MELO, Caroline Mourão. Estudo da atividade antiinflamatória e antinociceptiva da lactona do ácido hawtriwaico, diterpeno de Egletes viscosa Less, em camundongos : possíveis mecanismos. 2006. 104 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2006. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-08T13:14:19Z No. of bitstreams: 1 2006_dis_cmmelo.pdf: 9369146 bytes, checksum: 36274903e8ab153208a9134fef607505 (MD5) / Rejected by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com), reason: Sem referência. on 2012-03-09T11:50:42Z (GMT) / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-09T11:58:12Z No. of bitstreams: 1 2006_dis_cmmelo.pdf: 9369146 bytes, checksum: 36274903e8ab153208a9134fef607505 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-09T12:04:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_dis_cmmelo.pdf: 9369146 bytes, checksum: 36274903e8ab153208a9134fef607505 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-09T12:04:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_dis_cmmelo.pdf: 9369146 bytes, checksum: 36274903e8ab153208a9134fef607505 (MD5) Previous issue date: 2006 / The diterpene, 12-acetoxy-hawtriwaic acid lactone (AHAL) isolated from the flower buds of Egletes viscosa Less. (Asteraceae), a popular medicinal plant largely encountered in Ceará State was evaluated in mice for its anti-inflammatory and antinociceptive potential, using capsaicin-induced ear edema and hindpaw nociception as experimental models. AHAL (12.5, 25 and 50 mg/kg, p.o.) significantly attenuated the ear edema response to topically applied capsaicin (250µg), in a dose-related manner (45.7, 86.9 and 100 % respectively). This response to capsaicin was also greatly inhibited by ruthenium red (3 mg/kg, s.c.), a non-competitive capsaicin receptor (TRPV1) antagonist by 74.8%. The anti-edema effect of AHAL (50 mg/kg, p.o.) seems unrelated either to inhibition of mast cell degranulation or to antagonism at histamine and serotonin receptor since AHAL did not modify the paw edema response-induced by intraplantar injections of compound 48/80 (10 µg), histamine (10 µg) or serotonin (10 µg). However the substance P (SP) induced hindpaw edema was significantily inhibited by AHAL (25 and 50 mg/kg, p.o.) by 29.4 and 53.3 % respectively, as well as the increase in capillary permeability induced by intra-peritoneal acetic acid. In the hindpaw nociceptive model, AHAL suppressed the nocifensive paw-licking behavior induced by intraplantar injection of capsaicin (1.6 µg). This response to capsaicin was also greatly inhibited by ruthenium red (3 mg/kg, s.c.) by 64.9 %. The antinociceptive effect of AHAL (50 mg/kg, p.o.) was unaffected by naloxone pre-treatment but was significantly antagonized by theophylline and glibenclamide, the respective blockers of adenosine receptor and KATP-sensitive channels. AHAL (50 mg/kg, p.o.) did not impair the ambulation or motor coordination of mice in open-field and rota-rod tests. These data allow us to conclude that AHAL possesses anti-inflammatory and antinociceptive properties. It possibly inhibits acute neurogenic inflammation by the inhibition of SP release or its receptor blockade and the nociception through mechanisms that involve the endogenous adenosine and opening of ATP-sensitive potassium channels. / O diterpeno, lactona do ácido hawtriwaico (LAHT) isolado dos capítulos florais de Egletes viscosa Less. (Asteraceae) foi avaliado nos modelos de edema de orelha e nocicepção induzida por capsaicina em camundongos. A LAHT (12,5; 25 e 50 mg/kg, v.o.) atenuou significativamente a resposta ao edema de orelha induzido pela aplicação tópica de capsaicina (250 µg), de maneira dose dependente (45,7; 86,9 e 100 % respectivamente). A resposta ao edema de orelha induzido pela capsaicina foi também significativamente inibida em 74,8 % pelo vermelho de rutênio (VR; 3mg/kg, s.c.), um antagonista não competitivo do receptor da capsaicina (TRPV1). A LAHT (50 mg/kg, v.o.) não modificou a resposta ao edema de pata induzido por composto 48/80 (10 µg), histamina (10 µg) ou serotonina (10 µg), demonstrando que a LAHT não bloqueia a desgranulação de células mastocitárias ou os receptores de histamina e serotonina. No entanto, o edema de pata induzido por substância P (SP) foi significativamente suprimido pela LAHT (25 e 50 mg/kg, v.o.), em 29,4 e 53,3 % respectivamente, bem como o aumento da permeabilidade capilar induzido pela injeção intraperitoneal de ácido acético. No modelo de nocicepção, a LAHT (12,5; 25 e 50 mg/kg, v.o.) suprimiu de forma significativa o comportamento nociceptivo de lamber a pata induzido pela injeção intraplantar de 1,6 µg de capsaicina (27,1; 32,3 e 52 % respectivamente). A resposta à nocicepção induzida pela capsaicina foi significativamente inibida pelo VR (3 mg/kg, s.c.) em 64,9 %. O efeito antinociceptivo da LAHT (50 mg/kg, v.o.) não foi afetado pelo pré-tratamento por naloxona, mas foi significativamente antagonizado pela teofilina e glibenclamida, respectivos bloqueadores de adenosina e canais de KATP dependentes. A LAHT (50 mg/kg, v.o.) não alterou o tempo de sono, não prejudicou a atividade locomotora e não alterou a coordenação motora dos camundongos como evidenciado nos testes do tempo de sono induzido por pentobarbital, do campo aberto e rota-rod respectivamente. Esses dados sugerem que a LAHT inibe a inflamação neurogênica aguda, possivelmente pela inibição da liberação de SP ou bloqueio de seus receptores, e a nocicepção possivelmente pelo envolvimento de adenosina endógena e canais de KATP dependentes.

Made available in DSpace on 2016-02-26T13:34:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 luciana_leo_ioc_mest_2015.pdf: 2510426 bytes, checksum: 7967d9273680443d5c735d2b5543fee6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / O papel da lipoxina A4 (LXA4) no sistema imunológico é bem estudado, mas o papel dessa molécula na fisiologia do sistema nervoso central (SNC) só foi abordado recentemente. Como um modulador alostérico positivo, a LXA4 produz efeitos canabimiméticos e pode, dessa forma, estar envolvida em vários aspectos de funções fisiológicas reguladas pelo sistema endocanabinóide (eCB). Nós investigamos essa hipótese analisando o comportamento de camundongos knockout (5-LO-/-) para a enzima 5-lipoxigenase (5-LO), que participa da síntese de LXA4. Ansiedade, consumo de água e alimento, locomoção, nocicepção e memórias aversivas são comportamentos reconhecidos como sob controle do sistema eCB e foram avaliados neste estudo. Nenhuma alteração foi observada no comportamento de 5-LO-/- em relação ao consumo de água e alimento e locomoção no teste de campo aberto. No entanto, o tratamento com LXA4 produziu efeito ansiolítico no labirinto em cruz elevada. Além disso, inibição farmacológica da 5- LO demonstrou um efeito ansiogênico em animais idosos, mas não em adultos jovens, indicando que a LXA4 endógena exerce um efeito regulatório sobre ansiedade de forma idade-dependente. Os animais 5-LO-/- apresentaram um aumento na sensibilidade e redução na tolerância à dor no teste de sensibilidade ao choque. Ainda, uma disfunção em memória de curto prazo e extinção de memória no teste de esquiva inibitória foi observada nos animais 5-LO-/-, indicando que a LXA4 pode agir na facilitação do aprendizado. Esse dado é de grande importância para o possível uso da LXA4 como tratamento do dano cognitivo decorrente de neuroinflamação O estudo da sepse nos revela que um estímulo inflamatório pode gerar produção exacerbada de moléculas pró-inflamatórias no SNC, o que causa neuroinflamação e disfunção cognitiva. A LXA4 é uma boa candidata como alvo de terapia para o dano cognitivo decorrente de neuroinflamação, uma vez que tem potencial anti-inflamatório e neuroprotetor por ação em receptores ALX e CB1, respectivamente. Neste estudo foi possível observar queda na produção de citocinas pró-inflamatórias no plasma e no cérebro de camundongos com inflamação sistêmica induzida por lipopolissacarídeo (LPS) mediante tratamento com LXA4. Além disso, o dano cognitivo observado sobre consolidação de memória neste modelo de sepse foi prevenido após tratamento com LXA4. Os dados apresentados neste estudo apontam funções do SNC sujeitas a modulação pela disponibilidade de LXA4 endógena e um efeito benéfico do tratamento da LXA4 no resgate de dano cognitivo decorrente de neuroinflamação. Apresentamos evidências que contribuem para o esclarecimento do papel fisiológico da LXA4 no SNC e para o seu potencial no tratamento de patologias inflamatórias que atingem o encéfalo / The role of lipoxin A 4 (LXA 4 ) in the immune system is well studied, however the part this molecule play s in central nervous system (CNS) physiology has only recently been addressed. LXA 4 , as a CB1 allosteric enhancer, has a cannabimimetic effect and may therefore be involved in various aspects of endocannabinoid system (eCB) physiological functions. We investigated this reasoning by analyzing the behavior of 5 - lipoxygenase ( 5 - LO ) knockout mice (5 - LO - / - ) . A nxiety - like behavior, a ppetitive behavior, locomotion, nociception and learning and memory are all known to be under control of the eCB system and were assessed in this study. No alteration was observed in the behavior of 5 - LO knockout mi ce regarding appetitive behavior, measured by food and water intake, or locomotion in the open field test. However, treatment with LXA 4 produced an anxiolytic - like effect on the elevated plus maze. Further, pharmacological inhibition of 5 - LO showed a n anxi ogenic - like effect in aged, but not adult mice, indicating that endogenous LXA 4 has an age - dependent effect on the modulation of anxiety - like behavior. 5 - LO - / - mice presented an increase in pain sensitivity and a decrease in pain tolerance in the foot shoc k sensitivity test. Interestingly, the animals also presented impairment in short - term memory and extinction learning in the step - down inhibitory avoidance task, pointing out that LXA 4 may act in the facilitation of fear learning. These data are of great i mportance to the possible use of LXA 4 as treatment to neuroinflammation induced cognitive impairment. The study of sepsis reveals that an inflammatory stimulus can induce the exacerbated production of pro - inflammatory cytokines in the CNS, which causes neu roinflammation and cognitive impairment. LXA 4 is a good candidate as target in the treatment of neuroinflammation induced cognitive impairment, since it has anti - inflammatory and neuroprotection potential due to its action on ALX and CB1 receptors, respect ively. In this study, we observed a decrease in the production of pro - inflammatory cytokines in plasma and brain of mice with induced systemic inflammation by lipopolysaccharide (LPS) injection due to treatment with LXA 4 . Moreover, the memory consolidation impairment observed in this sepsis animal model was prevented following LXA 4 treatment. The data presented in this study point out CNS functions subjected to modulation by endogenous LXA 4 availability and a beneficial effect of LXA 4 tr eatment on neuroinflammation induced cognitive impairment. We present evidence that contributes to the understanding of the physiological role of LXA4 in the CNS and its potential in the treatment of inflammatory pathologies that affect the brain

Made available in DSpace on 2015-11-04T13:36:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 debora_amorim_ioc_mest_2014.pdf: 1324925 bytes, checksum: ef5bea54f46d162d48e15d4a0b299f08 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-04-14 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A sepse constitui importante problema de saúde pública. A incidência de sepse grave vem aumentando nas unidades de Terapia Intensiva, estando associada à alta morbimortalidade. Muitos pacientes evoluem para prótese ventilatória, precisando de drogas sedativas e analgésicas (como o midazolam e a morfina). Os sobreviventes podem apresentar disfunções cognitivas e comportamentais tardias. Estes déficits podem se dar tanto pelas alterações inflamatórias encontradas na sepse, como também por efeitos imunológicos e neurológicos de medicações utilizadas. Tentamos mimetizar este cenário clínico, usando o modelo experimental de Ligadura do Ceco e Perfuração (CLP de 2 furos e 4 furos) em camundongos suíços anestesiados com isoflurano inalatório. Após 5 h da cirurgia, eles receberam tratamento com salina 0,5 ml, midazolam 40 mg/kg ou morfina 80 mg/kg IP. Avaliamos escores de sedação, sinais clínicos de sepse, sobrevida (7-15 dias) e parâmetros neuro-inflamatórios 24 h após o CLP. Encontramos melhora dos índices de sobrevida nos grupos tratados com morfina, sobretudo no modelo de CLP de 4 furos (p<0,05) Observamos melhora dos escores clínicos de 24 h nos animais tratados com morfina e submetidos ao CLP de 4 furos (p<0,05). Houve tendência de diminuição das citocinas inflamatórias IL-1\03B2, IL-6 e de MCP-1 no lavado peritoneal, medidas por ELISA, nos grupos CLP 2 furos tratados com midazolam e morfina. Esta redução também foi verificada no córtex cerebral retirado pós perfusão. A redução de IL-6 foi significativa nos 2 grupos CLP tratados e de MCP-1, no grupo CLP tratado com midazolam (p<0,05). Esses resultados foram acompanhados pelo aumento da proteína pós-sináptica PSD95, no hipocampo dos animais dos grupos CLP tratados. Tais efeitos poderiam indicar um benefício antiinflamatório no uso de midazolam e da morfina, nas fases iniciais de sepse. Apesar dos indícios de melhorias neuroinflamatórias, ainda são necessários mais estudos para relacionarmos estas alterações a possíveis repercussões clínicas / Sepsis is a main problem in Public Health . The incidence of se vere sepsis is rising and is associated with high morbimortality indices. Many patients will need any kind of ventilatory assistance, sedative and analgesic drugs (e.g. m idazolam and m orphine). Survivals may present late cognitive and neurocomportamen tal dysfunctions . Sepsis inflammatory alterations , as well as neurologic and immunomodulatory effects mediated by these drugs may cause the deficits . We tried to simulate this clinical setting using the animal model of Cecal Ligature and Puncture (CLP), with 2 and 4 perf ora tions . Swiss mice were submitted to inalatory anesthesia with i soflurane for the surgery. After 5 h , they received s aline 0,5 ml, m idazolam 40 mg/kg or m orphine 80 mg/kg IP. We quantified sedation score, sepsis score , survival (7 - 1 5 days) and inflammatory parameters in 24 h after CLP . We found better survival taxes in the CLP group treated with m orphine , e specially in CLP with 4 perforations (p<0,05) . There were also better sepsis clinical scores 24 h and 48 h after CLP with 4 perforations, treated with m orphine (p<0,05) . The inflammatory cytokines IL - 1β, IL - 6 and MCP - 1 were lower in peritoneal lavage of CLP with 2 perforations treated with morphine and midazolam , measured by ELISA . This reduct ion w as also found in cerebral cortex, dissected after perfusion . IL - 6 reduction in cortex was important in both treated groups (CLP+Morp h ine and CLP+Midazolam) and MCP - 1 reduction in CLP+Midazolam group (p<0,05) . Postsynaptic p rotein PSD95 was augmented in hip p ocampal of CLP treated group. The results may point to anti - inflammatory benefits in using midazolam and morphine in initial phases of s epsis. Nevertheless, m ore studies are necessary to relate the potential neuroinflammatory benefits of these drugs with clinical repercussions

A gastrosquise (G) é o defeito congênito de fechamento da parede abdominal, que causa inflamação intestinal. Avaliou-se aqui a expressão protéica e gênica de marcadores neurogênicos e oxidativos no intestino de fetos de ratas tratadas ou não com dexametasona - DMT. Estes foram divididos em grupos: não manipulado (controle; C), falso operado (sham; S) e operado (G). A atividade da mieloperoxidase (MPO) aumentou no grupo G vs. C, não sendo afetada pela DMT. A expressão RNAm do receptor NK2, mas não NK1, VPAC e TRPV1, foi reduzida nos grupos G e S vs. C, sendo esta revertida pela DMT. A iNOS, mas não nNOS e eNOS, foi maior no grupo G. A DMT não inibiu a iNOS mas aumentou a eNOS. COX-2 aumentou na G e não foi afetada pela DMT. A expressão protéica da SOD-1 ou 3-NT não diferiu entre grupos G e controle. O grupo G tratado com DMT exibiu maior nitração protéica. A IL-6 aumentou no grupo G versus C. Conclui-se que a inflamação no intestino de fetos com G origina-se de uma possível combinação entre mecanismos oxidativos, geração de prostanóides e fatores neurovasculares. / Gastroschisis (G) is a congenital defect of the abdominal wall closure resulting in perivisceritis. The role of neurovascular and oxidative mechanisms in this condition was investigated by analyzing the gene and proteic expressions of these markers in the gut of foetus from female rats treated or not with dexamethasone (DMT). Increased MPO activity was found in G vs. control (C) but not sham (S) group. Reduced mRNA expression of NK2 receptor was found in G and S groups. Neither NK1 nor both VIP and TRPV1 receptors expression changed among groups. Increased expression of iNOS and COX-2, but not nNOS, eNOS and COX-1, was seen in G group. DMT reversed the expression of NK2R and increased that of NK1R without affecting iNOS and COX-2 expression. Increased levels of IL-6 but neither SOD-1 nor 3-NT was found in G group. In conclusion, the inflammatory process observed in the gut of foetus with G arises through a combination of neurogenic mechanisms that act in concert with reactive oxygen species and generation of prostanoids to produce gut dysfunction.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013 / Introdução: Estudos sugerem que o CO2 promova estimulo dos efeitos fisiologicos como, vasodilatacao, formacao de colageno e fibras elasticas. A Inflamacao Neurogenica (IN) e um dos primeiros eventos da cicatrizacao em resposta a um estimulo nociceptivo na pele, onde ha liberacao de neuropeptideos (NPÆs) pro-inflamatorios secretados por terminacoes nervosas, sendo lancados na fase inflamatoria da cicatrizacao. Entretanto nao ha estudos que relacionem a injecao de CO2 com a IN. Objetivo: investigar a injecao de Dioxido de Carbono (CO2) na secrecao dos neuropeptideos Peptideo Relacionado ao Gene da Calcitonina (CGRP) e Substancia P (SP) em pele de ratos. Metodos: foram utilizados 56 ratos Wistar-EPM distribuidos em dois grupos, um para analise de CGRP e outro de SP. Cada grupo foi subdividido em 4 subgrupos: controle, controle agulha, injecao de CO2 e injecao de ar atmosferico, contendo 7 animais respectivamente em cada subgrupo. As analises das amostras de pele parcial foram feitas por Western Blotting (WB). Resultados: No grupo SP houve uma diminuicao na quantidade de neuropeptideos no subgrupo 3 SP-CO2 e no subgrupo 4 SP -ar; no grupo CGRP, houve uma diminuicao da quantidade de neuropeptideos pro-CGRP (15 kDa) no subgrupo 3 CGRP-CO2 e no subgrupo 4 CGRP- ar; nao houve diminuicao da quantidade de CGRP (5 kDa).Conclusao: A injecao de CO2 e de ar atmosferico em pele de ratos diminuiu a quantidade de neuropeptideos SP e pro-CGRP (15 kDa) / Introduction: The Carbon Dioxide (CO2) infusion is a non surgical technique where the carbon gas is inject in the subcutaneous tissue. On the literature there are studies that suggest that the gas promotes stimulus of the physiological effects, such as circulation improvement, tissue oxygenation, collagen and new elastic fibers formation. Effects that possibly occur after the needle perforation, generating an inflammatory response, aiming to destroy, dilute or block the aggressor agent once the Neurogenic Inflammation (NI) is one of the first cicatrization events that happen. In response to a skin nonciceptive stimulus, there is the release of proinflammatory cutaneous neuropeptides (NP’s), substances that are produced by the brain cells from dorsal root ganglia and secreted by the skin nervous terminations, and are launched on the inflammatory phase of the cicatrization. Objective: to investigate the Carbon Dioxide (CO2) injection on the neuropeptides secretion of the Peptide related to the Calcitone (CGRP) and the P Substance (CSP) in rats skin. Method: there were used 56 Wistar-EPM rats divided into two groups, one for CGRP analysis and the other for SP. Each group was subdivided in 4 sub groups: control, needle control CO2 injection and air injection, each group with 7 rats. The partial skin sample analysis was done by Western Blotting (WB). Results: regarding the presence of the neuropeptides on the rats skin, on the SP group there was a decrease on the amount of the neuropeptides on the subgroup 3 and on the subgroup 4, Air injection; on the CGRP subgroup, there was a decrease on the amount of neuropeptides pro-CGRP, CO2 injection and also on the subgroup 4, Air injection; on the CGRP group, there was a decrease on the amount of neuropeptides there was proCGRP (15kDa) on the subgroup 4, injection of CO2. On the subgroup 4 there wasn’t any decrease on the amount of the effective GCRP (5 kDa). Conclusion: The CO2 and the Air injection in rats skin produces a decrease on the amount of SP neuropeptides and pro-CGRP (15 kDa). / BV UNIFESP: Teses e dissertações

A gastrosquise (G) é o defeito congênito de fechamento da parede abdominal, que causa inflamação intestinal. Avaliou-se aqui a expressão protéica e gênica de marcadores neurogênicos e oxidativos no intestino de fetos de ratas tratadas ou não com dexametasona - DMT. Estes foram divididos em grupos: não manipulado (controle; C), falso operado (sham; S) e operado (G). A atividade da mieloperoxidase (MPO) aumentou no grupo G vs. C, não sendo afetada pela DMT. A expressão RNAm do receptor NK2, mas não NK1, VPAC e TRPV1, foi reduzida nos grupos G e S vs. C, sendo esta revertida pela DMT. A iNOS, mas não nNOS e eNOS, foi maior no grupo G. A DMT não inibiu a iNOS mas aumentou a eNOS. COX-2 aumentou na G e não foi afetada pela DMT. A expressão protéica da SOD-1 ou 3-NT não diferiu entre grupos G e controle. O grupo G tratado com DMT exibiu maior nitração protéica. A IL-6 aumentou no grupo G versus C. Conclui-se que a inflamação no intestino de fetos com G origina-se de uma possível combinação entre mecanismos oxidativos, geração de prostanóides e fatores neurovasculares. / Gastroschisis (G) is a congenital defect of the abdominal wall closure resulting in perivisceritis. The role of neurovascular and oxidative mechanisms in this condition was investigated by analyzing the gene and proteic expressions of these markers in the gut of foetus from female rats treated or not with dexamethasone (DMT). Increased MPO activity was found in G vs. control (C) but not sham (S) group. Reduced mRNA expression of NK2 receptor was found in G and S groups. Neither NK1 nor both VIP and TRPV1 receptors expression changed among groups. Increased expression of iNOS and COX-2, but not nNOS, eNOS and COX-1, was seen in G group. DMT reversed the expression of NK2R and increased that of NK1R without affecting iNOS and COX-2 expression. Increased levels of IL-6 but neither SOD-1 nor 3-NT was found in G group. In conclusion, the inflammatory process observed in the gut of foetus with G arises through a combination of neurogenic mechanisms that act in concert with reactive oxygen species and generation of prostanoids to produce gut dysfunction.

A artrite reumatóide (AR) representa uma doença inflamatória crônica de alta prevalência, para a qual ainda não foi estabelecido um tratamento satisfatório. Os objetivos deste estudo foram: 1) investigar o efeito terapêutico da hemopressina e da depleção de neuropeptídeos sobre a artrite induzida por antígeno (AIA); 2) padronizar este modelo em duas linhagens de ratos: Wistar e Sprague Dawley (SD). Ambas as linhagens, exibiram sinais equipotententes de edema e dor; entretanto, a perda de peso, o infiltrado celular e a produção de citocinas foi maior no rato SD, sugerindo uma maior susceptibilidade do SD. O tratamento com hemopressina inibiu esses sinais inflamatórios, mas não preveniu a perda de peso e a gênese de citocinas. Em contraste, a depleção de neuropeptídeos falhou em suprimir os sinais da AIA, excluindo a participação de mecanismos neurovasculares na ação da hemopressina. Embora ainda não estabelecido o mecanismo de ação do efeito anti-artrítico da hemopressina, este achado inédito sugere uma alternativa promissora para o tratamento dessa doença. / Arthritis and other rheumatic conditions are among the most prevalent diseases worldwide and the most frequent cause of disability. There are many treatment options, but an effective treatment has not been established. Our aims were to investigate a possible anti-inflammatory effect of hemopressin and neuropeptide depletion on Met-BSA induced arthritis (AIA); and to establish a suitable rat strain between Wistar and Sprague Dawley (SD) for the study. The classical signs of AIA such as oedema and pain were similar in both strains. But, the cell influx and cytokines production were higher in SD, thus suggesting a higher susceptibility for this strain. The treatment of rats with hemopressin greatly reduced the oedema, pain and cell influx, but did not prevent the body weight loss and cytokines. Depletion of neuropeptides failed to reduce the AIA signs, thus excluding a neurogenic component on hemopressin-induced effect. In conclusion, our findings reveal a potential alternative treatment for arthritis, although the mechanism of action for this peptide is not clear.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A inflamacao neurogenica (IN) e um dos primeiros eventos da cicatrizacao. Diante de um estimulo nociceptivo na pele, ocorre a liberacao de neuropeptideos (NP´s) cutaneos pro-inflamatorios, que sao substancias produzidas pelos neuronios dos ganglios da raiz dorsal e secretadas de terminacoes nervosas na pele, deflagrando a fase inflamatoria da cicatrizacao. Os anestesicos locais (AL´s) tem amplo uso devido a sua efetividade e seguranca, mas ha evidencias de que eles poderiam bloquear o inicio da inflamacao neurogenica ao inibir a secrecao de NP´s, potencialmente retardando as fases iniciais da cicatrizacao. OBJETIVO: Avaliar o efeito dos AL´s lidocaina, bupivacaina e ropivacaina na secrecao de NP´s CGRP (Calcitonin Gene-Related Peptide) e SP (Substance P) na pele incisada de ratos. METODOS: Foram utilizados 28 ratos Wistar distribuidos igualmente em quatro grupos (n=7): grupo controle (C) com solucao salina 0,9%, grupo (L) (lidocaina 2%), grupo (B) (bupivacaina 0,5%) e grupo (R) (ropivacaina 0,75%). Apos anestesia geral, o farmaco de cada grupo foi injetado ao longo de uma linha reta com dois centimetros no tecido subcutaneo da linha mediana do dorso de cada rato e, apos 30 minutos, foi realizada uma incisao (estimulo nociceptivo) da extensao desse segmento. A seguir, cada rato foi submetido a morte induzida indolor e uma amostra de pele de cada rato, com area e volume padronizados, foi retirada do centro da reta incisada com ajuda de dermatomo eletrico e punch cutaneo de oito milimetros. Essa amostra foi enviada para quantificacao de CGRP e SP por Western blotting e os resultados foram submetidos a analise estatistica. RESULTADOS: em relacao a presenca de NP´s na pele de ratos, no grupo L e no grupo R houve reducao da quantidade de SP nas amostras, sem diferenca entre si; no grupo B nao houve reducao da quantidade de SP; em todos os grupos houve diminuicao da quantidade de pro-CGRP, sem diferenca entre si; e em nenhum grupo houve diminuicao da quantidade de CGRP. CONCLUSAO: a lidocaina e a ropivacaina diminuem os niveis de SP na pele incisada de ratos, enquanto a bupivacaina nao tem influencia sobre os NP´s estudados. Nenhum AL demonstrou influencia sobre a presenca de CGRP na pele incisada de ratos no tempo avaliado / Neurogenic inflammation (NI) is one of the earliest trigger in wound healing. After a nociceptive stimulus in the skin, occurs the release of skin pro-inflammatory neuropeptides (NP's), which are substances produced by the neurons of the dorsal root ganglia and secreted by nerve endings in the skin, triggering the inflammatory phase of wound healing. Local anesthetics (LA's) have widespread use due to its effectiveness and safety, but there is evidence that they could block the onset of neurogenic inflammation by inhibiting the secretion of NP's, potentially delaying the early stages of healing. OBJECTIVE: To evaluate the effect of LA's lidocaine (L), bupivacaine (B) and ropivacaine (R) in the secretion of SP and CGRP in incised rat skin. METHODS: We used 28 Wistar rats divided into 4 groups (n = 7), Group C (control saline 0.9%), L group (lidocaine 2%), group B (bupivacaine 0.5%) and group R (0.75% ropivacaine). After general anesthesia, the LA´s were injected in each group in a straight line in the subcutaneous tissue of the dorsal midline of each rat, and after 30 minutes, an incision was made (nociceptive stimulus) along that segment.Then, each rat was subjected to induced painless death, and a square of skin, with the incised line inside, was taken with the aid of an electric dermatome. Finally, a skin sample from the midpoint of the incised line was removed with a skin punch of 8mm, to achieve standardized area and volume. This sample was submitted to a quantification of CGRP and SP by Western Blotting and followed for statistical analysis. RESULTS: regarding NP's in the skin of rats, group L and group R showed a reduction of SP in the samples; group B showed no reduction in the amount of SP; all groups showed reduction in the amount of pro-CGRP, with no difference between them; and neither group showed a decrease in the amount of Abstract | 72 CGRP. CONCLUSION: The lidocaine and ropivacaine reduced secretion of SP by the nerve endings, the bupivacaine had no effect on secretion of SP; and no local anesthetic inhibited the secretion of CGRP in rat skin incision. / FAPESP: 2012/19163-4. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:46:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013 / A inflamacao neurogenica e um dos primeiros eventos de cura. Apos um estimulo nociceptivo na pele, ocorre a liberacao de neuropeptideos (NP 's) u substancias pro-inflamatorias u que sao produzidas pelos neuronios do ganglio da raiz dorsal e secretadas nas terminacoes nervosas da pele, provocando a fase inflamatoria da cicatrizacao das feridas. A expansao da pele e amplamente utilizada em cirurgia plastica como um recurso para ganho real de pele para rotacao de retalho e, assim, cobrir grandes defeitos decorrentes da perda de pele na remocao de tumores, acidentes de varias origens e reconstrucao de partes do corpo humano; mas nada se sabe sobre a acao dos neuropeptideos CGRP e SP nessas areas de tecido cutaneo expandido. OBJETIVO: Investigar os neuropeptideos SP e CGRP na pele cutanea expandida. METODOS: 28 ratos Wistar, separados em quatro grupos (n = 7): Grupo CO - (expansor vazio); Grupo EN - (expansao normal, 15 dias); Grupo ME - (meia expansao, 11 ml) e o Grupo EI - (expansao instantanea no dia da coleta). Depois de anestesia geral, cada grupo apresentou um expansor de pele de 22 ml de capacidade e o Grupo CO apenas o expansor vazio; o Grupo EN, o expansor inflado com metade da capacidade (11 ml) no implante e uma semana depois, inflado com mais 11 ml; Grupo ME igual ao grupo EN, mas com apenas metade da capacidade do expansor (11 ml) imediatamente apos o implante e o Grupo EI, expansor sendo insuflado com a capacidade total (22 ml) no dia da coleta. Em seguida, cada rato foi submetido a morte induzida, indolor, antes da coleta de amostras, que foram padronizadas quanto ao volume e area, utilizando-se dermatomo eletrico fixado em 500 &#956;m e punch de oito milimetros. Esta amostra foi enviada para a quantificacao de CGRP e SP por Western blotting. RESULTADOS: Em relacao a presenca de NPÆs na pele de ratos, diminuiu a concentracao do neuropeptideo SP, sendo a maior concentracao do grupo CO, e tendo a seguir o grupo ME, o grupo EI e o grupo EN; o neuropeptideo CGRP obteve valores semelhantes na avaliacao de CGRP-5kDa (neuropeptideo efetivo) e a manutencao das concentracoes dos grupos CO, ME e EI. Houve uma queda acentuada na concentracao do grupo EN. CONCLUSAO: A lenta e progressiva expansao da pele inibe a liberacao de neuropeptideos SP, reduzindo a resposta inflamatoria independente do volume observado / The neurogenic inflammation (IN) is one of the first events of healing. Before a nociceptive stimulus in the skin, there is release of neuropeptides (NP's) skin pro-inflammatory substances that are produced by the neurons of the dorsal root ganglia and secreted nerve endings in the skin, triggering the inflammatory phase of wound healing. The expansion skin, widely used in plastic surgery as a resource to gain real skin to skin flap rotation and thus cover large skin defects arising out of the loss is the removal of tumors, accidents of various origins and reconstructions of parts of the human body, but nothing is known about the action of neuropeptides CGRP and SP in these skin areas expanded. OBJECTIVE: To evaluate the effect of expanding the skin secretion of NP's SP and CGRP in the skin of mice. METHODS: 28 Wistar rats divided into 4 groups (n = 7): group C (empty Expander), EN group (Normal Expansion 15days), group (Half Expansion) and group EI (Instant Expansion on the collection day). After general anesthesia, each group has introduced a skin expander of 22ml capacity with the CO group only without the expander breathes it in no time, EM Group expander inflated with half capacity (11ml) after introducing a week later inflated with 11ml more, equal to group ME but with only half the capacity of the expander (11ml) and nothing else, and EI group expander being inflated with total capacity (22ml), waited a minute before the death of the animal and data collection . Next, each mouse was subjected to induced death painless and a skin sample from each mouse with standardized area and volume were taken from the center line incision with the aid of electric dermatome and 8mm dermal punch. This sample was sent for quantification of CGRP and SP by Western Blotting and followed for statistical analysis. RESULTS: In relation to the presence of A b s t r a c t | 64 NP's in the skin of rats in relation to neuropeptide SP was decreasing concentration being the highest concentration of CO Group and so on with the following GE Group ME and EI, as the neuropeptide CGRP have similar values in the evaluation of CGRP-5kDa (actual measure) and maintenance of the concentrations of CO Groups, ME and EI, as a sharp drop in the concentration EN group (normal expansion). CONCLUSION: It was observed that the slower expansion less concentration of neuropeptides soon denervation can be observed. Thus, the slow and progressive cutaneous expansion inhibits the release of neuropeptides reducing the inflammatory response. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

A artrite reumatóide (AR) representa uma doença inflamatória crônica de alta prevalência, para a qual ainda não foi estabelecido um tratamento satisfatório. Os objetivos deste estudo foram: 1) investigar o efeito terapêutico da hemopressina e da depleção de neuropeptídeos sobre a artrite induzida por antígeno (AIA); 2) padronizar este modelo em duas linhagens de ratos: Wistar e Sprague Dawley (SD). Ambas as linhagens, exibiram sinais equipotententes de edema e dor; entretanto, a perda de peso, o infiltrado celular e a produção de citocinas foi maior no rato SD, sugerindo uma maior susceptibilidade do SD. O tratamento com hemopressina inibiu esses sinais inflamatórios, mas não preveniu a perda de peso e a gênese de citocinas. Em contraste, a depleção de neuropeptídeos falhou em suprimir os sinais da AIA, excluindo a participação de mecanismos neurovasculares na ação da hemopressina. Embora ainda não estabelecido o mecanismo de ação do efeito anti-artrítico da hemopressina, este achado inédito sugere uma alternativa promissora para o tratamento dessa doença. / Arthritis and other rheumatic conditions are among the most prevalent diseases worldwide and the most frequent cause of disability. There are many treatment options, but an effective treatment has not been established. Our aims were to investigate a possible anti-inflammatory effect of hemopressin and neuropeptide depletion on Met-BSA induced arthritis (AIA); and to establish a suitable rat strain between Wistar and Sprague Dawley (SD) for the study. The classical signs of AIA such as oedema and pain were similar in both strains. But, the cell influx and cytokines production were higher in SD, thus suggesting a higher susceptibility for this strain. The treatment of rats with hemopressin greatly reduced the oedema, pain and cell influx, but did not prevent the body weight loss and cytokines. Depletion of neuropeptides failed to reduce the AIA signs, thus excluding a neurogenic component on hemopressin-induced effect. In conclusion, our findings reveal a potential alternative treatment for arthritis, although the mechanism of action for this peptide is not clear.