CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / Aquaculture takes up more and more space on the world stage, as a result of technological advances and increased demand for animal protein, consolidating itself as the fastest growing activity in agribusiness. On the other hand, there is the possibility of the development of illnesses over the cultivation, as well as impact on the environment, with the release of organic compounds in water, eutrophicating aquatic ecosystem. Given this scenario, microalgae Arthrospira platensis, as to appear as a strong ally of the producers, whether for absorption of organic compounds and treatment of effluents, is for the production of compounds that exhibit biological activity, promoting the welfare of farmed animals. Thus, the objective of this study was to produce. platensis cultivation sewage Nile tilapia (Oreochromis niloticus), extract and evaluate the immunomodulatory effect of sulfated polysaccharide (PS) in juvenile Penaeus vannamei. The PS were obtained from a hot aqueous extract and administered through immersion baths in juveniles of P. vannamei, at concentrations of 0, 60, 120 and 240 mg L-1. After soaking, the total count of hemocytes (THC) and checked the concentration of total proteins (CP) and activity of enzymes fenoloxidase (PO) and α2-macroglobulina. After the evaluation of the imunoparÃmetros, it was found that the concentration of 120 mg L-1 the best immunostimulating activity. This concentration was used to observe the reaction of immunological parameters when exposed to the weather (no exposure) 0, 45, 90, 135 and 180 minutes, as well as the antimicrobial activity against Vibrio alginolyticus. The microalgae showed a good development within the organic production system. Were extracted 19,85 g PS, with a yield of 8,5% of the biomass used. During the fractionation of PS were observed two fractions with 0,5 and 1,2 M majority of NaCl. After three hours of immersion in different concentrations of PS, the imunoparÃmetros showed an increase gradually as amounting to concentration of PS. Still, stimulation of the immune system of shrimp took place with 90 and 135 minutes of exposure to the PS. The fenoloxidase enzyme reached its maximum activity (72,33 Umin-1 mg-1) with 135 minutes of exposure, followed by an increase of the α2-macroglobulina enzyme activity with 180 minutes. The serum of animals collected with 90 and 135 minutes was more effective in inhibiting the development of V. alginolyticus, and needed only 1,51  0,08 and 1,59  0,02 mg mL-1 of proteins to fight it. The results obtained in other times did not differ from time zero. Thus, it is concluded that the PS of A. platensis were able to activate the immune system in shrimp shortly after 90 minutes of exposure, but also contributed to increase the antibacterial activity of the serum of animals. / A aquicultura ocupa cada vez mais espaÃo no cenÃrio mundial, em virtude do avanÃo tecnolÃgico e do aumento da demanda por proteÃna animal, consolidando-se como a atividade que mais cresce no agronegÃcio. Por outro lado, existe a possibilidade do desenvolvimento de enfermidades ao longo do cultivo, bem como, causar impactos no meio ambiente, com o lanÃamento de compostos orgÃnicos na Ãgua, eutrofizando o ecossistema aquÃtico. Diante deste cenÃrio, as cianobactÃrias como a Arthrospira platensis, surgem como um forte aliado dos produtores, seja para absorÃÃo de compostos orgÃnicos e tratamento de efluentes, seja pela produÃÃo de compostos que apresentam atividade biolÃgica, promovendo o bem-estar dos animais cultivados. Assim, o objetivo desse estudo foi produzir A. platensis em efluente de cultivo da tilÃpia do Nilo (Oreochromis niloticus), extrair e avaliar o efeito imunomodulador dos polissacarÃdeos sulfatados (PS) em juvenis de Penaeus vannamei. Os PS foram obtidos a partir de um extrato aquoso quente e administrados por meio de banhos de imersÃo em juvenis de P. vannamei, nas concentraÃÃes de 0, 60, 120 e 240 mg L-1. ApÃs a imersÃo, foi realizada a contagem total de hemÃcitos (THC) e verificada a concentraÃÃo de proteÃnas totais da hemolinfa (CP) e atividade das enzimas fenoloxidase (PO) e α2-macroglobulina no soro. ApÃs a avaliaÃÃo dos imunoparÃmetros, verificou-se que na concentraÃÃo de 120 mg L-1 ocorreu a melhor atividade imunoestimulante. Esta concentraÃÃo foi utilizada para se observar a reaÃÃo dos parÃmetros imunolÃgicos quando expostos ao tempo 0 (sem exposiÃÃo), 45, 90, 135 e 180 minutos, bem como a atividade antimicrobiana contra Vibrio alginolyticus. A microalga mostrou um bom desenvolvimento dentro do sistema de produÃÃo orgÃnico. Foram extraÃdos 19,85 g de PS, com um rendimento de 8,5% da biomassa utilizada. Durante o fracionamento dos PS foram observados duas fraÃÃes majoritÃrias com 0,5 e 1,2 M de NaCl. ApÃs trÃs horas de imersÃo em diferentes concentraÃÃes de PS, os imunoparÃmetros apresentaram um aumento gradativo à medida que se elevava a concentraÃÃo dos PS. Ainda, a estimulaÃÃo do sistema imunolÃgico dos camarÃes ocorreu com 90 e 135 minutos de exposiÃÃo aos PS. A enzima fenoloxidase atingiu sua atividade mÃxima (72,33 Umin-1mg-1) com 135 minutos de exposiÃÃo, seguida de um aumento da atividade da enzima α2-macroglobulina com 180 minutos. O soro dos animais coletados com 90 e 135 minutos foi mais efetivo em inibir o desenvolvimento de V. alginolyticus, sendo necessÃrios apenas 1,51  0,08 e 1,59  0,02 mg mL-1 de proteÃnas para combatÃ-lo. Os resultados obtidos nos demais tempos nÃo diferiram do tempo zero. Assim, conclui-se que os PS de A. platensis foram capazes de ativar o sistema imunolÃgico dos camarÃes logo apÃs 90 minutos de exposiÃÃo, como tambÃm contribuÃram para aumentar a atividade antibacteriana do soro dos animais.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Machos de tilÃpia chegam a crescer de 1,8 a 2,5 vezes mais rÃpido do que as fÃmeas, sob condiÃÃes de cultivo intensivo. Assim, as estratÃgias para obter populaÃÃes monossexo estÃo focadas na produÃÃo de lotes de alevinos machos. A produÃÃo de indivÃduos 100% machos atravÃs do uso do andrÃgeno 17-α-metiltestosterona à considerada a tÃcnica mais efetiva e de menor custo. No entanto, o uso de hormÃnios e o aumento na densidade de cultivo tendem a afetar adversamente a saÃde dos organismos cultivados, aumentando os Ãndices de mortalidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de polissacarÃdeos sulfatados, extraÃdos da alga marinha vermelha Gracilaria caudata, na sobrevivÃncia e ganho de peso de pÃs-larvas da tilÃpia do Nilo, Oreochromis niloticus, submetidas à reversÃo sexual. O experimento consistiu em quatro tratamentos com trÃs repetiÃÃes cada, em um total de doze aquÃrios com capacidade para 40L. Em cada tratamento foram utilizadas 960 pÃs-larvas (plâs) de tilÃpias, na densidade de estocagem de 8 plâs/L. No tratamento controle nÃo foi utilizado o polissacarÃdeo e, nos outros trÃs tratamentos, foram utilizadas doses crescentes (0,05, 0,1 e 0,2mg/g de peso vivo das larvas) do polissacarÃdeo na raÃÃo. Durante as duas primeiras semanas de reversÃo, foi utilizada aeraÃÃo constante e uma renovaÃÃo de Ãgua de 20% em cada repetiÃÃo. A partir da terceira semana, foi elevado o estresse em todos os tratamentos atravÃs da supressÃo da aeraÃÃo e/ou da renovaÃÃo de Ãgua, a fim de induzir o aumento da mortalidade. Ao final do experimento, nÃo houve diferenÃa significativa entre os tratamentos com relaÃÃo ao peso mÃdio final e ganho mÃdio de peso diÃrio das pÃs-larvas. No entanto, com relaÃÃo à mortalidade, houve diferenÃa significativa (α = 0,05) no final ao final da Ãltima semana de reversÃo e cinco dias apÃs o experimento (α = 0,01), quando o estresse foi de moderado a elevado, respectivamente. Desta forma, as plâs que receberam a dose de 0,1 e 0,2mg/g se tornaram mais resistentes Ãs situaÃÃes de estresse induzidas no experimento. / Under intensive culture conditions males of tilapia grow 1.8 to 2.5 times faster than females. Thus, strategies to get monosex populations are concentrated on male production fingerlings lots. The production of 100% males individuals through the use of the androgen 17-α-methyl-testosterone is considered the most effective and lesser cost technique. However, hormone administration and culture density enhan cement tend to adversely affect cultivated organisms health, increasing mortality indices. The aim of this work was to evaluate the effect of sulfated polysaccharides extracted from the red marine alga Gracilaria caudata in the Nile tilapia, Oreochromis niloticus, post-larvae (pl's) survival and weight gain submitted to sexual reversion. The experiment consisted of four treatments with three repetitions in twelve 40L capacity aquariums. In each treatment were used 960 tilapias pl's in a stockage density of 8 pl's/L. In the control treatment was not used the polysaccharide and in the others three ones were used increasing doses (0.05,0.1 and 0.2mg/g live weight) of the polysaccharide in the ration. During the two first weeks of reversion a constant aeration and a 20% water exchange were done in each treatment. In order to induc e mortality, stress was raised in all treatments by aeration and/or water exchange suppression from the th ird week until the end of the experiment. Final mean weight and daily mean weight gain of pl's in all treatments did not showed significant difference at a 5% level. However, pl's mortality showed significant difference at the end of the last week of reversion (α = 0.05) and at the end of the last five days of the experiment (α = 0.01), when stress was raised of moderate to elevated, respectively. Then, pl's that received the polysaccharides doses of 0.1 and 0.2mg/g live weight became more resistant to stress situations induced in the experiment.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O cÃncer à um dos principais problemas mundiais de saÃde e uma das causas mais importantes de morbidade e mortalidade em crianÃas e adultos. Apesar do sucesso no tratamento de diversos tipos de tumor, ainda nÃo se chegou ao fÃrmaco ideal e as terapias existentes nem sempre alcanÃam resultados satisfatÃrios alÃm de induzir muitos efeitos colaterais. A pesquisa em produtos naturais marinhos (PNM), embora recente, tem revelado uma enorme diversidade de estruturas quÃmicas, muitas vezes inÃditas e com potente atividade biolÃgica. MolÃculas citotÃxicas, com potencial aplicaÃÃo na quimioterapia do cÃncer, sÃo freqÃentemente isoladas dos organismos marinhos e dos quatro fÃrmacos oriundos de PNM comercializados atualmente, dois sÃo utilizados na quimioterapia do cÃncer. AlÃm dos metabÃlitos secundÃrios, o estudo de polissacarÃdeos modificadores da resposta biolÃgica para imunoterapia adjuvante tambÃm vem surgindo como uma Ãrea bastante promissora. Os cnidÃrios juntamente com esponjas, ascÃdias, moluscos e algas compÃem o grupo de representantes marinhos quimicamente mais prolÃficos. O zoantÃdeo Protopalythoa variabilis (Cnidaria, Anthozoa) à encontrado no litoral do mundo inteiro, porÃm o seu potencial farmacolÃgico nunca foi investigado anteriormente. O potencial antitumoral de substÃncias obtidas do P. variabilis encontrado no litoral cearense foi avaliado neste trabalho. O fracionamento guiado pela citotoxicidade de 4 linhagens de cÃlulas tumorais (HL-60, leucemia; HCT-8, cÃlon; SF-295, sistema nervoso central e MDA-MB-435, melanoma) do extrato hidroalcoÃlico bruto (EHB) rendeu uma mistura de alfa-aminoÃcidos lipÃdicos (1a/1b) inÃditos a partir da fraÃÃo hexano e 5 fraÃÃes (AcOEt-P-1-5) contendo sinais compatÃveis com esterÃides da fraÃÃo acetato de etila. Os 1a/1b apresentaram uma mÃdia de concentraÃÃo inibitÃria mÃdia (CI50) nas linhagens testadas de 85 ng/mL, enquanto a AcOEt-P-4, mais ativa dentre as derivadas da AcOEt exibiu uma mÃdia de CI50 de 117,5 ng/mL. Essa foi a primeira vez que alfa-aminoÃcidos lipÃdicos foram obtidos de uma fonte natural e tambÃm que o potencial citotÃxico de compostos dessa classe à demonstrado. O estudo da citotoxicidade dos 1a/1b e da AcOEt-P-4, na linhagem leucÃmica HL-60, revelou que estas amostras devem sua atividade à induÃÃo de apoptose com via intrÃnseca desempenhando um importante papel. A partir do resÃduo do EHB do P. variabilis, foram obtidos polissacarÃdeos sulfatados ligados a proteÃnas (PPV). O PPV nÃo apresentou citotoxicidade contra as cÃlulas tumorais in vitro, porÃm induziu 50% de inibiÃÃo do crescimento tumoral em camundongos transplantados com a linhagem B-16 (melanoma). As anÃlises dos parÃmetros bioquÃmicos, hematolÃgicos e histopatolÃgicos indicaram que o PPV nÃo apresentou toxicidade nos animais e aumentou a proliferaÃÃo de monÃcitos. Estudos adicionais com macrÃfagos peritoneais in vitro confirmaram que o PPV à um modificador da resposta biolÃgica. A ativaÃÃo dos macrÃfagos pelo PPV induziu a produÃÃo de Ãxico nÃtrico, e das citocinas IL-1 e IL-6, mas nÃo TNF-alfa. O presente trabalho mostrou que a espÃcie P. variabilis à uma rica e profÃcua fonte de compostos com potencial antitumoral a ser explorada, possuindo tanto metabÃlitos citotÃxicos capazes de induzir apoptose em cÃlulas tumorais diretamente, quanto macromolÃculas imunomoduladoras com atividade antitumoral in vivo. / Cancer is one of the biggest health problems in all over the world and causes a great amount of death of children and adults. Despite success of several cancer therapies, the ideal anticancer drug is not available yet and the numerous side effects are a limiting point. The natural products research, although recent, has shown often a variety of new chemical structures and potent biological activities. Cytotoxic compounds with possible cancer chemotherapy application are commonly isolated from marine organisms. Two within four marketed drugs from marine sources are used for cancer chemotherapy. Besides small weight molecules, the polysaccharides biological response modifiers also have showing to be a promising field as adjuvant in traditional chemotherapy. Cnidarians together with sponges, ascidians, mollusks and algae form the most promising marine group. The zoanthid Protopalythoa variabilis (Cnidaria, Anthozoa) is found in coastline of whole world, however its pharmacological potential have never been investigated before. The antitumor potential of compounds from P. variabilis from Cearà coast was evaluated in this work. The chemical fractionation guided by the cytotoxicity on four tumor cell lines (HL-60, leukemia; HCT-8, colon; SF-295, central nervous system and MDA-MB-435, melanoma) from crude hydroalcoholic extract yield two new lipidic -amino acids (1a/1b) in mixture from hexane fraction and five fractions (EtOAc-P-1-5) containing sterols signals from ethyl acetate fraction. 1a/1b showed a mean inhibitory concentration mean (IC50) of 85 ng/mL against cell lines tested, whereas EtOAc-P-4, the most powerful of EtOAc derivatives fractions, showed a mean IC50 of 117.5 ng/mL. This was the first report of lipidic amino acids obtained from natural sources and also the first cytotoxic data for this class of compounds. The cytotoxic investigation of 1a/1b and EtOAc-P-4 on HL-60 cells showed treated-cells dead by apoptosis with critical involvement of intrinsic pathway. Protein-bound sulfated polysaccharides (PPV) with high molecular mass were obtained from residue of the hydroalcoholic extract. PPV did not showed cytotoxicity on tumor cell lines in vitro, however it induced 50% of tumor growth inhibition on melanoma B-16 bearing-mice. No toxic evidences were observed in histopathology analysis as well as in biochemical and hematological parameters, however circulating monocytes increased with PPV treatment. In addition peritoneal macrophages investigated in vitro confirmed that PPV is a biological response modifier. The PPV-induced macrophage activation stimulated the release of nitric oxide and cytokines IL-1 and IL-6, but did not do TNF-. This work showed that P. variabilis is a rich source of antitumor compounds, having both small cytotoxic molecules and polysaccharides biological response modifiers with antitumor activity in vivo.