Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-01-16Bitstream added on 2014-06-13T20:44:07Z : No. of bitstreams: 1 alexandrino_b_dr_jabo.pdf: 403623 bytes, checksum: a596d9d91434dd37dd44458b1b70eb74 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A presente pesquisa teve como objetivo avaliar a utilização de cobaias e caprinos para teste de vacinas contra o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e os vírus da diarreia viral bovina tipos 1 (BVDV-1) e 2 (BVDV-2). Inicialmente foi realizada a infecção experimental em cobaias e bovinos, com esses três vírus, para verificar a máxima resposta imunogênica em ambas as espécies. As médias geométricas dos títulos de anticorpos (GMT) dos bovinos foram altas para todos os agentes virais; em cobaias foi possível observar que o BoHV-1 induziu elevadas GMT, para o BVDV-1 a indução foi moderada, enquanto para o BVDV-2 foi baixa, podendo comprometer a viabilidade dos testes antigênicos. Após essa etapa, foram vacinados bovinos, cobaias e caprinos, com seis vacinas comerciais de antígenos inativados, para verificar a indução de anticorpos por estímulo vacinal. Nos bovinos, as GMT obtidas para o BoHV-1 mostraram que as vacinas utilizadas promoveram a indução moderada na resposta imunológica, e apenas três delas foram consideradas satisfatórias. Para o BVDV-1, apenas uma vacina pode ser considerada eficiente, e em relação ao BVDV-2 nenhuma delas poderia ser assim classificada. Os resultados da vacinação com os caprinos mostraram que, apesar de os animais serem reagentes ao BoHV-1 no início do experimento, as formulações foram capazes de induzir a produção de anticorpos com títulos elevados contra os três vírus estudados. As cobaias, por sua vez, receberam doses fracionadas de uma vacina comercial nacional e, das frações testadas, 3,2mL foi a que apresentou melhores resultados, sendo esta estabelecida para testar as demais vacinas nesta espécie. Depois da imunização, os resultados mostram que para o BoHV-1 as GMT foram altas; em relação ao BVDV-1, apenas duas vacinas foram capazes de induzir... / The present research had as objective to evaluate the use of guinea pigs and goats in test of vaccines against the bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and the bovine viral diarrhea viruses types 1 (BVDV-1) and 2 (BVDV-2). First, an experimental infection was realized in guinea pigs and bovines, using these three viruses, to verify the maximum immune response in both species. The geometric means of antibodies titres (GMT) for bovines were high for the viral agents; in guinea pigs was possible to observe that the GMT induced by BoHV-1 was high, by BVDV-1 was moderate and by BVDV-2 was weak and could compromise the viability of antigenic tests. After this stage, the bovines, guinea pigs and goats were vaccinated using six commercial vaccines with inactivated antigens to verify the induction of antibodies production by vaccinal stimulus. In bovines, the GMT obtained for BoHV-1 showed the vaccines induced a moderate immune response, being only three of them considered satisfactory. For BVDV-1 only one and for BVDV-2 none of them can have the same classification. The results obtained with the goats, despite they were positive to BoHV-1 in the sorting, showed the formulations were able to induce high antibody production against the three virus studied. The guinea pigs, on the other hand, received fractional doses of a commercial vaccine well-established in the domestic trade and, from the fractions tested, 3.2 mL showed the best results, being established to test the other vaccines. After immunization, the results of GMT for BoHV-1 was high; relating to BVDV-1, only two vaccines were capable to induce antibodies production, but their GMT were weak; and there was no immune response against BVDV-2. Thus, goats can be ... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Samir Issa Samara / Banca: Moacir Marchiori Filho / Banca: Fabio Carvalho Dias / Banca: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Banca: Luís Antonio Mathias / Resumo: A presente pesquisa teve como objetivo avaliar a utilização de cobaias e caprinos para teste de vacinas contra o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e os vírus da diarreia viral bovina tipos 1 (BVDV-1) e 2 (BVDV-2). Inicialmente foi realizada a infecção experimental em cobaias e bovinos, com esses três vírus, para verificar a máxima resposta imunogênica em ambas as espécies. As médias geométricas dos títulos de anticorpos (GMT) dos bovinos foram altas para todos os agentes virais; em cobaias foi possível observar que o BoHV-1 induziu elevadas GMT, para o BVDV-1 a indução foi moderada, enquanto para o BVDV-2 foi baixa, podendo comprometer a viabilidade dos testes antigênicos. Após essa etapa, foram vacinados bovinos, cobaias e caprinos, com seis vacinas comerciais de antígenos inativados, para verificar a indução de anticorpos por estímulo vacinal. Nos bovinos, as GMT obtidas para o BoHV-1 mostraram que as vacinas utilizadas promoveram a indução moderada na resposta imunológica, e apenas três delas foram consideradas satisfatórias. Para o BVDV-1, apenas uma vacina pode ser considerada eficiente, e em relação ao BVDV-2 nenhuma delas poderia ser assim classificada. Os resultados da vacinação com os caprinos mostraram que, apesar de os animais serem reagentes ao BoHV-1 no início do experimento, as formulações foram capazes de induzir a produção de anticorpos com títulos elevados contra os três vírus estudados. As cobaias, por sua vez, receberam doses fracionadas de uma vacina comercial nacional e, das frações testadas, 3,2mL foi a que apresentou melhores resultados, sendo esta estabelecida para testar as demais vacinas nesta espécie. Depois da imunização, os resultados mostram que para o BoHV-1 as GMT foram altas; em relação ao BVDV-1, apenas duas vacinas foram capazes de induzir... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present research had as objective to evaluate the use of guinea pigs and goats in test of vaccines against the bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and the bovine viral diarrhea viruses types 1 (BVDV-1) and 2 (BVDV-2). First, an experimental infection was realized in guinea pigs and bovines, using these three viruses, to verify the maximum immune response in both species. The geometric means of antibodies titres (GMT) for bovines were high for the viral agents; in guinea pigs was possible to observe that the GMT induced by BoHV-1 was high, by BVDV-1 was moderate and by BVDV-2 was weak and could compromise the viability of antigenic tests. After this stage, the bovines, guinea pigs and goats were vaccinated using six commercial vaccines with inactivated antigens to verify the induction of antibodies production by vaccinal stimulus. In bovines, the GMT obtained for BoHV-1 showed the vaccines induced a moderate immune response, being only three of them considered satisfactory. For BVDV-1 only one and for BVDV-2 none of them can have the same classification. The results obtained with the goats, despite they were positive to BoHV-1 in the sorting, showed the formulations were able to induce high antibody production against the three virus studied. The guinea pigs, on the other hand, received fractional doses of a commercial vaccine well-established in the domestic trade and, from the fractions tested, 3.2 mL showed the best results, being established to test the other vaccines. After immunization, the results of GMT for BoHV-1 was high; relating to BVDV-1, only two vaccines were capable to induce antibodies production, but their GMT were weak; and there was no immune response against BVDV-2. Thus, goats can be ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T19:30:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JESSICA BRANDAO REOLON.pdf: 405938 bytes, checksum: 02d1f792d3137ced3fc728e0e11dcb3e (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-09-22T19:34:00Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JESSICA BRANDAO REOLON.pdf: 405938 bytes, checksum: 02d1f792d3137ced3fc728e0e11dcb3e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-22T19:34:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) JESSICA BRANDAO REOLON.pdf: 405938 bytes, checksum: 02d1f792d3137ced3fc728e0e11dcb3e (MD5) Previous issue date: 2016 / O herpesvírus simples (HSV) é um importante problema de saúde pública em vários países provocando ulceração genital. Dentre o arsenal terapêutico para o tratamento da infecção por HSV destaca-se o aciclovir (ACV). No entanto, este apresenta limitações no seu uso como um tempo de meia-vida curto e uma baixa solubilidade aquosa. A curcumina (CUR) é um composto natural que vem demonstrando diversas atividades terapêuticas, dentre estas a atividade antiviral, porém o seu uso por via oral também é comprometido pela baixa solubilidade em água. A encapsulação em micropartículas poliméricas (MPs) é uma abordagem farmacotécnica que podem superar as dificuldades do uso terapêutico destes dois compostos. Em vista disto, o presente trabalho visou desenvolver e caracterizar MPs pelo método de aspersão compostas por HPMC e Eudragit® RS100 como materiais poliméricos, além de manitol como adjuvante de secagem. Os resultados demonstraram que o método de preparo por aspersão (spray drying) apresentou um rendimento em torno de 50% para todas as formulações desenvolvidas, mostrando um fluxo tecnológico mais vantajoso para as partículas sem manitol. O doseamento demonstrou teores de 82 a 99% e de 81 a 94%, para ACV e CUR, respectivamente. A análise granulométrica mostrou micropartículas de tamanho micrométrico entre 8,7 e 15,3 μm. A análise morfológica evidenciou o formato esférico e confirmou o resultado das análises de tamanho. A espectroscopia na região do infravermelho mostrou uma sobreposição dos espectros obtidos pelos componentes isolados indicando boa compatibilidade entre os materiais. O perfil de liberação in vitro permitiu observar que as MPs foram capazes de controlar a liberação e melhorar a solubilidade dos compostos, destacando-se, neste quesito, as MPs compostas por HPMC. A avaliação preliminar da atividade antiviral in vitro demonstrou que a associação de ACV e CUR possui um efeito sinérgico frente ao vírus BoVH-1, sendo que as MPs foram capazes de potencializar este efeito. Neste contexto, as MPs mostraram-se sistemas promissores para a veiculação de ACV e CUR por via oral, com elevado potencial para constituir um tratamento alternativo para o herpes viral. / The herpes simplex virus (HSV), also known as human herpes virus, infects humans causing mainly genital and labial ulcerations. Among the drugs available for the treatment of HSV infection the acyclovir (ACV) is an effective antiviral drug. However this drug presents limitations in its use due to the short half-life and low water solubility. Curcumin (CUR) has demonstrated several therapeutic activities, including antiviral activity, but the oral administration of this natural compound is also compromised by low solubility. The polymeric microparticles (MP) are a pharmacotechnical approach that modifies the pharmacokinetics of the compounds and offers a possibility to overcome the difficulties of the therapeutic use. In view of this, this study aimed to develop MPs by spray drying method composed of HPMC and Eudragit® RS100 as polymeric materials, and mannitol as drying material. The results showed a yield around 50% for all developed formulations and a better technological flow rate for the particles without mannitol. The assay showed levels 82-99 and 81% to 94%, to ACV and CUR, respectively. The particle size analysis showed microparticles micrometric size between 8.7 and 15.3 micrometers. Morphological analysis showed the spherical shape and confirmed the results of size analysis. Spectroscopy in the infrared showed an overlap of the spectra obtained by the individual components indicating good compatibility between the materials. The in vitro release profile observed that the PMs were able to control the release and improved the solubility of the compounds, especially when composed of HPMC. Besides, an in vitro preliminary assessment of antiviral activity demonstrated that the combination of ACV and CUR presented a synergistic effect against BoVH-1 virus, and the MPs were able to enhance this effect. The MPs showed to be promising systems for the oral administration of ACV and CUR and could be an improved alternative treatment for viral herpes.

Recentemente, estudos têm associado a presença de vírus da família herpesviridae à doença periodontal, os quais poderiam estar envolvidos na ocorrência e progressão de diferentes formas da doença periodontal, através da supressão do sistema imune do periodonto, liberação de citotoxinas, mediadores pró-inflamatórios, o que poderia favorecer o crescimento subgengival de microrganismos. Neste estudo, testamos a hipótese de que a prevalência do herpes vírus na placa subgengival de pacientes com gengivite é igual a de pacientes portadores de periodontite crônica. Desse modo, o presente estudo teve como objetivo determinar a presença dos vírus Herpes simples vírus tipo 1 (HSV-1), Citomegalovírus (HCMV) e Epstein-Barr vírus tipo 1 (EBV-1), relacionando-os com a presença de bactérias periodontopatogênicas como: Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi), Tannerella forsythia (Tf) e Dialister pneumosintes (Dp) em amostras de placa subgengival, coletadas de 30 pacientes portadores de periodontite crônica (grupo PC), 30 pacientes com gengivite (grupo G) e 30 indivíduos periodontalmente saudáveis (grupo C). Foram coletadas quatro amostras de placa subgengival do sítio mais profundo de cada quadrante nos pacientes do grupo PC e nos pacientes do grupo G e C, um sítio aleatório de cada quadrante foi examinado. A detecção de espécies bacterianas e de herpes vírus na placa subgengival dos grupos foi realizada por PCR e Nested PCR, respectivamente. A análise estatística mostrou que o HCMV foi detectado com freqüência similar nos três grupos estudados e que houve uma maior prevalência do HSV-1, EBV-1 e P. intermedia nos pacientes com periodonite crônica e gengivite em relação ao grupo controle. Houve associação da periodontite crônica com o EBV-1 e as cinco bactérias estudadas, além da associação entre os vírus (EBV-1+ HCMV; EBV-1 + HSV-1; HSV-1 + HCMV) e entre vírus e bactérias (EBV-1+ P.intermedia, EBV-1 + P. gingivalis; HCMV + T. forsythia; HCMV + A. actinomycetemcomitans; HSV-1 + T. forsythia; HSV-1 + P. gingivalis). / Recently, studies have linked the presence of the virus family herpesviridae and periodontal disease, which may be involved in the occurrence and progression of different forms of periodontal disease through the suppression of the immune system of the periodontium, release of cytotoxins, pro-inflammatory mediators and immunopathological events, may promote growth of subgingival microorganisms. In this study, we tested the hypothesis that the prevalence of herpes virus in sub-gingival plaque of patients with gingivitis is equal to patients with chronic periodontitis. Thus, this study aimed to determine the presence of the virus Herpes simplex virus type 1 (HSV-1), Cytomegalovirus (HCMV) and Epstein-Barr virus type 1 (EBV-1), relating to the presence of bacteria as periodontopathogens: Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi), Tannerella forsythia (Tf) and Dialister pneumosintes (Dp) in subgingival plaque samples collected from 30 patients with chronic periodontitis (CP group), 30 patients with gingivitis (group G) and 30 periodontally healthy subjects (group C). We collected four samples of subgingival plaque from the deepest site in each quadrant and in the PC group and patients in group C and G, a random site in each quadrant was examined. The detection of bacterial species and herpes virus in subgingival plaque of the groups were identified by PCR and nested PCR respectively. Statistical analysis showed that HCMV was detected with a similar frequency among the three groups and significant difference in prevalence of HSV-1, EBV-1 and P. intermedia in patients with gingivitis in the control group. The chronic periodontitis was associated with EBV-1 and the five bacteria studied, and the association of the virus (EBV-1 + HCMV, EBV-1 + HSV-1, HSV-1 + HCMV) and between viruses and bacteria (EBV-1+ P.intermedia, EBV-1 + P. gingivalis; HCMV + T. forsythia; HCMV + A. actinomycetemcomitans, HSV-1 + T. forsythia; HSV-1 + P. gingivalis).

Recentemente, estudos têm associado a presença de vírus da família herpesviridae à doença periodontal, os quais poderiam estar envolvidos na ocorrência e progressão de diferentes formas da doença periodontal, através da supressão do sistema imune do periodonto, liberação de citotoxinas, mediadores pró-inflamatórios, o que poderia favorecer o crescimento subgengival de microrganismos. Neste estudo, testamos a hipótese de que a prevalência do herpes vírus na placa subgengival de pacientes com gengivite é igual a de pacientes portadores de periodontite crônica. Desse modo, o presente estudo teve como objetivo determinar a presença dos vírus Herpes simples vírus tipo 1 (HSV-1), Citomegalovírus (HCMV) e Epstein-Barr vírus tipo 1 (EBV-1), relacionando-os com a presença de bactérias periodontopatogênicas como: Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi), Tannerella forsythia (Tf) e Dialister pneumosintes (Dp) em amostras de placa subgengival, coletadas de 30 pacientes portadores de periodontite crônica (grupo PC), 30 pacientes com gengivite (grupo G) e 30 indivíduos periodontalmente saudáveis (grupo C). Foram coletadas quatro amostras de placa subgengival do sítio mais profundo de cada quadrante nos pacientes do grupo PC e nos pacientes do grupo G e C, um sítio aleatório de cada quadrante foi examinado. A detecção de espécies bacterianas e de herpes vírus na placa subgengival dos grupos foi realizada por PCR e Nested PCR, respectivamente. A análise estatística mostrou que o HCMV foi detectado com freqüência similar nos três grupos estudados e que houve uma maior prevalência do HSV-1, EBV-1 e P. intermedia nos pacientes com periodonite crônica e gengivite em relação ao grupo controle. Houve associação da periodontite crônica com o EBV-1 e as cinco bactérias estudadas, além da associação entre os vírus (EBV-1+ HCMV; EBV-1 + HSV-1; HSV-1 + HCMV) e entre vírus e bactérias (EBV-1+ P.intermedia, EBV-1 + P. gingivalis; HCMV + T. forsythia; HCMV + A. actinomycetemcomitans; HSV-1 + T. forsythia; HSV-1 + P. gingivalis). / Recently, studies have linked the presence of the virus family herpesviridae and periodontal disease, which may be involved in the occurrence and progression of different forms of periodontal disease through the suppression of the immune system of the periodontium, release of cytotoxins, pro-inflammatory mediators and immunopathological events, may promote growth of subgingival microorganisms. In this study, we tested the hypothesis that the prevalence of herpes virus in sub-gingival plaque of patients with gingivitis is equal to patients with chronic periodontitis. Thus, this study aimed to determine the presence of the virus Herpes simplex virus type 1 (HSV-1), Cytomegalovirus (HCMV) and Epstein-Barr virus type 1 (EBV-1), relating to the presence of bacteria as periodontopathogens: Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi), Tannerella forsythia (Tf) and Dialister pneumosintes (Dp) in subgingival plaque samples collected from 30 patients with chronic periodontitis (CP group), 30 patients with gingivitis (group G) and 30 periodontally healthy subjects (group C). We collected four samples of subgingival plaque from the deepest site in each quadrant and in the PC group and patients in group C and G, a random site in each quadrant was examined. The detection of bacterial species and herpes virus in subgingival plaque of the groups were identified by PCR and nested PCR respectively. Statistical analysis showed that HCMV was detected with a similar frequency among the three groups and significant difference in prevalence of HSV-1, EBV-1 and P. intermedia in patients with gingivitis in the control group. The chronic periodontitis was associated with EBV-1 and the five bacteria studied, and the association of the virus (EBV-1 + HCMV, EBV-1 + HSV-1, HSV-1 + HCMV) and between viruses and bacteria (EBV-1+ P.intermedia, EBV-1 + P. gingivalis; HCMV + T. forsythia; HCMV + A. actinomycetemcomitans, HSV-1 + T. forsythia; HSV-1 + P. gingivalis).