Submitted by Mendes Eduardo (dasilva@ufba.br) on 2013-07-15T14:55:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Adriana Jardim.pdf: 1540828 bytes, checksum: 12e7025b89679ee3f0de0889c139b05e (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Valéria de Jesus Moura (anavaleria_131@hotmail.com) on 2016-06-21T16:53:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Adriana Jardim.pdf: 1540828 bytes, checksum: 12e7025b89679ee3f0de0889c139b05e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-21T16:53:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Adriana Jardim.pdf: 1540828 bytes, checksum: 12e7025b89679ee3f0de0889c139b05e (MD5) / Capes / Durante algum tempo a literatura sobre tartarugas marinhas foi essencialmente pautada em estudos em áreas de reprodução devido a uma maior acessibilidade às fêmeas em suas praias de desova. Como as tartarugas marinhas são animais longevos e altamente migratórios, passando a maior parte de seu ciclo de vida na água, estudos sobre a biologia e ecologia destes animais em ambiente marinho passaram a ter maior importância, e foram conduzidos de acordo com os avanços tecnológicos que possibilitaram uma maior aproximação do homem a estes ambientes. Os estudos de telemetria por satélite, telemetria por rádio, marcação, recaptura e genética trouxeram informações importantes sobre os padrões de atividade e uso do hábitat das tartarugas marinhas no ambiente marinho. Mesmo assim, estudos sobre dieta, seletividade do alimento e observações in situ dos comportamentos em áreas de alimentação ainda são escassos e devem trazer informações importantes sobre a fase aquática do ciclo de vida das tartarugas. A tartaruga verde, Chelonia mydas é encontrada em todos os oceanos do mundo sendo considerada em perigo de extinção pela IUCN e vulnerável pela Lista Vermelha da fauna brasileira ameaçada de extinção. É a espécie mais comum em áreas de alimentação na costa brasileira e considerada o maior réptil marinho essencialmente herbívoro. No Brasil existem alguns programas de monitoramento de longo prazo através de marcação e recaptura, mas ainda poucos estudos que relacionassem a presença de recursos alimentares com a presença destes animais em diferentes locais, bem como elucidassem aspectos relacionados ao ciclo diário de atividade das tartarugas verdes. Além disso, com um litoral tão extenso é de se esperar que as agregações de tartarugas verdes, que advém de sítios de desova muitas vezes distantes do Brasil, se distribuam de maneira diferente ao longo da costa. Tartarugas juvenis, subadultas e adultas podem freqüentar as mesmas áreas, mas pode haver predominância de algumas fases do ciclo de vida em determinados locais. O presente estudo foi desenvolvido no litoral norte da Bahia, que é considerada área de alimentação para C. mydas baseando-se na quantidade de encalhes de tartarugas juvenis. Foi observado que esta agregação de C.mydas é constituída não apenas por juvenis, mas também por animais subadultos e adultos, diferente de outras áreas do Brasil onde são constituídas basicamente por animais juvenis. Esta informação nos faz levantar a hipótese da existência de diferentes hábitats de desenvolvimento no Brasil. Além disso, sobre o ciclo diário de atividade das tartarugas, observamos que as bancadas recifais são utilizadas para alimentação principalmente no período da tarde. Por fim, pudemos observar a influência direta de recursos alimentares no número médio de avistagens de tartarugas em recifes costeiros e submersos, trazendo ainda a lista das espécies de algas, as quais estariam disponíveis ao forrageio de C. mydas. Sendo assim, salientamos a importância da conservação dos ambientes recifais no Litoral norte da Bahia, devido a sua peculiaridade em abrigar juvenis, subadultos e adultos de C. mydas, possuir alta diversidade de fauna e abundância de algas, as quais servem de alimento para as tartarugas verdes. / This study aimed to verify the relationship between the percentage of algal cover and the distribution of green turtles, Chelonia mydas in a foraging ground in the northern Bahia State, Brazil. Moreover, differences in feeding behavior of this species were recorded in two distinct monitoring periods: morning and afternoon. Additionally, we assessed population structure regarding size distributions of the individuals and compared it with other populations in Brazil. From January to December 2011, line transects were used to collect data on the percent cover of algae on reef flats and submerged reefs, as well as on sea turtle sightings. There was a positive relationship between percent algal cover and number of individuals. Results showed a significant increase in foraging during the afternoon with peak activity occurring between 4 p.m. and 6 p.m. From June 2009 to September 2012, in-water captures were also conducted using a special gill net to safely capture sea turtles (average CPUE = 1.90 catch / hour). Of 256 captured turtles, 22 were recaptured at least once. Mean annual growth rates calculated for all recaptured turtles were 3,51 ± 1,15 cm/year; n=12. This information 15 highlights the importance of this area as a foraging ground. The green turtle population of the Northern coast of Bahia comprises juveniles, sub-adults and adults; and differs significantly, in terms of body size, from individuals inhabiting Ceará, Espírito Santo and São Paulo states. Our results indicate that green turtles may have significantly different size frequency distributions throughout the Brazilian coast, which suggests the existence of different development habitats for juvenile green turtles in Brazil. / Salvador

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-02-17T12:43:01Z No. of bitstreams: 1 rquivo total.pdf: 1353702 bytes, checksum: 83db724c3c959a4e1d35f4040336484d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-17T12:43:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 rquivo total.pdf: 1353702 bytes, checksum: 83db724c3c959a4e1d35f4040336484d (MD5) Previous issue date: 2016-11-28 / Most organisms have circadian rhythms with a periodicity of 24-hour that are generated by an endogenous mechanism, the molecular clock, which has the ability to synchronize biological functions with environmental signals. This mechanism has fundamental importance in the homeostasis of the tissues that are under its influence. Among the genes of the molecular clock machinery, the clock and bmal are positive regulators of clock mechanism and they present sigmoid expression profile in the skeletal muscle in zebrafish (Danio rerio). CLOCK and BMAL participate on the activation of the myogenic regulatory factors (MRFs - myoD, myog, myf5 and myf6), which are important in the development and differentiation of muscle cells. Despite this knowledge, the physiological importance of circadian rhythm in skeletal muscle of fish is not known. Therefore, the objective of the present study was to produce a zebrafish transgenic lineage that expresses bmal1a constitutively in the skeletal muscle to investigate the role of the molecular clock in the muscle. The transfer rate of the transgene to offspring, effect of transgenesis in the survival and fish growth, and expression of the bmal1a, clock1a and MRFs were investigated. The founding transgenic population (F0) was obtained after microinjection, and positive larvae were observed as specimens which presented green fluorescent heart. F1 was obtained from natural crossings between F0 and NT fish. Likewise, F2 was obtained from F1. F2 transgenic and NT were used in this study. The transgenic lineage was successfully generated with 50% transmission from the transgene to the offspring following a Mendelian model. The analysis of gene expression was made by qPCR. The survival (41,4±0% F2 and 44,3±6% NT) and growth (3.7±0.1 cm F2 and 3.8±0.2 cm NT) of F2 were not statistically different from NT fish. Among the genes, clock1a and myog presented statistically significant differences between the lineages with circadian profile in NT fish, suggesting that myog may be a clock controlled genes. The other genes (bmal1a, myf5, myf6, and myoD) presented constitutive expression. In general, it can be verified that the constitutive expression of bmal1a did not present change in the expression of the molecular clock, not affecting the homeostasis of the skeletal muscle, survival and growth. / A maioria dos organismos apresentam ritmos circadianos em torno de um período de 24 horas que são gerados por um mecanismo endógeno, o relógio molecular, que tem a capacidade de sincronizar-se com sinais ambientais. Este mecanismo tem fundamental importância na homeostase dos tecidos que estão sob sua influência. Dentre os genes que compõem a maquinaria do relógio molecular os genes clock e bmal são os reguladores positivos do mecanismo desse relógio e apresentam expressão com perfil sigmoide em tecido como o músculo do peixe-zebra (Danio rerio), participando da ativação de alguns fatores regulatórios miogênicos (MRFs – myoD, myog, myf5 e myf6), os quais possuem importância para o desenvolvimento e diferenciação do músculo. Apesar deste conhecimento, não se sabe a importância fisiológica do ritmo de expressão circadiana no músculo esquelético de peixes. Neste sentido, o objetivo desse estudo foi investigar a taxa de transferência do transgene para a prole; se a transgenia para o gene bmal1a no músculo esquelético interferiu na sobrevivência e crescimento dos peixes; e avaliar se a expressão dos genes bmal1a, clock1a e MRFs apresentaram diferenças na linhagem transgênica comparada à linhagem não-transgênica (NT). Os fundadores (F0) foram obtidos após a microinjeção do plasmídeo e as larvas positivas foram observadas com coração verde fluorescente. A F1 foi obtida a partir de cruzamentos entre peixes F0 e NT. Da mesma forma, F2 foi obtida a partir da F1, os quais foram utilizados no presente estudo. A análise da expressão gênica das linhagens aos 11 meses de idade foi realizada utilizando a técnica qPCR. A linhagem transgênica foi gerada com sucesso, transmitindo o transgene para a prole seguindo a herança mendeliana. A sobrevivência e crescimento da prole F2 não apresentaram diferenças entre as linhagens, sendo 41,4±0% para a linhagem transgênica e 44,3±6% NT até 30 dpf e 3.7±0.1 cm transgênicos e 3.8±0.2 cm para NT aos 11 meses de idade, respectivamente. Dentre os genes, o clock1a e o myog apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre as linhagens com perfil circadiano em peixes NT, sugerindo que myog seja um gene controlado pelo relógio. Os demais genes apresentaram expressão constitutiva. De um modo geral, pode-se verificar que a expressão constitutiva do bmal1a não apresentou alteração na expressão do relógio molecular, desta forma, não afetou a homeostasia do organismo, a sobrevivência das larvas, bem como não afetou o crescimento.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-01-16T17:02:58Z No. of bitstreams: 1 ValciclenioValerioPereiraDaCostaMacedo_DISSERT.pdf: 1459179 bytes, checksum: 91a7f197fc56e2506c46b69660d690cc (MD5) / Approved for entry into archive by Elisangela Moura (lilaalves@gmail.com) on 2017-01-16T17:08:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ValciclenioValerioPereiraDaCostaMacedo_DISSERT.pdf: 1459179 bytes, checksum: 91a7f197fc56e2506c46b69660d690cc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-16T17:08:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ValciclenioValerioPereiraDaCostaMacedo_DISSERT.pdf: 1459179 bytes, checksum: 91a7f197fc56e2506c46b69660d690cc (MD5) Previous issue date: 2014-06-10 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Ritmos circadianos influenciam a vida dos organismos e ocorrem a n?vel celular, fisiol?gico e comportamental. O processo mnem?nico onde a coincid?ncia da fase circadiana influencia o processo de evoca??o ? conhecido como Estampa Temporal O objetivo do presente estudo foi investigar se o fen?meno de estampa temporal pode ser generalizado para os diversos tipos de mem?ria. Para isto, investigamos a exist?ncia de estampa temporal na mem?ria de habitua??o ao campo aberto (CA), de reconhecimento de objeto (RO), de reconhecimento de objeto no espa?o (ROE) e na esquiva passiva (EP) em ratos Wistar. Foram utilizados 30 machos com 4 meses de idade, divididos em 5 grupos com 6 animais cada. Todos os grupos passam por duas exposi??es ao CA (sess?o 1 e sess?o 2), duas ao RO (treino e teste), duas ao ROE (treino e teste) e duas na esquiva passiva (treino e teste) em hor?rios coincidentes (G1 ZT14-14, G2 ZT22-22, G5 ZT14-14 horas; ZT0 indica o in?cio da fase de claro e ZT12, o in?cio do escuro) e em hor?rios n?o coincidentes (G4 ZT14-22, G5 ZT22-14). Para a an?lise da habitua??o ao Campo aberto, registramos o deslocamento (n? de quadrantes percorridos) nas duas sess?es. Adicionalmente, utilizamos um ?ndice de habitua??o (raz?o entre o deslocamento na sess?o 2 e o deslocamento na sess?o 1). Para o Reconhecimento de objeto, registramos o tempo de explora??o dos objetos no treino (objetos id?nticos) e no teste (objeto familiar e objeto novo), e utilizamos o ?ndice de reconhecimento (porcentagem do tempo de explora??o de um dado objeto em rela??o ao tempo total de explora??o dos dois objetos), o mesmo procedimento foi utilizado para o Reconhecimento de objeto no espa?o. Para a esquiva passiva foi medido a lat?ncia para descer da plataforma (tempo em segundos para descer da plataforma) como medida de mem?ria. Usamos o teste T de student pareado para compara??es dentro dos grupos e ANOVA para compara??es entre os grupos com post hoc de Tukey, posteriormente n?o encontrando nenhuma diferen?a entre os grupos coincid?ncia ou n?o coincid?ncia, fizemos a uni?o dos dados afim de criar dois grandes grupos (HC e HNC), para essa an?lise utizamos o teste T para amostras independentes. Para a esquiva passiva foi utilizado o teste de Kruskal-wallis para an?lise entre os grupos com post hoc de Mann-Whitney. Os resultados apontam que na tarefa de habitua??o os grupos HC apresentaram uma habitua??o significativa, enquanto n?o observamos diferen?as para os grupos HNC. Foi poss?vel observar no reconhecimento de objeto, que os animais do grupo hor?rio coincidente exploraram mais o objeto novo, quando comparado com o antigo, com exce??o do grupo 3. J? o grupo hor?rio n?o coincidente exploraram os objetos da mesma forma. No ROE n?o foi poss?vel observar nenhum resultado significativo nos grupos, com exce??o do grupo 3. J? na esquiva passiva, os grupos HC (G1 ZT14-14, G2 ZT22-22) e um do HNC (G4 ZT14-22) apresentaram aumento significativo na lat?ncia para descer da plataforma durante o teste, independente da coincid?ncia das fases circadianas ou n?o. Estudos pr?vios tem mostrado que a estampa temporal ? observada em tarefas comportamentais com condicionamento de lugar e esquiva. Nossos resultados mostram que a estampa temporal ? um fen?meno que ocorre tamb?m na habitua??o e reconhecimento de objeto. ? poss?vel que esse fen?meno seja generaliz?vel para o aprendizado e a recupera??o de informa??es. / Ritmos circadianos influenciam a vida dos organismos e ocorrem a n?vel celular, fisiol?gico e comportamental. O processo mnem?nico onde a coincid?ncia da fase circadiana influencia o processo de evoca??o ? conhecido como Estampa Temporal O objetivo do presente estudo foi investigar se o fen?meno de estampa temporal pode ser generalizado para os diversos tipos de mem?ria. Para isto, investigamos a exist?ncia de estampa temporal na mem?ria de habitua??o ao campo aberto (CA), de reconhecimento de objeto (RO), de reconhecimento de objeto no espa?o (ROE) e na esquiva passiva (EP) em ratos Wistar. Foram utilizados 30 machos com 4 meses de idade, divididos em 5 grupos com 6 animais cada. Todos os grupos passam por duas exposi??es ao CA (sess?o 1 e sess?o 2), duas ao RO (treino e teste), duas ao ROE (treino e teste) e duas na esquiva passiva (treino e teste) em hor?rios coincidentes (G1 ZT14-14, G2 ZT22-22, G5 ZT14-14 horas; ZT0 indica o in?cio da fase de claro e ZT12, o in?cio do escuro) e em hor?rios n?o coincidentes (G4 ZT14-22, G5 ZT22-14). Para a an?lise da habitua??o ao Campo aberto, registramos o deslocamento (n? de quadrantes percorridos) nas duas sess?es. Adicionalmente, utilizamos um ?ndice de habitua??o (raz?o entre o deslocamento na sess?o 2 e o deslocamento na sess?o 1). Para o Reconhecimento de objeto, registramos o tempo de explora??o dos objetos no treino (objetos id?nticos) e no teste (objeto familiar e objeto novo), e utilizamos o ?ndice de reconhecimento (porcentagem do tempo de explora??o de um dado objeto em rela??o ao tempo total de explora??o dos dois objetos), o mesmo procedimento foi utilizado para o Reconhecimento de objeto no espa?o. Para a esquiva passiva foi medido a lat?ncia para descer da plataforma (tempo em segundos para descer da plataforma) como medida de mem?ria. Usamos o teste T de student pareado para compara??es dentro dos grupos e ANOVA para compara??es entre os grupos com post hoc de Tukey, posteriormente n?o encontrando nenhuma diferen?a entre os grupos coincid?ncia ou n?o coincid?ncia, fizemos a uni?o dos dados afim de criar dois grandes grupos (HC e HNC), para essa an?lise utizamos o teste T para amostras independentes. Para a esquiva passiva foi utilizado o teste de Kruskal-wallis para an?lise entre os grupos com post hoc de Mann-Whitney. Os resultados apontam que na tarefa de habitua??o os grupos HC apresentaram uma habitua??o significativa, enquanto n?o observamos diferen?as para os grupos HNC. Foi poss?vel observar no reconhecimento de objeto, que os animais do grupo hor?rio coincidente exploraram mais o objeto novo, quando comparado com o antigo, com exce??o do grupo 3. J? o grupo hor?rio n?o coincidente exploraram os objetos da mesma forma. No ROE n?o foi poss?vel observar nenhum resultado significativo nos grupos, com exce??o do grupo 3. J? na esquiva passiva, os grupos HC (G1 ZT14-14, G2 ZT22-22) e um do HNC (G4 ZT14-22) apresentaram aumento significativo na lat?ncia para descer da plataforma durante o teste, independente da coincid?ncia das fases circadianas ou n?o. Estudos pr?vios tem mostrado que a estampa temporal ? observada em tarefas comportamentais com condicionamento de lugar e esquiva. Nossos resultados mostram que a estampa temporal ? um fen?meno que ocorre tamb?m na habitua??o e reconhecimento de objeto. ? poss?vel que esse fen?meno seja generaliz?vel para o aprendizado e a recupera??o de informa??es.

O presente estudo listou e analisou a composição e a estrutura da comunidade de saturnídeos atraídos por luz da Estação Biológica de Boraceia (EBB), Salesóplis, São Paulo, Brasil. A EBB pertence ao Museu de Zoologia da Universidade de São Paulo (MZUSP) e compreende uma área de 96 ha, por sua vez localizada dentro do maior remanescente brasileiro de Mata Atlântica da atualidade. A fauna de Saturniidae foi levantada através de exemplares da coleção de Lepidoptera do MZUSP, sendo estes dados complementados com 13 meses de coletas recentes, entre 2012 e 2013, quando foram realizadas coletas noturnas de 12 horas, por quatro noites em cada mês. Adicionalmente, foi produzida uma lista de 114 espécies de Saturniidae coletados no bioma Mata Atlântica, para muitas das quais foram gerados registros fotográficos in situ e de exemplares montados. Os dados oriundos deste levantamento foram comparados com outros estudos sobre Saturniidae realizados no Brasil e demonstraram número elevado de espécies para EBB (119 espécies) quando comparado aos dados disponíveis de outros levantamentos, como os de Saturniidae do Rio Grande do Sul, do Paraná e do bioma (ou ecótono) Cerrado. Os dados das coletas recentes (2012-2013) foram comparados com a assembleia destes lepidópteros amostrada em 25 meses consecutivos durante os anos de 1948 a 1950. Esta comparação demonstrou que a riqueza e a uniformidade das espécies registradas recentemente (2012-2013) é significativamente próxima daquela registrada no período histórico (1948-1950). Alguns exemplares representaram novos registros de espécies para EBB, e algumas espécies foram coletadas exclusivamente em algum momento de todo o período histórico. A área de coleta demonstrou grande densidade de espécies do gênero Hylesia Hübner, 1920 com pelo menos 15 espécies (sendo destas 3 morfoespécies) coletadas em 1.158 exemplares. Estes resultados asseguram a importância do remanescente de Mata Atlântica da Serra do Mar para manutenção de espécies de Saturniidae e ainda, demonstram a significância da EBB para estudos faunísticos de insetos da Mata Atlântica. Algumas avaliações sobre as distribuições sazonal e circadiana dos exemplares coletados em 2012-2013 apontaram padrões que poderão ser utilizados para testar hipóteses de comportamento e biologia das espécies. As espécies apresentaram tanto distribuição restrita ao longo do ano, quanto foram mais amplamente distribuídas. Da mesma forma algumas espécies apresentaram altos picos de abundâncias em períodos restritos da noite, enquanto outras ocorreram em distintos horários. A avaliação da alternância de espécies ao longo do ano e ao longo da noite indicou que há alta alternância de espécies para ambos os ciclos, ressaltando a importância de um levantamento que se ocupe com coletas durante todos os meses do ano e durante todo o período noturno. Demonstrou ainda, que a flutuação de abundância das espécies agrupadas em cada uma das cinco subfamílias representadas nas amostras, seguem padrões tanto semelhantes, quanto contrastantes. / This study evaluated and summarized the composition and structure of the saturniid community attracted to light trapping in a remnant of Atlantic Rainforest of the Boraceia Biological Station (EBB), Salesópolis, São Paulo, Brazil. The EBB belongs to Zoological Museum of University of São Paulo (MZUSP) and comprises a 96 ha area located inside the largest Brazilina remananent of the Atlantica Rain Forest. The Saturniidae fauna of this reserve was inventoried based on the specimens deposited at the MZUSP, and it was complemented with 13 months of recently field samplings between 2012 and 2013. Complementary field sampling was based on nocturnal collections of 12 hours along four nights on each of the 13 months. As a result we listed 114 species of the family Saturniidae. Many species were photographed in situ, for illustration of the dorsal and ventral habitus of each species we used the pinned specimens of the collection. Comparisons with other inventories of Saturniidae conducted in different Brazilian localities were performed and demonstrated an elevated number of species in EBB when compared to the data available from other inverntories, from Rio Grande do Sul state, Paraná state and the Savana bioma. Recent field samplings (2012-2013) were compared with the assemblage of saturniids from 25 consecutive months between 1948 and 1950. This comparison demonstrated that the richness and the uniformity of the species recentelly registered (2012-2013) is similar to that from the historical period (1948-1950). Few specimens constituted new record for EBB and other few were sampled exclusively on the whole range of the historical period. The studied area indicated high density of species of Hyleisa Hübner, 1920 with at least 15 species (with three morphospecies) collected, distributed in 1.158 specimens. The results stress the importance of the Serra do Mar Atlatic forest remanent to the conservation of the species of Saturniidae and yet, demonstrate the importance of EBB for the study of insects from the Atlantic Rain Forest. The analysis related to the seasonality and circadian pattern of the recently collected specimens (2012-2013) can be further used to test hypothesis of behavior and biology of the species. The abundance of species showed distinct fluctuation along the year, while some had concentrated distribution, others were broadly sampled along several months. Similarly, some species presented high pics of abundance on restricted periods during the night, while other speces were sampled in several distinct periods. The evaluation of the interchange of species during the year and during the night indicated hight interchanging of species for both cicles, sazonal and cyrcadina, stressing the importance of inventories of Saturniidae with effort along the entire year and along the hole night period. The same evaluation also demonstrated that the fluctuation of the abundance of species grouped by subfamilies follow similar and contrasting patters depending on the subfamilies that are being compaired.

O ciclo circadiano é um sistema adaptativo e vantajoso que permite a antecipação dos organismos e sincronização de suas atividades fisiológicas frente às variações ambientais que ocorrem ao longo do dia. Seu funcionamento molecular acontece pela geração dos ritmos circadianos, os quais surgem a partir da expressão cíclica dos genes do relógio em um feedback autoregulatório. Em insetos, os ritmos circadianos apresentam função importante em coordenar o timing do desenvolvimento e o comportamento. Nos últimos anos, estudos desvendaram que o relógio molecular de insetos sociais apresenta um funcionamento mais similar ao relógio de mamíferos do que com outros insetos como Drosophila melanogaster. Em especial, abelhas sociais têm sido ótimos modelos para investigar como os ritmos circadianos são modulados de acordo com as interações sociais entre os indivíduos, a plasticidade comportamental e a divisão social do trabalho entre as operárias. Operárias jovens (nutrizes) cuidam da cria no interior da colônia e geralmente apresentam uma atividade arrítimica ao longo de 24 horas, enquanto as abelhas mais velhas (forrageiras) são rítmicas e desenvolvem atividades complexas no ambiente externo. Nesse trabalho, nós caracterizamos os perfis de expressão dos genes do relógio period (per), cryptochrome mammalian-like (cry-m), clock (clk), cycle (cyc), timeout 2 (tim2), par domain protein 1 (pdp1), vrille (vri) e clockwork orange (cwo) durante todo o desenvolvimento de abelhas operárias de Apis mellifera. Verificamos que os genes do relógio são expressos antes mesmo da formação do sistema nervoso central no embrião e que seus transcritos podem ser herdados maternalmente. No desenvolvimento de larvas e pupas, revelamos que estes genes são diferencialmente expressos entre as fases investigadas e, com exceção dos genes cwo e tim2, todos respondem ao tratamento com o Hormônio Juvenil (HJ) na fase de pupa de olho branco. A resposta positiva dos genes clk, cyc e pdp1 frente ao tratamento hormonal pode estar relacionada com o envolvimento destes nas vias que respondem à sinalização do HJ, interagindo com os genes Kruppel (Kr-h1) e Methoprene-tolerant (MET). No desenvolvimento adulto, vimos que os genes per e cry-m são potenciais marcadores da plasticidade comportamental e divisão social do trabalho. Em um experimento usando single-cohort colony, estes genes apresentam níveis transcricionais que não oscilam em cabeças de operárias jovens (3 e 7 dias) ao longo de 24 horas, comparado aos níveis de expressão que oscilam de forma robusta em abelhas mais velhas (15 e 25 dias). Ainda, reconstruímos redes de interação proteína-proteína e miRNA-mRNA onde foram identificadas potenciais moléculas que atuam modulando os genes do relógio em nível póstranscricional e traducional. Dentre elas, validamos as interações entre os miRNA-34 e seus sítios de ligação que estão presentes nas 3`UTRS dos genes cyc e cwo, através do ensaio por luciferase, revelando que este miRNA é um regulador negativo da expressão desses genes. Pela primeira vez, realizamos uma análise ampla dos genes do relógio em um inseto social, além de identificar novas moléculas que podem atuar modulando os ritmos circadianos. Nosso trabalho demonstra a importâcia das abelhas sociais como modelos ideais para desvendar os mecanismos moleculares que regem os ritmos circadianos não só em abelhas, como também em outros organismos, inclusive mamíferos. / The circadian clock is an advantageous adaptive system that enables organisms to anticipate and syncronize their biological activities during the daily environmental changes. The circadian clock acts through the ontogeny of circadian rhythms, which are generated by the cyclic expression of the clock genes in an autregulatory feedback loop. In insects, the circadian rhythms have important roles in the coordination of the developmental timing and behavior, interacting with the endocrine system. In the last years, researchers revealed that the molecular clock of social insects is more similar to mammals than to insects. In particular, the social honeybee is an excellent model to investigate how the circadian rhythms are modulated accordingly to the social context, behavioral plasticity, and taskrelated activities. While young bees (nurses) work arrhythmically around the clock inside the colony in brood-care activities, old bees (foragers) need to be strongly rhythmic to develop complex tasks. In this work, we characterized the expression patterns of the clock genes period (per), cryptochrome mammalian-like (cry-m), clock (clk), cycle (cyc), timeout 2 (tim2), par domain protein 1 (pdp1), vrille (vri) e clockwork orange (cwo) in the entire development of Apis mellifera. Our results revealed that the clock genes are expressed before the formation of the central nervous system in embryos and that their transcripts might be inherited maternally. The clock genes are diferentially modulated during the larval and pupal development and, except for tim2 and cwo, all of them respond to the treatment with Juvenile Hormone (JH) in white-eyed pupae. The positive response to JH by clk, cyc and pdp1 might be related to the involvement of these genes on the pathways of the JH signaling, interacting with Kruppel (Kr-h1) and Methoprene-tolerant (MET) genes. In the adult development, the clock genes per and cry-m are potential molecular markers of the behavioral plasticity and division of labor in a single-cohort colony, once they did not exhibit transcriptional oscillations in heads of young bees (3 and 7 days-old) during 24h, compared to the robust transcriptional oscillation in old bees (15 and 25 days-old). Additionally, we reconstructed protein-protein and miRNA-mRNA interaction networks and identified putative molecules involved in the post-transcriptional and translational regulation of the clock genes. Among those molecules, we validated interactions between the miR-34 and its binding sites in the 3`UTR of cyc and cwo by luciferase assay, showing that this miRNA is a negative regulator of both clock genes. We showed for the first time a broad analysis of the circadian clock elements in a social insect, and also identified news molecules with potential to act as modulators of the circadian rhythms. This work expands the knowledge about the biological roles of the circadian clock in honeybees. Our work also contributes to highlight the importance of honeybees as an ideal model to uncover the molecular mechanisms that govern the circadian rhythms, not only in bees, but in other organisms, including mammals.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Fundo de Auxílio aos Docentes e Alunos (FADA) / Objetivo: Avaliar a fadiga circadiana na Sequela de Poliomielite (SP) e na Síndrome Pós-Poliomielite (SPP) e compará-los aos parâmetros actigráficos e polissonográficos bem como, à fraqueza muscular. Método: trinta e nove (39) pacientes realizaram avaliação do questionário do pré-sono e polissonografia, trinta e três (33) realizaram actigrafia e os dados destes exames foram correlacionados com as escalas de fadiga de Chalder, respondida por trinta e oito (38) pacientes e Piper, respondida por trinta (30) pacientes, nos 3 períodos do dia (enviadas via correios). Resultados: o presente estudo, permitiu-nos identificar que a qualidade do sono está comprometida nas duas populações, tanto SP quanto SPP, sendo de maior gravidade a situação enfrentada pelo grupo SPP. A fadiga de fato tem relação com a hora do dia, apresentando-se circadianamente na população de SPP. Conclusão: a fadiga assume caráter circadiano bem definido na população de SPP, de acordo com a avaliação da escala de Piper. A fadiga apresenta relação com parâmetros do sono, especialmente quanto às variáveis índice de apneia e hipopneia, movimento de pernas e arquitetura do sono. A intensidade da fadiga é maior nos pacientes com SPP. A escala de fadiga de Piper mostrou-se bastante sensível e capaz de mensurar a fadiga circadiana na SPP. A intensidade da fadiga está fortemente relacionada ao grau de fraqueza muscular. / Objective: To evaluate the circadian fatigue in sequelae of poliomyelitis (PS) and Post-Polio Syndrome (PPS) and compare them with actigraphy and polysomnography parameters as well as muscular weakness. Method: Thirty-nine (39) underwent evaluation of the pre-sleep questionnaire and polysomnography, thirty-three (33) underwent actigraphy and data from these examinations were correlated with the scales of the Chalder fatigue, answered by thirty-eight (38) patients and Piper, answered by thirty (30) patients in three periods of the day (sent by mail). Results: This study allowed us to identify the quality of sleep is affected in two populations, both PS and PPS, with increased severity of the situation faced by the PPS group. Fatigue in fact is related to the time of the day, appearing in the population of circadian PPS. Conclusion: The circadian fatigue character takes on well-defined population of PPS, according to the assessment of the scale of Piper. The fatigue is correlated with sleep parameters, especially considering the variables of apnea and hypopnea index, movement of legs and sleep architecture. The intensity of fatigue is greater in patients with PPS. The Piper fatigue scale proved to be very sensitive and can measure the circadian fatigue in PPS. The intensity of fatigue is strongly correlated with the degree of muscular weakness. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

O presente estudo listou e analisou a composição e a estrutura da comunidade de saturnídeos atraídos por luz da Estação Biológica de Boraceia (EBB), Salesóplis, São Paulo, Brasil. A EBB pertence ao Museu de Zoologia da Universidade de São Paulo (MZUSP) e compreende uma área de 96 ha, por sua vez localizada dentro do maior remanescente brasileiro de Mata Atlântica da atualidade. A fauna de Saturniidae foi levantada através de exemplares da coleção de Lepidoptera do MZUSP, sendo estes dados complementados com 13 meses de coletas recentes, entre 2012 e 2013, quando foram realizadas coletas noturnas de 12 horas, por quatro noites em cada mês. Adicionalmente, foi produzida uma lista de 114 espécies de Saturniidae coletados no bioma Mata Atlântica, para muitas das quais foram gerados registros fotográficos in situ e de exemplares montados. Os dados oriundos deste levantamento foram comparados com outros estudos sobre Saturniidae realizados no Brasil e demonstraram número elevado de espécies para EBB (119 espécies) quando comparado aos dados disponíveis de outros levantamentos, como os de Saturniidae do Rio Grande do Sul, do Paraná e do bioma (ou ecótono) Cerrado. Os dados das coletas recentes (2012-2013) foram comparados com a assembleia destes lepidópteros amostrada em 25 meses consecutivos durante os anos de 1948 a 1950. Esta comparação demonstrou que a riqueza e a uniformidade das espécies registradas recentemente (2012-2013) é significativamente próxima daquela registrada no período histórico (1948-1950). Alguns exemplares representaram novos registros de espécies para EBB, e algumas espécies foram coletadas exclusivamente em algum momento de todo o período histórico. A área de coleta demonstrou grande densidade de espécies do gênero Hylesia Hübner, 1920 com pelo menos 15 espécies (sendo destas 3 morfoespécies) coletadas em 1.158 exemplares. Estes resultados asseguram a importância do remanescente de Mata Atlântica da Serra do Mar para manutenção de espécies de Saturniidae e ainda, demonstram a significância da EBB para estudos faunísticos de insetos da Mata Atlântica. Algumas avaliações sobre as distribuições sazonal e circadiana dos exemplares coletados em 2012-2013 apontaram padrões que poderão ser utilizados para testar hipóteses de comportamento e biologia das espécies. As espécies apresentaram tanto distribuição restrita ao longo do ano, quanto foram mais amplamente distribuídas. Da mesma forma algumas espécies apresentaram altos picos de abundâncias em períodos restritos da noite, enquanto outras ocorreram em distintos horários. A avaliação da alternância de espécies ao longo do ano e ao longo da noite indicou que há alta alternância de espécies para ambos os ciclos, ressaltando a importância de um levantamento que se ocupe com coletas durante todos os meses do ano e durante todo o período noturno. Demonstrou ainda, que a flutuação de abundância das espécies agrupadas em cada uma das cinco subfamílias representadas nas amostras, seguem padrões tanto semelhantes, quanto contrastantes. / This study evaluated and summarized the composition and structure of the saturniid community attracted to light trapping in a remnant of Atlantic Rainforest of the Boraceia Biological Station (EBB), Salesópolis, São Paulo, Brazil. The EBB belongs to Zoological Museum of University of São Paulo (MZUSP) and comprises a 96 ha area located inside the largest Brazilina remananent of the Atlantica Rain Forest. The Saturniidae fauna of this reserve was inventoried based on the specimens deposited at the MZUSP, and it was complemented with 13 months of recently field samplings between 2012 and 2013. Complementary field sampling was based on nocturnal collections of 12 hours along four nights on each of the 13 months. As a result we listed 114 species of the family Saturniidae. Many species were photographed in situ, for illustration of the dorsal and ventral habitus of each species we used the pinned specimens of the collection. Comparisons with other inventories of Saturniidae conducted in different Brazilian localities were performed and demonstrated an elevated number of species in EBB when compared to the data available from other inverntories, from Rio Grande do Sul state, Paraná state and the Savana bioma. Recent field samplings (2012-2013) were compared with the assemblage of saturniids from 25 consecutive months between 1948 and 1950. This comparison demonstrated that the richness and the uniformity of the species recentelly registered (2012-2013) is similar to that from the historical period (1948-1950). Few specimens constituted new record for EBB and other few were sampled exclusively on the whole range of the historical period. The studied area indicated high density of species of Hyleisa Hübner, 1920 with at least 15 species (with three morphospecies) collected, distributed in 1.158 specimens. The results stress the importance of the Serra do Mar Atlatic forest remanent to the conservation of the species of Saturniidae and yet, demonstrate the importance of EBB for the study of insects from the Atlantic Rain Forest. The analysis related to the seasonality and circadian pattern of the recently collected specimens (2012-2013) can be further used to test hypothesis of behavior and biology of the species. The abundance of species showed distinct fluctuation along the year, while some had concentrated distribution, others were broadly sampled along several months. Similarly, some species presented high pics of abundance on restricted periods during the night, while other speces were sampled in several distinct periods. The evaluation of the interchange of species during the year and during the night indicated hight interchanging of species for both cicles, sazonal and cyrcadina, stressing the importance of inventories of Saturniidae with effort along the entire year and along the hole night period. The same evaluation also demonstrated that the fluctuation of the abundance of species grouped by subfamilies follow similar and contrasting patters depending on the subfamilies that are being compaired.

O complexo de espécies crípticas de Anastrepha fraterculus compreende oito morfotipos dos quais três ocorrem no Brasil. Anastrepha sp.1 aff. fraterculus é o morfotipo Brasil-1 e é uma espécie de ampla distribuição no planalto sudeste/sul do Brasil e no norte da Argentina. O comportamento reprodutivo dessa espécie é complexo, envolvendo uma série de movimentos desempenhados pelos machos para atrair as fêmeas para acasalamento, e ocorre, preferencialmente, nas primeiras horas do dia. Dois genes, period e fruitless, entre outros, são conhecidos por participar do controle do comportamento reprodutivo de vários organismos, incluindo algumas espécies de moscas-das-frutas. O presente trabalho buscou informações sobre a atuação desses genes no comportamento reprodutivo de A. sp.1, utilizando o silenciamento transitório desses genes pela metodologia de RNA interferente. Foram, primeiramente, desenhados iniciadores específicos para amplificar fragmentos do DNA genômico desses genes, sendo demonstrado que apresentaram uma similaridade entre 97 a 99% com os genes equivalentes de outras espécies de Anastrepha. A seguir, após padronização e adaptação de protocolos, foram sintetizados os RNA de dupla-fita (dsRNA) dos dois genes, que foram, então, utilizados nos experimentos de silenciamento. Análises, para verificação se os genes foram realmente silenciados foram feitas a partir a injeção dos dsRNAfru e/ou dsRNAper no abdomên de machos sexualmente maduros, tendo sido demonstrado que os genes estavam silenciados ao máximo, sete a oito dias após a injeção. Interferências no comportamento de machos sexualmente maduros, com um ou outro gene silenciado, foram avaliados por testes relacionados com dois parâmetros do comportamento reprodutivo: alterações nas atividades gerais (qualquer tipo de movimentação dos insetos) dos machos durante o ciclo circadiano (dia/noite) e mais especificamente, a atividade relacionada ao comportamento reprodutivo. Ao injetar dsRNAfru em machos adultos de A. sp.1 foi observado que não houve alteração significativa nas suas atividades gerais. Porém, foi observado que houve uma diminuição significativa no número de machos que realizavam atividades reprodutivas, sugerindo que o silenciamento de fruitless no macho adulto altera o funcionamento normal do comportamento sexual masculino. Em contrapartida, ao injetar dsRNAper em machos adultos de A. sp.1 não foi observada alteração significativa tanto nas suas atividades reprodutivas quanto nas atividades gerais. O silenciamento dos genes aparentemente não afeta a produção de espermatozóides. Apesar de controverso, esses dados corroboram com o que foi observado em D. melanogaster, em que o mutante nulo per04 não apresenta alteração significativa nos seus comportamentos em relação aos machos selavagens em um regime cíclico Dia/Noite. Dessa forma, análises adicionais serão necessárias com o objetivo de elucidar as implicações desses dois genes no comportamento locomotor e reprodutivo de Anastrepha sp.1 aff. fraterculus. / The complex of cryptic species Anastrepha fraterculus comprises eight morphotypes three of which occur in Brazil. Anastrepha sp.1 aff. fraterculus correspond to the morphotype Brazil-1 and is a species of wide distribution in the southeast/south plateau of Brazil and in north of Argentina. The reproductive behavior of this species is complex, involving a series of movements performed by males to attract females for mating, and occurs in the early hours of the day. Two genes, period and fruitless, among others, are known to participate in the control of reproductive behavior of various organisms, including some species of fruit flies. The present work aimed to get information about the presumable role of these genes in the reproductive behavior of A. sp.1, using transient silencing of these genes by interfering RNA methodology. Specific primers were first designed to amplify fragments of the genomic DNA of these genes, showing they have a similarity between 97 to 99% with the equivalent genes of other Anastrepha species. After standardization and adaptation of protocols, the double-stranded RNA (dsRNA) of the two genes were synthesized, and used in the silencing experiments. Tests to verify that the genes were actually silenced, were made after injection of the dsRNAfru and/or dsRNAper into the abdomens of sexually mature males. These tests showed that the genes were silenced to the maximum, seven to eight days after the injection. Interferences in the behavior of sexually mature males with one or other silenced gene were evaluated by tests related to two parameters of reproductive behavior: changes in the general activities (any type of movement of insects) of males during the circadian cycle (day/night) and more specifically, activity related to reproductive behavior. Injection of dsRNAfru in adult males of A. sp.1 showed that they did not cause significant alterations in general activities, but it was observed that they cause a significant decrease in the number of males that performed reproductive activities, suggesting that silencing of fruitless. alters the normal functioning of male sexual behavior. In contrast, when injecting dsRNAper. in adult males of A. sp.1, no significant alteration was observed neither in their reproductive activities nor in their general activities. Moreover, silencing of the genes seems not to affect the production of spermatozoa. Although controversial, the data are in line with observations in D. melanogaster, in which the null mutant per04 did not present significant alterations in behaviors relatives to the control males in a Day/Night cyclic regime. Thus, additional analyzes will be needed to elucidate the participation of the two genes in the coordination of behaviors in Anastrepha sp.1 aff fraterculus.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-08-25T14:53:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DesempenhoGuppyPoecilia.pdf: 4012755 bytes, checksum: e38444c9cd0f96e294f8f50246678089 (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-08-28T17:33:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DesempenhoGuppyPoecilia.pdf: 4012755 bytes, checksum: e38444c9cd0f96e294f8f50246678089 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-28T17:33:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DesempenhoGuppyPoecilia.pdf: 4012755 bytes, checksum: e38444c9cd0f96e294f8f50246678089 (MD5) Previous issue date: 2016-09-23 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O uso de modelos animais em pesquisa experimental nas últimas décadas tem se mostrado mais diversificado do que o modelo clássico através do uso de roedores ou primatas. Isso se dá principalmente pelos avanços nos estudos moleculares, morfológicos e funcionais que revelaram uma grande homologia entre os vertebrados. Nesta perspectiva, o peixe Zebrafish (Danio rerio) tem se mostrado como o animal não-mamífero com maior ascensão como animal de estudo em ciências biológicas nas últimas décadas. Entretanto, outras espécies de peixes também se mostram promissoras como alternativas de uso como modelo animal. Este estudo utilizou o Guppy (Poecilia reticulata) como modelo para pesquisa em comportamento através de diferentes abordagens experimentais. No estudo I, guppies foram expostos e reexpostos em diferentes turnos (manhã, tarde, noite e madrugada) nos testes de campo aberto e preferência claro-escuro. Os resultados encontrados mostram que em ambos os testes, machos e fêmeas apresentam diferenças comportamentais, sendo sensíveis a reexposição, com capacidade de aprendizagem e controle do ciclo circadiano. No estudo II, foi desenvolvido um labirinto em cruz com rampa no qual se verificou a sensibilidade da espécie ao aparato, o perfil de resposta mediante reexposição e o efeito de drogas. Os resultados revelaram sensibilidade ao aparato para uma altura de coluna d’água de 8cm e 5 minutos de sessão e diferenças entre os sexos e aprendizagem por habituação ao longo das reexposições. O estudo farmacológico indica que neste aparato a espécie é sensível a drogas ansiolíticas e ansiogênicas. Ao final, pode-se concluir que o Guppy apresenta comportamento similar e respostas as drogas compatível com os dados descritos para Zebrafish. Tais similaridades reforçam o uso de peixes como uma alternativa ao uso de mamíferos na experimentação animal. / The use of animal models in experimental research in the last decades has shown to be more diversified than the classical model through the use of rodent or primate. This is mainly by advances in molecular, morphological and functional studies that revealed a big homology between the vertebrates. On this perspective, the Zebrafish (Danio rerio) has shown to be the non-mammal animal with biggest ascension as a study model in biological sciences in the latest decades. However, other species of fish also show to be promising as alternatives of use as animal model. This study used Guppy (Poecilia reticulata) as model for the research in behavior through different experimental approaches. In study I, guppies were exposed and re-exposed in different shifts (morning, afternoon, evening and night) in the open field test and light-dark preference. The found results show that in both tests, male and female present behavioral differences, being sensitive to re-exposure, with capacity of learning e controlling of the circadian cycle. In study II, was developed a plus-maze with ramp where it was verified the sensibility of the specie to the apparatus, the profile of response upon re-exposure and the drug effect. The results revealed sensibility to the apparatus with a height of water column at 8 cm and 5 minutes of session and differences between sex and learning by habituation along the re-expositions. The pharmacological study indicates that in this apparatus, the specie is sensitive to anxiolytic and anxiogenic drugs. Finally, we can conclude that Guppy presents similar behavior and drug responses compatible with the data described to the Zebrafish. These similarities reinforce the use of fishes as an alternative to the use of mammals in animal experimentation.

O complexo de espécies crípticas de Anastrepha fraterculus compreende oito morfotipos dos quais três ocorrem no Brasil. Anastrepha sp.1 aff. fraterculus é o morfotipo Brasil-1 e é uma espécie de ampla distribuição no planalto sudeste/sul do Brasil e no norte da Argentina. O comportamento reprodutivo dessa espécie é complexo, envolvendo uma série de movimentos desempenhados pelos machos para atrair as fêmeas para acasalamento, e ocorre, preferencialmente, nas primeiras horas do dia. Dois genes, period e fruitless, entre outros, são conhecidos por participar do controle do comportamento reprodutivo de vários organismos, incluindo algumas espécies de moscas-das-frutas. O presente trabalho buscou informações sobre a atuação desses genes no comportamento reprodutivo de A. sp.1, utilizando o silenciamento transitório desses genes pela metodologia de RNA interferente. Foram, primeiramente, desenhados iniciadores específicos para amplificar fragmentos do DNA genômico desses genes, sendo demonstrado que apresentaram uma similaridade entre 97 a 99% com os genes equivalentes de outras espécies de Anastrepha. A seguir, após padronização e adaptação de protocolos, foram sintetizados os RNA de dupla-fita (dsRNA) dos dois genes, que foram, então, utilizados nos experimentos de silenciamento. Análises, para verificação se os genes foram realmente silenciados foram feitas a partir a injeção dos dsRNAfru e/ou dsRNAper no abdomên de machos sexualmente maduros, tendo sido demonstrado que os genes estavam silenciados ao máximo, sete a oito dias após a injeção. Interferências no comportamento de machos sexualmente maduros, com um ou outro gene silenciado, foram avaliados por testes relacionados com dois parâmetros do comportamento reprodutivo: alterações nas atividades gerais (qualquer tipo de movimentação dos insetos) dos machos durante o ciclo circadiano (dia/noite) e mais especificamente, a atividade relacionada ao comportamento reprodutivo. Ao injetar dsRNAfru em machos adultos de A. sp.1 foi observado que não houve alteração significativa nas suas atividades gerais. Porém, foi observado que houve uma diminuição significativa no número de machos que realizavam atividades reprodutivas, sugerindo que o silenciamento de fruitless no macho adulto altera o funcionamento normal do comportamento sexual masculino. Em contrapartida, ao injetar dsRNAper em machos adultos de A. sp.1 não foi observada alteração significativa tanto nas suas atividades reprodutivas quanto nas atividades gerais. O silenciamento dos genes aparentemente não afeta a produção de espermatozóides. Apesar de controverso, esses dados corroboram com o que foi observado em D. melanogaster, em que o mutante nulo per04 não apresenta alteração significativa nos seus comportamentos em relação aos machos selavagens em um regime cíclico Dia/Noite. Dessa forma, análises adicionais serão necessárias com o objetivo de elucidar as implicações desses dois genes no comportamento locomotor e reprodutivo de Anastrepha sp.1 aff. fraterculus. / The complex of cryptic species Anastrepha fraterculus comprises eight morphotypes three of which occur in Brazil. Anastrepha sp.1 aff. fraterculus correspond to the morphotype Brazil-1 and is a species of wide distribution in the southeast/south plateau of Brazil and in north of Argentina. The reproductive behavior of this species is complex, involving a series of movements performed by males to attract females for mating, and occurs in the early hours of the day. Two genes, period and fruitless, among others, are known to participate in the control of reproductive behavior of various organisms, including some species of fruit flies. The present work aimed to get information about the presumable role of these genes in the reproductive behavior of A. sp.1, using transient silencing of these genes by interfering RNA methodology. Specific primers were first designed to amplify fragments of the genomic DNA of these genes, showing they have a similarity between 97 to 99% with the equivalent genes of other Anastrepha species. After standardization and adaptation of protocols, the double-stranded RNA (dsRNA) of the two genes were synthesized, and used in the silencing experiments. Tests to verify that the genes were actually silenced, were made after injection of the dsRNAfru and/or dsRNAper into the abdomens of sexually mature males. These tests showed that the genes were silenced to the maximum, seven to eight days after the injection. Interferences in the behavior of sexually mature males with one or other silenced gene were evaluated by tests related to two parameters of reproductive behavior: changes in the general activities (any type of movement of insects) of males during the circadian cycle (day/night) and more specifically, activity related to reproductive behavior. Injection of dsRNAfru in adult males of A. sp.1 showed that they did not cause significant alterations in general activities, but it was observed that they cause a significant decrease in the number of males that performed reproductive activities, suggesting that silencing of fruitless. alters the normal functioning of male sexual behavior. In contrast, when injecting dsRNAper. in adult males of A. sp.1, no significant alteration was observed neither in their reproductive activities nor in their general activities. Moreover, silencing of the genes seems not to affect the production of spermatozoa. Although controversial, the data are in line with observations in D. melanogaster, in which the null mutant per04 did not present significant alterations in behaviors relatives to the control males in a Day/Night cyclic regime. Thus, additional analyzes will be needed to elucidate the participation of the two genes in the coordination of behaviors in Anastrepha sp.1 aff fraterculus.