Orientador: Lizete Toledo de Oliveira Ramalho / Banca: Dirceu Barnabé Raveli / Banca: Paulo Sérgio Cerri / Banca: Ana Maria Trindade Grégio / Banca: Gerson Luiz Ulema Ribeiro / Resumo: O objetivo deste trabalho foi elucidar os mecanismos do ácido fólico em prevenir o aparecimento de fenda palatina teratogenicamente induzida pela dexamatasona em ratos. Para tanto, foram usadas um total de 13 ratas do tipo Holtzman. G1) 3 ratas receberam 3mg/Kg Dex. Intramuscular (i.m.) do 14o ao 17o dia de prenhez. G2) 4 ratas receberam 3mg/Kg Dexa (i.m.) do 14o ao 17o dia de prenhez, e uma dose de 5mg/kg de ácido fólico (via oral) do dia 14o até 17o de prenhez. G3) 3 ratas receberam 3mg/Kg Dexa (i.m.) do 14o ao 17o dia de gravidez e uma dose de 5mg/kg de ácido fólico (via oral) do início até o final da prenhez. G4) 3 ratas receberam 3mg/Kg Dex (i.m.) do 14o ao 17o dia de prenhez e uma dose de 5mg/kg de ácido fólico (via oral) desde 5 dias antes da concepção até o final da gravidez. As cabeças dos fetos foram removidas no 19o dia de prenhez e estudadas. Foi utilizado o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis. O resultados mostraram o seguinte: G1) dos 27 fetos, (96,30%) apresentaram fenda total, e apenas 1 apresentou fenda parcial. G2) Dos 23 fetos apenas (8,7%) com fenda total, (43,35%) com ausência de fenda e (47,80%) apresentaram fenda parcial. G3) Observou-se 88,24% apresentaram fenda incompleta, 5,88% apresentaram fenda completa e 5,88% ausência de fenda. G4) dos 31 animais, (54,4%) apresentaram fenda incompleta, e 32,26% apresentaram fenda completa e (12,9%) sem fenda. / Abstract: The aim of the present study is to determine whether (FA) prevented cortisone-induced cleft palate (CP) in the Holtzman mouse. The animals were divided in 4 groups: G1- 3 pregnant mice had 3mg/Kg of Dex intramuscularly administrated (IA) from the 14th to 17th day of gestation; G2- 4 pregnant mice had 3mg/Kg of Dex IA from the 14th to 17th day of gestation, with a daily dose (dd) of 5mg/kg FA oral administrated (OA) from 14th to 17th day of gestation; G3- 3 pregnant mice had 3mg/Kg of Dex IA from the 14th to 17th day of gestation, with a (dd) of 5mg/kg FA OA from day 0 until 17th day of gestation; G4- 3 pregnant mice had 3mg/Kg of Dex IA from 14th to 17th day of gestation, with a (dd) of 5mg/kg FA OA 5 days before the fertilization until the 17th day of gestation. The fetuses were examined on 19th day of gestation. The data was analyzed by not paired Kruskal-Wallis test, and showed statistical difference among average score values. The results demonstrated that (96,3%) (G1) had total CP, and only 1 partial CP. In the (G2), (8,7%) showed total CP, (47,8%) partial CP and (43,35%) showed no CP. The (G3) showed (5,88%) had total CP, (88,24%) partial CP and (5,88%) had no CP. In the (G4), (54,4%) showed partial CP and (32,26%) total CP. Only (12,9%) had no CP. These results indicated that FA reduces the incidence of Dex-induced cleft palate independently on the period of the administration. / Doutor

A Fissura Oral (FO) é uma malformação craniofacial comum na espécie humana e sua etiologia é complexa com aspectos genéticos e ambientais envolvidos na sua formação. Por ser uma malformação de prevalência variável, estudos de associação em populações distintas são necessários, principalmente em populações heterogêneas como no Brasil. A suplementação com ácido fólico está envolvida na redução do risco de recorrência para algumas malformações, mas a natureza da reação entre a ingestão do ácido fólico, a interação entre os genes da rota metabólica e o seu efeito nas concentrações de folato é pouco caracterizada. Além disso, existem poucos estudos envolvendo um grande número de genes e a suplementação com ácido fólico a longo prazo. O objetivo desse trabalho foi estudar o papel dos genes MSX1 e IRF6 e região 8q24 em indivíduos com fissuras orais não sindrômicas de diferentes regiões do Brasil e analisar o efeito da suplementação com ácido fólico e dos polimorfismos nos genes da rota metabólica do folato nos níveis de folato séricos e eritrocitários. Nossos resultados mostram associação positiva entre o alelo 4 do polimorfismo de repetição CA (MSX1) e FO, alelo A da variante rs987525 (8q24) foi associado com FL/P e o haplótipo G/A (rs2235371/rs642961) do gene IRF6 associado com o aumento do risco para FL/P. Dos 23 genes da rota metabólica do ácido fólico estudados, 5 (FPGS, FOLR1, FOLR2, SHMTI e MTHFR) foram relacionados com os níveis de folato sérico e eritrocitário. As variantes rs7033913 (FPGS), rs11235462 (FOLR1) e rs2276048 (FOLR2) foram associadas com os níveis de folato sérico após suplementação. Os polimorfismos rs2168781 e rs2461837 (SHMT1) foram relacionados com os níveis de folato eritrocitário basal e o rs1801131(MTHFR) com os níveis de folato eritrocitário durante a suplementação. Conhecer a etiologia das fissuras orais e entender os efeitos da suplementação e de variantes dos genes da rota do folato nos níveis basais de folato é essencial tanto para auxiliar no manejo clínico através de uma medicina personalizada quanto para aconselhamento genético. / Oral cleft (OC) is a common craniofacial malformation. The etiology is complex and involves genetic and environmental factors. OC have a variable prevalence and association studies are needed in different populations, especially in heterogeneous populations as the Brazilian. Folic acid supplementation reduce the recurrence risk for some malformation, but the reaction between folic acid intake, the interaction between genes of metabolic pathway and effect on folate concentrations is poorly characterized. Furthermore, there are few studies with a large number of genes and long-term folic acid supplementation. The aim was to analyze the role of MSX1 and IRF6 gene and 8q24 region in individuals with non-syndromic oral clefts in different regions of Brazil and to analyze the effect of folic acid supplementation in folate pathway genes and correlate to levels of serum and red blood cell (RBC) folate. Our results have shown a positive association between the CA repeat polymorphism 4 allele (MSX1) and OC, between rs987525 A allele (8q24) and CL/P and the G/A haplotype (rs2235371 / rs642961) of IRF6 associated with increased risk of CL/P. The 23 folate pathway genes studied, 5 (FPGS, FOLR1, FOLR2, SHMTI and MTHFR) were correlated to serum and red blood cell (RBC) folate levels. The variants rs7033913 (FPGS), rs11235462 (FOLR1) and rs2276048 (FOLR2) were associated to serum folate levels after supplementation. Polymorphisms in SHMT1 (rs2168781 and rs2461837) were associated with basal RBC folate while MTHFR (rs1801131) were associated with RBC folate levels during supplementation. Understanding of oral cleft etiology and folate gene pathway will assist clinic management and genetic counseling since folate is involved in important biologic processes.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / A infecÃÃo pelo Helicobacter pylori à uma das infecÃÃes mais prevalentes do mundo. Existem fortes evidÃncias de que a transmissÃo dessa bactÃria ocorre na infÃncia, e estudos epidemiolÃgicos em crianÃas sÃo essenciais para que se entenda os aspectos relacionados com a dinÃmica da infecÃÃo e suas conseqÃÃncias. Previamente pesquisadores vinculados ao LaboratÃrio de Gastroenterologia da Universidade Federal do Cearà avaliaram a prevalÃncia de H.pylori em crianÃas atà quatorze anos de idade em uma comunidade fixa de baixa renda, denominada Parque UniversitÃrio. No presente estudo, foi realizado outro corte transversal aproximadamente oito anos apÃs a anÃlise inicial nesse mesmo grupo de crianÃas, com o objetivo de avaliar a dinÃmica da infecÃÃo e se as crianÃas infectadas sÃo mais susceptÃveis a terem anemia, deficiÃncia de ferrritina, folato e vitamina B12 do que as nÃo infectadas. A infecÃÃo por H. pylori foi avaliada em 133 crianÃas por meio do teste respiratÃrio, previamente validado para a populaÃÃo brasileira. Foram coletadas amostras de sangue em 108 crianÃas para a realizaÃÃo de hemograma e a dosagem de concentraÃÃes sÃricas de ferritina, vitamina B12 e folato por meio da tÃcnica de quimioluminescencia utilizando Immulite  2000. A prevalÃncia da infecÃÃo por H. pylori nas crianÃas foi de 53,4% (71/133) em 2000, enquanto a prevalÃncia de H. pylori nas mesmas crianÃas em 2008 foi de 64,7% (86/133). ApÃs 8 anos, a maioria (88,7%) das crianÃas H. pylori positivas permaneceram infectadas. A taxa de aquisiÃÃo da infecÃÃo por H. pylori apÃs 8 anos da anÃlise inicial foi de 17,3% (23/133) e a taxa de cura espontÃnea da infecÃÃo foi de 6% (8/133). As taxas de aquisiÃÃo foram maiores em crianÃas com idade de 10 anos ou menos, atingindo 30,2% em crianÃas menores de 5 anos. A prevalÃncia da infecÃÃo em crianÃas com menos de 5 anos aumentou de 39.6% em 2000 para 62,2% em 2008 (p=0,020). NÃo houve diferenÃa estatisticamente significante entre anemia, concentraÃÃes sÃricas de ferritina, vitamina B12 e folato em indivÃduos H. pylori positivos comparados aos H. pylori negativos. Em conclusÃo, a infecÃÃo por H. pylori à adquirida precocemente na infÃncia, com altas taxas de aquisiÃÃo em crianÃas com 10 anos ou menos. NÃo foi encontrado associaÃÃo entre a infecÃÃo por H. pylori e anemia, nÃveis sÃricos de vitamina B12, ferritina e folato / A infecÃÃo pelo Helicobacter pylori à uma das infecÃÃes mais prevalentes do mundo. Existem fortes evidÃncias de que a transmissÃo dessa bactÃria ocorre na infÃncia, e estudos epidemiolÃgicos em crianÃas sÃo essenciais para que se entenda os aspectos relacionados com a dinÃmica da infecÃÃo e suas conseqÃÃncias. Previamente pesquisadores vinculados ao LaboratÃrio de Gastroenterologia da Universidade Federal do Cearà avaliaram a prevalÃncia de H.pylori em crianÃas atà quatorze anos de idade em uma comunidade fixa de baixa renda, denominada Parque UniversitÃrio. No presente estudo, foi realizado outro corte transversal aproximadamente oito anos apÃs a anÃlise inicial nesse mesmo grupo de crianÃas, com o objetivo de avaliar a dinÃmica da infecÃÃo e se as crianÃas infectadas sÃo mais susceptÃveis a terem anemia, deficiÃncia de ferrritina, folato e vitamina B12 do que as nÃo infectadas. A infecÃÃo por H. pylori foi avaliada em 133 crianÃas por meio do teste respiratÃrio, previamente validado para a populaÃÃo brasileira. Foram coletadas amostras de sangue em 108 crianÃas para a realizaÃÃo de hemograma e a dosagem de concentraÃÃes sÃricas de ferritina, vitamina B12 e folato por meio da tÃcnica de quimioluminescencia utilizando Immulite  2000. A prevalÃncia da infecÃÃo por H. pylori nas crianÃas foi de 53,4% (71/133) em 2000, enquanto a prevalÃncia de H. pylori nas mesmas crianÃas em 2008 foi de 64,7% (86/133). ApÃs 8 anos, a maioria (88,7%) das crianÃas H. pylori positivas permaneceram infectadas. A taxa de aquisiÃÃo da infecÃÃo por H. pylori apÃs 8 anos da anÃlise inicial foi de 17,3% (23/133) e a taxa de cura espontÃnea da infecÃÃo foi de 6% (8/133). As taxas de aquisiÃÃo foram maiores em crianÃas com idade de 10 anos ou menos, atingindo 30,2% em crianÃas menores de 5 anos. A prevalÃncia da infecÃÃo em crianÃas com menos de 5 anos aumentou de 39.6% em 2000 para 62,2% em 2008 (p=0,020). NÃo houve diferenÃa estatisticamente significante entre anemia, concentraÃÃes sÃricas de ferritina, vitamina B12 e folato em indivÃduos H. pylori positivos comparados aos H. pylori negativos. Em conclusÃo, a infecÃÃo por H. pylori à adquirida precocemente na infÃncia, com altas taxas de aquisiÃÃo em crianÃas com 10 anos ou menos. NÃo foi encontrado associaÃÃo entre a infecÃÃo por H. pylori e anemia, nÃveis sÃricos de vitamina B12, ferritina e folato / Helicobacter pylori infection is one the most prevalent infections in the world. There is a strong evidence that it is acquired in childhood. Therefore epidemiological studies in children are essential to understand the dynamics of this infection and also to evaluate the possible consequences of H. pylori infection in children. Previously it was evaluated the prevalence of H. pylori in children up to fourteen years of age at a low-income community called Parque UniversitÃrio. The present study is a cohort of a group of children eight years after the first study, with the aim of evaluating the dynamics of H. pylori infection and also to check if infected children are more likely to have anemia and ferrritin, folate and vitamin B12 deficiency when compared to non-infected children. The infection was evaluated in 133 individuals through the 13C urea breath test, previously validated for the brazilian population. Blood was sampled from 108 individuals to dose levels of ferritin, vitamin B12 and folate by chemiluminescence using Immulite  2000 and hemoglobin. The prevalence of H. pylori infection in the individuals was 53.4% (71/133) in 2000, while the prevalence of H. pylori in the same group in 2008 was 64.7% (86/133). It was found that after eight years, the majority (88.7%) of H. pylori positive individuals remained positive for infection. The rate of acquisition of infection by H. pylori after 8 years of the initial analysis was 17.3% (23/133) and the rate of loss of infection was 6% (8/133). The acquisition rates were higher in children younger than 10 years, reaching 30.2% in children younger than 5 years. The prevalence of infection in children under 5 years increased from 39.6% in 2000 to 62.2% in 2008 (p = 0.020). There was no statistically significant difference between anemia, serum ferritin, vitamin B12 and folate in H. pylori-positive individuals compared to H. pylori-negative. In conclusion, H. pylori infection is acquired early in childhood, with high rates of acquisition in children under 10 years. There was no association between H. pylori infection and anemia, serum vitamin B12 and folate levels among the individuals studied. / Helicobacter pylori infection is one the most prevalent infections in the world. There is a strong evidence that it is acquired in childhood. Therefore epidemiological studies in children are essential to understand the dynamics of this infection and also to evaluate the possible consequences of H. pylori infection in children. Previously it was evaluated the prevalence of H. pylori in children up to fourteen years of age at a low-income community called Parque UniversitÃrio. The present study is a cohort of a group of children eight years after the first study, with the aim of evaluating the dynamics of H. pylori infection and also to check if infected children are more likely to have anemia and ferrritin, folate and vitamin B12 deficiency when compared to non-infected children. The infection was evaluated in 133 individuals through the 13C urea breath test, previously validated for the brazilian population. Blood was sampled from 108 individuals to dose levels of ferritin, vitamin B12 and folate by chemiluminescence using Immulite  2000 and hemoglobin. The prevalence of H. pylori infection in the individuals was 53.4% (71/133) in 2000, while the prevalence of H. pylori in the same group in 2008 was 64.7% (86/133). It was found that after eight years, the majority (88.7%) of H. pylori positive individuals remained positive for infection. The rate of acquisition of infection by H. pylori after 8 years of the initial analysis was 17.3% (23/133) and the rate of loss of infection was 6% (8/133). The acquisition rates were higher in children younger than 10 years, reaching 30.2% in children younger than 5 years. The prevalence of infection in children under 5 years increased from 39.6% in 2000 to 62.2% in 2008 (p = 0.020). There was no statistically significant difference between anemia, serum ferritin, vitamin B12 and folate in H. pylori-positive individuals compared to H. pylori-negative. In conclusion, H. pylori infection is acquired early in childhood, with high rates of acquisition in children under 10 years. There was no association between H. pylori infection and anemia, serum vitamin B12 and folate levels among the individuals studied.

A Fissura Oral (FO) é uma malformação craniofacial comum na espécie humana e sua etiologia é complexa com aspectos genéticos e ambientais envolvidos na sua formação. Por ser uma malformação de prevalência variável, estudos de associação em populações distintas são necessários, principalmente em populações heterogêneas como no Brasil. A suplementação com ácido fólico está envolvida na redução do risco de recorrência para algumas malformações, mas a natureza da reação entre a ingestão do ácido fólico, a interação entre os genes da rota metabólica e o seu efeito nas concentrações de folato é pouco caracterizada. Além disso, existem poucos estudos envolvendo um grande número de genes e a suplementação com ácido fólico a longo prazo. O objetivo desse trabalho foi estudar o papel dos genes MSX1 e IRF6 e região 8q24 em indivíduos com fissuras orais não sindrômicas de diferentes regiões do Brasil e analisar o efeito da suplementação com ácido fólico e dos polimorfismos nos genes da rota metabólica do folato nos níveis de folato séricos e eritrocitários. Nossos resultados mostram associação positiva entre o alelo 4 do polimorfismo de repetição CA (MSX1) e FO, alelo A da variante rs987525 (8q24) foi associado com FL/P e o haplótipo G/A (rs2235371/rs642961) do gene IRF6 associado com o aumento do risco para FL/P. Dos 23 genes da rota metabólica do ácido fólico estudados, 5 (FPGS, FOLR1, FOLR2, SHMTI e MTHFR) foram relacionados com os níveis de folato sérico e eritrocitário. As variantes rs7033913 (FPGS), rs11235462 (FOLR1) e rs2276048 (FOLR2) foram associadas com os níveis de folato sérico após suplementação. Os polimorfismos rs2168781 e rs2461837 (SHMT1) foram relacionados com os níveis de folato eritrocitário basal e o rs1801131(MTHFR) com os níveis de folato eritrocitário durante a suplementação. Conhecer a etiologia das fissuras orais e entender os efeitos da suplementação e de variantes dos genes da rota do folato nos níveis basais de folato é essencial tanto para auxiliar no manejo clínico através de uma medicina personalizada quanto para aconselhamento genético. / Oral cleft (OC) is a common craniofacial malformation. The etiology is complex and involves genetic and environmental factors. OC have a variable prevalence and association studies are needed in different populations, especially in heterogeneous populations as the Brazilian. Folic acid supplementation reduce the recurrence risk for some malformation, but the reaction between folic acid intake, the interaction between genes of metabolic pathway and effect on folate concentrations is poorly characterized. Furthermore, there are few studies with a large number of genes and long-term folic acid supplementation. The aim was to analyze the role of MSX1 and IRF6 gene and 8q24 region in individuals with non-syndromic oral clefts in different regions of Brazil and to analyze the effect of folic acid supplementation in folate pathway genes and correlate to levels of serum and red blood cell (RBC) folate. Our results have shown a positive association between the CA repeat polymorphism 4 allele (MSX1) and OC, between rs987525 A allele (8q24) and CL/P and the G/A haplotype (rs2235371 / rs642961) of IRF6 associated with increased risk of CL/P. The 23 folate pathway genes studied, 5 (FPGS, FOLR1, FOLR2, SHMTI and MTHFR) were correlated to serum and red blood cell (RBC) folate levels. The variants rs7033913 (FPGS), rs11235462 (FOLR1) and rs2276048 (FOLR2) were associated to serum folate levels after supplementation. Polymorphisms in SHMT1 (rs2168781 and rs2461837) were associated with basal RBC folate while MTHFR (rs1801131) were associated with RBC folate levels during supplementation. Understanding of oral cleft etiology and folate gene pathway will assist clinic management and genetic counseling since folate is involved in important biologic processes.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:34:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:01:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Os folatos, vitaminas hidrossolúveis do grupo B estão envolvidos em importantes processos bioquímicos como a síntese e reparação de DNA. O metabolismo humano não é capaz de sintetizar folatos e necessita obtê-los da dieta. O ácido fólico (AF), vitâmero sintético e estável dos folatos, é usado para a fortificação de alimentos como farinha de trigo em função do baixo custo e grande biodisponibilidade. O AF compreende uma pterina, um ácido p-aminobenzóico e um ácido glutâmico. É um composto sensível, facilmente degradado em solução aquosa por luz ultravioleta e visível. O tratamento por ionização de alimentos elimina ou reduz patógenos e insetos, aumenta o tempo de estocagem e a vida de prateleira dos alimentos. A irradiação de alimentos utiliza elétrons acelerados, raios gama ou raios X. Os objetivos deste estudo foram avaliar os efeitos dos tratamentos com feixe de elétrons, térmico em estufa e em forno micro-ondas na degradação do AF em solução, suspensão e pó. Também foi desenvolvido um método de extração por solvente pressurizado do AF de farinha de trigo fortificada e de pães. Os diferentes processamentos degradaram o AF e os principais produtos de degradação foram identificados por LC/MS/MS como sendo: 6- carboxipterina (PCA), ácido p-aminobenzóico (PABA), p-aminobenzoil-L-ácido glutâmico (pABGA) e ácido pteroico (PA). Em soluções de AF irradiadas foram identificados novos radioprodutos: n-(4-nitrobenzoil)-L-ácido glutâmico (pNBGA), xantopterina (XA) e 2-amino-6-(hidroximetil)pteridina-4(1H)-one (AHMP). Uma extração completa do AF por solvente pressurizado foi realizada com sucesso em amostras de farinha de trigo fortificada e pães em apenas 15 minutos. A panificação reduziu em até 57% o teor de AF no produto final. Por outro lado, a irradiação de farinha de trigo fortificada com doses de radiação até 10 kGy não alterou o conteúdo de AF. Esta tecnologia mostrou-se eficaz para tratamento de farinha de trigo e poderia ser utilizada como medida fitossanitária. / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

O carcinoma hepatocelular (HCC) é a 3ª causa de morte por neoplasias no mundo, sendo também o 5º tipo de neoplasia mais frequente. Seu tratamento limitado juntamente com o mau prognóstico tornam importante a adoção de medidas preventivas. A prevenção das etapas iniciais da hepatocarcinogênese pela administração de compostos bioativos de alimentos (CBAs) atualmente vem sendo observada em diversos estudos. Sugere-se que o processo de carcinogênese envolva alterações genéticas e epigenéticas, como a hipometilação do DNA e a desacetilação de histonas. Nesse sentido, o tratamento com ácido fólico (AF), precursor indireto de grupamento metil, e tributirina (TB), inibidora de enzimas desacetilases de histonas, quando em associação, poderia agir em adição potencializando os efeitos quimiopreventivos dos mesmos comparados às suas ações isoladas. A eventual atividade quimiopreventiva da TB (100mg/100g de peso corpóreo), do AF (0,08mg/100g de peso corpóreo), ambos com a metade da dose utilizada na literatura, e da associação entre os mesmos (AS) foi analisada durante a etapa de promoção da hepatocarcinogênese em ratos Wistar submetidos ao modelo do hepatócito resistente (HR). Para avaliação de GST-P, da proliferação celular, da apoptose, bem como a localização da histona H3K9 foi utilizada a técnica de imunohistoquímica; para a quantificação de H3K9, western blot. Em relação à análise macroscópica, os grupos tratados apresentaram menor número de nódulos em relação a MD (sem significância estatística), além de menor porcentagem de LPN menores do que 1mm nos grupos TB e AS. Na análise microscópica foi observado que os grupos TB, AF e AS apresentaram menor número de lesões pré neoplásicas persistentes (pLPN) em relação ao grupo controle isocalórico (MD, maltodextrina), assim como menor porcentagem de área ocupada por pLPN e por lesões em remodelação (rLPN). Quanto a proliferação celular, os grupos AF e AS apresentaram menor número de núcleos em fase S/mm2 quando comparados aos grupos MD e TB. Em relação à apoptose, os grupos TB e AS apresentaram maior número de hepatócitos em apoptose e corpúsculos apoptóticos/mm2 quando comparados aos grupos MD e AF. No resultado da metilação global do DNA não houve diferença entre os grupos. Em adição, os grupos AF e AS apresentaram maiores concentrações séricas de folato; o mesmo não ocorrendo para B12. No que diz respeito à acetilação de H3K9, os grupos TB e AS apresentaram maior porcentagem de acetilação quando comparados aos grupos N, MD e AF. Em conclusão, os grupos tratados com TB, AF e a associação entre eles apresentaram quimioprevenção pronunciada, sendo que o grupo AS apresentou mecanismos aditivos dos tratamentos isolados. / The hepatocellular carcinoma (HCC) is the third leading cause of death by cancer in the world, and the fifth most frequent type of neoplasm. Its limited treatment along with poor prognosis make it important to adopt preventive measures. The prevention of the initial stages of hepatocarcinogenesis by the administration of bioactive food compounds (BFCs) is currently being observed in several studies. It is suggested that the process of carcinogenesis involves genetic and epigenetic modifications, such as DNA hypomethylation and deacetylation of histones. Accordingly, treatment with folic acid (FA), indirect precursor of methyl grouping, and tributyrin (TB), a histone deacetylases inhibiting enzyme, when associated could act in addition to enhance the chemopreventive effects compared to their isolated actions. The possible chemopreventive activity of TB (100mg/100g body weight), FA (0.08 mg/100 g body weight) and the association between them (AS) were studied during the promotion stage of hepatocarcinogenesis in Wistar rats submitted to resistant hepatocyte model (RH).For evaluation of GST-P, cell proliferation, apoptosis, and the location of histone H3K9 was used immunohistochemistry, to quantify H3K9, western blot. Regarding the macroscopic analysis, the treated groups showed a lower number of nodules compared to MD (not statistically significant), and a lower percentage smaller than 1mm in groups TB and AS. Under microscopic examination the groups TB, FA and AS showed a lower number of persistent pre-neoplastic lesions (pLPN) compared to the isocaloric control group (MD, maltodextrin), as well as a lower percentage of the area occupied by pLPN and remodeling lesions (rLPN). As cell proliferation, FA and AS groups had fewer S phase nuclei/mm2 compared to MD and TB groups. Regarding apoptosis, TB and AS groups showed higher numbers of hepatocytes in apoptosis and apoptotic corpuscles/mm2 compared to MD and FA groups. Global DNA methylation did not differ between groups. In addition, AF and AS groups had higher serum concentrations of folate, which did not occur for B12.Concerning the H3K9 acetylation, the groups TB and AS showed higher percentage of acetylation when compared with the groups N, MD and FA. In conclusion, the groups treated with TB, FA and the association of both showed pronounced chemoprevention, and the AS group showed additive mechanisms compared with isolated treatments.

Orientador: Francisco Benedito Teixeira Pessine / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-19T02:12:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Calderini_Adriana_D.pdf: 8667238 bytes, checksum: 93c066670f54801635af79d770afae4c (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: 5-Fluorouracil (5-FU) e um dos fármacos mais úteis no tratamento de tumores sólidos em adultos, especificamente carcinomas do trato gastrointestinal (estômago, cólon e reto) e da mama. Em resumo, seu maior efeito bioquímico e a inibição da síntese do DNA, pois a concentração que inibe sua síntese pode ainda permitir a sintese do RNA. Causa severos efeitos adversos como mielo supressão, mucosite, dermatite, diarréia e toxicidade cardíaca. Em razão disto, têm sido realizadas várias tentativas para encapsular 5-FU a fim de reduzir os efeitos adversos que ele provoca. O objetivo deste projeto foi encapsular este anti-neoplásico utilizando nano-esferas de ácido poli(lático-co-glicólico), PLGA, como sistema carreador, acoplando à sua superfície quitosana e folato de quitosana para melhor endereçamento aos locais de ação, bioadesividade e menor toxicidade. A encapsulação de 5-FU em nano-esferas de PLGA foi aperfeiçoada através de planejamento experimental e por análise quimiométrica. Muitos fatores foram estudados: métodos de preparação, temperatura, quantidade inicial de 5-FU e pH. Na caracterização destes sistemas foram utilizadas diversas técnicas: espalhamento dinâmico de luz, determinação do potencial Zeta, calorimetria diferencial de varredura, análise termogravimétrica, difratometria de raios-X e microscopia eletrônica de varredura. Além disso, foram realizados ensaios de perfil de liberação, de estabilidade coloidal e estudo do comportamento desses sistemas em relação às células in vitro. O planejamento experimental permitiu obter nanoparticulas com capacidade de carregamento em torno de 11% e eficiência de encapsulação de 32%. O acoplamento de quitosana e folato de quitosana permitiu retardar a liberação do fármaco em solução. Para armazenagem destas partículas, observou-se que elas foram menos degradadas quando estão liofilizadas e mantidas a 4 °C. A melhor concentração de sacarose para liofilizá-las, sem que ocorra aumento de tamanho e polidispersão, foi 250 mmol/L. Os testes in vitro comprovaram a eficácia destas formulações / Abstract: 5-fluorouracil (5-fluoro-1H-pyrimidine-2,4-dione) is one of the most used drug to treat solid tumors in adults, specifically gastrointestinal (stomach and colorectal) and breast carcinomas. In summary, the major biochemical effect of 5-FU is inhibition of DNA synthesis, since concentrations which inhibit this synthesis may still permit RNA synthesis. It causes severe adverse effects as myelosuppression, mucositis, dermatitis, diarrhea and cardiac toxicity. Its encapsulation in nanoparticles can reduce these adverse effects, prolong its release and the drug can be placed directly on its site of action. The goal of this work was to encapsulate this anti-neoplasic drug using poly (lactic-co-glycolic acid) PLGA nanospheres as carrier system, attaching on their surface chitosan and folate-chitosan to attain an enhanced targeting, bioadesivity and less toxicity. The encapsulation of 5-FU in PLGA nanospheres was improved through an experimental design and chemometry. Many factors were studied: methods of preparation, temperature, initial amount of 5-FU and pH. In the characterization, many techniques were employed: dynamic light scattering, determination of Zeta potential, differential scanning calorimetry, thermo gravimetric analysis, X-ray difractometry and scanning electron microscopy. Besides, we also analyzed the release profile, colloidal stability and the behavior of these systems in relation to in vitro cancer cells. The experimental design allowed obtaining nanoparticles with drug loading around 11% and encapsulation efficiency of 32%. The attachment of chitosan and folate-chitosan also allowed prolonging the drug release in solution. To store these formulations, we observed that lyophilized particles kept at 4 °C were less degraded. The best sucrose concentration to freeze-drying these particles with no size and polidispersity change was 250 mmol/L. The in vitro tests proved the efficacy of these formulations / Doutorado / Físico-Química / Doutor em Ciências

Background: Preterm birth is one of the leading causes of perinatal mortality and morbidity and poses extensive economic liability. The rate of preterm births globally is approximately 11.1%, and in the US, the preterm birth rate has been estimated to be 12-13%. Folate and B12 requirements increase during pregnancy as a result of increased cell division to accommodate maternal and fetal growth; inadequate levels can result in placental abnormalities and thus present implications for preterm birth. Objective: To investigate the association between red blood cell (RBC) folate and B12 concentrations with the risk of preterm birth. Methods: Study participants were recruited from Tampa General Hospital between January 2011 and May 2013. Women with a singleton delivery occurring less than 37 weeks gestation were classified as cases and those with a singleton delivery occurring between 37 and 42 weeks gestation were classified as controls. The study had a final sample size of 227 women, including 36 cases and 191 controls. Maternal blood was collected in order to measure folate and B12 concentrations. The association between folate/B12 and preterm birth was assessed using logistic regression; odds ratio (OR), 95% confidence interval (CI) and p values are reported. A power analysis was also performed using the available sample as well as imputation for missing values in the B12 variable. Results: Although not statistically significant, the mean concentration of folate and B12 levels were higher in the cases than in the controls, 894 ± 158.1 vs. 869.2 ± 169.6 and 245.2 ± 102.2 vs 238.3 ± 81.5, respectively. No significant associations were found between folate or B12 and the risk of preterm birth. Conclusions: This study did not detect a significant association between folate or B12 and preterm birth; however, due to the small sample size this analysis was underpowered. Additional studies are needed, preferably using a randomized control study design, in order to elucidate the relationship between folate/B12 and preterm births.

Abstract Dietary vegetables and fruit may play a significant role in atherosclerosis. We investigated the effects of a high intake of vegetables, berries, and citrus fruit along with a diet low in total and saturated fat on plasma concentrations of lipids, lipoprotein(a), antioxidants, oxidised LDL (OxLDL), folate, homocysteine, and on serum paraoxonase-1 activity. We also determined whether gene polymorphisms affect diet response of plasma homocysteine and serum paraoxonase-1 activity. Thirty-seven healthy females consumed two diets (low and high vegetable diets) in a controlled crossover intervention. The plasma measurements were determined at the baseline and at the end of diet periods. The average plasma concentrations of total, LDL, and HDL cholesterol were 5.0 mmol/l, 2.8 mmol/l, and 1.7 mmol/l, respectively, on the low vegetable diet, and decreased by 8%, 8%,and 5%, respectively, in response to the high vegetable diet. The high vegetable diet increased the plasma concentrations of alpha-carotene, beta-carotene, lutein-zeaxanthin, beta-cryptoxanthin, and vitamin C by 133%, 134%, 107%, 65%, and 25%, respectively, compared with the low vegetable diet. There were no differences in the plasma concentrations of OxLDL between the low and high vegetable diets. The mean serum paraoxonase-1 activity was lower at the end of the high vegetable diet (226 U/l) than at the end of the low vegetable diet (240 U/l). Subjects having a genotype with high baseline paraoxonase-1 activity showed the most extensive reduction in their serum enzyme activities. The high vegetable diet enhanced the serum and erythrocyte folate concentrations by 78% and 14%, respectively, and reduced the plasma homocysteine by 13% compared with the low vegetable diet. The dietary treatment was effective even among subjects homozygous for C677T mutation in methylenetetrahydrofolate reductase gene, who are susceptible to high homocysteine levels. In conclusion, a high intake of vegetables, berries, and citrus fruit resulted in reduced plasma total and LDL cholesterol concentrations and enhanced plasma antioxidant levels. The high vegetable diet also effectively increased blood folate concentrations and reduced plasma homocysteine concentration.

Mexico has a high prevalence of stunting in children and adolescents, due to poor nutrition. Paradoxically, too many Mexican children and adolescents are currently overweight or obese (OW/OB). The dual-burden of stunting (low height for age) and OW/OB are nutritional conditions that increase the risk of developing chronic degenerative diseases in adulthood. The persistence of high levels of stunting in southern regions of Mexico, such as Yucatan, may be due to diet changes (nutrition transition) that Yucatecan population has experienced in recent years. Vitamins, such as folic acid (FA) and VB12 are micronutrients necessary for normal metabolism and growth. The relationships between the intake of these micronutrients and growth rate were identified. The impact of micronutrient consumption on body composition was also investigated. The sample population comprised 273 adolescents (152 females) aged 10-18 years, from Merida, Mexico. Dietary information was obtained using a food frequency questionnaire (FFQ) covering 106 local foods. Anthropometric and body composition measurements were taken, and socioeconomic data were gathered. Data were collected between September 2011 and July 2012. Over 50% of participants had inadequate consumption of both vitamins: 64% had inadequate intake of FA and 69% of VB12. Almost half (46.9%) were either short or stunted, and 33% were at risk of OW/OB. A higher risk of presenting OW/OB was found for participants with FA intake less than the RDI of 400 μg/day and for those with VB12 intake less than the RDI of 2.4 μg/day. No relationship was found between body fat percentage and the consumption of FA or VB12.