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Produção e caracterização de hidrolisado protéico provenientes de resíduos de tilápia ( Oreochromis niloticus)

SILVA, Juliett de Fátima Xavier da 26 February 2010 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-15T13:36:07Z No. of bitstreams: 1 Juliett de fatima Xavier da Silva.pdf: 686103 bytes, checksum: 6d24d97946373fdf1283e5d402f80f4c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-15T13:36:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Juliett de fatima Xavier da Silva.pdf: 686103 bytes, checksum: 6d24d97946373fdf1283e5d402f80f4c (MD5) Previous issue date: 2010-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / With the intensification of fish farming in Brazil the cultivation of tilapia has been expressive, mainly in the Northeast and Southeast. Due to the growth of exports, it had pushed up the installation of processing units fillet because of their high commercial value can yield more than 30% of the weight of the animal. The rest is considered waste of no commercial value (meat remains, head, skin, bones, scales and viscera) which had to be discarded without treatment, represent a serious environmental problem. However, carcasse is a rich material protein while, visceras is a source in digestive enzymes, including proteases, which can be used in the food industry and the production of protein hydrolysates. Thus, the objective of this study was to produce and characterize fish protein hydrolysate by enzymatic autolysis, and compare its performance with a commercial enzyme. For this, the following enzymatic sources were used: crude extracts of intestine with concentrations of 100 and 600 mg / mL and an extract with commercial alcalase to 0,5% (v/v). All extracts had their proteolytic activities and protein concentration determined. Later, three fish protein hydrolysates were produced (n = 3), by two autolysis (FPH100 and 600) and another enzyme with alcalase (HPPcom). The degree of hydrolysis (DH) was calculated as the soluble peptides concentration after TCA precipitation. In the end of 4 hours the GH of FPH600 was 61, 82% of HPPcom was 44,66% and FPH100 was 28,40%. An aliquot of the last time of hydrolysis of each hydrolysate was applied in SDS-PAGE and the molecular weights were estimated to be 116,25 and 37,41 kDa. Enzymatc activities were demonstrated by zymogram. The centesimal composition showed that the carcass of tilapia has 423.60 g/kg crude protein and FPHcom, 100, and 600 have 584,80; 407,00 and 508,20 g/kg, respectively. The amino acid composition, as well as the profile of essential fatty acids, showed to supplyt the nutritional requirements of carnivorous and omnivorous shrimp in the juvenile phase. These data showed that the proteases acted on the hydrolysis and FPH produced by autolysis have characteristics to be used in the production of feed for aquatic organisms. / Com a intensificação da piscicultura no Brasil, o cultivo de tilápia tem sido expressivo, principalmente nas regiões Nordeste e Sudeste. A instalação de unidades de processamento de filé foi impulsionada pelo crescimento das exportações deste produto de alto valor comercial, que pode render mais de 30% do peso do animal. O restante é considerado resíduo sem valor comercial (resquícios de carne, cabeça, pele, ossos, escamas e vísceras) que, ao serem descartados sem tratamento, representam grave problema ambiental. Entretanto, carcaça é um material rico em proteína enquanto que as vísceras são fontes de enzimas digestivas, entre elas as proteases, que podem ser utilizadas na indústria de alimentos e na produção de hidrolisado protéico. Desta forma, o objetivo do presente trabalho foi produzir e caracterizar hidrolisado protéico de peixe a partir de autólise enzimática, bem como comparar seu desempenho com uma enzima comercial. Para tanto, foram utilizadas as seguintes fontes de enzimas: extratos brutos de intestino com concentrações de 100 e 600 mg/mL e um extrato com alcalase comercial a 0,5%. Todos os extratos tiveram suas atividades proteolíticas e concentrações protéicas determinadas. Posteriormente produziram-se três hidrolisados protéicos de peixe (n = 3), dois por autólise (HPP100 e 600) enzimática e outro com alcalase (HPPcom). O grau de hidrólise (GH) foi calculado com base na concentração de peptídeos TCA solúveis e ao final de 4 horas o GH do HPP600 foi de 61,82%, do HPPcom de 44,66% e do HPP100 de 28,40%. Uma alíquota do último tempo de hidrólise de cada hidrolisado foi aplicada em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e os pesos moleculares observados foram estimados entre 116,25 e 37,41 KDa. As atividades enzimáticas foram comprovadas mediante zimograma. A composição centesimal revelou que a carcaça da tilápia possui 423,60 g/kg de proteína bruta e os HPPcom, 100, e 600 possuem 584,80; 407,00 e 508,20 g/kg, respectivamente. A composição de aminoácidos, assim como o perfil de ácidos graxos essenciais, evidenciaram suprir os requerimentos nutricionais de camarões carnívoros e onívoros na fase juvenil. Os dados obtidos demonstram que as proteases atuaram nas hidrólises e os HPP produzidos por autólise possuem características compatíveis para ser empregada na produção de alimentos para organismos aquáticos.
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Enzimas de organismos aquáticos e suas aplicações fisiológicas

Fernandes de Castro, Patricia 31 January 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:51:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1572_1.pdf: 9123537 bytes, checksum: 14ea19be2a4c24106f67de22123487d0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Empresa Brasileira de Agropecuária / Nos últimos anos, tem-se observado um aumento na demanda por produtos pesqueiros, seguido por um significativo incremento na produção mundial de organismos aquáticos. O crescimento da indústria pesqueira gera, como consequência, uma grande quantidade de resíduos e subprodutos ricos em biomoléculas, que são indevidamente descartados no ambiente. Esses resíduos podem ser usados em diversos estudos relacionados à fisiologia digestiva de espécies aquáticas de interesse comercial e ao desenvolvimento de ingredientes alternativos que possam ser usados como componentes de rações animais. O objetivo do presente trabalho foi investigar enzimas digestivas do hepatopâncreas de camarões peneídeos e avaliar o efeito de dietas com diferentes concentrações de hidrolisado protéico de camarão (HPC) sobre o crescimento, a composição corporal e a fisiologia digestiva de juvenis de Oreochromis niloticus. Amilases do hepatopâncreas dos camarões Farfantepenaeus subtilis (13g), Litopenaeus schmitti (23g) e L. vannamei (com 11 e 25g) e proteases do F. subtilis (6 e 13g) e F. paulensis (8g) foram caracterizadas a partir de estudos de atividade enzimática, inlcuindo pH e temperatura ótima, estabilidade térmica, efeito de íons metálicos e de inibidores, eletroforeses e zimogramas. Amilases de todas as espécies estudadas apresentaram atividade residual superior a 85% em pH alcalino (7,0 a 8,0), em temperatura entre 40 e 50oC e não foram termoestáveis em temperaturas superiores a 55oC. O íon Ca2+ ativou as amilases apenas na concentração de 1mM, mas inibiu a enzima nas concentrações de 5 e 10mM. Os demais íons empregados inibiram fortemente as enzimas independente da concentração utilizada. O inibidor Tipo I de alfa amilase foi altamente eficiente sobre as enzimas de F. subtilis e L. schmitti, mas os mesmos resultados não foram observados para o L. vannamei. O zimograma de atividade revelou nove isoformas de amilases para o F. subtilis, oito para o L. schmitti e sete e dez para o L. vannamei de 11 e 25g, respectivamente. Atividades de tripsina, quimotripsina e leucino aminopeptidase foram detectadas em F. subtilis e F. paulensis. As maiores atividades de todas as proteinases também ocorreram em pH alcalino (7,5 a 9,0) e temperatura de 45 a 55oC. O zimograma de atividade revelou oito bandas proteolíticas para F. paulensis e seis para F. subtilis.. As atividades de aminopeptidases (Arg, Leu, Lys, Phe, Val) e os níveis recomendados desses aminoácidos essenciais em dietas de camarões peneídeos apresentaram correlação positiva (P<0,05). Os efeitos de diferentes níveis de inclusão de hidrolisado protéico de camarão (HPC) em dietas sobre a atividade de enzimas digestivas de juvenis da tilápia do Nilo foram avaliados e correlacionados com parâmetros de crescimento com a composição corporal. O HPC foi incluído nas dietas em concentrações de 0, 1,5, 3 e 6%. Uma dieta comercial foi usada como referência. Hemoglobina, azocaseína, BApNA, SApNA, AA- naftilamidas e amido foram usados como substratos. Apesar de terem sido observadas algumas diferenças, não houve correlação entre atividade enzimática e as diferentes concentrações de HPC das dietas. O zimograma de atividade foi realizado para analisar as mudanças no perfil das proteases digestivas causadas pela inclusão do hidrolisado protéico. Foram observadas 12 bandas proteolíticas, oito das quais responderam à incorporação do HPC. O zimograma de inibição indicou uma diminuição na atividade de três enzimas com atividade de tripsina quando o nível de inclusão do HPC aumentou, enquanto que o inverso ocorreu para uma aminopeptidase. Perfis distintos de proteases foram encontrados para cada tratamento, sugerindo uma alta adaptabilidade da tilápia do Nilo às diferentes dietas. Atividades de tripsina e de aminopeptidase tiveram correlação positiva com parâmetros de crescimento e com o teor de proteína da carcaça e correlação negativa com a taxa de conversão alimentar e com o teor de lipídeos da carcaça. Uma vez que a digestão envolve a ação conjunta de diferentes enzimas, a compreensão adequada das características das enzimas envolvidas é necessária para que a capacidade digestiva das diferentes espécies possa ser estabelecida. O estudo das enzimas pode gerar informações básicas importantes para futuras pesquisas sobre nutrição das espécies, bem como servir como ferramenta para análise de diferentes dietas
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Utilização de hidrolisado protéico de camarão em rações para tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus, L.)

LEAL, Albino Luciani Gonçalves 15 February 2007 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2017-02-06T16:53:46Z No. of bitstreams: 1 Albino Luciani Goncalves Leal.pdf: 575820 bytes, checksum: 4cc0fd6d3bf7fe9198563d35eae04f53 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-06T16:53:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Albino Luciani Goncalves Leal.pdf: 575820 bytes, checksum: 4cc0fd6d3bf7fe9198563d35eae04f53 (MD5) Previous issue date: 2007-02-15 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Aquaculture requires high-quality feeds with high protein content. So, the determination of less-expensive sources of protein which provides good growth is advantageous. Shrimp wastes have been identified as an animal protein source with great potential. Shrimp protein hydrolysate (SPH), a derived product obtained from shrimp wastes, was considered an excellent alimentary source and may serve as an useful source of protein and flavorants in food formulations. This work aimed to evaluate the nutritional quality of SPH through growth performance of juvenile Nile tilapia and its protein utilization. SPH was included in isonitrogenous diets at levels of 0, 5, 10 and 20% of fish meal protein replacement (SPH0, SPH5, SPH10 and SPH20) and offered to juvenile Nile tilapia (1.7±0.4 g) stocked in 40-L glass aquaria in a 45-day feeding trial. The inclusion of SPH did not produce statistical differences (P≥0.05) on final weight (27.18, 29.46, 26.02 and 25.19 g), survival (100%), relative weight gain (1,571, 1,624, 1,388 and 1,301%), average daily gain, ADG (0.57, 0.62, 0.54 and 0.52 g day-1), specific growth rate, SGR (7.15, 7.38, 6.85 and 6.73 % day-feed conversion ratio, FCR (1.15, 1.09, 1.13 and 1.17) and protein efficiency ratio, PER (2.26, 2.33, 2.20 and 2.14), respectively. The inclusion of SPH in diets for Nile tilapia statistically affected (P<0.05) the final fish body composition. Protein and ash contents decreased and fat content increased with SPH inclusion levels. This study clearly demonstrates that SPH could be included in diets for Nile tilapia without adverse effects on growth and protein utilization. / A produção aqüícola requer rações de alta qualidade, com alto conteúdo protéico. Assim, a determinação de fontes protéicas de menor custo e que promovam bom crescimento é benéfica. Resíduos de camarão têm sido identificados como uma fonte de proteína animal de grande potencial. Hidrolisado protéico de camarão (HPC) foi considerado como uma excelente fonte alimentar e pode servir como uma adequada fonte de proteína e flavorizante em formulações alimentares. Este trabalho objetivou avaliar a qualidade nutricional do HPC através do desempenho em crescimento de juvenis da tilápia do Nilo e sua utilização protéica. SPH foi incluído em dietas isoprotéicas em níveis de 0, 5, 10 e 20% de substituição da proteína advinda da farinha de peixe (HPC0, HPC5, HPC10 e HPC20) e ofertadas aos peixes (1,7±0,4 g) estocados em aquários de 40 L, por um período experimental de 45 dias. A inclusão do HPC não produziu diferenças estatísticas (P≥0,05) no peso final (27,18, 29,46, 26,02 e 25,19 g), sobrevivência (100%), ganho de peso relativo (1.571, 1.624, 1.388 e 1.301%), ganho de peso diário, GPD (0,57, 0,62, 0,54 e 0,52g dia-1), taxa de crescimento específico, TCE (7,15, 7,38, 6,85 e 6,73 % dia-conversão alimentar, CA (1,15, 1,09, 1,13 e 1,17) e eficiência protéica, EP (2,26, 2,33, 2,20 e 2,14), respectivamente. A inclusão do HPC nas dietas para a tilápia do Nilo afetou estatisticamente (P<0,05) a composição final dos peixes. Os teores de proteína e cinzas diminuíram e o teor de gordura aumentou com os níveis de inclusão do HPC. Este estudo claramente demonstra que o hidrolisado protéico de camarão pode ser incluído em dietas para a tilápia do Nilo sem efeitos adversos em crescimento e utilização protéica.
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OBTENÇÃO DE HIDROLISADO PROTEICO DE CARNE MECANICAMENTE SEPARADA (CMS) E CARCAÇAS MANUALMENTE DESOSSADAS (CMD) DE FRANGO POR HIDRÓLISE ENZIMÁTICA / OBTAINMENT OF PROTEIC HYDROLYSATE FROM MECHANICALLY SEPARATED MEAT (MSM) AND MANUALLY DEBONED CHICKEN CARCASSES (MDC) BY ENZYMATIC HYDROLYSIS.

Oliveira, Mari Silvia Rodrigues de 12 September 2012 (has links)
The production and use of protein hydrolysates, derived from animal and vegetable sources in specific formulations is an area of growing interest. Protein hydrolysates can be obtained mainly by three methods: alkaline hydrolysis, enzymatic hydrolysis and acid hydrolysis. However, enzymatic hydrolysis shows to be more beneficial, and with this purpose various enzymes from different sources are used in order to obtain protein rich hydrolysates. Three proteolytic enzymes called Papaína®, Flavourzyme® and Protamex® were used for hydrolysis of mechanically separated meat MSM and manually deboned chicken carcass MDC. The hydrolysis occurred in a thermostatic bath with controlled temperature, time and pH, specific to each of the three enzymes used. Proximal composition of raw materials and lyophilized hydrolysates obtained was performed. Also were performed control analysis of hydrolysis such as degree of hydrolysis, protein, total solids, ash and characterization of amino acid hydrolysates. The results were evaluated by analysis of variance and Tukey test. Protein hydrolysates obtained from MSM and MDC had high protein content characterizing them as a promising raw material in the formulation of special diets. The highest degree of hydrolysis with MCS was obtained with Papaína, and the most efficient MDC enzyme in the enzymatic hydrolysis was Papaína, followed by Protamex and Flavourzyme. The hydrolysates obtained from the MCS with Papaína obtained higher protein and soluble solids content and lower ash content when compared to other hydrolysates with Protamex and Flavourzyme. For the raw MDC, the highest levels of proteins were found in the hydrolyzate obtained with Papaína, soluble solids did not vary between Papaína and Protamex, but the enzyme Flavourzyme presented a smaller percentage of soluble solids (p <0.05) than the other two enzymes. The highest concentration of ash from the hydrolysates obtained from MDC with Protamex and Flavourzyme (6.75% to 7.97%) is the result of pH adjustment during hydrolysis. The amino acid composition of the hydrolysates demonstrates that both CMS and CMD derived from Papain obtained a composition closer to what is recommended by the control authorities. The functional properties of the hydrolysates are highly dependent on the degree of hydrolysis. The protein solubility increased with higher degree of hydrolysis and the hydrolyzate with highest solubility was MCS obtained from Papaína. The higher water retention capacity was presented by the enzyme hydrolyzate obtained with Flavourzyme on MSM and this property is inversely proportional to the degree of hydrolysis, such as the ability to retain oil which was higher with Flavourzyme on both raw materials. The emulsifying capacity was also higher with Flavourzyme on MSM, since this property also depends on the degree of hydrolysis. Therefore, based on the results, enzymatic hydrolysis becomes a useful tool for processing meat based raw materials. / A produção e a utilização de hidrolisados proteicos, oriundos de fontes animais e vegetais, em formulações específicas é uma área de crescente interesse. Os hidrolisados proteicos podem ser obtidos basicamente por três métodos, hidrólise alcalina, hidrólise enzimática e a hidrólise ácida. Porém, a hidrólise enzimática apresenta-se mais benéfica, e com este intuito várias enzimas das mais diferentes fontes são utilizadas, com a finalidade de obter hidrolisados proteicos, ricos em proteínas. Neste estudo foram utilizadas três enzimas proteolíticas denominadas de Papaína®, Flavourzyme® e Protamex® para a hidrólise de carne mecanicamente separada (CMS) e carcaça manualmente desossada (CMD) de frango. A hidrólise ocorreu em banho termostatizado com temperatura, tempo e pH controlados e específicos para cada uma das três enzimas utilizadas. Foi determinada a composição proximal das matérias-primas e dos hidrolisados liofilizados obtidos, também foram realizadas análises de controle da hidrólise como grau de hidrólise, teores de proteínas, sólidos totais, cinzas e caracterização de aminoácidos dos hidrolisados. Os resultados foram avaliados por análise de variância e teste de médias de Tukey. Os hidrolisados proteicos obtidos da CMS e da CMD de frango apresentaram alto conteúdo proteico caracterizando-se como uma matéria-prima promissora na formulação de dietas especiais. O maior grau de hidrólise com a CMS foi obtido com a Papaína, e para a CMD a enzima mais eficiente na hidrólise enzimática foi a Protamex seguida da Papaína e da Flavourzyme. Os hidrolisados obtidos a partir da CMS com a Papaína obtiveram maior teor proteico, de sólidos solúveis e menor teor de cinzas quando comparados com outros hidrolisados obtidos com a Flavourzyme e a Protamex. Para a matéria prima CMD, os maiores teores de proteínas foram encontrados no hidrolisado obtido com a Papaína, os sólidos solúveis não variaram entre a Papaína e Protamex, porém a enzima Flavourzyme apresentou um percentual de sólidos solúveis menores (p<0,05) que as outras duas enzimas. A maior concentração de cinzas dos hidrolisados provenientes da CMD obtidos com a Flavourzyme e com a Protamex (6,75% a 7,97%) é decorrente do ajustamento do pH durante a hidrólise. A composição de aminoácidos demonstra que os hidrolisados oriundos tanto da CMS como da CMD obtidos da Papaína possuem uma composição mais próxima da recomendada pelos órgãos de controle. As propriedades funcionais dos hidrolisados são altamente dependentes do grau de hidrólise. A solubilidade proteica aumentou com o aumento do grau de hidrólise e o hidrolisado que apresentou maior solubilidade foi com a CMS e com a papaína como enzima. A maior capacidade de retenção de água foi apresentada pelo hidrolisado obtido com a enzima Flavourzyme na CMS, e esta propriedade é inversamente proporcional ao grau de hidrólise. Da mesma forma a capacidade de retenção de óleo foi maior para a Flavourzyme, nas duas matérias-primas utilizadas. A capacidade emulsificante também foi maior para a Flavourzyme na CMS, já que esta propriedade também depende do grau de hidrólise. Assim, com base nos resultados obtidos conclui-se que a hidrólise enzimática torna-se uma ferramenta bastante útil na transformação das matérias-primas cárneas.

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