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Caracterização do manejo de pragas empregado pelos produtores de uva de mesa Itália sob plástico / Characterization of pest management in Italia table grapes under plastic cover

Formolo, Rodrigo 24 March 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV10MA053.pdf: 1403790 bytes, checksum: fcc8683e96f4b0f7306c0fe41c66ad8f (MD5) Previous issue date: 2010-03-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Production of grapes for processing is one of the most important agricultural activities in Caxias do Sul municipality, Rio Grande do Sul State. In recent years, however, growers in the municipality are installing new vineyards for table grape production (Vitis vinifera) using plastic cover. Few information is available in relation to this production system mainly in relation to insect and mite management. This work was carried out to know the area grown with table grapes under plastic cover in the municipality, to identify the most damaging phytophagous and mite species in the vineyards and pest management adopted by growers, to monitor south American fruit fly Anastrepha fraterculus adults in the vineyards along the season and to know the effect of insecticides to control the specie in plastic cover vineyards. We identify 43 growers producing table grape under plastic cover in a total of 303.650 m2 ha in Caxias do Sul. The most important cultivar grown under plastic cover is Italia which is responsible for 70,31% of the total area grown. The most damaging insect pests for Italia table grape in the region are the flower thrips Frankliniella rodeos Moulton and the south american fruit fly Anastrepha fraterculus (Wiedemann, 1830). Insecticide application in a calendar base is the principal strategy used for grape growers for insect pest management in the vineyards. The monitoring of south american fruit fly using McPhail traps baited with hydrolyzed protein showed a higher incidence during the maturation period. Vineyards located near hosts suitable for fruit fly development and without insect control showed higher levels of infestation. A maximum of 16% of berries damaged by fruit fly were observed. Fenthion was a high efficient insecticide to control adult and larvae of fruit flies while a commercial rotenone and nim based insecticide (Rot-Nim) was effective only for adults but not for larvae of A. fraterculus. / O cultivo da videira para processamento é uma das principais atividades econômicas agrícolas do município de Caxias do Sul, no Rio Grande do Sul. No entanto, recentemente vários produtores tem implantado vinhedos de uvas finas de mesa (Vitis vinifera L.) sob plástico. Poucas informações estão disponíveis sobre este sistema de produção principalmente em relação ao manejo de pragas. Este trabalho foi realizado com o objetivo de conhecer a área cultivada com uvas finas de mesa sob plástico no Município, identificar as principais pragas e as estratégias de manejo empregadas pelos produtores, avaliar a flutuação populacional de adultos de Anastrepha fraterculus em uva fina de mesa e o efeito de inseticidas a campo e em laboratório para o controle da espécie em cultivo protegido. Através de entrevistas a todos produtores de uva de mesa produzida sob cobertura plástica do município foram identificadas 43 propriedades, sendo que a cultivar mais produzida é a Itália com 70,31% da área total de 303.650 m2. As principais pragas prejudiciais ao cultivo mencionadas pelos produtores foram o tripes Frankliniella rodeos Moulton e a mosca da fruta sulamericana Anastrepha fraterculus (Wiedemann, 1830), sendo que a aplicação de inseticida por calendário é a principal forma de controle de insetos na cultura. Utilizando armadilhas modelo McPhail, iscadas com proteína hidrolisada (BioAnastrepha® a 5%), instaladas em 6 vinhedos, foi observado que picos de adultos de A. fraterculus coincidem com a maturação e colheita dos frutos. Vinhedos que apresentam hospedeiros alternativos e multiplicadores de A. fraterculus no seu entorno são áreas mais propícias à ocorrência e quando não tomadas medidas de controle, perdas significativas da produção (até 16%) foram registradas. A campo e em laboratório, o inseticida fentiona foi eficaz no controle de adultos e larvas sendo que o composto à base de rotenona e nim (Rot-Nim) apresentou efeito sobre adultos não sendo indicado para o controle de larvas de A. fraterculus
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Análise morfométrica e molecular de morfotipos do complexo fraterculus (Diptera, Tephritidae, Anastrepha) de duas populações do Paraguai / Morphometric and molecular analysis of morphotypes of the fraterculus complex (Diptera, Tephritidae, Anastrepha) of two populations from Paraguay

Gleidyane Novais Lopes 25 January 2011 (has links)
A alta diversidade observada em Anastrepha fraterculus em toda sua área de distribuição caracteriza a existência do complexo fraterculus. A correta identificação de espécies de Anastrepha aparentadas atualmente exige a utilização de uma série de técnicas. Assim, o presente trabalho propõe verificar quão semelhantes os morfotipos de duas populações do complexo A. fraterculus são, usando dados morfológicos (morfometria tradicional e geométrica) e moleculares (marcadores nucleares e mitocondriais). As amostras de dois municípios do Paraguai (Concepción e Santa Rosa) foram analisadas e seis morfotipos (chamados de M1 a M6) foram reconhecidos (M1-M5 em Concepción; M1-M4 e M6 em Santa Rosa), com base nas variações do ápice do acúleo, e um morfotipo com o acúleo típico do complexo fraterculus. A análise multivariada das oito medidas tomadas a partir do acúleo indicaram diferenças entre todos os morfotipos. A análise morfométrica baseada na morfometria convencional também revelou a existência de variabilidade entre os morfotipos estudados, mas alguns espécimes do morfotipo M4 foram similares aos espécimes de morfotipos M5 e M3, em Concepción. As asas também foram submetidas à morfometria geométrica usando 20 marcos, que indicou a existência de variabilidade entre e dentro dos morfotipos. Morfotipos da população de Concepción tendem a formar grupos distintos. No entanto, além das variações morfológicas de morfotipos de ambas as populações analisadas, sequências parciais da citocromo oxidase I gene (Cox1) e região do espaçador interno transcrito 1 (ITS1) foram muito semelhantes entre si. Portanto, esses marcadores moleculares não diferenciaram os morfotipos estudados, os quais foram muito similares aos espécimes com o acúleo típico do complexo fraterculus. / The high diversity observed in Anastrepha fraterculus throughout its distribution range characterizes the existence of the fraterculus complex. The correct identification of closely related species of Anastrepha currently requires the use of a number of techniques. Thus, the present work is proposed to verify how similar morphotypes of two populations of the A. fraterculus complex are, by using morphological (conventional and geometric morphometry) and molecular (nuclear and mitochondrial markers) data. Specimens from two municipalities of Paraguay (Concepción and Santa Rosa) were analyzed and six morphotypes (named from M1 to M6) were recognized (M1-M5 in Concepción; M1-M4 and M6 in Santa Rosa) based on variations in the apex of the aculeus, and a morphotype with the typical aculeus of the fraterculus complex. Multivariate analysis of eight measurements taken from the aculeus indicated differences among all morphotypes. Morphometric analysis based on conventional morphometry also revealed the existence of variability among the morphotypes studied, but some specimens from morphotype M4 were similar to specimens from morphotypes M5 and M3 in Concepción. Wings were also subjected to geometric morphometry by using 20 landmarks, which indicated the existence of variability between and within morphotypes. Morphotypes from the population of Concepcion tended to form separate groups. However, besides the morphological variations observed for morphotypes from both populations analyzed, partial sequences of the citochrome oxidase I (Cox1) gene and the internal transcribed spacer 1 (ITS1) region were highly similar among them. Therefore, these molecular markers did not differentiate the morphotypes studied and were highly similar to specimens with the aculeus shape typical of the fraterculus complex.
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Avaliação do potencial inseticida de Azadirachta indica (Meliaceae) visando ao controle de moscas-das-frutas (Diptera:Tephritidae) / Evaluation of the insecticidal potential of Azadirachta indica (Meliaceae) aiming the control of fruit flies (Diptera: Tephritidae)

Márcio Alves Silva 28 June 2010 (has links)
Avaliou-se a bioatividade de derivados do nim (Azadirachta indica A. Juss.) como componente de isca para adultos e como regulador de crescimento de Ceratitis capitata (Wied.) e Anastrepha fraterculus (Wied.), determinando-se, ainda, o efeito de concentrações subletais de extratos de nim e o efeito deterrente de oviposição do extrato metanólico de folhas sobre C. capitata. Utilizando o extrato aquoso de amêndoas de nim, estimou-se a CL50 para adultos e imaturos, cujos valores foram 7.522 e 1.368 ppm para os adultos e 13.028 e 9.390 ppm para os imaturos de A. fraterculus e C. capitata, respectivamente. Subsequentemente, o óleo de amêndoas, os extratos de folhas, de ramos e de amêndoas de nim em diferentes solventes (água, metanol, diclorometano e hexano) foram comparados com base nas CL50 obtidas para adultos e para imaturos. Posteriormente, foram estimadas concentrações subletais (CL15 = 39 ppm, CL30 = 225 ppm e CL45 = 888 ppm) do extrato aquoso de amêndoas para adultos de C. capitata e avaliouse nessas concentrações o efeito do extrato aquoso de amêndoas, de folhas em metanol e de ramos em diclorometano sobre a reprodução e a longevidade dessa espécie. A deterrência de oviposição do extrato metanólico de folhas de nim em diferentes concentrações (10.000, 18.000, 32.000 e 56.000 ppm) para C. capitata foi avaliada tratando bagas de uva, que foram expostas às fêmeas com chance e sem chance de escolha. Verificou-se que os derivados do nim na concentração de até 7.522 e 1.368 ppm não afetaram os adultos de A. fraterculus e C. capitata, respectivamente. Já para a fase imatura, os extratos de amêndoas e de ramos em diclorometano na concentração de 13.028 ppm causaram mortalidade de A. fraterculus e na concentração de 9.390 ppm o extrato de amêndoas em metanol e em diclorometano causaram mortalidade de C. capitata. Houve redução da fecundidade total e da fertilidade no 8º dia quando os insetos foram alimentados com extrato de ramos em diclorometano a 888 ppm. A longevidade de machos e fêmeas e o período de pré-oviposição não foram afetados pelos tratamentos. O extrato de folhas em metanol provocou deterrência de oviposição para C. capitata em situação de chance de escolha, porém, em confinamento, o referido extrato não afetou o comportamento dessa espécie. A experiência recente de C. capitata não alterou a sua resposta em relação a bagas de uva tratadas. A atividade biológica dos derivados do nim em relação às moscas-das-frutas é discutida. / The bioactivity of neem (Azadirachta indica A. Juss.) as adult bait and as larval growth regulator for Ceratitis capitata (Wied.) and Anastrepha fraterculus (Wied.) was evaluated. Besides, the effect of sublethal concentrations of neem extracts and the oviposition deterrency of the methanolic extract from leaves on C. capitata was evaluated. The estimated LC50 of aqueous extract from seed kernels were 7,522 and 1,368 ppm for adults and 13,028 and 9,390 ppm for immatures of A. fraterculus and C. capitata, respectively. In addition, the oil from seed kernels and the extracts from leaves, branches and seed kernels in different solvents (water, methanol, dichloromethane and hexane) were compared based on the LC50 obtained for adults and immatures. After that, sublethal concentrations from aqueous extract from neem seed kernels for C. capitata adults were estimated (LC15 = 39 ppm, LC30 = 225 ppm and LC45 = 888 ppm) and the effects of such concentrations on the reproduction and logenvity of this species were also accessed. Oviposition deterrency of C. capitata to grapes treated with leaf methanolic extract at different concentrations (10,000; 18,000; 32,000 and 56,000 ppm) was evaluated in free-choice or no-choice test. It was verified that the neem extracts on the concentrations up to 7,522 and to 1,368 ppm did not affect the adults of A. fraterculus and C. capitata, respectively. On the other hand, the extract from seed kernels and branches in dichloromethane at 13,028 ppm provoked mortality in A. fraterculus larvae and the seed kernel extract in methanol and dichloromethane at 9,390 ppm provoked high mortality in C. capitata larvae. The total fecundity was reduced significantly and the fertility decreased on the 8th day when the insects were fed on branch extract in dichloromethane at 888 ppm. The longevity of males and females and the pre-oviposition period were not affected by treatments. The leaf extract in methanol provoked oviposition deterrency for C. capitata in free-choice test, but did not affect its behavior in no-choice test. The C. capitatas early experience did not affect its answer to the grapes treated in free-choice and no-choice situations. The biological activity of the neem extracts to fruit flies is discussed.
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Toxicogenetic Studies in Drosophila: Using Fruit Flies to Study Arsenic Toxicity

Muñiz Ortiz, Jorge G. 17 April 2009 (has links)
No description available.
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An Invasive Fruit Fly, Bactrocera dorsalis (Tephritidae), on Mango in Senegal: Impact on Mango Crop Production and Value, Marketing Practices, and Management

Balayara, Assa 12 July 2016 (has links)
The oriental fruit fly, Bactrocera dorsalis Hendel, is an economic tephritid that invaded Senegal in 2004 (Vayssieres et al. 2011). This work determined 1) Impact of B. dorsalis on mango crop production and value, and marketing practices, 2) Effect of neem and kaolin on its behavior and development (laboratory and field), and 3) Effect of treated soil with neem seed cake (NSC) and neem seed powder (NSP) on the larval-pupal survival and development (laboratory and field). Results revealed crop value (price/kg) was associated with infestation levels. P<0.0001, crop value decreased in highly infested orchards. Southern Orchards were heavily infested than northern orchards. Early harvest, orchard sanitation, decreasing the purchase quantity, sorting infested mangoes and lowering prices were strategies used by growers and traders. Laboratory bioassays showed females landed and spent time on fruit identically on control and neem. On kaolin there were fewer landings and less time spent. P<0.0001, mean pupae was higher in control than in treated mangoes. In the field, percent of infested mangoes was higher in neem than in control and kaolin. However, the number of emerged flies was higher in the control than in either the neem or kaolin-treated fruit. Treated soil with NSC and with NSP did not have effect on pupation; all larvae pupated in the lab. However, treated soil decreased significantly the number of emerged flies. In the field, there were no significant differences between untreated and treated soil in number of emerged flies. / Master of Science in Life Sciences
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Comportamento olfativo de três espécies de parasitóides (Hymenoptera: Braconidae) de moscas-das-frutas (Diptera: Tephritidae) / Olfactory behavior of three parasitoid species (hymenoptera: braconidae) of fruit flies (diptera: tephritidae)

Silva, José Wilson Pereira da 22 July 2005 (has links)
Entre os inimigos naturais das moscas-das-frutas, os representantes da subfamília Opiinae (Hymenoptera: Braconidae) têm sido os mais utilizados em programas de controle biológico. Entretanto, algumas espécies da subfamília Alysiinae são comumente relacionadas ao parasitismo desses dípteros, em particular Asobara anastrephae (Muesebeck). No estudo da eficiência desses parasitóides é de fundamental importância o conhecimento dos estímulos utilizados para a localização do hábitat de seus hospedeiros. Dessa forma, foram avaliadas as respostas olfativas do parasitóide exótico Diachasmimorpha longicaudata Ashmead, e dos nativos, Doryctobracon areolatus (Szépligeti) e A. anastrephae a frutos de goiaba (Psidium guajava L.) com e sem larvas de moscasdas- frutas, em condições de laboratório. D. longicaudata e D. areolatus foram também estudados em telado. As fêmeas de D. longicaudata e de D. areolatus responderam aos odores de frutos podres não-infestados, embora D. areolatus também tenha sido atraído aos frutos em maturação inicial (de vez). As fêmeas dessas espécies demonstraram reconhecer os voláteis de frutos com larvas de Ceratitis capitata (Wied.). No entanto, em bioensaios realizados com frutos contendo larvas de diferentes instares, as fêmeas de D. longicaudata não foram capazes de separar frutos com larvas dos primeiros instares dos de terceiro instar de C. capitata. Nas avaliações dos voláteis liberados dos frutos com larvas de C. capitata e de Anastrepha fraterculus (Wied.), as fêmeas de D. longicaudata orientaram-se aos voláteis dos frutos com ambas as espécies de hospedeiros, mas diferiram significativamente dos voláteis com larvas de C. capitata. As fêmeas de D. areolatus também demonstraram respostas para ambas as espécies, mas diferiram significativamente dos voláteis de frutos com larvas de A. fraterculus. As fêmeas de A. anastrephae orientaram-se de forma similar para os campos com odores de frutos infestados com ambas as espécies de moscas-dasfrutas. Em área coberta (telado), as fêmeas de D. longicaudata orientaram-se pelos voláteis de frutos podres com e sem larvas, porém não diferenciaram significativamente os hospedeiros. As fêmeas de D. areolatus não foram atraídas para os frutos nas gaiolas no solo independentemente do hospedeiro, sugerindo que este parasitóide não forrageia em frutos caídos. / Parasitoids of the Opiinae subfamily (Hymenoptera: Braconidae) are among the most used natural enemies in fruit fly control programs. Furthermore, some species of the subfamily Alysiinae, such as Asobara anastrephae (Muesebeck), are commonly associated to the parasitism of these dipterans. The study of efficiency of parasitoids is essential in order to understand the mechanisms that regulate both prey and habitat searching behavior of natural enemies. In this work we evaluated the behavioral response of the native parasitoid species Doryctobracon areolatus (Szépligeti), A. anastrephae as well as the exotic species Diachasmimorpha longicaudata Ashmead, to guava fruit (Psidium guajava L.) with and without fruit flies larvae under laboratory conditions. In addition, behavioral response of D. longicaudata and D. areolatus were also determined under natural conditions. Parasitoid females of D. longicaudata and D. areolatus responded to volatiles from non-infested fermented fruits, moreover D. areolatus also attracted to fruits on initial maturation. Both species recognized volatiles from fruits infested with Ceratitis capitata (Wied.) larvae; however D. longicaudata females were unable to differentiate volatiles from fruit infested with different larval instars of C. capitata. Olfactometer choice bioassays showed that females of both parasitoid species oriented to volatiles released from fruits infested with C. capitata and Anastrepha fraterculus (Wied.) larvae, however preference differed significantly for volatiles associated with each fruit fly species. Under natural conditions, D. longicaudata was attracted to volatiles released from infested and non-infested fermented fruits. Nevertheless, D. areolatus did not respond to volatiles from infested fruits placed on the ground, suggesting that this species do not prey on fallen fruits.
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Zoneamento ecológico de Anastrepha fraterculus e Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae) em dois cenários climáticos no Brasil / Ecological zoning for Anastrepha fraterculus and Ceratitis capitata (Diptera, Tephritidae) in two climatic scenarios in Brazil

Santos, Wyratan da Silva 28 February 2008 (has links)
O zoneamento ecológico exploratório de Anastrepha fraterculus e de Ceratitis capitata foi baseado nos dados climáticos de 497 estações meteorológicas de todo o Brasil para o clima recente (1961 - 1990) e nos dados climáticos previstos pelo IPCC para o clima futuro (2080 no cenário A2). Com esses dados, foram confeccionados evapluviogramas para calcular o índice de desenvolvimento das duas espécies, com base em suas necessidades térmicas e de umidade de solo. Os índices de desenvolvimento foram espacializados pelo sistema de informações geográficas SPRING 4.1.1 e divididos em cinco classes. As localidades mais propícias ao desenvolvimento de A. fraterculus, no clima recente, localizam-se nas regiões Sudeste e Sul. Essas regiões apresentam temperaturas médias mensais dentro da faixa mesotérmica de desenvolvimento da espécie e período curto de estiagem. Por outro lado, as localidades com condições menos favoráveis estão no semi-árido da região Nordeste, onde as temperaturas ficam sempre acima da temperatura-limite de desenvolvimento da mosca-das-frutas sul-americana e as condições hídricas são inadequadas ao desenvolvimento da fase de pupa. Com o aumento da temperatura, devido ao aquecimento global previsto para 2080 (cenário A2), as regiões Norte, Nordeste e Centro-Oeste serão completamente desfavoráveis ao desenvolvimento de A. fraterculus. Na região Sul e parte da Sudeste, a temperatura ficará dentro da faixa mesotérmica de desenvolvimento de A. fraterculus, mesmo com o aumento da temperatura, mas em alguns meses, excederá a temperatura-limite superior de desenvolvimento. No entanto, as condições hídricas serão desfavoráveis em grande parte do ano. No cenário do clima recente, as regiões Norte e Nordeste, com as temperaturas elevadas, são desfavoráveis ao desenvolvimento de C. capitata durante o ano todo. No Nordeste, também as condições hídricas só são favoráveis em curto período do ano. Na região Centro-Oeste, de março a agosto, parte do Mato Grosso do Sul e de Goiás são desfavoráveis ao desenvolvimento de C. capitata, em razão da precipitação pluvial baixa. Na região Sudeste, o período de setembro a março é favorável ao desenvolvimento, em razão da temperatura e condição hídrica adequadas. Na região Sul, apenas em maio e junho, quando ocorrem as menores temperaturas, o período é desfavorável ao desenvolvimento de C. capitata. Na previsão para 2080, devido principalmente ao aumento da temperatura causado pelo aquecimento global, apenas nos estados de Santa Catarina e do Rio Grande do Sul, haverá condições climáticas apropriadas ao desenvolvimento da mosca-do-mediterrâneo. Portanto, as mudanças climáticas previstas serão menos favoráveis ao desenvolvimento de C. capitata (espécie exótica) do de A. fraterculus (espécie nativa). / Exploratory ecological zoning for the South American fruit fly, Anastrepha fraterculus, and the medfly, Ceratitis capitata, were established based on data of 497 meteorological stations throughout Brazil, considering recent (1961 - 1990) and future climate forecast by IPPC (2080, A2 scenario). Climograms were used to estimate the South American fruit fly and medfly development indexes (Id) based on their thermal and soil moisture requirements. The development index was divided into five classes and spacialized by using the SPRING 4.1.1 geographical information system. Based on development index the Southwest and South regions were the most suitable for Anastrepha fraterculus in the recent climate. These regions have average monthly temperatures within the mesothermic range of A. fraterculus development and a short period of drought, while the unfavorable localities were situated in the semi-arid of the Northwest region, where temperatures are always above the threshold temperature of development and soil moisture are unsuitable for the pupa stage. For the increase of temperature due to global warming foreseen for 2080 (scenario A2), the North, Northwest and Center-West regions will become entirely unsuitable for the South American fruit fly development. Temperatures within the mesothermic range of development will still be available in part of Southwest region and in the South region, even with the increase of the temperature. However, the hydric conditions will be unfavorable for most of the year, and the upper temperature threshold will be exceeded in warmer months. For Ceratitis capitata, the recent climate of the North and Northwest regions were unsuitable for its development due to the high temperatures year-round. In the Northwest region, the hydric conditions will be favourable for a short period of the year. The low rainfall from March to August will make part of the state of Mato Grosso do Sul and Goiás unfavorable for medfly development in the Center-West region. In the Southwest region, temperature and hydric conditions from September to March are inadequate for medfly development. In the South region, conditions will be unfavorable to medfly development only during the months of May and June, when low temperatures occur. In the prediction for 2080, due to the temperature increase, only Santa Catarina and Rio Grande do Sul states will have adequate climatic conditions to allow for C. capitata development. Therefore, the foreseen climate changes will be more unfavorable for the development of C. capitata (exotic species) than A. fraterculus (native species).
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Determinação da dose de radiação gama esterilizante pela avaliação dos parâmetros biológicos de machos de Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae), linhagem tsl - Vienna 8 / Determination of the dose of gamma radiation sterilization for assessment of biological parameters of male Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae), tsl - Vienna 8 strain

Rocha, Aline Cristina Pereira da 23 August 2011 (has links)
A linhagem tsl (temperature sensitive lethal) - Vienna 8 da espécie Ceratitis capitata, por apresentar mutações que facilitam a criação e a liberação de apenas machos estéreis no campo, vem sendo utilizada em programas de controle da mosca-do-mediterrâneo com o uso da técnica do inseto estéril. O objetivo deste trabalho foi determinar a dose de radiação gama que proporciona o maior índice de esterilidade para machos da espécie C. capitata - linhagem tsl Vienna 8, avaliando seus parâmetros biológicos que indicam a qualidade dos machos estéreis a serem liberados. Pupas marrons (machos) da linhagem tsl, provenientes da criação do laboratório de Irradiação de Alimentos e Radioentomologia do CENA/USP, foram submetidas à radiação gama (60Co) 24 horas antes da emergência nas doses de 0, 30, 60, 90 e 120 Gy. A determinação da dose esterilizante foi baseada na fertilidade de fêmeas sexualmente maduras, da linhagem bissexual e não irradiadas, acasaladas com machos dos diferentes tratamentos. A coleta dos ovos foi realizada diariamente por 6 dias, sendo possível contabilizar e estimar a fecundidade, e obter a taxa de eclosão. A determinação da porcentagem de emergência e da capacidade de voo seguiram o protocolo de controle de qualidade do manual da FAO/IAEA/USDA (2003). Para avaliar a longevidade sob estresse nutricional, os insetos ficaram um período de 48h após a emergência na ausência de água e alimento, e após este período, a mortalidade foi registrada. O tamanho dos testículos (esquerdo e direito) foi obtido ao dissecar machos irradiados e não-irradiados no 8o dia de vida, e mensurar os testículos em uma ocular micrométrica, considerando os maiores comprimento e largura de cada amostra. Para determinar o número de espermatozoides foi necessário dissecar os machos e romper seus testículos. Não houve diferença na taxa de emergência, capacidade de voo e longevidade entre machos irradiados e não-irradiados, e nem na fecundidade das fêmeas acasaladas com os machos dos diferentes tratamentos. A dose esterilizante que resultou na menor fertilidade das fêmeas foi de 120 Gy, com 1,5% de eclosão. Considerando os parâmetros de porcentagem de emergência, capacidade de vôo, longevidade sob estresse, e a esterilidade recomendada para a técnica do inseto estéril que consiste em, aproximadamente, 99% dos ovos serem inviáveis, a dose esterilizante a ser utilizada é a de 120 Gy. O tamanho dos testículos e o número de espermatozoides foram afetados pela radiação, havendo diferença entre os tratamentos. Os machos irradiados com 120 Gy apresentaram uma redução de cerca de 25% no tamanho dos testículos, comparando com os do controle (0 Gy). Os testículos dos machos normais continham uma média de 41910 espermatozoides, e esse valor foi decrescendo ao aumentar a dose de radiação, de maneira que machos irradiados com 120 Gy tinham um número médio de 27921 espermatozoides, e isto, possibilita a recomendação do uso de macho transgênico para controle de C. capitata / The Vienna-8, tsl (temperature sensitive lethal) strain of Ceratitis capitata, by presenting mutations that facilitate the mass rearing and release only of sterile males in the field, has been used in medfly SIT (Sterile Insect Technique) programmes. The objective of this study was to determine the radiation dose that provides the highest level of sterility for Vienna-8, tsl males assessing their biological parameters that indicate the quality of sterile males to be released. Brown pupae (males) of the tsl strain were obtained from the mass rearing of the Food Irradiation and Radioentomologia laboratory of CENA/USP, and they were irradiated (with gamma radiation - 60Co) 24 hours before the emergence at rates of 0, 30, 60, 90 and 120 Gy. The determination of the sterilizing dose was based on fertility of sexually mature females of the bisexual strain and not irradiated, mated with males of different treatments. Eggs were collected daily during 6 days, were counted and it was possible to estimate fecundity, and assess the hatching rate. The emergence and flight ability were determined by following the protocol of quality control manual for FAO/IAEA/USDA (2003). To assess the longevity under nutritional stress, the insects were kept a period of 48 h after emergence in the absence of water and food, and after this period, mortality was recorded. The size of the testes (left and right) was obtained by dissecting irradiated and non-irradiated males at the eighth day of life, and measure the testes in an ocular micrometer, considering the maximum length and width of each sample. To determine the sperm number was necessary to dissect the males and break their testicles. No difference was observed in emergence rate, flight ability and longevity of irradiated and non-irradiated males, nor in the fecundity of females mated with males of different treatments. The sterilizing dose that resulted in lower fertility of females was 120 Gy, with 1.5% hatching. Considering the parameters of emergence, flight ability, longevity under stress and sterility recommended for the sterile insect technique which consists of approximately 99%, the sterilizing dose to be used is 120 Gy. The size of the testes and the sperm number were affected by radiation. Males irradiated with 120 Gy presented a reduction about 25% in size of the testes, compared with the control (0 Gy). The testes of normal males contained an average of 41.910 sperm, and this value was decreased by increasing the dose of radiation, so that males irradiated with 120 Gy had a median of 27.921 sperm, and this allowed to recommend the use of GM male to control C. capitata
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Silenciamento dos genes fruitless e period: efeitos no comportamento locomotor e reprodutivo de Anastrepha sp.1 affinis fraterculus (Diptera, Tephritidae) / Silencing of genes fruitless and period: effects in locomotor and reproductive behavior of Anastrepha sp. 1 affinis fraterculus (Diptera, Tephritidae)

Teixeira, Ighor Luiz Azevedo 04 December 2017 (has links)
O complexo de espécies crípticas de Anastrepha fraterculus compreende oito morfotipos dos quais três ocorrem no Brasil. Anastrepha sp.1 aff. fraterculus é o morfotipo Brasil-1 e é uma espécie de ampla distribuição no planalto sudeste/sul do Brasil e no norte da Argentina. O comportamento reprodutivo dessa espécie é complexo, envolvendo uma série de movimentos desempenhados pelos machos para atrair as fêmeas para acasalamento, e ocorre, preferencialmente, nas primeiras horas do dia. Dois genes, period e fruitless, entre outros, são conhecidos por participar do controle do comportamento reprodutivo de vários organismos, incluindo algumas espécies de moscas-das-frutas. O presente trabalho buscou informações sobre a atuação desses genes no comportamento reprodutivo de A. sp.1, utilizando o silenciamento transitório desses genes pela metodologia de RNA interferente. Foram, primeiramente, desenhados iniciadores específicos para amplificar fragmentos do DNA genômico desses genes, sendo demonstrado que apresentaram uma similaridade entre 97 a 99% com os genes equivalentes de outras espécies de Anastrepha. A seguir, após padronização e adaptação de protocolos, foram sintetizados os RNA de dupla-fita (dsRNA) dos dois genes, que foram, então, utilizados nos experimentos de silenciamento. Análises, para verificação se os genes foram realmente silenciados foram feitas a partir a injeção dos dsRNAfru e/ou dsRNAper no abdomên de machos sexualmente maduros, tendo sido demonstrado que os genes estavam silenciados ao máximo, sete a oito dias após a injeção. Interferências no comportamento de machos sexualmente maduros, com um ou outro gene silenciado, foram avaliados por testes relacionados com dois parâmetros do comportamento reprodutivo: alterações nas atividades gerais (qualquer tipo de movimentação dos insetos) dos machos durante o ciclo circadiano (dia/noite) e mais especificamente, a atividade relacionada ao comportamento reprodutivo. Ao injetar dsRNAfru em machos adultos de A. sp.1 foi observado que não houve alteração significativa nas suas atividades gerais. Porém, foi observado que houve uma diminuição significativa no número de machos que realizavam atividades reprodutivas, sugerindo que o silenciamento de fruitless no macho adulto altera o funcionamento normal do comportamento sexual masculino. Em contrapartida, ao injetar dsRNAper em machos adultos de A. sp.1 não foi observada alteração significativa tanto nas suas atividades reprodutivas quanto nas atividades gerais. O silenciamento dos genes aparentemente não afeta a produção de espermatozóides. Apesar de controverso, esses dados corroboram com o que foi observado em D. melanogaster, em que o mutante nulo per04 não apresenta alteração significativa nos seus comportamentos em relação aos machos selavagens em um regime cíclico Dia/Noite. Dessa forma, análises adicionais serão necessárias com o objetivo de elucidar as implicações desses dois genes no comportamento locomotor e reprodutivo de Anastrepha sp.1 aff. fraterculus. / The complex of cryptic species Anastrepha fraterculus comprises eight morphotypes three of which occur in Brazil. Anastrepha sp.1 aff. fraterculus correspond to the morphotype Brazil-1 and is a species of wide distribution in the southeast/south plateau of Brazil and in north of Argentina. The reproductive behavior of this species is complex, involving a series of movements performed by males to attract females for mating, and occurs in the early hours of the day. Two genes, period and fruitless, among others, are known to participate in the control of reproductive behavior of various organisms, including some species of fruit flies. The present work aimed to get information about the presumable role of these genes in the reproductive behavior of A. sp.1, using transient silencing of these genes by interfering RNA methodology. Specific primers were first designed to amplify fragments of the genomic DNA of these genes, showing they have a similarity between 97 to 99% with the equivalent genes of other Anastrepha species. After standardization and adaptation of protocols, the double-stranded RNA (dsRNA) of the two genes were synthesized, and used in the silencing experiments. Tests to verify that the genes were actually silenced, were made after injection of the dsRNAfru and/or dsRNAper into the abdomens of sexually mature males. These tests showed that the genes were silenced to the maximum, seven to eight days after the injection. Interferences in the behavior of sexually mature males with one or other silenced gene were evaluated by tests related to two parameters of reproductive behavior: changes in the general activities (any type of movement of insects) of males during the circadian cycle (day/night) and more specifically, activity related to reproductive behavior. Injection of dsRNAfru in adult males of A. sp.1 showed that they did not cause significant alterations in general activities, but it was observed that they cause a significant decrease in the number of males that performed reproductive activities, suggesting that silencing of fruitless. alters the normal functioning of male sexual behavior. In contrast, when injecting dsRNAper. in adult males of A. sp.1, no significant alteration was observed neither in their reproductive activities nor in their general activities. Moreover, silencing of the genes seems not to affect the production of spermatozoa. Although controversial, the data are in line with observations in D. melanogaster, in which the null mutant per04 did not present significant alterations in behaviors relatives to the control males in a Day/Night cyclic regime. Thus, additional analyzes will be needed to elucidate the participation of the two genes in the coordination of behaviors in Anastrepha sp.1 aff fraterculus.
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Avaliação da linhagem transgênica, OX3864A de Ceratitis capitata (Wied.,1824) (Diptera: Tephritidae), comparada à linhagem tsl Vienna 8, para aplicação na Técnica do Inseto Estéril / Evaluation of the RIDL transgenic lineage, OX3864A of Ceratitis capitata (Wied.,1824) (Diptera:Tephritidae), compared to tsl-Vienna 8 strain, for sterile insect technique purposes

Jair Fernandes Virginio 29 October 2015 (has links)
As moscas-das-frutas se constituem no maior obstáculo para a produção, processamento e comércio de frutas frescas em todo o mundo. O Brasil não é exceção e, embora as condições brasileiras sejam bastante adequadas à produção de frutas tropicais e temperadas, a fruticultura enfrenta, continuamente, o problema das moscas-das-frutas. Dentre as espécies de maior importância econômica e quarentenária, destaca-se a mosca-do-mediterrâneo Ceratitis capitata (Wied., 1824) que tem, como centro de origem, a África Equatorial, e é uma das pragas mais destrutivas, causando elevados prejuízos à fruticultura mundial. No Brasil, onde sua presença foi registrada no início do século passado, esta praga se encontra amplamente distribuída em todo o território nacional. Os processos integrados de controle de pragas e doenças, com emprego de controle biológico, monitoramento populacional da praga, sistema de informação geográfica e aplicação de técnicas de controle das populações têm se desenvolvido significativamente nos últimos anos, permitindo a obtenção de frutas de alta qualidade. Com o sucesso da aplicação da Técnica do Inseto Estéril (TIE) na erradicação da Cochliomyia hominivorax (Coquerel, 1858) da Ilha de Curaçao e da região Sudeste dos Estados Unidos, houve um estímulo para o uso de programa contra várias espécies de moscas-das-frutas. A necessidade de se buscar respostas para o uso de fontes alternativas na esterilização de insetos, notadamente o uso de raios X, em escala industrial e a busca de novos modelos que possam inovar desde o ponto de vista tecnológico a TIE, com métodos que dispensem, por completo, o uso de radiação ionizante é o desafio do presente estudo, que teve como objetivo avaliar, através de testes em laboratório e em gaiola de campo, a linhagem transgênica de Ceratitis capitata (Wied.), OX3864A, comparada à linhagem tsl Vienna 8 da mesma espécie, esterilizada por raios X, visando a sua possível aplicação em programas de controle de moscas-dasfrutas, com foco na TIE. Os resultados obtidos mostram que a criação massal da linhagem transgênica esta dominada e que a dieta adotada pela BIOFÁBRICA MOSCAMED BRASIL (BMB), para a linhagem tsl Vienna 8, pode ser usada para a criação da linhagem transgênica OX3864A sem afetar o rendimento e os padrões de qualidade requeridos para o uso da linhagem na TIE. No que diz respeito aos bioensaios em gaiola de campo, os machos de ambas linhagens apresentaram uma boa performance sexual sendo capazes de competir com machos coespécificos selvagens pela cópula com fêmeas selvagens virgens. O desempenho dos machos transgênicos OX3864A não deferiu do desempenho dos machos irradiados de tsl Vienna 8. A fim de aprofundar os estudos, necessário se faz a realização de novas pesquisas para avaliar o desempenho de linhagens transgênicas em campo aberto / Fruit flies are within the main barriers to fresh fruit production, processing and trade throughout the world. In that sense, Brazil is not an exception, and although Brazilian conditions are favorable to the production of tropical and temperate fruits, this industry continually faces problems related to the fruit fly. From an economical and quarantine point of view, Ceratitis capitata (Wied., 1824) can be considered the most important fruit fly specie, which has the Equatorial Africa as center of origin, is also one of the most destructive pests, causing high losses to the world fruit industry. In Brazil, where its presence has been first noticed in the beginning of the past century, nowadays this pest is widespread throughout the whole national territory. With the latest developments on biological control, pest monitoring, geographical information systems and application of population control techniques it is seen that the integrated pest management systems are allowing the production of high quality fruits. Since the successful application of the sterile insect technique on the eradication of Cochliomyia hominivorax (Coquerel, 1858) in Curaçao and in the US Southeast region, there has been an incentive to the use of this technique in programs against various fruit fly species. On the search for alternative sources for insect sterilization especially the use of X-ray in high scale and the search for new models able to innovate the sterile insect technique from a technological point of view with methods that exempt the use of ionizing irradiation is the challenge of the present study, whose aim was to evaluate through lab and field cage tests the transgenic OX3864A RIDL of Ceratitis capitata (Wied.) strain, compared to X-ray sterilized tsl Vienna 8 strain, looking for a possible application on fruit fly control programs focused on the Sterile Insect Technique (SIT). Results obtained show that the mass rearing of the transgenic strain is dominated and the diet adopted by MOSCAMED BRAZIL rearing facility, for tsl Vienna 8 can also be used for the OX3864A transgenic strain without affecting its yield and quality standards required for its use in SIT. Regarding the field cage bioassays, males from both strains presented a good sexual performance, being able to compete with wild co-specific to mate with virgin wild females. Transgenic males did not differ from irradiated tsl Vienna 8 males. Further studies on sexual performance evaluation on open field of transgenic strain is recommended in order to provide more knowledge

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