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Micobiota endofítica da planta medicinal Equisetum arvense L. e seu potencial antimicrobiano/ Fabíola Gomes da Silva

Silva, Fabíola Gomes da 31 January 2012 (has links)
Submitted by Danielle Karla Martins Silva (danielle.martins@ufpe.br) on 2015-03-04T14:08:38Z No. of bitstreams: 2 Dissertação_Fabíola Gomes_2012.pdf: 1270636 bytes, checksum: 26dc658c034477c3286c61bc7d20dc77 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T14:08:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação_Fabíola Gomes_2012.pdf: 1270636 bytes, checksum: 26dc658c034477c3286c61bc7d20dc77 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / CNPq / Fungos endofíticos são microrganismos que vivem no interior de tecidos vegetais, colonizando-os intra e/ou intercelularmente, durante algum período do seu ciclo de vida, sem causar danos aparentes aos seus hospedeiros. Nos últimos anos esses microrganismos têm despertado grande interesse devido ao seu potencial de utilização como fonte de novas moléculas bioativas que podem ser aplicadas na medicina, na indústria e na agricultura. Equisetum arvense é uma planta medicinal que atua como remineralizante, diurética, cicatrizante, desintoxicante, adstringente e anticancerígena. Tendo em vista que as plantas medicinais com ação antimicrobiana podem ser hospedeiras de fungos endofíticos com tais propriedades, o presente trabalho teve como objetivos verificar a composição dos fungos endofíticos associados à planta medicinal E. arvense e avaliar o potencial antimicrobiano desses fungos contra microrganismos de importância agrícola e médica. Duas coletas de seis amostras de E. arvense foram realizadas na horta medicinal do Instituto Agronômico de Pernambuco, nos meses de julho e outubro de 2010 correspondendo aos períodos de chuva e de estiagem, respectivamente. No laboratório de fungos fitopatogênicos da Universidade Federal de Pernambuco foram realizados os processos de desinfestação superficial das amostras dos tecidos vegetais (caule e raiz), isolamento e identificação dos fungos endofíticos, bem como os testes antimicrobianos. Um total de 235 fungos endofíticos foram isolados e destes, 205 foram identificados. Foram obtidos 22 taxa, 17 identificados ao nível de espécie e cinco ao nível de gênero. Hyphomycetes foi o grupo de fungos com maior número de representantes. Fusarium e Colletotrichum gloeosporioides foram o gênero e a espécie mais frequentes, com 26,8% e 25,11% de frequência relativa de isolamento, respectivamente. Verificou-se através da técnica de cultura pareada que nenhum dos nove fungos endofíticos testados (Curvularia lunata var. aeria, C. pallescens, C. brachyspora, Cladosporium oxysporum, C. cladosporioides, C. sphaerospermum, Fusarium solani, F. verticillioides e Gliomastix murorum var. felina) apresentou capacidade antagônica contra os fungos fitopatogênicos F. oxysporum f. sp. lycopersici e Sclerotion rolfsii. Os mesmos fungos endofíticos foram submetidos a ensaios em meio sólido e oito apresentaram ação antimicrobiana a pelo menos um dos microrganismos de importância médica utilizados (as bactérias: Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae e a levedura: Candida albicans). F. solani apresentou o maior halo de inibição para B. subtilis. Isso demonstra a potencialidade bioativa de fungos endofíticos isolados de E. arvense contra bactérias e fungos patogênicos ao homem.
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Avaliação da atividade diurética e segurança do uso da Equisetum arvense L. (Cavalinha) em humanos saudáveis / Evaluation of diuretic activity and security for the use of Equisetum arvense (horsetail) in healthy humans

Carneiro, Danilo Maciel 28 September 2012 (has links)
Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-06T21:04:37Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Danilo Maciel Carneiro - 2012.pdf: 736566 bytes, checksum: 660a01af596995a79647c05ae709a844 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-06T21:16:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Danilo Maciel Carneiro - 2012.pdf: 736566 bytes, checksum: 660a01af596995a79647c05ae709a844 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-06T21:16:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Danilo Maciel Carneiro - 2012.pdf: 736566 bytes, checksum: 660a01af596995a79647c05ae709a844 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2012-09-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Treatment with medicinal plants is described for centuries as part of traditional medicine and the interest for herbal products is growing consistently in present days. Equisetum arvense (horsetail) has a long traditional use in several countries and in Brazil its marketing is regulated. However, the existence of studies on its pharmacological effects and safety of use is questioned. The present study aims to combine to the traditional use and official regulations, new clinical data on the diuretic effect, safety and acute effects on kidney function of E. arvense. Primarily we preceded a literature review with searches by uniterm "Equisetum arvense" in the databases of PubMed, LILACS, SciELO, BVS, Cochrane, and Scopus. At the same time a double-blind randomized clinical trial randomly distributed 36 male healthy volunteers in 6 groups (n = 6), who have gone through a 3 stages treatment. Alternately for 4 days in a row, where given the drug tested, placebo or hydrochlorothiazide, separated by 10 days of wash out. The literature review showed that, despite of a well-documented traditional use and the regulation in some countries, studies on E. arvense are still incomplete for a well-established medical use, based on proven effectiveness and acceptable level of safety, necessitating more research mainly on the clinic area. In the clinical study, the extract of E. arvense demonstrated better acute diuretic effect than negative control and similar to hydrochlorothiazide (25 mg), without significant changes in elimination of electrolytes or urinary catabolites, and no signs of acute toxicity, hepatic, renal or cardiac. Further researches are needed to better clarification of the mechanism of action diuretic, as well as other possible pharmacological actions of this phytomedicine. / O tratamento com plantas medicinais é descrito há séculos como parte da medicina tradicional e o interesse em relação aos produtos fitoterápicos é crescente nos dias atuais. A Equisetum arvense (cavalinha) tem longa tradição de uso em vários países e, no Brasil, sua comercialização é regulamentada. Entretanto, há poucos estudos sobre os seus efeitos farmacológicos e segurança. O presente estudo visa contribuir com dados clínicos novos sobre o efeito diurético, segurança e ação na função renal da E. arvense. Inicialmente, procedeu-se uma revisão bibliográfica, de julho de 2011 a agosto de 2012, com buscas pelo unitermo “Equisetum arvense” nas bases de dados do PubMed, LILACS, SciELO, BVS, Cochrane e Scopus. Logo após, foi realizado um ensaio clínico duplo-cego randomizado com 36 voluntários sadios do sexo masculino, com idade entre 20 a 55 anos, alocados em 6 grupos (n=36) que passaram por 3 etapas de tratamento. Administrou-se alternadamente, por 4 dias seguidos, o extrato seco padronizado de Equisetum arvense, o placebo e a hidroclorotiazida, separados por 10 dias de wash out. A revisão bibliográfica revelou que, apesar do uso tradicional bem documentado e regulamentado em alguns países, os estudos sobre a E. arvense ainda são incompletos para o uso médico bem estabelecido, com base em eficácia comprovada e nível de segurança aceitável, necessitando de mais pesquisas principalmente na parte clínica. Contudo, no ensaio clínico, o extrato da E. arvense (900 mg/dia) demonstrou efeito diurético superior ao placebo e comparável à hidroclorotiazida (25 mg/dia), sem diferenças significativas nas taxas urinárias de eletrólitos ou de catabólitos e sem sinais de toxicidade aguda hepática, renal, hematológica ou cardíaca. Novas pesquisas são necessárias para melhor esclarecimento do mecanismo de ação diurética, bem como de outras possíveis ações farmacológicas deste fitomedicamento.
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Ensaio de citotoxicidade de extratos naturais após determinação da concentração microbicida mínima para Staphylococcus spp., Streptococcus mutans e Candida spp

Oliveira, Jonatas Rafael de [UNESP] 14 July 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-14Bitstream added on 2014-06-13T19:56:08Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_jr_me_sjc.pdf: 1011850 bytes, checksum: 0914206b09a47699d72d4dc7cfb6450f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A proposta deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana e citotoxicidade dos extratos vegetais de Equisetum arvense L. (cavalinha), Glycyrrhiza glabra L. (alcaçuz), Punica granatum L. (romã) e Stryphnodendron barbatimam Mart. (barbatimão). A atividade antimicrobiana dos extratos vegetais foi analisada em cepas de Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans, Candida albicans, Candida glabrata e Candida tropicalis, sendo uma ATCC e nove clínicas, através do teste de microdiluição em caldo, contudo para se determinar a Concentração Microbicida Mínima (CMM) dos extratos foram feitas semeaduras do conteúdo dos poços das placas de microdiluição. A citotoxicidade das CMM dos extratos naturais foi verificada pelo método colorimétrico MTT e pela quantificação da produção de citocinas IL-1β e TNF-α pelo teste ELISA, para tanto, foram utilizadas culturas celulares de macrófagos de camundongos (RAW 264.7). Os resultados foram analisados estatisticamente pelo teste ANOVA complementado por Tukey, com significância de 5%. Para o extrato de cavalinha, romã e barbatimão foi determinada como CMM efetiva para todas as cepas a concentração de 50 mg/mL e para o extrato de alcaçuz 100 mg/mL. Quanto à citotoxicidade destas concentrações, pelo método MTT, foi observada redução significativa da viabilidade celular (p≤0,05), em relação ao grupo controle, para 48% no grupo tratado com cavalinha, 79% para alcaçuz, 76% para romã e 86% para barbatimão. Em relação à quantificação de IL-1β, os grupos tratados com extratos de alcaçuz e cavalinha exibiram semelhanças ao grupo controle (p≥0,05) com produção de 1,99 e 1,32 pg/mL respectivamente, contudo o grupo tratado com extrato de barbatimão produziu 3,98 pg/mL (p<0,05) e o grupo que recebeu tratamento com extrato de romã a produção foi de 7,72 pg/mL (p<0,01), diferindo... / The objective of this study was to verify the antimicrobial activity and cytotoxicity of Equisetum arvense L. (horsetail), Glycyrrhiza glabra L. (licorice), Punica granatum L. (pomegranate) and Stryphnodendron barbatimam Mart. (barbatimam) glycolic extracts. The antimicrobial activity of the extracts was analyzed in Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans, Candida albicans, Candida glabrata and Candida tropicalis strains, being one ATCC and nine clinics through the method of microdilution in broth according to NCCLS. It was realized sowing of the contents from the well of microdilution plate, after incubation, for determination of MMC of the natural extracts. The cytotoxicity of the extracts was evaluated for MTT assay, having as an experimental model cultivation of mice macrophages (RAW 264.7), and through the ELISA test, for cytokyne quantification IL-1β and TNF-α produced by the cellular cultivation after a period of 24 hours exposed to the extracts MMC. The results were subordinated to statistical analisys (ANOVA and Turkey test), with p≤0,05. Related to the antimicrobial activity, the natural extracts of horsetail, pomegranate and barbatimam eliminated all the strains to the concentration of 50 mg/mL and the natural extract of licorice promoted the eliimination of 100 mg/mL. Regarding to the cellular viability of the active MMC for the 100% of strains, it was observed meaningful reduction (p<0,01) in all the natural extracts compared to the control group, and, as a result, horsetail exhibited an average of 48%; licorice, 79%; pomegranate, 76%; e barbatimam, 86%. As the production of cytokyne the pomegranate extract presented production of IL-1β (7,72 pg/mL) significantly superior to the other groups, including the control (p<0,05). The barbatimam extract exhibited an intermediate average value of IL-1β (3,98 pg/mL), being statistically... (Complete abstract click electronic access below)
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Avaliação fitoquímica, microbiológica e citotóxica da cavalinha (Equisetum arvense) / Phytochemical, microbiological and cytotoxic evaluation of horsetail (Equisetum arvense)

Temoteo, Jailma Letícia Marques 04 May 2017 (has links)
Medicinal plants have been used in popular medicine for centuries, a practice that has been practiced between generations. They are rich in active substances, which can lead to the discovery of a new herbal remedy and even the discovery of a new drug. The Equisetum arvense, popularly known as horsetail and present in RENISUS is a plant rich in silicon and also consisting of polyphenols and tannins, being used in therapy as diuretic, but also has a healing, antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial action. Considering the current panorama of microbial resistance, studies that are proposed to evaluate antimicrobial activity, as well as cytotoxic, are of great relevance. The objective of the present work is to evaluate the phytochemical profile, antimicrobial activity and the cytotoxicity of the extract and fractions of E. arvense. The gross extract was obtained by maceration of the horsetail in ethanol, while the fractions were by maceration of the horsetail in solvents of different polarities (hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol), and then concentrated in a rotary evaporator. The phenolic profile was composed by the phenol content by Folin-Ciocalteu, total flavonoids and identification of phenolic substances by HPLC with UV-DAD detector; the antioxidant activity was verified by DPPH; the evaluation of the antimicrobial activity was verified by the disc diffusion method using ATCC strains of S. aureus, E. coli and P. aeruginosa; and, cytotoxicity was performed on J774 lineage macrophages and determined by the Elisa assay at 530 nm using MTT as the cell death indicator. The results obtained showed the presence of phenolic compounds in the horsetail, such as phenolic acids and flavonoids, resulting in a good content of phenols and flavonoids in its extract and fractions and also in a high antioxidant activity, being this greater than 90% for the ethyl acetatel fraction. In relation to the antimicrobial activity, the ethyl acetate fraction was able to inhibit the growth of S. aureus and P. aeruginosa, while the chloroform fraction was able to inhibit the growth of E. coli as well, being this concentration dependent inhibition of the fraction. As for cytotoxicity, the hexane and methanol fractions of the plant presented LC50 of 67,66 and 74,33 μg/mL, respectively, these fractions being the most cytotoxic for J774 lineage macrophages, whereas gross ethanolic extract and fractions chloroform and ethyl acetate showed LC50 greater than 100 μg/mL. Therefore, the ethyl acetate fraction was highlighted, being the fraction with higher content of phenols and flavonoids, resulting in a high antioxidant activity, besides being able to inhibit the growth of S. aureus and P. aeruginosa when used in concentration of 500 mg / mL, and did not present significant cytotoxicity, without significantly damaging the cells. It is emphasized, then, that the horsetail has bioactivity with pharmacological function depending on its concentration, however it is a plant and due to the great diversity of its constituents may also exhibit certain toxicity. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As plantas medicinais são, há séculos, usadas na medicina popular, prática essa passada entre gerações. São ricas em substâncias ativas, que podem levar a descoberta de um novo fitoterápico e até mesmo a descoberta de um novo fármaco. A Equisetum arvense, conhecida popularmente por cavalinha e presente na RENISUS, é uma planta rica em silício e constituída também por taninos e polifenóis, sendo utilizada na terapêutica como diurética, porém também tem ação cicatrizante, antioxidante, anti-inflamatória e antimicrobiana. Considerando o atual panorama da resistência microbiana, estudos que se propõem a avaliar atividade antimicrobiana, como também citotóxica, são de grande relevância. O objetivo deste trabalho é avaliar o perfil fitoquímico, a atividade antimicrobiana e a citotoxicidade do extrato e frações de E. arvense. O extrato bruto foi obtido através da maceração da cavalinha em etanol, enquanto que as frações foram por meio da maceração da cavalinha em solventes de diferentes polaridades (hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol), e em seguida concentrados em evaporador rotatório. O perfil fenólico foi composto pelo teor de fenóis por Folin-Ciocalteu, flavonóides totais e identificação de substâncias fenólicas por CLAE com detector UV-DAD; a atividade antioxidante foi verificada por DPPH; a avaliação da atividade antimicrobiana foi verificada pelo método de difusão em disco, usando cepas ATCC de S. aureus, E. coli e P. aeruginosa; e, a citotoxicidade foi realizada em cultura de macrófagos de linhagem J774 e determinada pelo ensaio de Elisa a 530 nm, usando como indicador de morte celular o MTT. Os resultados obtidos comprovaram a presença de compostos fenólicos na cavalinha, como ácidos fenólicos e flavonóides, resultando em um bom teor de fenóis e flavonóides em seu extrato e frações e também em uma alta atividade antioxidante, sendo esta maior que 90% para a fração acetato de etila. Em relação a atividade antimicrobiana, a fração de acetato de etila foi capaz de inibir o crescimento de S. aureus e P. aeruginosa, enquanto que a fração clorofórmica foi capaz de inibir também o crescimento de E. coli, sendo esta inibição dependente da concentração da fração. Quanto a citotoxicidade, as frações de hexano e metanol da planta apresentou CL50 de 67,66 e 74,33 μg/mL, respectivamente, sendo estas frações as mais citotóxicas para os macrófagos de linhagem J774, enquanto que o extrato bruto etanólico e as frações clorofórmica e de acetato de etila apresentaram CL50 maior que 100 μg/mL. Logo, a fração acetato de etila se destacou, por ser a fração com maior teor de fenóis e flavonóides, resultando em uma alta atividade antioxidante, além de conseguir inibir o crescimento de S. aureus e P. aeruginosa quando utilizado em concentração de 500 mg/mL, e não apresentar citotoxicidade significativa, não lesando significantemente as células. Ressalta-se, então, que a cavalinha possui bioatividade com função farmacológica a depender de sua concentração, entretanto é uma planta e devido a grande diversidade de seus constituintes também pode exibir certa toxicidade.

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