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La région du Rio Tapajós, dans l'état brésilien du Pará, est parmi les endroits du bassin amazonien où l'importance du déboisement est imputable, entre autres, à l'agriculture sur brûlis, car après seulement quelques cycles de culture, les terres sont laissées à la végétation secondaire, en raison de la détérioration de la fertilité. Les travaux de recherche du projet Caruso ont également montré que le brûlis était associé à la contamination au mercure des écosystèmes aquatiques, affectant la santé des populations riveraines. Dès lors que l'agriculture traditionnelle a été associée à ce problème de santé humaine, ce projet s'est attardé sur ses pratiques agricoles, tant pour les aspects liés à la contamination au mercure qu'à la fertilité du sol. Les jachères forestières ont semblé montré un potentiel intéressant pour la récupération des propriétés du sol. Mais on connaît peu de choses sur les dynamiques édaphiques de ces forêts secondaires, ni sur leur potentiel d'utilisation par les communautés, dans un contexte où on observe la transformation de centaines de km² de forêt primaire en végétation secondaire. Le présent projet de recherche s'insère donc dans la continuité du projet Caruso et il a pour objectif de caractériser l'impact des jachères forestières sur la reprise de la fertilité et sur la rétention du mercure, ainsi que l'usage que font les agriculteurs de leurs forêts secondaires, comparativement à celui plus traditionnel des forêts primaires. Pour ce faire, 6 communautés réparties dans un segment de 150km au long du Rio Tapajós ont été visitées pour d'une part, échantillonner 270 carottes de sol dans 25 jachères de différents âges et 5 forêts primaires et d'autre part pour questionner les agriculteurs sur les produits qu'ils extraient de leurs jachères, en utilisant ceux tirés des forêts primaires comme témoin. La fertilité de chaque site a été caractérisée au moyen des variables suivantes: densité, teneurs en cations (Ca, Mg, et K), indicateurs de la matière organique (%N, %C, NO₃ et NH₄), et phosphore (Pexe, Pcdb, Papa et Porg). Les jachères ont réellement semblé contribuer à la reprise de la fertilité en deçà de 15 ans sur sols argileux. Toutefois, les jachères sur sol sablonneux semblaient avoir un moins grand pouvoir de récupération se traduisant par des valeurs faibles surtout pour les variables reliées à la matière organique, en plus de réagir plus durement à des brûlis répétés. Sur le territoire il y avait légèrement moins de sols sablonneux. Enfin, un phénomène intéressant a pu être mis en lumière pour le mercure, soit une migration de la partie liée aux particules grossières vers les particules fines après environ 7 ans de jachère, mais sur sols sablonneux seulement. Ce processus est possiblement expliqué par l'immobilisation des cations avec le temps, qui rendent les sites de liaison sur les particules fines graduellement disponibles à nouveau. Les jachères se sont également révélées un milieu propice pour l'extractivisme d'une cinquantaine d'espèces, à l'instar des forêts primaires qui sont cependant utilisées avec une plus grande intensité. Au total, 80 espèces ont été mentionnées par les agriculteurs pour les deux types de forêts combinées. La présence de la route semble être un élément qui nuit aux activités d'extractivisme, car elle permet, entre autre, un plus grand déboisement, ce qui limite ensuite la récolte et la chasse. Les communautés isolées utilisent au contraire davantage leurs forêts, tout particulièrement les forêts primaires. Donc les jachères semblent une utilisation intéressante pour fournir des biens et services aux communautés. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : Jachère, Fertilité du sol, Amazonie, Petits agriculteurs, Extractivisme.

Les pluies acides, la plantation d'arbres à croissance rapide, des rotations plus courtes et la récolte par arbres entiers accentuent la pression sur les sols forestiers, et pourraient en diminuer la fertilité à long terme. Afin d'assurer le maintien de la productivité des stations forestières, les sites vulnérables à la déplétion de leurs nutriments doivent être identifiés afin d'y limiter l'extraction de biomasse forestière. Par la suite, un suivi devrait être effectué afin de vérifier l'efficacité des mesures mises en place. Le premier chapitre de ce mémoire évalue le potentiel de la nutrition foliaire comme indicateur de suivi de la fertilité des sols. Cent quatre-vingt-onze stations furent échantillonnées pour déterminer les relations entre la nutrition, la fertilité du sol et la productivité. La nutrition du sapin baumier (Abies balsamea), de l'épinette noire (Picea mariana), de l'épinette blanche (Picea glauca) et du pin gris (Pinus banksiana) a été évaluée à l'échelle de la forêt boréale québécoise. Chaque essence s'est avérée avoir un profil nutritionnel distinct. La nutrition foliaire du sapin baumier, de l'épinette blanche et du pin gris répondait davantage aux gradients de fertilité du sol que celle de l'épinette noire. La capacité d'échange cationique (CEC) et le pH du sol ont démontré de plus fortes et consistantes corrélations avec la nutrition foliaire que les variables physiques du sol (texture, surface spécifique et profondeur). Entre la concentration en nutriments des aiguilles, le contenu en nutriments de 100 aiguilles et les ratios multivariés des concentrations foliaires (CND), la dernière méthode semble plus fortement liée à la fertilité des sols. L'âge du peuplement, la densité et les variables climatiques ont des effets variés sur la nutrition foliaire, mais souvent faibles et limités, suggérant la possibilité d'utiliser la nutrition foliaire comme indicateur sur de larges gradients environnementaux. Des normes CND établies avec la méthode « boundary-line » indiquent que la nutrition d'une importante proportion de peuplement est déjà déficiente en calcium et potassium. Donc, le suivi des réservoirs nutritionnels devraient figurer parmi les enjeux importants d'aménagement forestier. Dans le second chapitre, la productivité de plus de 400 sites déterminée à l'aide de l'indice de qualité de station (IQS), de la surface terrière et de la végétation indicatrice de sous-bois, a été mise en relation avec des variables climatiques et pédologiques. À une échelle régionale, les concentrations en cations basiques du sol évaluées à l'aide de 80 000 échantillons de sédiments de lacs et rivières provenant de la prospection minière sont faiblement corrélées à la productivité dans les modèles testés. La position sur la pente, le drainage, le dépôt de surface, le nombre de degrées-jours et les précipitations utiles formaient le modèle le plus apte à prédire la productivité. Un peuplement sur un dépôt à texture grossière, dépôt mince ou sur un affleurement rocheux a respectivement 6,1, 7,7 et 21,5 fois moins de chance qu'un site sur dépôt argileux d'être dans une classe de bonne productivité. Les sites en haut de pente à bon drainage ainsi que les sites présentant un drainage imparfait ont aussi été identifiés comme étant moins productifs. Ces résultats suggèrent que des sites vulnérables à la récolte de la biomasse forestière pourraient être facilement identifiés à l'aide de variables cartographiées comme le dépôt de surface, la position sur la pente et le drainage. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : forêt boréale, fertilité des sols, productivité, nutrition foliaire.

La fécondation dépend de la capacité de deux cellules uniques à s’unir :l’ovocyte et le spermatozoïde. Alors que le stock d’ovocytes est établi dès la puberté, les spermatozoïdes sont produits de façon continue à partir d’une réserve de cellules germinales souches (spermatogonies). Immobile et inapte à la fécondation, le spermatozoïde testiculaire doit subir un processus de maturation qui débute dans l’épididyme et se poursuit dans les voies génitales femelles. Bien qu’une première forme de mobilité soit acquise au contact du fluide épididymaire, le spermatozoïde subit, tout au long de son parcours dans le tractus femelle, de nombreuses modifications structurelles et biochimiques appelées « capacitation » et qui s’avèrent indispensables à l’acquisition de son pouvoir fécondant. La production de spermatozoïdes fertiles est un processus hautement régulé, notamment via l’ion calcium ;second messager crucial de nombreux processus de signalisation intracellulaire. Les modifications de la concentration intracellulaire de calcium sont indispensables pour le développement du potentiel de fécondation du sperme via la modification du profil de mobilité vers l’hyperactivation ou encore la réalisation de la réaction acrosomiale. Différents mécanismes de régulation de la concentration intracellulaire calcique ont déjà été mis en évidence dans les spermatozoïdes :canaux calciques, réserves intracellulaires de calcium… Toutefois, peu d’informations relatent la présence et/ou l’implication de protéines liant le calcium (Calcium-Binding Proteins - CaBP) au sein de ce type cellulaire.Notre étude a pour but de caractériser la présence et l’implication potentielle de EF-Hand CaBP dans l’acquisition du pouvoir fécondant des spermatozoïdes murins. Nous nous sommes principalement focalisés sur l’étude de trois membres de cette famille protéique :la calrétinine, la calbindine D-28k et la parvalbumine. Nos investigations ont été menées de manière comparative entre des spermatozoïdes de type Wild-type (WT) et des spermatozoïdes n’exprimant pas une ou plusieurs CaBP (calrétinine knock-out - CR-/-, calbindine D-28k - knock-out CB-/-, triple knock-out pour la calrétinine, la calbindine D-28k et la parvalbumine - CR-/-CB-/-PV-/-). La première partie de notre projet décrit la localisation et l’expression de la calrétinine, la calbindine D-28k et la parvalbumine dans les spermatozoïdes de souris et de rats par immunofluorescence et Western blotting. Ces protéines ont été localisées au niveau de la pièce principale du flagelle et au niveau de la Redundant Nuclear Envelope dans le cas de la parvalbumine. Au cours de la seconde partie du projet, des études de mobilité ainsi que des quantifications du taux de réaction acrosomiale ont été menées en comparant les spermatozoïdes WT aux cellules CR-/- et CR-/-CB-/-PV-/-. Alors qu’aucune différence n’a été constatée entre les taux de réaction acrosomiale WT versus knock-out tant en condition basale qu’induite, l’absence d’une ou plusieurs protéines apparaît influencer certains paramètres de mobilité des spermatozoïdes. En effet, les spermatozoïdes CR-/- et CR-/-CB-/-PV-/- ont présenté une fréquence du battement de flagelle (BCF) plus élevée par rapport à la fréquence mesurée chez les spermatozoïdes WT, paramètre modifié notamment au cours de l’hyperactivation. Cette différence pourrait être liée à une modification du tamponnage calcique ou à une régulation différente du canal calcique CatSper, acteur majeur du développement de l’hyperactivation. Les résultats préliminaires des mesures électrophysiologiques suggèrent un rôle potentiel de la calrétinine dans la régulation de l’activité de ce canal. Par ailleurs, la comparaison entre le nombre de petits par portées WT par rapport aux portées CR-/- ou CR-/-CB-/-PV-/- a indiqué que l’absence d’expression d’une ou plusieurs EF-Hand CaBP réduisait le nombre de naissances par portée au sein des génotypes knock-out.En conclusion, l’ensemble de nos résultats expérimentaux ont démontré la présence de trois EF-Hand CaBP au niveau des spermatozoïdes murins et permis d’apporter de nouvelles informations quant à l’implication potentielle de celles-ci dans l’acquisition du pouvoir fécondant des spermatozoïdes. / Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques (Médecine) / info:eu-repo/semantics/nonPublished

Dans le but de fournir une base de référence utile pour les études relatives au développement de la fleur et de la graine chez Cichorium intybus, le développement normal de la fleur, de l’akène et de la graine a été analysé histologiquement. A l’aide du référentiel établi pour le développement floral normal, nous avons pu montrer que la stérilité mâle nucléaire de type « Edith » observée chez la chicorée est associée à des perturbations dans les cellules du tapis et de la couche moyenne ainsi qu’à une dégénérescence des microspores qui a lieu après la formation des tétrades méiotiques. Les ressemblances histologiques entre le mâle stérile « Edith » avec certains mutants d’Arabidopsis thaliana et du riz ont servi dans le choix de gènes candidats lors de l’étude moléculaire de cette stérilité mâle. D’autre part, la stérilité mâle cytoplasmique nommée «524» créée par fusion de protoplastes de tournesol mâle stérile et de chicorée fertile, a aussi été analysée histologiquement. Lors du développement floral chez le mâle stérile « 524 », la dégénérescence des microspores commence avant la première mitose pollinique, si bien qu’à l’anthèse les grains de pollen sont vides; l’anthère reste indéhiscente et ratatinée et les parois des cellules de l’endothécium n’ont pas l’épaississement lignifié caractéristique de ce tissu. Par ailleurs, la caractérisation morphologique du développement floral chez les plantes portant le cytoplasme « 524 » nous a permis de mettre en évidence l’existence d’un mécanisme de restauration de la fertilité mais dont la nature génétique reste à déterminer. Pour le développement de l’akène et de la graine, la chronologie des événements ainsi que la caractérisation morphologique et physiologique des différents stades du développement de l’akène et de la graine ont révélé l’existence d’une variabilité génétique pour la durée du développement de l’akène et la graine chez la chicorée. Le référentiel du développement de l’akène et de l’embryon zygotique pourra servir notamment aux analyses d’expression des gènes candidats qui ont été identifiés pendant les études antérieures sur l’embryogenèse somatique chez la chicorée. / In order to provide a useful reference for morphological studies on flower and seed development in Cichorium intybus, the normal development for these two organs was histologically characterised. With reference to the morphological events during normal flower development, we have shown that nuclear male sterility type "Edith" is associated with disturbances in the tapetum and middle layer cells as well as degeneration of microspores after the formation of meiotic tetrads. Histological resemblance with some mutants in Arabidopsis thaliana and in rice helped for selection of candidate genes for molecular analysis of this male sterility. Moreover, the cytoplasmic male sterility named "524" which was created by fusion of protoplasts from sunflower male sterile and from fertile chicory was also histologically characterised. During flower development in the male sterile “524” degeneration of pollen grains occurs at the first pollen mitosis, so that at anthesis, the pollen grains are empty; the anther locules are unopened and shrivelled and no lignified secondary thickenings are observed in endothecium. Moreover, morphological characterisation of flower development in plants carrying the cytoplasm “524” led us to demonstrate the existence of a mechanism of fertility restoration for which heredity needs to be investigated. For the achene and seed development, the timing of events and morphological and physiological characterisation of developmental stages revealed genetic variability in the duration of achene and seed development in chicory. The reference established for achene and zygotic embryo development will help more particularly analysing expression of genes which have been previously shown to be involved in the somatic embryogenesis process in chicory.

L'objectif de la thèse est la cartographie fine de QTL de fertilité femelle (FF) chez les races bovines Françaises : la Prim'Holstein (PH), la Normande (NO) et la Montbéliarde (MO). La première étape du projet consiste en une primo-localisation, sur un dispositif de 78 familles, de QTL de FF dans 12 régions génomiques. Six QTL de FF ont été détectés chez la PH et deux chez la NO. La deuxième étape consiste en une cartographie des QTL détectés sur les chromosomes BTA01, BTA02, BTA03 et BTA21 sur un échantillon de 41 familles des trois races. La localisation de ces QTL a été confirmée et précisée pour les QTL détectés sur les chromosomes BTA01 et BTA03. Le QTL sur le chromosome BTA03 a été finement cartographié en utilisant 437 SNP ce qui a permis de réduire son intervalle de localisation à quelques centimorgans et de sélectionner six gènes candidats. Les régions flanquant les exons de ces six gènes ont été séquencées sur quatre pools d'ADN d'individus de phénotypes extrêmes afin de trouver des polymorphismes intéressants dans les régions séquencées qui pourront ensuite être validés sur l'ensemble du dispositif. La mise à disposition récente d'une puce de 54000 SNP situés dans tout le génome bovin a changé la stratégie de cartographie de QTL de FF. Des gènes pouvant influencer la FF ont été sélectionnés et suggérés comme étant des gènes candidats positionnels et fonctionnels responsables de la dégradation de la FF chez les bovins laitiers.

Ce travail a consisté en l'étude de protéines de spermatozoïdes de différentes, avec l'objectif de contrôler leur pouvoir fécondant. Dans un premier temps une protéine antioxydante du tractus génital mâle, et acquise au cours de la maturation épididymaire, la glutathion peroxydase 5 (GPX5), a été étudiée dans deux espèces d'intérêt agronomique : l'étalon et le taureau. Les semences de ces animaux sont fréquemment conservées pour des inséminations artificielles. Or lors de la conservation, les spermatozoïdes subissent entre autres un stress oxydant. L'ajout de cette protéine antioxydante dans le milieu de conservation pourrait limiter les dommages subis par les spermatozoïdes. Les séquences spécifiques de cette protéine dans chaque espèce ont été obtenues. Les ARNm ont ensuite été localisés dans les canaux efférents et la tête de l'épididyme équine, ainsi que dans la tête et le corps de l'epididyme bovin. Par ailleurs la protéine bovine a été localisée dans la tête et le corps epididymaire. La seconde partie de ce travail a consisté a analyser les antigènes spermatiques spécifiques d'un rongeur fouisseur , le campagnol terrestre Arvicola terrestris Scherman dans le but de les utiliser pour une immunocontraception de cet animal nuisible. La détermination de protéines spermatiques suscepyibles d'être immunogènes a été entreprise.

La chimiothérapie induit une baisse de la fertilité en exerçant une toxicité directe sur les ovaires entrainant une diminution du stock ovocytaire. Couramment utilisé dans le traitement du cancer du sein, le cyclophosphamide (Cy) est une des drogues reconnue comme la plus gonadotoxique. Récemment, il a été proposé que le Cy provoquait une déplétion folliculaire par une entrée en croissance massive des follicules au repos. L’Hormone Anti-Müllérienne (AMH) étant un des facteurs régulant la sortie des follicules primordiaux de la réserve ovarienne, nous avons émis l’hypothèse que cette hormone pourrait limiter la gonadotoxicité du Cy. Nous avons montré qu’un traitement par AMH recombinante chez des souris pubères traitées par Cy, permettait effectivement de limiter la déplétion folliculaire. Sur le plan fondamental, nous avons mis en évidence que l’autophagie pouvait être un des mécanismes impliqués dans l’inhibition du recrutement folliculaire exercée par l’AMH. Enfin, la méthode de référence consistant à évaluer la réserve ovarienne chez la souris étant particulièrement longue et fastidieuse, nous avons développé une technique de comptage folliculaire automatisé en utilisant des méthodes d’intelligence artificielle, et plus particulièrement une approche de « deep learning». / Chemotherapy induces infertility by exerting a direct toxicity on the ovaries, resulting in a depletion of the follicular stockpile. Cyclophosphamide (Cy), widely used for breast cancer, is recognized as one of the most gonadotoxic agent. Recently, it has been proposed that Cy gives rise to follicular depletion by a massive growth of resting follicles which are then destroyed. Since Anti-Müllerian Hormone (AMH) is one of the factors regulating primordial follicles activation, we hypothesized that this hormone might limited Cy-induced gonadotoxicity. We have shown in pubertal mice that recombinant AMH injections are able to preserve primordial follicle loss Cy-induced and might improve fertility outcome after treatment. In addition, we provide evidence that autophagy could be one of the mechanisms involved in the inhibition of follicular recruitment by AMH. At least, nowadays, the “gold standard” method of evaluating ovarian reserve in mouse is a process particularly time-consuming and tedious. We developed a new methodology of automatic primordial follicles detection and counting within mouse ovaries, using modern artificial intelligence methods, especially deep learning approach.

Résumé : Bien que la perte de poids a été associée à une amélioration de la fonction reproductive chez les femmes obèses, ses effets chez les hommes demeurent peu étudiés. Pour répondre à cette question, nous avons évalué les impacts d’une exposition des conjoints à une intervention de modification des habitudes de vie (HDV) orientée vers les femmes obèses infertiles, sur leur profil anthropométrique, HDV et issues de fertilité de leur couple. Tous les conjoints intéressés à participer à cette étude de cohorte prospective contrôlée, imbriquée dans un essai randomisé contrôlé, ont été recrutés. Les couples étaient référés à la clinique de fertilité du Centre hospitalier universitaire de Sherbrooke. L’exposition des participants était déterminée selon la randomisation de leur conjointe. Tous les participants ont été évalués à 12 ou 18 mois, ou au moment d’une conception, pour leur anthropométrie et HBV. Les résultats sont présentés en moyenne ± écart-type ou proportions. Les groupes ont été comparés par test t de Student ou U de Mann-Whitney. Les prédicteurs indépendants masculins d’une conception ont été vérifiés par une régression multiple par étape. Comparativement aux hommes canadiens âgés de 20 à 59 ans, les 66 participants (âgés de 33,1 ± 6,2 ans) étaient plus souvent obèses (4% vs. 23 %, p<0,001) ou avaient une obésité abdominale (tour de taille > 102 cm : 53% vs. 21%, p<0,001), moins actifs (29% vs. 58%, p<0,001) et mangeaient moins souvent 5 fruits et légumes/jour (12% vs. 35%, p<0,001) ou déjeunaient quotidiennement (43% vs. 81%, p<0,001). Après un suivi médian de 15,4 mois, l’anthropométrie et les HDV des hommes exposés à l’intervention, vs non exposés, tendaient vers une amélioration, mais non significative. Néanmoins, les conjoints qui ont réussi à concevoir ont perdu plus de poids (-0,32kg ± 4,55 vs. +2,68 ± 3,19, p=0.016; % avec perte de poids : 38,5% vs. 10%, p=0,029) et ont amélioré certaines HDV. La perte de poids (p=0,038 pour changement d’IMC), le nombre de déjeuners hebdomadaires (p=0,016) et la fréquence de consommation ≥ 5 fruits et légumes par jour (p=0,050) sont les prédicteurs indépendants masculins d’une grossesse chez la conjointe. Nos résultats suggèrent que les conjoints des couples infertiles dont la femme est obèse sont eux-mêmes plus souvent obèses et ont des HDV plus mauvaises que les hommes canadiens. Il s’agit de la première étude prospective suggérant qu’une amélioration de l’anthropométrie et de la diète chez le conjoint augmente la probabilité de conception dans le couple. Puisqu’une exposition à une intervention ciblant la conjointe ne semblait pas suffisante pour amener des changements significatifs, nos résultats supportent la mise en place d’une intervention de modification des HDV orientée vers les conjoints afin d’améliorer la fertilité de leur couple / Abstract : Although weight loss was shown to improve reproductive health in obese women, it is still unknown whether lifestyle modifications in men can improve their couple’s fertility. In order to answer this question, we assessed the impacts of an exposition to a lifestyle intervention, targeting obese infertile women, by male partners and whether anthropometric or lifestyle changes in those partners could influence the couple’s fertility. All interested male partners were recruited in this controlled prospective cohort study nested in a randomized-controlled trial. Couples were referred to the Fertility Clinic of a Canadian Academic Center. Participants were considered exposed to lifestyle modifications if their spouse was randomized to the intervention. Partners were evaluated after 12 or 18 months or at the time of a pregnancy for their anthropometric measures and lifestyle habits. Results are presented as means ± SD or proportions. Groups were compared using Student’s t tests or Mann-Whitney U test. Independent male predictors of pregnancy were determined using stepwise multiple logistic regression. Compared to the Canadian male population aged 20-59 years1 , the 66 participating male partners (age 33.1 ± 6.2 years) were more often obese (47% vs 23%, p<0.001) or abdominally obese (WC ≥102cm : 53% vs 21%, p<0.001), less active (29% vs 58%, p<0.001), and ate less often ≥ 5 fruits and vegetables daily (12% vs 35%, p<0.001) or a breakfast (43% vs 81%, p<0.001). After 12 months (n=46), anthropometry and lifestyle tended to improve in the exposed group, but not significantly. Nonetheless, male partners who conceived lost more weight (-0.32kg ± 4.55 vs 2.68 ± 3.19, p=0.016; % with weight loss: 38.5% vs 10%, p=0.029) and improved more some of their lifestyle habits. Significant independent male predictors of pregnancy were losing weight (p=0.038 for BMI), eating more breakfasts weekly (p=0.016) and beginning to consume ≥ 5 fruits and vegetables daily (p=0.050). Our preliminary results suggest that male partners of obese infertile women are often obese themselves and display worst lifestyle habits than the Canadian male population. Furthermore, this is the first prospective study suggesting that male partners who improve their weight and dietary habits also increase the odds for their couple to conceive. Since exposure of male partners to their spouse lifestyle intervention is not effective enough, these results support to develop lifestyle interventions targeted to male partners in order to improve couples’ fertility.

Pour mieux comprendre la signification des marqueurs d'apoptose dans les spermatozoïdes éjaculés humains, l'objectif de notre étude était de mesurer ces marqueurs dans les spermatozoïdes prélevés à différents niveaux du tractus génital masculin dans différentes situations physiopathologiques. Pour évaluer la qualité fonctionnelle de ces spermatozoïdes, des relations ont été recherchées entre l'expression de ces marqueurs et les résultats obtenus en assistance médicale à la procréation. Les marqueurs analysés sont des facteurs mis en jeu dans l'initiation et l'activation de l'apoptose (poly-caspases, caspase-3, -8 ou -9 activée(s)), et des signes précoces (externalisation de la phosphatidylsérine, PS) ou tardifs (fragmentation de l'ADN) de l'apoptose. Pour certains échantillons, une analyse ultrastructurale des spermatozoïdes a aussi été réalisée. la mesure de l'expression des caspases activées a fait l'objet d'une mise au point compte-tenu de l'hétérogénéité des populations spermatiques et de la faible quantité de spermatozoïdes disponibles. Finalement, nous avons retenu une mesure par double marquage associant un inhibiteur fluorescent vert des caspases activées et un colorant fluorescent rouge (Propidium Iodide) avec une détection soit en cytométrie en flux soit en microscopie à fluorescence selon la nature des spermatozoïdes analysés. Chez des patients présentant une agénésie bilatérale des canaux déférents, la proportion de spermatozoïdes vivants ou morts exprimant des caspases activées est plus élevée dans les spermatozoïdes testiculaires que dans les spermatozoïdes épididymaires suggérant une initiation du processus apoptique dans les testicules et une incapacité des spermatozoïdes épididymaires à initier l'apoptose. Dans ces conditions, en ICSI, le risque d'injecter un spermatozoïde apoptique dans un ovocyte est plus élevé avec les spermatozoïdes testiculaires et pourrait expliquer pour une part, les résultats de moins bonne qualité avec ces spermatozoïdes testiculaires qu'avec les spermatozoïdes épididymaires. Chez des patients infertiles, porteurs d'une translocation chromosomique réciproque ou Robertsonienne autosomique, il existe une expression plus importante des modifications ultrastructurales et des marqueurs biochimiques d'apoptose (caspases activées, fragmentation de l'ADN, externalisation de la PS) associée à des signes d'immaturité ultrastructurale, comparé aux spermatozoïdes d'hommes fertiles. Ces résultats pourraient expliquer que dans l'éjaculat de ces patients, il existe une prédominance de gamètes équilibrés sur le plan chromosomique. En effet, les gamètes présentant un déséquilibre auraient été éliminées préférentiellement par apoptose. En conclusion, les marqueurs d'apoptose exprimés par les spermatozoïdes éjaculés seraient le reflet d'une altération de la spermatogenèse avec une apoptose initiée et avortée dans le testicule associée à des anomalies de maturation et différentiation. La mesure des marqueurs d'apoptose dans les spermatozoïdes apporterait une aide dans la compréhension et la prise en charge de l'infertilité masculine, en particulier en assistance médicale à la procréation.