CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / In this in vitro study the effects of the monocyclic sesquiterpene alcohol (-)-α-bisabolol on the contractile behavior of rat and mouse smooth muscle preparations were investigated. Under resting tonus, (-)-α-bisabolol relaxed duodenal smooth muscle preparations, whereas it showed biphasic effects in other smooth muscles, contracting endothelium-intact aortic rings and urinary bladder strips at the concentration range of 30 - 300 ÂM, and relaxing these tissues at higher concentrations. When applied on the steady state of sustained contractions, (-)-α-bisabolol showed only relaxing properties. It preferentially relaxed contractions induced electromechanically by a high extracellular concentration of K+ than those induced pharmacomechanically by adding phenylephrine or carbachol in the bath chamber. The pharmacological potency of (-)-α-bisabolol was variable being higher in mesenteric vessels, whereas it exerted relaxing activity with lesser potency on tracheal or colonic tissues. Tissues possessing spontaneous activity were also differentially influenced by (-)-α-bisabolol that completely decreased spontaneous contractions in duodenum whereas increased their amplitude in urinary bladder. The (-)-α-bisabolol showed more pronounced inhibitory effects on the concentration-effect curves induced by calcium or barium when constructed in presence of an agent producing eletromecanic coupling. The vasodilatory effect of (-)-α-bisabolol in aortic rings did not involve a role of endothelial factors or of potassium channels. In aortic preparations under calcium free conditions (-)-α-bisabolol augmented the phasic contractions induced by caffeine. In vivo, (-)-α-bisabolol attenuated the increased responses of carbachol in tracheal rings of ovalbumin-sensitized rats challenged with ovalbumin, but was without effect in the decreased responsiveness of urinary bladder strips in animals submitted to ifosfamide treatment. In summary, (-)-α-bisabolol is characterized as a biologically active substance on smooth muscle. At least part of the underlying mechanism involved in the (-)-α-bisabolol -induced inhibitory actions is related to its ability in reducing electromechanical coupling. / Nesse estudo in vitro foram investigados os efeitos do Ãlcool sesquiterpÃnico monocÃclico (-)-α-bisabolol no comportamento contrÃtil de preparaÃÃes isoladas de mÃsculo liso de ratos e camundongos. Na tensÃo basal, o (-)-α-bisabolol (1 â 1000 ÂM) induziu relaxamento em preparaÃÃes duodenais, mas exibiu efeitos bifÃsicos em outros tecidos, contraindo preparaÃÃes de aorta com endotÃlio e de bexiga urinÃria na faixa de concentraÃÃo entre 30-300 ÂM e relaxando as mesmas preparaÃÃes em concentraÃÃes maiores. Quando aplicado apÃs induÃÃo de prÃ-contraÃÃo sustentada, o (-)-α-bisabolol apresentou apenas propriedades relaxantes. Esse sesquiterpeno relaxou preferencialmente as contraÃÃes induzidas eletromecanicamente por uma elevada concentraÃÃo extracelular de potÃssio em comparaÃÃo com as induzidas de modo farmacomecÃnico pela adiÃÃo de fenilefrina ou carbacol na cÃmara isolada. A potÃncia farmacolÃgica do (-)-α-bisabolol foi maior em vasos mesentÃricos e menor em preparaÃÃes isoladas de traquÃia e cÃlon. Os tecidos que apresentaram atividade espontÃnea tambÃm foram influenciados de forma diferenciada pelo (-)-α-bisabolol, que aboliu as contraÃÃes espontÃneas em tecidos duodenais e aumentou a amplitude das mesmas em preparaÃÃes de bexiga urinÃria. O (-)-α-bisabolol apresentou efeitos inibitÃrios mais pronunciados para as curvas concentraÃÃo-efeito obtidas para o cÃlcio e o bÃrio em presenÃa de agente indutor de acoplamento eletromecÃnico. O efeito vasodilatador do (-)-α-bisabolol em anÃis de aorta nÃo depende de fatores endoteliais e canais para potÃssio. Em preparaÃÃes de aorta o (-)-α-bisabolol potencializou a contraÃÃo fÃsica induzida pela cafeÃna em meio sem cÃlcio. Quando administrado in vivo, o (-)-α-bisabolol atenuou a resposta exacerbada ao carbacol observada em preparaÃÃes de traquÃia de ratos sensibilizados e desafiados com ovalbumina. Entretanto, esse sesquiterpeno nÃo alterou a responsividade contrÃtil diminuÃda observada em preparaÃÃes de bexiga urinÃria de camundongos tratados com ifosfamida. Em termos gerais, o (-)-α-bisabolol apresenta-se como uma substÃncia biologicamente ativa no mÃsculo liso. O mecanismo subjacente envolvido nas aÃÃes inibitÃrias do (-)-α-bisabolol està parcialmente relacionado à sua habilidade em reduzir o acoplamento eletromecÃnico.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / Sertralina, fÃrmaco pertencente à famÃlia dos inibidores seletivos da recaptaÃÃo de serotonina, à preferencialmente utilizada na terapÃutica antidepressiva, possuindo boa tolerÃncia com baixa incidÃncia de efeitos colaterais. Neste trabalho, caracterizamos os efeitos farmacolÃgicos da sertralina sobre o padrÃo miccional de ratos anestesiados, em parÃmetros funcionais de rim isolado de ratos Wistar e em parÃmetros contrÃteis de mÃsculo liso vesical e vascular isolados de ratos. In vitro, preparaÃÃes de mÃsculo liso vesical e artÃria mesentÃrica, foram mantidas em soluÃÃo nutridora aerada com 95% O2 â 5% CO2, pH 7,4, 37ÂC, para registro isomÃtrico das contraÃÃes musculares. Usamos tambÃm rim isolado de rato, perfundido com soluÃÃo de Krebs-Henseleit modificada contendo 6% de albumina bovina (37ÂC, 95% O2 â 5% CO2). In vivo, a bexiga de rato anestesiado foi continuamente infundida com salina à temperatura ambiente (23ÂC) atravÃs de bomba de infusÃo ajustada para fluxo de 0,06 mL/min e foram avaliados os parÃmetros miccionais apÃs administraÃÃo de sertralina. Nestes experimentos, a sertralina (20 mg/kg, i.v.) aumentou significativamente a frequÃncia miccional (controle = 0,16  0,02 micÃÃes/min para 0,70  0,09 micÃÃes/min), a pressÃo basal de enchimento (controle = 4,18  2,11 cmH2O para 25,38  3,03 cmH2O) e a pressÃo intravesical mÃxima alcanÃada durante as contraÃÃes miccionais (controle = 25,78  2,11 cmH2O para 40,88  3,03 cmH2O). Em rim isolado, a administraÃÃo prÃvia de sertralina (30 ÂM) inibiu as alteraÃÃes promovidas pela fenilefrina (10-4 M) na pressÃo de perfusÃo (PP; 178,31  21,68 mmHg para 105,40  14,46 mmHg), na resistÃncia vascular renal (RVR; 6,82  0,99 mmHg/mL.g-1.min-1 para 4,32  0,55 mmHg/mL.g-1.min-1), no fluxo urinÃrio (FU; 0,43  0,15 mL.g-1.min-1 para 0,08  0,03 mL.g-1.min-1) e no ritmo de filtraÃÃo glomerular (RFG; 1,60  0,40 mL.g-1.min-1 para 0,32  0,17 mL.g-1.min-1). Em tiras isoladas de bexiga de rato, a sertralina inibiu, de maneira dependente de concentraÃÃo as contraÃÃes induzidas por K+ 60 mM ou carbacol (CCh) 3 ÂM com CI50 de 21,0 [15,8 â 28,0] ÂM e 22,8 [12,9 â 40,4] ÂM, respectivamente. Adicionada no estado estacionÃrio da contraÃÃo induzida por K+ (60 mM) ou CCh (1 ÂM), a sertralina produziu efeito relaxante de maneira dependente de concentraÃÃo com CI50 de 94,3 [42,2 - 146,4] ÂM e 67,8 [20,1 - 115,5] ÂM, respectivamente. Em anÃis de artÃria mesentÃrica estimulados por K+ (60 mM) ou fenilefrina (PHE, 60 ÂM) em meio sem Ca2+ com EGTA (0,5 mM), a sertralina (100 ÂM) inibiu as contraÃÃes induzidas por Ca2+ de 124,1  8,1% para 48,3  14,0% e 74,8  13,5% para 35,9  9,4%, respectivamente. Em suma, a sertralina aumentou a frequÃncia miccional em ratos anestesiados, inibiu as alteraÃÃes induzidas por PHE em rim isolado sendo seus efeitos provavelmente causados por sua aÃÃo antiespasmÃdica vascular. Essa hipÃtese foi confirmada pelos efeitos inibitÃrios em tiras de mÃsculo liso vesical e em anÃis de artÃria mesentÃrica, sendo estes promovidos por provÃvel interferÃncia da sertralina com o influxo de Ca2+ pela membrana plasmÃtica seja por canais operados por receptor ou por canais voltagem-dependentes. / Sertraline, a drug belonging to the family of selective serotonin reuptake inhibitors, is used in antidepressant therapy, and has good tolerance with low incidence of side effects. Here we have characterized the pharmacological effects of sertraline on the pattern of voiding anesthetized rats, on the renal functional parameters of isolated rat kidney and on the contractile parameters of isolated bladder and mesenteric smooth muscle. In vitro, strips of urinary bladder and rings of mesenteric artery were kept in physiological solution aerated with 95% O2 - 5% CO2, pH 7.4, 37ÂC, for the record of isometric muscle contractions. We also used isolated rat kidney perfused with modified Krebs-Henseleit solution containing 6% bovine albumin (37ÂC, 95% O2 - 5% CO2). In vivo, urinary bladder of anesthetized rats was continuously infused with saline at room temperature (23ÂC) via an infusion pump set to flow 0.06 mL/min and urinary parameters were evaluated after administration of sertraline. In these experiments, sertraline (20 mg/kg, i.v.) significantly increased voiding frequency (control = 0.16  0.02 urination/min to 0.70  0.09 urination/min), basal pressure of filling (control = 4.18  2.11 cmH2O to 25.38  3.03 cmH2O) and maximum bladder pressure reached during the bladder contractions (control = 25.78  2.11 cmH2O to 40.88  3.03 cmH2O). In isolated kidneys, previous administration of sertraline (30 ÂM) inhibited the changes promoted by phenylephrine (10-4 M) in perfusion pressure (PP; 178.31  21.68 mmHg to 105.40  14.46 mmHg), renal vascular resistance (RVR, 6.82  0.99 mmHg/mL.g-1.min-1 to 4.32  0.55 mmHg/mL.g-1.min-1), urinary flow (UF; 0.43  0.15 mL.g-1.min-1 to 0.08  0.03 mL.g-1.min-1) and the rate of glomerular filtration rate (GFR, 1.60  0.40 mL.g-1.min-1 to 0.32  0.17 mL.g-1.min-1). In isolated strips of rat urinary bladder, sertraline inhibited, in a concentration-dependent manner, the contractions induced by 60 mM K+ or 3 ÂM carbachol (CCh) with IC50 of 21.0 [15.8 to 28.0] ÂM and 22.8 [12.9 to 40.4] ÂM, respectively. Added to the plateau of a steady state contraction induced by K+ (60 mM) or CCh (1 ÂM), sertraline produced relaxing effect, in a concentration-dependent manner, with IC50 of 94.3 [42.2 to 146.4] ÂM and 67.8 [20.1 to 115.5] ÂM, respectively. In rings of mesenteric artery stimulated by K+ (60 mM) or PHE (60 ÂM) in medium without Ca2+ with EGTA (0.5 mM), sertraline (100 ÂM) inhibited contractions induced by Ca2+ from 124.1  8.1% to 48.3  14.0% and 74.8  13.5% to 35.9  9.4% respectively. In conclusion, sertraline increased the urinary frequency voiding in anesthetized rats, inhibited the changes induced by PHE in isolated kidney and its effects probably are caused by its vascular antispasmodic actions. This hypothesis was confirmed by the inhibitory effects on bladder smooth muscle strips and mesenteric artery rings, which are promoted by a possible interference of sertraline with the Ca2+ influx through plasmalemmal channels, which may be receptor- or voltage-operated Ca2+ channels.

nÃo hà / A sÃndrome de imunodeficiÃncia adquirida (AIDS) à causada pela infecÃÃo pelo HIV e jà nÃo à sinÃnimo de letalidade. Desde que a doenÃa foi descoberta, no inÃcio da dÃcada de 1980, muitos avanÃos foram dados em relaÃÃo à maior compreensÃo da doenÃa e desenvolvimento terapÃutico. Atualmente, uma combinaÃÃo de medicamentos conhecida como HAART (Highly Active Antiretroviral Therapy) à indiscutivelmente reconhecida por tornar mais lento o curso da doenÃa e prolongar a vida. Este estudo objetivou detectar, em suas dimensÃes quantitativa e qualitativa, os problemas farmacolÃgicos relacionados à terapia antiretroviral em pacientes HIV+ que estejam iniciando o tratamento com antiretrovirais, no SAE/CEMJA â ServiÃo de Atendimento Especializado em HIV/AIDS do Centro de Especialidades MÃdicas Josà de Alencar em Fortaleza, CearÃ. Trata-se de um estudo descritivo, longitudinal e prospectivo, onde cada paciente funcionou como seu prÃprio controle. A pesquisa foi realizada no perÃodo de dezembro de 2008 a agosto de 2010. O acompanhamento farmacoterapÃutico (AFT) teve duraÃÃo de 09 meses e foi desenvolvido de acordo com uma adaptaÃÃo ao MÃtodo DÃder e a classificaÃÃo dos problemas farmacolÃgicos deu-se por uma adaptaÃÃo ao o II Consenso de Granada (2002). Na anÃlise dos dados, programas EpiInfo e Sigma Plot foram utilizados. Foram realizadas 47 entrevistas, sendo que 45 pacientes concluÃram o AFT. Em todos os estudos, considerou-se o valor de p<0,05 como nÃvel de significÃncia. Foram identificados 643 problemas farmacolÃgicos relativos à TARV. O PF-5 (seguranÃa qualitativa) foi o mais evidenciado seguido pelo PF-4 (relacionado à efetividade quantitativa-adesÃo irregular) e PF-1 (relativo à necessidade-nÃo-adesÃo) Os medicamentos antirretrovirais mais prescritos foram os fÃrmacos Zidovudina+lamivudina, Lopinavir+ritonavir e Efavirenz e tambÃm foram os mais envolvidos em problemas farmacolÃgicos relacionados à seguranÃa e efetividade. Durante o AFT, uma reduÃÃo (99,8%) e aumento (104,52%) mÃdio, estatisticamente significante, da carga viral e de linfÃcitos T CD4+, respectivamente, foram observados. Houve uma melhora na adesÃo ao tratamento por parte dos pacientes acompanhados e na determinaÃÃo global do Ãndice de adesÃo pelo registro de dispensa dos antirretrovirais na farmÃcia do CEMJA, foi encontrada um taxa de 64% de aderÃncia de todos os pacientes avaliados. Nossos achados nos permitiram compreender melhor que os principais obstÃculos e dificuldades vivenciados pelo paciente HIV+ relativos à TARV, concentram-se, sobretudo na toxicidade desses fÃrmacos e que isso tem relaÃÃo direta com a adesÃo ao tratamento, principalmente nos indivÃduos assintomÃticos e/ou com diagnÃstico de soropositividade menor que um ano, representando importantes grupos-alvo para estudos da freqÃÃncia de RAM com antiretrovirais.

nÃo hà / Introduction: Obesity is associated with oral diseases by promoting inflammatory processes and because of the fact that obese patients often eat cariogenic foods and use drugs capable of inducing salivary alterations. Bariatric surgery, surgical means of treating morbid obesity and obesity associated to co-morbidities, aims to change the volumetric capacity of the gastrointestinal tract and the course of the alimentary bolus. It causes changes in food consumption patterns and, often, gastro-esophageal disorders and may influence deleteriously oral health, which, however, is not determined. Objective: The aim of this study was to determine the profile of drug use, the occurrence of vomiting and tooth sensitivity, the standard of food eating and dental plaque index; to quantify Streptococcus mutans in stimulated saliva; to measure DMFT and to count erosive lesions in patients who had already been submitted to bariatric surgery and in patients who were going to be submitted to bariatric surgery, registering changes in pattern of occurrence of vomiting and tooth sensitivity and dietary patterns of patients who had already been submited to bariatric surgery. Materials and Methods: Through cross-sectional study, seeking retrospective data, there were evaluated 46 patients undergoing bariatric surgery (âNon-Operatedâ group) and 46 in the second year of postoperative follow-up of the same surgery (âOperatedâ group). After collection of personal data, we proceeded to collect saliva (to quantify S. mutans) and dental evaluation. Results: "Non-operated" group showed greater medication use and lower frequency of vomiting than "Operatedâ group, although, in this group, the occurrence of vomiting had reduced over time. "Operated" group had a higher intake of sweet foods and smaller intake of acid food than "Non-operatedâ group; the consumption of sweet foods and red meat of âOperatedâ group at the time of assessment decreased compared the preoperative period. Both groups had similar dental sensitivities and the majority of "Operated" group patients reported similarity of tooth sensitivity after surgery compared to preoperative values. Both groups showed similar and high plaque index (52.03  14.30 for "Non-operated" group and 51.59  10.38 for "Operatedâ group), the same was observed for S. mutans count (log (number of CFUs per mL of saliva +1) equal to 5.12  0.64 for "Non-operated" group and 5.05  1.06 for "Operated" group) and DMTF (13.67  5.78 for "Non-operated" group 13.33  5.78 for "Operated" group). Both groups were similar with respect to dental erosion variable. Discussion: Elevated plaque index, S. mutans count and DMFT show the condition of poor oral health of both patients with morbid obesity and submited to bariatric surgery, difficulting the eventually possible weight loss process by clinical means for obese patients and burdening the "new stomach" in patients undergoing surgery. Conclusion: Bariatric patient needs more attention to oral health, from oral hygiene orientation to the performance of operative procedures, providing oral health and contributing to the success of the surgical procedure. / IntroduÃÃo: A obesidade està associada a alteraÃÃes bucais, por favorecer processos inflamatÃrios e pelo fato de pacientes obesos ingerirem frequentemente alimentos cariogÃnicos e utilizarem fÃrmacos capazes de induzir alteraÃÃes salivares. A cirurgia bariÃtrica, meio cirÃrgico de tratar a obesidade mÃrbida e a obesidade associada a co-morbidades, visa alterar a capacidade volumÃtrica do trato gastrointestinal e o curso do bolo alimentar. Ocasiona alteraÃÃo do padrÃo alimentar e, nÃo raro, transtornos gastro-esofÃgicos, podendo influenciar deleteriamente a saÃde oral, o que, entretanto, nÃo està determinado. Objetivo: Determinar o perfil de uso de medicamentos, a ocorrÃncia de vÃmito e de sensibilidade dental, o padrÃo alimentar e o Ãndice de placa dental; quantificar Streptococcus mutans em saliva estimulada; medir CPOD e contar lesÃes erosivas em pacientes submetidos e a serem submetidos à cirurgia bariÃtrica; registrar alteraÃÃes em padrÃo de ocorrÃncia de vÃmito e sensibilidade dental e em padrÃo alimentar de pacientes submetidos à cirurgia bariÃtrica. Materiais e mÃtodos: Mediante estudo transversal observacional, buscando dados retrospectivos, avaliaram-se 46 pacientes a serem submetidos à cirurgia bariÃtrica (Grupo âNÃo-Operadoâ) e 46 no segundo ano de acompanhamento pÃs-operatÃrio da mesma cirurgia (Grupo âOperadoâ). ApÃs coleta de dados pessoais, procedeu-se à coleta de saliva (a fim de quantificar de S. mutans) e à avaliaÃÃo odontolÃgica. Resultados: O grupo âNÃo-operadoâ apresentou maior uso de medicamentos e menor frequÃncia de vÃmito do que o grupo âOperadoâ; apesar de, neste, ter havido reduÃÃo da ocorrÃncia de vÃmito com o passar do tempo. O grupo âOperadoâ apresentou maior ingestÃo de alimentos doces e menor ingestÃo de alimentos Ãcidos do que o grupo âNÃo-operadoâ; o grupo âOperadoâ apresentou reduÃÃo do consumo de alimentos doces, Ãcidos e carne vermelha no momento da avaliaÃÃo em comparaÃÃo ao perÃodo prÃ-operatÃrio. Os grupos apresentaram sensibilidades dentais semelhantes e a maioria dos pacientes do grupo âOperadoâ relatou similitude de sensibilidade dental no pÃs-operatÃrio em relaÃÃo ao prÃ-operatÃrio. Os grupos apresentaram Ãndices de placa elevados (52,03  14,30 para o grupo âNÃo-operadoâ e 51,59Â10,38 para o grupo âOperadoâ) e semelhantes; o mesmo tendo sido verificado para a contagem de S. mutans (log(nÃmero de UFCs por mL de saliva+1) igual a 5,12  0,64 para o grupo âNÃo-operadoâ e a 5,05  1,06 para o grupo âOperadoâ) e para CPOD (13,67  5,78 para o grupo âNÃo-operadoâ 13,33  5,78 para o grupo âOperadoâ). Os grupos mostraram-se semelhantes com relaÃÃo à variÃvel erosÃo dental. DiscussÃo: Os valores elevados de Ãndice de placa, contagem de S. mutans e CPOD demonstram a condiÃÃo inadequada de saÃde bucal tanto de pacientes obesos mÃrbidos quanto submetidos à cirurgia bariÃtrica, dificultando o processo de emagrecimento por meios clÃnicos eventualmente possÃvel do paciente obeso e sobrecarregando o ânovo estÃmagoâ no paciente operado. ConclusÃo: O paciente bariÃtrico necessita maior atenÃÃo à saÃde bucal, desde a orientaÃÃo de higiene bucal atà a realizaÃÃo de procedimentos operatÃrios, viabilizando a saÃde bucal e contribuindo para o Ãxito do procedimento cirÃrgico.

Orientadores : Antonio Carlos Neder, Armando Otavio Ramos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T13:15:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bourg_SoniaMaria_D.pdf: 1955336 bytes, checksum: c504fbe7b1180f1643a88a466ba8c19f (MD5) Previous issue date: 1975 / Resumo: Em 153 ratos adultos (WISTAR), machos, estudamos o efeito evolutivo da destruição eletrolltica de núcleos da rafe e da administração de p-clorofenilalanina / (300 mg/kg) sobre o limiar convulsivo ao cardiazol e ã estricnina. Consideramos limiar convulsivo a quantidade / de droga por kg de animal necessária para provocar o aparea cimento de potenciais típicos captados no tronco cerebral (estricnina) e no córtex cerebral (cardiazol). Nos animais que receberam p-clorofenilalanina (pCPA) determinamos o limiar convulsivo 24, 48, 96 e 192 horas após administração da droga, e nos que sofreram lesão, no 39, 59 e 79 dias após a mesma. O limiar convulsivo foi ainda determinado em um grupo de animais sem tratamento prévio (Grupo Controle) e em outro no qual efetuamos lesão eletrolltica simulada (Grupo com Lesão Fictícia). Anotamos a ocorrência ou não de estereotipias comportamentais relativas à postura, marcha, exploração do ambiente e resposta à estimulação ambiental. A extensão da lesão eletrolltica / foi avaliada por exame histológico. Após análise dos resultados, verificamos: 1- o limiar convulsivo ao cardiazol, após tratamento / com pCPA, diminuiu significativamente, em relação ao controle, em todos os momentos estudados; 2- o limiar convulsivo ã estricnina, após tratamento / com pCPA, diminuiu significativamente, em relação ao controle, apenas no momento 96 horas; 3- houve regressão significativa entre os valores de limiar convulsivo à estricnina e ao cardiazol e os diferentes tempos após administração de pCPA; 4- houve diferença entre o comportamento evolutivo do limiar convulsivo na dependência do agente convulsivante/ empregado; 5- o exame histológico do cérebro dos animais submeti dos a lesão eletrolítica mostrou extensão de área lesada/compatível com destruição dos núcleos dorsal e mediano da rafe. As lesões estenderam-se tanto no sentido crânio-cau dal quanto lateral, comprometendo estruturas vizinhas aos núcleos dorsal e mediano da rafe; 6- o limiar convulsivo ao cardiazol, após lesão fictí cia, não se alterou significativamente. O limiar à estrienina diminuiu significativamente no 39 dia após lesão; 7- o limiar convulsivo ao cardiazol diminuiu no 39 e 59 dias após a lesão eletrolítica dos núcleos dorsal e me diano da rafe, normalizando-se no 79 dia; 8- o limiar convulsivo ã estricnina aumentou significativamente no 39 dia após a lesão eletrolítica dos nú cleos dorsal e mediano da rafe, normalizando-se a partir do 59 dia; 9- apenas os animais submetidos a lesão eletrolítica apresentaram estereotipias comportamentais. Estas estéreo tipias, semelhantes ãs descritas na literatura como decor rentes do aumento dos níveis de catecoIaminas cerebrais , oorreram a partir do 39 dia após a lesão, desaparecendo / no 79 dia. / Abstract: Not informed / Doutorado / Neurofarmacologia / Doutor em Ciências

Orientador: Sergio de Moraes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-15T22:16:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_BeatrizMariaRomano_M.pdf: 1179980 bytes, checksum: e562b52408979264d7e4bdded7f10cea (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: O objetivo do presente estudo foi analisar a seletividade do composto NAIN para os subtipos de adrenoceptores beta-1 e beta-2. Com esta finalidade, avaliamos as respostas cronotrópica ( FC ) "in vivo" e "in vitro" e a resposta pressórica (PA) "in vivo". Os experimentos "in vivo" foram realizados em ratos cateterizados e conscientes submetidos a doses crescentes de NAIN (0.003 a 1.0 ug/100g) administradas por via endovenosa. Os resultados obtidos foram comparados aos do isoproterenol (ISO). Observamos que o NAIN não induz aumento significativo da FC, e induz redução da PA apenas em resposta à sua menor dose (0,003 ug/100g). Enquanto que o ISO, tal como esperado, determina um aumento da FC e redução da PA de maneira dose dependente. Os experimentos "in vitro" conduzidos em átrios direitos isolados de ratos e cobaias sugerem que o NAIN é um agonista não seletivo de adrenoceptores beta cardíacos. A reta da regressão de Schild obtida para o metoprolol, em concentrações seletivas para os adrenoceptores beta-1 em átrios de cobaia, usando o NAIN como agonista, apresentou coeficiente angular diferente da unidade, indicando que o efeito cronotrópico positivo do NAIN, nesta proparação, deve-se à ativação de ambos os subtipos de adrenoceptores. / Abstract: The selectivity of NAIN as a beta-adrenoceptor agonist was studied "in vivo" and "in vitro". The effects of the drug on arterial pressure and heart rate in conscious rats were compared with those obtained using isoproterenol. The pA2 value, obtained in isolated guinea-pig right atria for propranolol was compared to that obtained for metoprolol. The results from guinea-pig atrial preparations strongly suggest that NAIN activates both adrenoceptor subtypes since metoprolol was incapable of competitively blocking the chronotropic effect of NAIN (Schild Plot slope different from unity). These results are supported by the increase in heart rate observed in the rat right atrial preparation. In contrast, the experiments in conscious rats did not provide any significant evidence of receptor subtype activation, or was there a clear-cut dose-response relationship. The latter phenomenon may reflect, at least in part, the discrete bioavailability of the drug. / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / IntroduÃÃo/objetivos: O acidente vascular cerebral isquÃmico precipita uma cascata de eventos que envolvem excitotoxicidade, inflamaÃÃo, estresse oxidativo e morte celular. A curcumina tem demonstrado efeitos neuroprotetores, com propriedades antioxidantes e antiinflamatÃrias. Sendo assim, objetivou-se estudar estes efeitos da curcumina em modelo experimental de isquemia cerebral global em ratos em desenvolvimento. MÃtodos: O tratamento de ratas Wistar foi iniciado 24h apÃs o nascimento dos filhotes, durante 21 dias, com curcumina (25, 50 ou 100 mg/kg/dia, v.o.) ou Ãgua+Cremophor 1% (10 ml/kg). No 21 dia de vida os ratos foram anestesiados com Ketamina (75 mg/kg, i.p.) e Xilazina 2% (10 m/kg, i.p.) e submetidos à isquemia cerebral global durante 15 min, reperfusÃo pelo mesmo tempo, seguida de corte da carÃtida esquerda. 24 h apÃs iniciou-se o tratamento dos filhotes com curcumina durante 3 ou 7 dias consecutivos. Animais tratados durante 7 dias realizaram os testes comportamentais, campo aberto e labirinto aquÃtico, para avaliar a atividade locomotora e memÃria espacial, respectivamente. Grupos de animais com 3 ou 7 dias apÃs a isquemia foram eutanasiados e o corpo estriado, cÃrtex e hipocampo foram dissecados. O corpo estriado foi utilizado na preparaÃÃo de homogenatos para dosagem de monoaminas e metabÃlitos (DA, DOPAC, NE) em HPLC. Homogenatos de hipocampo e cÃrtex foram preparados para dosar os nÃveis de nitrito e malondialdeÃdo (MDA). Fatias de hipocampo foram separadas para a coloraÃÃo com o Fluoro-Jade B e imunohistoquÃmica (iNOS, COX-2, TNF-&#61537;). Resultados: A isquemia cerebral reduziu a atividade locomotora em ratos e o tratamento com curcumina reverteu este efeito; assim como o que ocorreu com a memÃria espacial que foi reduzida pela isquemia. A lesÃo no corpo estriado refletiu em reduÃÃo nos nÃveis de monoaminas e estes valores foram aumentados com uso da curcumina 3 e 7 dias apÃs a cirurgia e de maneira dose-dependente no 3 dia. Os nÃveis de MDA e nitrito foram significativamente aumentados em cÃrtex e hipocampo, 3 e 7 dias apÃs a isquemia cerebral global, quando comparados aos grupos falso operados. O tratamento com curcumina protegeu estas Ãreas de maneira significativa somente no 3 dia pÃs-isquemia, nas doses de 50 e 100 mg/kg. No 7 dia, os melhores resultados foram obtidos com a dose de 25 mg/kg. AlÃm disso, houve uma diminuiÃÃo nas cÃlulas imunocoradas para iNOS, COX-2 e TNF-&#61537; nos grupos tratados com curcumina em comparaÃÃo com o grupo isquemiado. Assim como reduÃÃo de cÃlulas Fluoro-Jade B positivas. ConclusÃo: O tratamento prÃvio das mÃes durante o perÃodo de lactaÃÃo bem como o tratamento subcrÃnico dos filhotes com a curcumina exerceu propriedades neuroprotetoras contra os danos causados pela isquemia cerebral global mais reperfusÃo. Estes efeitos refletiram na melhora da atividade locomotora e memÃria. Esta atividade foi observada atravÃs de aÃÃes antiinflamatÃrias e antioxidantes da curcumina, principalmente 3 dias apÃs o evento isquÃmico. Estas aÃÃes foram confirmadas com a inibiÃÃo da COX-2, iNOS, reduÃÃo de citocinas prÃ-inflamatÃrias, como TNF-&#61537;. AlÃm disso, neurÃnios foram preservados no hipocampo, o que pÃde ser visto atravÃs da coloraÃÃo com Fluoro-jade B, visualizada atravÃs de fluorescÃncia verde. / IntroduÃÃo/objetivos: O acidente vascular cerebral isquÃmico precipita uma cascata de eventos que envolvem excitotoxicidade, inflamaÃÃo, estresse oxidativo e morte celular. A curcumina tem demonstrado efeitos neuroprotetores, com propriedades antioxidantes e antiinflamatÃrias. Sendo assim, objetivou-se estudar estes efeitos da curcumina em modelo experimental de isquemia cerebral global em ratos em desenvolvimento. MÃtodos: O tratamento de ratas Wistar foi iniciado 24h apÃs o nascimento dos filhotes, durante 21 dias, com curcumina (25, 50 ou 100 mg/kg/dia, v.o.) ou Ãgua+Cremophor 1% (10 ml/kg). No 21 dia de vida os ratos foram anestesiados com Ketamina (75 mg/kg, i.p.) e Xilazina 2% (10 m/kg, i.p.) e submetidos à isquemia cerebral global durante 15 min, reperfusÃo pelo mesmo tempo, seguida de corte da carÃtida esquerda. 24 h apÃs iniciou-se o tratamento dos filhotes com curcumina durante 3 ou 7 dias consecutivos. Animais tratados durante 7 dias realizaram os testes comportamentais, campo aberto e labirinto aquÃtico, para avaliar a atividade locomotora e memÃria espacial, respectivamente. Grupos de animais com 3 ou 7 dias apÃs a isquemia foram eutanasiados e o corpo estriado, cÃrtex e hipocampo foram dissecados. O corpo estriado foi utilizado na preparaÃÃo de homogenatos para dosagem de monoaminas e metabÃlitos (DA, DOPAC, NE) em HPLC. Homogenatos de hipocampo e cÃrtex foram preparados para dosar os nÃveis de nitrito e malondialdeÃdo (MDA). Fatias de hipocampo foram separadas para a coloraÃÃo com o Fluoro-Jade B e imunohistoquÃmica (iNOS, COX-2, TNF-&#61537;). Resultados: A isquemia cerebral reduziu a atividade locomotora em ratos e o tratamento com curcumina reverteu este efeito; assim como o que ocorreu com a memÃria espacial que foi reduzida pela isquemia. A lesÃo no corpo estriado refletiu em reduÃÃo nos nÃveis de monoaminas e estes valores foram aumentados com uso da curcumina 3 e 7 dias apÃs a cirurgia e de maneira dose-dependente no 3 dia. Os nÃveis de MDA e nitrito foram significativamente aumentados em cÃrtex e hipocampo, 3 e 7 dias apÃs a isquemia cerebral global, quando comparados aos grupos falso operados. O tratamento com curcumina protegeu estas Ãreas de maneira significativa somente no 3 dia pÃs-isquemia, nas doses de 50 e 100 mg/kg. No 7 dia, os melhores resultados foram obtidos com a dose de 25 mg/kg. AlÃm disso, houve uma diminuiÃÃo nas cÃlulas imunocoradas para iNOS, COX-2 e TNF-&#61537; nos grupos tratados com curcumina em comparaÃÃo com o grupo isquemiado. Assim como reduÃÃo de cÃlulas Fluoro-Jade B positivas. ConclusÃo: O tratamento prÃvio das mÃes durante o perÃodo de lactaÃÃo bem como o tratamento subcrÃnico dos filhotes com a curcumina exerceu propriedades neuroprotetoras contra os danos causados pela isquemia cerebral global mais reperfusÃo. Estes efeitos refletiram na melhora da atividade locomotora e memÃria. Esta atividade foi observada atravÃs de aÃÃes antiinflamatÃrias e antioxidantes da curcumina, principalmente 3 dias apÃs o evento isquÃmico. Estas aÃÃes foram confirmadas com a inibiÃÃo da COX-2, iNOS, reduÃÃo de citocinas prÃ-inflamatÃrias, como TNF-&#61537;. AlÃm disso, neurÃnios foram preservados no hipocampo, o que pÃde ser visto atravÃs da coloraÃÃo com Fluoro-jade B, visualizada atravÃs de fluorescÃncia verde. / Introduction/Objectives: The ischemic stroke precipitates a cascade of events that involve excitotoxicity, inflammation, oxidative stress and cell death. Curcumin has demonstrated neuroprotective effects, with antioxidant and antiinflammatory properties. Therefore, we aimed to study these effects of curcumin on experimental model of global cerebral ischemia in rats under development. Methods: Wistar female rats treatment began 24 hours after the birth of pups, during 21 days, with curcumin (25, 50 or 100 mg/kg/day, p.o.) or water + 1% Cremophor (10 ml/kg). In 21 day old rats were anesthetized with Ketamine (75 mg/kg, i.p.) and xylazine (10 m/kg, i.p.) and subjected to the global cerebral ischemia for 15 min, reperfusion at the same time, followed the left carotid cut. 24 h after surgery, pups started treating for 3 or 7 consecutive days. The animals treated for 7 days underwent behavioral tests, open field and water maze, to assess the locomotor activity and spatial memory, respectively. Groups of animals with 3 or 7 days after ischemia were sacrificed and the striatum, cortex and hippocampus were dissected. The striatum was used in homogenates preparation to monoamine and metabolites (DA, DOPAC, NS) dosing on HPLC. Homogenates from the hippocampus and cortex were prepared to test the antioxidant activity, 3 and 7 days post-ischemia, to nitrite and malondialdehyde (MDA) dosing. Hippocampal slices were separated for staining with Fluoro-Jade B and immunohistochemistry (iNOS, COX-2, TNF-&#61537;). Results: Cerebral ischemia reduced the locomotor activity in rats and the treatment with curcumin reversed this effect; just like what happened with the special memory that was recovered after curcumin treatment in the three doses used. The striatum lesion reflected in a reduction in the levels of monoamines and these values were increased with the use of curcumin 3 and 7 days after surgery dose-dependent manner on day 3. MDA and nitrite levels were significantly increased in cortex and hippocampus, 3 and 7 days after global cerebral ischemia, when compared to the false-operated groups. The treatment with curcumin significantly protected these areas only at 3 days post-ischemia, in the doses of 50 and 100 mg/kg. On the 7th day, the best results were obtained with the dose of 25 mg/kg. Furthermore, there was a decrease in immunostained cells for iNOS, COX-2 and TNF-&#61537; in treated groups with curcumin compared with ischemic group. As reduction Fluoro-Jade B positive cells. Conclusion: The previous treatment of the dams during the lactation period and the subchronic treatment of puppies with curcumin exerted neuroprotective properties against damage caused by global cerebral ischemia/reperfusion. These effects reflected improved in locomotor activity and memory. This activity was observed through anti-inflammatory and antioxidant actions of curcumin, especially three days after the ischemic event. These actions were confirmed with inhibition of COX-2, iNOS and TNF-&#61537;. In addition, neurons were preserved in the hippocampus, which could be seen by staining with Fluoro-Jade B, viewed through green fluorescence. / Introduction/Objectives: The ischemic stroke precipitates a cascade of events that involve excitotoxicity, inflammation, oxidative stress and cell death. Curcumin has demonstrated neuroprotective effects, with antioxidant and antiinflammatory properties. Therefore, we aimed to study these effects of curcumin on experimental model of global cerebral ischemia in rats under development. Methods: Wistar female rats treatment began 24 hours after the birth of pups, during 21 days, with curcumin (25, 50 or 100 mg/kg/day, p.o.) or water + 1% Cremophor (10 ml/kg). In 21 day old rats were anesthetized with Ketamine (75 mg/kg, i.p.) and xylazine (10 m/kg, i.p.) and subjected to the global cerebral ischemia for 15 min, reperfusion at the same time, followed the left carotid cut. 24 h after surgery, pups started treating for 3 or 7 consecutive days. The animals treated for 7 days underwent behavioral tests, open field and water maze, to assess the locomotor activity and spatial memory, respectively. Groups of animals with 3 or 7 days after ischemia were sacrificed and the striatum, cortex and hippocampus were dissected. The striatum was used in homogenates preparation to monoamine and metabolites (DA, DOPAC, NS) dosing on HPLC. Homogenates from the hippocampus and cortex were prepared to test the antioxidant activity, 3 and 7 days post-ischemia, to nitrite and malondialdehyde (MDA) dosing. Hippocampal slices were separated for staining with Fluoro-Jade B and immunohistochemistry (iNOS, COX-2, TNF-&#61537;). Results: Cerebral ischemia reduced the locomotor activity in rats and the treatment with curcumin reversed this effect; just like what happened with the special memory that was recovered after curcumin treatment in the three doses used. The striatum lesion reflected in a reduction in the levels of monoamines and these values were increased with the use of curcumin 3 and 7 days after surgery dose-dependent manner on day 3. MDA and nitrite levels were significantly increased in cortex and hippocampus, 3 and 7 days after global cerebral ischemia, when compared to the false-operated groups. The treatment with curcumin significantly protected these areas only at 3 days post-ischemia, in the doses of 50 and 100 mg/kg. On the 7th day, the best results were obtained with the dose of 25 mg/kg. Furthermore, there was a decrease in immunostained cells for iNOS, COX-2 and TNF-&#61537; in treated groups with curcumin compared with ischemic group. As reduction Fluoro-Jade B positive cells. Conclusion: The previous treatment of the dams during the lactation period and the subchronic treatment of puppies with curcumin exerted neuroprotective properties against damage caused by global cerebral ischemia/reperfusion. These effects reflected improved in locomotor activity and memory. This activity was observed through anti-inflammatory and antioxidant actions of curcumin, especially three days after the ischemic event. These actions were confirmed with inhibition of COX-2, iNOS and TNF-&#61537;. In addition, neurons were preserved in the hippocampus, which could be seen by staining with Fluoro-Jade B, viewed through green fluorescence.

nÃo hà / O sildenafil (Viagra Â) à um inibidor seletivo da guanosina monofosfato cÃclico (cGMP), um tipo especÃfico de fosfodiesterase-5 (PDE5) Ãtil no tratamento da disfunÃÃo erÃtil e hipertensÃo arterial pulmonar. O aumento do nÃvel de GMPc intracelular causado pela inibiÃÃo da PDE5 provoca vÃrios eventos celulares, como relaxamento da musculatura lisa das vias aÃreas e inibiÃÃo da inflamaÃÃo celular. O objetivo deste estudo foi avaliar o mecanismo de aÃÃo do sildenafil em traqueias de animais naive e desafiados a ovoalbumina; avaliar a interferÃncia do sildenafil na expressÃo e no funcionamentode dos canais de cÃlcio operados por estoque em traqueias de animais naive, sensibilizados e desafiados a ovoalbumina. No presente trabalho foram utilizados ratos machos, da espÃcie Wistar, os animais foram sensibilizados ativamente por meio de injeÃÃes intraperitoneais de ovalbumina (3 aplicaÃÃes em dias alternados - nos dias 1, 3 e 5), o desafio antigÃnico (broncoprovocaÃÃo) ocorreu no perÃodo entre os dias 21 e 50 pÃs-sensibilizaÃÃo, exatamente 24 horas antes da realizaÃÃo dos experimentos in vitro. Apos a remoÃÃo os anÃis de traqueia foram montados nas camaras de banho isolado e realizadas as curvas concentraÃÃo efeito. Quando comparamos o efeito relaxante do sildenafil a IC50 nos animais com epitÃlio integro 27,2 [17,5 â 42,1] ÂM (n = 12), enquanto que a IC50 para o para as preparaÃÃes sem epitÃlio (n = 7) foi de 232,25 [129,58 â 416,23] ÂM, (p<0,05 Teste de Kruskal-Wallis). Nas preparaÃÃes nÃo tratadas com L-NAME a IC50 foi de 27,2 [17,5 â 42,1] ÂM (n = 12), enquanto que nas preparaÃÃes tratadas com L-NAME (n = 7) foi de 348,1 [248 â 488,5] ÂM (p<0,05 Teste de Kruskal-Wallis). Verificamos nos animais naive um aumento na EC50 para a contraÃÃo produzida pelo carbacol de 0,22 [0,17 - 0,30] ÂM (n = 8) na ausÃncia de sildenafil, para 2,01 [1,21 â 3,33] ÂM (n = 7) na presenÃa de 30 ÂM de sildenafil, para 2,85 [2,09 â 3,87] ÂM na presenÃa de 100 ÂM de sildenafil, e para 2,45 [1,67 â 3,6] ÂM (n = 10) na presenÃa de 300 ÂM de sildenafil. Nos animais sensibilizados e desafiados a ovoalbumina o sildenafil 30ÂM inibiu a hiperreatividade brÃnquica. Com relaÃÃo a entrada de cÃlcio capacitativo, o sildenafi diminuiu a contraÃÃo produzida pela reposiÃÃo de cÃlcio de 42,9  7,3% nos animais naÃve para 10,8  3,7% na presence de 30 ÂM de sildenafil (p<0,05). Nos animais desafiados o sildenafi diminuiu a contraÃÃo produzida pela reposiÃÃo de cÃlcio de (98,0  11,8%, n = 6) sem a presenÃa de sildenafil para 22,7  5,4% na presenÃa de sildenafil 30 ÂM (p <0,05). Relacionando com a expressÃo genica os animais sensibilizados e desafiados a ovoalbumina, tratados com sildenafil ocorreu um aumento significativo na expressÃo dos genes TRPC1 TRPC6 (p<0,05, Teste de HolmSidak), Em contraste a expressÃo de TRPC5, nÃo expressou mudanÃas apÃs o desafio antigÃnico, entretanto diminuiu de forma significativa apÃs o tratamento com sildenafil (p<0,05, Teste de HolmSidak). Nesse estudo, verificamos que o efeito miorrelaxante do sildenafil envolve o NO, GMPc, canais de potÃssio e canais de cÃlcio operados por estoque. A presenÃa do sildenafil tambÃm foi capaz de reduzir significativamente a resposta ao antÃgeno nos tecidos provenientes de ratos sensibilizados e desafiados, e de alterar a expressÃo de genes pertencentes à subfamÃlia dos TRPC, relacionando o envolvimento da via fosfodiesterase 5 na expressÃo celular de genes TRPC no musculo liso traqueal. / O sildenafil (Viagra Â) à um inibidor seletivo da guanosina monofosfato cÃclico (cGMP), um tipo especÃfico de fosfodiesterase-5 (PDE5) Ãtil no tratamento da disfunÃÃo erÃtil e hipertensÃo arterial pulmonar. O aumento do nÃvel de GMPc intracelular causado pela inibiÃÃo da PDE5 provoca vÃrios eventos celulares, como relaxamento da musculatura lisa das vias aÃreas e inibiÃÃo da inflamaÃÃo celular. O objetivo deste estudo foi avaliar o mecanismo de aÃÃo do sildenafil em traqueias de animais naive e desafiados a ovoalbumina; avaliar a interferÃncia do sildenafil na expressÃo e no funcionamentode dos canais de cÃlcio operados por estoque em traqueias de animais naive, sensibilizados e desafiados a ovoalbumina. No presente trabalho foram utilizados ratos machos, da espÃcie Wistar, os animais foram sensibilizados ativamente por meio de injeÃÃes intraperitoneais de ovalbumina (3 aplicaÃÃes em dias alternados - nos dias 1, 3 e 5), o desafio antigÃnico (broncoprovocaÃÃo) ocorreu no perÃodo entre os dias 21 e 50 pÃs-sensibilizaÃÃo, exatamente 24 horas antes da realizaÃÃo dos experimentos in vitro. Apos a remoÃÃo os anÃis de traqueia foram montados nas camaras de banho isolado e realizadas as curvas concentraÃÃo efeito. Quando comparamos o efeito relaxante do sildenafil a IC50 nos animais com epitÃlio integro 27,2 [17,5 â 42,1] ÂM (n = 12), enquanto que a IC50 para o para as preparaÃÃes sem epitÃlio (n = 7) foi de 232,25 [129,58 â 416,23] ÂM, (p<0,05 Teste de Kruskal-Wallis). Nas preparaÃÃes nÃo tratadas com L-NAME a IC50 foi de 27,2 [17,5 â 42,1] ÂM (n = 12), enquanto que nas preparaÃÃes tratadas com L-NAME (n = 7) foi de 348,1 [248 â 488,5] ÂM (p<0,05 Teste de Kruskal-Wallis). Verificamos nos animais naive um aumento na EC50 para a contraÃÃo produzida pelo carbacol de 0,22 [0,17 - 0,30] ÂM (n = 8) na ausÃncia de sildenafil, para 2,01 [1,21 â 3,33] ÂM (n = 7) na presenÃa de 30 ÂM de sildenafil, para 2,85 [2,09 â 3,87] ÂM na presenÃa de 100 ÂM de sildenafil, e para 2,45 [1,67 â 3,6] ÂM (n = 10) na presenÃa de 300 ÂM de sildenafil. Nos animais sensibilizados e desafiados a ovoalbumina o sildenafil 30ÂM inibiu a hiperreatividade brÃnquica. Com relaÃÃo a entrada de cÃlcio capacitativo, o sildenafi diminuiu a contraÃÃo produzida pela reposiÃÃo de cÃlcio de 42,9  7,3% nos animais naÃve para 10,8  3,7% na presence de 30 ÂM de sildenafil (p<0,05). Nos animais desafiados o sildenafi diminuiu a contraÃÃo produzida pela reposiÃÃo de cÃlcio de (98,0  11,8%, n = 6) sem a presenÃa de sildenafil para 22,7  5,4% na presenÃa de sildenafil 30 ÂM (p <0,05). Relacionando com a expressÃo genica os animais sensibilizados e desafiados a ovoalbumina, tratados com sildenafil ocorreu um aumento significativo na expressÃo dos genes TRPC1 TRPC6 (p<0,05, Teste de HolmSidak), Em contraste a expressÃo de TRPC5, nÃo expressou mudanÃas apÃs o desafio antigÃnico, entretanto diminuiu de forma significativa apÃs o tratamento com sildenafil (p<0,05, Teste de HolmSidak). Nesse estudo, verificamos que o efeito miorrelaxante do sildenafil envolve o NO, GMPc, canais de potÃssio e canais de cÃlcio operados por estoque. A presenÃa do sildenafil tambÃm foi capaz de reduzir significativamente a resposta ao antÃgeno nos tecidos provenientes de ratos sensibilizados e desafiados, e de alterar a expressÃo de genes pertencentes à subfamÃlia dos TRPC, relacionando o envolvimento da via fosfodiesterase 5 na expressÃo celular de genes TRPC no musculo liso traqueal. / O sildenafil (Viagra Â) à um inibidor seletivo da guanosina monofosfato cÃclico (cGMP), um tipo especÃfico de fosfodiesterase-5 (PDE5) Ãtil no tratamento da disfunÃÃo erÃtil e hipertensÃo arterial pulmonar. O aumento do nÃvel de GMPc intracelular causado pela inibiÃÃo da PDE5 provoca vÃrios eventos celulares, como relaxamento da musculatura lisa das vias aÃreas e inibiÃÃo da inflamaÃÃo celular. O objetivo deste estudo foi avaliar o mecanismo de aÃÃo do sildenafil em traqueias de animais naive e desafiados a ovoalbumina; avaliar a interferÃncia do sildenafil na expressÃo e no funcionamentode dos canais de cÃlcio operados por estoque em traqueias de animais naive, sensibilizados e desafiados a ovoalbumina. No presente trabalho foram utilizados ratos machos, da espÃcie Wistar, os animais foram sensibilizados ativamente por meio de injeÃÃes intraperitoneais de ovalbumina (3 aplicaÃÃes em dias alternados - nos dias 1, 3 e 5), o desafio antigÃnico (broncoprovocaÃÃo) ocorreu no perÃodo entre os dias 21 e 50 pÃs-sensibilizaÃÃo, exatamente 24 horas antes da realizaÃÃo dos experimentos in vitro. Apos a remoÃÃo os anÃis de traqueia foram montados nas camaras de banho isolado e realizadas as curvas concentraÃÃo efeito. Quando comparamos o efeito relaxante do sildenafil a IC50 nos animais com epitÃlio integro 27,2 [17,5 â 42,1] ÂM (n = 12), enquanto que a IC50 para o para as preparaÃÃes sem epitÃlio (n = 7) foi de 232,25 [129,58 â 416,23] ÂM, (p<0,05 Teste de Kruskal-Wallis). Nas preparaÃÃes nÃo tratadas com L-NAME a IC50 foi de 27,2 [17,5 â 42,1] ÂM (n = 12), enquanto que nas preparaÃÃes tratadas com L-NAME (n = 7) foi de 348,1 [248 â 488,5] ÂM (p<0,05 Teste de Kruskal-Wallis). Verificamos nos animais naive um aumento na EC50 para a contraÃÃo produzida pelo carbacol de 0,22 [0,17 - 0,30] ÂM (n = 8) na ausÃncia de sildenafil, para 2,01 [1,21 â 3,33] ÂM (n = 7) na presenÃa de 30 ÂM de sildenafil, para 2,85 [2,09 â 3,87] ÂM na presenÃa de 100 ÂM de sildenafil, e para 2,45 [1,67 â 3,6] ÂM (n = 10) na presenÃa de 300 ÂM de sildenafil. Nos animais sensibilizados e desafiados a ovoalbumina o sildenafil 30ÂM inibiu a hiperreatividade brÃnquica. Com relaÃÃo a entrada de cÃlcio capacitativo, o sildenafi diminuiu a contraÃÃo produzida pela reposiÃÃo de cÃlcio de 42,9  7,3% nos animais naÃve para 10,8  3,7% na presence de 30 ÂM de sildenafil (p<0,05). Nos animais desafiados o sildenafi diminuiu a contraÃÃo produzida pela reposiÃÃo de cÃlcio de (98,0  11,8%, n = 6) sem a presenÃa de sildenafil para 22,7  5,4% na presenÃa de sildenafil 30 ÂM (p <0,05). Relacionando com a expressÃo genica os animais sensibilizados e desafiados a ovoalbumina, tratados com sildenafil ocorreu um aumento significativo na expressÃo dos genes TRPC1 TRPC6 (p<0,05, Teste de HolmSidak), Em contraste a expressÃo de TRPC5, nÃo expressou mudanÃas apÃs o desafio antigÃnico, entretanto diminuiu de forma significativa apÃs o tratamento com sildenafil (p<0,05, Teste de HolmSidak). Nesse estudo, verificamos que o efeito miorrelaxante do sildenafil envolve o NO, GMPc, canais de potÃssio e canais de cÃlcio operados por estoque. A presenÃa do sildenafil tambÃm foi capaz de reduzir significativamente a resposta ao antÃgeno nos tecidos provenientes de ratos sensibilizados e desafiados, e de alterar a expressÃo de genes pertencentes à subfamÃlia dos TRPC, relacionando o envolvimento da via fosfodiesterase 5 na expressÃo celular de genes TRPC no musculo liso traqueal. / Sildenafil (Viagra Â) is a selective inhibitor of cyclic guanosinamonofosfato (cGMP) a specific phosphodiesterase-5 (PDE5) useful in the treatment of erectile dysfunction and pulmonary arterial hypertension. The increase in intracellular cGMP levels caused by inhibition of PDE5 causes several cellular events such as airway smooth muscle relaxation and inhibition of cellular inflammation. The aim of this study was to evaluate the mechanism of action of sildenafil in tracheas of naive animals and challenged to ovalbumin, evaluate the effect of sildenafil on the expression and function of calcium channels operated by stock in tracheas of naive animals, sensitized and challenged with ovalbumin. In this work male rats of Wistar species were used, animals were actively sensitized by intraperitoneal injections of ovalbumin (three application on alternate days - 1, 3 and 5), the antigenic challenge (bronchoprovocation) occurred during the period between the 21 and 50 days post-sensitization, exactly 24 hours before the experiments in vitro. After removing the tracheal rings form chambers mounted on isolated bath and performed the concentration effect curves. When comparing the relaxing effect of sildenafil IC50 in animals with intact epithelium 27.2 [17.5 to 42.1] microM (n = 12), whereas the IC50 for the preparations without epithelium (n = 7) was of 232.25 [129.58 to 416.23] microM, (p <0.05 Kruskal-Wallis). In preparations not treated with L-NAME IC50 was 27.2 [17.5 to 42.1] microM (n = 12), while in preparations treated with L-NAME (n = 7) was 348.1 [248 to 488.5] microM (p <0.05 Kruskal-Wallis). We observed in naive animals an increase in the EC50 for carbachol contraction produced by 0.22 [0.17 to 0.30] microM (n = 8) in the absence of sildenafil for 2.01 [1.21 to 3.33 ] microM (n = 7) in the presence of 30 microM of sildenafil for 2.85 [2.09 to 3.87] microM in the presence of 100 mM of sildenafil, and 2.45 [1.67 to 3.6 ] microM (n = 10) in the presence of 300 mM of sildenafil. In animals sensitized and challenged with ovalbumin, sildenafil 30&#956;M inhibited bronchial hyperactivity. Concerning the entrance of capacitative calcium, the sildenafi decreased the contraction produced by the replacement of calcium by 42.9  7.3% in naive animals to 10.8  3.7% in presence of 30 mM of sildenafil (p <0, 05). In the animals challenged sildenafi decreased the contraction produced by the replacement of calcium (98.0  11.8%, n = 6) without the presence of sildenafil in 22.7  5.4% in the presence of sildenafil 30 microM (p <0.05). Correlating gene expression with animals sensitized and challenged with ovalbumin treated with sildenafil a significant increase in gene expression TRPC1 TRPC6 (p <0.05, test HolmSidak) occurred. In contrast TRPC5 expression, expressed no changes after antigenic challenge, but decreased significantly after the treatment with sildenafil (p <0.05, test HolmSidak). In this study, we found that the myorelaxant effect of sildenafil involves NO, cGMP, potassium channels and calcium channels operated by stock. The presence of sildenafil was also able to significantly reduce the response to antigen in tissues from mice sensitized and challenged, and to alter the expression of genes belonging to the subfamily of TRPC, linking the involvement of phosphodiesterase 5 via the cellular expression of genes in TRPC tracheal smooth muscle. / Sildenafil (Viagra Â) is a selective inhibitor of cyclic guanosinamonofosfato (cGMP) a specific phosphodiesterase-5 (PDE5) useful in the treatment of erectile dysfunction and pulmonary arterial hypertension. The increase in intracellular cGMP levels caused by inhibition of PDE5 causes several cellular events such as airway smooth muscle relaxation and inhibition of cellular inflammation. The aim of this study was to evaluate the mechanism of action of sildenafil in tracheas of naive animals and challenged to ovalbumin, evaluate the effect of sildenafil on the expression and function of calcium channels operated by stock in tracheas of naive animals, sensitized and challenged with ovalbumin. In this work male rats of Wistar species were used, animals were actively sensitized by intraperitoneal injections of ovalbumin (three application on alternate days - 1, 3 and 5), the antigenic challenge (bronchoprovocation) occurred during the period between the 21 and 50 days post-sensitization, exactly 24 hours before the experiments in vitro. After removing the tracheal rings form chambers mounted on isolated bath and performed the concentration effect curves. When comparing the relaxing effect of sildenafil IC50 in animals with intact epithelium 27.2 [17.5 to 42.1] microM (n = 12), whereas the IC50 for the preparations without epithelium (n = 7) was of 232.25 [129.58 to 416.23] microM, (p <0.05 Kruskal-Wallis). In preparations not treated with L-NAME IC50 was 27.2 [17.5 to 42.1] microM (n = 12), while in preparations treated with L-NAME (n = 7) was 348.1 [248 to 488.5] microM (p <0.05 Kruskal-Wallis). We observed in naive animals an increase in the EC50 for carbachol contraction produced by 0.22 [0.17 to 0.30] microM (n = 8) in the absence of sildenafil for 2.01 [1.21 to 3.33 ] microM (n = 7) in the presence of 30 microM of sildenafil for 2.85 [2.09 to 3.87] microM in the presence of 100 mM of sildenafil, and 2.45 [1.67 to 3.6 ] microM (n = 10) in the presence of 300 mM of sildenafil. In animals sensitized and challenged with ovalbumin, sildenafil 30&#956;M inhibited bronchial hyperactivity. Concerning the entrance of capacitative calcium, the sildenafi decreased the contraction produced by the replacement of calcium by 42.9  7.3% in naive animals to 10.8  3.7% in presence of 30 mM of sildenafil (p <0, 05). In the animals challenged sildenafi decreased the contraction produced by the replacement of calcium (98.0  11.8%, n = 6) without the presence of sildenafil in 22.7  5.4% in the presence of sildenafil 30 microM (p <0.05). Correlating gene expression with animals sensitized and challenged with ovalbumin treated with sildenafil a significant increase in gene expression TRPC1 TRPC6 (p <0.05, test HolmSidak) occurred. In contrast TRPC5 expression, expressed no changes after antigenic challenge, but decreased significantly after the treatment with sildenafil (p <0.05, test HolmSidak). In this study, we found that the myorelaxant effect of sildenafil involves NO, cGMP, potassium channels and calcium channels operated by stock. The presence of sildenafil was also able to significantly reduce the response to antigen in tissues from mice sensitized and challenged, and to alter the expression of genes belonging to the subfamily of TRPC, linking the involvement of phosphodiesterase 5 via the cellular expression of genes in TRPC tracheal smooth muscle. / Sildenafil (Viagra Â) is a selective inhibitor of cyclic guanosinamonofosfato (cGMP) a specific phosphodiesterase-5 (PDE5) useful in the treatment of erectile dysfunction and pulmonary arterial hypertension. The increase in intracellular cGMP levels caused by inhibition of PDE5 causes several cellular events such as airway smooth muscle relaxation and inhibition of cellular inflammation. The aim of this study was to evaluate the mechanism of action of sildenafil in tracheas of naive animals and challenged to ovalbumin, evaluate the effect of sildenafil on the expression and function of calcium channels operated by stock in tracheas of naive animals, sensitized and challenged with ovalbumin. In this work male rats of Wistar species were used, animals were actively sensitized by intraperitoneal injections of ovalbumin (three application on alternate days - 1, 3 and 5), the antigenic challenge (bronchoprovocation) occurred during the period between the 21 and 50 days post-sensitization, exactly 24 hours before the experiments in vitro. After removing the tracheal rings form chambers mounted on isolated bath and performed the concentration effect curves. When comparing the relaxing effect of sildenafil IC50 in animals with intact epithelium 27.2 [17.5 to 42.1] microM (n = 12), whereas the IC50 for the preparations without epithelium (n = 7) was of 232.25 [129.58 to 416.23] microM, (p <0.05 Kruskal-Wallis). In preparations not treated with L-NAME IC50 was 27.2 [17.5 to 42.1] microM (n = 12), while in preparations treated with L-NAME (n = 7) was 348.1 [248 to 488.5] microM (p <0.05 Kruskal-Wallis). We observed in naive animals an increase in the EC50 for carbachol contraction produced by 0.22 [0.17 to 0.30] microM (n = 8) in the absence of sildenafil for 2.01 [1.21 to 3.33 ] microM (n = 7) in the presence of 30 microM of sildenafil for 2.85 [2.09 to 3.87] microM in the presence of 100 mM of sildenafil, and 2.45 [1.67 to 3.6 ] microM (n = 10) in the presence of 300 mM of sildenafil. In animals sensitized and challenged with ovalbumin, sildenafil 30&#956;M inhibited bronchial hyperactivity. Concerning the entrance of capacitative calcium, the sildenafi decreased the contraction produced by the replacement of calcium by 42.9  7.3% in naive animals to 10.8  3.7% in presence of 30 mM of sildenafil (p <0, 05). In the animals challenged sildenafi decreased the contraction produced by the replacement of calcium (98.0  11.8%, n = 6) without the presence of sildenafil in 22.7  5.4% in the presence of sildenafil 30 microM (p <0.05). Correlating gene expression with animals sensitized and challenged with ovalbumin treated with sildenafil a significant increase in gene expression TRPC1 TRPC6 (p <0.05, test HolmSidak) occurred. In contrast TRPC5 expression, expressed no changes after antigenic challenge, but decreased significantly after the treatment with sildenafil (p <0.05, test HolmSidak). In this study, we found that the myorelaxant effect of sildenafil involves NO, cGMP, potassium channels and calcium channels operated by stock. The presence of sildenafil was also able to significantly reduce the response to antigen in tissues from mice sensitized and challenged, and to alter the expression of genes belonging to the subfamily of TRPC, linking the involvement of phosphodiesterase 5 via the cellular expression of genes in TRPC tracheal smooth muscle.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / IntroduÃÃo: A mucosite induzida por antineoplÃsicos à um fator limitante na terapia anticÃncer. O trato gastrintestinal à vulnerÃvel por causa da alta proliferaÃÃo e frequÃncia de renovaÃÃo celular. Saccharomyces boulardii (SB) à uma levedura probiÃtica que à utilizada para proteger a microflora gastrintestinal do desequilÃbrio e de distÃrbios gastrintestinais associados. Objetivos: Avaliar o efeito do tratamento com SB na resposta inflamatÃria e nas vias de sinalizaÃÃo celular (NFkB e MAPK) e nos receptores Toll-like 2 e 4 associados a proteÃna adaptadora (MyD88) no curso da mucosite intestinal experimental induzida por 5-FU. MÃtodos: Camundongos machos Swiss (25-30g) foram tratados com 5-FU (450mg/Kg, i.p.) ou com soluÃÃo salina (controle). O grupo SB recebeu durante 3 dias consecutivos somente o SB (1.109 UFC/Kg, gavagem) atà o dia do sacrifÃcio. O grupo 5-FU+SB recebeu SB por 3 dias consecutivos apÃs a administraÃÃo do 5-FU. No 4 dia apÃs o 5-FU ou 5-FU+SB, os animais foram sacrificados, amostras de jejuno e Ãleo foram retiradas e os parÃmetros gerais da mucosite foram avaliados (leucograma, perca de peso, diarreia, histologia e MPO). Utilizou-se tambÃm as cÃlulas Caco2 incubadas com 5-FU (1mM) e SB por 24h. Avaliou-se tambÃm a inflamaÃÃo e as vias de sinalizaÃÃo celular, para isso avaliamos a expressÃo de NFkB, IkB, MAPK (p-ERK1/2, p-p38, p-JNK), iNOS, citocinas prÃ-inflamatÃrias (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), receptores toll-like 2 e 4 e, MyD88. Utilizou-se os mÃtodos de ELISA e ImunohistoquÃmica para as anÃlises em tecidos animais e, utilizamos as tÃcnicas de qPCR e de WB para as anÃlises celulares. Resultados: O tratamento com 5-FU foi capaz de induzir uma lesÃo intestinal com um importante comprometimento da barreira epitelial funcional com a presenÃa das seguintes alteraÃÃes: encurtamento acentuado das vilosidades intestinais, necrose parcial de criptas, vacuolizaÃÃo de cÃlulas, presenÃa de infiltrado de polimorfonucleares, aumento das concentraÃÃes de citocinas pro-inflamatÃrias (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), aumento das concentraÃÃes de iNOS, alteraÃÃes das vias celulares NF-kB e MAPK (p-ERK1/2, p-p38, p-JNK) e alteraÃÃo dos receptores Toll-like 2 e 4 e de MyD88. O tratamento com 5-FU+SB reduziu significativamente as lesÃes intestinais, com recuperaÃÃo dos vilos, recuperaÃÃo da profundidade das criptas, diminuiÃÃo do infiltrado neutrofÃlico e de iNOS, reduÃÃo da concentraÃÃo das citocinas pro-inflamatÃrias. Reduziu a alteraÃÃo causada pelo 5-FU nas vias celulares NF-kB e MAPK e nas expressÃes de receptores TLR2 e TLR4 e de MyD88. ConclusÃo: O SB reverte a mucosite intestinal causada pelo 5-FU, com a participaÃÃo de TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL-1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611; e iNOS. O SB parece inibir as vias NF-kB e MAPK. Nossos achados, em parte, poderiam explicar os sintomas persistentes da mucosite intestinal nos pacientes sob o tratamento com 5-FU, alÃm de contribuir para o entendimento dessa patogÃnese, auxiliando na descoberta de novas abordagens terapÃuticas com o uso de Saccharomyces boulardii. / IntroduÃÃo: A mucosite induzida por antineoplÃsicos à um fator limitante na terapia anticÃncer. O trato gastrintestinal à vulnerÃvel por causa da alta proliferaÃÃo e frequÃncia de renovaÃÃo celular. Saccharomyces boulardii (SB) à uma levedura probiÃtica que à utilizada para proteger a microflora gastrintestinal do desequilÃbrio e de distÃrbios gastrintestinais associados. Objetivos: Avaliar o efeito do tratamento com SB na resposta inflamatÃria e nas vias de sinalizaÃÃo celular (NFkB e MAPK) e nos receptores Toll-like 2 e 4 associados a proteÃna adaptadora (MyD88) no curso da mucosite intestinal experimental induzida por 5-FU. MÃtodos: Camundongos machos Swiss (25-30g) foram tratados com 5-FU (450mg/Kg, i.p.) ou com soluÃÃo salina (controle). O grupo SB recebeu durante 3 dias consecutivos somente o SB (1.109 UFC/Kg, gavagem) atà o dia do sacrifÃcio. O grupo 5-FU+SB recebeu SB por 3 dias consecutivos apÃs a administraÃÃo do 5-FU. No 4 dia apÃs o 5-FU ou 5-FU+SB, os animais foram sacrificados, amostras de jejuno e Ãleo foram retiradas e os parÃmetros gerais da mucosite foram avaliados (leucograma, perca de peso, diarreia, histologia e MPO). Utilizou-se tambÃm as cÃlulas Caco2 incubadas com 5-FU (1mM) e SB por 24h. Avaliou-se tambÃm a inflamaÃÃo e as vias de sinalizaÃÃo celular, para isso avaliamos a expressÃo de NFkB, IkB, MAPK (p-ERK1/2, p-p38, p-JNK), iNOS, citocinas prÃ-inflamatÃrias (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), receptores toll-like 2 e 4 e, MyD88. Utilizou-se os mÃtodos de ELISA e ImunohistoquÃmica para as anÃlises em tecidos animais e, utilizamos as tÃcnicas de qPCR e de WB para as anÃlises celulares. Resultados: O tratamento com 5-FU foi capaz de induzir uma lesÃo intestinal com um importante comprometimento da barreira epitelial funcional com a presenÃa das seguintes alteraÃÃes: encurtamento acentuado das vilosidades intestinais, necrose parcial de criptas, vacuolizaÃÃo de cÃlulas, presenÃa de infiltrado de polimorfonucleares, aumento das concentraÃÃes de citocinas pro-inflamatÃrias (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), aumento das concentraÃÃes de iNOS, alteraÃÃes das vias celulares NF-kB e MAPK (p-ERK1/2, p-p38, p-JNK) e alteraÃÃo dos receptores Toll-like 2 e 4 e de MyD88. O tratamento com 5-FU+SB reduziu significativamente as lesÃes intestinais, com recuperaÃÃo dos vilos, recuperaÃÃo da profundidade das criptas, diminuiÃÃo do infiltrado neutrofÃlico e de iNOS, reduÃÃo da concentraÃÃo das citocinas pro-inflamatÃrias. Reduziu a alteraÃÃo causada pelo 5-FU nas vias celulares NF-kB e MAPK e nas expressÃes de receptores TLR2 e TLR4 e de MyD88. ConclusÃo: O SB reverte a mucosite intestinal causada pelo 5-FU, com a participaÃÃo de TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL-1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611; e iNOS. O SB parece inibir as vias NF-kB e MAPK. Nossos achados, em parte, poderiam explicar os sintomas persistentes da mucosite intestinal nos pacientes sob o tratamento com 5-FU, alÃm de contribuir para o entendimento dessa patogÃnese, auxiliando na descoberta de novas abordagens terapÃuticas com o uso de Saccharomyces boulardii. / IntroduÃÃo: A mucosite induzida por antineoplÃsicos à um fator limitante na terapia anticÃncer. O trato gastrintestinal à vulnerÃvel por causa da alta proliferaÃÃo e frequÃncia de renovaÃÃo celular. Saccharomyces boulardii (SB) à uma levedura probiÃtica que à utilizada para proteger a microflora gastrintestinal do desequilÃbrio e de distÃrbios gastrintestinais associados. Objetivos: Avaliar o efeito do tratamento com SB na resposta inflamatÃria e nas vias de sinalizaÃÃo celular (NFkB e MAPK) e nos receptores Toll-like 2 e 4 associados a proteÃna adaptadora (MyD88) no curso da mucosite intestinal experimental induzida por 5-FU. MÃtodos: Camundongos machos Swiss (25-30g) foram tratados com 5-FU (450mg/Kg, i.p.) ou com soluÃÃo salina (controle). O grupo SB recebeu durante 3 dias consecutivos somente o SB (1.109 UFC/Kg, gavagem) atà o dia do sacrifÃcio. O grupo 5-FU+SB recebeu SB por 3 dias consecutivos apÃs a administraÃÃo do 5-FU. No 4 dia apÃs o 5-FU ou 5-FU+SB, os animais foram sacrificados, amostras de jejuno e Ãleo foram retiradas e os parÃmetros gerais da mucosite foram avaliados (leucograma, perca de peso, diarreia, histologia e MPO). Utilizou-se tambÃm as cÃlulas Caco2 incubadas com 5-FU (1mM) e SB por 24h. Avaliou-se tambÃm a inflamaÃÃo e as vias de sinalizaÃÃo celular, para isso avaliamos a expressÃo de NFkB, IkB, MAPK (p-ERK1/2, p-p38, p-JNK), iNOS, citocinas prÃ-inflamatÃrias (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), receptores toll-like 2 e 4 e, MyD88. Utilizou-se os mÃtodos de ELISA e ImunohistoquÃmica para as anÃlises em tecidos animais e, utilizamos as tÃcnicas de qPCR e de WB para as anÃlises celulares. Resultados: O tratamento com 5-FU foi capaz de induzir uma lesÃo intestinal com um importante comprometimento da barreira epitelial funcional com a presenÃa das seguintes alteraÃÃes: encurtamento acentuado das vilosidades intestinais, necrose parcial de criptas, vacuolizaÃÃo de cÃlulas, presenÃa de infiltrado de polimorfonucleares, aumento das concentraÃÃes de citocinas pro-inflamatÃrias (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), aumento das concentraÃÃes de iNOS, alteraÃÃes das vias celulares NF-kB e MAPK (p-ERK1/2, p-p38, p-JNK) e alteraÃÃo dos receptores Toll-like 2 e 4 e de MyD88. O tratamento com 5-FU+SB reduziu significativamente as lesÃes intestinais, com recuperaÃÃo dos vilos, recuperaÃÃo da profundidade das criptas, diminuiÃÃo do infiltrado neutrofÃlico e de iNOS, reduÃÃo da concentraÃÃo das citocinas pro-inflamatÃrias. Reduziu a alteraÃÃo causada pelo 5-FU nas vias celulares NF-kB e MAPK e nas expressÃes de receptores TLR2 e TLR4 e de MyD88. ConclusÃo: O SB reverte a mucosite intestinal causada pelo 5-FU, com a participaÃÃo de TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL-1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611; e iNOS. O SB parece inibir as vias NF-kB e MAPK. Nossos achados, em parte, poderiam explicar os sintomas persistentes da mucosite intestinal nos pacientes sob o tratamento com 5-FU, alÃm de contribuir para o entendimento dessa patogÃnese, auxiliando na descoberta de novas abordagens terapÃuticas com o uso de Saccharomyces boulardii. / Introduction: Intestinal mucositis is a frequent side-effect associated to 5-fluorouracil (5-FU) clinical use and results in inflammatory events. It is characterized by epithelial ulcerations in the mucosa and clinical manifestations of abdominal pain, nauseas and diarrhea. Saccharomyces boulardii is a probiotic yeast which has been shown to protect the gastrointestinal microflora from disequilibrium and from associated gastrointestinal disorders. Aim: To evaluate the effect of treatment with SB in the inflammatory response and in cellular signaling pathways (MAPK and NFkB) and Toll-like receptors 2 and 4, and associated adapter protein (MyD88) in the course of experimental intestinal mucositis induced by 5-FU. Methods: Male Swiss mice (25-30g) were treated with 5-FU (450 mg / kg, i.p.) or saline (control). The SB group received for 3 consecutive days only the SB (1,109 CFU / kg, gavage) until the day of sacrifice. 5-FU group received 5-FU+SB for 3 consecutive days after administration of 5-FU. On the 4th day after 5-FU or 5-FU + SB, the animals were sacrificed, samples of jejunum and ileum were removed and the general parameters of mucositis were evaluated (WBC, loss of weight, diarrhea, histology and MPO). It also used the Caco2 cells treated with 5-FU (1mM) and SB for 24h. We also evaluated the inflammation and cellular signaling pathways, for that evaluate the expression of NFkB, IkB, MAPK (p-ERK1 / 2, p38-p, p-JNK), iNOS, inflammatory proinflammatory cytokines (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), toll-like receptors 2 and 4 and MyD88. Immunohistochemistry and ELISA methods were used for the analysis in animal tissues and used qPCR techniques and WB for cell analysis. Results: Treatment with 5-FU was able to induce intestinal injury with a significant impairment of epithelial barrier function in the presence of the following changes: severe shortening of the villus, crypts of partial necrosis, vacuolization of cells, infiltration and mono polymorphonuclear, increased concentration of pro-inflammatory cytokines (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), increased expression of iNOS, changed c expressions of NF-kB and MAPK (p-ERK1 / 2, p38-p, p-JNK) cellular pathways and changed the toll-like receptors 2 and 4 and MyD88. However, treatment with SB significantly reduced intestinal lesions, recovery of the villi, the crypt depth recovery, decreased neutrophil infiltration and iNOS, reducing the concentration of pro-inflammatory cytokines. Reversed the changes caused by 5-FU in cellular pathways NF-kB and MAPK and expressions of TLR2 and TLR4 receptors and MyD88. / Introduction: Intestinal mucositis is a frequent side-effect associated to 5-fluorouracil (5-FU) clinical use and results in inflammatory events. It is characterized by epithelial ulcerations in the mucosa and clinical manifestations of abdominal pain, nauseas and diarrhea. Saccharomyces boulardii is a probiotic yeast which has been shown to protect the gastrointestinal microflora from disequilibrium and from associated gastrointestinal disorders. Aim: To evaluate the effect of treatment with SB in the inflammatory response and in cellular signaling pathways (MAPK and NFkB) and Toll-like receptors 2 and 4, and associated adapter protein (MyD88) in the course of experimental intestinal mucositis induced by 5-FU. Methods: Male Swiss mice (25-30g) were treated with 5-FU (450 mg / kg, i.p.) or saline (control). The SB group received for 3 consecutive days only the SB (1,109 CFU / kg, gavage) until the day of sacrifice. 5-FU group received 5-FU+SB for 3 consecutive days after administration of 5-FU. On the 4th day after 5-FU or 5-FU + SB, the animals were sacrificed, samples of jejunum and ileum were removed and the general parameters of mucositis were evaluated (WBC, loss of weight, diarrhea, histology and MPO). It also used the Caco2 cells treated with 5-FU (1mM) and SB for 24h. We also evaluated the inflammation and cellular signaling pathways, for that evaluate the expression of NFkB, IkB, MAPK (p-ERK1 / 2, p38-p, p-JNK), iNOS, inflammatory proinflammatory cytokines (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), toll-like receptors 2 and 4 and MyD88. Immunohistochemistry and ELISA methods were used for the analysis in animal tissues and used qPCR techniques and WB for cell analysis. Results: Treatment with 5-FU was able to induce intestinal injury with a significant impairment of epithelial barrier function in the presence of the following changes: severe shortening of the villus, crypts of partial necrosis, vacuolization of cells, infiltration and mono polymorphonuclear, increased concentration of pro-inflammatory cytokines (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), increased expression of iNOS, changed c expressions of NF-kB and MAPK (p-ERK1 / 2, p38-p, p-JNK) cellular pathways and changed the toll-like receptors 2 and 4 and MyD88. However, treatment with SB significantly reduced intestinal lesions, recovery of the villi, the crypt depth recovery, decreased neutrophil infiltration and iNOS, reducing the concentration of pro-inflammatory cytokines. Reversed the changes caused by 5-FU in cellular pathways NF-kB and MAPK and expressions of TLR2 and TLR4 receptors and MyD88. / Introduction: Intestinal mucositis is a frequent side-effect associated to 5-fluorouracil (5-FU) clinical use and results in inflammatory events. It is characterized by epithelial ulcerations in the mucosa and clinical manifestations of abdominal pain, nauseas and diarrhea. Saccharomyces boulardii is a probiotic yeast which has been shown to protect the gastrointestinal microflora from disequilibrium and from associated gastrointestinal disorders. Aim: To evaluate the effect of treatment with SB in the inflammatory response and in cellular signaling pathways (MAPK and NFkB) and Toll-like receptors 2 and 4, and associated adapter protein (MyD88) in the course of experimental intestinal mucositis induced by 5-FU. Methods: Male Swiss mice (25-30g) were treated with 5-FU (450 mg / kg, i.p.) or saline (control). The SB group received for 3 consecutive days only the SB (1,109 CFU / kg, gavage) until the day of sacrifice. 5-FU group received 5-FU+SB for 3 consecutive days after administration of 5-FU. On the 4th day after 5-FU or 5-FU + SB, the animals were sacrificed, samples of jejunum and ileum were removed and the general parameters of mucositis were evaluated (WBC, loss of weight, diarrhea, histology and MPO). It also used the Caco2 cells treated with 5-FU (1mM) and SB for 24h. We also evaluated the inflammation and cellular signaling pathways, for that evaluate the expression of NFkB, IkB, MAPK (p-ERK1 / 2, p38-p, p-JNK), iNOS, inflammatory proinflammatory cytokines (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), toll-like receptors 2 and 4 and MyD88. Immunohistochemistry and ELISA methods were used for the analysis in animal tissues and used qPCR techniques and WB for cell analysis. Results: Treatment with 5-FU was able to induce intestinal injury with a significant impairment of epithelial barrier function in the presence of the following changes: severe shortening of the villus, crypts of partial necrosis, vacuolization of cells, infiltration and mono polymorphonuclear, increased concentration of pro-inflammatory cytokines (TNF-&#945;, IL-1&#946;, CXCL1, IL-8, IL-4, IL-6, IL-12, IFN-&#611;), increased expression of iNOS, changed c expressions of NF-kB and MAPK (p-ERK1 / 2, p38-p, p-JNK) cellular pathways and changed the toll-like receptors 2 and 4 and MyD88. However, treatment with SB significantly reduced intestinal lesions, recovery of the villi, the crypt depth recovery, decreased neutrophil infiltration and iNOS, reducing the concentration of pro-inflammatory cytokines. Reversed the changes caused by 5-FU in cellular pathways NF-kB and MAPK and expressions of TLR2 and TLR4 receptors and MyD88.

Orientador : Profª. Drª. Maria A. B. F. Vital / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 30/11/2016 / Inclui referências : f. 42-48 / Área de concentração / Resumo: Existe um interesse crescente na investigação de um fármaco hipoglicêmico para o tratamento da Doença de Parkinson (DP), uma vez que foram verificados mecanismos em comum entre DP e Diabetes Mellitus (DM) e vários desses compostos mostraram potenciais efeitos neuroprotetores, dentre eles a classe dos inibidores dipeptidil peptidase-4 (DPP-4). Portanto, o presente estudo investigou os efeitos da saxagliptina (inibidor DPP-4) na função motora utilizando os testes do campo aberto (CA) e rotarod (RT), e na cognição por meio do teste de reconhecimento de objetos (RDO) no modelo animal de DP induzido por 6- hidroxidopamina (6-OHDA) em ratos. Os animais receberam uma infusão bilateral de 6-OHDA na substância negra (SN) e, após 24 horas, iniciou-se o tratamento com Saxagliptina (1 mg/kg, v.o.) uma vez ao dia, durante 21 dias. A lesão nigrostriatal promoveu hipolocomoção no CA e RT, comprometimento da memória no teste de RDO e também redução dos neurônios imunorreativos à tirosina hidroxilase (TH-ir). No entanto a saxagliptina não melhorou a função motora e, surpreendentemente, a droga promoveu prejuízo cognitivo. Nossos resultados indicam que o tratamento com saxagliptina não foi capaz de reverter o prejuízo produzido pela 6-OHDA nos testes analisados, além de ter prejudicado a memória dos animais neste modelo. Portanto, são necessários mais estudos para elucidar os efeitos destes fármacos em modelos animais da DP e especialmente os seus efeitos na memória a fim de esclarecer se as diferenças entre as gliptinas podem resultar em efeitos farmacológicos distintos ou se estas diferenças são relativas à particularidade deste modelo de DP. Palavras-chave: Doença de Parkinson; GLP-1; inibidores DPP-4; Saxagliptina; teste de reconhecimento de objetos; 6-OHDA. / Abstract: There is a growing interest in the investigation of a hypoglycemic agent for PD and Diabetes Mellitus (DM) have been reported. In addition, several hypoglycemic drugs have showed potential neuroprotective effects. A class of these drugs is composed by the dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4) inhibitors. Therefore, the present study investigated the effects of saxagliptin (DPP-4 inhibitor) in motor function using the open field (OFT) and rotarod tests. Moreover, cognition was evaluated using the novel object recognition test (NOR) in the animal model of PD induced by 6-hydroxydopamine (6-OHDA) in rats. Animals received a bilateral infusion of 6-OHDA in the substantia nigra (SN) and, after 24 hours, they started to receive treatment with Saxagliptin (1 mg/kg, p.o.) once daily, for 21 days. The nigrostriatal injury promoted a hypolocomotion in the OFT and rotarod, memory impairment in the NOR test and also a reduction of tyrosine hydroxylase immunoreactive (TH-ir) neurons. However, saxagliptin did not improve motor function and, surprisingly, the drug promoted cognitive decline. Therefore, our results indicate that treatment with saxagliptin was unable to reverse the impairment produced by 6- OHDA in the tests analyzed. Additionally, the drug worsened the memory of animals in this model. Thus, more studies are needed to elucidate the effects of these drugs in PD animal models and especially its effects in memory to clarify if differences between gliptins may result in distinct pharmacological effects or if these differences are relative to the particularity of this PD model. Keywords: Parkinson's disease; GLP-1; dpp-4 inhibitors; Saxagliptin; novel object recognition test; 6-OHDA