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Avaliação do comportamento metabólico de cisticercos de Taenia crassiceps cultivados in vitro e expostos a condições estressantesAndrade, Lilian Cristina Morais de 06 September 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-09-06 / Taenia crassiceps cysticerci possess antigenic similarities to T. solium cysticerci and because of this and added to the relative easiness in its maintainance in laboratory they are used as an experimental model to T. solium studies.
The objective of this study was to analyze the in vitro influence of glucose and insulin on the energetic and respiratory metabolism of T. crassiceps cysticerci exposed to low dosages of anti-helminthic drugs, albendazol and praziquantel, and also to different concentrations of glucose and insulin. Glucose is the main energy source to these parasites in their larval and adult stages and glycogen is their main energetic reserve. Glycogen may be converted into glucose in case of low glucose uptake and is stored in the cysticerci tegument.
The cysticerci were collected from the peritoneal cavity of BALB/c female mice experimentally infected and maintained in the animal facilities of IPTSP/UFG. After 24hours of culture in RPMI culture medium supplemented and with glucose, glargine insulin (LANTUS®, Sanofi Aventis), albendazol and praziquantel, the cysticerci were removed and the medium was frozen in liquid nitrogen as to allow the metabolix stasis. Afterwards this culture medium was analyzes through HPLC as to permit the quantification of the following organic acids related to the carbohydrates metabolism: lactate and pyruvate, intermediary metabolism: citrate, α-ketoglutarate, succinate, fumarate, malate and oxaloacetate, fatty acids metabolism: β-hydroxibutyrate and propionate. It was possible to detect propionate and β-hydroxibutyrate secreted by T. crassiceps cysticerci which indicates the fatty acids oxidation as an alternative energy
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source used by the initial stage cysticerci which are in rapid growth. Also the detection of organic acids from the citric acid cycle indicates the in vitro aerobiosis performed by the initial stage cysticerci. / Os cisticercos de Taenia crassiceps possuem similaridades antigênicas com cisticercos de Taenia solium e por este motivo, associado ao fato de uma relativa facilidade de sua manutenção em animais de laboratório, são utilizados como modelo experimental para estudos da cisticercose por T. solium.
O objetivo deste trabalho foi analisar in vitro a influência da glicose e da insulina no metabolismo energético e respiratório de cisticercos de T. crassiceps expostos aos fármacos anti-helmínticos albendazol e praziquantel em baixas doses, e diferentes concentrações de glicose e insulina.
A glicose é a principal fonte de energia para estes parasitos tanto na fase larval quanto adultos e o glicogênio, que pode ser novamente convertido em glicose, é fonte de reserva energética, sendo encontrado armazenado em suas membranas.
Os cisticercos foram provenientes da cavidade peritoneal de camundongos fêmeas Balb/c infectados experimentalmente e mantidos no biotério do IPTSP/UFG. Após 24 horas de cultivo em meio RPMI® suplementado e adicionado de glicose, insulina glargina (LANTUS®, Sanofi Aventis), albendazol e praziquantel, foram retirados da placa e o meio foi congelado em nitrogênio líquido para ocorrer estase metabólica. Posteriormente o meio de cultura passou por um processo de extração sendo analisado em Cromatografia Líquida de Alta Performance com detector UV (CLAE) dos seguintes ácidos orgânicos oriundos do metabolismo de carboidratos (lactato, piruvato), metabolismo intermediário (citrato, α-cetoglutarato succinato, fumarato, malato, oxaloacetato) e metabolismo de ácidos graxos (β-hidroxibutirato e propionato). Foram detectados propionato e β-hidroxibutirato secretados por cisticercos de T. crassiceps indicando a oxidação de ácidos graxos como fonte de energia alternativa, utilizada em especial nos estádios de crescimento e também em situações de baixas concentrações de substancias energéticas provenientes do hospedeiro. Em adição, a detecção de
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ácidos orgânicos do ciclo do ácido cítrico nos cisticercos analisados confirma a aerobiose in vitro do estádio evolutivos inicial dos cisticercos.
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