Introduction: Breast cancer still remains the most common malignancy in women and its incidence is slowly increasing. A marked reduction of mortality has been achieved in the last 10 years thanks to modern diagnostic methods, mammary screening, and comprehensive and targeted cancer therapy. Modern diagnostic capabilities not only allow early diagnosis of a primary tumor lesion and precise determination of its biological nature before commencing treatment, but they also enable early diagnosis of local and regional recidives, including diagnosis of metastases in distant organs. In addition to clinical examination, conventional and complementary imaging examinations and tumor markers our objective was to determine the importance and use of growth factors in relation to the overall prognosis. The growth factors physiologically act already during the ontogenetic period when they control cell growth, proliferation, differentiation and apoptotic processes. It is known that they take part in the tumor growth processes which are characterized by autonomous behavior, increased proliferative activity, distinct differentiation activity and reduced apoptosis. Growth factors work as autoregulation factors in the neoplastic process as well as through their paracrine effects mediated by more or less specific receptors....

The aim of this work was the production of two Drosophila growth factor proteins, DS47 and IDGF3. The cDNAs encoding the two proteins were cloned into a baculovirus transfer vector and used for the recombination with bacmid form of baculovirus maintained in Escherichia coli. The recombinant baculoviral DNA was transfected to insect cells. Baculovirus- infected cells produced recombinant His-tagged proteins which were purified from growth media by nickel-agarose affinity chromatography. The function of recombinant proteins was verified by in-vitro growth/survival tests.

O sistema cardiovascular está estrutural e funcionalmente disposto de modo “circular”. Situações de obstrução do fluxo sanguíneo determinam o aparecimento de mecanismos que visam suplantar tais interrupções e manter a circularidade íntegra. À nível molecular, o principal elemento envolvido nestes mecanismos é o Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF). A expressão do VEGF quando há oclusão arterial está bem documentada, faltando elementos com relação à oclusão venosa. Neste estudo objetivamos verificar se a oclusão à nível arterial determina uma expressão do VEGF diferente daquela que ocorre se a oclusão acontecer à nível venoso. Para isso randomizamos dois grupos de ratos de experimentação. Em um grupo realizamos a oclusão da aorta infra-renal e em outro a oclusão da veia cava infra-renal. Posteriormente medimos a expressão do VEGF através da contagem do número de células marcadas imunoistoquimicamente no omento destes ratos. O resultado demonstrou que a expressão do VEGF, quando analisada pelo método proposto foi igual no grupo da oclusão venosa e no grupo da oclusão arterial. / The cardiovascular system is structurally and functionally circular. Situations in which there is obstruction to blood flow trigger mechanisms to bypass these blockages and maintenance the integrity of the circularity. At the molecular level the main factor involved is the Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF). The VEGF expression associated with arterial occlusion is well documented but is lacking evidence when venous occlusion occurs. This study aimed to verify if the expression of VEGF when an occlusion occurs at venous level is the same or different from that caused at the arterial level. Two groups of rats were randomized by infra-renal aortic occlusion or inferior vena cava occlusion. VEGF was measured by counting the immunohistochemistry method marked cells at the omentum level. It was demonstrated that the VEGF expression is the same in the venous group obstruction as the arterial obstruction group.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-30 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Introdução: Diversos fatores podem diminuir a viabilidade do retalho TRAM, dentre eles a nicotina que tem sido responsabilizada pela perda parcial ou total destes retalhos. Objetivo: Avaliar a ação do Fator de Crescimento do Endotélio Vascular na viabilidade do Retalho Musculofasciocutâneo Transverso do Reto do Abdome, em ratos submetidos à nicotina. Métodos: Foram utilizados 60 Ratos Wistar EPM-1, machos adultos, pesando de 230 a 300g, aleatorizados em 4 grupos de 15 animais cada: Grupo Controle composto por animais que foram submetidos ao retalho TRAM; Grupo Nicotina composto por animais que foram submetidos á nicotina e ao retalho TRAM; Grupo VEGF composto por animais submetidos à administração de VEGF plasmidial antes do retalho TRAM; e Grupo Nicotina+VEGF composto por animais que foram submetidos à nicotina, tratados com administração de VEGF e submetidos ao retalho TRAM. Para análise dos resultados foi realizado método de análise da área de necrose e de densidade vascular. Resultados: Houve diferença estatisticamente significativa na comparação entre todos os grupos, com relação às variáveis área de necrose e densidade vascular (p<0,05). Os animais do Grupo VEGF apresentaram a menor área de necrose (4.10%) e a maior densidade vascular (39%) em relação aos outros grupos do estudo. Conclusão: O Fator de Crescimento do Endotélio Vascular aumentou a viabilidade do retalho musculofasciocutâneo transverso do reto do abdome, em ratos submetidos à nicotina. / Introduction: Several factors can reduce the viability of the TRAM flap, among them the nicotine has been made responsible by the loss partial or total of these flaps. Objective: To evaluate the action of the Vascular endothelial Growth Factor in the viability of the Transverse Rectus Abdominis Musculocutaneous, in rats submitted to the nicotine. Methods: Sixty Wistar EPM-1 rats were used, adult males, weighing from 230 to 300g, randomized in 4 groups of 15 animals each: Group Control composed by animals that were submitted to the TRAM flap; Group Nicotine composed by animals that were nicotine exposed and submitted of TRAM flap; Group VEGF composed by animals submitted to the administration of VEGF plasmidial before the TRAM flap; and Group Nicotina+VEGF composed by animals that were exposed to the nicotine, trated with administration of VEGF and submitted to the TRAM flap. For analysis of the results they were done necrosis area and vascular density. Results: There was estatistic significant differentiates in the comparison among all of the groups, regarding the variables necrosis area and vascular density (p <0,05). Conclusion: The Vascular Endothelial Growth Factor increased the viability of the Transverse Rectus Abdominis Musculocutaneous, in rats submitted to the nicotine. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-25. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:40Z : No. of bitstreams: 1 Publico-061.pdf: 1435875 bytes, checksum: 1afa77ce414913258d6fac6e89cdb379 (MD5) / Entre as alterações inerentes ao envelhecimento pode-se observar o surgimento do declínio cognitivo. Contudo, uma vida saudável com a prática de exercícios físicos parece gerar um efeito protetor contra o declínio cognitivo nos idosos. Segundo a literatura, tanto os exercícios aeróbios quanto os resistidos, quando praticados isoladamente, parecem beneficiar a cognição. Contudo, ainda não foi descrito se a combinação de ambas as modalidades acarretaria o mesmo beneficio. O objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos que o treinamento combinado traria para a função cognitiva de idosos saudáveis. Foram selecionados trinta e três idosos saudáveis que foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos: o Controle (N = 17) e o Combinado (N = 16). O grupo controle foi orientado a manter as suas atividades habituais, e o combinado participou de um programa de treinamento composto por exercícios físicos aeróbio e resistido, três vezes por semana, em dias alternados, por um período de seis meses. Os idosos, no início e ao final do protocolo, foram submetidos a avaliações físicas (ergoespirometria e teste de 1 Repetição Máxima - 1RM), cognitivas (por meio de medidas neuropsicológicas e neurofisiológicas), de humor, e de qualidade de vida, e também a análises sangüíneas (Fator de crescimento semelhante à insulina - IGF-1- e viscosidade do sangue). Os resultados demonstraram que nas avaliações físicas, tanto no consumo de oxigênio (p=0,01) quanto na 1RM (p=0,001), o grupo experimental, após o treinamento, apresentou uma diferença significativa em relação ao grupo controle. As variáveis relativas à composição corporal também tiveram diferenças significativas após a intervenção, ocorrendo uma diminuição da massa de gordura (p=0,016) e um aumento da massa livre de gordura (p=0,016). Além disso, no mesmo tipo de comparação, o grupo combinado, após um período de seis meses, apresentou um melhor desempenho nos seguintes testes: Figura Complexa de Rey e Taylor (p=0,01); Toulouse, no qual obtiveram um percentil maior na qualidade (p=0,045); Semelhanças (p=0,003); e Soma de todas das tentativas no teste de Pares Verbais Associados (p=0,043). Não foram observadas diferenças estatísticas nas demais análises. Desta forma, pode-se concluir que o treinamento físico combinado foi capaz de aumentar a força e a capacidade aeróbia de idosos saudáveis, tendo ocorrido também uma melhora na habilidade de abstração, no controle inibitório, na memória de curto prazo e na aprendizagem, / Among the changes associated with aging there is a cognitive decline. However, a healthy life style, such as physical exercise seems to generate a protective effect against this cognitive decline. The literature has shown that both aerobic and the resistance exercise, when practiced in isolation seem to result in benefits to cognition. Yet it is not described if the combination of both methods would result in the same benefit. The aim of this study was to investigate the effects of combined training on cognitive function in health elderly. Were select thirty-three elderly subjects who were randomly divided into two groups: Control (N = 17) and Combined (N = 16). The control group was instructed to maintain their usual activities and the combined group participated in a training program composed by aerobic and resistance exercise, three times per week on alternate days for a period of six months. Both groups underwent a physical assessment (spirometry and testing of 1 Repetition Maximum - 1RM), cognitive (through neurophysiological and neuropsychological measures), mood, quality of life and blood tests (Insulin-like growth factors type 1- IGF-1 - and blood viscosity) at the beginning and the end of the protocol. The results showed that in the physical assessments, both oxygen consumption (p = 0.01) and 1RM (p = 0.001), the experimental group after training showed a significant difference when compared to the control group. The variables relating to body composition also showed significant differences after the intervention, causing a decrease in fat mass (p = 0.016) and an increase in fat-free mass (p = 0.016). Moreover, the same type of comparison, the combined group, after a period of six months, performed better in the following tests: Rey Complex Figure and Taylor (p = 0.01); Toulouse, which obtained a percentile in the quality (p = 0.045); Similarities (p = 0.003); and Sum of all the attempts to test Verbal Associated Pairs (p = 0.043). There were no statistical differences in the other analysis. Thus, the conclusion is that the combined training can increase both strength and aerobic capacity in healthy elderlies, affecting an improvement in the ability of abstraction, inhibitory control, short-term memory and learning regardless of serum IGF-1 and blood viscosity. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

O sistema cardiovascular está estrutural e funcionalmente disposto de modo “circular”. Situações de obstrução do fluxo sanguíneo determinam o aparecimento de mecanismos que visam suplantar tais interrupções e manter a circularidade íntegra. À nível molecular, o principal elemento envolvido nestes mecanismos é o Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF). A expressão do VEGF quando há oclusão arterial está bem documentada, faltando elementos com relação à oclusão venosa. Neste estudo objetivamos verificar se a oclusão à nível arterial determina uma expressão do VEGF diferente daquela que ocorre se a oclusão acontecer à nível venoso. Para isso randomizamos dois grupos de ratos de experimentação. Em um grupo realizamos a oclusão da aorta infra-renal e em outro a oclusão da veia cava infra-renal. Posteriormente medimos a expressão do VEGF através da contagem do número de células marcadas imunoistoquimicamente no omento destes ratos. O resultado demonstrou que a expressão do VEGF, quando analisada pelo método proposto foi igual no grupo da oclusão venosa e no grupo da oclusão arterial. / The cardiovascular system is structurally and functionally circular. Situations in which there is obstruction to blood flow trigger mechanisms to bypass these blockages and maintenance the integrity of the circularity. At the molecular level the main factor involved is the Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF). The VEGF expression associated with arterial occlusion is well documented but is lacking evidence when venous occlusion occurs. This study aimed to verify if the expression of VEGF when an occlusion occurs at venous level is the same or different from that caused at the arterial level. Two groups of rats were randomized by infra-renal aortic occlusion or inferior vena cava occlusion. VEGF was measured by counting the immunohistochemistry method marked cells at the omentum level. It was demonstrated that the VEGF expression is the same in the venous group obstruction as the arterial obstruction group.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:32:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PedroCRN_DISSERT.pdf: 3117630 bytes, checksum: 2544a3022fe67731388c2238d7dc5289 (MD5) Previous issue date: 2012-02-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Odontogenic cysts are pathologic cavities covered by odontogenic epithelium and filled by liquid, desquamated cells or other materials. The intraosseous lesions, such as radicular cyst and dentigerous cyst, present a potential of expansion capable of promoting the destruction of the surrounding osseous tissue. The mechanisms related to this process of expansion are the proliferation of cystic epithelium, the increase of the osmolarity of the cystic fluid and the synthesis of reabsorption factors such as IFN-? and TGF-?1. The aim of this study was to evaluate and compare the immunohistochemical expression of IFN-? and TGF-?1 between radicular cysts and dentigerous cysts in order to understand the role and behavior of these proteins in the expansion of these cysts. We selected 20 cases of radicular cyst and 20 cases of dentigerous cyst chosen from the files of UFRN s Laboratory of Oral Pathology. After analyzing the clinical data, the cases underwent the routine staining technique (HE) and immunohistochemistry for the appearance of IFN-? and TGF-?1 in the epithelium and capsule of these cysts. The statistical analysis using the Mann-Whitney test revealed no statistically significant difference in immunoexpression of IFN-? between the epithelium (p = 0.565) and capsules (p = 0.414) of radicular cysts and dentigerous cysts. Moreover, there was no statistically significant difference of immunoexpression of TGF-?1 between the epithelium (p = 0.620) and capsules (p = 0.056) of radicular cysts and dentigerous cysts. The Wilcoxon test revealed no statistically significant difference between IFN-? and TGF-?1 imunoexpressions in the epithelium (p = 0.225) and capsules (p = 0.370) of radicular cysts. There was no statistically significant difference between IFN-? and TGF-?1 imunoexpressions in the epithelium (p = 0.361) of dentigerous cysts. However, there was a statistically significant difference between IFN-? and TGF-?1 immunoexpressions in the capsule (p = 0.001) of dentigerous cysts, being TGF-?1 the factor which presented the most significant immunoexpression. Given these results, we conclude that there was no difference in immunohistochemical expression of IFN-? and TGF-?1 between radicular and dentigerous cysts and that TGF-?1 was more significant than the IFN-? in the capsule of dentigerous cysts / Os cistos odontog?nicos s?o cavidades patol?gicas revestidas por epit?lio odontog?nico e preenchidas por l?quido, c?lulas descamadas, ou outros materiais. As les?es intra-?sseas, como o cisto radicular e o cisto dent?gero, apresentam um potencial de expans?o capaz de promover a destrui??o do tecido ?sseo circunjacente. Os mecanismos relacionados a esse processo de expans?o s?o a prolifera??o do epit?lio c?stico, o aumento da osmolaridade do fluido c?stico e a s?ntese de fatores de reabsor??o ?ssea como IFN-? e TGF-?1. O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar a express?o imuno-histoqu?mica do IFN-? e do TGF-?1 entre cistos radiculares e cistos dent?geros com a finalidade de compreender o papel e o comportamento dessas prote?nas no processo de expans?o destes cistos. Selecionamos 20 casos de cisto radicular e 20 casos de cisto dent?gero retirados dos arquivos do Laborat?rio de Patologia Oral da UFRN. Ap?s an?lise dos dados cl?nicos, os casos foram submetidos a t?cnica de colora??o de rotina (HE) e ao m?todo imuno-histoqu?mico para evidencia??o da express?o do IFN-? e do TGF-?1 no epit?lio e na c?psula dos referidos cistos. A an?lise estat?stica dos dados utilizando o teste de Mann-Whitney revelou que n?o houve diferen?a estatisticamente significativa da imunoexpress?o do IFN- entre os epit?lios (p=0,565) e c?psulas (p=0,414) dos cistos radiculares e cistos dent?geros. Al?m disso, n?o houve diferen?a estatisticamente significativa da imunoexpress?o do TGF-?1 entre os epit?lios (p=0,620) e c?psulas (p=0,056) dos cistos radiculares e cistos dent?geros. O teste de Wilcoxon revelou que n?o houve diferen?a estatisticamente significativa entre as imunoexpress?es do IFN- e do TGF-?1 no epit?lio (p=0,225) e na c?psula (p=0,370) dos cistos radiculares. N?o houve diferen?a estatisticamente significativa entre as imunoexpress?es do IFN- e do TGF-?1 no epit?lio (p=0,361) dos cistos dent?geros. No entanto, houve diferen?a estatisticamente significativa entre as imunoexpress?es do IFN- e do TGF-?1 na c?psula (p=0,001) dos cistos dent?geros, sendo o TGF-?1 o que apresentou a imunoexpress?o mais significativa. Diante destes resultados, conclu?mos que n?o houve diferen?a de express?o imuno-histoqu?mica do IFN-? e do TGF-?1 entre os cistos radiculares e dent?geros e que o TGF-?1 foi mais expressivo do que o IFN-? na c?psula dos cistos dent?geros

Apesar de sua importância clínica e epidemiológica, a fisiopatologia da préeclâmpsia ainda não foi completamente compreendida. Sabe-se que a doença constitui-se de uma fase pré-clínica e um estágio clínico. Durante a última década muito esforço tem se concentrado na identificação precoce da doença, ainda em sua fase pré-clínica. A literatura científica tem demonstrado claramente um desequilíbrio na regulação da angiogênese das gestantes com pré-eclâmpsia, marcado por níveis elevados do fator antiangiogênico soluble fms-like tyrosine kinase-1 (sFlt-1) e níveis diminuídos do fator pró-angiogênico placental growth fator (PlGF). Embora um número crescente de estudos em populações de alto risco tenha avaliado o papel desses biomarcadores no diagnóstico de pré-eclâmpsia, dados sobre sua utilização para a predição de pré-eclâmpsia superajuntada, cujo diagnóstico pode ser particularmente difícil, permanecem relativamente escassos e controversos. Com o presente estudo pretendemos avaliar o desempenho de medidas seriadas dos níveis maternos circulantes dos fatores sFlt-1 e PlGF, bem como da razão sFlt-1/PlGF, para predição de pré-eclâmpsia superajuntada e compará-lo ao seu desempenho na predição de pré-eclâmpsia em sua forma \"pura\", não superajuntada. Para este propósito, estudamos uma coorte prospectiva composta de dois braços, um de gestantes com hipertensão arterial crônica e outro de gestantes normotensas, e avaliamos os níveis séricos de sFlt-1 e de PlGF e a razão sFlt-1/PlGF nas idades gestacionais de 20, 26, 32 e 36 semanas, tendo como desfecho principal o diagnóstico de pré-eclâmpsia. Um total de 97 gestantes foram acompanhadas, 37 normotensas e 60 com hipertensão arterial crônica. Entre elas, 4 (10,8%) desenvolveram pré-eclâmpsia e 14 (23,3%) desenvolveram pré-eclâmpsia superajuntada. Para predição de pré-eclâmpsia, a análise ROC (Receiver Operating Characteristics) apresentou área sob a curva (AUC - area under curve) de 0,83 (IC 95% = 0,68-0,99, P = 0,035) para dosagem de PlGF com 20 semanas e AUC = 0,92 (IC 95% = 0,81 - 1,00, P = 0,007) para a razão sFlt-1/PlGF com 26 semanas de gestação. A variação percentual dos níveis de PlGF entre 26 e 32 semanas de gestação apresentou AUC = 0,96 (IC de 95% = 0,89-1,00, P = 0,003). Para a predição de pré-eclâmpsia superajuntada, a razão sFlt-1/PIGF na idade gestacional de 32 semanas apresentou AUC = 0,69 (IC de 95% = 0,53-0,85, P = 0,039). Entre 20 e 26 semanas de gestação, a variação percentual do PIGF e da razão sFlt-1/PlGF apresentaram, respectivamente, AUC = 0,74 (IC de 95% = 0,58-0,90, P = 0,018) e AUC = 0,71 (IC 95% = 0,52-0,91, P = 0,034). Por nossos resultados podemos concluir que, embora os níveis de PlGF e a razão sFlt-1/ PlGF tenham apresentado bons desempenhos na predição de pré-eclâmpsia, é preciso ter cuidado ao usá-los para a predição de pré-eclâmpsia superajuntada. Nessas gestantes, a dosagem dos fatores angiogênicos apresenta capacidade de predição menor e mais tardia. Avaliações seriadas dos fatores podem melhorar o desempenho dos testes para predição de pré-eclâmpsia superajuntada em idades gestacionais mais precoces / Despite being a major public health problem, the pathophysiology of preeclampsia is incompletely understood. Preeclampsia progression comprises a pre-clinical stage and a clinical stage. During the last decade much work has focused on identifying the pre-clinical stage of preeclampsia. Many researchers have clearly demonstrated an anti-angiogenic imbalance that is marked by higher levels of soluble fms-like tyrosine kinase-1 (sFlt-1) and lower levels of placental growth factor (PlGF) in the subjects who develop preeclampsia compared with those who do not. Although a growing number of studies in the high-risk population have shown the role of these biomarkers in diagnosing preeclampsia, superimposed preeclampsia, which can be a challenging diagnosis, remains partially understudied and the literature regarding this subject continues to be relatively scarce as well as controversial. By this study, we aimed to evaluate the performance of serial measurements of maternal circulating sFlt-1 and PlGF levels for the prediction of superimposed preeclampsia in chronic hypertensive subjects and to compare it to the prediction of preeclampsia in normotensive control subjects. For this purpose, we evaluated a two-armed prospective cohort of women with normotensive and chronic hypertensive pregnancies and assessed the serum levels of sFlt-1 and PlGF and the sFlt-1/PlGF ratio at gestational ages of 20, 26, 32 and 36 weeks, having preeclampsia as the primary outcome to be predicted. A total of 97 women were followed-up, 37 in the normotensive group and 60 in the chronic hypertensive group. Among them, 4 (10.8%) women developed preeclampsia and 14 (23.3%) developed superimposed preeclampsia. For predicting preeclampsia, PlGF at 20 gestational weeks presented an AUC=0.83 (CI 95% = 0.68 - 0.99, P=0.035) and the sFlt-1/PlGF ratio at 26 gestational weeks presented an AUC=0.92 (CI95% = 0.81 - 1.00, P=0.007). The percent change of the PlGF levels between 26 and 32 gestational weeks presented an AUC=0.96 (CI 95% = 0.89 - 1.00, P=0.003). For predicting superimposed preeclampsia, the sFlt-1/PlGF ratio at 32 gestational weeks presented an AUC=0.69 (CI 95% = 0.53 - 0.85, P=0.039). Between 20 and 26 gestational weeks, the percent change of PlGF and the sFlt-1/PlGF ratio presented, respectively, an AUC=0.74 (CI 95% = 0.58 - 0.90, P=0.018) and an AUC=0.71 (CI 95% = 0.52 - 0.91, P=0.034). By our results, we concluded that, although the PlGF level and the sFlt-1/PlGF ratio present good performances in the prediction of preeclampsia, caution is required when using them for the prediction of superimposed preeclampsia. Sequential assessments slightly improve the test performances for predicting superimposed preeclampsia at earlier gestational ages

O sistema cardiovascular está estrutural e funcionalmente disposto de modo “circular”. Situações de obstrução do fluxo sanguíneo determinam o aparecimento de mecanismos que visam suplantar tais interrupções e manter a circularidade íntegra. À nível molecular, o principal elemento envolvido nestes mecanismos é o Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF). A expressão do VEGF quando há oclusão arterial está bem documentada, faltando elementos com relação à oclusão venosa. Neste estudo objetivamos verificar se a oclusão à nível arterial determina uma expressão do VEGF diferente daquela que ocorre se a oclusão acontecer à nível venoso. Para isso randomizamos dois grupos de ratos de experimentação. Em um grupo realizamos a oclusão da aorta infra-renal e em outro a oclusão da veia cava infra-renal. Posteriormente medimos a expressão do VEGF através da contagem do número de células marcadas imunoistoquimicamente no omento destes ratos. O resultado demonstrou que a expressão do VEGF, quando analisada pelo método proposto foi igual no grupo da oclusão venosa e no grupo da oclusão arterial. / The cardiovascular system is structurally and functionally circular. Situations in which there is obstruction to blood flow trigger mechanisms to bypass these blockages and maintenance the integrity of the circularity. At the molecular level the main factor involved is the Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF). The VEGF expression associated with arterial occlusion is well documented but is lacking evidence when venous occlusion occurs. This study aimed to verify if the expression of VEGF when an occlusion occurs at venous level is the same or different from that caused at the arterial level. Two groups of rats were randomized by infra-renal aortic occlusion or inferior vena cava occlusion. VEGF was measured by counting the immunohistochemistry method marked cells at the omentum level. It was demonstrated that the VEGF expression is the same in the venous group obstruction as the arterial obstruction group.

Submitted by Claudinei Pracidelli (cpracide@ipen.br) on 2016-11-11T11:03:59Z No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2016-11-11T11:03:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A deficiência de hormônio de crescimento (DGH) é tratada convencionalmente com repetidas injeções do hormônio recombinante. Este trabalho teve como objetivo estabelecer uma alternativa de tratamento baseada na transferência dos genes do hormônio de crescimento humano (hGH) ou de camundongo (mGH), em camundongos anões lit/lit ou lit/scid, mediante administração de DNA plasmidial associada à eletrotransferência, com a finalidade de atingir a máxima recuperação de crescimento em comparação ao camundongo normal (catch-up growth). Inicialmente foi realizada a administração do plasmídeo contendo o gene do mGH no músculo quadríceps exposto ou tibial anterior (TA) não exposto. Utilizando diferentes condições de eletrotransferência, baseadas em pulsos alternados de baixa (100 V/cm) e alta (1000 V/cm) voltagem (HV/LV, HV/8LV) ou em pulsos seguidos de baixa voltagem (8 pulsos de 150 V/cm), o músculo TA na condição HV/LV apresentou os maiores níveis de expressão de mGH: 6,7 ± 2,5 ng/mL. O tempo de exposição e a quantidade da enzima hialuronidase (HI) necessária para a eletrotransferência foram também analisados. O tempo de 30 minutos e a dose de 20 U de HI proporcionaram os melhores resultados de expressão. Diferentes quantidades de DNA foram também testadas, mas a administração de 50 &mu;g DNA/animal foi confirmada como a melhor. Na padronização do volume de solução do plasmídeo administrado no TA, foi observado que a injeção de 20 &mu;L de DNA apresentou expressão significativamente maior da proteína em comparação a de 10 &mu;L. Buscando uma maior expressão de GH, foi realizado experimento adicionando poli-L-glutamato ao diluente do DNA, comparando também diferentes condições de eletrotransferência (HV/LV e 375 V/cm). A condição de 375 V/cm, sem a adição do polímero, proporcionou as maiores concentrações, tanto de hGH como de mGH, no soro de camundongos lit/scid e lit/lit, respectivamente. Quando utilizados 3 pulsos de 375 V/cm e a administração do plasmídeo com o gene do mGH em dois locais de cada músculo TA, foram obtidos os mais altos níveis de expressão atingindo 14,7 ± 3,7 ng mGH/mL. Estes foram os parâmetros utilizados em um bioensaio, no qual foi também determinada a medida do comprimento inicial e final do fêmur por radiografia. Neste bioensaio de 36 dias, a curva de crescimento dos camundongos lit/lit tratados foi similar a de camundongos heterozigotos não tratados e os níveis de mGH do grupo DNA foram significativamente maiores (P<0,0002) em relação ao grupo controle. Os camundongos tratados também apresentarem concentração de mIGF-I no soro superior a do grupo controle. Considerando os parâmetros de crescimento avaliados, o grupo tratado com DNA apresentou percentuais de incremento altamente significativos em relação ao grupo controle, com P<0,001 para o peso corpóreo e P<0,002 para o comprimento do corpo, da cauda e para ambos os fêmures, com valores de catch-up da ordem de 79% para o comprimento dos fêmures. Podemos concluir que foi estabelecida uma metodologia eficiente de transferência gênica não viral, que poderá levar a uma completa normalização de crescimento de camundongos anões mediante utilização de animais mais jovens, como mencionado na literatura e em trabalho recente do nosso grupo. / Dissertação (Mestrado em Tecnologia Nuclear) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP / FAPESP: 14/07380-6