Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Química, 2012. / Submitted by Marília Freitas (marilia@bce.unb.br) on 2013-01-29T11:28:14Z No. of bitstreams: 1 2012_RafaelFeitosadaSilva.pdf: 1016739 bytes, checksum: 352b5699acf98872f72ca31a13e51ba5 (MD5) / Rejected by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br), reason: on 2013-01-29T11:32:55Z (GMT) / Submitted by Marília Freitas (marilia@bce.unb.br) on 2013-01-29T11:33:54Z No. of bitstreams: 1 2012_RafaelFeitosadaSilva_PARCIAL.pdf: 1016739 bytes, checksum: 352b5699acf98872f72ca31a13e51ba5 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-03-11T11:03:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_RafaelFeitosadaSilva_PARCIAL.pdf: 1016739 bytes, checksum: 352b5699acf98872f72ca31a13e51ba5 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-11T11:03:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_RafaelFeitosadaSilva_PARCIAL.pdf: 1016739 bytes, checksum: 352b5699acf98872f72ca31a13e51ba5 (MD5) / Trabalhos recentes têm buscado estabelecer uma nova abordagem para estimar de forma rápida e segura o consumo de drogas de abuso (DA) considerando-se a análise do esgoto bruto gerado por uma população quanto à concentração dessas substâncias e de seus metabólitos. Nesse contexto, o presente trabalho apresenta uma estimativa do consumo de cocaína (COC) da população do Distrito Federal (DF) obtida a partir da análise de amostras de esgoto coletadas em oito estações de tratamento de esgoto (ETE) durante uma única campanha realizada em abril de 2012. A estimativa foi realizada com base nos valores de concentração de benzoilecgonina (BE), principal metabólito urinário da COC, em amostras de esgoto bruto. A determinação envolveu etapas de extração e concentração dos analitos empregando extração em fase sólida (SPE) e determinação por HPLC-MS/MS. Para avaliar a eficiência do método SPE testes de recuperação foram realizados com base em um planejamento fatorial 23. As melhores recuperações foram obtidas com cartuchos SPE Strata-X, condicionamento da fase sólida e eluição das substâncias de interesse com solução de ACN/MeOH (60:40) e passagem da amostra acidificada a pH 2. Pela primeira vez, testes de preservação das amostras foram realizados para investigar o comportamento da COC e da BE durante o envio das amostras de esgoto bruto pelos correios. A acidificação da amostra bruta a pH 2 mostrou-se a maneira mais eficaz de reduzir as variações nas concentrações dos analitos. A presença de COC e BE foi confirmada em todas as amostras analisadas e as concentrações ficaram entre 519 e 1260 ng L-1 e 1228 e 4297 ng L-1, respectivamente. A região correspondente a ETE Brasília Norte apresentou o maior consumo per capita de COC base livre (4453 doses ano-1 1000 hab-1), seguida da ETE Samambaia (4049 doses ano-1 1000 hab-1) e da ETE Gama (3607 doses ano-1 1000 hab-1). O consumo de COC base livre para a população do DF foi estimado em 753 kg ano-1, o que corresponde a um consumo per capita de aproximadamente 2930 doses ano-1 1000 hab-1. A partir da análise de amostras de esgoto coletadas da ETE Brasília Norte durante o período de 19 a 25 de abril de 2012, também foi possível estabelecer o perfil semanal de consumo da região norte de Brasília, DF. O maior consumo de COC foi observado nos finais de semana. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The battle against drug use and trafficking depends on many factors. Among them, stands out the obtention of information regarding consumption trends including the amount of drugs of abuse (DA) used by a given population. In this context, recent studies aimed to establish an alternative approach for drug use estimates based on the analysis of the raw sewage generated by a population through the quantification of selected substances and their metabolites in the samples. For that reason, this work presents an estimate of cocaine (COC) use in the Brazilian Federal District (FD) obtained from the analysis of raw sewage samples collected at eight wastewater treatment plants (WTP) serving more than 70% of the FD inhabitants. The estimate was based on the quantification of benzoylecgonine (BE), the main urinary metabolite of COC, in samples of raw sewage. Solid phase extraction (SPE) and HPLC-MS/MS were employed for sample preparation and analysis, respectively. Based on a 23 factorial design, recovery tests were carried out to evaluate the efficiency of the SPE method. Better recoveries were obtained using acidified samples (pH 2) and comercial hydrophilic/lipophilic solid phases with conditioning and elution steps based on the use of a 60:40 mixture of acetonitrile:methanol. For the first time, to the best of our knowledge, preservation tests of sewage samples were carried out to investigate the stability of COC and BE during shipment of samples through the mail. The acidification of the sample of sewage to pH 2 showed to be the most effective procedure in order to avoid analyte degradation and/or transformation. The occurrence of COC and BE was confirmed in all analyzed samples and the concentrations varied between 519 to 1260 ng L-1 for COC and from 1228 to 4297 ng L-1 for BE. The region corresponding to the North Brasilia WTP had the highest per capita consumption of COC free base (4453 doses year-1 1000 inhab-1), followed by Samambaia WTP (4049 doses year-1 1000 inhab-1) and Gama WTP (3607 doses year-1 1000 inhab-1). The consumption of COC free base for the DF population was estimated at 753 kg year-1, which corresponds to a per capita consumption of approximately 2930 doses year-1 1000 inhab-1. The weekly consumption profile of the north region of Brasilia was established based on the analysis of sewage samples collected for seven consecutive days. The weekly profile showed concentration peaks on Saturday and valleys on Tuesday reflecting the highest COC consumption on weekends. The results also showed the possible existence of distinct groups of users who make constant and/or intermittent use of COC.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2015. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2015-11-27T13:53:54Z No. of bitstreams: 1 2015_SandraRitaSilva.pdf: 5588058 bytes, checksum: d10d68d2a8dd77637b85e001313eaba5 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2015-12-04T12:45:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_SandraRitaSilva.pdf: 5588058 bytes, checksum: d10d68d2a8dd77637b85e001313eaba5 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-04T12:45:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_SandraRitaSilva.pdf: 5588058 bytes, checksum: d10d68d2a8dd77637b85e001313eaba5 (MD5) / O lançamento de esgoto doméstico em corpos hídricos resulta na deposição de vários poluentes, entre eles os chamados poluentes emergentes. Dentre esses destacam-se os interferentes endócrinos (IEs), agentes exógenos que mimetizam os hormônios naturais ativando ou bloqueando vias de sinalização que desencadeiam a função hormonal. Esses poluentes têm sido encontrados em amostras ambientais do mundo todo, incluindo o Brasil, em baixas concentrações, causando efeitos aos organismos expostos. Nesse contexto, os objetivos do presente trabalho foram: investigar a ocorrência de três poluentes emergentes com atividade estrogênica -17β-estradiol (E2), 17α-etinilestradiol (EE2) e bisfenol A (BPA) em amostras de água do Lago Paranoá e de efluentes das Estações de Tratamento de Esgoto (ETEs) Sul e Norte, Brasília-DF; verificar a toxicidade das amostras e do poluente mais frequentemente detectado (BPA), através de ensaios de exposição em embriões de Danio rerio e da avaliação de marcadores bioquímicos e, por fim, comparar os resultados obtidos com concentrações de efeito para animais aquáticos do primeiro e do segundo níveis tróficos descritos na literatura. Para as análises de quantificação, as amostras foram processadas por extração em fase sólida (SPE) e submetidas a um método analítico desenvolvido em HPLC/DAD/FL. A fase móvel utilizada na separação foi acetonitrila com água na proporção 40:60 (v/v), acidificadas com ácido trifluoracético (0,12%), em condição isocrática. Os ensaios de toxicidade seguiram o protocolo OCDE nº 236 (Guideline on Fish Embryo Toxicity Test-FET). As determinações enzimáticas foram feitas em espectrofotômetro usando microplacas de 96 poços. Os resultados obtidos revelaram que o BPA é o contaminante mais predominante, com frequência de detecção de 100% nas amostras de esgoto tratado e 23% nas amostras de água superficial. As concentrações obtidas variaram entre ˂394 ng L-1 e 1231 ng L-1 no efluente e entre ˂197 ng L-1 e 644 ng L-1 nas amostras do Lago. Os demais compostos, E2 e EE2, apresentaram baixa frequência de detecção (<18%), sendo que, em apenas uma amostra de efluente, o EE2 pode ser quantificado, apresentando concentração de 591 ng L-1. Os testes de toxicidade demonstraram que as amostras de água do Lago Paranoá e efluente da ETE Sul não apresentam toxicidade para embriões de Danio rerio, no que se refere aos parâmetros analisados; o BPA é pouco tóxico (CL50 de 13,45 mg L-1) além de ser rapidamente degradado em meio aquoso (4 - 5 dias). No entanto, efeitos na eclosão (CEO = 10 mg L-1), atraso na pigmentação e na formação crânio-facial (CEO = 21,54 mg.L-1) e inibição da GST (CEO = 11,68 μg L-1) foram observados nos embriões expostos a BPA. Os níveis em que os três poluentes foram encontrados nas amostras estão entre as concentrações de efeito relatadas na literatura para animais aquáticos do primeiro e do segundo níveis tróficos, com exceção do BPA, onde as concentrações obtidas estiveram acima das CEO descritas para consumidores primários. Além disso, dados da literatura sugerem que o BPA tende a ser menos tóxico quando comparado ao E2 e EE2, de onde se conclui que, apesar de ser o composto mais frequentemente detectado nas amostras, o BPA é o que apresenta menor toxicidade para animais aquáticos. Os dados obtidos contribuem para ampliar o banco de dados relacionado à presença de contaminantes com atividade estrogênica no Lago Paranoá e nos efluentes ETEs, além de fornecer ferramentas para a avaliação da toxicidade das amostras. Considerando que em breve o Lago Paranoá será utilizado para abastecimento de água de parte da população do DF, esses resultados deverão auxiliar na tomada de decisões referentes aos processos de tratamento a serem implantados. / Sewage release results in the disposal of various pollutants in water bodies, including the so-called emerging pollutants. Among these are the endocrine disrupters, exogenous agents that mimic the natural hormones binding to cell receptor sites activating or blocking cell signaling pathways that trigger hormone function. These pollutants have been found in environmental samples all over the world, including Brazil, at low concentrations causing effects to exposed organisms. In this context, the aims of this study were to investigate the occurrence of three emerging pollutants with estrogenic activity (17β-estradiol-E2, 17α-ethinylestradiol-EE2 and bisphenol A-BPA) in water samples from Paranoá Lake and effluent of Sewage Treatment Plants (STPs), North and South, in Brasília-DF; Evaluate the toxicity of both environmental samples as the pollutant most frequently detected (BPA) to zebrafish embryonic development. In addition, it was tested, in the same animal model, sub lethal doses of BPA by biochemical markers. Finally, the environmental concentrations detected were compared with effect concentrations, described in literature, for aquatic animals from the first and second trophic levels. In the quantification analysis, samples were processed by solid phase extraction (SPE) and subjected to an analytical method developed in HPLC/DAD/FL. In this case, the mobile phase was acetonitrile with water in the ratio 40:60 (v/v), acidified with trifluoroacetic acid (0,12%) in isocratic condition. All the toxicity assays was performed following the OECD Protocol 236 (Guideline on Fish Embryo Toxicity Test-FET). The results showed that BPA was the most predominant pollutant in analyzed samples, with 100% of detection in the treated wastewater and 23% in surface water. The concentrations found were between <394-1231 ng L-1 in the effluent and <197-644 ng L-1 in Lake samples. Other compounds, E2 and EE2, showed low frequency of detection (<18%) in both Lake and effluent samples and, for only one effluent sample, EE2 was quantified in concentration of 591 ng L-1.Toxicity tests showed that water samples from Paranoá Lake and South STP effluent were no toxic to zebrafish embryos; BPA is slightly toxic to zebrafish embryos (LC50 13.45 mg L-1) and was rapidly degraded in an aqueous medium (4 - 5 days). However, effects on hatching (CEO = 10 mg L-1), delayed pigmentation, craniofacial formation (CEO = 21.54 mg L-1) and inhibition of GST (CEO = 11.68 ug L-1) were observed in embryos exposed to BPA. In addition, the levels at which the three pollutants were found in the analyzed samples are among the effects concentrations reported in the literature for aquatic animals of the first and second trophic levels, with the exception of BPA for primary consumers. Moreover, the literature suggests that BPA tends to be less toxic than E2 and EE2. It follows that, despite being the most often detected in samples, BPA is the one with less toxicity to aquatic animals. This data contribute to enlarge the database related to the presence of contaminants with estrogenic activity on Paranoá Lake and the effluent of the main treatment plants, which discharge into Lake, as well as, provide tools for assessing the toxicity of the water Lake and the Sewage Treatment Plants. Considering that, the Paranoá Lake will be used to supply water to part of the DF population, these results should also assist in the selection of the most appropriate water treatment processes.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-10-24T15:42:17Z No. of bitstreams: 1 2017_KarolinedosAnjos.pdf: 13759442 bytes, checksum: 67f82fbe592b08b0f37f08cd9aafb104 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-10-25T16:20:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_KarolinedosAnjos.pdf: 13759442 bytes, checksum: 67f82fbe592b08b0f37f08cd9aafb104 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-25T16:20:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_KarolinedosAnjos.pdf: 13759442 bytes, checksum: 67f82fbe592b08b0f37f08cd9aafb104 (MD5) Previous issue date: 2017-10-25 / Os calicivírus humanos são os principais causadores de gastroenterites no mundo, atualmente. No entanto, por não possuírem ainda um sistema de replicação viral in vitro, diferentes abordagens são desenvolvidas para que se possa obter maiores informações a cerca da biologia desses vírus. A análise ambiental tem demonstrado que assim como os demais vírus entéricos, as partículas dos calicivírus humanos são resistentes e são passíveis de serem detectados a partir de metodologias como RT-PCR em diferentes amostras. No Capítulo I desta tese utilizou-se a tecnologia de Next Generation Sequencing para a avaliação da população viral encontrada em um esgoto urbano coletado na Estação de Tratamento de Esgoto Norte, Brasília, DF, Brasil, com intuito de se determinar quais possíveis vírus humanos estariam circulando na população do Distrito Federal. Além de vírus humanos, foram encontrados vírus animais, vegetais e de insetos nas amostras analisadas. No entanto apenas os vírus com hit para entéricos causadores de doença humana tiveram seu genoma completo montado. Dentre os achados pelo menos três genótipos de sapovírus foram encontrados, assim como o novo genótipo epidêmico de norovírus GII.17 e, um vírus novo descrito como astrovirus-tipo, o bastrovirus. No Capítulo II seis diferentes genótipos de norovírus pouco detectados foram utilizados para expressar o domínio protuberante (P) do capsídeo, com intuito de se comparar e compreender possíveis mudanças estruturais e nucleotidícas em relação ao genótipo mais prevalente (GII.4). Como resultados as estruturas cristalizadas de domínio P de norovírus GII.21, GII.22 e GII.22 ligada a fucose, que é um açúcar precursor na diferenciação de HBGA (histo-blood group antigens) foram resolvidas. Por fim, no Capítulo III, um clone contendo o cDNA referente ao genoma do sapovírus BR01 foi construído. O uso de microscopia confocal a laser e citometria de fluxo confirmaram a funcionalidade do clone pela positividade de reação entre as células transfectadas e o anticorpo anti-P2 (subdomínio de VP1). Futuros experimentos poderão validar o uso desse clone como ferramenta para genética reversa. / Human caliciviruses are the main cause of gastroenteritis in the world today. However, because they do not have a viral multiplication system in cell culture, different approaches are developed so that more information can be obtained about the biology of these viruses. Environmental analysis has shown that, like other enteric viruses, human calicivirus particles are resistant and can be identified from methodologies such as RTPCR in water or food samples. In Chapter I of this thesis was used the Next Generation Sequencing technology to evaluate the viral population found in an urban sewage collected in the North Waste Water Treatment, Brasilia, DF, Brazil, in order to determine which possible human viruses would be circulating in the population of the Federal District. In addition to human viruses, animal, plant and insect viruses were found in the samples analyzed. However only the hit viruses for enteric-causing human disease had their complete genome assembled. Among the findings, at least three sapovirus genotypes were found, as well as the novel genotype of norovirus GII.17 and, a novel virus described as astrovirus-type, bastrovirus. In Chapter II, six different genotypes of undetected norovirus were used to express the protruding (P) capsid domain, in order to compare and understand possible structural and nucleotid changes in relation to the most prevalent genotype (GII.4). As results the crystallized P domain structures of norovirus GII.21, GII.22 and GII.22 linked to fucose, which is a precursor sugar in the differentiation of HBGA (histo-blood group antigens) were resolved. Finally, in Chapter III, a clone containing the cDNA for the genome of sapovirus BR01 was constructed. The use of laser confocal microscopy and flow cytometry confirmed the functionality of the clone by the reactivity positivity between the transfected cells and the anti-P2 antibody (subdomain of VP1). Future experiments could validate the use of this clone as a tool for reverse genetics.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Geociências, Programa de Pós-Graduação em Geociências Aplicadas, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-11-07T19:01:09Z No. of bitstreams: 1 2017_MarceliTerradeOliveira.pdf: 5546539 bytes, checksum: 9255679f40faaf10b4a7fad959b7ba7d (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-11-30T20:29:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_MarceliTerradeOliveira.pdf: 5546539 bytes, checksum: 9255679f40faaf10b4a7fad959b7ba7d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-30T20:29:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_MarceliTerradeOliveira.pdf: 5546539 bytes, checksum: 9255679f40faaf10b4a7fad959b7ba7d (MD5) Previous issue date: 2017-11-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). / Devido à constante mudança e alteração dos solos por meio de interferência humana, uma nova classificação foi empregada para melhor discriminação: os Antropossolos. Esses são classificados como decapíticos quando há remoção dos horizontes superficiais. Substratos minerados apresentam atributos muito diversos daqueles presentes em solos e são materiais que limitam severamente o desenvolvimento vegetal devido a fatores físicos, químicos e biológicos desfavoráveis, baixa capacidade de retenção de água, baixa concentração de matéria orgânica e de nutrientes disponíveis, cuja consequência é o prejuízo da sucessão ecológica local. Uma forma de recuperar esses solos é por meio do tratamento com lodo de esgoto, o qual repõe a matéria orgânica e proporciona crescimento vegetal espontâneo. Estudos ainda são necessários para avaliar a eficácia do tratamento, bem como o impacto que esse tratamento pode causar e também o mapeamento desses solos reconstruídos com lodo de esgoto. O propósito deste trabalho foi analisar o comportamento espectral de duas áreas de antropossolos decapíticos revegetados há duas décadas com lodo de esgoto no Distrito Federal, por meio de espectroscopia de reflectância. As amostras também foram submetidas à difratometria de raio X (DRX), como forma de validação da identificação de minerais dos espectros. Foi observada diferenças na dinâmica mineralógicas ao se comparar as amostras de solo pós tratamento e o substrato. Após a aplicação dos métodos, cálculo de profundidade de feição e intensidade integrada dos picos, foi verificado o grau de correlação entre os métodos para as razões de caulinita e gibbsita para o Latossolo e Cambissolo de, respectivamente, 0,92 e 0,98, e para hematita e goethita de, respectivamente, 0,70 e -0,81. Foi observada ainda a presença de todos os minerais citados em ambos os tipos de solo, sendo que o Cambissolo se diferencia pela presença do mineral ilita. As parcelas de substrato apresentaram teor mais caulinítico, enquanto as parcelas que foram submetidas à incorporação do lodo de esgoto apresentaram teor mais gibbsítico. Já na análise discriminante, duas hipóteses foram testadas: a separação do tipo de solo e solos tratados e não tratados. A espectroscopia de reflectância apresentou maiores valores de probabilidade de acerto com todos os minerais e razões em comparação com o método de DRX. Em relação às diferentes profundidades analisadas, as duas primeiras profundidades (0-5 e 5-15 cm) do solo tratado com lodo de esgoto apresentaram maiores registros do mineral gibbsita, o que reforça a ideia de o manejo exercer algum tipo de influência na dinâmica mineralógica do solo, uma vez que a profundidade de 15-30 cm apresentou maior similaridade com a parcela de substrato. Isso pode indicar que o lodo de esgoto é um elemento catalisador do processo de intemperismo biológico, o qual contribuiu de maneira indireta para a alteração química observada nas parcelas do solo. / Due to the constant change and alteration on the soils through human interference, a new classification is applied for better discrimination: the Anthroposols. These are classified as decapitated when the superficial horizons are removed. These mineralized substrates present very different attributes from those present in soils and are materials that severely limit plant growth and development due to unfavorable physical, chemical and biological factors, such as: soil structure, low water retention capacity, low organic matter concentration and available nutrients, the consequence of which is the damage to the local ecological succession. One way to recover these soils is through treatment with sewage sludge, which replenishes the organic matter and provides spontaneous plant growth. Studies are necessary to evaluate the effectiveness of the treatment as well as the impact that this type of treatment can cause, along with a better mapping of these revegetated soils. The purpose of this work was to analyze the spectral behavior of two areas of decapitated Anthroposols recovered with sewage sludge in the Federal District, by means of reflectance spectroscopy, in a way that it was possible to create a spectral library for this new subclass of the Anthroposols. The samples were also exposed to Xray diffraction (XRD), to validate the identification of minerals of the spectrum. Differences in the mineralogical dynamics were observed when comparing the soil samples after treatment and the substrate. After the implementation of the methods, calculation of feature’s depth and integrated intensity of the peaks, it was verified a degree of correlation between the methods for the kaolinite and gibbsite ratios and the Oxisols and Inceptisols, respectively, of 0.92 and 0.98, and for hematite and goethite of, respectively, 0.70 and -0.81. It was also observed the presence of all the minerals mentioned in both types of soil, and the Inceptisols is distinguished by the presence of the illite mineral. The substrate portions had more kaolinite content, while the portions that were submitted to the incorporation of the sewage sludge presented more gibbsite content. Furthermore, in the discriminant analysis, two hypotheses were tested: the separation of soil type and treated or untreated soils. Reflectance spectroscopy presented higher values of probability of success with all minerals and ratios compared to the XRD method. In relation to the different depths analyzed, the first two depths (0-5 and 5-15 cm) of the soil treated with sewage sludge presented greater records of the gibbsite mineral, which reinforces the idea that the management exerts some type of influence in the mineralogical dynamics of the soil, since the depth of 15-30 cm presented greater similarity with the substrate portion. This may indicate that sewage sludge is a catalyzer element of the biological weathering process, which, in turn, contributed indirectly to the chemical alteration observed in the soil portions.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Biologia, Pós-Graduação em Biologia Microbiana, 2018. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-07-20T17:33:47Z No. of bitstreams: 1 2018_NatalyMitieNatsumeMoriya.pdf: 2644950 bytes, checksum: ea481d769cf8a761af43566c542d198a (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-07-20T19:34:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_NatalyMitieNatsumeMoriya.pdf: 2644950 bytes, checksum: ea481d769cf8a761af43566c542d198a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-20T19:34:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_NatalyMitieNatsumeMoriya.pdf: 2644950 bytes, checksum: ea481d769cf8a761af43566c542d198a (MD5) Previous issue date: 2018-07-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). / A contaminação por patógenos humanos na água de esgoto é um assunto importante, principalmente em locais onde as condições de saneamento não são ideais. A tecnologia de Next Generation Sequencing (NGS) tem sido utilizada em diversos estudos metagenômicos virais (viromas). Além de descrever a diversidade genética, é uma ferramenta útil para analisar o viroma em amostras de esgoto. Apesar do interesse no tratamento de água, a cidade de Brasília não possuí um estudo de censo e informações focado na contaminação viral do Lago Paranoá. Com este propósito, os patógenos humanos astrovírus (HAstV), norovírus (NoV) e sapovírus (SaV) foram selecionados e investigados em amostras de água não-tratada (influente) e tratada (efluente) utilizando o NGS. Amostras de influente e efluente (de março, maio de 2016 e fevereiro de 2017) foram coletadas na estação de tratamento de água de esgoto em Brasília, Brasil. As amostras foram submetidas a processos de extração de RNA e as bibliotecas de cDNA foram sequenciadas através do Illumina HiSeq 2000, com a condição de 100 bases paired-end. Os reads foram trimados através do Trimmomatic e os contigs foram montados com os programas Megahit e Velvet. As sequências foram analisadas por tBLASTX e Megablast, respectivamente, contra o "RefSeq Virus" utilizando o software Geneious v.8.1. Os reads resultantes também foram enviados e analisados na plataforma online Kaiju. Os SaV foram detectados nas seis amostras sequenciadas, HAstV e NoV foram encontrados em todas as amostras, exceto no efluente de maio. Os resultados encontrados foram discutidos e comparados com estudos brasileiros e internacionais. / Contamination of human pathogen in wastewater is an important matter, especially where sanitation is not ideal condition. Next Generation Sequencing (NGS) has been applied in several viral metagenomes (viromes) studies. Besides describing gene diversity, it is a helpful tool to analyze virome in sewage water. Despite the interest in wastewater treatment, Brasilia city lacks a census study and information aiming to assess viral contamination in Paranoa lake. For this purpose, the human pathogens astrovirus (HAstV), norovirus (NoV) and sapovirus (SaV) were selected in untreated (influent) and treated (effluent) wastewater and investigated using NGS technology. Samples of influent and effluent stream (from March, May of 2016 and February of 2017) were collected at the treatment station of wastewater in Brasília, Brazil. Samples were submitted to RNA extraction process and the cDNA libraries were sequenced using Illumina HiSeq 2000 with the condition of 100 base paired-end. The NGS reads were trimmed by Trimmomatic and the contigs were assembled with Megahit and Velvet. The assembled contigs were analyzed by tBLASTX and Megablast, respectively, against RefSeq Virus using Geneious Software v.8.1. Resulted reads were also uploaded and analyzed on Kaiju online platform. SaV were detected in the six sequenced samples, HAstV and NoV were found in all samples except the May untreated water sample. The results found were discussed and compared with Brazilian and international studies.