Orientador: Milton Carlos Kuga / Resumo: O objetivo dos estudos são avaliar a capacidade de limpeza superfie dentinaria impregnada por AH Plus e MTA Fillapex, proporcionada pelo etanol a 95,0% (E) ou xilol (X) e seus efeitos sobre a interface adesiva e resistência de união do sistema adesivo etch-and-rinse, com condicionamento ácido (CA) imediato (I) ou após 7 dias (T). Publicação 1: Cinquenta espécimes de coroas de incisivos bovinos foram impregnados com o cimento e divididos em quatro grupos (n=10): G1(EICA), E e CA imediato; G2(XICA), X e CA imediato; G3(ETCA), E e CA após 7 dias e G4(XTCA), X e CA após 7 dias e G5(controle), CA imediato. Escores foram atribuídos, em relação à persistência de resíduos na dentina, por análises em MEV(500X). Cinquenta fragmentos foram preparados, restaurados com resina composta e obtidas imagens em microscopia confocal laser (1024X), para avaliar a formação de camada hibrida, mensurada no Image J. Cinquenta fragmentos foram igualmente preparados e submetidos ao teste de microcisalhamento para avaliar os efeitos sobre a resistência de união do sistema adesivo etch-and-rinse na dentina. Em relação à persistência de resíduos, G1 e G2 apresentaram maiores valores que G3 e G4 (P<0,05). Entre G1 e G2 ou G3 e G4 não houve diferença (P>0,05). Em relação à interface adesiva, a extensão da formação da camada hibrida foi G5>G4=G3=G2=G1. Em relação à resistência de união do sistema adesivo G5=G4 e G4=G2 (P=0,05), porém G5>G2 (P<0,05) e G1=G2=G3 (P>0,05). Publicação 2: Cinquenta espécimes de co... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim was to evaluate the cleaning protocol in dentin impregnated with different endodontic sealers using 95% ethanol (E) or xylol (X) and its effects on adhesive interface and on bond strength of etch-and-rinse adhesive system when the acid etching (AE) was immediately (I) carried out or 7 days delay (D).Publication 1:Fifty bovine incisors specimens were impregnated with epoxy resin-based sealer (AH Plus) sealer and divided into four groups (n = 10): G1 (EIAE); G2 (XIAE); G3 (EDAE); G4 (XDAE) and G5 (control, IAE). The persistence of residues was evaluated using scores by SEM (500X). Fifty fragments were prepared similarly as described before, restored with composite resin and subjected to laser confocal microscopy (1024X). The hybrid layer formation was measured using Image J program. Another fifty fragments were similarly prepared and submitted to microshear bond test to access the bond strength of etch-and-rinse adhesive system to dentin.Regarding the persistence of residues, G1 and G2 presented higher values than G3 and G4 (P<0.05). No statistical difference was found between G1 and G2 or G3 and G4 (P>0.05). Regarding the adhesive interface, the extend of hybrid layer formation G5>G4=G3=G2=G1.Regarding the bond strength of adhesive system: G5=G4 and G4=G2 (P=0.05), however G5>G2 (P<0.05) and G1=G2=G3 (P>0.05).Publication 2: Fifty bovine crown specimens were impregnated with mineral trioxide aggregate-based (MTA) sealer and divided into four groups (n = 10): G1 (EIAE); G2 (XIAE); G3 (EDAE); G4 (XDAE) and G5 (control, IAE). The residues persistence using scores by SEM (500x). Fifty fragments were prepared similarly as described before and subjected to laser confocal microscopy (1024X). The hybrid layer formation was measured using Image J program. Fifty fragments were similarly prepared and submitted to microshear bond test to access the bond strength of etch-and-rinse ...(Complete abstract electronic access below) / Doutor

Orientador: João Guilherme Padilha Filho / Banca: Marco Antonio Gioso / Banca: Moacir Santos de Lacerda / Banca: Antonio Carlos Alessi / Banca: Cintia Lúcia Maniscalco / Resumo: Objetivou-se avaliar a presença de microrganismos nas estruturas dentais com necrose pulpar induzida experimentalmente, testando a eficácia de materiais com relação à atividade antibacteriana e influência no reparo tecidual. Utilizaram-se quatro cães, totalizando 78 raízes, provenientes de pré-molares, divididas em grupos. O Grupo I foi obturado com guta percha e cimento à base de óxido de zinco e eugenol, o Grupo II, com hidróxido de cálcio com paramonoclorofenol canforado (PMCC), o Grupo III, com hidróxido de cálcio e o Grupo IV, não foram obturados. Todos tiveram controle clínico e radiográfico quinzenal e após 120 dias, foram extraídos em bloco para análises. Observou-se imagem radiográfica radioluscente ao redor das raízes, e após os tratamentos, notou-se diminuição no número de raízes afetadas. A histopatologia evidenciou infiltrado inflamatório, reabsorção cementária e óssea e tecido necrótico no delta apical, em diferentes proporções. A histomicrobiologia revelou presença de microrganismos nas estruturas estudadas, variando de acordo com o tratamento utilizado. Os resultados foram submetidos à análise estatística e não foram significantes entre si. A guta-percha com óxido de zinco e eugenol apresentou-se eficaz com relação à atividade antibacteriana. O hidróxido de cálcio sozinho não se mostrou eficaz, e associado ao PMCC, favoreceu o reparo tecidual. A utilização dessa associação como "curativo de demora", para posterior obturação definitiva com guta-percha e óxido de zinco e eugenol, talvez seja a melhor opção para se ter um bom efeito antibacteriano e um adequado processo de reparo tecidual. / Abstract: The purpose of this study was to evaluate the permanence of microorganisms in dental structures with pulpar necrosis experimentally induced. Four dogs were used, totalizing 78 roots, coming from premolars, divided in four groups. Group I received gutta-percha with zinc oxide cement and eugenol. Group II was treated with calcium hydroxide and camphorate paramonoclorofenol (PMCC). Group III was submitted to calcium hydroxide and group IV had no treatment. All teeth had radiographic and clinical control every 2 weeks and, after 120 days, were extracted in block for analysis. Pulpar exposition had radiographic radioluscent image around roots and, after treatments, there were less affected roots. Histopathological analysis evidenced inflammatory infiltrate, bone and cementary reabsorption and necrosis in apical delta, in different proportion. Histomicrobiological analysis showed presence of microorganisms in apical delta, dentinary tubules, cementary lacunas, radicular canal wall and interior, variating with the treatment used. Statistically the results had no statistic difference. Gutta-percha with zinc oxide and eugenol was effective against microorganisms. Calcium hydroxide alone was not effective in none parameter and, associated with PMCC, was less irritating for periapical tissues, facilitating the tissue repair. The use of this association as "delay bandage", for later and definitive obturation with gutta-percha with zinc oxide and eugenol maybe the best option for a good antibacterial effect and a appropriate tissue repair. / Doutor

Orientador: Renato de Toledo Leonardo / Banca: Idomeo Bonetti Filho / Banca: Celso Kenji Nishiyama / Resumo: As fissuras de lábio e/ou palato são más-formações congênitas que acarretam como conseqüência uma série de alterações: comprometimento da estética, fala e da posição dos dentes. O cirurgião dentista tem um papel fundamental no tratamento do paciente fissurado, pois a maioria deles necessita de uma reabilitação oral caracterizada pela atuação de especialistas de várias áreas como ortodontia, dentística, endodontia, periodontia e prótese. O objetivo deste estudo foi conhecer a demanda de atendimento endodôntico em pacientes fissurados de lábio e/ou palato cadastrados no Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais (HRAC). Buscamos estudar a associação entre o tipo de fissura oral e o comprometimento endodôntico, quantificar as causas do tratamento endodôntico, bem como o prognóstico desses dentes. Foram avaliados 671 prontuários de pacientes com idades entre 7 e 65 anos, que foram atendidos no Setor de Endodontia do HRAC, totalizando 1377 dentes que receberam tratamento endodôntico radical. Após a coleta de dados nos prontuários, os mesmos foram lançados em uma tabela no computador e submetidos à análise estatística. Os resultados demonstraram que a maior parte dos pacientes atendidos era do gênero masculino, proveniente da região sudeste do Brasil. O tipo de fissura mais comum foi a transforame incisivo. O tratamento endodôntico mais realizado foi a necropulpectomia, tendo como causas mais freqüentes a cárie dentária e a finalidade protética. Poucos foram os dentes extraídos pós tratamento endodôntico, sendo a cárie a causa mais comum para as exodontias. Concluímos, portanto, que a necessidade de tratamento endodôntico está diretamente relacionada à alta incidência de cárie nesses pacientes. A grande porcentagem de dentes mantidos demonstra que o prognóstico desses dentes é favorável... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: Cleft lip and/or palate are congenital malformations that bring about several alterations, such as impairment in esthetics, speech and tooth positioning. The dental professional plays a fundamental role in the treatment of patients with clefts, since they need an oral rehabilitation characterized by the collaborative work of specialists of several fields such as Orthodontics, Restorative Dentistry, Endodontics, Periodontics and Prosthodontics. The aim of this study was to investigate the demand of endodontic treatment in patients with cleft lip and/or palate attending the Hospital for Rehabilitation of Craniofacial Anomalies (HRAC). An attempt was made to assess the association between the type of cleft and the endodontic disturbances, quantify the causes of endodontic treatment, as well as the prognosis of these teeth. A total of 671 records of patients aged 7 to 65 years assisted at the Sector of Endodontics of the HRAC were evaluated, adding up to 1,377 teeth submitted to endodontic treatment. Data were collected from the records, entered in a data sheet in the computer and submitted to statistical analysis. The results demonstrated that most patients assisted were of male gender and from Southeast Brazil; the most common type of cleft was the complete cleft lip and palate; the endodontic treatment most frequently provided was non-vital pulp therapy. Few teeth were extracted after the endodontic treatment, and caries was the most common reason for such extractions. Therefore, it was concluded that the need of endodontic treatment is directly related to the high caries incidence among these patients. The large percentage of teeth maintained demonstrates that the prognosis of these teeth is favorable, and that both the endodontic planning and the collaborative planning have been effective. / Mestre

Orientador: Elisa Maria Aparecida Giro / Banca: Carlos Alberto de Souza Costa / Banca: João Eduardo Gomes Filho / Resumo: Para que um material seja indicado como retrobturador, é desejável que apresente várias propriedades, entre elas, intensa atividade antibacteriana e aceitável biocompatibilidade. O presente trabalho teve como objetivo avaliar, in vitro, o efeito antibacteriano e citotóxico do Agregado de Trióxido Mineral (MTA-Branco, Angelus® Indústria de Produtos Odontológicos Ltda., Londrina, PR, Brasil), associado à solução de clorexidina (CHX) em diferentes concentrações. Para a análise da atividade antibacteriana foi empregado o método de difusão em ágar Müller-Hinton e foram utilizados os microrganismos Staphylococcus aureus (ATCC - 25923), Pseudomonas aeruginosa (ATCC - 27853), Escherichia coli (ATCC - 25922) e Enterococcus faecalis (ATCC - 29262). Em placas de Petri contendo a suspensão bacteriana com meio de cultura, foram preparados poços com 4 mm de diâmetro e 5 mm de profundidade, os quais foram preenchidos com o cimento MTA preparado com água destilada estéril (G1-controle) ou com solução de CHX nas concentrações de 0,06% (G2), 0,12% (G3), 0,2% (G4) e 1% (G5). As placas foram incubadas em condições de aerobiose a 37ºC por 24 horas e os halos de inibição do crescimento bacteriano foram medidos em milímetros. Para avaliar a citotoxicidade do MTA associado às diferentes concentrações de CHX, o metabolismo e a morfologia celular foram avaliados por meio do teste do MTT e da análise da microscopia eletrônica de varredura, respectivamente. Corpos de prova de 4 mm de diâmetro e 2 mm de espessura foram preparados com as associações de materiais e imersos em 1,1 mL de meio de cultura (DMEM) por 24 horas ou por 7 dias para obtenção dos extratos. DMEM completo (grupo controle - G6) e os extratos de cada grupo foram aplicados sobre cultura de fibroblastos do ligamento periodontal de camundongos, os quais foram incubados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: An ideal root-end filling material should present several properties, including antibacterial activity and biocompatibility. The aim of this in vitro study was to investigate the antibacterial and cytotoxic effects of Mineral Trioxide Aggregate (MTA-White, Angelus® Indústria de Produtos Odontológicos Ltda., Londrina, PR, Brasil) mixed with different concentrations of chlorhexidine (CHX). For antibacterial activity analysis diffusion method on Müller-Hinton agar was employed. The bacterial strains used were Staphylococcus aureus (ATCC - 25923), Pseudomonas aeruginosa (ATCC - 27853), Escherichia coli (ATCC - 25922) e Enterococcus faecalis (ATCC - 29262). In Petri plates containing culture medium with bacterial suspension, wells were made measuring 4 mm in diameter and 5 mm in depth. The wells were completely filled with MTA mixed with sterile distilled water (G1) or with different concentrations of CHX: 0.06 % (G2), 0.12% (G3), 0.2% (G4) and 1% (G5). The plates were incubated in aerobic conditions at 37ºC for 24 hours, and then the diameters of the zones of bacterial inhibition were measured. To evaluate the cytotoxicity of the MTA mixed with different concentrations of CHX, the cell metabolism and cells morphology were evaluated by the MTT assay and scanning electron microscopy, respectively. Round-shaped samples measuring 4 mm in diameter and 2 mm in thickness were prepared with the association of materials and immersed in 1.1 mL of culture medium (DMEM) and incubated for 24 hours or 7 days. The extracts from every sample and pure DMEM (control group - G6) were applied on mouse periodontal ligament fibroblast cells culture and incubated at 37ºC with 5% CO2 and 95% air for 24 hours. The addition of CHX 1% to MTA increased the antibacterial activity of the cement against S. aureus (p <0.05). There was no statistically significant difference... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Paulo Sérgio Cerri / Banca: Mário Tanomaru Filho / Banca: Victor E. Arana Chávez / Resumo: O sucesso do tratamento de dentes com perfurações de furca está diretamente relacionado ao tipo de material utilizado no preenchimento destas perfurações. Um material selador ideal deve possuir boas propriedades físicas, químicas e biológicas, sendo, o Mineral Trióxido Agregado (MTA) um dos materiais indicados. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a resposta biológica de três materiais seladores: MTA-Angelus branco® (MTA), Endo-C.P.M.-Sealer® (CPM) e cimento de óxido de zinco e eugenol (OZE). Para isso, foram utilizados os primeiros molares superiores de 60 ratos; o primeiro molar superior do lado esquerdo hígido foi utilizado como controle e o do lado direito foi realizada a perfuração no assoalho da câmara pulpar com uma fresa nº ¼. Os materiais foram manipulados e inseridos na perfuração e a cavidade de acesso foi selada com ionômero de vidro. Decorrido os períodos de 07, 15, 30 e 60 dias, os animais foram sacrificados e os fragmentos das maxilas removidos e fixados em formaldeído. Após a descalcificação em EDTA, os fragmentos de maxila foram desidratados, diafanizados e incluídos em parafina. Os cortes foram corados com hematoxilina & eosina (H&E), tricrômico de Masson ou submetidos ao método do TRAP ("Tartrate Resistant Acid Phosphatase") para realização das análises morfológica e morfométrica. A análise morfométrica foi realizada sob três parâmetros: espessura do ligamento periodontal (LP), número de células inflamatórias/mm2 (CI) e número de osteoclastos TRAP-positivos. Os resultados morfométricos revelaram aumento significante (p_0,05) no espaço do LP,em todos os períodos, em relação ao controle. Entretanto, aos 60 dias, este espaço foi menor em todos os grupos experimentais; o OZE foi o que provocou maior espessamento do LP, não havendo diferenças significantes... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The therapy success in the treatment of root perforations depends on the material used to fill them. The best sealing material should present good physical, chemical and biological properties. More recently, the mineral trioxide aggregate (MTA) has been indicated for sealing of root perforations. Thus, the aim of the present study was to evaluate the biological response of three sealing materials: White MTA-Angelus (MTA), Endo- C.P.M.-Sealer (CPM) and zinc-oxide and eugenol cement (OZE). Sixty adult rats weighing 250g were divided into three groups: MTA, CPM and OZE. Furcal perforations were performed in maxillary first molars with a round bur no. ¼; the contra-lateral maxillary first molars - without perforations - were used as control. The perforations were carried out and the materials were placed into these defects; access cavities were sealed with glass ionomer. After 07, 15, 30 and 60 days, the animals were killed, and fragments of maxilla containing first molars were removed and immediately immersed in 4% formaldehyde. After decalcification in EDTA, the specimens were processed and embedded in paraffin. Sections were stained with hematoxylin-eosin, Masson's trichrome and submitted to TRAP (Tartrate Resistant Acid Phosphatase) reaction. The morphometric analysis, in the furcation region of the periodontal ligament, was performed considering three parameters: thickness of periodontal ligament (PL), number of inflammatory cells (IC) and number of TRAP-positive osteoclasts in the alveolar bone surface. The experimental groups showed, in all periods, significant increase (p_0.05) in the PL thickness in comparison to control group; this thickness was more accentuated in the OZE group. The periodontal space in the CPM group was less thick in all experimental periods in comparison to MTA and OZE groups, except in the period of 60 days; in this period, statistical differences in the periodontal space were not detected between CPM and MTA groups. / Mestre

Orientador: Carmelinda Schmidt Unterkircher / Banca: Caio Cezar Randi Ferraz / Banca: Marcia Carneiro Valera Garakis / Resumo: A parede celular das bactérias Gram-negativas é constituída principalmente por endotoxinas, que são complexos de lipopolissacarídeos com potente ação citotóxica, liberadas durante a duplicação ou morte celular destas bactérias. Assim, mesmo após o preparo biomecânico do canal, a endotoxina pode permanecer e contribuir para a manutenção da lesão periapical, impedindo o sucesso do tratamento endodôntico. Com isso, a proposta desta pesquisa foi avaliar a efetividade de curativos intracanal na eliminação das endotoxinas presentes nos canais radiculares. Para tanto, foram utilizados 75 dentes humanos unirradiculados, que tiveram suas coroas seccionadas e o ápice cortado em 3mm, padronizando o tamanho dos espécimes em 14mm. Os dentes foram preparados biomecanicamente, seus ápices radiculares vedados com resina fotopolimerizável e as raízes impermeabillzadas externamente com um adesivo epóxi (Araldite). A seguir, os espécimes foram esterilizados e foi inoculada, no interior de sessenta canais radiculares, uma solução contendo endotoxina de Escherichia coli. Os dentes foram então divididos em 5 grupos experimentais, com 15 dentes cada. O grupo 1 recebeu como medicamento intracanal a pasta de hidróxido de cálcio, o grupo 2 recebeu uma solução contendo Polimixina B pura, o grupo 3 recebeu uma solução contendo Polimixina B associada ao sulfato de neomicina e hidrocortisona, o grupo 4 (controle positivo) não recebeu nenhum medicamento e no grupo 5 (controle negativo) não foi inoculada endotoxina. Os dentes foram mantidos em estufa a uma temperatura de 37±1°C e umidade relativa 100% durante 7 dias. Após este período, a neutralização da endotoxina foi verificada utilizando-se o método do lisado de amebócito de Limulus (Sigma) e a produção de anticorpos em cultura de linfócitos B. Os resultados obtidos com o lisado de Limulus foram submetidos à análise estatística usando o teste de... / Abstract: The cell walls of Gram-negatives bacteria contain a lipopolysaccharide complex, also called endotoxin, which may be released into the environment as blebs during bacterial cell growth or as large pieces of membrane upon cell death. Endotoxins are potent agents capable of initiating various biological responses, which include initiation of osteoclastic activity and subsequent bane resorption. The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of intracanal medicaments in the elimination of the endotoxins in the root canal. Seventy-fivefreshly extracted, single-rooted, straight human anterior teeth were used in the study. The crowns were removed and the apex cut in 3mm, standardizing the size of the specimens in 14mm. The root canals of the teeth were instrumented, and the roots apex hindered with light-cure resin. The specimens were sterilized and it was inoculated endotoxin of Escherichia coli inside sixty root canals. The teeth were divided in 5 experimental groups (15 teeth). The group 1 received as intracanal medicament the paste of calcium hydroxide, the group 2 received a solution contends Polymyxin B pure, the group 3 received a solution contends Polymyxin 8, neomycin sulfate and hydrocortisone, the group 4 (control positive) didn't receive any medicament and in the group 5 (controls negative) the endotoxin was not inoculated. The teeth were maintained in stove to a temperature of 37±1ºC and relative humidity 100% for 7 days. Alter this period, the neutralization of the endotoxin was verified being used Limulus lisate and the production of antibodies in lymphocyte B culture. The results obtained with the Limulus lisate were submitted to the statistical analysis using the test of MannWhitney and was verified that the treatments with the calcium hydroxide and with the Polymyxin B pure went effective in to neutralization of the endotoxin in the root canals. The results obtained in the lymphocyte... / Mestre

Orientador: Lizeti Toledo de Oliveira Ramalho / Banca: Fábio Luiz Camargo Villela Berbert / Banca: Welingtom Dinelli / Banca: Manoel Damião de Souza Neto / Banca: Antônio Miranda da Cruz Filho / Resumo: O presente estudo avaliou o efeito do laser de baixa intensidade diodo semicondutor de arseneto de gálio e alumínio em exposições pulpares induzidas e nos tecidos apicais e periapicais após tratamento endodôntico em dentes de macacos. Nas exposições pulpares, foi avaliado efeito do laser infra-vermelho associado ao hidróxido de cálcio, variando o tempo de aplicação, onde utilizou-se quatro macacos, totalizando 24 dentes, distribuídos em quatro grupos experimentais: Grupo I: Laser 2,5 segundos (dentes incisivos), Grupo II: Laser 40 segundos (dentes incisivos), Grupo III: Laser 40 segundos (dentes prémolares) e Grupo IV: Controle sem Laser (dentes pré-molares), por um período de 55 dias. Quanto ao efeito do laser sobre a agressividade tecidual do cimento endodôntico óxido de zinco e eugenol (OZE), após tratamento endodôntico nos tecidos apicais e periapicais, foi comparando o laser vermelho com o infravermelho, utilizando quatro macacos, totalizando 24 dentes, distribuídos em três grupos experimentais: Grupo I (Laser Vermelho), Grupo II (laser Infra-Vermelho) e Grupo III (Controle: Sem Laser), por um período de 22 dias. Decorrido os períodos experimentais de cada estudo, os animais foram mortos, os dentes ou peças removidas e preparadas para análise histológica. De acordo com a proposta e as condições específicas deste trabalho, os resultados nos permitem concluir que nas exposições pulpares, a irradiação com laser infra-vermelho (40 segundos) diminuiu a reação inflamatória e induziu a organização tecidual, bem como na formação da barreira mineralizada, apresentando diferenças estatísticas significantes entre os grupos (p<0,05), tendo como melhor resultado a irradiação com laser infra-vermelho (40 segundos), já nos tecidos apicais e periapicais a irradiação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study evaluated the effect of the laser of low intensity diode semiconductor of gallium aluminum arsenide in exposed pulp induced in apical and periapical tissues after endodontic treatment in teeth of monkeys. In the exposed pulp, the effect of the laser infra-red associated to the hydroxide of calcium was evaluated varying the time of application, being used 04 monkeys, totaling 24 teeth, distributed in four experimental groups: Group I: Laser 2,5 seconds (incisive teeth), Group II: Laser 40 seconds (incisive teeth), Group III: Laser 40 seconds (premolar teeth) and Group IV: Control without Laser (premolar teeth), for a period of 55 days. As for the effect of the laser on the tissue aggressiveness of the endodontic zinco oxide and eugenol (OZE) sealer, after endodontic treatment o in the apical and Periapical tissues, the red laser was compared with the laser infra-red, using 04 monkeys, totaling 24 teeth, distributed in 03 experimental groups: Group I (Red Laser), Group II (Infra-red laser) and Group III (it Controls: Without Laser), for a period of 22 days. After the experimental periods of each study, the animals were killed, the teeth or pieces were removed and prepared for histological analysis. In agreement with the proposal and the specific conditions of this study work, the results allow to conclude us that in exposed pulp infra-red laser irradiation (40 seconds.) reduced the inflammatory reaction and induced the tissue organization, as well as the mineralized barrier formation and in apical and periapical tissues infra-red laser irradiation stimulated the cells of the periodontal tissue inducing periapical repair. / Doutor

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / O objetivo principal deste estudo foi investigar a interação de 24 cepas de E. faecalis isoladas de infecções endodônticas primárias às proteínas de matriz dentinária, como também a moléculas de matriz presentes em lesões de endocardites. A análise desta interação foi feita através de técnica enzimática, com confirmação pela técnica de fluorescência. Além disto, foi realizada a confirmação do isolamento da espécie E. faecalis, através da técnica de PCR para o gene 16SrRNA e a análise da presença de genes de virulência da referida espécie microbiana para aderência às supostas proteínas de matriz incluindo às de ligação ao colágeno (ace, gelE, esp, agg e efaA). O maior padrão de interação das cepas ocorreu com a fibronectina (83,4%), seguido pelo fibrinogênio (62,5%) e colágeno humano tipo I (52%). Curiosamente, a aderência observada para o colágeno do tipo I, foi de pequena magnitude, quando comparado com a amostra padrão da ATCC 29212. As cepas ATCC 29212, A1, A43 e A68 interagiram com todas as proteínas de matriz utilizadas neste estudo. Um percentual expressivo das cepas testadas apresentou amplificação para efaA (86,9%) e para ace (73,9%). Paralelamente, todas as cepas apresentaram amplificação para gelE e foram negativas para os genes agg e esp. Adicionalmente, não houve correlação entre a detecção dos genes de virulência e a interação às proteínas de matriz, evidenciando que, mesmo com a detecção dos genes nas amostras, se faz necessário avaliar a expressão gênica por qPCR. / The main objective of this study was to investigate the interaction of 24 E. faecalis strains isolated from primary endodontic infections with dentin matrix proteins, as well as to the matrix molecules present in endocarditis lesions. The analysis of this interaction was made by enzyme assay, with confirmation by the fluorescence technique. In addition, confirmation of the isolation of the species E. faecalis was performed by PCR for 16S rRNA gene and the analysis of the presence of virulence genes for matrix proteins including type I collagen (ace, gelE, esp , agg and efA). The strains interacted mostly with fibronectin (83.4%), followed by fibrinogen (62.5%) and human collagen type I (52%). Interestingly, the adhesion to type I collagen occurred in small magnitude, when compared with the E. faecalis type strain ATCC 29212. The strains ATCC 29212, A1, A43 and A68 interacted with all matrix proteins investigated in this study. A significant percentage of the tested strains showed amplification for efaA (86.9%) and ace (73.9%). In parallel, all strains showed amplification for gelE and were negative for the genes esp and agg. Additionally, there was no correlation between the detection of virulence genes and the interaction with matrix proteins, showing that even with the detection of genes in a particular strain, it is necessary to evaluate the gene expression by qPCR.

Este estudo teve como objetivo avaliar, em microscopia confocal à laser (CLSM), a ação antimicrobiana do Neo MTA Plus, do Biodentine e do MTA Angelus, utilizando um modelo de biofilme multi-espécies microcosmo, e descrever a morfologia dos microrganismos encontrados no biofilme, através da análise em microscópio eletrônico de varredura (MEV). Cinquenta e seis blocos de dentina, confeccionados a partir de raízes de dentes humanos, foram cortados em dimensões de 5 x 4 x 4 mm, limpos e esterilizados. Dois blocos foram utilizados para o controle do processo de esterilização. Os demais 54 foram fixados em placas de Hawley confeccionadas para 6 voluntários. Cada voluntário utilizou uma placa por 72 horas. Após esse período, os blocos foram mantidos em poços de cultura celular, contendo BHI, em estufa à 37ºC, por um período de 21 dias. Ao final do processo de maturação do biofilme, as amostras foram divididas aleatoriamente em 5 grupos, conforme os cimentos a serem testados e o método de análise: Neo MTA Plus (n=12), Biodentine (n=12), MTA Angelus (n=12), controle negativo (n=12) e grupo para análise em MEV (n=6). A seguir, os cimentos foram colocados em contato com o biofilme dos blocos dos grupos-teste e os conjuntos (bloco + cimento) ou os blocos do grupo controle e para análise em MEV foram recolocados em poços de cultura contendo BHI, onde permaneceram por 7 dias à 37ºC. A análise em CLSM foi realizada nos blocos de dentina e nos cimentos, separadamente. A analise em MEV foi realizada nas seis amostras do grupo correspondente. Todos os grupos apresentaram mais de 50% de bactérias viáveis. O Neo MTA Plus foi o único material a apresentar diferença significativa quando comparado ao grupo controle negativo (P=.0379). A análise em MEV mostrou um biofilme composto por bactérias de forma circular e de bastonetes, circundadas por matriz extra-celular. Em conclusão, todos os grupos apresentaram bactérias viáveis e o Neo MTA Plus teve a maior ação antimicrobiana. / This study aimed to assess, by confocal laser scanning microscopy (CLSM), the antimicrobial effect of Neo MTA Plus, Biodentine and MTA Angelus, using a microcosmo biofilm model, and to describe the microrganisms morphology, by SEM. Fifty-six dentin blocks were made from human teeth roots, cut in a size 5 x 4 x 4 mm, cleaned and sterelized. Two blocks were used to sterelization control. The others 54 blocks were fixed in Hawley retainers made for 6 volunteers that used it for 72h. After this period, they were placed in wells with BHI for 21 days, at 37ºC. At the end of the biofilm growth, the samples were randomly divided in 5 groups: Neo MTA Plus (n=12), Biodentine (n=12), MTA Angelus (n=12), negative control (n=12), and SEM analysis (n=6). The cements were placed in contact with the blocks of the tested groups. All samples were replaced in wells with BHI by 7 days at 37ºC. CLSM analysis evaluated the dentin blocks and cements isolated. SEM observation were performed in the six samples of the respective group. All groups presented a level of viable bacteria higher than 50%. Neo MTA Plus was the only one that showed significant difference from the negative control group (P=.0379). SEM analysis showed a biofilm composed of spherical and rod-shaped bacteria surrounded by extracellular matrix. All groups presented viable bacteria and Neo MTA Plus had the highest antimicrobial effect.

Introdução: Retratamentos endodônticos apresentam maior complexidade técnica e piores prognósticos quando comparados ao tratamento endodôntico inicial. Nesse contexto, uma investigação mais detalhada em relação aos fatores que afetam a exiquibilidade de se obter qualidade técnica satisfatória e reparo periapical é necessária. Técnicas empregadas para mineração de dados são pouco exploradas na área da Odontologia, ainda que apresentem potencial em contribuir com a descoberta do conhecimento. No presente estudo, padrões e fatores de risco relacionados à qualidade técnica e ao reparo periapical de retratamentos endodônticos foram investigados. Árvores de decisão foram geradas, sendo essa técnica complementada pela análise estatística convencional. Metodologia: Este estudo observacional incluiu 321 indivíduos com indicação de retratamento endodôntico atendidos por alunos de especialização em Endodontia. Foram coletados dados demográficos, referentes a história médica, ao diagnóstico, ao tratamento e a controles pós-operatórios, os quais foram transferidos para uma base de dados eletrônica. Após o preparo e pré-processamento de dados, foram selecionadas 32 variáveis independentes e 2 variáveis dependentes, as quais compreenderam os desfechos qualidade técnica do retratamento e reparo periapical. Estatísticas descritivas foram conduzidas a fim de determinar a frequência de dados ausentes, a distribuição das variáveis categóricas e a média e desvio-padrão de variáveis numéricas. Foram geradas árvores de decisão para a determinação de padrões relacionados aos desfechos, através do software de mineração de dados Weka (Waikato Environment of Knowledge Analysis, University of Waikato, New Zealand). Análises estatísticas convencionais foram conduzidas com auxílio do Software SPSS (SPSS Inc., Chicago, IL, USA), a fim de determinar fatores que poderiam interferir nos referidos desfechos. Resultados: Após o retratamento endodôntico, qualidade técnica satisfatória e reparo periapical foram obtidos em 65,20% e em 80,50% dos casos, respectivamente. A qualidade técnica do retratamento endodôntico foi afetada por vários fatores de risco, incluindo curvatura radicular severa (p < 0,001) e alterações na morfologia do canal radicular (p = 0,002). As árvores de decisão sugeriram padrões que combinam a ocorrência simultânea de raízes retas e reabsorções radiculares apicais com resultados tecnicamente insatisfatórios. O diâmetro da lesão periapical (p = 0,018), o grupo dentário (p = 0,015) e a presença de reabsorções apicais (p = 0,024) apresentaram associação significativa com o insucesso de retratamentos endodônticos. A análise de mineração de dados sugeriu que lesões periapicais extensas e qualidade da obturação insatisfatória no tratamento endodôntico inicial, apresentam mecanismos de interação entre a infecção intracanal e a resposta do hospedeiro que não foram totalmente elucidados, sendo necessários estudos complementares. Conclusão: Qualidade técnica satisfatória é afetada por diversos fatores de risco, entre eles, a presença de curvaturas radiculares severas e alterações na morfologia do canal radicular. A localização dos acidentes de procedimento exerce influência na obtenção da qualidade técnica. Fatores como o diâmetro da lesão periapical, o grupo dentário e as reabsorções radiculares apicais mostraram-se significativamente associados ao insucesso de retratamentos endodônticos. / Introduction: Non-surgical root canal retreatment presents higher technical complexity and poor prognosis compared to primary endodontic treatment. Within this context, a more detaild investigation on the factors affecting the feasibilty of achieving technical quality and periapical healing in teeth presenting secondary root canal infection is needed. Data mining approach is still little explored in the dentistry field, regardless of its potential to contribute to knowledge discovery. In the present study decision trees were complemented by conventional statistical analysis aiming to investigate patterns and risk factors related to technical quality and healing outcomes in non-surgical root canal retreatment. Methods: This observational study included 321 consecutive patients presenting for non-surgical root canal retreatment. Patients were treated by postgraduate students, following standard protocols. Data concerning demographic, medical, diagnostic, treatment and follow-up variables were transferred to an eletronic chart database (ECD). After data preprocessing and preparation a total of 32 independent variables and 2 dependent variables were defined. Basic statistics were tabled and provided the frequency of missing values, the distribution of categorical attributes and the mean and standard deviation values of numeric attributes. Decision trees were generated to predict patterns related to technical quality (satisfactory/unsatisfactory) and periapical healing (healed /failure), using J48 classification algorithm in Weka data mining software (Waikato Environment of Knowledge Analysis, University of Waikato, New Zealand). Statistical tests were performed using SPSS software (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Univariate and multivariate analytic methods were used to determine factors affecting endodontic retreatment technical quality and periapical healing. Results: After endodontic retreatment, technical outcome was satisfactory in 65.20%, and periapical healing was observed in 80.50% of the cases. Technical quality of endodontic retreatment was affected by several risk factors, including severity of root curvature (p < 0.001) and altered root canal morphology (p = 0.002). The decision trees suggested that patterns that combine straight root curvature and apical root resorption may prevent satisfactory technical outcomes. Periapical lesion area (p = 0.018), tooth type (p = 0.015) and apical resorption (p = 0.024) were shown to be significantly associated with endodontic retreatment failure. Data mining analysis suggested that large periapical lesions, as well as poor root filling quality in the initial endodontic treatment, present mechanisms that are not fully understood with regards to the interaction between intracanal infection and host response, which should be further investigated. Conclusions: Technical quality of endodontic retreatment is affected by several risk factors, including severity of root curvature and altered root canal morphology. The occurence of procedure accidents is especially relevant in the apical third of the roots, affecting the technical quality. Periapical lesion area, tooth type and apical resorption were shown to be significantly associated with endodontic retreatment failure.