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Micropropagação do porta-enxerto Mr. S. 2/5 (Prunus cerasifera x Prunus spinosa) / Micropropagation of rootstock Mr. S. 2/5 (Prunus cerasifera x Prunus spinosa)Gallo, Cibele Merched 15 February 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-02-15 / Although fruiting plants can be propagated by several methods, commercial
seedlings of Prunus are obtained by grafting a scion on a rootstock. In Rio Grande do
Sul State, because of the proximity of the canning industry, the rootstocks originate
from the disposal pits of late maturing cultivars, allowing the occurrence of varietal
mixtures, and consequently, the formation of orchards with uneven plants. On the
other hand, vegetative propagation leads to the formation of uniform plants, because
they keep the characteristics of the mother-plant. This propagation may be made by
several methods, for example, micropropagation. Thus, to develop protocols for
vegetative propagation will contribute to the production of seedlings of Prunus spp. in
southern Brazil. The aim of this work was to optimize in vitro multiplication and
rooting, and the acclimatization of shoots from the rooting medium with rootstock Mr.
S. 2/5.This work was divided into two chapters, one on the in vitro multiplication, and
the second refers to in vitro rooting and acclimatization. In the first chapter,
composition of salts, culture medium pH, source and concentration of carbohydrate,
and concentration of IBA were tested. In the second chapter, the objective was to
evaluate the effect of IBA concentration, and the permanence time of the shoots in
the culture medium, in vitro rooting, and their survival during acclimatization phase.
At the multiplication stage, the explants cultivated in MS medium, pH 5.2, showed a
higher number of shoots. However, the source and concentration of carbohydrate
had no influence on number and length of the shoots formed. In relation to IBA
concentrations, supplemented mediums with 0.06mgL-1 increased formation of shoots, but had no significant influence on their length. With respect to in vitro rooting
phase and acclimatization, shoots cultivated in a culture medium with 1.6mgL-1 IBA,
during 12 days, showed high percentage of rooting, approximately 90%, as well as
higher percentage of surviving plants in the acclimatization phase. / Apesar das plantas frutíferas serem propagadas por vários métodos, as mudas
comerciais de prunáceas são obtidas por meio da enxertia de uma cultivar copa
sobre um porta-enxerto. No Rio Grande do Sul pela proximidade das indústrias de
conserva, os porta-enxertos são originários a partir do descarte dos caroços de
cultivares de maturação tardia, aspecto este que permite a ocorrência de misturas
varietais e consequentemente a formação de pomares com plantas desuniformes.
Por outro lado, a propagação vegetativa leva à formação de plantas uniformes, pois
mantém as características da planta matriz, podendo esta ser realizada por diversos
métodos, como por exemplo, a micropropagação. Assim, desenvolver protocolos de
propagação vegetativa irá contribuir no processo de produção de mudas de
prunáceas na região Sul do Brasil. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi
otimizar a multiplicação e o enraizamento in vitro, bem como a aclimatização das
brotações provenientes do meio de enraizamento com o porta-enxerto Mr. S. 2/5 .
Para tal, o trabalho foi dividido em dois capítulos, um sobre a multiplicação in vitro e
o segundo referente ao enraizamento in vitro e aclimatização. No primeiro capítulo
foram testados a composição de sais, o pH do meio de cultura, a fonte e a
concentração de carboidrato e a concentração de AIB. No segundo capítulo,
objetivou-se avaliar o efeito da concentração de AIB e o tempo de permanência das
brotações no meio de cultura, sobre o enraizamento in vitro e a sobrevivência
dessas na fase de aclimatização. Na etapa de multiplicação, explantes cultivados em meio MS com pH 5,2 apresentaram o maior número de brotações. Entretanto, a
fonte e a concentração de carboidrato não exerceram influência sobre o número e o comprimento das brotações formadas. Já, com relação às concentrações de AIB,
meios suplementados com 0,06 mg L-1 apresentaram maior formação de brotações,
porém sem influência significativa para o comprimento destas. No que diz respeito à
fase de enraizamento in vitro e de aclimatização, brotações cultivadas em meio de
cultura com 1,6 mg L-1 de AIB por 12 dias, apresentaram alta percentagem de
enraizamento, aproximadamente, 90%, bem como maior percentagem de plantas
sobreviventes na fase de aclimatização.
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Fatores bi?tico e abi?ticos que influenciam na concentra??o de podofilotoxinaMeira, Paloma Ribeiro 19 September 2013 (has links)
Submitted by Verena Bastos (verena@uefs.br) on 2015-10-14T21:06:54Z
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Previous issue date: 2013-09-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / This paper describes the influence of abiotic and biotic factors in the concentration of secondary metabolites of pharmaceutical interest in medicinal plants, while it aims to answer how these factors influence the concentration of podophyllotoxin and yate?na Leptohyptis macrostachys in vitro, this goal. The specimen Leptohyptis macrostachys was established in vitro from seeds collected in the Chapada Diamantina-Ba; studying the rate of germination rate, the germination and mean germination of seeds grown on MS medium with different concentrations of salts constituents of this medium as well as different concentrations of sucrose and gibberellic acid. Was also studied, such as abiotic factors (culture medium, carbon source temperature, photoperiod and gas exchange) and biological (plant growth regulators) influenced the development (number of shoots and leaves and roots presence of friable callus, compact or oxidized) and production of podophyllotoxin and yate?na. To study the influence of these factors in getting these metabolites, plants were steeped at 40 ? C in ethanol to produce the extract. This was partitioned with water and after a specific treatment, injected into the HPLC. We established a protocol for Leptohyptis macrostachys growing from seeds in ? MS medium supplemented with 1.5% sucrose and 11.55 mM of GA3, there was no significant formation of callus in treatments applied and the concentration of podophyllotoxin was favored when L. macrostachys was grown in ? MS medium supplemented with 1.5% sucrose, closed with PVC film and kept in a growth room at 30 ? C. / Este trabalho descreve a influ?ncia de fatores abi?ticos e bi?tico na concentra??o de metab?litos secund?rios de interesse farmacol?gico em plantas medicinais, ao mesmo tempo que se prop?e a responder como esses fatores influenciam na concentra??o de podofilotoxina e yate?na em Leptohyptis macrostachys in vitro, objetivo deste. A esp?cime Leptohyptis macrostachys foi estabelecida in vitro a partir de sementes coletadas na regi?o da Chapada Diamantina-Ba; estudando o ?ndice de velocidade de germina??o, a germinabilidade e o tempo m?dio de germina??o de sementes cultivadas em meio MS com diferentes concentra??es de sais constituintes deste meio, bem como diferentes concentra??es de sacarose e ?cido giber?lico. Foi estudado tamb?m, como fatores abi?ticos (meio de cultivo, fontes de carbono temperatura, fotoper?odo e trocas gasosas)e bi?tico (reguladores vegetais) influenciaram no desenvolvimento (quantidade de brotos folhas e ra?zes e presen?a de calos fri?veis, compactos ou oxidados) e na produ??o de podofilotoxina e yate?na. Para estudar a influ?ncia estes fatores na obten??o destes metab?litos, as plantas foram maceradas ? 40?C em etanol para a produ??o do extrato. Este foi particionado com ?gua e, ap?s tratamento espec?fico, injetado no CLAE. Foi estabelecido um protocolo de cultivo para Leptohyptis macrostachys a partir de sementes em meio MS ? suplementado com 1,5% de sacarose e 11,55?M de GA3; n?o houve forma??o significativa de calos nos tratamentos aplicados e a concentra??o da podofilotoxina foi favorecida quando L. macrostachys foi cultivada em meio MS ? suplementado com 1,5% de sacarose, fechada com filme de PVC e mantida em sala de crescimento a 30?C.
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Micropropagação de Acmella oleracea (L.) R. K. Jansen e estabelecimento de meio de cultura para a conservação desta espécie em de banco de Germoplasma IN VITRO.Malosso, Milena Gaion 10 April 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007-04-10 / Acmella oleracea (L.) R. K. JANSEN is an Amazonian medicinal plant popularly named jambu. The leaves extract contain Sphylantol, an N-isobutilamide with anesthetic activity and it is used by people to treat mouth and throat aches as well as toothaches anesthetic. It has larvicide activity against Aedes aegyptii, so could be used as an important tool in the control do dengue. The objective of this work was to develop
in vitro protocols for micropropagation and conservation of this species, as well as to clarify the germination capacity of A. oleracea. Accordingly with results, nom germination was completed both under in vitro as ex vitro conditions. Nodal segments come from adult plants maintained in greenhouse, these plants were submitted to three concentrations of hypochlorite of calcium, wit 0.25%, 32% of explants were decontaminated and survived , wich were used to explants source for three multiplication experiments. The culture medium used was MS supplied with 0.1mg.L-1 KIN, 100¨of explants produced shoots, 93,33% produced roots and 0% produced callus. The experiments probed that central positions of bud promoted 86.67% shoots production in explants, these buds reach 7.61 cm height, this position also induce 100% root of plants. Moreover, the PlantmaxÒ substratum was indicated to acclimation because it appeases 100% of survival plants. The temporary immersion system
(R.I.T.A.) was not efficient to optimize this species protocol, since 100% of explants submitted in medium liquid treatments oxidized and dyed. In vitro germoplasm bank was established in MS medium supplied with sucrose 2% and sorbitol 4%, since this treatment induced 100% of explants with shoot and rooted and also produced a larger number of buds (2,0 ± 0,3) and none callus, it produce the less height of explants (5,5 ± 1,1), when was compared with other treatments that exhibit more than 50% of survival explants. This treatment also induced a great number of buds (7.0 ± 1.0), when was compared with the other treatments applied in this specie. Thus, this specie could be produced in large scale by the micropropagation protocol here established, as well as its genetic variability could be conserved in vitro conditions. / A Acmella oleracea (L.) R. K. JANSEN é uma planta medicinas da Amazônia pertencente à família Compositae e que é popularmente conhecida como jambu. O extrato de suas folhas possui o espilantol, que é uma N-isobutilamida com atividade anestésica e é utilizada popularmente no tratamento de males da boca e da garganta, bem como anestésico para dor-de-dente, além de possuir atividade larvicida contra
Aedes aegyptii, podendo ser utilizado como importante ferramenta no controle da dengue. O objetivo deste trabalho foi desenvolver protocolos para a micropropagação e
conservação desta espécie, verificar a capacidade de germinação de sementes de A. oleracea. Não houve germinação de sementes sob condições in vitro e ex vitro.
Segmentos nodais advindos de plantas adultas mantidas em casa de vegetação foram submetidos a três concentrações de hipoclorito de cálcio e o tratamento com 0,25%
deste agente desinfestante resultou em 32% de explantes vivos e axênicos, que serviram como fonte de explantes para três experimentos de multiplicação. O meio de cultura
indicado foi o MS suplementado com 0,1 mg.L-1 de cinetina, que proporcionou 100% de explantes com brotação, 93,33% de plantas enraizadas e ausência total de calos. Experimentos comprovaram que as gemas centrais da haste promovem 86,67% de explantes com brotação e brotos com 7,61 cm de altura, além de induzir 100% de plantas enraizadas, e que o substrato PlantmaxÒ é o mais indicado para a aclimatação,
mantendo 78,81% de plantas vivas. Os sistema de imersão temporária (R.I.T.A.) não foi eficaz para otimizar o protocolo desta espécie, uma vez que 100% dos explantes submetidos à tratamentos em meio de cultura líquido oxidaram e morreram. O banco de germoplasma in vitro foi estabelecido em meio de cultura MS acrescido de 2% de sacarose e 4% de sorbitol, uma vez que nesta condição 100% de explantes mantiveramse com brotação, vivos e enraizados, com maior número de brotos por gema (2,0 ± 0,3), ausência total de calos e a menor altura (5,5 ± 1,1). Este tratamento também induziu um excelente número de gemas por haste (7,0 ± 1,0), quando comparado com os demais tratamentos aplicados a esta espécie. Deste modo, esta espécie pode ser produzida em
larga escala pelo protocolo de micropropagação aqui estabelecido, bem como conservada em laboratórios para a manutenção de sua variabilidade genética.
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Micropropagação e estresse oxidativo de pereira e marmeleiro cultivados em meio contendo alumínio / Micropropagation and oxidative stress of pear and quince cultivated on medium with aluminumRibeiro, Mirian de Farias 04 March 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-03-04 / The objective of this work was to evaluate the effect of aluminum (Al) on in vitro
multiplication and rooting of pear and quince. The explants were nodal segments of
pear and quince in vitro cultivated. The culture medium to pear was QL modificated
by Leblay and to quince was MS, both added of Al to 0 (pH 5,7, control), 0, 15, 30, 45
e 60 mg L-1 (pH 4,0) put in jars with 1 g of cotton for multiplication and 3 g of
vermiculite for rooting and 30 mL of medium. The trial had four replicates and five
explants each. At 60 days the percentage of shoots, length and number of shoots,
fresh and dry mass and catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX) activity in
pear were assessed. At 45 days the percentage of rooting, length and number of
root, fresh and dry mass of shoots and roots, CAT, APX and superoxide dismutase
(SOD) activity in pear and nutrients content were assessed. In the multiplication, the
quince had 100% of shoot, but decreased the number of shoots. The length of
shoots, fresh and dry mass decreased in MC but increased in BA 29 . The pear had
high percentage of shoots. The number of shoot was higher for Conference . The
length of shoots, fresh and dry mass was increased at Al. CAT activity in
Conference was increased at 30 mg L-1 of Al and in Abate Fetel was increased at
30 and 45 mg L-1 of Al. APX activity in Conference was increased at 30 and 60 mg
L-1 of Al and in Abate Fetel was increased at 30 mg L-1 of Al. In the rooting, the
percentage of rooting, lenght and number of roots was higher for quince. The fresh
mass of shoot was higher for Conference and for 30 mg L-1 of Al. The fresh mass of
root was higher for BA 29 at 15 mg L-1 of Al. The dry mass of shoot was higher for
Conference and for 15 and 30 mg L-1 of Al. The dry mass of root was higher for BA
29 and for 15 mg L-1 of Al. The nutrient content increased at aluminum. In the Abate
Fetel the CAT and APX activity was increased and the SOD activity was decreased
at aluminum. On the other hand, in the Conference the CAT activity was decreased
at aluminum, the APX was decreased only at 45 mg L-1 of Al and the SOD activity
was increased. As conclusion, the cultivars answered of different form at Al and, in
some parameters, the presence of this metal was beneficial. / O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito do alumínio (Al) na
multiplicação e enraizamento in vitro de pereira e marmeleiro. Os explantes
constituíram-se de segmentos nodais de pereira e marmeleiro cultivados in vitro. O
meio de cultura para pereira foi o QL modificado por Leblay e para marmeleiro foi o
MS, ambos adicionados de Al a 0 (pH 5,7 controle), 0, 15, 30, 45 e 60 mg L-1 (pH
4,0), colocado em frascos contendo 1 g de algodão hidrófilo para multiplicação e 3 g
de vermiculita para enraizamento e 30 mL de meio. O experimento constou de
quatro repetições com cinco explantes cada. A multiplicação foi avaliada aos 60 dias
quanto a percentagem de explantes brotados, número e comprimento das
brotações, massa fresca e massa seca total e a atividade das enzimas catalase
(CAT) e ascorbato peroxidase (APX) em pereira. O enraizamento foi avaliado aos 45
dias quanto a percentagem de explantes enraizados, número e comprimento das
raízes, massa fresca e seca da parte aérea e radicular, a atividade das enzimas
CAT, APX e superóxido dismutase (SOD) em pereira e teor de nutrientes. Na
multiplicação, o marmeleiro teve 100% de explantes brotados, mas houve
diminuição no número de brotos. O MC apresentou diminuição no comprimento dos
brotos, na massa fresca e seca, já o BA 29 apresentou aumento desses
parâmetros. A pereira teve alta percentagem de explantes brotados. A Conference
apresentou maior número de brotos. Com relação ao comprimento dos brotos,
massa fresca e seca houve aumento na presença de Al. A atividade da CAT na
Conference foi aumentada em 30 mg L-1 de Al e na Abate Fetel foi aumentada em
30 e 45 mg L-1 de Al. A atividade da APX na Conference foi aumentada em 30 e 60
mg L-1 de Al e na Abate Fetel foi aumentada em 30 mg L-1 de Al. No enraizamento,
o marmeleiro apresentou maior percentagem de enraizamento, maior número e
comprimento das raízes. A maior massa fresca da parte aérea foi obtida pela
Conference e por 30 mg L-1 de Al. A massa fresca da raiz foi maior no BA 29 em
15 mg L-1 de Al. A maior massa seca da parte aérea foi obtida pela Conference e
por 15 e 30 mg L-1 de Al. A maior massa seca da raiz foi obtida pelo BA 29 e por 15
mg L-1 de Al. O teor de nutrientes aumentou na presença de Al. A atividade da CAT
e APX aumentou e da SOD diminuiu em Abate Fetel na presença de Al, enquanto
que na Conference a atividade da CAT diminui, da APX diminuiu somente em 45
mg L-1 de Al e da SOD aumentou. De modo geral, os cultivares responderam de
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forma diferente a presença de Al e, em alguns parâmetros, a presença desse metal
foi benéfica.
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CONTRIBUIÇÕES PARA A MICROPROPAGAÇÃO DE Eugenia involucrata DC. E Handroanthus chrysotrichus (Mart. ex DC) Mattos / CONTRIBUTIONS TO MICROPROPAGATION OF Eugenia involucrata DC. AND Handroanthus chrysotrichus (Mart. ex DC) MattosPaim, Aline Ferreira 18 July 2011 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Eugenia involucrata DC. and Handroanthus chrysotrichus (Mart. ex DC) Mattos are
native species with economic, ecological and silvicultural. They have problems with
their spread via seeds, because they are recalcitrant and lose viability within a few
weeks after collection. In addition, there is little information about the propagation of
these species. Therefore, the general objective of this study was to evaluate
methodologies which may contribute to micropropagation of E. involucrata and H.
chrysotrichus. For multiplication of E. involucrata were tested different sources (BAP,
KIN, 2iP and TDZ) and concentrations (0, 16 and 32 μM) of cytokinins added to the
nutrient medium MS/2. Also, we tested the effect of TDZ (16 or 32 μM) combined
with GA3 (0; 10; 20 and 40 μM) added in medium MS/2, on in vitro multiplication of
nodal segments. Even for E. involucrata, we examined the effect of NAA (0; 0,5 and
1 μM) combined with TDZ (0; 16 and 32 μM), added to the medium MS/2. Finally, for
E. involucrata, we tested the effect of different concentrations of TDZ (0; 16 and 32
μM) added to the nutrient medium MS/2, on the multiplication of shoot apices of
seedlings germinated in vitro. For H. chrysotrichus were tested different types of
explants (shoot apical segments and epicotyl) and nutrient media (WPM, MS, WPM/2
and MS/2) in the presence and absence of activated charcoal as well as the effect of
BAP (0; 2; 4; 8 and 16 μM) on in vitro multiplication of this species. For in vitro
multiplication of nodal segments of E. involucrata the cytokinins tested are
dispensable; cytokinins favor the growth of bacterial contamination, high levels of
contamination reduce in vitro survival and establishment of nodal segments; the in
vitro establishment for this species is impaired by the occurrence of leaf chlorosis and
swelling of the explants. As for H. chrysotrichus, the shoot apical segments show the
highest development in the in vitro survival and establishment than of epicotyl ; there
is a high in vitro swelling of the explants in the absence of growth regulators; in the in
vitro establishment in medium WPM/2 in the presence of 0,05 μM shoot apical
segments are more efficient under low concentrations of BAP; there isgreater calli
formation in epicotyl with increase the concentration of BAP, the opposite was true
for the shoot apical segment. / Eugenia involucrata DC. e Handroanthus chrysotrichus (Mart. ex DC) Mattos são
espécies florestais nativas com importância econômica, silvicultural e ecológica.
Possuem problemas quanto a sua propagação via sementes, pois estas são
recalcitrantes, perdendo a viabilidade em poucas semanas após a coleta. Além
disso, existem poucas informações sobre a propagação vegetativa dessas espécies.
Considerado o exposto, o objetivo geral do presente estudo foi avaliar metodologias
que possam contribuir para a micropropagação in vitro de E. involucrata e de H.
chrysotrichus. Para a multiplicação de E. involucrata foram testadas diferentes fontes
(BAP, CIN, TDZ e 2iP) e concentrações (0; 16 e 32 μM) de citocininas adicionadas
ao meio nutritivo MS/2. Também foi testado o efeito de TDZ (16 e 32 μM) combinado
a GA3 (0; 10; 20 e 40 μM), acrescentados em meio MS/2, na multiplicação in vitro de
segmentos nodais. Ainda para E. involucrata, foi avaliado o efeito de ANA (0; 0,5 e 1
μM) combinado a TDZ (0; 16 e 32 μM), acrescidos ao meio MS/2. Por fim, para esta
espécie, testou-se o efeito de diferentes concentrações de TDZ (0; 16 e 32 μM)
adicionadas ao meio MS/2, na multiplicação de segmentos apicais caulinares
obtidos de plântulas germinadas in vitro. Para H. chrysotrichus, foram testados
diferentes tipos de explantes (segmento apical caulinar e epicótilo) e meios nutritivos
(WPM, MS, WPM/2 e MS/2), na presença e ausência de carvão ativado, bem como
o efeito de BAP (0; 2; 4; 8 e 16 μM) na multiplicação in vitro dessa espécie. Para
multiplicação in vitro de segmentos nodais de E. involucrata, as citocininas testadas
são dispensáveis, uma vez que favorecem o crescimento de contaminação
bacteriana. Elevados índices de contaminação acarretam reduzida sobrevivência e
estabelecimento in vitro de segmentos nodais; o estabelecimento in vitro para essa
espécie é comprometido pela ocorrência de clorose foliar e intumescimento dos
explantes. Já para H. chrysotrichus, o segmento apical caulinar apresenta
desenvolvimento superior ao do epicótilo na sobrevivência e no estabelecimento in
vitro; há elevado intumescimento in vitro dos explantes na ausência de
fitorreguladores. No estabelecimento in vitro em meio WPM/2 na presença de 0,05
μM de ANA, os segmentos apicais caulinares são mais eficientes sob concentrações
reduzidas de BAP; há maior calogênese em epicótilos à medida que aumenta a
concentração de BAP, ocorrendo o contrário para o segmento apical caulinar.
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