Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Como parte do estudo de bioprospecÃÃo para a identificaÃÃo de compostos com potencial anticÃncer de organismos da costa brasileira, investigamos a citotoxicidade do extrato etanÃlico da esponja marinha Plakortis angulospiculatus, reconhecida como fonte de endoperÃxidos cÃclicos com vÃrias atividades farmacolÃgicas, inclusive citotÃxica. O fracionamento bioguiado do extrato levou ao isolamento de 4 policetÃdeos com anel dihidrofurano (3, 4, 5, 6), endoperÃxidos cÃclicos de 5 (1) e 6 membros (2, 7, 9, 10), incluindo 3 plakortÃdeos inÃditos, 7,8-dihidroplakortÃdeo E (1), 2 e 10, alÃm dos conhecidos, espongosoritina A (5), plakortÃdeo P (9) e derivados. Ao compararmos a citotoxicidade dos dois grupos de compostos em cÃlulas tumorais humanas de cÃlon (HCT-116) e prÃstata (PC-3M), e nÃo tumoral (MRC-5) pelo ensaio do MTT, observamos perfis diferentes de atividade, onde compostos com anel dihidrofurano foram, em geral, menos ativos, e exibiram citotoxicidade tempo-dependente, enquanto os plakortÃdeos com anÃis de 6 membros exibiram maior citotoxicidade e efeito independente do tempo de incubaÃÃo. Os mecanismos de aÃÃo citotÃxicas dos compostos 2, 3, 5, 7 e 9 foram investigados usando cÃlulas HCT-116. Estudos com citometria de fluxo indicaram reduÃÃo da densidade celular acompanhado de reduÃÃo de cÃlulas com membrana Ãntegra nas maiores concentraÃÃes testadas, com exceÃÃo do composto 2. AnÃlises do ciclo celular indicaram que 3 e 5 induziram bloqueio de G0/G1, enquanto 2, 7 e 9 causaram bloqueio na fase G2/M, com presenÃa de figuras mitÃticas e efeito independente da polimerizaÃÃo de microtÃbulos, demonstrada por microscopia confocal. A avaliaÃÃo de 2 e 9 em linhagem tumoral de mama (MCF-7) nÃo revelou mudanÃas no ciclo celular, porÃm, aumentou a fragmentaÃÃo de DNA, um indicativo de morte celular por apoptose. AtravÃs do teste de azul de tripan, verificamos um sinergismo entre plakortÃdeo P (9) e ciclosporina A, um inibidor da enzima calcineurina, demonstrado pela diminuiÃÃo de mais de 80% da viabilidade das cÃlulas HCT-116, quando comparado Ãs cÃlulas tratadas somente com plakortÃdeo P (9) ou com ciclosporina A, indicando um possÃvel envolvimento de vias de sinalizaÃÃo dependentes de cÃlcio no efeito exercido pelo plakortÃdeo P. / As part of a bioprospecting study to identify compounds from marine organisms with anticancer potencial compounds from the brazilian coast, we investigated the cytotoxicity of an ethanolic extract derived from the marine sponge Plakortis angulospiculatus, widely known as a source of cyclic endoperoxides with various pharmacological activities, including cytotoxic. The bioguided fractionation of the extract led to the isolation of 4 polyketides with a dihydrofuran ring (3, 4, 5, 6), 5- (1) and 6- membered cyclic endoperoxides (2, 7-10), including three new plakortides, 7,8-dihydroplakortide E (1), 2 and 10, and known compounds such as spongosoritin A (5), plakortide P (9). To compare the cytotoxicity of both groups in human tumor cells of colon (HCT-116), prostate (PC-3M) and non-tumor (MRC-5) by the MTT assay, we observed different activity profiles, as compounds that contained a dihydrofuran ring were generally less activeand displayed a time-dependent activity. Six membered cyclic plakortides, on the other hand, exhibited greater cytotoxicity and time-independent effect. The modes underlying the cytotoxic actions of 2, 3, 5, 7, and 9 were further investigated using HCT-116 cells. Flow cytometry studies demonstrated cell density reduction accompanied by a reduction in membrane integrity at higher concentrations, with the exception of 2. Further inspection through cell cycle analyses indicated that 3 and 5 induced blockage at G0/G1. To the contrary, 2, 7 and 9 delivered a G2/M arrest and presence of mitotic figures, however this effect was independent of microtubule polymerization, as demonstrated by confocal microscopy. The evaluation of plakortides 2 and 9 on breast cancer cell line (MCF-7) revealed no changes on cell cycle, but increased DNA fragmentation, indicating cell death by apoptosis. Using the trypan blue assay, we verified a synergistic effect between plakortide P (9) and cyclosporin A, a calcineurin inhibitor, which induced a decrease of over 80% in viability of HCT-116 cells when compared to cells treated only with plakortide P (9) or cyclosporin A, which suggests the involvement of calcium-dependent pathways in the effect presented by plakortide P.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A nicotina (NIC) à o principal componente da fumaÃa do tabaco e considerada uma das substÃncias com maior poder de abuso. Um importante efeito farmacolÃgico da NIC à a induÃÃo de convulsÃes. Neste contexto, foi proposto que a administraÃÃo repetida de NIC à capaz de causar abrasamento, uma forma de sensibilizaÃÃo à manifestaÃÃo de alteraÃÃes comportamentais, dentre elas a convulsÃo, sendo usado como ferramenta para o estudo dos mecanismos de progressÃo para uma ampla gama de transtornos neuropsiquiÃtricos. Recentemente nosso grupo de pesquisa evidenciou que ratas na periadolescÃncia sÃo mais susceptÃveis aos efeitos do abrasamento por NIC mostrando a participaÃÃo de mecanismos prÃ-oxidantes neste processo. Baseado nestas evidÃncias, o presente trabalho objetivou estudar os possÃveis benefÃcios da administraÃÃo de N-acetilcisteina (NAC), uma droga antioxidante, na prevenÃÃo do abrasamento induzido por NIC. Para isto foram utilizadas ratas Wistar periadolescentes (60-80 g). Os animais receberam NIC (2mg/Kg/dia, v.o.); NAC (90, 180 ou 270 mg/Kg/dia, i.p.) sozinha ou associada a NIC (NAC+NIC) ou Ãgua destilada durante 19 dias (cinco dias consecutivos e dois de intervalo). O comportamento dos animais foi avaliado nos 1Â, 8 15 e 19 dias, atravÃs da Escala de Racine. Ao final do tratamento (19 dia) os animais tiveram o cÃrtex prÃ-frontal (CPF), hipocampo (HP) e corpo estriado (CE) dissecados para a avaliaÃÃo de parÃmetros oxidativos como atividade da SOD, nÃveis de GSH, nitrito e peroxidaÃÃo lipÃdica (TBARS). Os resultados mostraram que os animais tratados com NAC apresentaram diminuiÃÃo dos graus de convulsÃo na Escala de Racine. A administraÃÃo de NAC+NIC reduziu a atividade da SOD, enquanto os nÃveis de GSH foram significativamente aumentados nos grupos NAC e NAC+NIC. NAC+NIC reduziram a peroxidaÃÃo lipÃdica nÃo alterando os nÃveis de nitrito nos grupos estudados. Em conclusÃo nosso estudo mostrou que a NAC apresenta efeito protetor em animais expostos ao abrasamento induzido por nicotina. / Nicotine (NIC) is the major component of tobacco smoking being one of the most abused substances worldwide. One important pharmacological effect of NIC is the induction of seizures. In this context it was previously proposed that NIC repeated administration is capable of inducing kindling, a form of sensitization related to the induction of behavioral alterations, among then seizures. Kindling is being used as a tool for the study of progression in a wide range of neuropsychiatric disorders. Recently our research group evidenced that periadolescent female rats were more susceptible to NIC-induced kindling demonstrating a participation of prooxidant mechanisms in this response. Based on these evidences, the present study had the goal to study the benefits of the administration of N-acetylcysteine (NAC), an antioxidant drug, in the prevention of NIC-induced seizures. To do this, female Wistar periadolescent rats (60-80 g) were used. The animals were administered NIC (2mg/Kg/day, i.p.); NAC (90, 180 or 270 mg/Kg/day, i.p.) alone or combined with NIC (NAC+NIC) or distilled water during 19 days. The animalâs behavior was evaluated at 1st, 8th, 15th and 19th days, using Racine Scale (seizure grades 1 to 5). At the end of treatment (19th day), animals were killed and their prefrontal cortex, hippocampus and striatum dissected. Homogenates were used to evaluate SOD activity, GSH levels, nitrite levels (as an indirect nitric oxide measurement), and lipid peroxide generation by measuring the substances that react with thiobarbituric acid. Animals treated with NAC presented a decrement in seizure activity. The SOD activity levels were decreased in group that received NAC+NIC. On the other hand, GSH levels had a significant increment in both groups treated with NAC and NAC+NIC. The lipid peroxidation level was reduced in the group that received NAC+NIC, and there was no change in nitrite levels in any group. The conclusion was that NAC presented a neuroprotective effect when diminished the lipid peroxidation level in animals exposed to nicotine-induced kindling.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A utilizaÃÃo de plantas tem seus princÃpios oriundos da medicina tradicional. O gÃnero Croton à conhecido pela presenÃa de espÃcies ricas em metabÃlitos secundÃrios biologicamente ativos. Croton cordiifolius Baill. à um arbusto conhecido como quebra faca encontrado no interior de Pernambuco e utilizado pela populaÃÃo local para diversos fins. Contudo nÃo hà estudos que comprove seus efeitos. O presente estudo iniciou-se por um inquÃrito etnobotÃnico realizado na Ãrea Rural do semiÃrido Pernambucano, ocasiÃo em que o quebra faca foi citado principalmente como anti-inflamatÃrio e cicatrizante. Portanto foi decido avaliar a toxicidade aguda, atividade anti-inflamatÃria tÃpica, cicatrizante, antimicrobiana e antinociceptiva do Ãleo essencial extraÃdo das folhas frescas desta espÃcie. EspÃcimes de C. cordiifolius foram coletados, e uma exsicata depositada no herbÃrio do Instituto AgronÃmico de Pernambuco. O Ãleo essencial foi extraÃdo por hidrodestilaÃÃo e sua composiÃÃo determinada por cromatografia a gÃs acoplada a espectrÃmetro de massa. Para os ensaios in vivo foram utilizados camundongos (2-4 meses) e para atividade antimicrobiana in vitro cepas de bactÃrias isoladas de feridas. AnÃlise quÃmica do Ãleo essencial evidenciou, como constituintes majoritÃrios, o 1,8-cineol e o -felanfreno. O Ãleo essencial de Croton cordiifolius (OECc) apresentou baixa toxicidade (DL50 >1000 mg/kg), atividade anti-inflamatÃria tÃpica no edema de orelha induzido por Ãleo de CrÃton e Ãcido araquidÃnico, bem como em feridas excisioniais. Nas quais tambÃm estimulou a angiogÃnese e deposiÃÃo de colÃgeno. Quanto a atividade antinociceptiva, o OECc promoveu reduÃÃo do nÃmero de contorÃÃes abdominais por Ãcido acÃtico e no tempo de lambida de pata em ambas as fases do teste da formalina, evidenciando seu efeito antinociceptivo, que se mostrou independente da via dos opioides e dos receptores TRPV-1, com participaÃÃo do sistema glutamatÃrgico. Estes dados evidenciam o potencial farmacolÃgico desta espÃcie no processo cicatricial, assim como na reduÃÃo da dor e atenuaÃÃo da inflamaÃÃo. / The use of plants has derived its principles from traditional medicine. Croton genus is known for the presence of species rich in biologically active secondary metabolites. Croton cordiifolius Baill. is a shrub known as âquebra facaâ found in the state of Pernambuco and used by local people for various purposes . However, there are no studies to prove its effects. This study started by an ethnobotanical survey in a rural area of semiarid region of Pernambuco, in which âquebra facaâ was cited mainly as anti-inflammatory and wound healing. So, it was decided to assess the acute toxicity, topical anti-inflammatory, wound healing, antibacterial and antinociceptive activities of the essential oil extracted from the fresh leaves of this species. Specimens of C. cordiifolius were collected, and a voucher specimen deposited in the herbarium of the Agronomic Institute of Pernambuco. The essential oil was extracted by hydrodistillation and its composition determined by gas chromatography to a mass spectrometry gas. For in vivo testing mice (2- 4 months) and for in vitro antimicrobial activity, clinical isolated from wounds were used. Chemical analysis of the essential oil showed, as major constituents, 1,8-cineole and -phellandrene. The essential oil from Croton cordiifolius (EOCc) showed low toxicity (LD50 > 1000 mg/kg) , topical anti-inflammatory activity in the ear edema induced by croton oil and arachidonic acid as well as in excisionial wounds, in which also stimulated angiogenesis and collagen deposition. Regarding antinociceptive activity, EOCc reduced the number of writhing induced by acetic acid and the licking time in both phases of the formalin test, showing its antinociceptive effect, with no involvement of opioid system and vanilloid receptors (TRPV-1), and participation of the glutamatergic system. These data show the pharmacologic potential of this specie in wound healing process, as well as in pain and inflammation reduction.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O cÃncer colorretal (CCR) à um dos mais comuns tumores malignos atualmente. Regimes à base de irinotecano (IRI) tÃm sido utilizados no tratamento do CCR e do CCR metastÃtico. Contudo, tais regimes estÃo associados ao surgimento de mucosite intestinal (MI), muitas vezes limitante do tratamento. A MI e a diarrÃia grave sÃo efeitos colaterais frequentes que podem atingir de 15-25% dos pacientes em quimioterapia. No entanto, o manejo clÃnico destes efeitos secundÃrios ainda à parcialmente ineficaz. O estudo dos mecanismos e mediadores envolvidos na resposta imune no estado de pÃs sepse vem evidenciando que nesta condiÃÃo parece haver uma inibiÃÃo de eventos inflamatÃrios entre os quais a migraÃÃo de neutrÃfilos. Dessa forma, o estado de pÃs-sepse poderia interferir no curso da MI induzida por IRI. Pretende-se avaliar os efeitos da imunomodulaÃÃo em animais sobreviventes de sepse grave no desenvolvimento das alteraÃÃes inflamatÃrias da MI induzida pelo IRI. Camundongos C57BL/6 machos, 20-25g, foram divididos em 4 grupos (n=5-8), submetidos ao modelo de ligaÃÃo e perfuraÃÃo do ceco (CLP) e tratados com ertapenem 20mg/Kg i.p. 6h depois da CLP e de 12/12h por trÃs dias, para induzir aproximadamente 50% de sobrevida. Animais submetidos à cirurgia mas nÃo à perfuraÃÃo do ceco (SHAM) receberam soluÃÃo salina (Sal, 5 mL/Kg, i.p.). Quinze dias apÃs CLP, os animais sobreviventes e animais do grupo SHAM receberam soluÃÃo salina (Sal, 5 ml/Kg, i.p.) durante 4 dias ou IRI (75mg/kg, i.p.). A massa corpÃrea (g) foi mensurada diariamente. No 5 ou 7  dia, foi avaliada a contagem total de leucÃcitos (x103/ÂL) e a diarreia (escores). ApÃs a morte, o jejuno e o Ãleo foram recolhidos para a dosagem da mieloperoxidase (MPO), IL-1&#946; e IL-10 (pg/mL) e anÃlise histopatolÃgica, ANOVA/Bonferroni ou Kruskal Wallis/Dunn foram usados como testes estatÃsticos. P <0,05 foi aceito. Protocolo CEPA 84&#824; 2014. Animais pÃs-sÃpticos por CLP tratados com IRI apresentaram reduÃÃo dos escores de diarreia e atividade da MPO no 5 e 7 dia (diarreia 5D: [0(0-0)]; 7D: [0(0-2) / MPO do jejuno e Ãleo, 5D: 2,96Â1,01; 2,35Â0,76 e 7D:0,42Â0,14; 0,92Â0,19, respectivamente) quando comparados com os animais SHAM tratados com IRI (diarreia 5D: 1[0-1]; 7D:[2,5(1-3)] /MPO do jejuno e Ãleo, 5D: 8,16Â1,48; 7,96Â0,96; 7D: 2,51Â0,67; 2,87Â0,65, respectivamente). AlÃm disso, animais pÃs-sÃpticos tratados com IRI apresentaram reduÃÃo nos danos histopatolÃgicos no 5 e 7 dia (5D no jejuno e Ãleo: [1(1â3)] e [1(0-1)]; e 7D no Ãleo: [2(1-3)] em relaÃÃo a IRI (5D no jejuno e Ãleo: [4(2-4)] e [4(1-4)] / 7D: Ãleo [4(3-4)]) e aumento dos nÃveis da citocina IL-10 (5D no jejuno e Ãleo: 55,80 3,42; 34,45Â1,87; 7D: Ãleo: 133,00Â20,25) em comparaÃÃo com SHAM + IRI (5D no jejuno e Ãleo: 34,45Â1,87; 6,91 3,05; 7D no Ãleo: 63,67 9,08). No entanto, animais CLP + IRI nÃo tiveram alteraÃÃo da leucopenia induzida por IRI. Animais C57BL/6 pÃs-sÃpticos apresentaram reduÃÃo da lesÃo da mucosa intestinal e infiltraÃÃo de neutrÃfilos na MI induzida por IRI. Tal efeito pode ser consequente, entre outros, ao aumento de IL-10. / Nowadays the colorectal cancer (CRC) is one of the most common malignant tumors. Irinotecan have been used in the treatment of CRC and metastatic CRC. However, the treatment protocols are associated with the development of intestinal mucositis (IM), reaction that affects the therapy. The IM and severe diarrhea are common side effects that may reach 15-25% of the patients undergoing chemotherapy and the clinical management of these effects is still partly ineffective. The study of the mechanisms and mediators involved in immune response in post-sepsis has provided evidences that in this condition seems to be an inhibition of inflammatory events including neutrophil migration. Thus, the post-sepsis could influence the course of MI induced by IRI. The aim of this study is to evaluate the effects of immunomodulation in the development of inflammatory changes of IM induced by Irinotecan in severe sepsis surviving animals. C57BL / 6 male mice, 20-25g, were divided into 4 groups (n = 5-8) were subjected to the model of cecal ligation and puncture (CLP) and treated with ertapenem 20mg/kg i.p. 6 h after CLP and 12/12h for three days to induce approximately 50% of survival. Animals underwent surgery but not to puncture the cecum (SHAM) received saline (NaCl, 5 mL / kg, ip). Fifteen days after CLP, the surviving animals and animals of the SHAM group received saline (NaCl, 5 ml / kg, ip) for 4 days or Irinotecan (75mg/kg, ip). The body mass (g) was measured every day. On the 5th or 7th day, total leukocyte count (x103/&#956;L) and diarrhea (scores) were evaluated. After the death, the jejunum and the ileum were collected for determination of myeloperoxidase (MPO), IL-1&#946; and IL-10 (pg / ml) and histopathological analysis. ANOVA / Kruskal Wallis test or Bonferroni / Dunn were used as statistical tests. P <0.05 was accepted. CEPA 84/2014 protocol. Post-septic animal by CLP treated with Irinotecan decreased scores of diarrhea and MPO activity in the 5th and 7th day (diarrhea 5D: [0 (0-0)]; 7D: [0 (0-2) / MPO jejunum and ileum 5D: 2.96  1.08, 2.35  0.76 and 7D: 0.42  0.14, 0.92  0.19, respectively) compared against the SHAM animals treated with Irinotecan (diarrhea 5D: [1(0-1)]; 7D: [2.5 (1-3)] / MPO jejunum and ileum 5D: 8.15  1.48, 7.96  0.96; 7D: 2.51  0.67, 2.87  0.65, respectively). Furthermore, post-septic mice treated with Irinotecan decreased histopathological damage in the 5th and 7th day (5D jejunum and ileum: [1(1-3)] and [1(0-1)], and 7D in the ileum: [2 (1-3)] for Irinotecan (jejunum and ileum 5D: [4 (2-4)] and [4 (1-4)] / 7D: ileum [4 (3-4)]) and increased levels of IL-10 (jejunum and ileum 5D: 55.80  3.42; 34.45  1.87; 7D: Ileum: 133.00  20.25) compared against the SHAM + IRI (5D in jejunum and ileum: 34.45  1.87; 6.91  3.05; 7D ileum:. 63.67  9.08). However, IRI + CLP animals had no change of IRI-induced leukopenia. C57BL/6 post-septic animals had reduced intestinal mucosal injury and neutrophil infiltration in IM induced by Irinotecan, this effect can be consequential, among others, of the increase in IL-10.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The use of substances from natural products has grown over the years, being the basis of therapeutic products. Lignans are molecules with large pharmaceutical use, which has aroused interest in search of new drugs to treat diseases. Much interest has been focused on their effectiveness as an antineoplastic agent. Thus, the aim of this study was to evaluate the in vitro anticancer potencial of compounds isolated from ethanolic extract of Combretum fruticosum, as well as, to study the possible mechanisms of action of a dibenzylbutyrolactone type lignan, trachelogenin, in colorectal cancer cells. The fractionation of the ethanolic extract of C. fruticosum resulted in the isolation of seven compounds: three triterpenes, two mixtures of &#946;-sitosterol and stigmasterol steroids and two lignans Among them, the lignan, trachelogenin showed higher cytotoxic activity, with IC50 values ranging from 0.8 to 32.4 ÂM in glioblastoma (SF-295) and leukemic (HL-60) cells, respectively. While in normal cells (3T3-L1 and PBMC cells) the IC50 values were greater than 64.3 ÂM. The antiproliferative profile of different times of incubation was performed in SF-295 and HCT-116 cells. The cytotoxic effect on SF-295 cells was only observed after 72 hours of incubation, whereas in HCT-116 cells, this effect was observed after 48 hours, and it was enhanced after 72 hours of incubation. Before these results, analyzing cell cycle profile, membrane integrity, phosphatidylserine externalization and expression of proteins related to cell death by apoptosis in HCT-116 cells, it was not observed significantly changed, suggesting that the antiproliferative effect of this lignan is not related to mechanisms of cell death such as apoptosis and/or necrosis. Autophagy seems to be one of the cell death mechanisms involved in the antiproliferative effect of trachelogenin, because we observed an increase on number and size of acidic vesicular organelles (AVO) as well as the expression of proteins recruited during autophagy (LC3 A and B-II and Beclin-1) in cells treated with trachelogenin, although this seems not to be the only process involved. Therefore, we conclude that trachelogenin showed potent antitumor activity in vitro, and this effect may be related to the induction of autophagy. However, further tests should be conducted to confirm these proposals and to evaluate its mechanism of action and the therapeutic potential of this molecule better. / A utilizaÃÃo de substÃncias derivadas de produtos naturais tem crescido com o passar dos anos, formando a base dos produtos terapÃuticos. As lignanas sÃo molÃculas com amplo uso farmacÃutico, o que tem despertado interesse na pesquisa e busca de novos fÃrmacos no tratamento de doenÃas. Muito interesse tem sido focado na sua eficÃcia como agente antineoplÃsico. Com isso, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial anticÃncer in vitro de compostos isolados a partir do extrato etanÃlico dos talos da Combretum fruticosum, bem como, estudar os possÃveis mecanismos de aÃÃo da trachelogenina, uma lignana do tipo dibezilbutirolactona, em cÃlulas de cÃncer colorretal (HCT-116). O fracionamento do extrato etanÃlico da C. fruticosum resultou no isolamento de sete compostos: trÃs triterpenos, duas misturas dos esteroides &#946;-sitosterol e estigmasterol e duas lignanas. Dentre eles, a trachelogenina mostrou maior atividade citotÃxica, apresentando valores de CI50 que variaram de 0,8 a 32,4 ÂM em cÃlulas tumorais de glioblastoma (SF-295) e leucÃmicas (HL-60), respectivamente, apÃs 72 horas de incubaÃÃo. Enquanto que, para cÃlulas nÃo tumorais (3T3-L1 e CMSP) esses valores foram maiores que 64,3 ÂM. O perfil antiproliferativo em diferentes perÃodos de incubaÃÃo foi realizado em cÃlulas SF-295 e HCT-116. O efeito citotÃxico em cÃlulas SF-295 foi observado apenas apÃs 72 horas de incubaÃÃo, enquanto que, em cÃlulas HCT-116, esse efeito foi observado apÃs 48 horas, sendo intensificados apÃs 72 horas de incubaÃÃo. Diante desses resultados, em cÃlulas HCT-116, a anÃlise do perfil do ciclo celular, integridade de membrana, externalizaÃÃo da fosfatidilserina e expressÃo de proteÃnas relacionadas ao processo de morte celular por apoptose nÃo apresentou alteraÃÃes significativas, sugerindo que o efeito antiproliferativo desta lignana nÃo està relacionado com processos de morte por apoptose e/ou necrose. A autofagia parece estar envolvida no mecanismo antiproliferativo da trachelogenina, visto que foi possÃvel verificar um aumento do nÃmero e do tamanho de organelas vesiculares Ãcidas (AVOs) bem como um aumento da expressÃo de proteÃnas recrutadas durante a autofagia (LC3 A e B II e Beclina-1) nas cÃlulas tratadas com a trachelogenina, embora nÃo pareÃa ser o Ãnico processo envolvido. Logo, podemos concluir que a trachelogenina apresentou potente atividade anticÃncer in vitro, e este efeito pode estar relacionado com a induÃÃo da autofagia. No entanto, outros testes devem ser realizados para confirmar as propostas acima apresentadas e para uma melhor avaliaÃÃo do mecanismo de aÃÃo e do potencial terapÃutico desta molÃcula.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Acute pancreatitis is an inflammatory disease of the pancreas which involves a complex sequence of pathophysiological events, many of which are still unknown. Recent data give more importance to the events that happen within the pancreatic cell. The severity and duration of the stimulus applied to pancreatic acinar cells may lead to apoptosis or necrosis. A large number of studies have demonstrated that the lectin of Canavalia ensiformis (ConA) and Canavalia brasiliensis (ConBr) induce cell death by apoptosis in various cell types. However there are no studies on its anti-necrotic effects. Thus, we investigated the effects of ConA and ConBr concerning the death of pancreatic acinar cells, induced by the main triggers of acute pancreatitis. The acinar cells were isolated from the pancreas of male Swiss mice. The cells were pre-incubated with ConA and ConBr for 1h followed by the induction of cell damage by SATC, ethanol or APO administration for 30 min (room temperature, RT). To evaluate the role of the lectin domain of ConBr and ConA, the lectins were preincubated for 1h at 37ÂC with its alpha-methyl-mannoside (&#945;-MM) ligand sugar, or with a nonbinding sugar, D-galactose, both at a concentration of 0.2M, prior to experimental protocols. All groups were incubated for 5 minutes with the nuclear marker Hoechst 33342 (50 Âg/ml) and with the necrosis marker, propidium iodide (PI; 10 Âg/ml). In another analysis, ConA and ConBr conjugated to fluorescein isothiocyanate (FITC) were incubated for 1h (RT) with the acinar cells. To evaluate the effect of ConA and ConBr effect on mitochondrial membrane potential (&#916;&#1136;m) of pancreatic acinar cells under administration of SATC, ethanol or APO, the cells were stained with Hoechst 33342, and tetramethylrhodamine methyl ester (TMRM, fluorescent dye that is readily sequestered by active mitochondria). All analyzes were performed using confocal microscope FluoViewTM 1000 - Olympus. The results showed that the SATC, ethanol and APO groups caused significant necrosis on cells compared to control groups, and pretreatment ConBr and ConA caused a significant protection against harmful necrosis caused by all three agents. When lectins were complexed to their &#945;-MM ligand sugar, this protective effect was significantly reversed; not being changed, however, by no specific sugar D-galactose, suggesting a participation of the lectin domain in protective effect. Lectins conjugated with FITC showed a marking on acinar cells at the level of membrane, confirming its interaction with carbohydrates present on the surface of these cells. In the analysis of mitochondrial potential, SATC, ethanol and mainly APO triggered intense depolarization of &#916;&#1136;m of pancreatic acinar cells. Pretreatment with ConA prevented mitochondrial dysfunction in all injury models, however ConBr prevented this injury caused by a dysfunction in SATC and ethanol, without changing the dysfunction caused by APO. Given the above, Con A and Con Br protect pancreatic acinar cells against necrosis induced by sulfated taurolithocholic acid, ethanol and APO with its effects mediated by lectin domain, beyond of the maintenance the integrity of the mitochondrial membrane of pancreatic cell, determinant factor to prevent the course of necrosis in acute pancreatitis. / A pancreatite aguda à uma doenÃa inflamatÃria do pÃncreas que envolve uma sequÃncia complexa de eventos fisiopatolÃgicos, muitos dos quais ainda desconhecidos. Dados recentes atribuem maior importÃncia aos eventos que aconteceriam no interior da cÃlula pancreÃtica. A gravidade e a duraÃÃo do estÃmulo aplicado Ãs cÃlulas acinares pancreÃticas podem levar à apoptose ou à necrose. Um grande nÃmero de estudos demonstraram que as lectinas de Canavalia ensiformis (ConA) e Canavalia brasiliensis (ConBr) induzem morte celular por apoptose em diversos tipos de cÃlulas. Contudo nÃo hà estudos sobre seus efeitos anti-necrÃticos. Dessa forma, investigamos os efeitos de ConA e ConBr frente à morte de cÃlulas acinares pancreÃticas, induzida pelos principais desencadeadores da pancreatite aguda. As cÃlulas acinares foram isoladas de pÃncreas de camundongos Swiss machos. As cÃlulas foram previamente incubadas durante 1h com ConA (200 Âg/ml) e ConBr (200 Âg/ml) seguido da induÃÃo das lesÃes celulares pela administraÃÃo de SATC (500ÂM), etanol (850mM) ou APO (100 ÂM) durante 30 min (T.A). Para avaliar a participaÃÃo do domÃnio lectÃnico de ConA e ConBr, as lectinas foram previamente incubadas, durante 1h a 37ÂC, com seu aÃÃcar ligante &#945;-metil-manosÃdeo (&#945;-MM), ou com um aÃÃcar nÃo ligante, D-galactose, ambos na concentraÃÃo de 0,2M, antes dos protocolos experimentais. Todos os grupos foram incubados por 5 minutos com o marcador nuclear Hoechst 33342 (50 Âg/ml) e com o marcador de necrose iodeto de propÃdeo (IP; 10 Âg/ml). Em outra anÃlise, ConA e ConBr conjugadas ao isotiocianato de fluoresceÃna (FITC) foram incubadas durante 1h (T.A), com as cÃlulas acinares. Para a avaliaÃÃo do efeito de ConA e ConBr no potencial de membrana mitocondrial (&#916;&#1136;m) de cÃlulas acinares pancreÃticas sob administraÃÃo de SATC, etanol ou APO, as cÃlulas foram marcadas com Hoechst 33342 e tetrametilrodamina-metilÃster (TMRM, corante fluorescente que à prontamente sequestrado pela mitocÃndria ativa). Todas as anÃlises foram realizadas no microscÃpio confocal FluoViewTM 1000 â Olympus. Os resultados mostraram que os grupos SATC, etanol e APO causaram necrose significativa Ãs cÃlulas, quando comparado com os grupos controles e que o prÃ-tratamento de ConA e ConBr promoveu proteÃÃo significativa (p < 0,05) contra a necrose causada pelos trÃs agentes lesivos. Quando as lectinas foram complexadas ao seu aÃÃcar ligante, &#945;-MM, este efeito protetor foi significativamente revertido (p < 0,05); nÃo sendo alterado, porÃm, pelo aÃÃcar nÃo especÃfico D-galactose, evidenciando a participaÃÃo do domÃnio lectÃnico no seu efeito protetor. As lectinas conjugadas com FITC evidenciaram uma marcaÃÃo nas cÃlulas acinares a nÃvel de membrana, confirmando a sua interaÃÃo com carboidratos presentes na superfÃcie dessas cÃlulas. Na anÃlise do potencial mitocondrial, SATC, etanol e principalmente APO desencadearam intensa despolarizaÃÃo do &#916;&#1136;m das cÃlulas acinares pancreÃticas. O prÃ-tratamento com ConA preveniu (p < 0,05) a disfunÃÃo mitocondrial em todos os modelos de lesÃo, contudo ConBr preveniu essa disfunÃÃo na lesÃo causada por SATC e etanol (p < 0,05), sem alterar a disfunÃÃo causada por APO. Diante do exposto, ConA e ConBr protegem cÃlulas acinares pancreÃticas contra a necrose induzida por Ãcido taurolitocÃlico sulfatado, etanol e APO, tendo seus efeitos mediados pelo domÃnio lectÃnico, alÃm da manutenÃÃo da integridade da membrana mitocondrial da cÃlula pancreÃtica, fator determinante para evitar o curso da necrose na pancreatite aguda.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O acetato de citronelila à um monoterpeno presente no Ãleo essencial de diversas plantas como a citronela. Estudos mostraram sua atividade como substÃncia anti-inflamatÃria, antioxidante, antimicrobiana e analgÃsica, sendo seu maior uso, na veterinÃria como repelente para insetos. Entretanto, pesquisas que mostrem sua atividade como antidepressivo e ansiolÃtico em modelos experimentais, nÃo foram realizadas. O presente estudo investigou a atividade antidepressiva em camundongos nos testes experimentais do nado forÃado e teste de suspensÃo da cauda, bem como o envolvimento do sistema monoaminÃrgico nestes efeitos. A anÃlise neuroquÃmica a fim de verificar a atividade antioxidante nos camundongos submetidos ao teste do nado forÃado tambÃm foi realizado. AlÃm disso, foi verificada tambÃm a atividade ansiolÃtica, no teste do plus maze, a avaliaÃÃo da atividade motora no teste do campo aberto, a atividade anticonvulsivante no teste das convulsÃes induzidas por pentilenotetrazol, e a atividade hipnÃtica no tempo de sono induzido por pentobarbital. A toxicologia e o dano aos ÃrgÃos (cÃrebro, fÃgado e rim) dos animais tambÃm foi avaliada. O acetato de citronelila reduziu o tempo de imobilidade no teste do nado forÃado e no teste de suspensÃo da cauda, nas doses de 50 e 100 mg/kg, v.o. O efeito de anti-imobilidade do acetato de citronelila (50 e 100 mg/kg) foi revertido pelo prÃ-tratamento com PCPA 100 mg/kg i.p. (inibidor da sÃntese de serotonina), Prazosin 1mg/kg, i.p. (antagonista &#945;-1 adrenÃrgico), ioimbina 1mg/kg, i.p. (antagonista &#945;-2 adrenÃrgico), SCH23390, 15 Âg/kg, s.c. (antagonista dopaminÃrgico D1) ou sulpirida 50 mg/kg, i.p. (antagonista dopaminÃrgico D2). O acetato de citronelila nÃo alterou a atividade locomotora espontÃnea dos animais no teste do campo aberto, bem como nÃo apresentou atividade ansiolÃtica nos animais, no teste do plus maze. A anÃlise dos nÃveis de monoaminas mostrou que houve um aumento dos nÃveis das monoaminas (NA, DA e 5-HT) na dose de 100 mg/kg do acetato de citronelila e que a dose de 50 mg/kg aumentou os nÃveis de NA no corpo estriado dos camundongos. Houve uma diminuiÃÃo nos nÃveis de metabÃlitos (DOPAC, HVA e 5-HIAA) no corpo estriado dos camundongos. Os testes de toxicidade mostraram que o acetato de citronelila apresentou um nÃvel de seguranÃa 5 (CINCO), de acordo com o protocolo OECD 423 e mostrou que nÃo houve alteraÃÃes histolÃgicas significativas nos ÃrgÃos dos animais estudados. Com isso, o estudo sugere que o efeito de anti-imobilidade do acetato de citronelila no teste do nado forÃado està relacionado com sua aÃÃo nos receptores adrenÃrgicos, dopaminÃrgicos e serotonÃrgicos, o qual foi evidenciado por um aumento nos nÃveis de monoaminas no cÃrebro, sugerindo um possÃvel efeito antidepressivo desta substÃncia. NÃo houve alteraÃÃo da atividade locomotora dos animais, bem como evidÃncia de efeitos ansiolÃticos no teste do plus maze, alÃm de, nÃo apresentar efeitos toxicolÃgicos significativos. / The citronellyl acetate is a monoterpene present in the essential oil of various plants with citronella. Studies have shown its activity as anti-inflammatory, antimicrobial substance analgesic, antioxidant, and being their biggest use in veterinary as insect repellent. However, surveys show that its activity as an antidepressant and anxiolytic in experimental models, were not performed. The present study investigated the antidepressant activity in mice in the experimental tests the forced swimming and tail suspension test as well as the involvement of the monoaminergic system in these effects. The neurochemical analysis in order to verify the antioxidant activity in mice submitted to the forced swimming test was also performed. Furthermore, it was also verified anxiolytic activity in the plus maze test, the assessment of motor activity in the open field test, the testing of anticonvulsant activity in pentylenetetrazole-induced seizures and hypnotic activity on the sleeping time induced by pentobarbital. Toxicology and damage to organs (brain, liver and kidney) of the animals was also evaluated. Citronellyl acetate reduced the immobility time in the forced swimming test and tail suspension test, at doses of 50 and 100 mg/kg, p.o. The anti-immobility effect of citronellyl acetate (50 and 100 mg / kg) was reversed by pretreatment with PCPA 100 mg/kg i.p. (inhibitor of serotonin synthesis), Prazosin 1 mg / kg, i.p. (&#945;-1 adrenoceptor antagonist), Yohimbine 1 mg / kg, i.p. (&#945;-2 adrenergic receptor antagonist), SCH233390, 15 mg / kg, s.c. (D1 dopamine antagonist) sulpiride 50 mg / kg, i.p. (dopamine D2 antagonist). Citronellyl acetate did not alter spontaneous locomotor activity of animals in the open field test, and showed no anxiolytic activity in animals in the plus maze test. The analysis of the levels of monoamines showed an increase in the levels of monoamines (NA, DA and 5-HT) at a dose of 100 mg/kg of citronellyl acetate and the dose of 50 mg/kg increased levels of NA in striatum of mice. There was a decrease in the levels of metabolites (DOPAC, 5-HIAA and HVA) in the striatum of mice. Toxicity tests have shown that citronellyl acetate showed a security level five (5) according to the OECD 423 protocol and showed no significant histology alterations in the organs of the animals studied. Thus, the study suggests that the anti-immobility effect of citronelila acetate in the forced swim test is related to its action on adrenergic, dopaminergic and serotonergic receptors, which was evidenced by an increase in the levels of monoamines in the brain, suggesting a possible antidepressant effect of this substance. Donât have altering the locomotor activity of animals and evidence of anxiolytic effects in plus maze test, and not presented significant toxicological effects.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / As algas marinhas sÃo um grupo de seres vivos aquÃticos com capacidade de produzir polissacarÃdeos sulfatados. Esses polissacarÃdeos sÃo encontrados em grandes concentraÃÃes nas algas da espÃcie Gracilaria cornea e possuem diversas finalidades comerciais, sendo utilizados nos principais setores industriais. Possuem tambÃm relevÃncia cientÃfica por apresentarem diversas atividades biolÃgicas. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a citotoxicidade renal dos polissacarÃdeos sulfatados totais (PSTs) da alga marinha Gracilaria cornea. Primeiramente, estudaram-se os efeitos dos PSTs, em trÃs concentraÃÃes (1&#956;g/mL, 3&#956;g/mL e 4,5&#956;g/mL), no sistema de perfusÃo de rim de rato isolado com a finalidade de avaliar as possÃveis alteraÃÃes dos parÃmetros renais. Neste modelo experimental foram utilizados ratos Wistar machos (280-300 g). ApÃs a perfusÃo renal, os rins foram submetidos à anÃlise histolÃgica. Os parÃmetros avaliados foram analisados pela ANOVA e Student t-test, com p<0,05. Investigaram-se os efeitos causados pelos PSTs em cultura de cÃlulas tubulares renais do tipo MDCK (Madin-Darby canine kidney). Essas cÃlulas foram cultivadas em garrafas plÃsticas a 37 ÂC em atmosfera de 5% de CO2, com meio RPMI 1640 suplementado com soro bovino fetal a 10%. Para avaliar o tipo de morte celular causada pelos PSTs em cultura de cÃlulas MDCK, foram realizados ensaios com anexina V-FITC e iodeto de propÃdio, marcadores de apoptose e necrose, respectivamente, no citÃmetro de fluxo com a concentraÃÃo de 50 Âg/mL dos PSTs. Os resultados encontrados demonstraram que os PSTs promoveram aumento significativo na pressÃo de perfusÃo (PP) e na resistÃncia vascular renal (RVR) nas concentraÃÃes de 3,0 e 4,5 Âg/mL. O fluxo urinÃrio (FU) diminuiu com a concentraÃÃo de 1 Âg/mL dos PSTs, porÃm sofreu aumento nas demais concentraÃÃes. O ritmo de filtraÃÃo glomerular (RFG) diminuiu significativamente nas trÃs concentraÃÃes. Foi observada diminuiÃÃo do percentual de transporte dos eletrÃlitos cloreto, sÃdio e potÃssio. O Clearance OsmÃtico (COSM) foi diminuÃdo e aumentado com as concentraÃÃes de 1,0 e 4,5 &#956;g/mL, respectivamente. As alteraÃÃes histolÃgicas nos rins indicaram alteraÃÃes tubular e glomerular. O tratamento de cultura de cÃlulas com os PSTs causou reduÃÃo da viabilidade celular em todas as concentraÃÃes estudadas (200, 100, 50, 25, 12,5, 6,25 e 3,12 Âg/mL) nÃo sendo concentraÃÃo-dependente. Observou-se morte celular significativa, com evidÃncias de um processo apoptÃtico, alÃm de morte celular por apoptose tardia. Esses achados tentam colaborar para um melhor conhecimento acerca dos efeitos citotÃxicos renais dessa alga e pode ainda propiciar a descoberta de novas ferramentas farmacolÃgicas antitumorais. / The red marine algae are a group of sea live beings able to produce sulfated polysaccharides. These polysaccharides are found in great amount in algae of Gracilaria cornea species and they also have several commercial uses, mainly in industrial fields. They are also used for scientific pourposes because of its biologic activities. This work`s goal is to evaluate the effects of sulfated polysaccharides total (SPTs) from the seaweed Gracilaria cornea contributing to a better understanding about its effects. First, we have studied SPTs effects in three concentrations (1&#956;g/mL, 3&#956;g/mL e 4,5&#956;g/mL), in the renal perfusion system aiming to evaluate the possible changes in kidney parameters. In this experimental model we used male Wistar rats (280-300 g). After the perfusion, the kidneys were subjects of histological analysis. The parameters were analised using ANOVA and Student t-test (p<0,005). The results we have found proved that SPTs promoted a significant increase in perfusion pressure (PP) and in renal vascular resistance (RVR) in concentrations 3,0 and 4,5 Âg/mL. The urinary flow (UF) decreased with the 1 Âg/mL SPTs concentration, but increased with the 3,0 and 4,5 Âg/mL concentrations. The glomerular filtration rate (GFR) significantly dicreased with all the three concentrations. We noticed a decrease in sodium, potassium and chloride transport. The Osmotic Clearance (COSM) decreased with 1,0 &#956;g/mL concentration and increased with 4,5 &#956;g/mL concentration. The histological changes were mild and included tubular and glomerular damages. We also investigated the side effects caused by SPTs in cultured renal tubular cells of the type MDCK (Madin-Darby canine kidney). MDCK cells were grown in plastic flasks at 37 ÂC in umidified atmosphere of 5% CO2 â air with RPMI 1640 medium supplemented with 10% fetal calf serum. The SPTs caused decrease in cell viability in all studied concentrations (200, 100, 50, 25, 12,5, 6,25 and 3,12 Âg/mL) and this effect did not depend on concentration. To evaluate the type of cell death caused by SPTs in MDCK cells, we performed anexin V-FITC and propidium iodide assays, respectively apoptosis and necrosis indicators. This analysis was made in a flow cytometry system with a 50 Âg/mL SPTs concentration. We found a significant cell death amount, with apoptotic signs, and also late apoptotic cell death. These findings can improve the understanding about this algae biologic activities and help to find new farmacologic antitumoral weapons.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A doenÃa de Parkinson (DP) Ã caracterizada por uma degeneraÃÃo progressiva dos neurÃnios da substÃncia negra (SN) e uma concomitante diminuiÃÃo do conteÃdo de dopamina no estriado, que pode ser mimetizada pela administraÃÃo de 6-OHDA. Visto que o ATP liberado das cÃlulas danificadas exerce efeitos deletÃrios diretos sobre os neurÃnios, agindo atravÃs de receptores P2X7, o objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos do Brilliant Blue G (BBG), um antagonista dos receptores P2X7, sobre a neurotoxicidade induzida por 6-OHDA. Ratos Wistar machos receberam injeÃÃes estereotÃxicas de 6-OHDA (18 Âg/3Âl) no estriado direito e foram tratados com BBG (45 mg/kg, i.p. 48/48hs) durante 14 dias. Em uma sÃrie adicional de experimentos, os animais receberam o antagonista seletivo A-438079 (10 ÂM i.c.v.) por 14 dias. O tratamento com BBG diminuiu o nÃmero de rotaÃÃes contralaterais no teste da apomorfina, efeito que foi mimetizado pelo antagonista seletivo A-438079. O BBG tambÃm melhorou o desempenho dos animais no teste da esquiva passiva (memÃria de curta duraÃÃo), assim como na versÃo com plataforma sinalizada do labirinto aquÃtico. O antagonismo dos receptores P2X7 pelo BBG preveniu ainda a reduÃÃo do conteÃdo de dopamina no estriado e SN, assim como a perda de neurÃnios dopaminÃrgicos, a microgliose e astrogliose no estriado. O tratamento com BBG tambÃm diminuiu os nÃveis de IL-1&#946; no estriado, apesar das diferenÃas observadas entre os grupos nÃo serem estatisticamente diferentes. Com o objetivo de entender melhor o mecanismo de aÃÃo do BBG, foram utilizados modelos in vitro explorando a sinaptotoxicidade (sinaptossomas estriatais) e neurotoxicidade (cÃlulas SH-SY5Y dopaminÃrgicas diferenciadas). AlÃm da demonstraÃÃo da presenÃa dos receptores P2X7 nos terminais nervosos estriatais, foi observado que o BBG 100 nM preveniu a disfunÃÃo sinaptossomal. TambÃm demonstramos a presenÃa dos receptores P2X7 nas cÃlulas SH-SY5Y, assim como sua co-localizaÃÃo com tirosina hidroxilase, onde o prÃ-tratamento com BBG 100 nM diminuiu o dano celular, avaliado atravÃs da liberaÃÃo de lactato desidrogenase. Os resultados obtidos no presente estudo sugerem que os receptores P2X7 contribuem para a patogÃnese da DP atravÃs de um triplo mecanismo sobre a sinaptotoxicidade, gliose e neurotoxicidade, ressaltando o potencial terapÃutico dos antagonistas desses receptores na doenÃa. / Parkinsonâs disease (PD) is characterized by a progressive degeneration of dopaminergic neurons in the substantia nigra (SN) and a concomitant decrease of dopamine (DA) in the striatum, which can be modeled by 6-OHDA administration. Since ATP released from damaged cells can exert noxious effects on neurons, acting through its P2X7 receptors (P2X7R), the aim of the present study was to investigate the effects of a P2X7R antagonist, Brilliant Blue G (BBG) on 6-OHDA-induced neurotoxicity. Male Wistar rats received stereotaxic injections of 6-OHDA (18 Âg/3Âl) into the right striatum and were treated with BBG (45 mg/kg, i.p. 48/48 h) for two weeks. In an additional experiment, animals were treated with the selective antagonist A-438079 (10 ÂM i.c.v.) for two weeks. BBG decreased the number of contralateral rotations in the apomorphine test, an effect mimicked by the selective P2X7R antagonist A438079. BBG has also improved the animalsâ performance in the passive avoidance test (short-term memory) and in the cued version of the Morris Water maze. The antagonism of P2X7R by BBG has also prevented the reduction of dopamine content in the striatum and SN as well as the loss of dopaminergic neurons, and microgliosis and astrogliosis in the striatum. BBG treatment also decreased the IL-1&#946; levels in striatum, despite the observed effect not being statistically significant. To grasp the mechanism of action of BBG, we used in vitro models exploring synaptotoxicity (striatal synaptosomes) and neurotoxicity (dopamine-differentiated SH-SY5Y cells). Besides showing that P2X7R are present in striatal dopaminergic terminals, we observed that BBG 100 nM prevented the 6-OHDA-induced synaptosomal dysfunction. Furthermore, we have shown the presence of P2X7 receptors in SH-SY5Y cells, their co-localization with tyrosine hydroxilase, and that BBG attenuates the cell damage, evaluated through lactate dehydrogenase release. The present results suggests that P2X7R contribute to PD pathogenesis through a triple impact on synaptotoxicity, gliosis and neurotoxicity, highlighting the therapeutic potential of P2X7R antagonists in the disease.

nÃo hà / A prevalÃncia de obesidade no Brasil à alarmante com estimativa de 48,5% de adultos com excesso de peso. A cirurgia bariÃtrica à considerada o tratamento de maior eficÃcia para a obesidade com benefÃcios para a saÃde orgÃnica e melhora na qualidade de vida. O objetivo deste estudo foi analisar a qualidade de vida dos pacientes submetidos à derivaÃÃo gÃstrica em Y de Roux (DGYR) hà mais de 5 anos, grupo bariÃtrica (GB), comparando com obesos (IMC 35 kg/m2 e comorbidades ou IMC &#8805; 40 kg/m2) nÃo operados, grupo controle (GC). O GB respondeu um interrogatÃrio de dados antropomÃtricos e realizou exames laboratoriais. Em ambos os grupos analisamos a qualidade de vida atravÃs do questionÃrio Moorehead-Ardelt Quality of Life Questionnaire (M-A QoLQ) e, ansiedade e depressÃo com o instrumento Escala hospitalar de ansiedade e depressÃo. O GB, 53 pacientes operados, apresentou idade de 44  12 anos e perderam 82,8  16,5% do excesso de peso. A entrevista foi realizada 6,4  0,9 anos apÃs a cirurgia, esse grupo apresentou reganho de 22,8  13,4% do excesso de peso perdido. A avaliaÃÃo do M-A QoLQ revelou qualidade de vida muito boa em 62,3%, boa em 34,0%, razoÃvel em 3,8%. A alteraÃÃo nutricional mais prevalente foi a deficiÃncia de vitamina D, em 70% dos pacientes. Neste grupo, foram vistos 20,4% dos pacientes com ansiedade e 1,9% com depressÃo. No GC, foram entrevistados 55 voluntÃrios com 35  10 anos, IMC de 42,3  5,3 kg/m2. Na avaliaÃÃo obtivemos, 5,4% de qualidade de vida muito boa, 16,3% boa, 65,4% razoÃvel, 9,2% ruim e 3,7% muito ruim. O GC apresentou 42,1% de ansiedade e 26,3% depressÃo. Houve diferenÃa estatisticamente significativa da qualidade de vida nos grupos estudados. A depressÃo apresentou maior prevalÃncia no GC com diferenÃa estatisticamente significante, entretanto a ansiedade nÃo apresentou diferenÃa nos grupos. Analisando GB, os fatores que influenciaram positivamente a qualidade de vida foram a ausÃncia de deficiÃncia de ferro, a ausÃncia de ansiedade e depressÃo. / The prevalence of obesity in Brazil is alarming with estimated 48.5% of adults overweight. Bariatric surgery is considered the treatment more effective for obesity with benefits for organic health and improved quality of life. The objective of this study was to analyze the quality of life of patients undergoing gastric bypass Roux-Y (DGYR) for over five years, bariatric group (GB), compared to obese (BMI 35 kg / m2 and comorbidities or BMI &#8805; 40 kg / m2) non-operated control group (CG). GB answered an interrogation anthropometric data and performed laboratory tests. In both groups we analyzed the quality of life through the questionnaire Moorehead-Ardelt Quality of Life Questionnaire (MA QoLQ) and anxiety and depression with the Hospital Scale tool for anxiety and depression. GB, 53 operated patients, showed age was 44  12 years and lost 82.8  16.5% overweight. The interview was conducted 6.4  0.9 years after surgery, this group had regained 22.8  13.4% of excess weight lost. Evaluation of MA QoLQ proved very good quality of life in 62.3%, good in 34.0%, reasonable 3.8%. The most prevalent nutritional change was the vitamin D deficiency in 70% of patients. In this group, 20.4% were seen in patients with anxiety and 1.9% with depression. In the control group, were interviewed 55 volunteers with 35  10 years, BMI 42.3  5.3 kg / m2. In the evaluation we obtained 5.4% of very good quality of life, 16.3% good, 65.4% reasonable, 9.2% and 3.7% bad very bad. The CG showed 42.1% and 26.3% of anxiety depression. There was a statistically significant difference in the quality of life in both groups. Depression is more prevalent in GC with a statistically significant difference, however anxiety showed no difference in the groups. GB analyzing the factors that influenced the quality of life were the absence of iron deficiency in the absence of anxiety and depression.