Orientador: Selma Giorgio, Luciana Maria de Hollanda / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia. / Made available in DSpace on 2018-08-18T19:40:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_FlaviaLuna_M.pdf: 5109370 bytes, checksum: b5d1a1158570ae39829ed8ec9ff682e5 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Pseudomonas aeruginosa é um dos principais patógenos oportunistas responsáveis pelas infecções nosocomiais. Essas infecções representam um grave problema de saúde para pessoas com feridas graves e queimaduras, sendo responsável por altas taxas de mortalidade nos pacientes. Os tecidos cronicamente lesados apresentam microáreas de hipóxia, pouco vascularizadas, que são extremamente difíceis de serem tratadas, diminuem e alteram os efeitos dos medicamentos propiciando que linhagens multiresistentes desse patógeno infectem e sobrevivam. Assim, torna-se imprescindível o desenvolvimento de tratamentos que sejam eficazes tanto no combate do patógeno, como na regeneração do tecido destruído. A terapia com oxigenação hiperbárica (HBO) promove a regeneração tecidual pela formação de novos vasos, apresenta propriedades bacteriostáticas e bactericidas e pode atuar de forma sinérgica com antibióticos. O objetivo geral deste trabalho foi avaliar o papel da HBO no crescimento de P. aeruginosa, na ação de imipenem e em macrófagos e peles artificiais infectadas com esse patógeno. Nossos resultados mostraram que a exposição de seis cepas de P. aeruginosa a HBO (100% de O2 a 3 ATA pressão) diminui o crescimento bacteriano, além de potencializar o efeito de imipenem/cilastatina no combate a esta bactéria. A exposição a HBO durante 90 minutos protegeu macrófagos peritoneais da lise causada pela infecção bacteriana. Quando peles artificiais infectadas com P. aeruginosa foram expostas a HBO a carga bacteriana destes tecidos diminuiu. Os nossos resultados evidenciam a importância do tratamento hiperbárico no controle de infecções causadas por este patógeno / Abstract: Pseudomonas aeruginosa is a major opportunistic pathogens responsible for nosocomial infections. These infections represent a serious health problem for people with severe wounds and burns and are responsible for high mortality rates in these patients. The chronically injured tissues have small areas of hypoxia, these areas, low vascularization, are extremely difficult to treat, reduce and alter the effects of medicines providing that multiresistant strains of this pathogen to infect and survive in these places. Thus, it is essential to develop a treatment that is effective both in combating the pathogen, as in the regeneration of damaged tissue. Therapy with hyperbaric oxygen (HBO) promotes tissue regeneration by new vessel formation, has bacteriostatic and bactericidal properties and can act synergistically with antibiotics. The aim of this study was to evaluate the role of HBO on the growth of P. aeruginosa, in the imipenem action and infected macrophages and artificial skin infected with this pathogen. Our results show that exposure of six strains of P. aeruginosa to hyperbaric conditions (100% O2 at 3 ATA pressure) reduces bacterial growth, and maximize the effect of imipenem/ cilastatina against this bacterium. Exposure to HBO for 90 minutes protected macrophages from lysis caused by bacterial infection. Artificial skins infected with P. aeruginosa and exposed to HBO showed a decrease in bacterial load. These results support the importance of hyperbaric oxygen therapy in control infections caused by this pathogen / Mestrado / Imunologia / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Fabio Trindade Maranhão Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T03:13:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Blanco_YaraCarollo_M.pdf: 1932159 bytes, checksum: 7fa3ee714af53f1bf4da1434c08a29f5 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A malária é sem dúvida a doença parasitária mais importante do mundo, infectando 300-500 milhões de pessoas e levando a óbito cerca de 1-2 milhões de indivíduos anualmente. Malária cerebral (MC) é o mais importante tipo de complicação nas infecções maláricas. MC é uma síndrome multifatorial, entretanto sua patogênese ainda não foi totalmente elucidada. Diversos estudos mostram a adesão de eritrócitos infectados (EI) no endotélio microvascular do hospedeiro. No entanto, várias evidências indicam que um desbalanço da resposta imune e da homeostase, acarretando numa elevada expressão de citocinas pró-inflamatórias também desempenham um papel importante na patogênese da MC. O modelo utilizando camundongos C57BL/6 infectados com Plasmodium berghei ANKA (PbA) parece ser o que mais se assemelha a MC humana, já que em ambos casos ocorre um aumento significativo de citocinas próinflamatórias, da destruição neuronal, da hemorragia cerebral e da concentração de lactato. A terapia de oxigenação hiperbárica (HBO) tem sido amplamente utilizada como potencializador de cicatrização e contra microrganismos anaeróbicos. No entanto, nos últimos anos, diversos estudos têm mostrado que o oxigênio pressurizado é capaz de proteger contra a destruição da barreira hemato-encefálica (BHE), inibir a destruição neuronal, reduzir a produção de citocinas pró-inflamatórias e a expressão ICAM-1, receptor leucocitário, e de EI. Neste estudo, avaliamos os efeitos da HBO na prevenção dos sintomas da MC em camundongos infectados com PbA e nos eritrócitos expostos diretamente ao oxigênio hiperbárico. A utilização do oxigênio hiperbárico mostrou-se capaz de reduzir significativamente a taxa de mortalidade associada à malária cerebral experimental, assim como uma redução da queda da temperatura corporal e dos níveis de parasitemia. Além disso, nossos resultados demonstram que a terapia com oxigênio hiperbárico impede a destruição da BHE. Testes In vitro mostraram que a exposição direta de eritrócitos sadios e de eritrócitos infectados (EI), á HBO não é tóxica e nem capaz de alterar a viabilidade e infectividade de EI. Por último, mostramos que o tratamento com HBO realizado após o quarto dia de infecção (quando a parasitemia já é patente), retarda o aparecimento dos sintomas neurológicos da malária cerebral e morte associada / Abstract: Malaria is the world¿s most nefarious infectious disease, affecting 300-500 million people and leads to death of 1-2 million individuals per year. Cerebral malaria (CM) is the most serious complications that might occur during a malarial infection. CM is a multifactorial syndrome; however its pathogenesis is still a matter of debate. Several studies show that in adhesion of infected erythrocytes (IE) to the host microvascular endothelium is involved. Nevertheless, several bodies of evidence indicate that a unbalance in host immune response and homeostasis, leading to the expression at higher levels of proinflammatory cytokines. Infection of C57BL/6 mice with IE of Plasmodium berghei ANKA (PbA) is the largely used model for CM, as a significant augmentation in the expression levels of proinflammatory cytokines and lactate, neuronal damage and cerebral hemorrhage also occurs. Hyperbaric oxygen therapy (HBO) has been widely used against anaerobic microorganism and as an adjunct therapy in surgeries. However, in the last year several studies have shown that HBO is able to prevent brain-blood-barrier (BBB) breakdown, inhibit neural damage and the syntheses of proinflammatory cytokines and the expression of ICAM-1, a the host receptors involved in the adhesion of leukocytes and IE. Herein, we evaluated the HBO effects in preventing CM specific clinical signs in PbA-infected mice and directly against IE of PbA. The data provided by us demonstrated that HBO treatment reduces significantly CM associated mortality and clinical outcomes, such as hypothermia, BBB dysfunction and is able to inhibit parasite burden early on the infection. In vitro analysis showed that directly exposure to HBO, up to six hours, is not harmful to health erythrocytes neither inhibit parasite development and infectivity. Finally, HBO treatment was able to delay significantly the CM neurological signs and death, even thought administrated after parasite establishment / Mestrado / Mestre em Parasitologia

Orientador:Selma Giorgio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-09T03:42:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ayres_DianaCopi_M.pdf: 1836758 bytes, checksum: 420db1cc65cdcfd2ad1eb3aa3a054589 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A Leishmania amazonensis, espécie transmitida principalmente na região amazônica, está associada com a presença de lesões cutâneas locais e a quimioterapia é a principal forma de controle da doença, já que vacinas efetivas ainda necessitam ser desenvolvidas. Neste contesto, tem havido uma intensa busca por compostos sintéticos ou produtos naturais com potencial para o tratamento da leishmaniose que evite a exposição de pacientes a drogas potencialmente tóxicas. A própolis é uma resina que abelhas coletam de diferentes exsudatos de plantas. Ela apresenta muitas atividades farmacológicas e já vêm sendo utilizada para o tratamento de diversas doenças. No presente trabalho, avaliamos a atividade leishmanicida da Anfotericina B, Glucantime, Miltefosina e dos imunoestimuladores Propinobacterium acnes (P. acnes) e Polyinosinic-Polyribocytidylic acid (Poly IC) no modelo in vitro em condições de hipóxia (6% O2) e de Glucantime, própolis e P. acnes no modelo in vivo em condições de hiperóxia (100% O2 a uma pressão de 2.5 ATA). Primeiramente, nós descrevemos o efeito da Anfotericina B, Glucantime, Miltefosina, P. acnes e Poly IC em condições de normóxia e hipóxia. Em condições hipóxicas, todos os compostos foram menos efetivos em macrófagos peritoneais infectados com L. amazonensis. Avaliamos também o efeito de diferentes tratamentos no modelo in vivo de infecção com L. amazonensis na região do dorso. Nossos resultados mostram a análise dos efeitos do extrato etanólico de própolis vermelha tipificada, assim como dos géis de própolis e papaína, Glucantime e P. acnes isolados ou juntamente com o tratamento hiperbárico. Grupos de camundongos BALB/c tratados com Glucantime, Glucantime e HBO ou Glucantime e gel de própolis apresentaram uma diminuição significativa do tamanho das lesões, comparado com as lesões de animais do grupo controle. Diferenças significativas entre os tecidos das lesões de camundongos infectados com L. amazonensis e não tratados, tratados com gel de própolis, gel de papaína, Glucantime, Glucantime e gel de própolis ou P. acnes, submetidos ou não a HBO foram observadas através da análise histopatológica. Finalmente, investigamos a produção das citocinas INF-??e IL-4 por camundongos BALB/c infectados com L. amazonensis e tratados com gel de HBO, própolis, Glucantime, Glucantime e gel de própolis ou Glucantime e HBO. O único grupo de camundongos a apresentar uma produção de INF-??maior que o grupo controle foi o grupo tratado com Propaína. Não foi observada a produção de IL-4 nos grupos analisados / Abstract: L. amazonensis, a species transmitted mainly in the Amazon region, which is associated with localized cutaneous lesions and chemotherapy remains the mainstay for the control of leishmaniasis, as effective vaccines have yet to be developed. In this context, there is an intense search for potential new synthetic compounds and natural products for the treatment of leishmaniasis that avoids exposure to potentially toxic drugs. Propolis is a resinous substance that honey bees collect from different plant exsudates. It posses versatile valuable pharmacological activities and has, to date, been taken in internal and external dosage forms for the treatments of various diseases. In this work we evaluated the leishmanicidal activity of Amphotericin-B, Glucantime, Miltefosine and the immunostimulatory Propinobacterium acnes (P. acnes) e Polyinosinic-Polyribocytidylic acid (Poly IC) in vitro under hypoxic (6% O2) and of Glucantime, propolis and P. Acnes in vivo under hyperoxic conditions (100% O2 at a pressure of 2.5 ATA). First, we describe the effect of Amphotericin-B, Glucantime, Miltefosine and the immunostimulatory P. Acnes and Poly IC under normoxic and hypoxic conditions. Under hypoxic condition all compounds were less efective in L. amazonensis infected peritoneal macrophages. We also evaluated the role of different treatment in a in vivo model of rump infection, with leishmaniasis. We describe the effects of ethanolic extract of typified Brazilian red propolis sample, red propolis and papain gel, Glucantime and the imunomodulator P. acnes with or with out the HBO terapy. For this reason, we have performed a longitudinal analysis in the expanding lesions of the susceptible BALB/c mouse. BALB/c mice treated with Glucantime, a combinated therapy of Glucantime and HBO or Glucantime and propolis gel showed significant delay in lesion development and reduction in lesion parasite burdens compared with control mice. Significant differences in the tissue pathology between red propolis and papain gel, Glucantime and P. acnes with or without the HBO terapy and untreated mice were observed by the end of treatments. Finally, we investigated the citokyne production by BALB/c mouse infected with L. amazonensis and treated with propolis gel, Glucantime and HBO terapy. Propolis gel was the only treatment that increases the INF-??productin. We do not observe IL-4 production in the tested groups / Mestrado / Mestre em Parasitologia

Orientadores: João Jose Fagundes, Wu Feng Chung / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T12:33:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_AntonioAngelo_D.pdf: 7742775 bytes, checksum: 2cabe2d42821253fa63080904d8d166b (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A cicatrização das anastomoses intestinais depende de fatores locais e sistêmicos. A peritonite é fator importante que pode alterar a cicatrização das anastomoses no intestino. A hiperóxia hiperbárica (HBO) consiste na inalação de oxigênio a 100% em pressão superior à atmosférica. OBJETIVO: Analisar o efeito da oxigenoterapia hiperbárica sobre a resistência mecânica de anastomoses realizadas em cólon distal de ratos na presença de peritonite induzida por ligadura e punção cecal utilizando o teste biomecânico de Energia Total de Ruptura (ETR). MATERIAL e MÉTODO: Foram utilizados 45 ratos distribuídos em três grupos de 15 animais. No Grupo Controle (GC), realizou-se anastomose no cólon distal sem peritonite. No Grupo Peritonite (GP), realizou-se anastomose seis horas após a indução da peritonite por ligadura e punção cecal. No Grupo Câmara Hiperbárica (GCH), realizou-se anastomose seis horas após a indução da peritonite por ligadura e punção cecal. Os animais dos GC e GP foram mantidos em ar ambiente. Os animais do GCH foram colocados em uma câmara hiperbárica experimental para inalarem oxigênio a 100%, a duas atmosferas absolutas, durante 120 minutos, por quatro dias consecutivos. A eutanásia ocorreu no quinto dia do experimento. Todos os animais foram submetidos ao Teste de Resistência Biomecânico Energia Total de Ruptura (ETR). A Energia Total de Ruptura foi definida como a energia interna acumulada necessária para promover o rompimento do cólon após a imposição de uma força externa de tração. RESULTADOS: O Grupo Peritonite apresentou menor média de ETR que o Grupo Controle. Não houve diferença estatística entre o Grupo Peritonite e o Grupo Câmara Hiperbárica. CONCLUSÃO: A oxigenoterapia hiperbárica não alterou a resistência mecânica de anastomoses realizadas no cólon distal de ratos na presença de peritonite induzida por ligadura e punção cecal / Abstract: The cicatrization of bowel anastomosis depends on local and systemic factors. Peritonitis is an important factor that can alter the cicatrization of anastomosis in bowels. The HBO consists of inhaling oxygen at 100% under a pressure greater than the surrounding atmosphere. PURPOSE: To analyze the effect of hyperbaric oxygen therapy on the mechanical resistance of the anastomosis in the distal colon of rats in the presence of peritonitis induced by cecal ligation and puncture using the Total Energy Rupture biomechanical test (ETR). MATERIAL and METHOD: We used 45 rats divided into three groups of 15 animals. In the Control Group (CG) distal colon anastomosis was carried out without peritonitis. In the Peritonitis Group (GP), anastomosis was carried out six hours after the induction of peritonitis by cecal ligation and puncture. In the Hyperbaric Chamber Group (GCH), anastomosis was carried out six hours after induction of peritonitis by cecal ligation and puncture. The animals in the study and control groups were kept in environmental air. The GCH animals were placed in an experimental hyperbaric chamber to inhale 100% oxygen, at two absolute atmospheres for 120 minutes, for four consecutive days. Euthanasia occurred on the fifth day of the experiment. All animals were submitted to the Total Energy Rupture biomechanical test (ETR). The Total Energy Rupture was defined as the accumulated internal energy necessary to promote the rupture of the colon after the imposition of an external force of traction / Doutorado / Pesquisa Experimental / Mestre em Cirurgia

Orientador: Fabio Trindade Maranhão Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T23:13:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Blanco_YaraCarollo_D.pdf: 7163711 bytes, checksum: 880b23b56e210670cf37c82408110b1b (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A Malária é a principal doença parasitária do mundo, infectando 300-500 milhões de pessoas e levando ao óbito cerca de 1 milhão de indivíduos anualmente. As infecções maláricas geralmente não apresentam complicações, no entanto, infecções por Plasmodium falciparum podem se desenvolver em formas graves da doença, como a malaria cerebral. A malaria cerebral e considerada uma síndrome multifatorial, envolvendo a citoadesão de eritrócitos infectados por P. falciparum (EIPf) através de diferentes receptores como CD36, ICAM-1, VCAM, P-selectina e E-selectina, sendo o ICAM-1 apontado como o principal receptor. Varias evidências sugerem ainda que o desbalanço da resposta imune do hospedeiro, a ativação endotelial e alterações na cascata de coagulação desempenham papel importante na patogênese da MC. Além disso, outros fatores como a presença de heme livre e NOS também tem sido apontados como essenciais para o desenvolvimento da MC... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Malaria still is a major parasitic disease in the world, infecting 300-500 million people and leading to death about 1 million people annually. Usually malaria infections do not lead to complications, however some infections, mainly, by Plasmodium falciparum can evolve into severe forms of disease such as cerebral malaria (CM). CM is considered a multifactorial syndrome involving cytoadhesion of P. falciparum-infected erythrocytes (PfEI) to different host receptors such as CD36, VCAM, P-selectin and E-selectin and ICAM-1 , which is considered the main receptor involved in MC. A large body of evidences suggests that the imbalance of the host immune response, endothelial activation and changes in the coagulation cascade play an important role in the pathogenesis of CM. Moreover, of free heme, and NOS has also been identified as essential for the development of CM...Note: The complete abstract is available with the full electronic document / Doutorado / Parasitologia / Doutor em Parasitologia

Orientador: Selma Giorgio / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T16:29:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_WagnerWelberArraisda_D.pdf: 2543782 bytes, checksum: d4c1a96c9dabbacb3872004b7f017fb8 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Nas infecções com o parasito do gênero Leishmania a incapacidade da célula hospedeira destruir os amastigotas leva à lesão a cronificar-se. A persistência e o aumento da carga parasitária levam a formação de um granuloma macrofágico, que resulta em áreas de inadequada perfusão e conseqüente alteração do microambiente tecidual. Assim, neste trabalho avaliamos durante a evolução da lesão de camundongos infectados com L amazonensis a expressão das proteínas HIF-1a e VEGF, que respondem ao estresse microambiental. Paralelamente, investigamos protocolos terapêuticos com HBO que modulem a curva de crescimento da lesão em modelos animais da infecção por Leishmania amazonensis. A expressão de HIF-1a ocorreu nas fases iniciais, crônicas e fases finais da infecção murina com L. amazonensis. Nas lesões cutâneas de camundongos da linhagem BALB/c a expressão de HIF-1a foi de localização difusa na lesão, enquanto que a expressão de HIF- 1a em lesões cutâneas da linhagem C57Bl/6 foi em forma de cluster restrita aos macrófagos parasitados. A expressão de VEGF nas lesões de ambas linhagens de camundongos foi discreta durante todo o período experimental e não aumentou com o tempo de infecção. O tratamento com oxigênio hiperbárico mostrou efeito deletério sobre formas promastigotas aumentando o acúmulo de lipídios citoplasmáticos e o nível de apoptose. O oxigênio hiperbárico diminuiu os efeitos patológicos e modulou a resposta imune. Concluímos que a expressão de HIF-1a durante a evolução da lesão leishmaniótica não está diretamente relacionada à expressão de VEGF e pode ser resultado de múltiplos fatores, que incluem fatores hipóxicos e não hipóxicos. Sugerimos também que o tratamento hiperbárico é capaz de modular a resposta imunológica e diminuir a progressão da lesão durante a leishmaniose murina / Abstract: The incapacity of host cell in killing amastigotes during Leishmania infections causes to chronic lesions. The increase of parasite burden leaves to macrophage accumulation and consequently granuloma formation that result in inadequate perfusion and tissue microenvironment alterations. Thus, in this work we evaluated the HIF-1a and VEGF expression, proteins that responses for environmental stress, during the course of L.amazonensis infection. We also investigated protocols for hyperbaric oxygen therapy that module the lesion progress in animal models infected with L. amazonensis. HIF-1a expression occurred in the early, chronic and in final stages of murine infection with L. amazonensis. BALB/c mice lesions showed a homogeneous expression of HIF-1a while footpads from C57Bl/6 mice showed HIF-1a expression restrict in clusters of heavily infected macrophages. The VEGF expression was not correlated to the evolution of lesion or the HIF-1 production in both stains. The hyperbaric oxygen treatment showed deleterious effects on promastigotes increasing cytoplasmtic lipids and apoptosis level. The HBO decreased pathological effects and modulated the immune response. The results suggest that the HIF-1a expression during lesion progress induced by L.amazonensis in both murine strains is the result of multiple factors, including hypoxic and non hypoxic factors. There is no direct relation between HIF-1a and VEGF expression during experimental cutaneous leishmaniasis. We also indicated that hyperbaric oxygen therapy was able to modulate immune response and decrease of lesion progress during murine leishmaniasis / Doutorado / Doutor em Parasitologia