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Otimização e validação de metodologia para determinação de Ivermectina em amostras de leite

Alves, Naamã Elias Augusto 08 August 2014 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Tecnologias Química e Biológica, 2014. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-02-19T14:51:08Z No. of bitstreams: 1 2014_NaamãEliasAugustoAlves.pdf: 1229706 bytes, checksum: 9ffb180525b0472209d2fe2cf1d95fe2 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-05-17T19:45:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_NaamãEliasAugustoAlves.pdf: 1229706 bytes, checksum: 9ffb180525b0472209d2fe2cf1d95fe2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-17T19:45:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_NaamãEliasAugustoAlves.pdf: 1229706 bytes, checksum: 9ffb180525b0472209d2fe2cf1d95fe2 (MD5) / O fármaco veterinário endectocida conhecido como ivermectina ou 22,23-dihidroavermectina B1a + 22,23-dihidroavermectina B1b, apesar da sua recente proibição, continua a ser usado largamente no Brasil tanto em bovinos como em suíno e bubalino, porém a grande maioria se deve aos bovinos, devido ao fato do Brasil possuir o segundo maior rebanho mundial. A problemática da utilização deste fármaco está associada a uma possível excreção da ivermectina no leite desses animais, o qual é amplamente utilizado na dieta diária dos brasileiros, e os efeitos devido à exposição crônica a esse fármaco ainda não são bem estudados. Este trabalho adaptou uma metodologia para determinação da ivermectina em leite de bovinos. Foi realizada a validação da metodologia com leitura de amostra de leite fortificada. A amostra de leite integral foi coletada direto do animal para que permanecesse a quantidade total de gordura, devido ao caráter lipofílico do fármaco. O método validado baseou-se em cromatografia líquida com detecção UV/VIS. A extração foi realizada em duas partes, a primeira líquido-líquido, onde há a separação das gorduras e proteínas, e a segunda em fase sólida com o auxílio de cartuchos SPE C18. Para a leitura das amostras utilizou-se cromatógrafo líquido, com detector de UV-Vis, com coluna Phenomenex C18, 10cm, ID 46µm. Os resultados de validação mostraram que o método é linear, com coeficiente de determinação (R2) igual à 0,991, seletivo, preciso, com coeficientes de variação entre 3,98 e 9,42%, exato, com valores de recuperação variando entre 98 e 110% e com limites de detecção e quantificação de 19,825 µg/L e 49,350 µg/L respectivamente. _______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The veterinary drug called ivermectin or endectocide 22.23-22.23-dihydroavermectin B1a + B1b dihydroavermectin, despite its recent ban, continues to be used widely in Brazil both in cattle and in pigs and buffalo, but the vast majority is due to cattle, due to the fact that Brazil has the second largest herd. The issue of use of this drug is associated with a possible excretion of ivermectin in milk of these animals, which is widely used in daily diet of Brazilians, and the effects due to chronic exposure to this drug are not well studied. This study adapted a method for determining the milk of bovine ivermectin. Validate the methodology with sample reading of fortified milk was performed. The sample of whole milk was collected directly from the animal to remain on the total amount of fat, due to the lipophilic nature of the drug. The validated method was based on liquid chromatography with UV detection / VIS. The extraction was performed in two parts, the first liquid-liquid, where there is a separation of fat and protein, and the second solid phase with the aid of C18 SPE cartridges. To read the samples we used liquid chromatography with UV-Vis detector with Phenomenex C18, 10cm, 46μm ID column. The validation results showed that the method is linear, with a coefficient of determination (R2) equal to 0.991, selective, precise, with coefficients of variation between 3.98 and 9.42%, exact, with recovery values ranging between 98 and and 110% limits of detection and quantification of 19,825 mg / L and 49,350 mg / l respectively.
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Efeito da ozonização na contagem da Staphylococcus aureus em leite / Effect of ozonation on Staphylococcus aureus count in milk

Couto, Emanuel Pereira 21 February 2014 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Veterinária, 2014. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-13T17:44:55Z No. of bitstreams: 1 2014_EmanuelPereiraCouto.pdf: 1011271 bytes, checksum: 0fdb0f9270ca9b9379a88f42456e26fe (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-13T17:45:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_EmanuelPereiraCouto.pdf: 1011271 bytes, checksum: 0fdb0f9270ca9b9379a88f42456e26fe (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-13T17:45:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_EmanuelPereiraCouto.pdf: 1011271 bytes, checksum: 0fdb0f9270ca9b9379a88f42456e26fe (MD5) / Com o objetivo de avaliar a eficiência da ação da ozonização do leite sobre a redução na contagem de colônias de micro-organismos da espécie Staphylococcus aureus, foi realizado experimento em que amostras de leite inoculadas com o micro-organismo foram submetidas à ozonização com diferentes binômios tempo/concentração. Assim, dividiram-se as amostras em quatro ensaios: 1 e 2, com leite desnatado e concentrações de 34.7 mg L-1 e 44.8 mg L-1 de ozônio, respectivamente; e ensaio 3 e 4, com leite integral (34.7 mg L-1 e 44.8 mg L-1 de ozônio, respectivamente). Os tempos de ozonização em todos os ensaios foram de 5 (T1), 10 (T2), 15 (T3), 20 (T4) e 25 (T5) minutos, com três repetições. Cada tratamento foi repetido três vezes. As contagens bacterianas foram feitas imediatamente antes e após o processo de ozonização das amostras, em agar Baird Parker. Nos tratamentos 1 e 2, as maiores reduções foram de 0.42 log10 UFC/mL, enquanto nos tratamentos 3 e 4, foram de 0.19 e 0.21 log10 UFC/mL, respectivamente. Os resultados de todos os ensaios mostram que, em T1, não houve redução da carga microbiana, enquanto que a partir de T2, há uma crescente queda da microbiota, que é acentuada nos tempos T4 e T5. Tanto para leite desnatado quanto para o integral, nas concentrações de 34,7 e 44,8 mg L-1, a partir dos 20 minutos de ozonização, as reduções foram significativamente maiores. Os resultados do trabalho confirmam a eficácia do ozônio sobre o patógeno bacteriano Staphylococcus aureus inseridos em leite fluido e que os lipídios do leite exercem influência sobre tal eficiência bactericida. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / In order to evaluate the efficiency of the action of ozonation of milk on the reduction in bacterial counts of Staphylococcus aureus, an experiment was undertaken in which milk samples inoculated with the microorganism were subjected to ozonation with different binomials time / concentration of ozone. Thus, the samples were divided in four assays: 1 and 2, with skim milk, and concentrations of 34.7 mg L -1 and 44.8 mg L-1 of ozone, respectively, and assay 3 and 4, with whole milk (34.7 mg L -1 and 44.8 mg L- 1 of ozone, respectively). The time of ozonation in all assays were 5 (T1), 10 (T2), 15 (T3), 20 (T4) and 25 (T5) minutes. Each treatment was replicated three times. The bacterial counts were made immediately before and after the ozonation process, plating the samples on Baird Parker agar. In treatments 1 and 2, the greatest reductions were 0.42 log10 CFU / mL, while in treatments 3 and 4 were 0.19 and 0.21 log10 CFU / mL, respectively. The results of all the tests show that, on T1, there was no reduction in microbial load, whereas, on T2, there is a sharp decrease of the microbiota, which is remarkable in the times T4 and T5. In both skim and whole milk, at ozone concentrations of 34.7 and 44.8 mg L-1, after 20 minutes ozonation, the reductions were significantly greater. The findings confirm the effectiveness of ozone on the bacterial pathogen Staphylococcus aureus inoculated into fluid milk. In addition, the milk lipids have an influence on the ozonation’s effects.
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Qualidade do leite produzido e beneficiado no Distrito Federal (Brasil) quanto à adequação à instrução normativa nº 51/2002 / Quality of the milk produced and processed in Distrito Federal (Brazil) regarding its adequacy to normative instruction nº 51/2002

Silva, Patrícia Helena Caldeira da 22 February 2010 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2010. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-04-17T18:58:00Z No. of bitstreams: 1 2010_PatriciaHelenaCaldeiradaSilva.pdf: 1051696 bytes, checksum: 4e776a55f24e6c1874d72c6b0a5b2a8e (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-04-17T18:59:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_PatriciaHelenaCaldeiradaSilva.pdf: 1051696 bytes, checksum: 4e776a55f24e6c1874d72c6b0a5b2a8e (MD5) / Made available in DSpace on 2011-04-17T18:59:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_PatriciaHelenaCaldeiradaSilva.pdf: 1051696 bytes, checksum: 4e776a55f24e6c1874d72c6b0a5b2a8e (MD5) / A produção leiteira no Distrito Federal, Brasil, é uma atividade potencial para o crescimento da região e de importância significativa para a agricultura familiar. A produção e o beneficiamento do leite estão regulamentados por legislações que determinam os critérios de qualidade do produto. Essa pesquisa teve como objetivo avaliar os parâmetros físico-químicos e microbiológicos indicadas na Instrução Normativa n.º 51/2002 (MAPA), assim como pesquisar resíduos de antibióticos, cloretos e amido nos leites cru (LC) e pasteurizado (LP). Foram colhidos 19 lotes (n=5) de LP e 19 amostras de LC em laticínios do Distrito Federal que recebem matéria-prima da região e do entorno, para as análises acima citadas. Os resultados obtidos demonstram qualidade insatisfatória da matéria-prima sendo que as principais alterações físico-químicas observadas foram em relação ao Índice crioscópico (57,9%), a acidez (31,5%), a contagem de aeróbios mesófilos (63,2%) e presença de resíduos de antibióticos (11,1%), além da verificação de prática irregular de aquecimento da matéria-prima a temperaturas acima de 65ºC. Com relação aos LP, 42% dos lotes foram classificados como inaceitáveis e com contagens médias de 43 UFC/mL para coliformes totais e de 0.8 UFC/mL para Escherichia coli. As principais alterações físico-químicas observadas nos LP foram referentes à acidez (31,5%), ao índice crioscópico (21,0%) e ao tratamento térmico inadequado (18%). Ainda, constatou-se a inadequação ás normas vigentes, com relação á rotulagem, encontrando-se diversas marcas apresentando a classificação de "Leite tipo C", já não mais vigente no país. Os resultados obtidos nessa pesquisa demonstram que o leite produzido e beneficiado no Distrito Federal apresenta qualidade insatisfória resultante de práticas de produção e de beneficiamento inadequados, além da constatação de adulterações do produto, sendo necessária a adoção de medidas por parte de produtores, responsáveis técnicos e serviço de inspeção, no sentido de atender á legislação vigente e dessa forma, garantir a adequação do produto e garantir a saúde do consumidor. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Milk production in the Distrito Federal, Brazil, is a potential activity for the region's growth and of significant importance to the family farm. The production and processing of milk are regulated by laws that determine the criteria for product quality. This study aimed to evaluate the physico-chemical and microbiological parameters specified in Instruction No. 51/2002 (MAPA), as well as search for antibiotic residues, chloride and starch in raw milk (LC) and pasteurized (LP). We collected 19 lots (n = 5) LP and 19 samples of LC in the Federal District Dairy receiving raw material and the surrounding region, to the studies mentioned above. The results showed poor quality of raw material and the main physical and chemical changes were observed in relation to cryoscopic index (57.9%), acidosis (31.5%), the aerobic mesophilic count (63.2 %) and residues of antibiotics (11.1%), besides checking the irregular practice of heating the raw material to temperatures above 65A ° C. With respect to LP, 42% of the lots were classified as unacceptable and with average counts of 43 CFU / mL for total coliforms and 0.8 CFU / mL for Escherichia coli. The main physical and chemical changes observed in the LP were related to acidity (31.5%), the peak index crioscà ³ (21.0%) and inadequate heat treatment (18%). Still, it was found inadequate to current regulations, with respect to labeling, meeting various brands showing the classification of "milk type C", no longer existing in the country. The results obtained in this study demonstrate that milk produced and processed in the Federal District provides quality insatisfória result of production practices and inadequate processing, besides ascertaining the adulteration of the product, requiring the adoption of measures by producers, and technicians responsible inspection service in order to meet current legislation and will thus ensure the suitability of the product and ensure the health of the consumer.
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Avaliação da presença de substâncias químicas em leites cru e beneficiado produzidos e comercializados no Distrito Federal e Entorno

Amorim, Amanda Laryssa Borges do Carmo 22 February 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-05-30T16:43:23Z No. of bitstreams: 1 2017_AmandaLaryssaBorgesdoCarmoAmorim.pdf: 938397 bytes, checksum: e8d3e9b81705be4524be9b784aba4c1f (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-06-06T21:32:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_AmandaLaryssaBorgesdoCarmoAmorim.pdf: 938397 bytes, checksum: e8d3e9b81705be4524be9b784aba4c1f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-06T21:32:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_AmandaLaryssaBorgesdoCarmoAmorim.pdf: 938397 bytes, checksum: e8d3e9b81705be4524be9b784aba4c1f (MD5) Previous issue date: 2017-06-06 / Para que seja adequado ao consumo o leite deve ser produzido em boas condições de higiene e obtido de animais sadios, entretanto essa não é a realidade de produção em diversos países, inclusive o Brasil. A adição fraudulenta de substâncias químicas ao leite é realizada principalmente, com a intenção de mascarar má qualidade. A legislação determina várias análises para o controle de qualidade tanto da matéria-prima quanto do produto final, e considera o leite fraudado/adulterado impróprio para o consumo humano. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a qualidade do leite produzido e comercializado no Distrito Federal e Entorno, por meio de análises físico-químicas, enzimáticas e pesquisa de substâncias neutralizantes, reconstituintes, conservantes e resíduos antibióticos em leites cru (n=32), pasteurizado (n=38) e UAT (n=30). Em adição, todas as amostras foram submetidas à prova de lactofermentação. Os resultados demonstraram que 86% das amostras apresentaram alteração em pelo menos um dos parâmetros pesquisados. A adulteração mais frequente foi a adição de cloretos (16%), seguida de sacarose (6%), alcalinos (2%) e antibióticos (1%). Os parâmetros alterados em relação às análises físico-químicas foram densidade (54%), crioscopia (29%), teor de gordura (11%), teor de proteína (6%), Sólidos Não Gordurosos (6%), alizarol (6%), acidez Dornic (4%), teor de lactose (1%) e pesquisa de peroxidase (1%). 41% das amostras apresentaram inconformidades na prova de lactofermentação. Todas as amostras apresentaram resultado negativo para a pesquisa de resíduos de amido, formol, cloro, hipoclorito, neutralizantes da acidez, peróxido de hidrogênio ou álcool etílico. A alta frequência de amostras de leite em desacordo com os padrões vigentes demonstra falhas no controle de qualidade das indústrias da região e na fiscalização, comprometendo a saúde do consumidor. / To be suitable for consumption, milk must be produced in good hygienic conditions and obtained from healthy animals, but this is not the reality of production in several countries, including Brazil. The fraudulent addition of chemicals to milk is mainly done with the intention of masking poor quality. The legislation determines several analyzes for quality control of both the raw material and the final product, and considers fraudulent/adulterated milk unfit for human consumption. The objective of the present study was to evaluate the quality of the milk produced and commercialized in the Federal District and Surroundings, through physicochemical and enzymatic analyzes and research of neutralizing substances, reconstituents, preservatives and antibiotic residues in raw milks (n = 32), pasteurized (n = 38) and UHT (n = 30). In addition, all samples were submitted to lactofermentation test. The results showed that 86% of the samples presented alteration in at least one of the parameters studied. The most frequent adulteration was the addition of chlorides (16%), followed by sucrose (6%), alkaline (2%) and antibiotics (1%). The parameters altered in relation to the physicochemical analyzes were density (54%), cryoscopy (29%), fat content (11%), protein content (6%), Non-Fat Solids (6%), alizarol (6%), Dornic acidity (4%), lactose content (1%) and peroxidase research (1%). 41% of the samples presented nonconformities in the lactofermentation test. All the samples presented negative results for the search of residues of starch, formaldehyde, chlorine, hypochlorite, neutralizers of acidity, hydrogen peroxide or ethyl alcohol. The high frequency of milk samples in disagreement with the current standards shows failures in the quality control of the region's industries and in inspection, thus compromising consumer health.

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