CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / De acordo com o MinistÃrio da SaÃde do Brasil, as serpentes do gÃnero Bothrops sÃo as principais envolvidas nos acidentes ofÃdicos no paÃs e a insuficiÃncia renal aguda (IRA) à uma complicaÃÃo grave dos envenenamentos por estas serpentes. Neste trabalho, foram investigados os efeitos renais do veneno total de Bothropoides pauloensis (VBp) em sistema de rim isolado de rato e em cultura de cÃlulas tubulares renais da linhagem MDCK (Madin-Darby Canine Kidney). Para perfusÃo de rim isolado foram utilizados ratos Wistar pesando entre 250 e 300g, cujos rins foram excisados cirurgicamente e perfundidos com soluÃÃo de Krebs-Henseleit contendo 6%p/v de albumina bovina previamente dialisada. Foram investigados os efeitos do VBp (3Âg/mL e 10 Âg/mL; n=6). Verificamos queda na pressÃo de perfusÃo (PP) na concentraÃÃo de 10μg/mL aos 90 e 120 min. A resistÃncia vascular renal (RVR) tambÃm diminuiu na concentraÃÃo de 10μg/mL aos 90 e 120 minutos e na concentraÃÃo de 3 μg/mL aos 120 min. O fluxo urinÃrio (FU) diminuiu aos 90 e 120 minutos em ambas as concentraÃÃes, nÃo apresentando diferenÃa significativa entre as concentraÃÃes no tempo de 120min. O ritmo de filtraÃÃo glomerular (RFG) apresentou uma reduÃÃo aos 60 minutos em ambas as concentraÃÃes, mantendo-se diminuÃda atà o final do experimento, nÃo havendo diferenÃa significativa entre as concentraÃÃes no tempo de 60min. O percentual de transporte tubular de sÃdio (%TNA+) foi reduzido em ambas as concentraÃÃes nos tempos de 60,90 e 120min, nÃo apresentando diferenÃa significativa entre as concentraÃÃes no tempo de 60 min; O transporte tubular de cloreto(%TCl-) tambÃm foi reduzido aos 60, 90 e 120min. Em ambas as concentraÃÃes; O transporte tubular de potÃssio (%TK+) diminuÃram aos 60, 90 e 120 minutos na concentraÃÃo de 10μg/mL, na concentraÃÃo de 3μg/mL reduziu aos 60 min,retornando a valores prÃximos ao controle no tempo de 90 e 120min. NÃo havendo diferenÃa significativa entre as concentraÃÃes nos tempos de 60 e 90 min. A anÃlise mostrou a presenÃa de alteraÃÃes morfolÃgicas significativas, como acÃmulo de proteÃnas a nÃvel tubular. Na cultura de cÃlulas MDCK, o VBp foi capaz de diminuir a viabilidade celular (CI50= 7,5μg/mL). Citometria de fluxo com anexina V e iodeto de propÃdio mostrou que a morte celular ocorreu predominantemente por apoptose. Tratamento com VBp (7,5 μg / mL) levou a despolarizaÃÃo significativa do potencial de membrana mitocondrial. Verificamos a geraÃÃo de EspÃcies Reativas de OxigÃnio. A anÃlise morfolÃgica das cÃlulas mostrou caracterÃsticas indicativas de apoptose. Esses resultados demonstram que o veneno de B. pauloensis alterou todos os parÃmetros renais avaliados na perfusÃo de rim isolado e foi citotÃxico para cultura de cÃlulas MDCK. / According to the Ministry of Health of Brazil, Bothrops are the main involved in snakebites in the country and acute kidney injury is a serious complication of poisoning by these snakes. In this work, we investigated the renal effects of total venom Bothropoidespauloensis (VBP) in isolated rat kidney system and in cultured renal tubular cell line MDCK (Madin - Darby Canine Kidney). For perfusion of isolated kidney Wistar rats were used weighing 250- 300g, whose kidneys were surgically excised and perfused with Krebs- Henseleit solution containing 6% w/v pre-dialysed bovine serum albumin. The effects of VBp (n = 3μg/mL and 10 mg/mL; n=6) was investigated. Reduction was observedin perfusion pressure (PP) at a concentration of 10μg/mL at 90 and 120 min. Renal vascular resistance (RVR) also decreased the concentration of 10μg/mL at 90 and 120 minutes and at a concentration of 3 mg/mL at 120 min. The urinary flow (FU) decreased at 90 and 120 minutes in both concentrations, no significant difference between the concentrations at the time of 120min. The glomerular filtration rate (GFR) was reduced to 60 minutes in both concentrations and remained decreased until the end of the experiment, no significant difference between the concentrations in the time of 60min. The percentage of tubular sodium transport (%TNA+) was reduced by both concentrations in times of 60, 90 and 120 min, with no significant difference between the concentrations at time 60 min. The tubular transport of chloride (%TCl-) was also reduced to 60, 90 and 120 min. In both concentrations; the tubular potassium transport (%TK+) decreased at 60, 90 and 120 minutes at a concentration of 10μg/mL in a concentration of 3μg/mL reduced to 60 min, returning to near control at 90 and 120min values. No significant difference between the concentrations in the times of 60 and 90 min. The analysis showed the presence of significant morphological changes such as the accumulation of proteins plate level in the culture of MDCK cells, the VBP was able to reduce cell viability (IC50 = 7.5 g/ mL). Flow cytometry with Annexin V and propidium iodide showed that cell death occurred by apoptosis predominantly. VBP treatment ( 7.5 mg/ml) led to a significant depolarization of the mitochondrial membrane potential. We verified the generation of Reactive Oxygen Species. Morphological analysis of the cells showed features indicative of apoptosis. These results demonstrate that the venom of B. pauloensis altered all renal parameters evaluated in the kidney perfusion was cytotoxic to isolated and MDCK cell culture.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / 2-Nitro-1-fenil-1-propanol (NFP) à um nitro-Ãlcool utilizado como intermediÃrio quÃmico na sÃntese de norefedrina e efedrina, agonistas simpatomimÃticos. Sua estrutura quÃmica assemelha-se com a da norefedrina, com substituiÃÃo do grupo NH2 pelo NO2. A presenÃa do grupo nitro nos levou a hipÃtese deste composto ser capaz de produzir efeito vasodilatador, visto que foi demonstrada em estudo prÃvio a aÃÃo vasodilatadora do nitrocomposto 1-nitro-2-feniletano, resultante da estimulaÃÃo da via guanilil ciclase-GMPc. Assim, nosso objetivo foi caracterizar o efeito do NFP em preparaÃÃes vasculares isoladas de ratos. ContraÃÃes isomÃtricas de anÃis isolados da aorta torÃcica ou de ramos de 2Â-3 geraÃÃo da artÃria mesentÃrica de ratos Wistar com ou sem endotÃlio funcional foram registradas por sistema de aquisiÃÃo de dados. NÃveis de nucleotÃdeos cÃclicos foram medidos por ELISA. Sinais de fluorescÃncia ao Ca2+ e de forÃa foram capturados simultaneamente em microscÃpio confocal acoplado a sistema de aquisiÃÃo de dados. Em anÃis de aorta isolada com endotÃlio intacto, NFP relaxou preparaÃÃes contraÃdas com fenilefrina (1 ÂM), K+ (60 mM) ou U-46619 (0,3 ÂM) com CE50 de 30,2 [25,5 - 35,7], 31,8 [27,1-37,3] e 28,5 [23,1-35,2] ÂM, respectivamente. Por outro lado, em vasos mesentÃricos, NFP relaxou as preparaÃÃes contraÃdas com fenilefrina (10 ÂM), K+ (60 mM) ou U-46619 (1 ÂM) com CE50 de 0,41 [0,31-0,55], 0,16 [0,10-0,24] e 15,1 [10,4-24,4] ÂM, respectivamente, indicando maior potÃncia do NFP nesses tecidos. O aumento da concentraÃÃo extracelular de K+ produziu diminuiÃÃo gradual do efeito relaxante do NFP em vasos mesentÃricos. O prÃ-tratamento com TEA nÃo afetou o efeito relaxante do NFP em anÃis de aorta, contudo, vasos mesentÃricos prÃ-tratados com TEA, BaCl2, CsCl ou apamina responderam menos ao NFP. PrÃ-tratamento com indometacina, glibenclamida, 4-aminopiridina ou L-NAME nÃo alterou seu efeito relaxante em ambas as preparaÃÃes. Em contrapartida, sua potÃncia foi significativamente reduzida pelo tratamento prÃvio com ODQ (inibitor de guanilil ciclase), MDL 12,330A (inibitor de adenilil ciclase), H-89 (inibitor de PKA) ou bisindolilmaleimida IV (inibitor de PKC). NFP inibiu a vasoconstriÃÃo induzida por Ca2+ em aorta prÃ-contraÃda com fenilefrina ou K+, efeito prevenido pelo prÃ-tratamento com ODQ ou MDL-12,330A. AlÃm disso, NFP apresentou uma tendÃncia para o aumento dos nÃveis de GMPc e AMPc em anÃis de aorta. A atividade vasorrelaxante do NFP foi maior na presenÃa do Y-27632, inibidor de Rho-cinase. Em vasos mesentÃricos, NFP inibiu simultaneamente a forÃa e a intensidade de fluorescÃncia ao Ca2+, indicando que este composto à capaz de diminuir a concentraÃÃo citossÃlica deste Ãon. Portanto, NFP possui aÃÃo vasodilatadora de maior potÃncia em vasos mesentÃricos. Os mecanismos envolvidos em seu efeito parecem envolver a participaÃÃo dos nucleotÃdeos cÃclicos, o controle do influxo de Ca2+ e a regulaÃÃo da sensibilidade dos filamentos contrÃteis ao Ca2+ e o controle do influxo de Ca2+. AlÃm disso, evidÃncias apontam que a abertura de canais para potÃssio parece estar envolvida no seu efeito em vasos mesentÃricos, mas nÃo em aÃrticos. / 2-Nitro-1-phenyl-1-propanol (NPP) is a nitro-alcohol used as a chemical intermediate in the synthesis of ephedrine and norephedrine, sympathomimetic agonists. Its chemical structure resembles the norephedrine, with replacement of the NH2 group by NO2. The presence of the nitro group led us to consider that this compound is able of produce vasodilatory effect, since it was demonstrated in a previous study the vasodilator actions of the nitro compound 1-nitro-2-phenylethane, resulting from stimulation of the guanylate cyclase-cGMP pathway. Our aim was to characterize the effect of on rat isolated vessels. Isometric contractions of isolated rings of thoracic aorta or 2nd-3rd generation branchs mesenteric artery of Wistar rats were recorded by data acquisition system. Cyclic nucleotide levels were measured by ELISA. Signals of strength and calcium fluorescence were simultaneously captured in confocal microscope connected to the data acquisition system. On isolated aorta with intact endothelium, NPP relaxed preparations contracted with phenylephrine (1 ÂM), K+ (60 mM) or U-46619 (0.3 ÂM) with EC50 of 30.2 [25.5 - 35.7], 31.8 [27.1 - 37.3] and 28.5 [23.1 - 35.2] ÂM, respectively. Conversely, in mesenteric vessels, NPP relaxed preparations contracted with phenylephrine (10 ÂM), K+ (60 mM) or U-46619 (1 ÂM) with EC50 of 0.41 [0.31 - 0.55], 0.16 [0.10 - 0.24] and 15.1 [10.4 - 24.4] ÂM, respectively, showing higher potency of NPP in these tissues. The extracellular K+ concentration increase produced gradual decrease in the relaxant effect of the NPP in mesenteric vessels. Pre-treatment with TEA had no effect in the relaxant effect of NPP in aortic rings, however, pretreated mesenteric vessels with TEA, BaCl2, CsCl ou apamin responded less to NPP. Pre-treatment with indomethacin, glybenclamide, 4-aminopyridine or L-NAME did not affect the vasorelaxant effect of the NPP in either aorta or mesenteric vessels. However, its potency was significantly reduced by ODQ (guanylate cyclase inhibitor), MDL-12,330A (adenylate cyclase inhibitor), H-89 (PKA inhibitor) or bisindolylmaleimide IV (PKC inhibitor) pre-treatment. NPP inhibited the vasoconstriction induced by Ca2+ in aorta pre-contracted with phenylephrine or K+, an effect prevented by pretreatment with ODQ or MDL-12,330A. Furthermore, NPP showed a tendency to increase the levels of cAMP and cGMP in aortic rings. The vasorelaxant activity of the NPP was higher in the presence of Y-27632, a Rho- kinase inhibitor. In mesenteric vessels, NPP inhibited both the strength and the calcium fluorescence intensity, indicating that this compound is able to decrease the cytosolic concentration of this ion. So, NPP has vasodilatory action with higher potency in mesenteric vessels. The mechanisms involved in it effect appear to involve the participation of cyclic nucleotides, the control of Ca2+ influx and the regulation of sensitivity of contractile filaments to Ca2+. Moreover, evidences support that the opening of potassium channels is involved in it effect in mesenteric vessels, but not in aortic.

nÃo hà / IntroduÃÃo: Um estudo clinico aberto randomizado para avaliar a viabilidade de um esquema uniforme de 6 meses para tratar todos os pacientes de hansenÃase (U-MDT/CT-BR) està sendo desenvolvido desde 2007 em dois centros de referÃncia do MinistÃrio da SaÃde. A introduÃÃo da clofazimina na terapÃutica dos pacientes paucibacilares causa questionamento quanto a possÃvel aumento dos efeitos adversos à MDT. Objetivos: descrever os efeitos adversos secundÃrios à MDT em pacientes que participam do Estudo Clinico Randomizado para Tratamento Uniforme de Multidrogaterapia para HansenÃase no Brasil (U-MDT/CT-BR), comparando sua incidÃncia e gravidade entre os que receberam o esquema uniforme (U-MDT) e os que receberam o tratamento atual recomendado pela OMS (R-MDT). Pacientes e mÃtodos: os pacientes foram recrutados de marÃo de 2007 a fevereiro de 2012 e, apÃs classificaÃÃo operacional, alocados por randomizaÃÃo aleatÃria em um dos grupos do estudo. Durante o tratamento, retornaram mensalmente para avaliaÃÃo clÃnica e laboratorial, visando o monitoramento de possÃveis efeitos adversos. Resultados: foram incluÃdos 864 pacientes. PigmentaÃÃo cutÃnea (21,7%) e xerose (16,9%) foram as queixas mais frequentes. Os exames laboratoriais mostraram concentraÃÃo de hemoglobina menor que 10g/dL em 23,3% dos pacientes, e TGO/ TGP acima de 40Ui/L em 27,3% e 27,7% dos pacientes, respectivamente. Vinte e quatro pacientes (2,8%) tiveram a dapsona suspensa por efeitos adversos, dos quais 16 (66,7%) por anemia. Houve um caso de sÃndrome da sulfona. NÃo houve diferenÃas significativas dos efeitos adversos nos quatro braÃos do estudo. ConclusÃo: A similaridade dos efeitos adversos à MDT nos quatro braÃos do estudo apontam para a viabilidade de um esquema uniforme de 6 meses para todos os pacientes de hansenÃase. / Background: An open label randomized clinical trial to evaluate the effectiveness of an uniform six-months regimen to treat all leprosy patients (U-MDT/CT-BR) is being conducted in two national referral centers of the National Leprosy Control Program. Adding clofazimine to the current treatment for paucibacillary patients causes inquiry into possible increasing adverse effects to MDT. Objective: to describe the adverse effects due to MDT in patients who participated in the Randomized Clinical Trial for Uniform Multidrug Therapy for Leprosy Patients in Brazil (U-MDT/CT-BR), comparing the incidence and severity between those who received uniform regimen (U-MDT) and those who received current WHO regimen (R-MDT). Patients and methods: patients were enrolled in the study from March 2007 to February 2012, and, after the operational classification, were randomly allocated in one group of the study. During treatment, they returned monthly for clinical and laboratorial evaluation, in order to monitor possible adverse effects. Results: 864 patients were included in the study. Skin pigmentation (21.7%) and xerosis (16.9%) were the most frequent complaints. Laboratory exams showed hemoglobin concentration lower than 10g/dL in 23.3%, and STGO/STGP above 40Ui/L in 27.3% e 27.7% of patients, respectively. Twenty four patients(2,8%) had dapsone interrupted due to adverse effects, from whom 16.6% for anemia. One case of sulfone syndrome was reported. No differences statically significant were found in adverse effects between the four arms of the study. Conclusions: The similarities in the adverse effects of MDT in all the arms of the study point to the viability of a six-month uniform regimen of treatment for all leprosy patients.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / IntroduÃÃo e Justificativa: Calotropis procera (CP). Planta comum em climas Ãrido e semiÃrido, apÃs dano mecÃnico produz lÃtex. CP na Ãsia tem uso popular, medicinal. A fraÃÃo borracha à muito tÃxica, sendo desprezada e uma fraÃÃo proteica do lÃtex separada e liofilizada, a (LP). Metodologia: Aprovado o protocolo experimental no comità de Ãtica para animais (CEPA/UFC n 67/2012) ratos adultos machos (n = 4 a 6 por grupo) submetidos a experimentos avaliando possÃveis efeitos fisiolÃgicos e toxicolÃgicos: cardiovasculares e renais, na presenÃa de LP, por tÃcnicas in vivo, ex vivo e in vitro: Medida da pressÃo arterial mÃdia (PAM); PerfusÃo renal em rim isolado; Histologia hematoxilina/eosina (HE); Citometria de fluxo; Teste de InibiÃÃo de crescimento celular: MTT. Resultados: LP injetada na jugular mostra hipotensÃo em ratos, em 144 Âg/ml, sendo -22% de queda da PAM, atà -29% em 444 Âg/ml, ambas as concentraÃÃes cumulativas, sem efeito na frequÃncia cardÃaca nem em vasos de resistÃncia. Na perfusÃo renal a LP em todas as concentraÃÃes e tempos reduziu o ritmo de filtraÃÃo glomerular (0,1649Â0,027* versus (vs) 0,740Â0,02), e tambÃm o percentual de transporte de eletrÃlitos %TNa+ (72,15Â4,526* vs 81,30Â0,03), %TCl- (69,31Â4,441* vs 77,10Â0,29) e %TK+ (68,51Â5,660* vs 74,78Â0,14) versus o controle, sendo concentraÃÃo e tempo dependentes. Jà em 30 Âg/ml, houve reduÃÃo do fluxo urinÃrio apenas nos tempos de 90 e 120 minutos, porÃm nessa concentraÃÃo e tempos nÃo reduziu %TK+ um fenÃmeno explicando o outro parcialmente. (HE) mostra lesÃo nos tÃbulos renais nas concentraÃÃes de 10 e 30 Âg/ml, e mais severa em 100 Âg/ml. A LP adicionada em cÃlulas tubulares renais caninas (MDCK) em cultura iniciou morte celular na concentraÃÃo de 6,25 Âg/ml atà 200 Âg/ml Na citometria de fluxo a 100 Âg/ml a maioria das cÃlulas morreu por necrose ou apoptose tardia. Os escores de lesÃes renais feitos em lÃminas histolÃgicas mostram dano renal induzido por LP em Ãreas tubulares renais. ConclusÃo: Efeitos tÃxicos no tecido renal, histologia (HE), perfusÃo renal, e MDCK podem explicar em parte alteraÃÃes na filtraÃÃo glomerular e reabsorÃÃo tubular, e indiretamente a hipotensÃo observada in vivo. Para elucidar melhor os mecanismos mais experimentos sÃo necessÃrios. / Introduction and aim: Calotropis procera (CP) is a laticifer plant adapted in arid and semiarid climates, when mechanically damaged it produces latex. CP in Asia is used in popular medicine. Its rubber fraction is removed cause is high toxic. A protein fraction is separated from the latex of CP, it is (LP). Methodology: After experimental protocol approved to ethic committee in animals (CEPA/UFC nÂ67/2012), male adults rats (n = 4 till 6 per group) submitted to cardiovascular and renal approaches, using in vivo, ex vivo and in vitro, in order to investigate toxicological and physiological properties of LP. Mean arterial pressure measured (PAM); Renal perfusion from isolated kidney; Histology hematoxylin/eosin (HE); Flow cytometry; Test for inhibition cell growing: MTT. Results: LP showed a hypotensive effect initiated when LP 144 Âg/ml injected in jugular of rat, leading a PAM decrease -22% , and falling -29%, 444 Âg/ml, both cumulative concentrations with no cardiac frequency or small vascular resistance effects. In Renal perfusion had diminishing of glomerular filtration rate (RFG) (0,1649Â0,02734* versus (vs) 0,740Â0,02) and electrolytes reabsorption at Na+ (%TNa+) (72,15Â4,526* vs 81,30Â0,03), and Cl- (%TCl-) (69,31Â4,441* vs 77,10Â0,29), and K+ (%TK+) (68,51Â5,660* vs 74,78Â0,14),. versus control and it depended on concentration and time. Already at 30 mg/ml decreased urinary flow only in times of 90 and 120 minutes, however in the same concentration and times had no reduction in% TK +, a phenomena which explained the other one. (HE) showed renal tubules damage at 10 and 30 Âg/mL, more severe at 100 Âg/ml concentration LP had toxicity added at canine tubular renal cells in culture, Madin Darbin Canine Kidney (MDCK), since 6,25 g/mL, increasing until 200 g/ml concentration. At flow cytometry to 100 Âg/ml the most of the cells died by necrosis or late apoptosis. The renal lesions scores measured in histologic laminas proved renal damage induced from LP mainly in tubular renal areas. Conclusion: The toxic effect at kidney perfused tissue, histology (HE), renal perfusion, and MDCK cells could partially explain changes on glomerular filtration and tubular reabsorption, and contributes indirectly hypotension in vivo. More experiments are need for ameliorate the elucidation these mechanisms.

nÃo hà / A Neoplasia EndÃcrina MÃltipla Tipo 1 (NEM1) à um patologia genÃtica com padrÃo de heranÃa autossÃmico dominante de alta penetrÃncia (prÃximo 100% aos 50 anos) causada por uma mutaÃÃo que inativa o gene MEN1. Define-se pela ocorrÃncia combinada de dois dos trÃs principais tumores endÃcrinos relacionados à NEM1: hiperparatireoidismo primÃrio (HPT), tumores hipofisÃrios (TH) e tumores endÃcrinos enteropancreÃticos (TEP). Classifica-se como NEM1 familiar quando hà um paciente com NEM1 e pelo menos um familiar com um dos trÃs tumores clÃssicos. Devido ao padrÃo de heranÃa os parentes de primeiro grau dos indivÃduos afetados apresentam um risco teÃrico de 50% de serem portadores da mutaÃÃo. Em estudo prÃvio realizado no Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio foram diagnosticados clinicamente 56 pacientes com NEM1, sendo oriundos de 12 famÃlias e 4 casos esporÃdicos. Das 12 famÃlias, seis sÃo procedentes de dois municÃpios situados numa microrregiÃo do estado do Cearà conhecida como Baixo Jaguaribe. No presente trabalho objetivamos realizar rastreamento clÃnico-laboratorial e avaliar associaÃÃes entre dados epidemiolÃgicos, clÃnicos e laboratoriais sob o impacto no diagnÃstico de NEM1 em parentes sob-risco de NEM1 provenientes da regiÃo supracitada e aferir o grau de concordÃncia entre a pesquisa clÃnica atravÃs da aplicaÃÃo de questionÃrio e o diagnÃstico bioquÃmico. Foram realizadas coleta dos dados clÃnicos dos parentes de primeiro grau ≥ 20 anos sob-risco, atravÃs de questionÃrio clÃnico-epidemiolÃgico e avaliaÃÃo bioquÃmica, para diagnÃstico dos principais tumores relacionados à sÃndrome (dosagem sÃrica de glicemia, insulina, cÃlcio total, cÃlcio ionizado, fÃsforo, PTH, 25-hidroxivitamina D, prolactina, IGF-1 e gastrina). Dos 27 indivÃduos sob-risco avaliados a idade mÃdia foi de 45,1  13,1(22-65) anos, 59% destes realizavam atividade relacionada à tecelagem de rede. Do total da amostra, 11/27 (40,7%) apresentaram pelo menos uma queixa clÃnica possivelmente relacionada à presenÃa de HPT, enquanto o diagnÃstico bioquÃmico deste foi feito em 13/27(48,1%). 18/27(66,6%) dos indivÃduos apresentaram um ou mais sinais/sintomas que podem estar associados aos TEP, enquanto o diagnÃstico bioquÃmico foi feito em apenas 02/27(7,4%) dos indivÃduos (01 gastrinoma e 01 insulinoma). ManifestaÃÃes sugestivas de TH foram encontradas em 17/27 (62,9%), enquanto a confirmaÃÃo bioquÃmica foi feita em 05/27(18,5%), todos com hiperprolactinemia. Encontramos uma concordÃncia entre o diagnÃstico clÃnico e bioquÃmico para pesquisa de HPT em 8/11(72,7%) dos indivÃduos (kappa = 0,40, p=0,054) que à considerada moderada, sendo a mesma considerada fraca para TEP com 2/18 (11,1%; kappa = 0,07 e p=0,054) e TH em 5/17 (29,4%; kappa = 0,23 e p=0,124). Em conclusÃo, encontramos 14/27(51,8%) novos casos com diagnÃstico de NEM1 em uma populaÃÃo considerada de alto risco, estando de acordo com o padrÃo de transmissÃo da doenÃa. Em mÃdia, o diagnÃstico foi feito na quinta dÃcada de vida, demonstrando um atraso no diagnÃstico. A aplicabilidade do questionÃrio clÃnico mostrou-se de baixa confiabilidade para o diagnÃstico uma vez que a relaÃÃo entre a presenÃa de um sinal e/ou sintoma e a confirmaÃÃo bioquÃmica apresentou baixa concordÃncia, havendo apenas uma concordÃncia considerada moderada para o diagnÃstico de HPT. / The Multiple Endocrine Neoplasia type 1 (MEN1) is a genetic disorder with autosomal dominant inheritance with high penetrance (near 100% at 50 years) caused by a mutation that inactivates the MEN1 gene. It is defined by the combined occurrence of two of the three major endocrine tumors related to MEN1: Primary hyperparathyroidism (HPT), pituitary tumors (PT) and enteropancreatic endocrine tumors (PET). It is classified as familial MEN1 when there is one patient with MEN1 and at least one first degree relative with one of the three classic tumors. Due to this inheritance pattern, the first degree relatives of patients with MEN1 have a theoretical 50% risk of being carriers of the mutation. In a previous study conducted at the University Hospital Walter CantÃdio were clinically diagnosed 56 patients with MEN1, divided into 12 families and four sporadic cases. Of the 12 families, six are coming from two cities located in micro-region of Cearà state known as Baixo Jaguaribe. In this work we aimed to perform clinical and laboratory screening and evaluating associations between epidemiological, clinical and laboratory data on the impact on the diagnosis of MEN1 in relatives under-risk MEN1 from that region and measuring the degree of correlation between clinical research by applying the questionnaire and the biochemical diagnosis. Collection of clinical data of first-degree relatives ≥ 20 years-old under-risk through clinical and epidemiological questionnaire and biochemical evaluation were performed for diagnosis of the main tumors-related syndrome (serum glucose, insulin, total calcium, ionized calcium, phosphorus, PTH, 25-hydroxyvitamin D, prolactin, IGF-1 and gastrin). Of the 27 individuals at-risk evaluated the average age was 45,1  13.1 (22-65) years-old, 59% of them performed activities related to network weaving. Of the total sample, 11/27 (40,7%) had at least one clinical complaints possibly related to the presence of HPT, while the biochemical diagnosis of this was done in 13/27 (48,1%). 18/27 (66,6%) of subjects had one or more signs/symptoms that may be associated with PET, while the biochemical diagnosis was made in only 2/27 (7,4%) of the subjects (01 gastrinoma and 01 insulinoma). Suggestive complaint of PT were found in 17/27 (62,9%), while the biochemical confirmation was made in 5/27 (18,5%), all with hyperprolactinemia. We found a correlation between the clinical and biochemical research for HPT in 8/11 (72,7%) of the subjects (kappa = 0,40, p = 0,054), which is considered moderate and on the other hand there were a weak correlation to both PET in 2/ 18 (11,1%; kappa = 0,076 and p = 0.054) and PT in 5/17 (29,4%; kappa = 0,23 and p = 0,124). In conclusion, we found 14/27 (51,8%) new cases diagnosed with MEN1 in a population considered high risk, which is consistent with the pattern of disease transmission. On average the diagnosis was made in the fifth decade of life, showing a delay in diagnosis. The clinical questionnaire had a poor applicability for diagnosis since the relationship between the presence of a sign and/or a symptom and biochemical diagnosis showed low consistency, with only moderate concordance considered for diagnosis of HPT.

nÃo hà / O Clostridium difficile à reconhecido por ser uma bactÃria nosocomial, levando a intensa inflamaÃÃo intestinal, quebra da barreira epitelial e diarreia. A produÃÃo de adenosina està aumenta durante eventos inflamatÃrios. O receptor de adenosina A2B (A2BR) à o mais expresso no intestino de humanos e camundongos. NÃs investigamos o efeito de exposiÃÃo Ãs TcdA e TcdB, a curto e longo prazo, em cÃlulas HCT-8 e cÃlulas epiteliais intestinais isoladas do ceco. CÃlulas HCT-8 foram expostas a TcdA ou TcdB (10 ng/ml) por 2, 6 e 24h. Foi usado o modelo de alÃa cecal e de infecÃÃo pelo bacilo em murinos para avaliar os efeitos da TcdA e da infecÃÃo pelo C. difficile, respectivamente. Foi demonstrado que HCT-8 e cÃlulas epiteliais intestinais isoladas do ceco naturalmente expressam altos nÃveis do receptor A2BR. TcdA e TcdB alteraram a morfologia celular, viabilidade e proliferaÃÃo e causaram aumento da expressÃo gÃnica de todos os subtipos de receptores de adenosina e das citocinas IL-6 e IL-8 em HCT-8. Em cÃlulas epiteliais intestinais isoladas do ceco, a TcdA significativamente causou um aumento do peso e volume/comprimento da alÃa cecal, escores histolÃgicos e infiltrado neutrofÃlico, medido por MPO, e tambÃm causou alteraÃÃes da expressÃo gÃnicas dos receptores de adenosina, tanto no modelo de alÃa cecal quanto na infecÃÃo pelo bacilo. O tratamento com PSB603, um antagonista do receptor A2BR, foi capaz de reverter os efeitos causados pelas toxinas do C. difficile. Nossos dados suportam a hipÃtese que as toxinas do C. difficile alteram a expressÃo dos receptores de adenosina e isso pode estar relacionado com os severos efeitos inflamatÃrios. NÃs concluimos que os receptores de adenosina tenham um papel importante na regulaÃÃo da inflamaÃÃo em cÃlulas epiteliais intestinais na infecÃÃo pelo C. difficile. / Clostridium difficile is recognized to be a nosocomial pathogen that causes intense intestinal inflammation, epithelial barrier disruption and diarrhea. Adenosine production is increased under inflammatory situations. The adenosine receptor A2B is the most expressed receptor in the human and mice intestine. We investigated the effect of short- and long-term exposure to TcdA and TcdB in HCT-8 cells and isolated cecum epithelial cells. HCT-8 cells were exposed to TcdA or TcdB (10 ng/ml) for 2, 6 and 24h. We used a murine cecal loop model and murine infection model to evaluate the effects of TcdA and C. difficile infection, respectively. We demonstrated that HCT-8 and isolated intestinal cecum epithelial cells naturally express high levels of A2BR receptors. TcdA or TcdB alters the cell morphology, viability and proliferation pattern and caused gene expression increase of all AR subtypes in HCT-8. In isolated cecum epithelial cells, TcdA significantly (p<0.05) increased volume/length, weight/length, histopathology scores, neutrophil infiltration, as measured by MPO content, and induced an altered gene expression increase of all AR subtypes. PSB603 (10 nM) treatment significantly (p<0.05) reduced TcdA-induced tissue damage. Our findings support the hypothesis that Clostridium difficile toxins affect adenosine receptor expression and this action may be related to their severe inflammatory effect. We concluded that adenosine receptors may play a crucial role in regulating the inflammatory system in intestinal epithelium during C. difficile infection.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Previamente foi sugerido que a acidemia, provocada por uma sessÃo de exercÃcio fÃsico agudo, seria responsÃvel por induzir retardo no esvaziamento gÃstrico de lÃquidos, assim como diminuir a resposta contrÃtil em tecidos isolados de fundo de estomago, em ratos. No presente trabalho, estudamos os efeitos in vitro da acidose extracelular em tecidos gastrintestinais de ratos. Os registros isomÃtricos foram obtidos a partir de tiras isoladas de fundo de estÃmago e segmentos de duodeno em preparaÃÃes para ÃrgÃos isolados atravÃs de sistema de aquisiÃÃo de dados. A acidose extracelular (pH 6,0) diminuiu a resposta contrÃtil de forma significativa (P < 0,05, two-way ANOVA, seguido de teste de Bonferroni) em tecidos de fundo de estÃmago, evocadas por acoplamento farmacomecÃnico por carbacol (CCh) e serotonina (5-HT), com respostas mÃximas de (148.1  12.5% vs 212  11.6%) para o CCh e (76.3  8% vs 105.6  8.4%) para a 5-HT. Jà em tecidos isolados de duodeno, em meio acidificado, tambÃm estimulados por CCh e 5-HT, nÃo foram encontradas diferenÃas nas respostas contrÃteis (P>0,05). Em meio Ãcido (pH 6,0), a contraÃÃo mÃxima dos tecidos de fundo de estÃmago pela entrada de Ca2+ via canais ROCC (Canais para cÃlcio operados por receptor), ativados por CCh (1ÂM), foi reduzida de forma significativa (P < 0,05, two-way ANOVA, seguido de teste de Bonferroni) em comparaÃÃo com seu controle (56.6Â9.3% vs 93.8Â11.5%, respectivamente). Entretanto, quando os canais ROCC foram ativados por CCh (30 ÂM), diminuiÃÃes significativas das respostas foram encontradas apenas quando o Ca2+ foi adicionado nas concentraÃÃes de 2 e 5 mM (21.9  6.6%; 84.2  15.3%) vs (89.3  15.5%; 150.6  18.6%), respectivamente. Em experimento adicional, a acidose extracelular (pH 6,0) reduziu as respostas contrÃteis de tecidos de fundo de estÃmago pela entrada de Ca2+ atravÃs dos canais SOCC (Canais para cÃlcio operados por estoque), com diferenÃas significativas (P < 0,05, two-way ANOVA, seguido de teste de Bonferroni) quando o Ca2+ foi adicionado nas concentraÃÃes de 2 e 5 mM (24.5  10.1% e 82.1  13.9%) vs (66  12.9% e 125.3  12.7%), respectivamente. O presente estudo demonstrou que a acidose extracelular diminuiu a resposta contrÃtil nos tecidos gastrintestinais de forma seletiva, visto que apenas os tecidos de fundo de estÃmago foram afetados. E ainda, que essa diminuiÃÃo na contratilidade pareceu ser devida, pelo menos em parte, a uma diminuiÃÃo na captaÃÃo de Ca2+ do meio extracelular por canais para cÃlcio ativados por transduÃÃo de sinal intracelular.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / IntroduÃÃo: O irinotecano à um antineoplÃsico usado no tratamento de primeira e segunda linha do cÃncer colorretal. No entanto, um importante efeito colateral associado ao irinotecano, a mucosite intestinal, tem impactado negativamente na qualidade de vida dos pacientes e no sucesso terapÃutico. Trabalhos anteriores demonstraram que na patogÃnese da mucosite intestinal hà a participaÃÃo de mediadores prÃ-inflamatÃrios, como IL-1, IL-18, IL-33, Ãxido nÃtrico dentre outros, cuja modulaÃÃo leva à reduÃÃo do infiltrado neutrofÃlico no intestino e melhora do dano tecidual. Entretanto, o papel de receptores de quimiocinas, como o CXCR2, importantes no recrutamento de neutrÃfilos, ainda nÃo foram investigados no contexto da mucosite. Objetivos: Avaliar o papel de receptores CXCR2 na mucosite intestinal induzida pelo Irinotecano. MÃtodos: Camundongos C57BL/6 machos, 18-25g, foram divididos em grupos (n=6), administrados por 4 dias com salina (5mL/kg, i.p) ou com irinotecano (75, 90, 105 ou 120 mg/kg, i.p). A dose de 120 mg/kg foi a que melhor reproduziu o quadro inflamatÃrio caracterÃstico da mucosite, sendo entÃo utilizada nos ensaios posteriores em associaÃÃo ao SB225002, um antagonista de receptores CXCR2. Os animais foram analisados quanto ao peso corpÃreo, escores de diarreia, contagem de leucÃcitos. ApÃs a eutanÃsia, uma amostra de intestino foi coletada para anÃlise histopatolÃgica e morfomÃtrica, dosagem de mieloperoxidase e nÃveis de IL-1&#946;, IFN-&#947; e KC. AlÃm disso, o comprimento do intestino delgado foi mensurado, bem como o peso do conteÃdo sÃlido. Avaliou-se tambÃm a bacteremia. Adicionalmente, realizou-se a quantificaÃÃo dos receptores CXCR2 e CCR2, alÃm do ensaio de quimiotaxia in vitro de neutrÃfilos isolados de camundongos tratados com IRI ou com IRI+SB225002. (Protocolo CEPA 58/14). Resultados: O IRI em todas as doses avaliadas promoveu uma significativa (P<0,05) perda ponderal e leucopenia. Sendo que, apenas as doses de 105 e 120 mg/kg foram capazes de reduzir de forma significativa (P<0,05) a razÃo vilo/cripta e de aumentar (P<0,05) o infiltrado neutrofÃlico (ensaio de MPO). Nenhuma das doses avaliadas promoveu diarreia nos camundongos desse experimento. A dose de 120 mg/kg foi que a melhor reproduziu o dano histopatolÃgico tÃpico da mucosite intestinal, sendo a dose escolhida para as demais anÃlises. O uso do antagonista dos receptores CXCR2, o SB225002, associado ao IRI nÃo protegeu os animais da perda de peso, da leucopenia, do dano histopatolÃgico (mensurado pela razÃo vilo/cripta), da reduÃÃo do comprimento do intestino delgado nem da reduÃÃo do peso do conteÃdo do delgado. Todos esses parÃmetros apresentaram-se de forma semelhante nos animais tratados apenas com IRI ou em associaÃÃo IRI+SB225002. Quanto ao infiltrado neutrofÃlico, observamos que o uso do SB225002 no D2, 24h apÃs a 1 administraÃÃo do IRI, foi capaz de reduzir a atividade da MPO (P<0,05). Tal reduÃÃo nÃo foi observada nos tempos subsequentes. Observou-se que o tratamento com irinotecano levou à internalizaÃÃo de CXCR2 e aumento da expressÃo do CCR2 nos neutrÃfilos de animais tratados com o antineoplÃsico. Houve, ainda, uma reduÃÃo da migraÃÃo de neutrÃfilos do quinto para o sÃtimo dia apÃs a injeÃÃo do IRI. Corroborando com esse dado, houve reduÃÃo da migraÃÃo dos neutrÃfilos (isolados da medula Ãssea de camundongos tratados com irinotecano) ao MIP-2, um ligante de CXCR2. Observamos, ainda, que os camundongos injetados com IRI apresentaram bacteremia, quando comparados ao grupo salina. ConclusÃo: O receptor CXCR2 participa somente da fase precoce da mucosite intestinal, provavelmente devido a uma internalizaÃÃo deste receptor, o qual à substituÃdo pelo CCR2 na superfÃcie dos neutrÃfilos. / Introduction: Irinotecan is an anticancer agent used in first and second line treatment protocols for colorectal cancer. However, a major side effect associated with irinotecan, intestinal mucositis, has negatively impacted on patientâs quality of life and limiting the therapeutic outcome. The literature reports the involvement of several inflammatory mediators in the pathogenesis of intestinal mucositis, including IL-1, IL-18, IL-33, nitric oxide and several others, whose pharmacological inhibition prevents neutrophil infiltration and leads to mucositis improvement. However, the role of chemokine receptors that are important to neutrophil recruitment, such as CXCR2, in intestinal mucositis is unknown. Aims: To study the role of CXCR2 receptors in the pathogenesis of irinotecan-induced intestinal mucositis. Methods: Male C57BL/6 mice (n = 6) were divided into groups and injected with either saline (5ml / kg, ip) or irinotecan (75, 90, 105 or 120 mg/kg ip) for 4 days. The dose of 120 mg/kg reproduced the inflammatory condition of mucositis, so it was used in association with SB225002, a CXCR2 antagonist. Body mass variation, diarrhea scores and leukocyte count were recorded. Following euthanasia, intestinal samples were collected for histopathological analysis, mieloperoxidase activity (MPO), IL-1&#946;, KC and IFN-&#947; levels. In addition, the length of the small intestine was measured so was the weight of its solid contents. Bacteremia was further carried out. Additionally, we measured the expression of CXCR2 and CCR2 receptors on neutrophils surface. We also performed the in vitro chemotaxis assay, using neutrophils isolated from bone marrow of mice treated with IRI or IRI + SB225002 (Study approval number: 58/14). Results: IRI produced a significant (P <0.05) weight loss and leukopenia in all doses tested. However, only the doses of 105 and 120 mg/kg reduced (P<0.05) the villus/crypt ratio and increased (P<0.05) neutrophil infiltration (MPO assay). None of the doses promoted diarrhea. The dose of 120 mg/kg was the best in reproducing the typical histopathological damage seen during intestinal mucositis, thus this dose was chosen for further analysis. The treatment with SB225002 did not protect the animals from the weight loss, leukopenia, histopathological damage (measured by the villus/crypt ratio), reduction of the small intestine length or weight reduction of the small intestine content induced by IRI. There was no difference between IRI or IRI + SB225002 groups in regard to these parameters. In regard to neutrophil infiltration, SB225002 prevented the increase in MPO activity as early as 24 hours post 1st dose of IRI (P<0.05) vs IRI group, but failed to do so in late mucositis. In addition, IRI led to CXCR2 internalization followed by an increased expression of CCR2 receptor on neutrophils harvested from IRI-treated mice. Accordingly, in vitro neutrophil migration towards MIP-2, a CXCR2 ligand, was reduced. We also observed that mice injected with IRI or SB225002+IRI showed bacteremia when compared to the saline group. Conclusion: CXCR2 receptors only participate in the early phases of intestinal mucositis, likely due to the downregulation of these receptors, which are replaced by CCR2 on the surface of neutrophils.

nÃo hà / A eficÃcia da clozapina (CLZ) como um agente antipsicÃtico atÃpico foi reconhecida desde o inÃcio dos anos 1960, sendo ainda nos dias atuais a droga de escolha no tratamento de casos de esquizofrenia refratÃrios a outros antipsicÃticos. Dentre os efeitos adversos da CLZ, a constipaÃÃo à relatada com frequÃncia, podendo progredir para obstruÃÃo intestinal, necrose intestinal, sepse intrabdominal e morte. O presente estudo avaliou o mecanismo de aÃÃo da CLZ sobre a motilidade gastrintestinal atravÃs da anÃlise da taxa de trÃnsito intestinal (TI) e da excreÃÃo de pelotas fecais em camundongos. Foram utilizados camundongos Swiss, machos, peso 25-30g, provenientes do BiotÃrio Central da UFC e o projeto foi aprovado pela CEPA/UFC (Proc. No. 57/2014). As drogas utilizadas foram: CLZ (2,5; 5; 10; 20mg/kg), neostigmina (NEO, 1mg/kg i.p.), serotonina (5-HT, 10mg/kg v.o.), alilisitiocianato (AITC 10mg/kg v.o.), domperidona (DOM, 20mg/kg v.o.), L-NAME (80 mg/kg i.p.), naloxona (2mg/kg s.c.), glibenclamida (5mg/kg i.p.) e AM251 (1mg/kg i.p.). A administraÃÃo oral de CLZ 10 e 20 mg/kg reduziu significativamente (p<0,05) o transito gastrintestinal (TI) em relaÃÃo ao veÃculo a partir desse resultado optou-se pela menor dose efetiva de CLZ sobre a funÃÃo motora intestinal para as avaliaÃÃes subsequentes. A CLZ 10mg/kg reduziu significativamente (p<0,05) a excreÃÃo de pelotas fecais. O prÃ-tratamento com naloxona (antagonista opiÃide), com DOM (antagonista dopaminÃrgico), ou com L-NAME (inibidor da oxido nÃtrico sintase) nÃo inibiu efeito da CLZ (10mg/kg) sobre o transito intestinal. Contudo o prÃ-tratamento com a NEO (anticolinesterÃsico), com 5-HT, com o AITC (agonista TRPA1), com a glibenclamida (bloqueador de canais de potÃssio ATP dependentes) ou com o AM251 (antagonista CB1) reduziram significativamente (p<0,05), o efeito da CLZ sobre o TI. Enquanto o AM 251inibiu completamente o efeito da CLZ sobre o TI, este nÃo alterou o efeito da CLZ sobre a excreÃÃo de pelotas fecais. O efeito da CLZ sobre o transito gastrintestinal e sobre a expulsÃo de pelotas fecais sÃo caracterÃsticos de seu efeito de constipaÃÃo e consistente com as observaÃÃes clÃnicas em pacientes esquizofrÃnicos tratados com CLZ. Podemos concluir que a CLZ inibe a funÃÃo motora gastrintestinal atravÃs de um mecanismo de aÃÃo multifatorial envolvendo a modulaÃÃo de vÃrios neurotransmissores dentre aqueles avaliados no presente estudo ressalta-se uma aÃÃo inibitÃria da clozapina sobre as vias colinÃrgicas, serotoninÃrgicas e de canais de cÃtions TRPA1 e excitatÃria sobre os canais de cÃtions sensÃveis ao ATP e receptores CB1. / Clozapine (CLZ) an atypical antipsychotic agent recognized for its efficacy since the early 1960s stills nowadays the drug of choice in treating refractory schizophrenia cases to other antipsychotics. Among the adverse effects of CLZ, constipation, often reported, may progress to bowel obstruction, intestinal necrosis, intraabdominal sepsis and death. This study evaluated the mechanism of action of CLZ on gastrointestinal motility by analyzing the intestinal transit rate (IT) and excretion of fecal pellets in mice. Animals used were Swiss males, weight 25-30g, from the UFC Central Animal Facility and the project approved by the CEPA / UFC (Proc. No. 57/2014). The drugs used were: CLZ (2.5, 5, 10, 20mg/kg p.o.), neostigmine (NEO 1mg /kg i.p.), serotonin (5-HT, 10mg/kg p.o.), alilisotiocianate (AITC 10mg/kg p.o.) , domperidone (DOM 20mg/kg p.o.), L-NAME (80 mg/kg i.p.), naloxone (2 mg/kg s.c.), glibenclamide (5 mg/kg i.p.) and AM251 (1 mg/kg i.p.). Oral administration of CLZ 10 and 20 mg/kg significantly (p <0.05) inhibited IT from the vehicle. Based on the results we decided for the smallest effective dose of CLZ active on intestinal motor function (10mg/kg) for subsequent evaluations. The CLZ inhibited significantly (p <0.05) the excretion of fecal pellets. Pretreatment with naloxone (opioid antagonist), DOM (dopamine antagonist) or with L-NAME (nitric oxide synthase inhibitor) did not inhibit the effect of CLZ (10mg / kg) on gastrointestinal transit. However pretreatment with NEO (anticholinesterasic agent) with 5-HT, with the AITC (TRPA1 agonist), with glyburide (blocker dependent ATP potassium channel) or with AM251 (CB1 antagonist) inhibited significantly (p < 0.05), the effect of CLZ on IT. While the AM 251 inhibited completely the effect of CLZ on IT, it does not alter the effect of CLZ on the excretion of fecal pellets. The effect of CLZ on the gastrointestinal transit and the expulsion of fecal pellets are characteristic of its constipation side effect, consistent with clinical observations in schizophrenic patients treated with CLZ. We can conclude that CLZ inhibits gastrointestinal motor function through a multifactor mechanism of action, involving the modulation of various neurotransmitters among those evaluated in this study points to an inhibitory effect of clozapine on cholinergic and serotoninergic pathways and cation channels TRPA1 and excitatory on the ATP sensitive cation channel and on CB1 receptors.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / O aumento da atividade muscular mastigatÃria à considerado uma resposta fÃsica de mudanÃas no estado emocional. O estresse e a ansiedade aumentam a atividade mioelÃtrica dos mÃsculos do sistema estomatognÃtico, com resultante aumento das parafunÃÃes, como apertamento dos dentes. O bruxismo à uma atividade parafuncional diurna ou noturna, incluindo apertamento ou ranger os dentes. Tem forte associaÃÃo com a dor miofascial mastigatÃria, uma dor facial crÃnica dos mÃsculos mastigatÃrios com possÃvel bloqueio e limitaÃÃo da abertura de boca. O sistema endocanabinoide à composto pelos receptores canabinoides, pelos ligantes endÃgenos (endocanabinoides) e proteÃnas responsÃveis pelo seu metabolismo. Os endocanabinoides estÃo envolvidos em diferentes funÃÃes fisiolÃgicas e patolÃgicas, como imunomodulaÃÃo, inflamaÃÃo e analgesia. A aÃÃo antinociceptiva dos canabinoides tem sido demonstrada em vÃrios modelos experimentais de dor, porÃm, nÃo hà relatos na literatura do envolvimento dos canabinoides na nocicepÃÃo associada à hiperatividade muscular em situaÃÃes de hÃbitos parafuncionais. O objetivo da presente pesquisa foi estudar a atividade muscular mastigatÃria e a nocicepÃÃo associada em modelo de estresse emocional em ratos e o envolvimento do sistema endocanabinoide. O estudo foi aprovado pela ComissÃo de Ãtica em Pesquisa Animal da Universidade Federal do Cearà (n 35/13). A caixa de comunicaÃÃo foi utilizada como instrumento de estÃmulo do estresse emocional, durante 14 dias. Foram implantados eletrodos subcutÃneos na regiÃo dos mÃsculos masseter e temporal para avaliar a atividade muscular mastigatÃria e realizado teste de hipernocicepÃÃo mecÃnica nos referidos mÃsculos durante o estÃmulo do estresse emocional. Foram avaliados tambÃm parÃmetros de comportamento de ansiedade, peso corporal, peso bruto das glÃndulas adrenais e expressÃo de c-Fos e receptores canabinoides CB1 e CB2 no gÃnglio trigeminal e trato espinhal trigeminal. Foi administrado um antagonista canabinoide CB1 e avaliado o comportamento nociceptivo. A expressÃo dos receptores canabinoides no mÃsculo masseter tambÃm foi avaliada. Os resultados demonstraram um aumento significativo da atividade muscular mastigatÃria nos animais estressados no sÃtimo dia de estÃmulo do estresse emocional. Observou-se uma reduÃÃo significativa do limiar nociceptivo dos mÃsculos mastigatÃrios, com pico no dÃcimo primeiro dia do estresse emocional. Os animais estressados apresentaram comportamento de ansiedade, sem diferenÃas no peso corporal e no peso bruto das glÃndulas adrenais. Os resultados demonstraram ainda que os animais estressados apresentaram acÃmulo de vacÃolos citoplasmÃticos no cÃrtex das glÃndulas adrenais, e expressÃo aumentada de c-Fos e receptores CB1 e CB2 no gÃnglio trigeminal e trato espinhal trigeminal. A administraÃÃo do antagonista CB1 intensificou a nocicepÃÃo no quarto dia de estresse emocional. Os receptores canabinoides CB1 e CB2 apresentam expressÃo aumentada no mÃsculo masseter dos animais estressados. Os dados sugerem que animais expostos ao estresse emocional apresentaram atividade muscular mastigatÃria aumentada e comportamento bruxismo-sÃmile, com reduÃÃo nos limiares nociceptivos dos mÃsculos mastigatÃrios. O sistema endocanabinoide parece estar envolvido na modulaÃÃo da nocicepÃÃo induzida por estresse emocional com aumento da expressÃo dos receptores CB1 e CB2 nos gÃnglios trigeminais, no trato espinhal do trigÃmeo e no mÃsculo masseter. / The increased masticatory muscle activity is considered a physical response to changes in emotional state. Stress and anxiety increase the myoelectric activity of the stomatognathic system muscles, with resulting parafunctions increase, as teeth clenching. Bruxism is a diurnal or nocturnal parafunctional activity including clenching or teeth grinding. Bruxism is strongly associated with the masticatory myofascial pain, a chronic facial pain of the masticatory muscles with possible blockage and limited mouth opening. The endocannabinoid system consists of cannabinoid receptors by the endogenous ligands (endocannabinoids) and proteins responsible for its metabolism. Endocannabinoids are involved in different physiological and pathological functions. The antinociceptive action of cannabinoids has been shown in several experimental models of pain, but there are no literature reports of cannabinoids involvement in nociception associated with muscle hyperactivity in parafunctional habits situations. The aim of this study was to study the masticatory muscle activity and nociception associated in emotional stress model in rats and the endocannabinoid system involvement. The study was approved by the Animal Research Ethics Committee of the Federal University of Cearà (N 35/13). The communication box was used as stimulus instrument for emotional stress for 14 days. Subcutaneous electrodes were implanted in the masseter and temporal muscles region to evaluate the masticatory muscle activity and it was performed mechanical hyperalgesia test in these muscles during the emotional stress stimulation. Were also evaluated anxiety behavior parameters, body weight, adrenal glands gross weight and c-Fos expression and cannabinoid CB1 and CB2 receptors in the trigeminal ganglion and trigeminal spinal tract. Cannabinoid CB1 antagonist was administered and evaluated the nociceptive behavior. The expression of cannabinoid receptors in the masseter muscle was also assessed. The results showed a significant increase in stressed animals masticatory muscle activity on the seventh day of emotional stress stimulus. A significant reduction of masticatory muscles nociceptive threshold was observed, peaking on the eleventh day of emotional stress. The stressed animals showed anxiety behavior, with no differences in body weight or adrenal glands gross weight. The results also pointed that the stressed animals showed cytoplasmic vacuoles accumulation in the adrenal glands cortex, and increased expression of c-Fos and CB1 and CB2 receptors in the trigeminal ganglion and trigeminal spinal tract. The administration of the antagonist CB1 intensified the nociception on the fourth day of emotional stress. Cannabinoids CB1 and CB2 receptors have increased expression in the masseter muscle of the stressed animals. The data suggest that animals exposed to emotional stress have increased masticatory muscle activity and âbrux-likeâ behavior with a reduction in masticatory muscles nociceptive thresholds. Endocannabinoid system appears to be involved in the modulation of nociception induced emotional stress with increased expression of CB1 and CB2 receptors in the trigeminal ganglion, trigeminal spinal tract and masseter muscle.