Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_juliano_lacava_pereira.pdf: 1194037 bytes, checksum: 9990bc185909cc08288cd6230c0a9be6 (MD5) Previous issue date: 2011-07-18 / Several recombinant proteins have been studied as immunocontraception agents in mammals, among them the Gonadotropin-releasing hormone (GnRH). Nevertheless, due to its low molecular weight, GnRH needs to be conjugated with a carrier protein. Among the eukaryotic platforms the yeast Pichia pastoris, which are able of promoting post-translational modifications to expressed recombinant protein. The aim of this study was to clone and express the GnRH/LTB chimera in P. pastoris, and to test it as an immunocontraceptive. In order to accomplish this, sequences of P. pastoris codons usage were synthesized and cloned into the plasmid pPICZαB. The plasmid containing the sequence were propagated and transformed into yeast by electroporation. The transformed colonies were selected by resistance to antibiotics and confirmed by Colony Blotting. The selected clone was cultivated, induced and the protein expressed in supernatant. The protein was concentrated and used as a vaccine antigen. BALB/c males mice were vaccinated twice 15 apart with 100µg de LTB/GnRH adjuvanted with aluminum hydroxide. The immune response was evaluated by ELISA, showing seraconversion in vaccinated animals. The sperm concentration in the control group was 16.93 x 107 and 8.00 x 107 sperm/mL in the immunized group. Vaccination caused a reduction of spermatogenesis (p < 0,05), vacuolization and disorganization of the seminiferous tubules. We concluded that the yeast was able to express the recombinant protein LTB/GnRH, and it demonstrated immunocontraceptive potential in mice. / Diversas proteínas recombinantes estão sendo pesquisadas para utilização na imunocontracepção de mamíferos. Entre elas, o hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), entretanto devido ao seu baixo peso molecular há necessidade de associá-lo a uma molécula carreadora. Dentre as plataformas eucarióticas, encontra-se a levedura Pichia pastoris que tem possibilitado expressão e modificações pós-traducionais das proteínas recombinantes. O objetivo deste trabalho foi clonar e expressar a quimera LTB/GnRH em P. pastoris, visando sua utilização como imunocontraceptivo. Para tanto, sequências com os códons preferenciais de P. pastoris da proteína foram sintetizadas e clonada no plasmídeo pPICZαB. O plasmídeo foi propagado e transformado na levedura por eletroporação. As colônias transformadas foram selecionadas por resistência antibiótica e confirmadas por Colony Blotting. O clone selecionado foi cultivado e após indução expressou a proteína no sobrenadante. A proteína foi concentrada e utilizada como antígeno vacinal. Camundongos BALB/c machos foram vacinados com duas doses de 100µg de LTB/GnRH adsorvidas em hidróxido de alumínio com intervalo de 15 dias. A resposta imune foi avaliada por ELISA, mostrando soroconversão nos animais imunizados. A concentração espermática no grupo controle foi 16,93 x 107 e no grupo imunizado 8,00 x 107 espermatozóides/mL. A imunização induziu a redução da espermatogênese (p < 0,05), vacuolização nos túbulos seminíferos e desorganização testicular. Concluiu-se que a levedura foi capaz de expressar a proteína LTB/GnRH recombinante e a mesma apresentou potencial imunocontraceptivo em camundongos.

Orientador: Lilian Madi-Ravazzi / Coorientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo-Oliveira / Banca: Blanche Christine Pires de Bitner-Mathé Leal / Banca: Maria Izabel Camargo Mathias / Banca: Hermione Elly Melara de Campos Bicudo / Banca: Patrícia Vilamaior / Resumo: Zaprionus indianus é um drosofilídeo nativo da região Afrotropical que colonizou o continente Sul Americano, apresentando uma ampla distribuição geográfica enquanto Z. sepsoides é restrita a algumas regiões africanas. As duas espécies diferem em relação ao tamanho dos testículos e dos espermatozoides que é maior em Z. indianus do que em Z. sepsoides. Com o intuito de conhecer aspectos da biologia e o grau de diferenciação destas espécies, o presente estudo avaliou a espermatogênese de machos de diferentes idades (1, 3, 5 e 8 dias) de ambas as espécies por meio de técnicas de coloração convencional e de ultraestrutura. A espermatogênese e ultraestrutura dos espermatozoides foram semelhantes nas espécies em que foi confirmado o número diploide de cromossomos com 2n = 12. Entretanto, foi observada uma quantidade maior de espermatozoides em machos jovens (1 a 3 dias de idade) em Z. indianus do que em Z. sepsoides, o qual apresentou maior frequência de estágios iniciais da espermatogênese nestas idades. A porção da cabeça dos espermatozoides foi fortemente marcada nas duas espécies pela coloração por prata (AgNOR), orceína lacto-acética e pela reação de Feulgen. Quando submetidos à reação de P.A.S., os testículos de Z. sepsoides e Z. indianus apresentaram grânulos de glicogênio. As espécies possuem a mesma ultraestrutura flagelar, em que o axonema mostra um arranjo de 9+9+2 microtúbulos, com a presença de dois derivados mitocondriais de diferentes tamanhos e o número de 64 espermatozoides por feixe, em ambas as espécies. A grande semelhança observada no padrão do arranjo de microtúbulos do axonema e nos derivados mitocondriais com diferentes tamanhos nas espécies de Zaprionus, comparadas com outras espécies de Drosophila, é indicativa da conservação destas estruturas na família Drosophilidae... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Zaprionus indianus is a drosophilid native to the Afrotropical region that has colonized South America. Z. indianus exhibits a wide geographical distribution, whereas Z. sepsoides is restricted to certain African regions. The two species differ in the size of their testes, which are larger in Z. indianus than in Z. sepsoides. To better understand the biology and the degree of differentiation of these species, the current study evaluated spermatogenesis in males of different ages (1, 3, 5 and 8 days old) from both species by conventional staining techniques and ultrastructural analysis. Spermatogenesis and the ultrastructure of spermatozoa were similar in the two species, for which the diploid number was confirmed to be 2n = 12 chromosomes. However, a greater number of spermatozoa were observed in young Z. indianus males (1-3 days old) than in young Z. sepsoides males, which showed a higher frequency of cells at the early stages of spermatogenesis at this age. A portion of the head of the sperm was strongly marked in both species by silver staining (AgNOR), lacto-acetic orcein and the Feulgen reaction. Additionally, when submitted to P.A.S. reaction, the testes of both Z. sepsoides and Z. indianus exhibited glycogen granules. The two species also presented the same flagellar ultrastructure, in which the axoneme includes a 9+9+2 arrangement of microtubules, two mitochondrial derivatives of different sizes are present and the number of spermatozoa per bundle is 64. The great similarity in the pattern of microtubule arrangement in the axoneme and in the mitochondrial derivatives of the species Zaprionus, as compared with other species of Drosophila, indicates that these structures are preserved in the family Drosophilidae. The differences observed between the young males of Z. indianus and Z. sepsoides, including the number and frequency of sperm... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Tercília Vilela Azeredo Oliveira / Coorientador: Patrícia Simone Leite Vilamaior / Banca: Alba Regina de Abreu Lima / Banca: Silvana Gisele Pegorin de Campos / Resumo: Os triatomíneos são insetos hematófagos de grande importância para a saúde pública, uma vez que são considerados como a principal forma de transmissão do protozoário Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas. Além da importância epidemiológica, esses insetos se destacam em estudos celulares, pois apresentam algumas peculiaridades, como cromossomos holocêntricos, meiose invertida para os cromossomos sexuais e persistência nucleolar durante a meiose. O fenômeno de persistência nucleolar é definido pela presença do nucléolo ou corpúsculos nucleolares durante todas as fases da meiose. Esse fenômeno foi descrito, até o momento, para 24 espécies de triatomíneos, dos gêneros Triatoma, Rhodnius e Panstrongylus. No entanto, somente a presença dessa estrutura nuclear em todas as fases da meiose não garante a sua atividade transcricional. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo descrever a nucleologênese em novas espécies de, pelo menos, sete novos gêneros (Cavernicola, Psammolestes, Dipetalogaster, Eratyrus, Meccus, Mepraia, Nesotriatoma), com o intuito de analisar se a persistência nucleolar é uma sinapomorfia da subfamília Triatominae. Além disso, esse trabalho também teve como finalidade avaliar a atividade nucleolar durante a meiose das espécies Triatoma infestans, Rhodnius montenegrensis e Panstrongylus megistus, por meio da técnica citoquímica Acridine Orange, com o objetivo de caracterizar, com base na presença de RNA, se existe atividade transcricional... / Abstract: Triatomines are hematophagous insects of great importance for public health, since they are considered as the main form of transmission of the protozoan Trypanosoma cruzi, etiologic agent of Chagas disease. Besides the epidemiological importance, these insects stand out in cellular studies, as they present some peculiarities, such as holocentric chromosomes, inverted meiosis for sex chromosomes and nucleolar persistence during meiosis. The phenomenon of nucleolar persistence is defined by the presence of the nucleolus or nucleolar corpuscles during all phases of meiosis. So far, this phenomenon has been described for 24 triatomine species of the genus Triatoma, Rhodnius and Panstrongylus. However, only the presence of this nuclear structure in all phases of meiosis does not guarantee its transcriptional activity. So, the objective of the present study was to describe the nucleologenesis in new species of at least seven new genera (Cavernicola, Psammolestes, Dipetalogaster, Eratyrus, Meccus, Mepraia, Nesotriatoma), in order to analyze if nucleolar persistence is a synapomorphy of the subfamily Triatominae. Besides that, this work had the purpose to evaluate the nucleolar activity during the meiosis of the species Triatoma infestans, Rhodnius montenegrensis and Panstrongylus megistus, by means of the cytochemical technique Acridine Orange, with the objective of characterizing, based on the presence of RNA, if there is transcriptional activity in the persistent nucleolar material. All 59 species analyzed, distributed in seven genera, presented nucleolar persistence during meiosis, thus corroborating that this phenomenon is a synapomorphy of the subfamily Triatominae. By means of the fluorochrome Acridine Orange, the persistent nucleolus has been found to be transcriptionally active. Thus, it was evident, for the first time, that the nucleolus is present in the spermatogenesis of ... / Mestre

Orientador: Selma Maria Almeida-Santos / Banca: Otavio Augusto Vuolo Marques / Resumo: Dados sobre a biologia reprodutiva (e.g. ciclos reprodutivos, maturação e dimorfismo sexual, padrões de estocagem de esperma e padrões de atividade) de três espécies de serpentes da Família Viperidae da região neotropical, Crotalus durissus (N = 228), Bothrops leucurus (N = 320) e Bothrops erythromelas (N = 239), são apresentados neste estudo. Os machos atingem a maturidade sexual com comprimento rostro-cloacal (CRC) menor que as fêmeas em B. erythromelas e B. leucurus. Nas populações de C. durissus da região Nordeste do Brasil, machos e fêmeas atingem a maturidade sexual com comprimentos semelhantes, porém há relatos de padrões diferentes para outras populações. Não há diferença quanto ao CRC de machos e fêmeas sexualmente maduros de C. durissus e B. leucurus, espécies paras as quais há relato de combate entre os machos. Fêmeas de B. erythromelas são maiores que os machos, característica esperada para uma espécie em que não há a ocorrência de combate. Os ciclos reprodutivos de machos e fêmeas das três espécies, descritos com base em análises morfológicas e histológicas das gônadas e vias genitais, são sazonais e influenciados tanto pelas condições climáticas quanto pelas relações filogenéticas. O período de vitelogênese ocorre ao longo de grande parte do ano em B. leucurus e B. erythromelas e em um período mais restrito em C. durissus, durante o outono e a primavera. Relatos de acasalamento durante o outono estão disponíveis para as três espécies, embora para B. leucurus o acasalamento também possa ocorrer durante o inverno. Em B. leucurus e C. durissus, após a cópula, os espermatozóides permanecem estocados no trato reprodutivo da fêmea, no interior da contração muscular uterina, até o momento da ovulação e fertilização (final do inverno - início do verão). É provável que as fêmeas de B. erythromelas também... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: New data about reproductive biology (e.g. reproductive cycles, sexual maturation and dimorphism, sperm storage and activity patterns) of three species of Viperidae snakes from the Neotropical region, Crotalus durissus (N = 228), Bothrops leucurus (N = 320) and Bothrops erythromelas (N = 239), are presented. B. erythromelas and B. leucurus males attain sexual maturity at smaller sizes (snout-vent length - SVL) than conspecific females. C. durissus males and females from northeastern Brazil attain sexual maturity at similar sizes. However, other sexual maturity patterns have already been described for other populations. No significant difference was observed on SVL between mature males and females of C. durissus and B. leucurus. Male-male combat behavior has been previously described for these species. B. erythromelas females are larger than males and male-male combat has never been reported for this species. Reproductive cycles are described considering morphological and histological analysis of the gonads and genital ducts. Reproductive cycles of the three species considered herein are seasonal and influenced by climatic conditions and phylogenetic relationships. Secondary vitellogenic follicles may be found in every season in B. leucurus and B. erythromelas, and only during autumn and spring in C. durissus. Records of mating during the autumn are available for the three studied species, but it may also occur during winter in B. leucurus. After mating, spermatozoa are stored in the female reproductive tract by means of an uterine muscular twisting (UMT) until ovulation and fertilization occur (end of winter - beginning of summer) in C. durissus and B. leucurus. It is probable that it also occurs in B. erythromelas because mating and ovulation are not synchronous in this species either. However, we did not find evidences for the occurrence of the UMT to confirm... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Carlos Alberto Vicentini / Banca: Classius de Oliveira / Banca: Sérgio Ricardo Batlouni / Resumo: O Cichla kelberi, espécie recentemente classificada e popularmente conhecida como tucunaré amarelo, é endêmico dos rios Araguaia e baixo Tocantins, sendo, entretanto, encontrado em muitas outras bacias, onde apresenta grande importância para a pesca profissional por seu alto valor econômico, devido a qualidade e sabor de sua carne, e pela pesca esportiva, como pode ser observado pelos campeonatos anuais de pesca ao tucunaré nos rios em que se encontra. Para entender esse rápido processo de ocupação e adaptação a novos ambientes, 78 exemplares de Cichla kelberi foram mensalmente coletados entre os meses de março de 2009 a fevereiro de 2010, com o auxílio de vara de pesca e anzol na Lagoa do Pernilongo (20º 29' 11,93"S, 51º 25' 33,27"O) e Ilha da Ferradura (20º 28' 27,11" S, 51º 25' 54,53"O), no Reservatório de Jupiá, rio Paraná, Ilha Solteira, São Paulo, Brasil, onde foi introduzido. Foram definidas quatro classes de maturação gonadal para o ciclo reprodutivo anual do tucunaré amarelo C. kelberi. A definição das classes de Maturação Inicial, Maturação Intermediária, Maturação Final e Regressão, tiveram como base as alterações do epitélio germinativo testicular associado aos estágios das células germinativas presentes. A Classe de Maturação Inicial é caracterizada pela presença de um epitélio germinativo totalmente contínuo, cistos com células germinativas em todos os estágios de desenvolvimento, intensa atividade espermatogênica por todo o testículo e raros "clusters" periféricos, formados por espermatogônias primárias. A Classe de Maturação Intermediária inicia com o surgimento de um epitélio germinativo descontínuo na região anastomosada, com diminuição da espermatogênese e estocagem de espermatozóides nesta região. Os agrupamentos periféricos de espermatogônias ou "clusters" estão ausentes... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Cichla kelberi, a recently classified specie and popularly known as yellow peacock bass, is endemic from the Araguaia an low Tocantins river, being, however, found in many other basins, where has great importance for the professional fishing for its high economic value due to the quality and flavor of their meat and fishing, as can be observed by annual championships of peacock in the rivers where it is. To understand this fast process of occupation and adaptation to new environments, 78 specimens of C. kelberi were caught monthly between the months of March 2009 to February 2010 with the aid of fishing pole and hook, from the Lagoa do Pernilongo (20º 29' 11,93"S, 51º 25' 33,27"O) and Ilha da Ferradura (20º 28' 27,11" S, 51º 25' 54,53"O), in the Jupiá Reservoir, Parana River, Ilha Solteira, São Paulo, Brazil, where it was introduced. It was defined four gonadal maturation class to the annual reproductive cycle of the yellow peacock bass C. kelberi. The definition of the Early Maturation, Mid Maturation, Final Maturation and Regression Classes, were based on the changes of the testicular germinal epithelium associated with the germ cell stages present. The Class of Early Maturation is characterized by the presence of a fully continuous germinal epithelium, cysts with germ cells at all stages of development, intense spermatogenic activity throughout the testis and rare "clusters" peripherals, consisting of primary spermatogonia. The Mid maturation Class starts with the appearance of a discontinuous germinal epithelium in the anastomosed region with spermatogenesis decrease and sperm storage in this region. The peripheral groups of spermatogonia or "clusters" are missing at the end of this class of maturation. In the Final Maturation Class the germinal epithelium discontinuity reaches the periphery of lobules... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2014-01-29T20:30:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_PuberdadeCaititusTayassu.pdf: 2278284 bytes, checksum: a177cf6287324da20024168a41c7de35 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2014-02-05T16:58:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_PuberdadeCaititusTayassu.pdf: 2278284 bytes, checksum: a177cf6287324da20024168a41c7de35 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-05T16:58:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_PuberdadeCaititusTayassu.pdf: 2278284 bytes, checksum: a177cf6287324da20024168a41c7de35 (MD5) Previous issue date: 2009 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Esta pesquisa analisa o desenvolvimento da espermatogênese em caititus (Tayassu tajacu) e determina a idade em que atingem a puberdade, considerando-se a biometria testicular e dos túbulos seminíferos, a quantificação das células espermatogênicas, a descrição morfológica dos estádios do ciclo do epitélio seminífero (CES), a freqüência relativa com a qual aparecem no interior dos túbulos seminíferos e o rendimento geral da espermatogênese. No experimento, os animais foram divididos de acordo com a faixa etária, em cinco grupos, com três animais em cada grupo, sendo G1 (7 a 8 meses), G2 (9 a 10 meses), G3 (11 a 12 meses), G4 (13 a 14 meses) e G5 (15 a 16 meses). Os animais foram submetidos à cirurgia de orquiectomia, para obtenção das amostras testiculares, as quais foram fixadas em solução de Alfac por 24 horas e processadas histologicamente, onde cortes de 5 μm foram corados em Hematoxilina-Eosina. Tendo como base, o método da morfologia tubular, foi feita a quantificação dos tipos celulares corrigidos para seus diâmetros nucleares médios de 10 secções transversais de túbulos seminíferos no estádio 1 do CES para animais com a espermatogênese estabelecida e 20 secções transversais para os animais mais jovens, nos quais não havia atividade espermatogênica estabelecida; e também a classificação dos estádios do ciclo do epitélio seminífero, por meio da análise de 100 secções transversais de túbulos seminíferos. Os dados da biometria testicular, a saber, o peso, o comprimento e a largura, revelaram crescimento constante e gradual com diferenças estatísticas significativas (p<0,05) e alta correlação entre si. Os valores do diâmetro tubular apresentaram significância estatística do G1 ao G4, a partir deste, tiveram crescimento acelerado e contínuo, não havendo significância estatística (p >0,05). De acordo com as análises quantitativas e morfológicas das células espermatogênicas que compõem o epitélio germinativo, os grupos etários dos animais foram classificados nas fases seguintes: impúbere (G1), pré-púbere (G2), puberdade (G3), pós-puberdade 1 (G4) e pós-puberdade 2 (G5). A fase em que ocorreu o início da atividade reprodutiva, ou seja, a puberdade, foi determinada nos animais a partir de 11 meses de idade, onde ocorreu o maior crescimento no número de células espermatogênicas e uma correlação positiva com o peso testicular. Nessa fase, as células de Sertoli, apresentaram um decréscimo significativo (p<0,05). Na determinação da freqüência relativa dos estádios do ciclo do epitélio seminífero, foram observadas oito tipos de associações, segundo o método da morfologia tubular, onde o estádio com maior e menor freqüências foram o 1 e o 3, respectivamente. A fase pós-meiótica, apresentou maior freqüência e a fase meiótica, a menor, sendo estatisticamente significativa em relação às demais. A eficiência reprodutiva foi demonstrada por meio dos valores traduzidos pelas razões celulares entre as espermatogônias do tipo A e espermátides arredondadas, não tendo sido observado aumento significativo das espermátides arredondadas entre os grupos G3 ao G5 (p>0,05); e o índice das células de Sertoli apresentou diferença estatística significativa entre todas as possíveis comparações dos grupos etários do G3 ao G5 (p <0,05). / This study analyzes the development of spermatogenesis in peccaries (Tayassu tajacu) and establishes the age the reach puberty, considering testicular biometry and seminiferous tubules, the amount of spermatogenic cells, the morphological description of the stages of the seminiferous epithelium cycle (SEC), the relative frequency on which they surge inside the seminiferous tubules and general spermatogenesis yield. In the experiment, the animals were divided according to age bracket, into five groups, with three animals in each group, G1 (7 to 8 months), G2 (9 to 10 months), G3 (11 to 12 months), G4 (13 to 14 months) and G5 (15 to 16 months). The animals were subjected to orchiectomy surgery, to obtain the testicle samples, which were fixed in Alfac solution for 24 hours and histologically processed, where 5 μm cuts were stained in hematoxylin eosin. Based on the tubular morphology method, it was done the quantification of the cell types corrected to its average nucleus diameters of 10 transversal sections at SEC stage 1 for animals with established spermatogenesis and 20 transversal sections for the younger animals without any established spermatogenic activity; and also the classification of the stages of the seminiferous epithelium cycle, by analyzing 100 transversal sections of seminiferous tubules. The data from the testicular biometry, such as, weight, length and width, showed gradual and constant growth with significant statistical differences (p<0,05) and high correlation among themselves. The tubular diameter values presented statistical significance from G1 to G4, and from G4 an accelerated and continuous growth, with no statistical significance (p>0,05). According to the quantitative and morphological analysis of the spermatogenic cells which form the germinative epithelium, the animal age brackets were classified in the following phases impuberal (G1), prepuberal (G2), puberty (G3), pos puberty 1(G4), and pos puberty 2 (G5). The phase the productive activity started, or, puberty, was determined in the animals when they turned 11 months, when the the greatest growth in the number of spermatogenic cells and a positive correlation with testicular weight occurred. At this stage, the Sertoli cells, presented a significant decrease (p<0,05). During determination of relative frequency of the stages of seminiferous epithelium cycle, eight types of association were observed, according to the tubular morphology method, where the stages with greater and less frequency were 1 and 3 respectively. The pos meiotic phase showed more frequency and the meiotic phase, the lower one, being statistically significant in relation to the other ones. The reproductive efficiency was demonstrated through translated values by the cell ratios between type A spermatogonic cells and round spermatids, being that no significant increase between G3, G4 and G5 was observed (p>0,05); and the rate of Sertoli cells showed a significant statistical difference between all possible comparisons of age brackets from G3 to G5 (p< 0,05).

Submitted by Jordan (jordanbiblio@gmail.com) on 2017-03-02T17:03:16Z No. of bitstreams: 1 DISS_2015_Pedro Paulo Tsuneda.pdf: 1132820 bytes, checksum: d9120ff845d0a7e5ce5a679c7a376de2 (MD5) / Approved for entry into archive by Jordan (jordanbiblio@gmail.com) on 2017-03-03T11:50:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISS_2015_Pedro Paulo Tsuneda.pdf: 1132820 bytes, checksum: d9120ff845d0a7e5ce5a679c7a376de2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-03T11:50:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISS_2015_Pedro Paulo Tsuneda.pdf: 1132820 bytes, checksum: d9120ff845d0a7e5ce5a679c7a376de2 (MD5) Previous issue date: 2015-02-26 / CAPES / Os coprodutos agroindustriais, antes considerados um problema para a natureza, ressurgem demonstrando seus potenciais, devido ao seu poder em substituir alimentos tradicionais, reduzindo o custo com a alimentação. Durante o processo de produção do biodiesel, também se origina a glicerina, com teor de glicerol que pode variar de 80 a 90%, com potencial para utilização em dietas de ruminantes, em substituição de grãos energéticos, por exemplo, o milho. Porém, existem suspeitas que o glicerol utilizado na dieta possa interferir nos parâmetros espermáticos de reprodutores. Outro coproduto agroindustrial a ser explorado por vantagens de custo e da funcionalidade é o caroço de algodão, que não compete a alimento humano e sua composição é rica em energia e proteína. Porém em todas as estruturas da planta do algodoeiro existe uma toxina denominada gossipol. Trabalhos descrevem que o gossipol promove redução na concentração, inibição da motilidade e aumento da mortalidade de espermatozoides. O objetivo principal do trabalho foi avaliar se o caroço de algodão e glicerina bruta como ingredientes em suplementos múltiplos para bovinos Nelore em fase de terminação no período das águas interferiu nos parâmetros seminais e histopatologia testicular. Utilizou-se 40 bovinos Nelore com peso inicial de 472±23,23 kg e idade média de 30 meses. Os animais receberam dietas com dois níveis de caroço de algodão (0 e 25%) e dois níveis de glicerina bruta (0 e 15%) em suplementos múltiplos, sendo os tratamentos: SP (Concentrado sem adição de co-produtos, contendo 0% de glicerol e 0g Gossipol), CA (Concentrado com inclusão de 25% de caroço-de-algodão, contendo 0% de glicerol e 50g Gossipol/dia), GLIC (Concentrado com inclusão de 15% de glicerina, contendo 15% glicerol/MS e 0g Gossipol) e CAGLIC ( Concentrado com inclusão de 25% de caroço de algodão e 15% de glicerina, contendo 15% glicerol/MS e 50g Gossipol/dia), fornecendo-se 4 kg/animal/dia dos suplementos. As variáveis de parâmetros seminais analisadas foram: volume, motilidade, vigor, concentração, integridade de membrana plasmática integridade de membrana acrossomal, porcentagens de anormalidades menores, maiores e totais. Paralelamente às análises de parâmetros seminais avaliaram-se possíveis alterações histológicas dos parênquimas testiculares. A integridade de membrana plasmática sofreu interferência negativa (P<0,05) pelo tratamento, CAGLIC (23,062 ± 14,63) se comparado ao grupo GLIC e CA , ( 49,784 ± 17,60) e ( 48,039 ± 13,02), respectivamente. Nas variáveis: volume, motilidade, vigor, concentração, integridade de membrana acrossomal, porcentagens de anormalidades totais, anormalidades menores e maiores não houve influência dos tratamentos (P>0,05). Não houve diferença entre os tratamentos referente à histologia testicular. A glicerina e o caroço de algodão nos níveis utilizados na substituição energética do milho e proteica do farelo de soja em dietas de touros não interferiram na qualidade espermática e na histologia testicular dos reprodutores. / The agro-industrial byproducts, once considered a problem for nature, resurface demonstrating its potential, due to its power to replace traditional foods, reducing the cost of food. In the biodiesel production process also leads to glycerin, glycerol content which can vary from 80 to 90%, with a potential for use in ruminant diets, replacing energy grains such as corn. However, there are suspicions that the glycerol in the diet can interfere with sperm breeding parameters. Another byproduct agribusiness to be explored by cost advantages and functionality is the cotton seed, that it is not for human food and its composition is rich in energy and protein. But in all cotton plant structures there is a toxin called gossypol. Papers state that gossypol promotes reduction in the concentration, inhibition of motility and increased sperm mortality. The main objective was to assess whether the cottonseed and crude glycerin as ingredients in multiple supplements for Nellore finishing phase during the wet season interfered in semen parameters and testicular histopathology. We used 40 Nellore with initial weight of 472 ± 23.23 kg and mean age of 30 months. The animals were fed diets with two cottonseed levels (0 and 25%) and two crude glycerin levels (0 and 15%) in multiple supplements, with the treatments: SP (concentrate with no added co-products containing 0% 0g glycerol and gossypol), CA (concentrate 25% with the inclusion of seed cotton-containing 0% glycerol and Gossypol 50g / day), GLIC (Concentrate with inclusion of 15% glycerol containing 15% glycerol / MS and 0g Gossypol) and CAGLIC (concentrate 25% with the inclusion of cottonseed and 15% glycerol containing 15% glycerol / MS and Gossypol 50g / day), providing up 4 kg / animal / day supplements. The variables of seminal parameters analyzed were: volume, motility, vigor, concentration, plasma membrane integrity integrity of acrosome membrane, percentages of minors, major and total abnormalities. Together with evaluation of semen parameters were evaluated possible histological changes of testicular parenchyma. The plasma membrane integrity suffered negative interference (P <0.05) by treatment CAGLIC (23.062 ± 14.63) compared to the GLIC and AC group (49.784 ± 17.60) and (13.02 ± 48.039) respectively. In the variables: volume, motility, vigor, concentration, acrosome membrane integrity, percentages of total abnormalities, minor abnormalities and higher there was no influence of the treatments (P> 0.05). There was no difference between treatments on the testicular histology. Glycerin and the cotton seed in the levels used in the energy substitution of corn and protein soybean meal in diets bulls did not affect the sperm quality and testicular histology of players.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 332986 bytes, checksum: 266b8ef630ac7176f6d6bad826615c84 (MD5) Previous issue date: 2006-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / To study the spermatogenetic cycle in ocelots, were used, three adult males, proceeding from the Centro de Triagem de Animais Silvestres the Federal University of Viçosa and two adult males proceeding from the Fundação Zoobotânica of Belo Horizonte/MG/Brazil, authorized by the IBAMA-MG. These animals were submitted to general anesthesia, weighed and its testis were measured and biopsied to obtain, representative fragments. After this, the fragments histologically processed and analyzed in light microscopy. The average value for the age of the studied animals was 5.6 years and for the body weight was 14.5 kg. Using the volumetric calculation, it was observed a testicular mass 8.5 g. The gonadosomatic index was 0.12%, the tubulosomatic index was 0.074% and the leydigosomatic index was 0.0036%. In adult male ocelots, the testicular albuginea represents 23.42% of the testicular mass. The testicular parenchyma of adult ocelots is constituted by 80.58 % seminipherous tubules and 19.39% of intertubular tissue, with volume respective 10.53 e 2.58 ml. Most of the intertubular tissue is constituted by loose connective tissue. The mean diameter of the cross section of the seminipherous tubules in the adult ocelot was 211.37 µm, while the average thickness of seminipherous tubules was 75.38 µm. The adult ocelot presents around 17.81 m of seminipherous tubules for each gram of testis. The spermatogonias of the adult male ocelot possess a bigger coefficient of mitoses efficiency and the sperm production registered between the felines already studied. However, the Sertoli cells maintain its support capacity, in the same range observed for the felines. The spermatids reserve for each cycle of the seminipherous epithelium was approximately 3.7 billions for each gram of testis, the greatest quantity already registered between the studied mammals. The Leydig cell of ocelot presented a single, rounded nucleus with a fine layer of heterochromatin near to the nuclear envelope, and only one nucleolus. Too, it was observed a variable quantity of lipofuccin in its cytoplasm. The adult ocelot presents about 33.39 millions of Leydig cells in each gram of testis. In this animal, volume of the Leydig cells 913.39 µm3. The ocelot presents a small volume of the Leydig cell but a similar number for each gram of testis as related to other studied felines. / Foram utilizadas no presente experimento, cinco jaguatiricas machos adultas, sendo três provenientes do Centro de Triagem de Animais Silvestres da Universidade Federal de Viçosa e duas da Fundação Zoobotânica de Belo Horizonte-MG, devidamente autorizado pelo IBAMA-MG. Estes animais foram submetidos à anestesia geral, pesados, tiveram os testículos mensurados e biopsiados para obtenção de fragmentos representativos, os quais foram processados histologicamente, e analisados em microscopia de luz. A idade média dos animais estudados foi de 5,6 anos, e o peso corporal médio foi de 14,5 kg. Através do cálculo volumétrico a massa testicular média foi de 8,5 g. O índice gonadossomático encontrado foi de aproximadamente 0,12 %, o índice tubulossomático de 0,074% e o índice leydigossomático de 0,0036%. Em jaguatiricas machos adultas, a albugínea testicular representa 23,42% da massa testicular. O parênquima testicular de jaguatiricas adultas apresenta 80,58% de sua massa alocada em túbulos seminíferos e 19,39% alocados em tecido intertubular, perfazendo respectivamente um volume de 10,53 e 2,58 ml. A maior parte do tecido intertubular está alocado em tecido conjuntivo frouxamente distribuído. O diâmetro da secção transversal de túbulos seminíferos na jaguatirica adulta foi em média 211,37 µm, enquanto a espessura média do epitélio seminífero foi de 75,38 µm. A jaguatirica adulta apresenta em torno de 17,81 metros de túbulo seminífero por grama de testículo. As jaguatiricas machos adultas possuem o maior coeficiente de eficiência de mitoses espermatogoniais e rendimento geral da espermatogênese registrados entre todos os felinos já estudados; porém, a capacidade de suporte das células de Sertoli encontra-se dentro da amplitude observada para os demais felinos. A reserva de espermátides nas jaguatiricas é de aproximadamente 3,7 bilhões de espermátides produzidas a cada ciclo do epitélio seminífero por grama de testículo, sendo a maior já documentada entre os mamíferos já estudados. A célula de Leydig da jaguatirica apresentou-se uninucleada, com o núcleo arredondado contendo uma fina camada de heterocromatina ao longo do envelope nuclear e, na maioria das vezes, um único nucléolo. Observam-se, ainda, montantes variáveis de pigmentos de lipofuccina em seu citoplasma. A jaguatirica adulta apresenta cerca de 33,39 milhões de células de Leydig alocados por grama de testículo, com volume unitário de 913,39 µm3. Embora as jaguatiricas possuam células de Leydig com pequeno volume unitário, o número destas células por grama de testículo é semelhante àquele dos demais felinos estudados.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 829087 bytes, checksum: 53a595f1be1470ef16a089fa9a53d992 (MD5) Previous issue date: 2004-03-31 / The present work proposed evaluating the organization of the components of the testes, the seminiferous epithelium cycle, the intrinsic yield of each fase of spermatogenic process, the testicular sperm reserve, as well as the correlations of these items with corporal and testicular biometric parameters.The medium corporal weight of the jaguar in the present experiment was 78,5 kg, of which about 0,034% are located in the testicular mass, and 0,022% specifically in the seminiferous tubules, which represented about 77,7% of the testicular parenchyma. The average diameter of seminiferous tubules in jaguars was 257 µm, and the average thickness of the seminiferous epithelium was about 90m. Jaguars have about 12,2 meters of seminiferous tubules by testicle gram. The general spermatogenic yield of the jaguar was about 23,4 cells and each Sertoli cell was able to sustain and to keep about 19,2 germ cells, 11 of which were round spermatides. In each seminiferous epithelium cycle about 166 million of spermatozoids were produced by testicle gram. In the jaguar the Leydig cells occupy an average 0,0036% of the corporeal weight and its average number by testicle gram is within the scope for most mammals: between 20 and 40 million. The obtained data supplied pertinent information about the spermatogenic process of this feline of the brazilian fauna, for subsidy to projects of conservation and protection of the wild life that involve reproduction programs. / O presente trabalho propôs avaliar a organização dos componentes do testículo, o ciclo do epitélio seminífero, o rendimento intrínseco de cada fase do processo espermatogênico, a reserva espermática testicular, bem como as correlações destes itens com parâmetros biométricos corporais e testiculares. O peso corporal médio das onças-pintadas do presente experimento foi de 78,5 kg, dos quais cerca de 0,034% são alocados em massa testicular e 0,022% especificamente em túbulos seminíferos, que representaram cerca de 77,7% do parênquima testicular. O diâmetro médio dos túbulos seminíferos em onça-pintada foi de 257&#956;m, e a espessura média do epitélio seminífero foi de aproximadamente 90&#956;m. A onça-pintada apresenta cerca de 12,2 metros de túbulo seminífero por grama de testículo. O rendimento geral da espermatogênese da onça-pintada foi de aproximadamente 23,4 células, e cada célula de Sertoli foi capaz de sustentar e manter aproximadamente 19,2 células da linhagem germinativa, das quais cerca de 11 são espermátides arredondadas. A cada ciclo do epitélio seminífero, cerca de 166 milhões de espermatozóides são produzidos por grama de testículo. Em onças-pintadas as células de Leydig ocupam em média 0,0036% do peso corporal e seu número médio por grama de testículo apresentou-se dentro da amplitude descrita para a maioria dos mamíferos, entre 20 e 40 milhões. Os dados obtidos fornecem informações pertinentes sobre o processo espermatogênico deste felino da fauna brasileira, para subsídio a projetos de conservação e proteção da vida silvestre que envolvam programas de reprodução.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-11T14:42:47Z No. of bitstreams: 1 Guadalupe de Carvalho Xavier.pdf: 1269249 bytes, checksum: 9e9b65665bfe96096243db3a76a3bafa (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T14:42:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guadalupe de Carvalho Xavier.pdf: 1269249 bytes, checksum: 9e9b65665bfe96096243db3a76a3bafa (MD5) Previous issue date: 2007-02-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Aiming to evaluate the effect of diet supplementation with Selenium and Vitamin E (Selevit E®) on the testis and seminal parameters of goats induced to scrotal insulation, it were used 12 animals with age varying between seven and eight months, distributed randomly in two groups (G1= Control; G2= Selenium and Vitamin E) and submitted to adaptation period of 60 days. In this period the animals were submitted to two semen harvests and weighted each seven days to supplement and diet correction on the G2 animals. Before putting the testis plastic bags to SI, it was measured scrotal circumference of all animals. Animals of both groups were induced to SI during 18 days, period of which they were submitted to six semen harvests, one before SI (0d), one at the finish of SI (18d) and four on the post-insulation period (PSI). At the end of SI, it was chosen randomly three animals of each group to be submitted to bilateral orchiectomy. The G2 animals have diet supplementation with Selenium and Vitamin E during this period. The maintenance diet was offered to both groups during 42 days, corresponding to post-scrotal insulation (PSI). At the end of this period, the animals of G1 and G2 groups also were orchietomized to have biometric and volumetric testis parameters, where left and right testis as well as left and right epididymis were weighted and prepared to biometric and histometric analyses. The semen harvests were done by eletroejaculation method. The Seleniun and Vitamin E group animals have significantly high scrotal circumference at the end of SI, whereas the Selenium and Vitamin E group had values significantly higher of scrotal circumference at the end of SI, whereas the Control animals were more sensitive to degenerative effects of the SI on the same period. The SI time had significant effect on the quanti-qualitative characteristics of the semen on the animals of both groups (G1 and G2), with reduction of the evaluated parameters (PM, vigor, sperm concentration, acrosoma and DNA integrity), except to semen volume. At the same way it was observed damages like testis degeneration on orchiectomized animals of both groups. However, there was significant difference on the biometric and volumetric parameters of testis parenchyma only to blood vessel volume at this period. In contrast, the serum testosterone concentration increased highly at the end of SI and differed between groups (P<0.05). During the PSI period (36d PSI) there was no treatment effect on the seminal parameters, but it was observed day effect. However, at the end of PSI period the seminal parameters have values close to basal day (0d). The biometric and volumetric parameters of testis parenchyma, at the end of PSI period, have significant difference on the seminiferous tubules and seminiferous epithelium, as well as on the tubular diameter and ephitelium height of goats induced to scrotal insulation. It was observed also significant variation between groups to serum testosterone concentration. It can be concluded that the supplementation with Selenium and Vitamin E did not prevent drastic alterations caused by scrotal insulation technique. However, the continuous supplementation, 36 days after the end of SI, accelerated the spermatogenic recuperation process on goats. / Objetivando verificar o efeito da suplementação alimentar com Selênio e Vitamina E (Selevit E®) nos parâmetros testiculares e seminais de caprinos submetidos a estresse térmico induzido por insulação escrotal (IE), utilizou-se 12 animais com idade variando entre 7 e 8 meses, os quais foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos (G1= Controle; G2= Selênio e Vitamina E - Selevit E), passando por um período de adaptação de 60 dias, período no qual os animais foram submetidos a duas colheitas de sêmen e pesados a cada sete dias para correção alimentar de dieta de mantença e correção da suplementação para o G2. Antes de serem colocadas as bolsas para IE, realizou-se a mensuração da circunferência escrotal dos animais de ambos os grupos. Animais de ambos os grupos foram induzidos a IE durante 18 dias, período no qual foram submetidos a duas colheitas de sêmen, uma anterior à IE (0d), uma ao término da IE (18d) e quatro no período PIE (7, 21, 35 e 42d). Ao término da IE, sortearam-se aleatoriamente três animais de cada grupo para orquiectomia bilateral, mantendo-se a suplementação alimentar com Selênio e Vitamina E nos animais restantes do G2. A dieta de mantença foi fornecida para ambos os grupos por mais 42 dias, correspondendo à fase de pós IE (PIE), no final do qual os animais restantes de G1 e G2 também foram orquiectomizados para registro de parâmetros biométricos e volumétricos do parênquima testicular, onde os testículos direito e esquerdo, assim como o epidídimo direito e esquerdo, foram pesados e preparados para posterior análise biométrica e histométrica. As colheitas de sêmen foram realizadas pelo método de eletroejaculação. O grupo de animais que recebeu Selênio e Vitamina E teve média significativamente maior de circunferência escrotal ao término da IE, enquanto que o grupo controle apresentou-se mais suscetíveis aos efeitos degenerativos da IE. O tempo de IE teve efeito significativo sobre as características quanti-qualitativas do sêmen nos animais de ambos os grupos (G1 e G2), com redução dos parâmetros avaliados (MIP, vigor, concentração espermática, integridade de DNA e de acrosoma), exceto o volume seminal. Da mesma forma, observou-se lesões compatíveis com degeneração testicular nos animais orquiectomizados de ambos os grupos. No entanto, constatou-se diferença significativa para os parâmetros biométricos e volumétricos do parênquima testicular apenas para o parâmetro vaso sanguíneo nesse mesmo período. Em contrapartida, a concentração sérica de testosterona aumentou significativamente ao término da IE e diferiu estatisticamente (P<0,05) entre os grupos. Durante o período PIE (42d PIE) não foi observado efeito de tratamento nos parâmetros seminais, mas constatou-se efeito de dias. No entanto, ao término do período PIE os parâmetros seminais apresentaram-se, em média, com valores próximos aos valores antes da IE. Os parâmetros biométricos e volumétricos do parênquima testicular, ao término do período PIE, evidenciaram diferença significativa para os parâmetros de túbulo seminífero, epitélio seminífero, diâmetro tubular e altura de epitélio. Pode-se observar também variação significativa entre os grupos para a concentração sérica de testosterona. Conclui-se que o suplemento com Selênio e Vitamina E não previniu ou reverteu os efeitos provocados pela técnica de insulação escrotal. Entretanto, a continuação desta suplementação, 42 dias após término da IE, acelerou a recuperação do processo espermatogênico em caprinos.