Le virus d'immunodéficience humaine 1 (VIH-1) cible spécifiquement les cellules CD4+ et empêche ainsi l'activation de cellules T cytotoxiques et B lors d'une infection secondaire. Le VIH-1 antagonise également la plupart des facteurs de restriction de l'hôte, y compris la tétherine. En l'absence de la protéine virale Vpu, la tétherine inhibe le relarguage de particules virales et provoque leur dégradation. La tétherine est également capable d'induire une signalisation pro-inflammatoire en réponse au bourgeonnement viral ainsi que d'activer le récepteur de cellules dendritiques ILT7. L'objectif principal de cette étude consistait à élucider les bases structurales de l'interaction entre la tétherine et ILT7. Malgré de nombreuses difficultés rencontrées dans la production recombinante de ILT7, on a pu déterminer la structure cristallographique du domaine N-terminale du récepteur. La ligation de la tétherine à l'ectodomaine entier de ILT7, mais pas au domaine N-terminal, a également été montré. Ces résultats constituent une base solide pour la caractérisation plus détaillée de l'interaction. / Human immunodeficiency virus 1 (HIV-1) specifically infects CD4+ T cells, thereby preventing an appropriate activation of cytotoxic T cells and B cells in response to opportunistic pathogens. In addition, HIV-1 antagonises host restriction factors, including tetherin. In the absence of the viral protein Vpu, tetherin potently inhibits virus particle release from infected cells. Tetherin also triggers proinflammatory signaling upon sensing virus assembly, and activates the dendritic cell receptor ILT7. The principal objective of this thesis was to elucidate the structural details underlying the interaction of tetherin with ILT7. Despite difficulties in the production of recombinant ILT7, the crystal structure of the N-terminal ILT7 domain could be determined. Furthermore, binding of tetherin to full-length ILT7, but not to the N-terminal domain, could be confirmed by SPR. These results provide a solid basis for the more detailed characterisation of the interaction.

Viral protein U (Vpu) is an accessory protein of HIV‐1 that efficiently targets BST2/Tetherin, a cellular restriction factor that acts as molecular anchor impeding the release of various enveloped viruses from the cell surface. The recently discovered natural receptor of BST2 is ILT7, a molecule exclusively expressed at the surface of the professional type 1 interferon (IFN‐1) producing cells, plasmacytoid dendritic cells (pDCs). The interaction between BST2 and ILT7 has been reported to efficiently induce a repression of IFN­‐1 secretion by pDCs. Here, we investigated the impact of Vpu mediated antagonism of BST2, in regards to this newly described immune function of BST2. Using a system of CD4+ T cell lines infected with wild type or Vpu‐deficient HIV-­1 cultured with peripheral blood mononuclear cells or purified pDCs, we report that the presence of Vpu efficiently reduces IFN-­1 production from sensing pDCs. Furthermore, we observed that this Vpu effect is dependent on the availability of BST2 molecules at the surface of the infected cells, since the Vpu's immunoregulation is abrogated when blocking any potential BST2 trans interaction with anti­‐BST2 antibodies. Similarly, depleting ILT7 from pDCs by means of small interfering RNA treatment equally negates the downregulation of pDC IFN-­1 secretion by Vpu. Finally, the use of recombinant soluble ILT7 competes with pDC‐bound ILT7 for the free BST2 and similarly results in high IFN-­1 production, causing an identical phenotype. Overall, our results demonstrate that Vpu heightens ILT7 activation and subsequent repression of IFN‐1 production by pDCs in response to HIV­‐1 infected CD4+ T cells by promoting it's trans interaction with infected T cell bound BST2, through a yet uncharacterized mechanism. By allowing efficient particle release and restraining pDCs antiviral functions, Vpu exerts a double role on BST2 that seems crucial for the replication and dissemination of HIV‐1. / La protéine accessoire U (Vpu) du VIH‐1 cible efficacement BST2/Tetherin, facteur de restriction restreignant la relâche de divers virus enveloppés à même la surface cellulaire. Le récepteur naturel de BST2 récemment découvert est ILT7, une protéine exclusivement exprimée à la surface des cellules produisant l'essentiel de l'interféron de type 1 (IFN-­1) lors d'infections virales, les cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDCs). L'interaction entre BST2 et ILT7 réprime la production d'IFN‐1 des pDCs. Considérant le potentiel immunorégulateur de BST2 récemment décrit, nous avons entrepris d'évaluer cet aspect de l'antagonisme de Vpu sur BST2. À l'aide d'un système de co­‐culture entre une lignée de cellules T CD4+ infectée avec un virus exprimant ou n'exprimant pas Vpu et les cellules mononucléées du sang périphérique ou de pDCs purifiés, nous avons observé que Vpu est responsable d'une atténuation majeure de la sécrétion d'interféron de type 1 (IFN-­1) produite en réponse aux cellules infectées. La présence de molécules de BST2 de surface libres est essentielle à ce processus, puisque le bloc de toute interaction en trans de BST2 par des anticorps polyclonaux α­‐BST2 abroge l'effet de Vpu. Similairement, Vpu ne peut exercer cet effet lorsque ILT7 est déplété dans les pDCs à l'aide de petits ARN interférents. Enfin, l'introduction de protéines recombinantes solubles d'ILT7 dans le système de co-culture semble prévenir l'effet inhibiteur de Vpu, suggérant que Vpu exploite l'interaction de BST2 avec ILT7 pour moduler la sécrétion d'IFN-­1 des pDCs. En conclusion, nos résultats démontrent que Vpu exerce un contrôle sophistiqué de la production d'IFN‐1 par les pDCs en réponse aux lymphocytes T CD4+ infectés par le VIH-­1. Il semble ainsi que l'action de Vpu favorise, par un mécanisme encore méconnu, l'activation d'ILT7 à travers BST2. En effet, cette fonction de Vpu semble tout aussi dépendante de BST2 que de l'ILT7. En favorisant la relâche virale et en menant à l'inhibition de la réponse antivirale des pDCs, la régulation ciblée de BST2 par Vpu est non seulement cruciale à la dissémination du virus, mais aussi à sa réplication.