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Hibridação Genômica Comparativa em Endometriose / Comparative Genomic Hybridization in Endometriosis

Luciana Caricati Veiga Castelli 31 March 2008 (has links)
A endometriose é uma doença ginecológica benigna comum, mas agressiva, caracterizada pela presença de tecido endometrial ectópico. A teoria mais aceita para explicá-la é a teoria de Sampson, na qual o tecido endometrial descamado durante a menstruação sofre refluxo através das tubas uterinas, adere e se prolifera em sítios ectópicos da cavidade peritoneal. Por outro lado, apenas o refluxo tubário não é capaz de estabelecer a doença e vários estudos sugerem uma etiologia multidimensional incluindo fatores hereditários, hormonais e imunológicos. Várias metodologias têm sido propostas com o objetivo de identificar genes candidatos para a endometriose. A hibridação genômica comparativa (CGH) é uma técnica que permite que o genoma inteiro seja analisado em um só experimento, sem a necessidade de cromossomos metafásicos obtidos por cultura celular. Nossa proposta foi avaliar, por CGH, amostras de endometriomas ovarianos e de tecido endometrial eutópico de dez pacientes com diagnóstico firmado de endometriose, para screening do genoma. No grupo eutópico, 6/10 amostras apresentaram alterações caracterizadas por perdas ou ganhos de regiões cromossômicas e no grupo ectópico foram encontradas alterações em 7/10 casos. A presença de perdas e ganhos de regiões cromossômicas no endométrio eutópico, histologicamente normal, de mulheres com endometriose ovariana, pode ser considerada como alteração primária ao desenvolvimento da doença. A metodologia de CGH permitiu a detecção das regiões cromossômicas 11q12.3-q13.1, 17p11.1-p12 e 17q25.3-qter como regiões críticas, direcionando investigações futuras para identificação de genes associados à endometriose. / Endometriosis is a common benign gynecological disease, very aggressive, characterized by the presence of ectopic endometrial tissue. The most accepted theory to explain it is Sampson\'s implantation theory, which says that the endometrial tissue exfoliated during menstruation undergoes reflux through the uterine tubes, adheres and proliferates in ectopic sites of the peritoneal cavity. On the other hand, only reflux is not enough to the establishment of the disease and a number of studies suggest a multidimensional etiology including hereditary, hormonal and immunological factors. Several methodologies have been proposed for the identification of candidate genes for endometriosis. The comparative genomic hybridization (CGH) is a versatile technique that allows the entire genome to be analyzed in only one experiment without the necessity of metaphasic chromosomes from the sample, excluding the cell culture. We aimed to evaluate, by CGH, ovarian endometriomas and eutopic endometrial tissue samples from 10 patients with confirmed diagnosis of endometriosis, for a genomic screening. In the eutopic group, 6/10 samples presented genomic imbalances and 7/10 cases showed alterations in the ectopic group. The presence of losses and gains of chromosomic regions in the histologically normal eutopic endometrium from women with ovarian endometriosis can be considered as a primary alteration in the development of the disease. The CGH methodology allowed the detection of chromosomic regions 11q12.3-q13.1, 17p11.1-p12 and 17q25.3-qter as critical regions, leading to future investigations for the identification of genes associated to endometriosis.
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Foram dois, "Voltamos em cinco": família e reprodução assistida em Marechal Cândido Rondon / Were in two, "Come back in five": family and assisted reproduction in Marechal Cândido Rondon

Heidemann, Samuelli Cristine Fernandes 03 September 2018 (has links)
Submitted by Wagner Junior (wagner.junior@unioeste.br) on 2018-12-10T13:12:47Z No. of bitstreams: 2 Samuelli_Cristine_Fernandes_Heidemann_2018.pdf: 1568851 bytes, checksum: b8f4638f2b0fcd13a97dbcec5240edd7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-12-10T13:12:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Samuelli_Cristine_Fernandes_Heidemann_2018.pdf: 1568851 bytes, checksum: b8f4638f2b0fcd13a97dbcec5240edd7 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-09-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This dissertation aims to evidence the assisted reproduction like a way of maintaining "traditional" relationships of the modern nuclear family, centered on love, on affection, on idea of the couple’s "plan", which connects parents to their children, and in blood and family name categories. The research, conducted in 2017 and 2018, in the small town of Marechal Cândido Rondon / PR, focused on the lived experience by eight women ando ne man who used technological reproductive methods such as the artificial insemination and in vitro fertilization. These methods operate aggressively in their bodies of these women by intensive use of medicalization, but does not question how the techniques are disclosed and marketed. As a methodological strategy, in addition to analytical and bibliographic references about the subject, the construction of data was done through unstructured interviews and other sources obtained on websites and social networks like the facebook. The argument is that, for these women and their families, the Assisted Reproduction "corrects" the infertility and yours stigmatizing effects and, above all, leads to the realization of the biogenetic parental project, reinforcing the family nucleus composed by father, mother and biological child. / Esta dissertação tem como objetivo analisar a reprodução assistida como um meio de manter relacionamentos “tradicionais” da família nuclear moderna, centrada no amor, no afeto, na ideia de “projeto” do casal, que liga os pais a seus filhos, e nas categorias do sangue e do nome de família. A pesquisa, realizada nos anos de 2017 e 2018, no pequeno município de Marechal Cândido Rondon/PR, centrou-se na experiência vivida por oito mulheres e um homem que utilizaram meios reprodutivos tecnológicos como a inseminação artificial e a fertilização in vitro. Esses métodos intervêm agressivamente sobre os corpos dessas mulheres pelo uso intensivo de medicalização, não sendo questionado por elas o modo como as técnicas são divulgadas e mercantilizadas. Como estratégia metodológica, além das referências analíticas e bibliográficas sobre o tema, a construção de dados foi feita por meio de entrevistas semiestruturadas e de outras fontes obtidas em sites da internet e nas redes sociais como o Facebook. O argumento apresentado é que, para essas mulheres e suas famílias, a reprodução assistida “corrige” a infertilidade e seus efeitos estigmatizantes e, sobretudo, conduz à realização do projeto parental biogenético, reforçando o núcleo familiar composto por pai, mãe e filho biológico.
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Psicodinamismos de mulheres inférteis portadoras da síndrome dos ovários policísticos / Psychodynamics of women with Infertility caused by Polycystic Ovary Syndrome

Patricia Gomes Accioly Lins 12 June 2012 (has links)
A Infertilidade é, hoje, um problema real na vida de homens e mulheres. Pelo menos, 20% da população mundial está descobrindo que o filho nem sempre chega no momento planejado. Habitualmente, um casal infértil é definido como aquele que não obteve gravidez após um ano tendo relações sexuais regulares sem o uso de qualquer método contraceptivo, apesar de alguns autores estenderem esse período para dois anos. As principais causas da Infertilidade feminina estão relacionadas com a idade da paciente, com os fatores ovulatório, cervical, tubário, peritoneal e o endometrial. A Síndrome dos Ovários Policísticos não determina, necessariamente, a Infertilidade da mulher, porém é considerada como uma de suas etiologias, dado ao desequilíbrio hormonal que a acompanha. Obrigatoriamente, o tratamento de um casal infértil deverá ser realizado após uma investigação detalhada das possíveis causas da Infertilidade. As técnicas empregadas para o tratamento da Infertilidade são conhecidas como \'Reprodução Assistida\'. Apesar de existir certo reconhecimento dos fatores emocionais presentes nessa condição, as pesquisas sobre a Infertilidade que consideram os aspectos psicológicos e psicodinâmicos ainda são incipientes, principalmente no Brasil. Diante disso, a realização da presente pesquisa teve como objetivo conhecer os psicodinamismos de mulheres inférteis portadoras da Síndrome dos Ovários Policísticos, sendo operacionalizada por meio de avaliação psicológica, a qual incluiu entrevistas, técnicas objetivas e projetivas de avaliação da personalidade, a saber: Inventário de Sintomas de Stress de Lipp (ISSL) e Teste de Apercepção Temática (TAT). As entrevistas psicológicas foram analisadas por meio do método da livre inspeção do material; o ISSL, a partir das diretrizes expostas no manual; o TAT, pelo sistema interpretativo de Morval, acrescentando uma avaliação dinâmica das estórias. A amostra foi composta com quatro mulheres que apresentaram o referido quadro, sem suspeita de fator masculino envolvido na Infertilidade. A investigação sustenta-se numa abordagem qualitativa de cunho biopsicossocial, analisando os elementos conscientes e inconscientes presentes nas mulheres inférteis, bem como o seu nível de stress. A estratégia metodológica eleita foi a do estudo de caso coletivo e os resultados mostraram que as participantes vivem em ambientes familiares conflitivos, permeados pela deficiência de holding, com presença de rivalidade fraterna, dificuldades na introjeção da figura materna, sentimentos de desvalorização, rejeição, solidão, baixa autoestima, ambivalência frente à maternidade, enfrentando a Infertilidade vivida por elas como uma doença. Com isso, essas mulheres apresentaram dificuldades em seu desenvolvimento emocional, especialmente no que se refere à integração da sexualidade na personalidade e na identificação com a figura feminina, necessária para posterior estabelecimento de sua identidade sexual. / Nowadays, infertility is a real problem in women and men\'s life. At least 20% of people around the world are realizing that a child is not always born in the planned moment. Ordinary couples, that usually have active sexual life, have 25% chances of conceiving every month. After a year, 85% of the couples obtain a pregnancy. An infertile couple is defined as the one who is not able to obtain a pregnancy after trying one year without the use of any contraception - despite the fact that some authors consider a two-year period. The treatment of an infertile couple must be performed after a detailed research of the infertility reasons. Nevertheless, many general factors such as age, habits, environment and psychological factors may also have influence in the success of the infertility treatment. The techniques are known as \"Assisted Reproduction\" and have the objective of helping the nature, obtaining a good oocyte and spermatozoa quality, that should result in a healthy pregnancy and embryo. The present study aims to make a medical, psychoanalytic, psychological and social literature, investigating unconscious aspects and the psychodynamics of women with infertility caused by Polycystic Ovary Syndrome. The inquiry is supported by a qualitative boarding of biopsych- social matrix type, and regards the understanding of the desire for maternity - however it emphasazes unconscious elements found in the infertile women, as well as their level of stress. The methodological strategy was the study of a 4 infertile women collective case, with the instruments: the TAT - Thematic Apperception Test, the ISSL - Inventory of Stress Symptoms for adults with Lipp and the psychological interview. The analysis of the data was made through the interpretation of the interview, the Thematic Apperception Test and the interpretation of the ISSL.
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A vivência afetivo-sexual de casais inférteis / The sexual affective experience of infertile couples

Ana Larissa Marques Perissini 07 December 2010 (has links)
A pesquisa aqui relatada foi realizada com 08 casais inférteis em tratamento na Unidade de Medicina Reprodutiva e Imaginologia de um hospital-escola do interior paulista. A fim de compreendermos o instigante fenômeno da infertilidade, acessamos a vivência desses colaboradores mediante uma questão norteadora: Gostaria que você contasse para mim a sua vivência afetivo-sexual durante o namoro, a partir de seu casamento, quando decidiram engravidar, quando perceberam que tinham dificuldade de engravidar e durante a trajetória clínica da investigação e tratamento da infertilidade. Para análise de seus relatos, utilizamos a metodologia qualitativa, alicerçada na fenomenologia, que consiste na leitura e releitura dos depoimentos, discriminção das unidades de significado, elaboração de categorias e identificação das convergências e divergências encontradas em seus discursos. Para o entendimento de suas declarações, nos apoiamos nas perspectivas psicológica, biológica, sociocultural, histórica e da sexologia. Ao analisarmos os depoimentos, destacaram-se as seguintes categorias de significado: 1) Lembranças do tempo de namoro; 2) A arte do convívio a dois; 3) Desvendando a intimidade sexual; 4) A busca por uma ajuda especializada; 5) O estigma da infertilidade; 6) O filho como projeto de vida; 7) A menstruação como marcador de (in)sucesso do tratamento. Como resultado, percebemos que os casais planejam uma família com filhos biológicos, ou seja, uma família nuclear: pai, mãe, filho, partindo do pressuposto que eles têm o controle da função reprodutora. Entretanto, ao deparar-se com a dificuldade de engravidar, buscam um culpado pela infertilidade. Tornam o sexo mecânico, voltado só para a procriação, sentem-se estigmatizados por sua importência e veem a menstruação como sinônimo de fracasso do tratamento. A perda do controle da função procriadora os leva a buscar por novas tecnologias de RHA. E diante do insucesso do tratamento, muitos casais partem para a adoção, construindo uma família adotiva. / The research reported here was conducted with 08 infertile couples undergoing treatment at the Reproductive Medicine and Imaginology Unit of a teaching hospital in the countryside of Sao Paulo state. In order to understand the intriguing phenomenon of infertility, we assessed the experience of these couples by one question: I would like you to tell me your experience during sexual-affective relationship when you were dating, after getting married, when you decided to get pregnant, when you realized you had difficulty to get pregnant and during the course of clinical research and treatment of infertility. For analysis of their reports, we used a qualitative methodology based on phenomenology, which consists of reading and rereading of testimonies, discrimination of the units of meaning, development of categories and identification of similarities and differences found in their speeches. In order to understand their statements, we rely on the psychological, biological, sociocultural and historical perspectives as well as sexology. In reviewing the testimonies, the highlights are the following categories of meaning: 1) Memories of time of dating, 2) The art of living as a couple, 3) Revealing sexual intimacy; 4) The search for expert help, 5) The stigma of infertility, 6) The child as a life project; 7) The menstruation as a marker of (un) successful treatment. As a result, we realized that couples plan a family with biological children, that is, a nuclear family: father, mother, son, assuming that they have the control of reproductive function. However, when faced with the difficulty of getting pregnant, they seek something to blame for infertility. Sex becomes mechanic, aiming at procreation only; they feel stigmatized by their impotence and see menstruation as a synonym for treatment failure. The loss of control of the procreative function leads to the search for new AHR technologies. And faced with the failure of treatment, many couples decide to adopt a child, building an adoptive family.
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Maternidade adotiva e infertilidade: contribuições da avaliação psicológica / Adoptive motherhood and infertility: contributions from psychological evaluation

Nicole Medeiros Guimarães Eboli 11 August 2017 (has links)
Os processos judiciais de adoção são pautados por muitas expectativas e dificuldades técnicas, envolvendo complexos fatores. O presente trabalho objetivou contribuir com a área por meio do estudo de características de personalidade de mulheres inférteis que buscam a adoção de crianças como forma de vivenciar a maternidade. Em complemento, objetivou-se examinar indicadores psicométricos (precisão e validade) acerca do Questionário Desiderativo enquanto método projetivo de avaliação da personalidade. O delineamento do estudo foi transversal, descritivo-comparativo de grupos e correlacional, a partir de instrumentos de avaliação psicológica. Foram avaliadas 60 mulheres voluntárias (30 a 50 anos), em união conjugal, com escolaridade média ou superior. Destas, 40 não tinham filhos biológicos, sendo 20 pretendentes à adoção (Grupo 1=G1) e 20 mães adotivas (Grupo 2=G2). As 20 restantes eram mães biológicas, constituindo grupo de comparação (Grupo 3=G3). Responderam, individualmente, a uma bateria de instrumentos psicológicos, incluindo Self-Reporting Questionnaire (SRQ-20), Bateria Fatorial de Personalidade (BFP), Questionário Desiderativo (QD) e Psicodiagnóstico de Rorschach (escola francesa), aplicados e avaliados conforme diretrizes técnicas de seus respectivos manuais. Os dados foram submetidos à análise estatística descritiva e inferencial, comparando-se resultados médios ou frequências das variáveis nos grupos (ANOVA e Kruskall-Wallis, com post-hoc de Bonferroni ou teste Qui-quadrado), além da análise de associação entre variáveis e avaliação de concordância entre examinadores (Kappa e correlação de Spearman), considerando-se p0,05. Os achados apontaram elevados índices de precisão no Rorschach e no Desiderativo, com altos índices de concordância entre examinadores independentes, conferindo-lhes confiabilidade. A comparação de resultados médios entre os grupos apontou reduzido número de diferenças estatisticamente significativas, sugerindo homogeneidade nas características de personalidade das mulheres avaliadas, bem como ausência de indicadores psicopatológicos (SRQ-20). O padrão geral de respostas aos instrumentos mostrou-se compatível com referenciais normativos dos instrumentos utilizados, independente da diferenciada experiência das mulheres em termos de maternidade. Dentre os fatores de personalidade avaliados pela BFP, houve diferença estatisticamente significativa em apenas uma de suas facetas: Liberalismo (maior em G3). No Rorschach houve indicadores de preservado funcionamento lógico e afetivo, com raros marcadores específicos entre os grupos. No tocante ao Desiderativo foi possível aprimorar seu sistema avaliativo, com positivos indicadores de precisão e de validade, como inicialmente proposto. Os resultados enriqueceram-se a partir das análises correlacionais entre os três instrumentos avaliativos, identificando-se importantes e variadas correlações entre variáveis do Desiderativo e Rorschach, bem como entre Desiderativo e BFP, evidenciando indicadores de validade entre construtos relacionados, fortalecendo possibilidades avaliativas de características de personalidade a partir desta bateria técnica, integrando métodos projetivos e de autorrelato. Houve diferentes resultados de variáveis com correlação estatisticamente significativa em cada grupo de participantes, sugerindo que a combinação entre os instrumentos pôde detectar especificidades no funcionamento psicodinâmico destas participantes, a depender de suas condições frente à maternidade, não reveladas pela análise isolada das variáveis. Os resultados ilustram a relevância de se considerar componentes da personalidade em processos de avaliação psicológica forense voltados à adoção, visto que variáveis relacionadas às vivências psíquicas da infertilidade (ou não) podem interferir em seus resultados. Por fim, o trabalho aponta para as possibilidades informativas dos instrumentos padronizados de avaliação psicológica, sobretudo de sua utilização conjunta e complementar neste contexto da prática profissional do psicólogo. / The adoption judicial processes are based on many expectations and technical difficulties, involving complex factors. The present work aimed to contribute to the area through the study of infertile womens personality features who seek children´s adoption as a way of experiencing motherhood. In addition, we aimed to examine psychometric indicators (reliability and validity) of the Desiderative Questionnaire as a projective method for assessment of the personality. The study design was cross-sectional, descriptive, comparative between groups, and correlational, based on psychological assessment instruments. Sixty female volunteers (30 to 50 years old), in a conjugal union, with average or higher education were assessed. Forty women did not have biological children: 20 were waiting for adoption (Group 1 = G1) and 20 were adoptive mothers (Group 2 = G2). The remaining 20 were biological mothers, constituting a comparison group (Group 3 = G3). They individually answered to a battery of psychological tests, including Self-Reporting Questionnaire (SRQ-20), Factorial Personality Battery (BFP), Desiderative Questionnaire (QD) and Rorschach Psychodiagnosis (French Approach), administered and interpreted according to technical guidelines from their respective manuals. Data were submitted to descriptive and inferential statistical analysis, comparing mean scores or variable\'s frequencies in the groups (ANOVA and Kruskall-Wallis, with Bonferroni posthoc, or Chi-square test), as well as the analysis of the association between variables and agreement between examiners (Kappa and Spearman correlation), considering p0.05. The findings indicated high indicators of reliability in the Rorschach and Desiderative, with high agreement between independent examiners. The of means between the groups indicated a small number of statistically significant differences, suggesting homogeneity in the personality characteristics of the women evaluated, as well as the absence of psychopathological indicators (SRQ-20). The general pattern of responses to the instruments was compatible with the instruments normative references, regardless of the differentiated women\'s experience in maternity terms. Among the personality factors evaluated by BFP, there was a statistically significant difference in only one of its facets: Liberalism (higher in G3). In the Rorschach, there were indicators of preserved logical and affective functioning, with rare specific markers between groups. Regarding the Desiderative, it was possible to improve its evaluation system, with positive indicators of reliability and validity, as initially proposed. The results were enriched from the correlational analyses between the three evaluation instruments, identifying important and varied correlations between the Desiderative and Rorschachs variables, as well as between Desiderative and BFP, evidencing validity indicators between related constructs, strengthening evaluation possibilities of personality characteristics from this technical battery, integrating projective and self-report methods. There were different results from variables with significant correlation in each group of participants, suggesting that the instruments combination could detect specificities in the psychodynamic functioning of these participants, depending on their conditions in relation to motherhood, not revealed by the isolated analysis of the variables. The results illustrate the relevance of considering personality components in forensic psychological evaluation processes aimed at adoption since variables related to psychological experiences related to infertility (or not) might interfere with their results. Finally, the research points to the informative possibilities of the standardized instruments of psychological evaluation, especially their conjunction and complementary use in this context on the psychological professional practice.
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Caracterização Citogenética Molecular de Rearranjos Cromossômicos Aparentemente Equilibrados Associados ao Fenótipo de Infertilidade / Molecular Cytogenetic Characterization of Apparently Balanced Chromosomal Rearrangements Associated with Infertility

Juliana Dourado Grzesiuk 13 August 2012 (has links)
A translocação recíproca é o rearranjo equilibrado mais comum em humanos. Frequentemente, indivíduos com rearranjos equilibrados não apresentam manifestações clínicas, entretanto, na meiose, o pareamento entre cromossomos translocados forma uma figura quadrivalente em forma de cruz que torna a disjunção cromossômica incerta e dependendo do rearranjo, o individuo pode vir a ser infértil, apresentar um risco aumentado de abortamento espontâneo e/ou da prole apresentar alterações fenotípicas. Neste projeto, investigamos duas famílias de pacientes inférteis, portadores de translocações cromossômicas. O objetivo foi caracterizar as alterações citogenéticas e citogenômicas relacionadas à infertilidade masculina em pacientes portadores de rearranjos aparentemente equilibrados, associando técnicas de citogenética clássica (bandeamento GTG), citogenética molecular (FISH) e citogenômica (array-CGH). Foram estudados sete indivíduos da família 1, sendo diagnosticados três portadores da translocação (X;22), sendo um deles azoospérmico. Nesta família foram ainda detectados dois casos de mosaicismo para síndrome de Turner. A família 2 foi composta por dois irmãos oligozoospérmicos, portadores de translocação (8;13). Com a aplicação da técnica de FISH, definimos o cariótipo final dos portadores dos rearranjos como 46,XX ou 46,XY,t(X;22)(p22.3;q11.2) para a família 1 e 46,XY,t(8;13)(q13;q14)para a família 2. A técnica de array-CGH (plataforma 2x400K, Agilent) detectou alterações no número de cópias de alguns genes candidatos relacionados ao fenótipo de infertilidade, sendo a sequência 132 de piRNAs, os genes DDX11, Jagged 2 e ADAM18 na família 1 e os genes candidatos ADAM18 e POTE nos pacientes da família 2. / Reciprocal translocations are the most common balanced rearrangement in humans. Often individuals with balanced rearrangements show no clinical findings. However, in meiosis, the pairing between translocated chromosomes forms a quadrivalent cross-shaped figure which has the effect of making chromosome disjunction uncertain and, depending on the rearrangement, and on the segregation of the unbalanced chromosomes, the individual can be infertile, can present with an increased risk of spontaneous abortions or can have an offspring with abnormal phenotype. We have studied two families of infertile patients, who were carriers of chromosomal translocations. The objective was to characterize the cytogenetic and cytogenomic alterations related to male infertility in patients with apparently balanced rearrangements using classical cytogenetic techniques (GTG banding), molecular cytogenetics (FISH) and cytogenomics (array-CGH). Seven subjects of the family 1 were studied, including three carriers of translocation (X;22), one azoospermic. Two cases of mosaicism for Turner syndrome were detected in this family. The second family consisted of two oligozoospermic brothers with translocation (8;13). FISH was used to characterize the karyotypes as 46, XX or 46,XY, t(X;22)(p22.3;q11.2) for the members of the family 1 and 46,XY,t(8;13)(q13;q14) for family 2. Array-CGH was also performed using the Agilent platform 2x400K, to detect associated copy number variations of some of the candidate genes that could be related to infertility. In the family 1 the candidate genes were 132 piRNAs sequences and DDX11,Jagged 2 and ADAM18 genes. The candidate genes for the family 2 were ADAM18 and POT.
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Effect of feeding lambs with cottonseed co-products on reproductive system and meat quality / Efeito da alimentação de cordeiros com co-produtos do algodão no sistema reprodutivo e na qualidade de carne

Tiago do Prado Paim 07 December 2012 (has links)
The aim of this study was to investigate the effect of feeding cotton co-products with different gossypol concentrations on reproductive development of lambs close to puberty and also on carcass traits and fatty acid profile of meat. Twenty four 5-months old ram lambs (20.6 ± 1.9 kg BW) were used. These were housed in individual pens and received four diets: 20% of dry matter intake (DMI) of whole cottonseed (WCS), 20%DMI of cottonseed meal (CSM), 20%DMI of high oil cottonseed meal (CSC) and a control group without cottonseed co-products (CTL). Free gossypol intake was 0, 16.32, 6.98 and 5.47 mg/kgBW for CTL, WCS, CSC and CSM, respectively. At each 15 days, the animals were weighted, and blood and semen samples were collected. Sperm motility, vigor, mass movement, concentration and pathologies were evaluated. The free testosterone and cortisol concentrations in serum were determined. After 95 experimental days, the lambs were slaughtered and carcass traits were measured. Meat samples of Longissumus dorsi muscle were taken for fatty acid profile analysis. And testis samples were collected to analysis in light and transmission electron microscopes. The treatments did not differ in average daily weight gain, sperm volume, motility, vigor and concentration. The CTL group had higher testosterone concentration than CSC at the end of trial and had lower total sperm defects and higher mass movement than others. The number of mitochondrial sheath aplasia increased with increasing gossypol level in diet. There was no relation between the other variables evaluated and gossypol level in diets; however the groups that received cottonseed co-products showed worse reproductive parameters than CTL. Therefore, these co-products had negative impact on reproductive system of puberal lambs. In relation to fatty acid profile, meat from CSM and CSC groups had higher levels of conjugated linolenic acid (CLA) than others and yet CSC group showed higher vaccenic acid than others. Meat from animals that received whole cottonseed had less unsaturated fatty acids, CLA and vaccenic acid. Therefore, between cotton co-products, the processed (CSM and CSC) must be preferred for use in ruminant feed rather than whole cottonseed. The meat from animals that did not receive cotton co-products had higher n-3 fatty acid, and also better n-6 to n-3 ratio compared to others. This can impair the use of these co-products due to current great importance given to these fatty acids in human nutrition / Com este estudo, objetivou-se avaliar o efeito da alimentação com co-produtos do algodão tendo diferentes concentrações de gossipol no desenvolvimento reprodutivo de cordeiros no período próximo a puberdade e também nas características de carcaça e no perfil de ácidos graxos da carne. Vinte e quatro cordeiros com 5 meses de idade (20.6 ± 1.9 kg PV) foram utilizados. Estes foram alojados em baias individuais e receberam quatro dietas: 20% da ingestão de matéria seca (IMS) de caroço de algodão (CAROÇO), 20%IMS de farelo de algodão (FARELO), 20%IMS de torta de algodão (TORTA) e um grupo controle (CONTROLE) sem o uso de co-produtos do algodão. A ingestão de gossipol livre foi de 0, 16,32, 6,98 e 5,47 mg/kgPV para CONTROLE, CAROÇO, TORTA e FARELO, respectivamente. A cada 15 dias, os animais foram pesados, e amostras de sangue e sêmen foram coletadas. O sêmen foi analisado quanto a motilidade, vigor, turbilhão, concentração e patologias. Foram determinadas a concentração de testosterona livre e cortisol no soro sanguíneo. Após 95 dias de experimento, os cordeiros foram abatidos e as características de rendimento de carcaça e composição da 12ª costela foram mensuradas. Amostras do músculo Longissumus dorsi foram coletadas para a análise do perfil de ácidos graxos. Amostras dos testículos foram coletadas para análise em microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão. Os tratamentos não diferiram em ganho em peso diário, volume ejaculado, motilidade, vigor e concentração espermática. Os animais do grupo CONTROLE apresentaram concentração de testosterona maior que os do grupo TORTA no final do período experimental. E ainda os animais do grupo CONTROLE tiveram menor número de defeitos totais e maior turbilhão que os outros. O número de lesões de aplasia da bainha mitocondrial aumentou com o aumento do teor de gossipol livre na dieta. Para as outras variáveis avaliadas, não houve relação com o nível de gossipol livre na dieta, no entanto os animais que receberam co-produtos do algodão apresentaram piores parâmetros reprodutivos do que os animais do grupo CONTROLE. Por isso, pode-se concluir que estes co-produtos tiveram um impacto negativo no sistema reprodutivo dos cordeiros durante a puberdade. Em relação ao perfil de ácidos graxos, a carne dos animais dos grupos TORTA e FARELO apresentaram maiores valores de ácido linolênico conjugado (CLA) que os outros dois tratamentos e ainda os animais do grupo TORTA apresentaram maior teor de ácido vacênico que os outros. A carne dos animais que receberam caroço de algodão mostrou menor quantidade de ácidos graxos insaturados, CLA e ácido vacênico. Portanto, dentre os co-produtos do algodão, os processados (FARELO e TORTA) devem ser preferidos para uso na nutrição de ruminantes em detrimento ao caroço. A carne dos animais do grupo CONTROLE apresentou maior teor de n-3, e ainda melhor proporção entre n-6 e n-3 comparado com as demais dietas, o que pode dificultar o uso desses co-produtos devido a grande importância dada atualmente a este grupo de ácidos graxos na nutrição humana
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Padrão de metilação do receptor de progesterona (PGR) em endométrio eutópico de pacientes com infertilidade relacionada à endometriose durante a fase secretora / Methylation pattern of progesterone receptor (PGR) on eutopic endometrium of patients with infertility related to endometriosis during stage secretory

Carlos Valério da Rocha Júnior 08 December 2015 (has links)
A endometriose é uma doença caracterizada pelo crescimento de tecido endometrial ectópico histologicamente similar ao do endométrio eutópico. Dentre sua sintomatologia, encontra-se relatos de infertilidade a qual está relacionada à diminuição da receptividade endometrial e a resistência à progesterona, importante hormônio envolvido no estabelecimento desse processo e na manutenção da gestação. A etiologia da endometriose não é bem conhecida, mas estudos sugerem que essa desordem possa estar ligada a mecanismos epigenéticos de regulação da expressão genica, tais como a metilação do DNA. A receptividade endometrial à progesterona é mediada por receptores (PR-A e PR-B) a qual parece estar suprimida nessas pacientes, possivelmente por diminuição ou inatividade destes receptores, o que poderia ser um mecanismo envolvido na infertilidade associada à endometriose. Estudos de metilação no gene codificante das isoformas A e B do receptor de progesterona (PGR) mostram que o exon 1 da isoforma PR-B encontra-se hipermetilado e tem sua expressão silenciada em pacientes portadoras da doença. Entretanto ainda não foi avaliado o perfil de metilação deste gene em mulheres inférteis com a doença, o que poderia estar envolvido na infertilidade apresentada por essas pacientes. O objetivo desde estudo foi avaliar o padrão de metilação do gene PGR em endométrio eutópico de mulheres com infertilidade relacionada à endometriose e controles inférteis, durante a fase secretora. 10 Foram realizadas biópsias endometriais de 23 pacientes, divididas em dois grupos: 12 mulheres inférteis sem endometriose (Controle infértil) e 11 mulheres inférteis com endometriose (Endometriose). Todos os endométrios coletados foram confirmados na fase secretora do ciclo através de análise histológica clássica segundo os critérios de Noyes. O DNA genômico foi extraído com o QIAamp DNA Mini Kit e modificado utilizando o EpiTec Bissulfite Kit. O padrão de metilação das isoformas PR-A e PR-B foi avaliado pela técnica HRM (High Resolution Melting) A análise de metilação da isoforma PR-A mostrou que a região analisada encontra-se hipometilada, em que a porcentagem de metilaçao encontrada foi 0% em ambos os grupos com e sem endometriose. No entanto, no grupo com endometriose, a isoforma PR-B mostrou-se parcialmente metilada na maioria das pacientes com porcentagem de metilaçao de 50% (n=8), somente uma paciente apresentou 80% de metilacão na isoforma B. Para o grupo sem endometriose a isoforma PR-B mostrou-se hipometilada (0%). A hipometilação da isoforma PR-A sugere que este gene encontrar-se na sua forma ativa, sem alterações em sua expressão. No entanto, a hipermetilação da isoforma PR-B nas mulheres com endometriose pode estar relacionada com o silenciamento gênico ou redução da sua expressão, sugerindo que a baixa resposta à progesterona nas mulheres com endometriose pode estar diretamente ligada à redução do número de seus receptores nessas pacientes / Endometriosis is a disease characterized by ectopic growth of endometrial tissue histologically similar to the eutopic endometrium. Among this symptoms, is infertility accounts which is related to decreased endometrial receptivity and resistance to progesterone, important hormone involved in the establishment of this process and the maintenance of pregnancy. The etiology of endometriosis is not well known, but studies suggest that this disorder can be linked to epigenetic mechanisms of regulation of gene expression such as DNA methylation. The endometrial responsiveness to progesterone is mediated by receptors (PR-A and PR-B) which seem to be suppressed in these patients, possibly reducing or inactivity of these receptors, which could be a mechanism involved in the infertility associated with endometriosis. Studies in methylation of the gene encoding the A and B isoforms of progesterone receptor (PGR) showed that exon 1 of the PR-B isoform is hypermethylated and silenced have its expression in patients with the disease. However it has not been rated the methylation profile of this gene in infertile women with the disease, which could be involved in the infertility presented by these patients. The goal from study was to evaluate the methylation pattern of the PGR gene in eutopic endometrium of women with infertility related to endometriosis and infertile controls during the secretory phase. Endometrial biopsies were performed on 12 23 patients, divided into two groups: 12 infertile women without endometriosis (infertile Control) and 11 infertile women with endometriosis (Endometriosis). All endometrium collected were confirmed in the secretory phase of the cycle by classical histological analysis according to the criteria of Noyes. Genomic DNA was extracted with the QIAamp DNA Mini Kit and using the modified EpiTec Bissulfite Kit. The methylation pattern of PR-A and PR-B isoforms was assessed by HRM technique (Melting High Resolution) Methylation analysis of PR isoform The analyzed showed that the region is hipometilada, wherein the percentage of methylation was found 0% in both the groups with and without endometriosis. However, in the group with endometriosis, the PR-B isoform showed partially methylated in most patients with methylation percentage of 50% (n = 8), only one patient showed methylation in 80% of isoform B. In the group without endometriosis the PR-B isoform was shown hipometilada (0%). The hypomethylation of PR-A isoform suggests that this gene be in its active form, without change in his expression. However, hypermethylation of the PR-B isoform in women with endometriosis may be associated with gene silencing or reducing the expression, suggesting that the low response to progesterone in women with endometriosis can be directly linked to the reduction of its receptors in these patients
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Perfil diferencial de microRNAs em células do Cummulus oophorus de mulheres inférteis com e sem endometriose submetidas à estimulação ovariana / Differential profile of microRNAs in Cumulus oophorus cells from infertile women with and without endometriosis submitted to ovarian stimulation

Liliane Fabio Isidoro da Silva 27 September 2017 (has links)
Questiona-se um possível papel deletério da endometriose sobre a qualidade oocitária (QO), que é, em grande parte, condicionada pelo papel das células do cumulus. A função dessas células envolve a expressão de diversas moléculas codificadas por genes específicos, regulada a nível de transcrição, pós-transcrição e tradução. Os microRNAs atuam como reguladores póstranscricionais da expressão gênica, de modo que qualquer alteração nesse mecanismo pode levar a anormalidades no desenvolvimento oocitário. Desta forma, propusemos um estudo inédito da análise de microRNAs em células do cumulus (CC) de mulheres inférteis com e sem endometriose com o objetivo de evidenciar processos biológicos e vias de atuação correlacionados com o papel da endometriose na infertilidade e seu possível impacto na aquisição da competência oocitária. Foram incluídas no estudo 15 pacientes inférteis (5 controles com fator tubário e/ou masculino, 5 com endometriose estágios I/II e 5 com endometriose estágios III/IV) submetidas à estimulação ovariana controlada (EOC) para injeção intracitoplasmática de espermatozoide (ICSI). Imediatamente após a captação oocitária, as CCs foram isoladas e armazenadas para extração dos miRNAs. O perfil de 754 miRNAs foi analisado por meio da técnica de TaqMan®Array Human MicroRNA Cards. Considerou-se significativo p<0,05. Os miRNAs hsa-let-7f-1#, hsa-miR-1291, hsa-miR-140-5p, hsa-miR-218, hsa-miR-30b e hsa-miR-629-5p foram identificados menos expressos nas pacientes com endometriose I/II comparadas às controles. Os miRNAs hsa-miR-1291, hsa-miR-187-3p, hsamiR-30b, hsa-miR-532-3p e hsa-miR-629-5p foram identificados menos expressos nas pacientes com endometriose III/IV em relação às controles. Ao comparar-se os grupos endometriose I/II e endometriose III/IV entre si, os miRNAs hsa-miR-187-3p e hsa-miR-532- 3p foram menos expressos e os miRNAs hsa-let-7f-1# e hsa-miR-362-3p mais expressos nas pacientes com endometriose III/IV. A análise de enriquecimento identificou os genes regulados pelos miRNAs e as respectivas vias metabólicas em que estão envolvidos, sugerindo aumento de apoptose, diminuição de proliferação celular, alterações no controle do ciclo celular e no metabolismo energético das CCs de mulheres com a doença inicial e avançada. Os dados apontam para alterações na regulação pós-transcricional em CCs de mulheres inférteis com endometriose inicial e avançada, o que pode afetar processos e vias essenciais à aquisição de competência oocitária e estar envolvido na infertilidade associada à doença. Este estudo contribui para o entendimento da etiopatogênese da infertilidade relacionada à endometriose identificando mecanismos pós-transcricionais relacionados à piora da qualidade gamética nestas mulheres. / It is questioned a possible deleterious role of endometriosis on oocyte quality (OQ), which is largely conditioned by the function of cumulus cells. The role of these cells involve the expression of several molecules encoded by specific genes, regulated at transcription level, post-transcription and translation. The microRNAs act as transcriptional regulators of gene expression, thus any alteration in this mechanism can lead to abnormalities in oocyte development. In this way, we proposed an unpublished study of the microRNAs analysis in cumulus cells (CC) of infertile women with and without endometriosis, aiming to evidence the biological processes and pathways of action correlated with the presence of endometriosis in infertility and its possible impact on the acquisition of oocyte competence. Fifteen infertile patients (5 controls with tubal factor and/or male, 5 with stage I/II of endometriosis and 5 with stages III/IV of endometriosis) submitted to the controlled ovarian stimulation (EOC) for intracytoplasmic sperm injection (ICSI) were included in the study. Immediately after oocyte uptake, CCs were isolated and stored for miRNA extraction. The 754 miRNAs profile was analyzed using the TaqMan®Array Human MicroRNA Cards technique. Significant values were considered when p <0.05. The hsa-miR-218, hsa-miR-301 and hsa-miR-629-5p miRNAs were identified as less expressed in the patients with endometriosis I/II compared to controls. The miRNAs hsa-miR-1291, hsa-miR-187-3p, hsa-miR-30b, hsa-miR-532-3p and hsa-miR- 629-5p were identified as less expressed in patients with endometriosis III/IV compared to controls. Comparing the groups with endometriosis I/II and endometriosis III/IV, hsa-miR-187- 3p and hsa-miR-532-3p miRNAs were less expressed and hsa-let-7f-1# and hsa-miR-362-3p more expressed in patients with endometriosis III/IV. The enrichment analysis identified the genes regulated by the miRNAs and the respective metabolic pathways in which they are involved, suggesting apoptosis increase, decreased cell proliferation, alterations in the cell cycle control and energetic metabolism of the CCs of women with initial and advanced disease. The data point to changes in post-transcriptional regulation in CCs of infertile women with early and advanced endometriosis, which may affect processes and pathways essential for acquiring oocyte competence and resulting in infertility associated with the disease. This study contributes to the understanding of the etiopathogenesis of infertility related to endometriosis by identifying post-transcriptional mechanisms related to the deterioration of quality of gametes in these women.
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Estudo Comparativo entre os Métodos de Sonohisterossalpingografia Contrastada, Histerossalpingografia e Laparoscopia / A comparative study of hysterosalpingo-contrast sonography, hysterosalpingography and laparoscopy

Rodrigo Alves Ferreira 02 April 2001 (has links)
O fator tuboperitoneal é a causa mais freqüente de infertilidade na mulher e a sua investigação é fundamental na propedêutica do casal infértil. Neste estudo, avaliou-se o método da sonohisterossalpingografia contrastada (Hycosy), que utiliza o contraste SH U 454 (Echovist&#61650;), na detecção da permeabilidade tubária, comparando-o com a histerossalpingografia (HSG) e com a laparoscopia (LPS) acompanhada de cromotubagem (padrão ouro). Realizou-se a investigação de 96 tubas uterinas de 48 pacientes, submetidas à Hycosy, HSG e LPS. Todas as avaliações da Hycosy foram realizadas por um único observador que desconhecia o resultado da HSG. O mesmo se refere, também, quanto à realização da HSG, bem como da LPS. Foram avaliados os seguintes instrumentos de medidas: sensibilidade (S), especificidade (E), valor preditivo positivo (VPP), valor preditivo negativo (VPN), concordância observada (CO), razão de verossimilhança positiva (RV+) e razão de verossimilhança negativa (RV-). Comparando-se a avaliação pela Hycosy com a LPS, foram encontrados os seguintes resultados: S=86,6%, E=35,7%, VPP=88,75%, VPN=31,25%, CO=79,2%, RV+=1,35 e RV-=0,38. Quanto à comparação da HSG com a LPS, os valores obtidos foram: S=85,4%, E= 50%, VPP=90,9%, VPN=36,8%, CO=80,2%, RV+=1,71 e RV-=0,29. Entre Hycosy e HSG, a co-positividade foi de 87%, a co-negatividade de 31,6% e a concordância de 76%. Esse estudo demonstrou que a Hycosy é uma técnica segura e confiável para a avaliação da permeabilidade tubária na propedêutica da infertilidade. / Tubal disorders are the main causes of female infertility. Assessment of tubal patency is a very important issue for evaluating an infertile couple. A total of 96 Fallopian tubes from 48 patients was examined with hysterosalpingo-contrast sonography (Hycosy), hysterosalpingography (HSG) and laparoscopic chromopertubation (LPS). Hycosy was performed by transvaginal ultrasound with a new contrast medium (Echovist&#61650;). Compared with laparoscopic results, we found a sensitivity of 86.6%, a specificity of 35.7%, positive predictive value (VPP) of 88.75%, negative predictive value (VPN) of 31.25% and concordance (Hycosy/LPS) of 79,2%, while the results for HSG were sensitivity of 85.4%, specificity of 50%, VPP of 90.9%, VPN of 36.8% and concordance (HSG/LPS) of 80.2%. In conclusion, the results have shown that Hycosy is a reliable and safe method for evaluating tubal patency.

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