estudada de 103 pacientes, a ET (Fibroscan®) foi realizada com sucesso em 75 de 103 pacientes e ARFI em 78 de 78 pacientes. A etiologia VHC e elevados valores de alfa-feto proteína foram fatores de risco para a presença de CHC. Os valores de MELD mais elevados foram significativos nos pacientes que evoluíram a óbito. A curva ROC mostrou respectivamente sensibilidade e especificidade para a AFP de 50% e 86% (valor de corte 9,1); ET (valor de corte 9 kPa) 92% e 17%; e ARFI 21% e 92% (valor de corte 2,56 m/s). O valor médio da ET nos pacientes com CHC foi de 30,4 ± 21,0 kPa, do ARFI do parênquima hepático foi de 1,97 ± 0,64 e ARFI do nódulo hepático foi de 1,89 ± 0,74. CONCLUSÃO: Os pacientes em triagem para transplante de fígado com carcinoma hepatocelular apresentam valores elevados de elastografia tanto pelo Fibroscan® quanto pelo ARFI®. A elastografia apresenta-se como uma importante ferramenta não invasiva para o acompanhamento de cirróticos graves podendo ajudar no manejo do carcinoma hepatocelular / INTRODUCTION: Cirrhosis is the eighth leading cause of mortality worldwide and its progression and staging are extremely important in patients with end liver disease. The presence of cirrhosis is recognized as an increased risk of hepatocellular carcinoma (HCC) and its incidence is directly related to the degree of liver fibrosis. In the last decade, was noted the development and improvement of methods for predicting the degree of fibrosis and cirrhosis using non-invasive methods, aiming to replace the liver biopsy. The population on the liver transplant waiting list presents different degrees of liver fibrosis, which may not be directly related to MELD. In addition, these patients have HCC at the time of screening for liver transplantation. There is no evaluation of this population by elastography. OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate patients on screened to the list for liver transplantation, with and without hepatocellular carcinoma, by liver elastography with Fibroscan and ARFI. METHOD: Were studied 103 adult patients from the screening for liver transplantation waiting list on the Liver and Gastrointestinal Transplant Division HC/FMUSP from October 2012 to December 2013. Sampling for convenience and evaluation clinical data, epidemiological, laboratory, imaging, elastography findings and outcome. Analysis of transient elastography (TE) by Fibroscan TM (Echosens, France) and Acoustic Radiation Force Impulse (ARFI) by (Siemens Acuson S2000, Germany) in patients with and without HCC proven in accordance with guidelines of diagnosis EASL/AASLD. Fisher\'s ANOVA or Kruskal-Wallis tests Whitney-Mann Test were performed. Tukey and define cut-of for examinations with ROC curves. The p value considered was < 0.05. RESULTS: Among the patients, the majority were men (68%), mean age 53 ± 11.5 years. This is the most common cause of hepatitis C virus (HCV) 34.9%. The classification by Child-Turcotte-Pugh score (CTP) showed: class A patients in 38.4%, 47.2% in class B and class C in 14.2%. The average value of MELD patients was 14.75 (± 6.45) and a median of 14 (range, 6-32). In the study population of 103 patients, the ET (Fibroscan) was successfully performed in 75 of 103 patients and ARFI in 78 of 78 patients. The HCV etiology and high levels of alpha-fetoprotein were risk factors for the presence of HCC. MELD values were significant higher in patients who died. The ROC curve shown respectively sensitivity and specificity for AFP of 50% and 86% (cutoff 9.1); ET (9 cutoff kPa) 92% to 17%; and ARFI 21% and 92% (cut-off 2.56 m / s). The average value of ET in HCC patients was 30.4 ± 21.0 kPa, the ARFI parenchymal liver was 1.97 ± 0.64 and ARFI liver nodules was 1.89 ± 0.74. CONCLUSION: Patients in screening for liver transplantation with hepatocellular carcinoma have elevated values of both elastography by Fibroscan as the ARFI®. Elastography is presented as an important non-invasive tool for monitoring severe cirrhosis may help in management of hepatocellular carcinoma
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Elastografia hepática em pacientes com carcinoma hepatocelular em triagem para transplante de fígado / Liver elastography in patients with hepatocellular carcinoma in screening for liver transplantationLucas Souto Nacif 15 December 2014 (has links)
INTRODUÇÃO: A cirrose é a oitava causa de mortalidade no mundo, e sua progressão e estadiamento são de extrema importância nos pacientes com doença terminal do fígado. A presença de cirrose é reconhecida como risco aumentado de carcinoma hepatocelular (CHC) e o seu aparecimento está diretamente relacionado ao grau de fibrose do fígado. Na última década, notou-se o desenvolvimento e aperfeiçoamento dos métodos de predição do grau de fibrose e cirrose, através de métodos não-invasivos, com o objetivo de substituir a biópsia hepática. A população em lista de espera para transplante de fígado apresenta graus diferentes de fibrose hepática, que pode não estar diretamente relacionada ao MELD. Além disso, esses pacientes apresentam CHC no momento da triagem para transplante de fígado. Não existe avaliação desta população por elastografia. OBJETIVO: O objetivo deste trabalho foi avaliar os pacientes em triagem para transplante de fígado, com e sem carcinoma hepatocelular, pela elastografia hepática com Fibroscan® e ARFI. MÉTODO: Foram estudados 103 pacientes adultos do ambulatório de triagem da Disciplina de Transplante de Órgãos do Aparelho Digestivo HC/FMUSP, no período de outubro de 2012 à dezembro de 2013. A amostragem foi por conveniência e foram avaliados dados clínicos, epidemiográficos, laboratoriais, imagem, elastográficos e o desfecho. Análise de elastografia transitória (ET) foi feita pelo Fibroscan® TM (Echosens, França) e força impulso por radiação acústica (ARFI) (Siemens Acuson S2000, Alemanha) nos grupos com e sem CHC comprovados de acordo com orientação de diagnóstico pelas diretrizes européias (EASL) e americanas (AASLD). Para a análise estatística foi realizado o teste de Mann-Whitney, teste não paramétrico aplicado para duas amostras independentes; o teste de Fisher e o método ANOVA através do teste de Kruskal-Wallis ou teste de Tukey para comparações múltiplas. Foi realizado também a curva ROC para avaliação dos testes diagnósticos e ponto de corte. O valor considerado de p significativo foi <0,05. RESULTADOS: Entre os pacientes avaliados, a maioria foi de homens (68%), com idade média de 53 ± 11,5 anos. A etiologia mais comum foi o vírus da hepatite C (VHC) em 34,9%. A classificação pelo escore Child-Turcotte-Pugh (CTP) mostrou: pacientes classe A em 38,4%, classe B em 47,2% e classe C em 14,2%. O valor do MELD médio dos pacientes foi de 14,75 (± 6,45) e a mediana de 14 (variando, 6 - 32). Na população estudada de 103 pacientes, a ET (Fibroscan®) foi realizada com sucesso em 75 de 103 pacientes e ARFI em 78 de 78 pacientes. A etiologia VHC e elevados valores de alfa-feto proteína foram fatores de risco para a presença de CHC. Os valores de MELD mais elevados foram significativos nos pacientes que evoluíram a óbito. A curva ROC mostrou respectivamente sensibilidade e especificidade para a AFP de 50% e 86% (valor de corte 9,1); ET (valor de corte 9 kPa) 92% e 17%; e ARFI 21% e 92% (valor de corte 2,56 m/s). O valor médio da ET nos pacientes com CHC foi de 30,4 ± 21,0 kPa, do ARFI do parênquima hepático foi de 1,97 ± 0,64 e ARFI do nódulo hepático foi de 1,89 ± 0,74. CONCLUSÃO: Os pacientes em triagem para transplante de fígado com carcinoma hepatocelular apresentam valores elevados de elastografia tanto pelo Fibroscan® quanto pelo ARFI®. A elastografia apresenta-se como uma importante ferramenta não invasiva para o acompanhamento de cirróticos graves podendo ajudar no manejo do carcinoma hepatocelular / INTRODUCTION: Cirrhosis is the eighth leading cause of mortality worldwide and its progression and staging are extremely important in patients with end liver disease. The presence of cirrhosis is recognized as an increased risk of hepatocellular carcinoma (HCC) and its incidence is directly related to the degree of liver fibrosis. In the last decade, was noted the development and improvement of methods for predicting the degree of fibrosis and cirrhosis using non-invasive methods, aiming to replace the liver biopsy. The population on the liver transplant waiting list presents different degrees of liver fibrosis, which may not be directly related to MELD. In addition, these patients have HCC at the time of screening for liver transplantation. There is no evaluation of this population by elastography. OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate patients on screened to the list for liver transplantation, with and without hepatocellular carcinoma, by liver elastography with Fibroscan and ARFI. METHOD: Were studied 103 adult patients from the screening for liver transplantation waiting list on the Liver and Gastrointestinal Transplant Division HC/FMUSP from October 2012 to December 2013. Sampling for convenience and evaluation clinical data, epidemiological, laboratory, imaging, elastography findings and outcome. Analysis of transient elastography (TE) by Fibroscan TM (Echosens, France) and Acoustic Radiation Force Impulse (ARFI) by (Siemens Acuson S2000, Germany) in patients with and without HCC proven in accordance with guidelines of diagnosis EASL/AASLD. Fisher\'s ANOVA or Kruskal-Wallis tests Whitney-Mann Test were performed. Tukey and define cut-of for examinations with ROC curves. The p value considered was < 0.05. RESULTS: Among the patients, the majority were men (68%), mean age 53 ± 11.5 years. This is the most common cause of hepatitis C virus (HCV) 34.9%. The classification by Child-Turcotte-Pugh score (CTP) showed: class A patients in 38.4%, 47.2% in class B and class C in 14.2%. The average value of MELD patients was 14.75 (± 6.45) and a median of 14 (range, 6-32). In the study population of 103 patients, the ET (Fibroscan) was successfully performed in 75 of 103 patients and ARFI in 78 of 78 patients. The HCV etiology and high levels of alpha-fetoprotein were risk factors for the presence of HCC. MELD values were significant higher in patients who died. The ROC curve shown respectively sensitivity and specificity for AFP of 50% and 86% (cutoff 9.1); ET (9 cutoff kPa) 92% to 17%; and ARFI 21% and 92% (cut-off 2.56 m / s). The average value of ET in HCC patients was 30.4 ± 21.0 kPa, the ARFI parenchymal liver was 1.97 ± 0.64 and ARFI liver nodules was 1.89 ± 0.74. CONCLUSION: Patients in screening for liver transplantation with hepatocellular carcinoma have elevated values of both elastography by Fibroscan as the ARFI®. Elastography is presented as an important non-invasive tool for monitoring severe cirrhosis may help in management of hepatocellular carcinoma
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Avaliação da condição funcional, capacidade pulmonar, composição corporal e qualidade de vida dos pacientes candidatos a transplante de fígado = Evaluation of functional status, pulmonary capacity, body composition and quality of life of end-stage liver disease patients candidates for surgery / Evaluation of functional status, pulmonary capacity, body composition and quality of life of end-stage liver disease patients candidates for surgerySantos, Daniele Costa dos, 1981- 26 August 2018 (has links)
Orientadores: Raquel Silveira Bello Stucchi, Ilka de Fátima Santana Ferreira Boin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T08:25:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Santos_DanieleCostados_M.pdf: 1085243 bytes, checksum: f6d71bd9d53ba2ba29df2a153ac0ae0a (MD5)
Previous issue date: 2014 / Resumo: Introdução: Fatores como perda de massa e função muscular, alterações mecânicas da mobilidade da caixa torácica e diafragma secundárias a ascite e fraqueza muscular juntamente com desnutrição podem induzir à deficiência motora global e à inatividade física, interferindo negativamente nas atividades de vida diária e na qualidade de vida dos indivíduos que possuem doença hepática crônica em fase avançada. Objetivos: Avaliar a capacidade funcional, composição corporal, qualidade de vida e eletromiografia de pacientes hepatopatas crônicos candidatos a transplante de fígado; verificar se existe correlação entre as variáveis funcionais dos indivíduos testados por meio do Teste de Caminhada de 6 minutos (TC6) e as co-variáveis: prova de função pulmonar (PFP), qualidade de vida, eletromiografia de superfície dos músculos reto abdominal e diafragma e composição corporal total. Métodos: Este estudo foi realizado no Ambulatório de Transplante de Fígado da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) no período de agosto de 2012 a novembro de 2013. Foram incluídos 54 pacientes com doença hepática crônica que possuíam condições clínicas e funcionais de realizarem os testes a serem propostos. Foram submetidos às seguintes avaliações: anamnese, questionário de qualidade de vida "Short Form 36" (SF-36), eletromiografia de superfície (sEMG) dos músculos diafragma e reto abdominal, avaliação da composição corporal por meio da Bioimpedância Elétrica (BIA), TC6 e PFP. Resultados: Foram encontrados scores médios inferiores a 65 no questionário SF-36, bem como a média da distância percorrida no TC6 também foi abaixo dos valores preconizados para população saudável. A distância percorrida no TC6 teve correlação com qualidade de vida e com ângulo de fase da BIA. Foram encontradas também correlações das variáveis respiratórias do TC6 com índice de massa corpórea, PFP e qualidade de vida. Conclusão: Conclui-se que a capacidade funcional e qualidade de vida encontram-se diminuídos em pacientes hepatopatas crônicos em lista de transplante hepático. Adicionalmente, a capacidade funcional apresentou correlações com alterações na qualidade de vida, função pulmonar e composição corporal / Abstract: Introduction: Loss of muscle mass and function, mechanic alterations of chest mobility and the diaphragm due to ascitis and muscular weakness in combination with malnutrition can induce a global motor impairment and physical inactivity, adversely impairing the daily living activities and quality of life in end-stage liver disease patients, candidates for liver transplantation. Objectives: To evaluate functional status, pulmonary function, body composition and quality of life in end-stage liver disease patients, candidates for liver transplantation; to verify if there is a correlation between the functional variables of the individuals tested through the 6-minute walk test (6MWT) and covariables: pulmonary function test (PFP), quality of life, surface electromyography (sEMG) of the diaphragm and rectus abdominis muscles and body composition. Methods: This study was carried out at the Liver Transplant Unit of the State University of Campinas (UNICAMP) from August, 2012 until November, 2013. Fifty four patients with end-stage liver disease were included. The patients underwent the following evaluations: medical history, quality of life questionnaire "Short Form 36" (SF-36), surface electromyography (sEMG) of the diaphragm and rectus abdominis muscles, body composition assessment by Electrical Bioimpedance (BIA), 6MWT and PFP. Results: Scores below to 65 at SF-36 were founded and the distance walked on 6MWT was below to recommended for heathy population. The walked distance was correlated with quality of life and BIA (phase angle). Correlations were found between respiratory variables of 6MWT and body mass index, PFP and quality of life. Conclusion: Functional status and quality of life are impaired in patients with chronic liver disease and candidates for liver transplantation. Additionally, functional status is related to changes in quality of life, pulmonary capacity and body composition / Mestrado / Fisiopatologia Cirúrgica / Mestra em Ciências
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Short and Long-Term Outcomes Associated with Technical Variant Liver Grafts in Pediatric Liver Transplantation: In-Situ versus Ex-VivoDelman, Aaron M. 04 October 2021 (has links)
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Avaliação da condição periodontal de pacientes cirróticos candidatos ao transplante hepático / Periodontal status of cirrhotic liver transplant candidatesBruna Di Prófio Daibs 16 August 2017 (has links)
Pacientes cirróticos apresentam comprometimento da defesa imunológica sistêmica, o que pode aumentar o risco de infecções, como as doenças periodontais. O objetivo desta investigação foi comparar pacientes cirróticos candidatos ao transplante com controles sem hepatopatia, em relação à prevalência, extensão e severidade de doença periodontal. Foram submetidos a exame periodontal completo 50 pacientes cirróticos (grupo cirrose) e 50 sujeitos sem hepatopatia (grupo controle). Os grupos foram pareados segundo sexo, idade e tabagismo. Foi aplicado questionário estruturado para registro de dados demográficos, condição hepática, saúde sistêmica e história médica relacionada a desordem hepática. Foi realizado exame periodontal completo de seis sítios por dente em boca toda: recessão gengival (RG), profundidade clínica de sondagem (PCS), sangramento a sondagem (SS) e índice de placa visível (IPV). Perda clínica de inserção (PCI) foi calculada pela soma da RG e PCS mensuradas em cada sítio. Pacientes com cirrose apresentaram maior prevalência de periodontite do que os controles sadios (p<0.001). Além disso, apresentaram maior prevalência média de sítios com perda de inserção de 3mm ou mais (p=0,005) e 5mm ou mais (p=0.004), maior número médio de sítios com perda de inserção de 5mm ou mais (p=0,009), maior média de retração gengival (p<0.001) e maior número de dentes ausentes que o grupo controle (p=0,02). A análise de regressão logística múltipla mostrou que cirróticos tinham cinco vezes mais chances de apresentar periodontite do que controles sem cirrose. Além disso, diabéticos apresentaram quatro vezes maior chance de apresentar periodontite, enquanto mais de oito anos de estudo foi um fator de proteção para a doença. Foi concluído que pacientes cirróticos apresentaram maior prevalência, extensão e severidade de periodontite que indivíduos não hepatopatas. / Cirrhotic patients have compromised immune systemic defense, which may increase the risk of infections, such as periodontal diseases. The aim of this investigation was to compare cirrhotic liver transplant candidates with controls without liver disease, regarding prevalence, extent and severity of periodontal disease. Fifty cirrhotic patients (cirrhosis group) and 50 subjects without liver disease (control group) underwent complete periodontal examination. The groups were matched according to sex, age and smoking. A structured questionnaire was applied to record demographic data, hepatic condition, systemic health and medical history related to liver disorder. Whole-mouth complete periodontal examination of six sites per tooth was performed: gingival recession (GR), probing depth (PD), bleeding on probing (BOP) and visible plaque index (VPI). Attachment loss (AL) was calculated as the sum of GR and PD measured at each site. Patients with cirrhosis had higher prevalence of periodontitis than healthy controls (p <0.001). In addition, they had higher mean prevalence of sites with attachment loss of 3mm or more (p = 0.005) and 5mm or more (p = 0.004), more sites with attachment loss of 5mm or more (p = 0.009), higher mean gingival recession (p <0.001) and more missing teeth than control group (p = 0.02). Multiple logistic regression analysis showed that cirrhotics were 5 times more likely to present periodontitis than controls. In addition, diabetics were four times more likely to present periodontitis, while more than eight years of study was a protective factor for the disease. It was concluded that liver transplant candidates presented higher prevalence, extension and severity of periodontitis than non-cirrhotic patients.
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Avaliação da condição periodontal de pacientes cirróticos candidatos ao transplante hepático / Periodontal status of cirrhotic liver transplant candidatesDaibs, Bruna Di Prófio 16 August 2017 (has links)
Pacientes cirróticos apresentam comprometimento da defesa imunológica sistêmica, o que pode aumentar o risco de infecções, como as doenças periodontais. O objetivo desta investigação foi comparar pacientes cirróticos candidatos ao transplante com controles sem hepatopatia, em relação à prevalência, extensão e severidade de doença periodontal. Foram submetidos a exame periodontal completo 50 pacientes cirróticos (grupo cirrose) e 50 sujeitos sem hepatopatia (grupo controle). Os grupos foram pareados segundo sexo, idade e tabagismo. Foi aplicado questionário estruturado para registro de dados demográficos, condição hepática, saúde sistêmica e história médica relacionada a desordem hepática. Foi realizado exame periodontal completo de seis sítios por dente em boca toda: recessão gengival (RG), profundidade clínica de sondagem (PCS), sangramento a sondagem (SS) e índice de placa visível (IPV). Perda clínica de inserção (PCI) foi calculada pela soma da RG e PCS mensuradas em cada sítio. Pacientes com cirrose apresentaram maior prevalência de periodontite do que os controles sadios (p<0.001). Além disso, apresentaram maior prevalência média de sítios com perda de inserção de 3mm ou mais (p=0,005) e 5mm ou mais (p=0.004), maior número médio de sítios com perda de inserção de 5mm ou mais (p=0,009), maior média de retração gengival (p<0.001) e maior número de dentes ausentes que o grupo controle (p=0,02). A análise de regressão logística múltipla mostrou que cirróticos tinham cinco vezes mais chances de apresentar periodontite do que controles sem cirrose. Além disso, diabéticos apresentaram quatro vezes maior chance de apresentar periodontite, enquanto mais de oito anos de estudo foi um fator de proteção para a doença. Foi concluído que pacientes cirróticos apresentaram maior prevalência, extensão e severidade de periodontite que indivíduos não hepatopatas. / Cirrhotic patients have compromised immune systemic defense, which may increase the risk of infections, such as periodontal diseases. The aim of this investigation was to compare cirrhotic liver transplant candidates with controls without liver disease, regarding prevalence, extent and severity of periodontal disease. Fifty cirrhotic patients (cirrhosis group) and 50 subjects without liver disease (control group) underwent complete periodontal examination. The groups were matched according to sex, age and smoking. A structured questionnaire was applied to record demographic data, hepatic condition, systemic health and medical history related to liver disorder. Whole-mouth complete periodontal examination of six sites per tooth was performed: gingival recession (GR), probing depth (PD), bleeding on probing (BOP) and visible plaque index (VPI). Attachment loss (AL) was calculated as the sum of GR and PD measured at each site. Patients with cirrhosis had higher prevalence of periodontitis than healthy controls (p <0.001). In addition, they had higher mean prevalence of sites with attachment loss of 3mm or more (p = 0.005) and 5mm or more (p = 0.004), more sites with attachment loss of 5mm or more (p = 0.009), higher mean gingival recession (p <0.001) and more missing teeth than control group (p = 0.02). Multiple logistic regression analysis showed that cirrhotics were 5 times more likely to present periodontitis than controls. In addition, diabetics were four times more likely to present periodontitis, while more than eight years of study was a protective factor for the disease. It was concluded that liver transplant candidates presented higher prevalence, extension and severity of periodontitis than non-cirrhotic patients.
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Avaliação da capacidade de células mesenquimais obtidas de sangue de cordão umbilical, tecido adiposo e de medula óssea humanos na diferenciação em hepatócitos / Mesenchymal stem cells obtained from adipose tissue, umbilical cord blood and bone marrow : ability to differentiate into functional hepatocytesManzini, Bruna Maria, 1981- 24 August 2018 (has links)
Orientador: Ângela Cristina Malheiros Luzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T17:27:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2014 / Resumo: Introdução: Cirrose e hepatite fulminante ocasionam diminuição severa da função hepática. Recentes avanços em terapia celular podem ser uma alternativa de tratamento. Objetivo desse estudo é analisar se MSCs obtidas de tecido adiposo (TA), sangue de cordão umbilical (SCU) e medula óssea (MO) se diferenciam em hepatócitos funcionais. Materiais e Métodos TA foi obtido de lipoaspiração, SCU do Banco Público de Cordão Umbilical e MO da Unidade de Transplante de Medula Óssea. Termo de Consentimento Livre e Esclarecido foi obtido de todos. TA foi submetido à digestão por colagenase, SCU e MO ao gradiente de Ficoll. As células obtidas foram cultivadas (DMEM meio baixa glicose, SFB) por 3 dias. As células aderentes foram tratadas com tripsina e cultivadas com meio acima e na quarta passagem, caracterizadas por citometria de fluxo, microscopia confocal e diferenciadas para linhagem mesoderrmal para confirmação da diferenciação em MSCs. Atividade da enzima Telomerase (TEA) e cariótipo foram realizados. Diferenciação para hepatócitos: 1,0 x103 MSCs foram semeadas em DMEM, HGF, bFGF, nicotinamida (7 dias), quando receberam meio de maturação (oncostatina, dexametasona e ITS) por 36 dias. A hepatogênese foi analisada por morfologia, funcionalidade (detecção da reserva de glicogênio, marcação PAS), absorção de Indocianina Verde e expressão gênica (PCR-TR dos genes albumina (Alb), Alpha- fetoproteina (AFP), tirosina amino-transferase (TAT) e glutamina sintetase (GS) nos dias 9, 18, 25 e 36). Transplantes: MSCs indiferenciadas e diferenciadas em hepatócitos derivadas de TA e MO infundidas em animais, sacrificados no 7° e 15° dias após transplante, para confirmação e avaliação da regeneração hepática por células humanas através de histopatológico. Resultados: MSCs foram obtidas das três fontes. Análises de telomerase e de cariótipo não demonstraram potencial tumorigênico. MSCs adquiriram morfologia cuboide semelhantes a hepatócitos. Análise funcional efetiva, demonstrando armazenamento de glicogênio e absorção de ICG. Expressão de albumina subiu progressivamente (3.7 no dia 9; 10 no dia 25). AFP inicialmente alta (4.5 dia 9; 5.0 no dia 18), diminuindo depois do dia 18 (3.0 dia 25 e 1.5 dia 36). GS aumentou 3 vezes mais durante processo de diferenciação. TAT foi maior que 6.6 (dia 25 e 36). Anatomopatológico dos transplantes demonstrou que apesar de todas as células conseguirem reverter a lesão, MSCs indiferenciadas foram mais efetivas. Conclusões:. Embora MSCs se diferenciaram em hepatócitos funcionais, devido demora em obter MSCs-SC relativa à diferenciação e expansão, talvez medula óssea e tecido adiposo sejam mais efetivos no processo de regeneração hepática utilizando terapia celular com MSCs / Abstract: Introduction: Liver cirrhosis and fulminant hepatites greatly diminishes liver function. Cell therapy could be a new tool for treatment. This study aimed analyze whether mesenchymal stem cells (MSCs) obtained from adipose tissue (AT), umbilical cord blood (UBC) and bone marrow (BM) could differentiate into functional hepatocytes. Material and Method: Adipocyte tissue (AT) was obtained from lipoaspiration, umbilical cord blood from Umbilical Cord Blood Bank and bone marrow (BM) from BM Transplantation Unit donors. All patients and donors signed free informed consent. AT was submitted to collagenase digestion, UCB and BM to Ficoll gradient. Cells were cultured (DMEM low glucose medium, SFB) for 3 days. Detached adherent cells at passage four were characterized as MSCs by flow cytometry, mesodermal lineages differentiation. Telomerase enzyme activity, karyotype analyses discharged tumorigenicity. Hepatocyte differentiation protocol was: DMEM, HGF, bFGF, nicotinamide for 7 days; addition of maturation medium (oncostatin, dexamethasone and ITS) during 36 days. Hepatogenesis was analyzed by morphology and gene expression (RT-PCR) of albumin, AF, TAT and GS genes on day 9, 18, 25 and 36. Functionality confirmed by glycogen storage detection, indocyanine green( ICG) absorption and animal experiment performed with transplantation of undifferentiated AT and BM MSCs and hepatocyte-like cells derived from AT and BM-MSCs into BALB/NOD mice submitted to fulminant hepatitis by CCl4 intraperitoneal injection. Animals were sacrificed at 7 and 15 days post transplantation to perform anatomohistopathological analyses. Results: All MSCs acquired cuboid form as hepatocyte-like cells, stored glycogen and absorbed ICG demonstrating functionality. Albumin expression gradually increased (3.7 on day 9 , 10 on 25 ). AFP expression was high at the beginning (4.5 day 9 ; 5.0 on day 18 ) , decreasing after day 18 ( 3.0 and 1.5 on day 25 day 36 ). GS expression increased 3 times during the differentiation process. TAT expression was greater than 6.6 on day 25 and 36. Animal experiments showed that undifferentiated MSCs (U-MSCs) and derivate hepatocyte ¿like cells regenerate the injured liver, but in different degrees. U-MSCs promoted better liver regeneration. Conclusion: MSCs differentiated into funcional hepatocytes, U-MSCs promoted better regeneration at animal experiments, and might be a useful tool for regenerative medicine in liver injuries improving cell therapy in this field / Mestrado / Fisiopatologia Cirúrgica / Mestra em Ciências
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