Reproduction in mammals is regulated by neurons that synthesize and secrete gonadotropin-releasing hormone (GnRH) and across the species these neurons are present in few numbers scattered in the hypothalamus. Due to limited neurogenesis of these neuronal cell types outside the brain in the olfactory placode, these neurons are subjected to tight regulation during embryonic development to reach their final targets in the hypothalamus, from birth until puberty for minimal secretion of hormone and during adults to achieve pulsatile secretion of the hormone. Deregulation in any of these mechanisms may lead to deleterious effects on adult reproduction and clinical pathologies like absence of puberty, hypogonadism, sterility, amenorrhea, etc. Kallmann syndrome (KS), one of these severe reproductive pathologies is an inherited disorder and patients affected with this syndrome display anosmia (inability to smell) and hypogonadotropic hypogonadism (HH). Genetic screening of molecules in these patients lead to identification of genes like KAL1, FGFR1, FGF8, PROK2, PROKR2, WDR11 and CHD7 encoding proteins that play an important role in migration and targeting of olfactory system during embryonic development however these genes account only for 30% of KS cases emphasizing the need for further characterization and identification of other genes. While these proteins are involved in ontogenesis olfactory and GnRH system, genetic screening of molecules in patients suffering from normosmic idiopathic HH lead to identification of genes encoding for Kisspeptin receptor-GPR54, TAC-TACR3, LEP-LEPR, PCSK-1, GnRH receptor-GnRHR and GnRH-1 itself that play a crucial role in occurrence of puberty or adult reproduction. Here, for my PhD thesis, we focused on studying the role of guidance molecule Semaphorin3A (Sema3A)-Neuropilin1 (Nrp1) interactions in ontogenesis of GnRH neurons during embryonic development while in adults we first addressed the question if hypothalamic Kisspeptin neurons interact with neurons containing neuronal nitric oxide synthase (nNOS), the mutation of which causes HH in mice, and physiological significance of this interactions in regulation of GnRH neurons and neuroendocrine control of female reproduction. Finally our results demonstrate that Sema3A-Nrp1 interactions are implicated in ontogenesis of olfactory and GnRH neurons during embryonic development and nNOS neurons are important mediators of peripheral estrogens-kisspeptin signaling onto GnRH neurons and adult reproduction and propose to further study the implication of nNOS neurons in reproductive pathologies.

De nombreuses données indiquent qu'un petit poids à la naissance, résultant en partie d'une sous-nutrition materno-fœtale, est associé à une augmentation de la morbidité et de la mortalité durant la période néonatale, et conduit également à un risque accru de développer à l'âge adulte un syndrome métabolique (diabète de type 2, obésité, hypertension artérielle et dyslipidémie). Les mécanismes de cette programmation prénatale sont encore mal connus et impliqueraient plusieurs molécules et systèmes physiologiques distincts. De nombreuses études suggèrent que le placenta serait impliqué dans la programmations de ces pathologies métaboliques. En effet, celui-ci constitue un organe de communication entre la mère et son fœtus et participe à la régulation de l'homéostasie fœtale. En raison de la proportion croissante de femmes présentant des troubles de la nutrition durant la grossesse et en lien avec leurs répercussions potentielles chez la descendance, il est nécessaire de mieux comprendre les interactions entre l'alimentation maternelle et l'unité fœto-placentaire et d'identifier les mécanismes impliqués dans les altérations de la croissance fœtale. En conséquent, le placenta constitue un organe de choix pour étudier les interactions entre l'alimentation maternelle et le fœtus au cours de la grossesse. Durant cette thèse, nous avons tenté d'identifier de nouvelles voies moléculaires placentaires impliquées dans le contrôle de la croissance fœtale chez le rat, puis d'étudié l'expression de ces facteurs dans des placentas humains provenant de grossesses impliquant des anomalies de la croissance fœtale. Comme la malnutrition maternelle constitue une part importante dans l'étiologie de la restriction de croissance intra-utérine (RCIU), nous avons utilisé un modèle expérimental effectué chez le rat, qui consiste en une réduction (de 50% à 70%) de la ration alimentaire quotidienne maternelle durant la gestation. Ces régimes conduisent à des troubles de la croissance de l'unité fœto-placentaire révélés par des réductions drastiques du poids du placenta et des poids de naissance à terme. Afin d'identifier de nouvelles voies placentaires impliquées dans RCIU, nous avons utilisé deux méthodologies différentes: une approche protéomique et une évaluation de deux protéines récemment caractérisées.Premièrement, nous avons étudié le protéome placentaire chez le rat RCIU provenant de mères dénutris par une analyse protéomique (2D-PAGE et spectrométrie de masse). Cette stratégie nous a permis de découvrir de nouvelles voies modulées par le RCIU et, étonnamment, des modulations importantes ont été observées pour plusieurs protéines mitochondriales, suggérant un effet ciblé de la dénutrition sur ces organites. Par la suite, en utilisant diverses techniques d'analyses moléculaires, protéomiques et fonctionnelles, nous avons montré que ces organites élaborent une réponse adaptative à la restriction alimentaire maternelle qui pourrait avoir des conséquences sur la régulation de la croissance fœtale. Deuxièmement, nous avons étudié deux autres protéines atypiques: le brain-derived neurotrophic factor et l'hormone apéline. Nos résultats suggèrent que ces deux facteurs pourraient être impliqués, au niveau placentaire, dans le contrôle de la croissance fœtale à la fois chez le rat et chez l'homme. En conclusion, comme les techniques cliniques actuelles ne permettent pas de diagnostiquer avec précision un RCIU, nos résultats pourraient permettre une meilleure compréhension de la physiopathologie placentaire et permettre de développer de nouveaux marqueurs de diagnostique et/ou de traitement dans le but d'améliorer la croissance placentaire et fœtale en conditions pathologiques.

La maladie de Parkinson (MP) est caractérisée par la mort des neurones dopaminergiques de la substance noire et la présence de corps de Lewy. Son diagnostic reste sujet à des erreurs notamment aux stades précoces. Les cellules mononucléées sanguines périphériques (PBMC) jouent un rôle dans la cascade délétère et sont le reflet d'événements associés à la MP. Même si elles ne représentent qu'un faible pourcentage, les formes génétiquement déterminées permettent d'identifier des sujets à un stade précoce. Nous avons émis l'hypothèse que les PBMC pouvaient constituer un modèle d'étude reflétant certains mécanismes de la dégénérescence du vivant du patient. Nous avons réalisé des études du transcriptome chez différents groupes de sujets malades ou porteurs de mutations pour y déceler les gènes et voies de signalisation cellulaire dérégulés. Nous avons d'abord étudié le profil d'expression génique de sujets porteurs de la mutation G2019S de LRRK2. L'analyse des puces a permis d'identifier des perturbations de voies impliquées dans la MP comme l'oxydation mitochondriale, l'inflammation et la guidance axonale. Des altérations de la voie des MAPK, du cytosquelette d'actine et du transport vésiculaire ont été notées. La liste des gènes dérégulés permet de séparer les individus selon leur statut génétique. La mutation LRRK2 est associée à un profil d'expression génique dès les stades précoces identifiable dans les PBMC. Nous nous sommes ensuite intéressés à une autre forme de MP avec duplication de SNCA. Nous avons caractérisé la relation entre le génotype et le phénotype clinique des sujets de cette famille. La duplication s'étend sur 4,928 Mb, comporte 31 gènes et résulte d'une recombinaison homologue non allélique. L'analyse de l'expression des gènes présents dans la duplication dans les PBMC d'un sujet à un stade pauci-symptomatique a montré une surexpression de SNCA. Nous avons comparé nos analyses chez les porteurs des mutations LRRK2 et SNCA et chez des parkinsoniens sporadiques. Nos analyses montrent que les sujets LRRK2 et les sujets sporadiques présentent des dérégulations communes de voies de signalisation. En revanche, les voies dérégulées chez le sujet dupliqué reflètent la pathogénie de SNCA comme l'autophagie et les voies lysosomales. Nous nous sommes intéressés à l'expression des 4 isoformes de SNCA dans les PBMC de ces 3 groupes d'individus. Les patients sporadiques et LRRK2 montrent une diminution de l'expression des 4 isoformes de SNCA dans leur PBMC. Chez le sujet dupliqué, on observe uniquement une surexpression de l'isoforme 112. Nous avons ensuite identifié les voies moléculaires associée

Objectifs: D'une part étudier les effets de la SCP à moyen et long terme chez les patients de notre centre ayant une forme génétique de MP, d'autre part effectuer une étude clinique, génétique et transcriptomique d'un groupe de patients parkinsoniens ayant une mutation du gène SCA2 (dits patients SCA2).Méthode: 1/ Effet de la SCP chez des patients ayant une forme génétique de MP: cinq patients ayant une forme génétique de MP, appartenant à une cohorte de 52 patients parkinsoniens ayant bénéficié d'une stimulation à haute fréquence du noyau sous-thalamique entre 1998 et 2000, ont été examinés avant la chirurgie puis à 1 et 5 ans. Les patients ont été évalués avec et sans L-dopa par plusieurs échelles: UPDRS II et III,dyskinésies, Schwab et England, Mattis et MADRS. Les résultats ont été comparés aux patients de la même cohorte ayant une forme sporadique de MP.2/ Etude des patients parkinsoniens SCA2 : la description clinique est rapportée rétrospectivement. Les études génétique et transcriptomique ont été effectuées chez 7 patients parkinsoniens et 8 patients cérébelleux SCA2, sur des cellules mononuclées sanguines. Le séquençage de l'ADN a permis de déterminer la longueur de la répétition de triplets CAG et d'identifier les interruptions par des triplets CAA. Le transcriptome de ces patients ainsi que de 13 témoins (sujets sains appariés sur le sexe et l'âge) a été réalisé sur deux plateformes de puces à ADN (Agilent et Illumina). L'analyse de l'expression des gènes chez les patients parkinsoniens et cérébelleux comparés à leurs contrôles respectifs a été réalisée avec le logiciel Genespring GX. Les gènes ayant une expression significativement différente (variation d'expression >1,3 et Welch t-test p< 0,05) ont été analysés à l'aide du logiciel Ingenuity Pathways Analysis qui identifie les voies canoniques significativement dérégulées.Résultats: 1/ Effet de la SCP chez des patients ayant une forme génétique de MP: les résultats de l'ensemble des parkinsoniens étaient comparables à la littérature. Les mouvements involontaires compliquant la dopathérapie s'amélioraient au cours du temps. Les patients ayant une forme génétique bénéficiaient d'un meilleur résultat que les autres parkinsoniens sur les signes dopasensibles et sur les complications dopa-induites.2/ Etude des patients parkinsoniens SCA2 : cliniquement, la MP était tout à fait classique, l'âge moyen de début était de 55,2 ans, tous les patients étaient dopasensibles et les complications typiques de la MP étaient constatées. Le séquençage de l'ADN a montré des expansions légèrement plus longues chez les patients cérébelleux (37-41 triplets) que chez les patients parkinsoniens (35-39). Les patients cérébelleux n'avaient pas d'interruptions CAA sur leur allèle muté. Tous les patients parkinsoniens avaient en revanche une séquence d'interruptions CAA inhabituelle. Pour ce qui concerne l'étude transcriptomique, nous avons constaté chez les patients cérébelleux et chez les parkinsoniens la dérégulation de l'expression de gènes connus pour interagir avec l'ataxine 2 (DDX6, PABP, gènes de la voie du métabolisme des inositol phosphates), ainsi que de gènes impliqués dans le métabolisme du cancer et dans l'immunité. Les patients parkinsoniens avaient un dérèglement des voies de signalisation de la sclérose latérale amyotrophique, du VEGF et de HIF1. Chez ces patients, l'expression de SNCA était diminuée, y compris chez les patients les moinsVIIsymptomatiques, alors qu'elle ne l'était pas chez les cérébelleux. Chez les patients cérébelleux, plusieurs voies concernant le métabolisme des ARN étaient dérégulées, ainsi que le métabolisme du phosphate inositol. Plusieurs voies canoniques impliquant l'apoptose étaient dans les 2 groupes de patients, avec une expression de gènes pro- et antiapoptotiques en faveur de l'apoptose chez les cérébelleux et en sa défaveur chez les parkinsoniens.

La dérégulation du métabolisme glucidique conduisant au développement d'une hyperglycémie est classiquement associée aux maladies métaboliques, telles que le diabète de type 2 et l'obésité. Le foie est un organe clé dans le contrôle de l'homéostasie glucidique. Ainsi, lors d'un état post-prandial (après un repas), il utilise le glucose pour produire de l'énergie par la voie de la glycolyse, mais surtout stocke l'excès de glucose sous forme de glycogène par la voie de synthèse du glycogène et l'excès d'énergie sous forme d'acides gras par la voie de la lipogenèse. Ces voies sont sous le contrôle des hormones insuline et glucagon qui, en fonction des changements nutritionnels, régulent respectivement l'utilisation (glycolyse) et la production (néoglucogenèse) de glucose en induisant l'expression des enzymes de ces voies métaboliques. Plus récemment, il a été montré que les voies de la glycolyse et de la lipogenèse sont également régulées par le glucose qui active le facteur de transcription ChREBP (Carbohydrate Response Element Binding Protein) et induit de ce fait l'expression des gènes de la glycolyse, tels que la LPK (Liver Pyruvate Kinase), et de la lipogenèse, tels que FAS (Fatty Acid Synthase) et ACC1 (Acetyl-CoenzymeA Carboxylase 1). Le récepteur nucléaire Farnesoid X Receptor (FXR), un facteur de transcription activé par des ligands, en plus de son rôle très important dans la régulation des acides biliaires et des lipides, contrôle aussi le métabolisme glucidique dans le foie. Ainsi, FXR inhibe l'expression des gènes des voies de la glycolyse et de la lipogenèse, probablement en interférant avec le facteur de transcription ChREBP, comme le propose une étude récente. Les objectifs de ma thèse ont été de caractériser deux lignées hépatocytaires humaines IHH (Immortalized Human Hepatocytes) et HepaRG d'un point de vue métabolique et d'étudier les mécanismes moléculaires d'interférence du récepteur nucléaire FXR avec l'activité du facteur ChREBP dans ces deux lignées.

H 1 parvovirus (H-1PV) is a little single stranded DNA virus that preferentially replicates in a lytic manner in transformed cells due to their expression profile that meets the requirements for the activation of H¬ 1 PV life cycle unlike normal cells. This feature is known as oncotropism. H 1PV genome is constituted by two transcriptional units. The first one is driven by the proliferation and transformation dependent P4 promoter and allows the expression of both non structural proteins NS1 and NS2, and the second one controls the expression of both capsid proteins VP1 and VP2 through the activation of P38 promoter. H-1PV life cycle tightly depends on NS1 protein that is involved in crucial events, including viral DNA replication, P38 promoter activation as well as cytotoxicity.NS1 protein is regulated at both transcriptional and post translational levels.My thesis aimed at identifying new determining elements for both of these regulations and characterizing their involvement in both H-1PV life cycle and oncotropism.

Background Exhaustion disorder (ED) is a common mental and behavioural disorder which often leads to severe negative consequences for the individual and the society. Natural environments have positive effects on mental, physiological and attentional recovery in stressed persons, which encouraged us to test if forest visits could improve recovery from ED. The main objective of the thesis was to study if visits to different kinds of forest environments have positive health effects on patients suffering from ED, and if forest visits can be utilized for rehabilitation. Methods Participants in the MiniRest study (n=20) and the Pilot study (n=6) (Papers I and II) were recruited from the Stress Rehabilitation Clinic (SRC) at the University Hospital in Umeå.  Participants in the randomised controlled study, ForRest (n=99) and the Interview study (n=19) (Papers III and IV) were recruited from both the SRC and the Swedish Social Insurance Agency in Umeå. The MiniRest study involved only female ED patients and focused on immediate mental, physiological and attention capacity effects in one urban and three forest environments. The Pilot study investigated the practical arrangements for the forthcoming ForRest study. Participants in the ForRest study were randomised into either a three-month forest rehabilitation group; A (forest visits twice a week/4 hours per day) or to a control condition; B. Both groups received Cognitive Behavioural Rehabilitation (CBR) at 24 occasions/once a week after the three-month study period. Preferences for forest environments, mental state and attention capacity were studied for group A only. Psychological health measurements and sick leave data were compared between the groups after (i) the forest rehabilitation and (ii) the CBR. The Interview study was conducted according to grounded theory methodology and consisted of 19 participants from group A to explore personal experiences from the forest rehabilitation. Data collection was implemented through questionnaires, medical records, physiological measurements, and interviews. Results Exposure to forest environments was associated with higher preference, more favourable mental state and physiological responses, and increased attention capacity compared to an urban environment (Paper I). Open and accessible forest environments were preferred (Papers I, II and III). Recovery from ED was found in both groups in the ForRest study, but there were no differences between the groups over time. In group A, positive effects on mental state and attention capacity were found during the forest visits. An interaction effect was found with more positive effects on mental state during spring compared to autumn (Paper III). Solitude, feelings of freedom and no demands were important for finding peace of mind during the forest visits. Moreover, easier access to peace of mind, reflective thinking and positive feelings were reported as the forest rehabilitation progressed (Papers II and IV). Conclusions Forest visits have restorative effects for ED patients through enhanced mental well-being, easier access to peace of mind, beneficial physiological reactions and increased attention capacity which support the use of forest environments in rehabilitation. However, forest rehabilitation tested in a randomised controlled trial did not improve recovery from ED. Potentially rehabilitation with CBR and forest visits integrated could be more effective and should be further investigated in nature-assisted rehabilitation for ED patients.

Le commerce des substances chimiques constitue l’une des principales activités économiques mise en cause dans les pollutions environnementales, et dans l’augmentation de certaines maladies mortelles ou invalidantes, qu’elles soient d’origine professionnelle ou non. Le règlement REACH, acronyme de « registration evaluation authorisation of chemicals » définitivement adopté le 18 décembre 2006, et entré en vigueur le 1er juin 2007, vise à encadrer le secteur des substances chimiques, pour élever le niveau de protection de la santé humaine et de l’environnement tout en améliorant la compétitivité de l’industrie chimique européenne. Le recours à un règlement d’applicabilité directe et immédiate permet l’harmonisation des ordres juridiques des États membres en vue d’une part, de contribuer au processus d’intégration du marché intérieur, et d’autre part, afin de permettre une application uniforme des prescriptions à visée environnementale et sanitaire. Fondé sur le principe de précaution et le développement durable, le règlement REACH constitue un instrument de régulation sectorielle, renvoyant à une vision systémique, dont l’objectif est d’établir un dialogue entre des enjeux a priori antinomiques. Aussi, cette norme met-elle en exergue l’émergence et la construction d’un équilibre de ces trois enjeux en présence. La question qui se pose est de savoir si, confronté à la réalité économique, sociale et environnementale, cet équilibre peut se maintenir dans la pratique, ou s’il ne tend pas à se fragiliser, faisant potentiellement ressurgir le conflit originel existant entre les exigences marchandes et non-marchandes. / The trade of chemicals is one of the one of the main economics activities involved in the environmental pollutions and in the increase of certain fatal or invalidating diseases, professionals or not. The REACH regulation, acronym of « registration, evaluation, authorization of chemicals », of 18 December 2006, came into force the July 1st, 2007, to improve the protection of human health and the environment from the risks that can be posed by chemicals, while enhancing the competitiveness of the european chemical industry. The use of a regulation of direct and immediate applicability allows the harmonization of laws of each member states in order to on one hand, contribute in the process of market integration and on the other hand, allow a uniform sanitary and environmental prescriptions application. Based on the precautionary principle and the sustainable development, the REACH regulation instrument gives rise to a systemic approach with the objective to establish a dialogue between imperatives a priori divergent. This norm highlights the emergence and the construction of a balance of these three imperatives present. The question is if, confronted with the economic, environmental and sanitary reality, this balance can persist in practice, or if it becomes uncertain, to lead potentially, the reappearance of the original conflict between economics and non-economics imperatives.

The main goal of this diploma thesis was to summarize crimes against health in accordance to Chapter I Title II of the Criminal Code. Firstly I focused on history of the crimes against health. As these crimes were present during the whole human being, my goal was to describe the main historical milestones from the beggining of the Czech state until the publication of the present Criminal Code. In another chapter I described crimes against health from the criminological point of view. I defined individual types of offenders of these crimes, their motivation, causation why are they commiting crimes and last but not least the possible way how to prevent these crimes. Third chapter contains description of the main elements in crimes against health. There are four obligatory signs of every criminal offence. The object, the subjective point, the objective point and the perpetrator. Main part of this work is devoted to the analysis of the particular crimes according to Chapter I Title II of the Criminal Code. I devided this part systematicly into two chapters - intentional crimes and crimes caused by negligance. Chapter about the crimes caused by negligance describes more detailed crimes against health caused by road accidents, doctors and sportsman. There is an extensive practise of the courts in this...

Environmental contamination with heavy metals, especially of soils, has been a continuousproblem worldwide since the beginning of the industrial revolution. Heavy metal emissionshave increased continuously since 1900 and the metals accumulate in the environment. Pulpand paper mill factories, and factories which produce sulphuric acid emit heavy metals,among others lead (Pb), copper (Cu) and zinc (Zn). Results from previous studies showedthat the soils near factories had higher concentrations of these pollutants than the controlplace. In this study I want to determine the effects of industrial heavy metal emissions of onehistoric and one present industry on nearby soil heavy metal concentrations.Samples were taken near one historically heavily contaminated site, the old sulphite factoryin Rydöbruk (1897-1944) and near the present Stora Enso paper mill in Hyltebruk. As acontrol site, I compared these with Rocknen nature reserve area.At each site I took 6 soil samples, representing the top 15-20 cm of soil and organic material.Samples were analysed with an Atomic Absorption Spectrometer and the concentrations oflead, copper and zinc were determined per ashed dry material.I analyzed the samples at the laboratory using the guideline from the Swedish StandardInstitute for water analysis.The concentrations of the soil samples showed no significant difference between the naturereserve area and the industrial sites (One-way ANOVA). This was due to very variableorganic content within and between the sites.Organic content of the samples has a significantly effect on the metal concentrations for Pband Cu (Linear Regression test). In conclusion, metals can accumulate in the vegetation, andin case of Pb and Cu there is a correlation between their concentration and the amount oforganic matter. Therefore in future studies it is best if soil with very high organic content orvegetation is used to determine if forest soil near industries are affected by past or presentindustrial emissions of heavy metals.