Submitted by Maurílio Figueiredo (maurilioafigueiredo@yahoo.com.br) on 2013-03-06T20:21:39Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_EnsaioComunitárioMascarado.PDF: 4978025 bytes, checksum: 849ae09d78ca6c1d9f99ec029044652a (MD5) / Approved for entry into archive by Neide Nativa (neide@sisbin.ufop.br) on 2013-03-13T19:48:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_EnsaioComunitárioMascarado.PDF: 4978025 bytes, checksum: 849ae09d78ca6c1d9f99ec029044652a (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-13T19:48:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO_EnsaioComunitárioMascarado.PDF: 4978025 bytes, checksum: 849ae09d78ca6c1d9f99ec029044652a (MD5) Previous issue date: 2008 / A complexidade eco-epidemiológica da LTA tem dificultado o desenvolvimento de estratégias eficazes para a prevenção e controle da doença. Portanto, o desenvolvimento de uma vacina segura e efetiva ainda permanece a forma mais promissora para prevenir a LTA. O objetivo do presente estudo foi determinar a redução da incidência da LTA de uma série temporal de 18 anos, após 5 anos do uso I.M. de duas doses da vacina produzida com Leishmania (Leishmania) amazonensis mortas. Um ensaio comunitário mascarado foi executado em 108 pequenas áreas geográficas de uma região endêmica de LTA em Bom Jesus do Galho, Caratinga, Córrego Novo, Entre Folhas, Imbé de Minas e Ubaporanga localizadas na microrregião de Caratinga, leste do Estado de Minas Gerais, no período de 2002 a 2007. Estas comunidades depois de estratificadas pelo tamanho populacional (N = 11.773) foram randomizadas através de amostra simples para receber vacina (N=50) ou placebo (N=58). Um total de 5.606 indivíduos de 5 a 59 anos e que não apresentavam história de LTA e apresentavam IDRM negativo, foram eleitos para participar do ensaio. As taxas de incidência observadas nas áreas vacinadas ou controles foram comparadas através da análise de co-variância ajustada pela incidência média anual pré-vacinal. Diferenças entre grupos foram consideradas significantes quando P < 0.05. Não foi observada diferença significativa (p= 0,357) entre as incidências no período pré-vacinal observadas em ambas as áreas (vacina e controle). Foi observada uma flutuação cíclica do número de casos durante o período de observação em ambas as áreas. Uma redução no número de casos foi observada na área vacinada (n=1) em relação à observada na área controle (n=9) ou entre o grupo de indivíduos que recusaram (n=9) a participar do ensaio. Este ensaio demonstrou que a vacina foi capaz de conferir proteção aos indivíduos vacinados. No entanto frente ao pequeno número de casos de LTA observados na região durante esses últimos cinco anos faz-se necessário a manutenção da vigilância epidemiológica das áreas selecionadas para participar do ensaio. ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The eco-epidemiological complexity of American cutaneous leishmaniasis (ACL) has made it difficult to elaborate an efficient strategy for the management of the disease, and the development of an effective vaccine remains the most promising approach. The objective of the study was to determine the reduction in the incidence of ACL in a 18 years of a temporal trend following 5 years of an intramuscular administration of two doses of a killed Leishmania (Leishmania) amazonensis vaccine. A community-based blind trial was conducted during 2002-2007 in 108 areas in the Caratinga micro-region of Minas Gerais (Brazil) that is endemic for ACL. Communities were stratified according to population size, and areas were randomly selected to receive vaccine (n=50) or placebo (n=58). The post-vaccination ACL incidence rates in the two areas were compared through co-variant analysis. A cyclic fluctuation in the number of ACL cases recorded during the 18-year pre-vaccination period was observed in both areas but there were no significance differences in overall incidence rates. Following the vaccination campaign, a significant reduction in the number of cases of ACL was observed in the vaccine area in comparison with the placebo area and with groups of individuals who refused to take part in the trial. This study demonstrated that the vaccine was able to confer protection against ACL. However, since there have been few cases of ACL in the study region since 2002, it was not possible to detect a significant difference between the average incidence rates in the post-vaccination period between the various groups. Continuation of epidemiological surveillance in the study areas is recommended in order to determine the precise efficacy of the vaccine.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2011. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2012-05-18T15:59:01Z No. of bitstreams: 1 2012_EdvarYuriPachecoSchubach.pdf: 1291703 bytes, checksum: fef36e4b8793edd323eba5d1f25c3009 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-23T11:28:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_EdvarYuriPachecoSchubach.pdf: 1291703 bytes, checksum: fef36e4b8793edd323eba5d1f25c3009 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-23T11:28:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_EdvarYuriPachecoSchubach.pdf: 1291703 bytes, checksum: fef36e4b8793edd323eba5d1f25c3009 (MD5) / A leishmaniose visceral representa um importante problema em saúde pública para o Brasil, sendo o cão doméstico a principal fonte de infecção para o vetor. O objetivo deste estudo foi validar a técnica de imunocromatografia rápida de duplo percurso para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina em amostras de sangue total e soro de cães. A amostra foi composta por 428 cães domiciliados selecionados por conveniência em dois bairros de uma região endêmica na cidade de Fortaleza, Ceará. De cada cão examinado, foram coletados 5µL de sangue periférico da ponta de orelha para realização do teste rápido em sangue total, 5 mL de sangue da veia jugular para obtenção do soro utilizado na realização do teste em condições de laboratório, além de três fragmentos de pele íntegra da região escapular utilizados para exames parasitológicos. Destes, dois foram acondicionados em solução salina estéril com antibiótico e antifúngico para isolamento de Leishmania em cultura e um em formol 10% tamponado para realização do exame histopatológico e de imunohistoquímica. Os animais positivos em pelo menos um desses três exames foram considerados casos e os negativos nos três exames foram considerados controles ou não-casos. Na avaliação do teste rápido no sangue com leitura visual, no soro com leitura eletrônica e no soro com leitura visual, foram estimadas, respectivamente, sensibilidade de 87,5% (IC95% 66,5 a 96,7), 88% (IC95% 67,5 a 96,8) e 88% (IC95% 67,5 a 96,8) e especificidade de 73,3% (IC95% 67,7 a 78,4), 69,2% (IC95% 63,7 a 74,3) e 68,2% (IC95% 62,2 a 74,3). A concordância entre a leitura visual e eletrônica no soro foi classificada como quase perfeita, índice Kappa = 0,88 (IC95% 0,83 a 0,93). O valor preditivo positivo para 7.9% de prevalência observada na amostra do estudo foi 21.9%. A análise de sensibilidade revelou que o valor preditivo positivo permaneceu abaixo de 50% em cenários com prevalência de 20%. O bom desempenho do teste rápido no sangue com leitura visual sugere que o mesmo possa ser indicado como exame de triagem para uso na rotina de campo e que ferramentas para leitura eletrônica não sejam necessárias para confirmação do resultado, porém seu uso associado a outros testes, utilizando estratégias de testagem sequencial ou paralela em algoritmos específicos deve ser avaliado, assim como a sua comparação formal com os testes atualmente disponíveis na rotina, para aproveitar da melhor maneira possível as facilidades da sua aplicação em condições de campo. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Visceral leishmaniasis is a major public health problem in Brazil where the domestic dog is the main source of infection for the vector. The objective of this study was to validate a dual path platform rapid chromatographic immunoassay for diagnosis of canine visceral leishmaniasis in whole blood and serum samples. The study sample consisted of 428 resident dogs selected by convenience from two districts of an endemic region of the city of Fortaleza, Ceará. Five micro liters of peripheral blood were collected from the tip of the ear to perform the rapid test in whole blood; 5 mL of blood from the jugular vein were collected to obtain serum for testing under laboratory conditions, and three fragments of intact skin from the scapular region were obtained for parasitological examination. Two skin fragments were stored in sterile saline with antibiotics and antifungal agents for isolation of Leishmania in culture and one fragment was stored in 10% buffered formalin for performing the histopathology and immunohistochemistry procedures. Positive animals in at least one of those three parasitological tests were classified as cases and negative animals in all the three tests were considered non-cases. Rapid test sensitivities were 87.5% (CI95% 66,5 to 96,7), 88% (CI95% 67,5 to 96,8%) and 88% (CI95% 67,5 to 96,8); and specificities were 73.3% (CI95% 67,7 to 78,4), 69,2% (CI95% 63,7 to 74,3) and 68,2% (CI95% 62,2 to 74,3) in whole blood submitted to visual reading; serum submitted to electronic reading and serum submitted to visual reading; respectively. The agreement between visual and electronic reading of serum samples was classified as almost perfect, Kappa index = 0.88 (CI95% 0.83 to 0.93). Positive predictive value for a 7.9% prevalence observed in the study sample was 21.9%. Sensitivity analysis revealed that positive predicted value remained below 50% in scenarios of prevalence as high as 20%. The performance of the rapid test in whole blood samples submitted to visual reading suggests that it could be indicated as the screening test for routine use in the field and that tools for electronic reading would be unnecessary to confirm the final result. However, its use in conjunction with other serological assays, using sequential or parallel testing strategies in specific algorithms should be evaluated, as well as its forma comparison with the currently available tests for canine visceral leishmaniasis diagnosis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-11Bitstream added on 2014-06-13T20:51:03Z : No. of bitstreams: 1 rossi_cn_me_jabo.pdf: 323193 bytes, checksum: 33919c622846b1fdf1e017e291939314 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Apesar de alguns relatos da ocorrência de leishmaniose visceral em felinos, a literatura é escassa no que diz respeito à sua pesquisa em populações de gatos de áreas endêmicas para a doença. Desta forma, o presente estudo teve por objetivo pesquisar em uma área endêmica para leishmaniose visceral canina, a possibilidade de infecção em gatos, por meio de exame parasitológico direto e da pesquisa de anticorpos anti-Leishmania chagasi pelas técnicas de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) e reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Para tanto, foram colhidas amostras de soro de 200 gatos, encaminhados ao Centro de Controle de Zoonoses do município de Araçatuba - São Paulo - Brasil, bem como realizadas punções biópsias aspirativas de linfonodo, medula óssea, baço e fígado, utilizados para a confecção de preparados citológicos para a pesquisa direta de formas amastigotas de Leishmania sp. A prevalência da doença nessa população de gatos foi de 6,5%. Dos 200 animais avaliados, oito (4,0%) apresentaram resultado parasitológico positivo, seis (3,0%) apresentaram títulos sorológicos acima do ponto de corte (0,332) pela técnica de ELlSA e um (0,5%) evidenciou título superior ao ponto de corte (1:40) pela RIFI, totalizando 13 gatos considerados positivos. / In spite of some reports of the occurrence of feline visceral leishmaniasis, the literature is scarce about its research on populations of cats in endemic areas for the disease. The present work aimed to study, in an endemic area for canine visceral leishmaniasis, the infection possibility in cats using the direct parasitological test, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescent antibody test (IFAT). For this purpose, a total of 200 cats directed to the Zoonosis Control Center of the municipal district of Araçatuba - São Paulo - Brazil were employed. Lymph node, bone marrow, spleen and liver aspiration biopsies were carried out and observed under optical microscope to search for amastigote forms of the parasite and serum samples were submitted to serological methods in order to detect anti-Leishmania chagasi circulating antibodies. The prevalence of the disease in this population of cats was 6.5%. Amastigote forms of the parasite were observed in eight (4.0%) cats; by ELISA method, six (3.0%) cats presented titer above the specie's cut off point (0,332) and one cat (0,5%) showed a titer above 1:40, a positive serological reaction, by IFAT, totalizing 13 positive cats.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T20:30:48Z : No. of bitstreams: 1 torresneto_r_me_bobtfmvz.pdf: 1205608 bytes, checksum: a043d02ed53f9963d975e5590d24439a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / A leishmaniose visceral canina é uma zoonose considerada endêmica em algumas regiões do estado de São Paulo e outras localidades do país. Apesar de ser uma enfermidade sistêmica, no cão, os principais sinais clínicos são dermatológicos. Foram avaliados trinta cães com diagnóstico de leishmaniose pelos exames parasitológico e sorológico, divididos em dois grupos: grupo A com descamação cutânea e grupo B com ulceração cutânea. Os padrões histopatológicos encontrados nos animais pertencentes ao grupo A foram de dermatite perianexial (33,3%), perivascular superficial (6,6%), nodular (6,6%), e as mistas (53,3%), sendo, intersticial/perianexial (12,5%), liquenóide/perivascular superficial e profunda (12,5%), perivascular superficial e profunda/perianexial (12,5%) e perivascular superficial/perianexial (62,5%). Os cães do grupo B apresentaram quadros histopatológicos compatíveis com dermatite perivascular superficial e profunda (33,3%), difusa (20%), perianexial (13,3%), nodular (6,6%), e as mistas (26,6%), representadas por intersticial/perivascular superficial e profunda (25%), nodular/perianexial (25%), fibrosante/perianexial (25%) e perivascular superficial e profunda/perianexial (25%). A presença de formas amastigotas foi observada em 8 (53%) cães com descamação e 7 (47%) com ulceração. A presença de linfócitos T CD3+ foi maior em relação aos linfócitos B CD79a +, tanto nas lesões descamativas como nas ulcerativas (69,5/8,8 e 66,1/14,5, respectivamente). Houve diferença estatística entre a população de células CD3+ e CD79a+ dentro do mesmo padrão dermatológico, o mesmo ocorreu quando se comparou a população de células CD79a+ entre os padrões descamativos e ulcerativos (p<0,05). / Canine leishmaniasis is an endemic zoonoses, in some São Paulo state regions and other Brazilian cities. Even though it is a systemic disease, in the dog, the main clinical sign is dermatological. Thirty dogs with positive results in serology and parasitological exam for leishmaniasis, were evaluated. They were divided in two groups, one with exfoliative lesions and other with cutaneous ulcers. Histopathological patterns in the first group were: periadnexial dermatitis (33.3%), superficial perivascular (6.6%), nodular (6.6%) and mixeds (53.3%), intersticial/periadnexial (12.5%), lichenoid/perivascular superficial and deep (12.5%), perivascular superficial and deep/periadnexial (12.5%) and superficial perivascular/periadnexial (62.5%). In the ulcerative pattern, the histopathological patterns were: perivascular superficial and deep dermatitis (33.3%), diffuse dermatitis (20%), periadnexial dermatitis (13.3%), nodular dermatitis (6.6%) and mixed dermatitis (26.6%), including intersticial/ perivascular superficial and deep (25%), nodular/periadnexial (25%), fibrosing/perianexial (25%) and perivascular superficial and deep/periadnexial. Parasites were found in 8 dogs (53%) with exfoliative pattern and 7 dogs (47%) with ulcerative pattern. CD3 positive cells (T lymphocytes) were predominant than CD79a positive cells (B lymphocytes), in both dermatological patterns of lesions (69,5/8,8 e 66,1/14,5, respectively). There was no statistical difference between CD3 positive and CD79a cell population concerning exfoliative and ulcerative patterns. There was statistical difference between CD3+ cells and CD79a+ cells, when the same dermatological pattern was considered. The same was observed when compared CD79a+ cells in exfoliative and ulcerative patterns (p<0,05).

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2007. / Submitted by Rebeca Araujo Mendes (bekinhamendes@gmail.com) on 2009-12-22T00:13:19Z No. of bitstreams: 1 2007_VanessaVianaCardoso.pdf: 1910167 bytes, checksum: a55c514050e76b694ea5803428ab0065 (MD5) / Approved for entry into archive by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com) on 2010-01-07T18:45:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_VanessaVianaCardoso.pdf: 1910167 bytes, checksum: a55c514050e76b694ea5803428ab0065 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-07T18:45:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_VanessaVianaCardoso.pdf: 1910167 bytes, checksum: a55c514050e76b694ea5803428ab0065 (MD5) Previous issue date: 2007 / A leishmaniose visceral é caracterizada pela visceralização da leishmânia pelo sistema fagocítico-mononuclear. A expressão clínica da doença depende de fatores como a espécie e virulência da cepa e o tipo de resposta do sistema imunitário, características individuais, genética e o meio ambiente em que o indivíduo está inserido. O glucantime continua sendo a droga de primeira escolha no tratamento desta doença e a resposta clínica ao tratamento depende da inter-relação de vários fatores. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do glucantime sobre a função dos monócitos e neutrófilos de crianças com leishmaniose visceral. Foram avaliados os parâmetros clínico-evolutivos e a função dos fagócitos de 23 crianças com leishmaniose visceral e 18 crianças controles sem a doença. A capacidade fagocitária dos monócitos e neutrófilos e a capacidade microbicida foram avaliadas antes, após 48 h e ao final do tratamento com glucantime. O teste de fagocitose foi realizado utilizando-se Saccharomyces cerevisiae, pelos receptores que reconhecem padrões moleculares de patógenos e pelos receptores que reconhecem os componentes do complemento e porção Fc da IgG. A produção de ânions superóxido foi avaliada pelo teste do nitroblue tetrazolium. A desnutrição foi mais freqüente entre as crianças com leishmaniose visceral, e o escore z da estatura para idade (E/I) mostrou relação direta com a capacidade microbicida. Infecção bacteriana foi observada em 35% das crianças, sendo o pulmão o local mais freqüentemente acometido. Hepatite ocorreu em 74% dos casos e insuficiência hepática foi observada em uma criança. Provavelmente houve hepatotoxidade em 13% dos casos. O tamanho do baço mostrou relação inversa com a concentração de hemoglobina e com o índice fagocitário dos monócitos. Observou-se melhora da febre em 61% das crianças no sétimo dia de tratamento, redução do tamanho do baço e do fígado das crianças em 55% e 54%, respectivamente, na segunda semana, melhora da pancitopenia com aumento em 20% da concentração de hemoglobina, em 46% no número de glóbulos brancos e em 67% no número das plaquetas e tendência à diminuição das enzimas hepáticas na segunda semana de tratamento. Houve dois óbitos devidos a insuficiência respiratória e hepática. O índice fagocitário de neutrófilos e monócitos estava aumentado nas crianças com leishmaniose visceral antes do tratamento, devido ao aumento da média de levedura ingeridas por fagócito, o que sugere um aumento na expressão de receptores para complemento e porção Fc das IgG nestes fagócitos, induzidas pela infecção parasitária. Entretanto, observamos uma diminuição na capacidade microbicida dos fagócitos nas crianças com leishmaniose visceral antes do tratamento específico. O tratamento com o glucantime contribuiu para a melhora dos parâmetros clínicos e laboratoriais e aumentou a capacidade microbicida dos fagócitos. Entretanto, esta droga modulou negativamente a capacidade fagocitária. Mostramos a ação desta droga como moduladora da resposta do sistema de fagócitos. A aumentada capacidade fagocitária associada com a diminuída produção de moléculas microbicidas pode fazer parte dos mecanismos de escape do parasita da resposta imune do hospedeiro e o tratamento com o antimonial possivelmente está atuando como um mecanismo de contra-escape, aumentando a competência microbicida destas células. ___________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Visceralizing of leishmaniasis is in part due to the mononuclear phagocyte system. The clinical manifestations depend on several factors as parasite and virulence of the strain, the type of immune response, genetic and environment. The meglumine antimoniate remains the first choice for the treatment of the disease and the cure depends on several factors. This work aimed to evaluate the influence of meglumine antimoniate on phagocytosis and superoxide production by phagocytes from visceral leishmaniasis children. Phagocytosis was assessed in 16 infected children, before, 9 children 48h after treatment and in 16 children at the end of the therapy, and in 18 normal control, using Saccharomyces cerevisiae, through pattern recognition receptors and opsonin receptors. The production of superoxide was assessed by the nitroblue tetrazolium test. Clinical and laboratorial parameters of 23 children were evaluated and followed up. The malnutrition was frequent in children with visceral leishmaniasis and the z score height for age showed positive relationship with the microbicidal capacity. Bacterial infection was observed in 35% of the diseased children and the lung was the most frequent site of infection. Acute hepatitis was observed in 74% of the cases and hepatic insufficiency was present in one patient. In 13% of the cases hepatotoxicity was observed, probably secondary to meglumine antimoniate use. The spleen size showed negative relationship with the hemoglobin concentration and phagocytic index of monocytes. The fever decreased in 61% of the children in the seventh day of treatment. After two weeks there was 55% and 54% reduction of spleen and liver, respectively, 20% increase of hemoglobin concentration, 46% increase of leukocytes and 67% increase of platelets and showed tendency to reduction of hepatic enzymes. There were two deaths due to hepatic insufficiency and respiratory failure. The phagocytic index of monocytes and neutrophils was increased in children with visceral leishmaniasis before treatment due to an increase of the median of ingested S. cerevisiae by phagocyte. This suggests an increase of opsonin receptors expression induced by parasitic infection. However, it was observed reduction of microbicidal capacity of phagocytes in children with visceral leishmaniasis before specific treatment. The antimoniate treatment contributed to improve the clinical and laboratorial parameters and the microbicidal capacity of phagocytes. However, the antimoniate modulated negatively the phagocytic capacity. The increased phagocytic capacity associated with the reduction of microbicidal molecules may play a role in the escape mechanism of the parasite from the host immune response and the antimonial treatment is probably acting as a counter escape mechanism, therefore increasing the microbicidal capability of these cells.

Orientador: Adelino Vieira de Godoy Netto / Banca: Victor Marcelo Deflon / Banca: Sofia Nikolaou / Banca: Eduardo Tonon de Almeida / Banca: Lázaro Moscardini D'Assunção / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo a síntese de compostos de paládio(II) utilizando como precursor o complexo [PdCl2(LH2)]×H2O (1), onde LH2 = 4,4',5,5'-tetrametil-2,2'-bis-imidazol. A obtenção de novos derivados de Pd(II) a partir do composto 1 ocorreu empregando os sais KBr e KSCN, os ligantes sulfurados {tiouréia (tu); N-metiltiouréia (mtu); N-feniltiouréia (ftu); N,N'-dimetiltiouréia (dmtu); N,N'-difeniltiouréia (dftu)}, diimínicos {2,2'-bipiridina (bpy), 1,10-fenantrolina (phen); 1,10-fenantrolina- 5,6-diona (pheno)} e fosfínicos {1,2-bis(difenilfosfina)etano (dppe), cis-1,2-bis(difenilfosfina)etileno (dppet) e 1,3-bis(difenilfosfina)propano (dppp); trifenilfosfina (PPh3)}. Os compostos foram caracterizados por análise elementar, espectroscopia vibracional na região do infravermelho, ressonância magnética nuclear de 1H, 13C{1H}, MAS-RMN de 31P e por termogravimetria. As reações entre o precursor [PdCl2(LH2)] (1) e os sais KBr e KSCN conduziram a formação dos complexos [PdBr2(LH2)] (2) e [Pd2(g-1,3-SCN)2(SCN)2(LH2)] (3), respectivamente. A partir da análise dos dados espectroscópicos e dos resultados provenientes da otimização da geometria dos complexos utilizando a metodologia DFT, foi possível evidenciar o modo de coordenação quelante bidentado do ligante LH2 pelo deslocamento das bandas com forte contribuição do modo bNH em 1206 e 1379 cm-1 para frequências significativamente maiores que aquelas observadas no espectro no IV do ligante (1104 cm- 1 e 1353 cm-1, respectivamente). A presença de grupos tiocianatos coordenados no modo S-terminal e end-to-end no complexo 3 foi sugerida pelo aparecimentos de duas bandas nasSCN em 2160 e 2114 cm-1. Os complexos [Pd(tu)2(LH2)]Cl2 (4), [Pd(metu)2(LH2)]Cl2 (5), [Pd(ftu)2(LH2)]Cl2 (6), [Pd(dmtu)2(LH2)]Cl2 (7) e [Pd(dftu)2(LH2)]Cl2 (8)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work deals with the synthesis of Pd(II) compounds using [PdCl2(LH2)] (1), where LH2 = 4,4',5,5'- tetramethyl-2,2'-bis-imidazole, as a precursor. New Pd(II) derivatives were prepared from the reaction between compound 1 and KBr and KSCN salts, sulfur-based ligands {thiourea (tu); N-methylthiourea (mtu); N-phenylthiourea (ptu); N,N'-dimethylthiourea (dmtu); N,N'-diphenylthiourea (dptu)}, diimines-type ligands {2,2'-bipyridine (bpy), 1,10-phenanthroline (phen); 1,10-phenanthroline-5,6-dione (pheno)} and phosphines {1,2-bis(diphenylphosphine)ethane (dppe), cis-1,2-bis(diphenylphosphine)ethylene (dppet) and 1,3-bis(diphenylphosphine)propane (dppp); triphenylphosphine (PPh3)}. The compounds were characterized by means of elemental analyses, IR spectroscopy, 1H, 13C{1H} NMR and 31P MAS-NMR spectroscopy and thermogravimetry. Reactions between [PdCl2(LH2)]×H2O (1) and the KBr and KSCN salts yielded the complexes [PdBr2(LH2)] (2) and [Pd2(g-1,3-SCN)2(SCN)2(LH2)] (3), respectively. From the inspection of spectroscopic data and results from geometry optimization of the complexes, calculated using the DFT/B3LYP method, the chelating bidentate coordination mode of the ligand was proposed by the shift to higher frequencies of the bNH bands at 1206 and 1379 cm-1 upon complexation (free ligand: 1104 cm-1 and 1353 cm-1). Complexes [Pd(tu)2(LH2)]Cl2 (4), [Pd(metu)2(LH2)]Cl2 (5), [Pd(ptu)2(LH2)]Cl2 (6), [Pd(dmtu)2(LH2)]Cl2 (7) and [Pd(dptu)2(LH2)]Cl2 (8) were synthesized from the reaction between 1 and the suitable thiourea type ligands, at the 1:2 molar ratio, respectively. Spectroscopic techniques provide useful information on the S-coordination mode of thioureas as well on the structural proposals. Reaction between precursor 1 and the diimines bpy, phen and pheno afforded the... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Adelino Vieira de Godoy Netto / Coorientador: antonio Eduardo Mauro / Banca: Rose Maria Carlos / Banca: Wendel Andrade Alves / Resumo: Os compostos de coordenação de paládio(II) possuem extensas aplicações nas mais diferentes áreas da química. Nos últimos anos, eles estão sendo cada vez mais estudados para catálise homogênea, química supramolecular, materiais líquidocristalinos e Medicina. Dentre esses compostos de paládio(II) destacam-se os ciclopaladados, por apresentarem em alguns casos atividade antitumoral comparável ou superior a da cisplatina e recentemente atividade antileishmanicida. Este trabalho teve como propósito sintetizar cinco novos complexos ciclopaladados mononucleares do tipo [PdCl(C2,N-bzox)L], onde bzox = benzaldeidooxima e L = tiouréia (1), N,N'-dimetiltiouréia (2),N-metiltiouréia (3), N-feniltiouréia (4) e tioacetamida (5) através de reações entre o precursor dimérico [Pd(μ-Cl)(C2,Nbzox)] 2 e os ligantes. Posteriormente os compostos foram caracterizados por Análise Elementar, Espectroscopia no IV (Infra-Vermelho), RMN (Ressonância Magnética Nuclear) e Espectrometria de Massas. Os complexos e a cisplatina tiveram sua citotoxicidade investigada, in vitro, pelo método do MTT frente à linhagem celular LM3 (adenocarcinoma mamário), onde os compostos 1, 2 e 4 apresentaram valores citotóxicos comparáveis a cisplatina. Os compostos também foram testados frente ao protozoário do gênero Leishmania e a concentração inibitória, IC50 foi determinada. O composto 4 com o ligante feniltiouréia mostrou-se o mais ativo com um IC50 de 1,56 μg mL-1, inclusive quando comparado a droga de referência Anfotericina B (IC50 = 6,95 μg mL-1) / Abstract: Palladium (II) compounds been the subject of intense studies in various areas of chemistry, such as homogeneous catalysis, supramolecular chemistry, liquid crystalline materials and Bioinorganic chemistry. Among them, special attention has been devoted to palladacycles, because of their promising cytotoxic activity towards tumor cells as well their some cases they have antitumor activity comparable or superior to cisplatin and antileishmanicidal activity. This research aimed to synthesize five new mononuclear palladacycles complexes of the type [PdCl(C2,N-bzox)L], where bzox = benzaldeidooxima and L = thiourea (1), N,N'-dimethylthiourea (2), N-methylthiourea (3) N-phenylthiourea (4) and thioacetamide (5) through bridge splitting reaction between the dimeric precursor [Pd(μ-Cl)(C2,N-bzox)]2 and the ligands. Subsequently the compounds were characterized by Elemental Analysis, IR spectroscopy (Infra-Red), NMR (Nuclear Magnetic Resonance) and Mass Spectrometry. All the complexes and cisplatin have been tested in vitro by MTT assay for their cytotoxicity against the cell line LM3 (mammary adenocarcinoma), where the compounds 1, 2 and 4 showed to be as cytotoxic as cisplatin. The compounds were also tested against the Leishmania protozoa and the inhibitory concentration, IC50 was determined. Compound 4 with the ligand phenylthiourea proved to be the most active with an IC50 of 1.56 mg mL-1, even when compared to reference drug Amphotericin B (IC50 = 6.95 mg mL-1) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-11-10Bitstream added on 2014-06-13T19:22:42Z : No. of bitstreams: 1 santiago_meb_dr_jabo.pdf: 510527 bytes, checksum: 23f153f852b4ef52ff4f3278f8a62f07 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente estudo investiga in vitro a ação leishmanicida do imunomodulador fosfolinoleato-palmitoleato de magnésio e amônio proteico (PMAPA) e sua ação citotóxica em células mononucleares, e in vivo seu efeito imunomodulador em cães naturalmente infectados por Leishmania spp. Para avaliar a viabilidade celular após a ação do P-MAPA utilizou-se o ensaio colorimétrico com (3 - (4,5-dimetil-2-il) -2,5-difenil tetrazolium brometo (MTT), onde células mononucleares derivadas de sangue periférico foram cultivadas com diferentes concentrações de P- MAPA; 0, 50, 100 e 200 μg/mL em ambiente úmido a 37°C, com 5% de CO2 por 72 horas. A ação leishmanicida do imunomodulador foi avaliada pelo mesmo método utilizando-se a forma promastigosta de Leishmania (L.) chagasi. Para avaliar a ação terapêutica do PMAPA, vinte cães sem raça definida, com sintomas clínicos compatíveis com leishmaniose e positivos na detecção de anticorpos anti-leishmania pelo método ELISA, foram tratados. Dez cães receberam 15 doses do imunomodulador (2,0 mg/kg), por via intramuscular, e dez receberam solução fisiológica como placebo. Os grupos foram acompanhados para observação da remissão de sinais clínicos, no grupo tratado e controle foram colhidas amostras de pele antes e após a administração do imunomodulador para quantificação da carga parasitária, ao final do tratamento amostras de sangue periférico foram utilizadas para o isolamento de mononucleares e investigação do perfil linfocitário do tipo T e produção das citocinas IL-10, IFN-gama e IL-2 em sobrenadante de cultura celular. A quantificação da carga parasitária nas amostras de pele foi realizada pelo método da PCR em tempo real. O perfil linfocitário do tipo T foi realizado por citometria de fluxo, e a quantificação das citocinas em sobrenadante de cultura... / This study investigates the in vitro leishmanicidal action of the immunomodulator-phospholinoleate palmitoleato magnesium and ammonium protein (P-MAPA) together with its cytotoxic action in mononuclear cells. It also investigates, in vivo, its immunomodulatory effect in dogs naturally infected by Leishmania spp. To assess cell viability after the action of P-MAPA, the colorimetric assay with (3 - (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) was used. There mononuclear cells derived from peripheral blood and were cultured with different concentrations of P-MAPA, 0, 50, 100 and 200 μg/mL in a humid environment at 37 ° C with 5% CO2 for 72 hours. The leishmanicidal action of immunomodulators was evaluated using the same method to form promastigosta of Leishmania (L.) chagasi. To assess the therapeutic action of P-MAPA, twenty mongrel dogs, with clinical symptoms compatible with leishmaniasis and positive detection of anti-leishmania antibodies by ELISA assay were treated. Ten dogs received 15 doses of the immunomodulator (2.0 mg / kg) intramuscularly, and ten received saline solution as placebo. The groups were followed for observation of clinical signs of remission; in the both groups, skin samples were collected before and after administration of the immunomodulator to quantify the parasite load. At the end of treatment, peripheral blood samples were used for the isolation of mononuclears, the profile investigation of type T lymphocytes, together with the production of IL-10, IFN-gamma and IL-2 cytokines in cell culture supernatant. The quantification of parasite load in the samples was performed by PCR in real time. The profile of type T lymphocytes was performed by flow cytometry, and quantification of cytokines in culture supernatants by ELISA capture... (Complete abstract click electronic access below)

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-05-10T16:20:01Z No. of bitstreams: 1 2016_LubhandwaSebastianBiswaro.pdf: 2616385 bytes, checksum: 2795a754581f3627c2de38ff8b29cb3c (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-05-11T11:21:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_LubhandwaSebastianBiswaro.pdf: 2616385 bytes, checksum: 2795a754581f3627c2de38ff8b29cb3c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-11T11:21:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_LubhandwaSebastianBiswaro.pdf: 2616385 bytes, checksum: 2795a754581f3627c2de38ff8b29cb3c (MD5) / A leishmaniose é uma doença negligenciada causada por um protozoário leishmania e é transmitida por flebotomíneos. Está doença acomete mais de 350 milhões de pessoas em todo o mundo. Os medicamentos de primeira linha utilizados para tratar esta doença foram os antimoniais, os quais possuem resistência e apresentam efeitos colaterais severos. O Itraconazol é um antimicótico que também é usado no tratamento de leishmaniose. No presente estudo, o Itraconazol foi encapsulado em nanopartículas utilizando o co-polímero láctico co-ácido glicólico (PLGA) e recobertas com manose. Estas nanopartículas foram caracterizadas e testadas em ensaios de citotoxicidade e atividade anti-leishmania. As nanopartículas de PLGA vazias apresentaram um diâmetro hidrodinâmico médio de 220 nm ± 27 e um potencial zeta de -1,1 mV ± 0,7, enquanto nanopartículas de PLGA com itraconazol recobertas com manose (PLGA ITZ manose) apresentaram 263 nm ± 12,6 e -1,9 mV ± 0,5. Por meio do ensaio de MTT, a citotoxicidade das nanopartículas vazias foi de 13,7% e 12,6% para as células THP-1 e J774, respectivamente, enquanto PLGA ITZ manose foram de 1% e 20,7% para as células THP-1 e J774, respectivamente. A análise da atividade anti-leishmaniose foi avaliada pela redução do número de células que continham mais de 20 amastigotas intracelulares e observou-se que PLGA ITZ manose a 0,1 mM e de PLGA ITZ a 0,2 mM reduziram o percentual de amastigotas intracelulares de 34,6% para 13,7 % ± 2,8 e 5,7 % ± 2,1 (p<0,05), respectivamente, para L (V.) panamensis. Já para L (L.) infantum, a atividade leishmanicida de PLGA ITZ manose e nanopartículas de PLGA ITZ conseguiu reduzir os amastigotas de 16,7% para 4,8% ± 2,8 e 8,3% ± 0,3, respectivamente. Para L (L.) braziliensis, a atividade leishmanicida de PLGA e PLGA ITZ manose houve uma redução dos amastigotas com diferença estatistíca significativa (p <0,05) de 68,6% para 28 ± 2,4% e 21,1% ± 4,6, respectivamente. As três cepas testadas responderam de forma diferente para as nanoformualções de PLGA contendo itraconazol com ou sem manose. As nanopartículas de PLGA carregadas com itraconazol revestidas com manose conseguiu reduzir mais amastigotas de L (L.) infantum, enquanto que nanopartículas de PLGA com itraconazol sem manose conseguiu reduzir mais amastigotas intracelulares de L (V.) Panamensis e L. (L.) braziliensis. O fato das nanopartículas de PLGA contendo itraconazol revestidas com manose terem apresentado uma maior eficácia na redução das formas amastigotas de L (L.) infantum, foi possivelmente devido à adição de manose a nanoformulação. Como recomendação sugere-se que sejam realizados estudos in vivo das nanopartículas de itraconazol revestidas com manose para investigar e/ou confirmar o potencial dessas nanopartículas. _______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Leishmaniasis is a neglected disease caused by the protozoa Leishmania and is transmitted by sand flies. This disease affects over 350 million people worldwide. The first-line drugs used to treat this disease were antimonials, which resistance and severe side effects have been associated with. Itraconazole is an antifungal which is also used in the treatment of leishmaniasis. In the present study, Itraconazole was encapsulated in nanoparticles using the copolymer lactic co-glycolic acid (PLGA) and coated with mannose. These nanoparticles were characterized and tested in cytotoxicity assays and anti-leishmania activity. The empty PLGA nanoparticles had a mean hydrodynamic diameter of 220 nm ± 27 and a zeta potential of -1.1 mV ± 0.7, while PLGA nanoparticles coated with mannose itraconazole (ITZ mannose PLGA) were 263 nm ± 12, 6 and -1.9 ± 0.5 mV. By means of the MTT assay, cytotoxicity of empty nanoparticles was 13.7% and 12.6% for THP-1 cells and J774, respectively, while PLGA ITZ mannose were 1% and 20.7% for the cells THP-1 and J774, respectively. The analysis of anti-leishmanial activity was evaluated by the reduction in the number of cells containing intracellular amastigotes more than 20 and it was noted that the PLGA ITZ 0.1 mM mannose and PLGA ITZ 0.2 mM reduced the percentage of intracellular amastigotes 34.6% to 13.7% ± 2.8 and 5.7 ± 2.1% (p <0.05), respectively, to L (V.) panamensis. As for L (L.) infantum, the leishmanicide activity of PLGA nanoparticles ITZ mannose and PLGA ITZ could reduce amastigotes from 16.7% to 4.8% ± 2.8 and 8.3 ± 0.3%, respectively. For L (L.) braziliensis, the anti-leishmanial activity of PLGA and PLGA ITZ mannose there was a reduction of amastigotes with statistically significant difference (p <0.05) from 68.6% to 28 ± 2.4% and 21.1% ± 4.6, respectively. The three strains tested responded differently to nanoformulation of PLGA containing itraconazole with and without mannose. The PLGA nanoparticles loaded with itraconazole coated with mannose could further reduce amastigotes L (L.) infantum, while PLGA nanoparticles with itraconazole without mannose could further reduce intracellular amastigotes L (V.) panamensis, and L. (L.) braziliensis. The fact that PLGA nanoparticles containing itraconazole coated with mannose have shown greater effectiveness in reducing amastigotes of L (L.) infantum, was possibly due to the addition of mannose to nanoformulação. As a recommendation is suggested that in vivo studies of itraconazole nanoparticles coated with mannose are carried out to investigate and / or confirm the potential of these nanoparticles.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2006. / Submitted by Thaíza da Silva Santos (thaiza28@hotmail.com) on 2009-09-25T19:44:43Z No. of bitstreams: 1 2006_Maria Elizabeth M C Dorval.pdf: 5823254 bytes, checksum: d0288003f2151f98537c46e000f4a4c1 (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2009-09-28T13:15:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Maria Elizabeth M C Dorval.pdf: 5823254 bytes, checksum: d0288003f2151f98537c46e000f4a4c1 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-09-28T13:15:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Maria Elizabeth M C Dorval.pdf: 5823254 bytes, checksum: d0288003f2151f98537c46e000f4a4c1 (MD5) Previous issue date: 2006 / Os estudos epidemiológicos realizados permitiram o isolamento e a identificação de Leishmania (Leishmania) amazonensis em pacientes procedentes do município de Bela Vista, Mato Grosso do Sul, ampliando-se, portanto, o conhecimento da distribuição geográfica desta espécie de parasito. As capturas de flebotomineos foram realizadas no período de fevereiro de 2004 a janeiro de 2006, na mata, utilizando-se armadilhas automáticas luminosas (AAL), de Shannon e de Disney, e em abrigo de animais domésticos, com AAL. Com o emprego dos três tipos de armadilhas capturou-se 1.999 espécimes pertencentes a três subtribos, oito gêneros e 19 espécies de Phlebotominae. Brumptomyiina: Brumptomyia avellari, Br. brumpti e Brumptomyia sp; Lutzomyiina: Evandromyia aldafalcaoae, Ev. bourrouli, Ev. cortelezzii, Ev. evandroi, Ev. lenti, Ev. teratodes, Ev. termitophila, Lutzomyia longipalpis, Pintomyia christenseni e Sciopemyia sordellii; Psychodopygina: Bichromomyia flaviscutellata, Nyssomyia whitmani, Psathyromyia aragaoi, Ps. campograndensis, Ps. punctigeniculata e Ps. shannoni. Do total de espécimes capturados, 22,7% foram nas armadilhas de Shannon (33,9% das fêmeas de Ps. punctigeniculata; 7,7% de Bi. flaviscutellata e 4,4% de Lu. longipalpis), 17,7% nas AALs (na mata, 70,6% dos espécimes de Brumptomyia e em abrigos de animais domésticos, 80,2% de Lu. longipalpis) e 59,6% nas armadilhas de Disney (57,6% de Ev. bourrouli e 41,4% de Bi. flaviscutellata, sendo 81,7% das fêmeas, desta espécie). Pela primeira vez, se registra a presença de Ev. evandroi no Estado. Bi. flaviscutellata esteve distribuída em todos os ambientes de mata amostrados, com freqüência mais regular nos meses secos, porém, mostrou pico em março. Não foi observada a infecção natural por Le .(Le.) amazonensis em Bi. flaviscutellata, porém, seu pico de captura coincidente com o período da infecção natural em hamsters (Mesocricetus auratus) sentinelas, permitem supor a existência de um ciclo enzoótico na área, com a infecção acidental e periódica do homem que adentra a área, uma vez que fêmeas deste flebotomíneo compareceram, embora com freqüência baixa, em armadilhas de Shannon, sugerindo a sua antropofilia. Além da presença de vetores de Le. (Le.) amazonensis e Le. (Le.) chagasi, constatou-se ainda a presença de Ny. whitmani, reconhecido vetor de Le. braziliensis, no entanto, em baixa freqüência. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The epidemiological studies undertaken permitted the isolation and identification of Leishmania (Leishmania) amazonensis in patients from the municipality of Bela Vista, Mato Grosso do Sul State, Brazil, thus expanding our knowledge of this parasite’s distribution. The captures of phlebotomines were undertaken from February 2004 to January 2006, using automatic light traps (ALTs), Shannon traps and Disney traps in forested environments and ALTs in domestic animal shelters. With the three types of traps, a total of 1,999 specimens belonging to three subtribes, eight genera and 19 species of Phlebotominae were captured: Brumptomyiina: Brumptomyia avellari, Br. brumpti and Brumptomyia sp; Lutzomyiina: Evandromyia aldafalcaoae, Ev. bourrouli, Ev. cortelezzii, Ev. evandroi, Ev. lenti, Ev. teratodes, Ev. termitophila, Lutzomyia longipalpis, Pintomyia christenseni and Sciopemyia sordellii; Psychodopygina: Bichromomyia flaviscutellata, Nyssomyia whitmani, Psathyromyia aragaoi, Ps. campograndensis, Ps. punctigeniculata and Ps. shannoni. Of this total, 22.7% were captured on the Shannon traps (33,9% of the females being of Ps. punctigeniculata; 7.7% of Bi. flaviscutellata and 4.4% of Lu. longipalpis); 17.7% in the ALTs (in the forest 70.6% of the specimens captured belonged to Brumptomyia and in the domestic animal shelters, 80.2% belonged to Lu. longipalpis) and 59.6% in the Disney traps (57.6% of Ev. bourrouli and 41.4% of Bi. faviscutellata; 81.7% of the females being of this species). The occurrence of Ev. evandroi in the State is here registered for the first time. Bi. Flaviscutellata occurred in all the forested environments sampled, with more regular frequencies during the dry period of the year, though showing a peak in March. No natural infection by Le. amazonensis was observed in Bi. flaviscutellata, however its peak of capture coincident with the period of natural infection in hamsters (Mesocricetus auratus) used as bait in Disney traps, suggests the existence of an enzootic cycle in the area, with periodic and accidental infection of people who enter it, since females of this sandfly were captured (although in low frequency) on the Shannon traps, indicating their anthropophily. Besides the presence of the vectors of Le. amazonensis and Le. chagasi, Ny. whitmani, a known vector of Le. braziliensis, was found, albeit in very low frequency.