Th. 3e cycle--Biochim. appl.--Lille 1, 1979. N°: 795. / Extr. en partie de Nature, 1979, 281, 452-455.

Made available in DSpace on 2018-08-01T22:56:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10843_Sayanne Luns Hatum de Almeida20170524-112004.pdf: 758565 bytes, checksum: 57393c4768503df0af55863dd91c885d (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / A Leucose Enzoótica Bovina (LEB) além de causar prejuízos econômicos acarreta em importantes alterações na imunidade. Isso, acabar por comprometer a resposta frente a outros agentes patogênicos, aumentando assim, a chance de desenvolvimento de outras doenças concomitantes, principalmente doenças infecciosas, entre elas a mastite. O objetivo do presente estudo foi avaliar se há associação entre a LEB e a mastite, além de determinar a prevalência da LEB e da mastite em vacas leiteiras na região do Caparaó, ao sul do Estado do Espírito Santo. Foram utilizadas 899 vacas mestiças, com aptidão leiteira em diferentes fases de lactação provenientes de propriedades localizadas nos 12 municípios que compõem a região do Caparaó Capixaba, no Sul do Espírito Santo. A detecção da mastite clínica foi realizada por meio da identificação dos sinais clínicos de inflamação na glândula mamária e pelo teste da caneca de fundo preto e a mastite subclínica foi diagnosticada pelo teste CMT (California Mastite Teste). O diagnóstico da LEB foi realizado por meio da técnica de imunodifusão em ágar gel (IDGA). Os resultados foram tabelados e demonstradas as prevalências por meio de análise descritiva. A análise estatística do coeficiente de correlação de Spearman foi realizado para verificar o grau de correlação entre presença de mastite, mastite clínica, presença de mastite subclínica e a LEB. As associações entre a variáveis dependentes (mastite, mastite clínica e mastite subclínica) e a variável independente (leucose) foram estimadas pela razão dos produtos cruzados- Odds Ratio (OR) e respectivos intervalos de 95% de confiança. O teste Qui-quadrado foi utilizado para verificar a significância das associações. A prevalência para LEB encontrada no Caparaó, foi de 56,51% (508/ 899). Das 70 propriedades, 94,29% apresentaram pelo menos um animal positivo para a enfermidade. Foi observado a presença de mastite clínica e subclínica em 5,78% (53/899) e 44,27% (398/899) dos animais avaliados, respectivamente. Foram encontradas 61,24% (253/ 418) de vacas com mastite e positivas para LEB. A mastite (=0,088; p=0,008) e a mastite subclínica (=0,091; p=0,006) apresentaram correlação significativa positiva com a leucose à nível de 0,01 de significância. Enquanto que a mastite clínica (=0,077; p=0,021) mostrou correlação positiva com a leucose. O valor Odds Ratio (OR) variou de 1,101 - 1,874, 1,099 - 3,745 e 1,109 - 1,893 para mastite, mastite clínica e mastite subclínica respectivamente. Ou seja, a infecção pelo vírus da Leucose Bovina (BLV) aumenta as chances do animal infectado adquirir mastite, mastite clínica ou subclínica. Observou-se com este trabalho que animais com LEB tem cerca de 2,03% mais chances de adquirirem mastite clínica, e 1,45% mais chances de adquirirem mastite subclínica. Diante dos dados obtidos é possível concluir que o BLV encontra-se amplamente disseminado nos rebanho leiteiros da região do Caparaó Capixaba e as prevalências de mastite encontram-se elevadas. Além disso, constatou-se que a LEB pode aumentar as chances do animal adquirir mastite, seja ela na sua forma clínica ou subclínica.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-18T15:38:40Z No. of bitstreams: 1 Claudio Henrique Clemente Fernandes.pdf: 1914599 bytes, checksum: da7b1a519963cc8ffa30d5c1998aa94f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-18T15:38:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Claudio Henrique Clemente Fernandes.pdf: 1914599 bytes, checksum: da7b1a519963cc8ffa30d5c1998aa94f (MD5) Previous issue date: 2007-02-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The bovine enzootic leucosis (BEL) is a contagious infect disease cosmopolitan, with immune depressor potential, characterized by chronic evolution and great injuries that cause to the national cattle- breeding. The general objective of the achievement of this study was to contribute to the Bovine Leukosis Virus (BLV), realizing immune serologic essay to find dimension of the infection (serum-prevalent) and establish a parameter for evaluation of the immune condition (levels of serum lysozyme) of milky cattle breeding raised in the north region of Tocantins state. It was colleted serum samples of 38 bovine herds, totalizing 881 samples submitted to the double radial immune diffusion test of Ouchterlony in agar gel. From this universe of samples, 400 samples were divided in 2 groups. According to the immune serologic result obtained. G1 200 BLV negative samples, G2 BLV positive samples. The samples were still submitted to a simple radial immunodiffusion of Mancini to define the serum concentration of lysozyme which obtained results were statistically analyzed by t- student test. The results demonstrated that the BEL is amply disseminated in bovine herds examined (94,7% - 36/38), with a prevalence of serum antibodies anti BLV of the studied population corresponding to 37% (328/821) this is the first register of the infection in Tocantins State. The serum levels of lysozyme found G1 8,94 /ml e G2 7,05 /ml, knowing that the average difference between the two groups was 1,92 /ml, so, more elevated in the BLV negative animals than in the BLV positive ones, this revealed how significant is that difference. It can signalize an immune depression state of the immunity system. The obtained results demonstrated the large dissemination of BEL, being the influence, of risk factors in connection with a reduction of levels of lysozyme in animals BLV positives, and suggest that immune serologic tests realized, make possible the validation of an important parameter of evaluation of immune state of BLV positive bovine contributing, this way, to elucidation of immune depressor paper of bovine leucosis virus. / A Leucose Enzoótica dos Bovinos (LEB) é uma doença infecto-contagiosa, cosmopolita, de potencial imunodepressor, caracterizada pela evolução crônica e pelos grandes prejuízos que determina a pecuária bovina nacional. O objetivo geral com a realização deste estudo foi contribuir para a elucidação do papel imunodepressor do Vírus da Leucose Bovina (VLB), realizando ensaios imunossorológicos para dimensionar a infecção (soroprevalência) e estabelecer um parâmetro de avaliação do estado imunitário (teores de lisozima sérica) de bovinos leiteiros criados na Região Norte do Estado do Tocantins. Foram colhidas amostras séricas de 38 rebanhos bovinos, totalizando 882 amostras submetidas ao teste de Imunodifusão Radial Dupla de Ouchterlony em gel de ágar. Desse universo amostral, 400 amostras foram divididas em dois grupos, em função do resultado imunossorológico obtido: G1 200 amostras VLB negativos e G2 200 amostras VLB positivos. As amostras foram submetidas, ainda, à Imunodifusão Radial Simples de Mancini para determinar a concentração sérica da lisozima, cujos resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelo teste t-Student. Os resultados demonstraram que a LEB encontra-se amplamente disseminada nos rebanhos examinados (94,7% - 36/38), com uma prevalência de anticorpos séricos anti-VLB da população estudada igual a 37,0% (326/881), sendo este o primeiro registro da infecção no Estado do Tocantins. Os níveis séricos de lisozima encontrados foram G1 8,94 g/ml e G2 7,05 g/ml, sendo que a diferença média entre os dois grupos foi de 1,92 g/ml, portanto, mais elevado nos animais VLB negativos do que nos VLB positivos, diferença esta que se revelou significante, sinalizando um estado imunitário de imunodepressão. Os resultados obtidos demonstraram a ampla disseminação da LEB, sob a influência de fatores de risco, em conexão com a redução dos teores de lisozima nos animais VLB positivos, e sugerem que os ensaios imunossorológicos realizados possibilitaram a validação de um importante parâmetro de avaliação do estado imunitário de bovinos VLB positivos, contribuindo, desta forma, para a elucidação do papel imunodepressor do Vírus da Leucose Bovina.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T12:48:58Z No. of bitstreams: 1 Gislaine Raquel dos Santos.pdf: 1237145 bytes, checksum: 1d84eb25ea90c4c2359acf5c66e01410 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T12:48:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gislaine Raquel dos Santos.pdf: 1237145 bytes, checksum: 1d84eb25ea90c4c2359acf5c66e01410 (MD5) Previous issue date: 2011-02-09 / The objective of this thesis was to conduct a epidemiological study about the Enzootic Bovine Leukosis virus infection in dairy cattle originating from farms in the micro region of Garanhuns, State of Pernambuco. Four hundred forty five blood samples were collected on 19 dairy herds distributed in 15 towns. Samples were submitted to the Agar Gel Immunodiffusion (AGID) technique to detect anti-VLB serum antibodies. To identify the risk factors associated with infection was performed an univariate statistical analysis for those variables of interest using the chi-square test and later was made a logistic regression analysis considering as dependent variable serology (reagent or no reagent). There was a prevalence of 20.7% (95% CI; 17.1 - 82.9). Prevalence of infection at the studied properties ranged from 0.1% to 77.9%. There was at least one infected animal in 63.2% of farms. After logistic regression analysis were observed as risk factors: intensive farming (OR 19.1, CI 6.9 - 52.6), performance of palpation (OR 2.1, CI 1.3 - 3.4); management of handlers (OR 2.8, CI 1.2 - 6.5) and as a protective factor fly control (OR 0.2, CI 0, 1 - 0.4), heat treatment of colostrum (OR 0.7, CI 0.5 - 0.9); replacement animal import (OR 0.5, CI 0.3 - 0.9). According to the results, BLV infection is widespread in the studied region and control management should be implemented to prevent the spread of the virus to other properties in the region and other states. / Objetivou-se realizar um estudo epidemiológico sobre a infecção pelo vírus da Leucose Enzoótica em bovinos leiteiros procedentes de propriedades rurais na Microrregião de Garanhuns, Estado de Pernambuco. Foram coletadas 449 amostras de sangue em 19 rebanhos leiteiros distribuídos em 15 municípios. As amostras foram submetidas à técnica de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) para detecção de anticorpos séricos contra o VLB. Para a identificação dos fatores de risco associados à infecção foi realizada uma análise estatística univariada para aquelas variáveis de interesse através do teste quiquadrado de Pearson e posteriormente realizou-se a regressão logística, considerando como variável dependente o exame sorológico (reagente ou não reagente). Observou-se uma prevalência de 20,7% (IC 95%; 17,1 - 82,9). A prevalência da infecção nas propriedades estudadas variou de 0,1 a 77,9%. Observou-se que 63,2% das propriedades possuíam ao menos um animal infectado. Na análise de regressão logística observou-se como fator de risco: sistema de criação intensivo (OR 19,1; IC 6,9 – 52,6); realização de exame de palpação (OR 2,1; IC 1,3 - 3,4); manejo dos tratadores (OR 2,8; IC 1,2 – 6,5) e como fator de proteção o controle de mosca (OR 0,2; IC 0,1-0,4); tratamento térmico do colostro (OR 0,7; IC 0,5 – 0,9); importação de animais para reposição (OR 0,5; IC 0,3 – 0,9). Diante os resultados obtidos constata-se que a infecção pelo VLB está distribuída na região estudada e que medidas de controle devem ser implementadas para impedir a propagação do vírus para as demais propriedades da região e outros estados brasileiros.

Doctorat en Sciences / info:eu-repo/semantics/nonPublished

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_clarissa_castro.pdf: 569054 bytes, checksum: b9876922c1664dec56ef9c9d4ff5cb3a (MD5) Previous issue date: 2011-03-31 / The enzootic bovine leukosis is an illness caused by the bovine leukosis virus (BLV) which provokes a persistent infection in cattle and is responsible for significant economical losses to the bovines, mainly dairy cattle. It is widely spread in Brazilian cattle and it can come up in three forms: asymptomatic infection, persistent lymphocytosis and lymphosarcoma. The animals that have antibodies against the BLV must be eliminated or separated from the rest of the cattle, because they are carriers and disseminators of the virus during all their lifetimes. The diagnosis of this disease is essential for control and eradication strategies based on the segregation of infected animals in order to avoid or attenuate the transmission of the virus, and consequently, minimize the economical losses caused by the disease. During the BLV infection antibodies are produced against the main viral proteins, gp 51, gp 30 (envelope glicoproteins) and p24 (capsid protein). The agar gel immunodiffusion (AGID) and the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) tests are the most used for diagnosis. In this report the immunoperoxidase technique (peroxidase linked assay - PLA) was evaluated in order to detect antibodies against the BLV. The results obtained in the PLA were compared with the AGID test and the specificity of the positive ones was confirmed by the Western blotting (WB) technique. Two hundred and one bovine serum samples of cattle coming from the city of Pelotas were tested: 59% (119) were positive in PLA and 26% (53) were positive in AGID. All the AGID positive samples were also PLA positive. From the 32,8% (66) of the conflicting serum results just eight were confirmed as positive in WB, indicating that the rest of the results were false-positive and showing that AGID failed in identifying 4% of the BLV positive animals. The PLA technique for the diagnosis of the BLV infection demonstrated to be very useful to use in control programs because it was more sensitive when compared to the AGID technique. However, the occurrence of false-positive results by the PLA makes its use unviable in eradication programs that involve the sacrifice of seropositive animals. / A leucose enzoótica dos bovinos (EBL) é uma enfermidade causada pelo vírus da leucose bovina (BLV), que ocasiona uma infecção persistente em bovinos, e é responsável por perdas econômicas significativas à pecuária, principalmente a leiteira. Amplamente disseminada no rebanho brasileiro, pode ser manifestada de três formas: aleucêmica, linfocitose persistente e linfossarcoma. Os animais com anticorpos contra o BLV deverão ser eliminados ou separados do restante do rebanho, pois significa que são portadores e disseminadores do vírus por toda a vida. O diagnóstico desta doença é essencial para estratégias de controle e erradicação baseadas na segregação de animais infectados no intuito de evitar ou amenizar a transmissão do vírus e, consequentemente, minimizar as perdas econômicas causadas pela doença. Durante a infecção pelo BLV são produzidos anticorpos contra as principais proteínas virais, gp51, gp30 (glicoproteínas do envelope) e p24 (proteína do capsídeo). O teste de imunodifusão em gel de ágar (agar gel immunodiffusion AGID) e o ensaio imunoenzimático (enzyme-linked immunosorbent assay ELISA) são os mais utilizados para diagnóstico. No presente trabalho foi avaliada a técnica de imunoperoxidase (peroxidase linked assay PLA) na detecção de anticorpos contra o BLV. Os resultados obtidos na PLA foram comparados com o teste de AGID e a especificidade dos positivos confirmada pela técnica de Western blotting (WB). Foram testadas 201 amostras de soro de bovinos provenientes de propriedades localizadas no município de Pelotas: 59% (119) foram positivos por PLA e 26% (53) positivos por AGID. Todas as amostras positivas na AGID foram também positivas na PLA. Dos 32,8% (66) dos soros com resultados conflitantes apenas oito foram confirmados como positivos no WB, indicando serem falso-positivos os demais resultados e constatando que a AGID falhou em identificar 4% de animais positivos para EBL. A técnica de PLA para diagnóstico de infecção pelo BLV se mostrou muito útil para uso em programas de controle devido à maior sensibilidade da técnica quando comparada com o teste de AGID. Contudo, a ocorrência de resultados falso-positivos pela PLA inviabiliza o seu uso em programas de erradicação que envolva o sacrifício do animal soropositivo.

Dentre as enfermidades que causam alterações hematológicas em bovinos podemos citar a leucose enzoótica bovina (LEB). Podendo em alguns animais, determinar formações tumorais por infiltração de células mononucleares (linfócitos, pró-linfócitos e linfócitos atípicos), em diferentes tecidos. A doença possui quadro sintomático pleomórfico e alterações hematológicas, evidenciadas por leucocitose e linfocitose persistente, com aumento de formas linfocitárias atípicas. Desta forma o presente estudo tem como objetivo avaliar a atipia linfocitária em bovinos da raça Holandesa Preto e Branco em animais soropositivos com ou sem a presença de linfocitose persistente e animais soronegativos para LEB e correlacioná-la com a apoptose de células CD5+ e a proliferação linfocitária. Assim, foram selecionados 56 animais, divididos de acordo com o leucograma e o sorodiagnóstico da LEB pela imunodifusão em ágar gel e pelo ensaio imunoenzimático em: negativos (n = 25), alinfocitóticos (AL, n= 12) e com linfocitose persistente (LP, n=19). Destes, 15 animais tiveram suas amostras sanguíneas avaliadas quanto a proliferação de linfócitos e apoptose. Os resultados deste estudo mostraram que, a contagem de leucócitos totais e os valores absolutos e relativos de linfócitos atípicos foram maiores no grupo LP. Em relação aos linfócitos atípicos, os linfócitos sombra de Gümprecht, linfócito monocitóide e linfócito com núcleo duplo, foram encontrados nos três grupos de estudo, porém mais comumente em animais infectados pelo VLEB, predominantemente no grupo manifestando linfocitose persistente. Este trabalho demonstrou uma menor proliferação de linfócitos nos animais infectados pelo VLEB manifestando LP, associado a uma menor apoptose de células CD5+. Na análise da correlação entre a apoptose de células CD5+ e a porcentagem das populações linfocitárias entre os 15 animais, observou-se que a apoptose tem uma correlação positiva com os linfócitos com núcleo duplo, o que não ocorreu nas demais populações celulares. Na correlação entre a proliferação, foi observado nos 15 animais, que quanto maior a porcentagem de linfócitos menor é a proliferação e quanto maior a porcentagem de linfócitos monocitóides menor a proliferação, o que não ocorreu nas demais populações celulares. Portanto, a manifestação da LP em animais naturalmente infectados pelo VLEB, pode ser associada ao aumento de linfócitos atípicos do tipo sombra de Gümprecht, linfócito monocitóide e linfócito núcleo duplo e da menor apoptose das células CD5 + e da menor proliferação de linfócitos / Among the diseases that cause hematological changes in cattle can cite the enzootic bovine leukemia (EBL). And in some animals, to determine tumor formations by infiltration of mononuclear cells (lymphocytes, pro-lymphocytes and atypical lymphocytes) in different tissues. The disease has symptoms very pleomorphic and hematological changes, evidenced by leukocytosis, and persistent lymphocytosis, an increase of atypical lymphocyte forms. Thus this study aims to evaluate the atypical lymphocyte in Holstein Black and White in seropositive animals with or without the presence of persistent lymphocytosis and animals seronegative LEB and correlate them with apoptosis of cells CD5 + and lymphocyte proliferation. Thus, we selected 56 animals, divided according to the WBC and serodiagnosis of LEB by agar gel immunodiffusion and by enzyme immunoassay in: negative (n = 25), non- lymphocytic (AL, n = 12) and with persistent lymphocytosis (PL, n = 19). Of these, 15 animals had their blood samples evaluated for lymphocyte proliferation and apoptosis. The results of this study showed that in total leukocytes and absolute and relative values of atypical lymphocytes were higher in group LP. Regarding atypical lymphocytes, lymphocytes Gumprecht shadow, lymphocyte and monocytoid lymphocytes with dual core, were found in the three study groups, but more commonly in animals infected VLEB, predominantly in the group with persistent lymphocytosis. This study demonstrated a reduced proliferation of lymphocytes in animals infected VLEB expressing LP, associated with lower apoptosis of CD5 + cells. In analyzing the correlation between apoptosis of cells and the percentage of CD5 + lymphocyte populations among the 15 animals, we observed that apoptosis has a positive correlation with lymphocytes with dual core, which did not occur in other cell populations. Correlation between proliferation, was observed in 15 animals, the higher the percentage of lymphocyte proliferation and lower the higher the percentage of monocytoid lymphocytes less proliferation, which did not occur in other cell populations. Therefore, the expression of LP in animals naturally infected VLEB may be associated with increased atypical lymphocytes of the type of shadow Gumprecht, lymphocyte and lymphocyte monocytoid dual-core and reduced apoptosis of CD5 + cells and reduced lymphocyte proliferation

A Leucose Enzoótica Bovina é uma doença crônica de ocorrência mundial que acomete bovinos. Seu agente etiológico é um retrovírus do mesmo grupo dos que causam a leucemia linfocítica crônica e a AIDS, importantes doenças que acometem humanos. Os retrovírus são vírus que se integram ao DNA do hospedeiro e desta forma são potencialmente mutagênicos. Os bovinos infectados podem desenvolver uma linfocitose persistente e/ou linfoma. A gênese das neoplasias está nas mutações de classes de genes como os proto-oncogenes, genes supressores de tumor, genes de reparo do DNA e genes que controlam a apoptose. O gene p53 acumula algumas funções como de parada do ciclo celular, estimulo ao reparo do DNA ou indução da célula a apoptose. O gene bcl-2 é conhecidamente um gene que regula a apoptose. A interferência no processo de apoptose através de mutações provocadas pelos retrovírus nos genes p53 e bcl-2 é um dos mecanismos carcinogênicos associados a LEB. As mutações no gene p53 acabam promovendo o aumento de sua meia vida e em bcl-2 o aumento em sua expressão. Devido a essas alterações o aumento na expressão do gene bcl-2 e o aumento da meia vida da p53 podem ser avaliadas pela técnica de imunoistoquímica. O presente trabalho avaliou as proteínas p53 e bcl-2 em amostras de bovinos infectados pelo VLB através da técnica de imunoistoquímica. Foram pré-definidos escores de imunomarcação em amostras de animais não infectados. Os escores apresentados pelos animais infectados pelo VLB foram significativamente maiores que os animais do grupo controle. Os valores percentuais de imunomarcação apresentados para bcl-2 foram de 50,26 ± 12,25 do grupo afetado contra 10,86 ± 3,30 do grupo controle. Para p53 somente o grupo afetado apresentou imunomarcação, ficando em zero a imunomarcação do grupo controle. O valor percentual médio do grupo afetado foi de 55,95 ± 7,07. A diferença significativa entre os percentuais dos grupos controle e afetado confirma que os genes p53 e bcl-2 podem estar envolvidos no processo de linfomagênese da LEB. / The Enzootic Bovine Leukosis (EBL) is a chronic disease with mundial occurrence in bovines. Its etiologic agent is a retrovirus of the same group that promotes the chronic lymphocytic leukemia and HIV, that wich are important diseases in humans. The retrovirus integrates into the host DNA and thus they are potential mutagenic. The infected bovines can develop a persistent lymphocytosis and/or lymphoma. The neoplasm genesis is associated with genes mutation like the protooncogenes, tumor suppressor, DNA repair and apoptosis control. The p53 gene has some functions how cell cycle arrest, DNA repair stimulus or apoptosis induced. The interference in the apoptosis process through mutations stimulates about the retrovirus in the p53 and bcl-2 genes are the carcinogenic mechanisms associated to EBL. The mutations in the p53 gene promote the increase in its half life and increase of bcl-2 expression. Due this alterations the increase of bcl-2 gene expression and p53 half-life can be evaluate by immunohistochemistry. This work evaluated the bcl-2 and p53 proteins in EBL infected bovines tissue samples by immunohistochemistry. We determined scores of immunomarked in non-infected animal\'s samples. The scores showed by the EBL infected animals were significantly higher than in control group. The infected bovines showed 50.26 ± 12.25% of positive cells to bcl-2 while the control group showed 10.86 ± 3.3%. Only the infected animals presented reactivity against p53, whereas the control group no showed reaction. These results confirm that the p53 and bcl-2 genes can be involved in a process of EBL leukemogenesis.

Dentre as enfermidades que causam alterações hematológicas em bovinos podemos citar a leucose enzoótica bovina (LEB). Podendo em alguns animais, determinar formações tumorais por infiltração de células mononucleares (linfócitos, pró-linfócitos e linfócitos atípicos), em diferentes tecidos. A doença possui quadro sintomático pleomórfico e alterações hematológicas, evidenciadas por leucocitose e linfocitose persistente, com aumento de formas linfocitárias atípicas. Desta forma o presente estudo tem como objetivo avaliar a atipia linfocitária em bovinos da raça Holandesa Preto e Branco em animais soropositivos com ou sem a presença de linfocitose persistente e animais soronegativos para LEB e correlacioná-la com a apoptose de células CD5+ e a proliferação linfocitária. Assim, foram selecionados 56 animais, divididos de acordo com o leucograma e o sorodiagnóstico da LEB pela imunodifusão em ágar gel e pelo ensaio imunoenzimático em: negativos (n = 25), alinfocitóticos (AL, n= 12) e com linfocitose persistente (LP, n=19). Destes, 15 animais tiveram suas amostras sanguíneas avaliadas quanto a proliferação de linfócitos e apoptose. Os resultados deste estudo mostraram que, a contagem de leucócitos totais e os valores absolutos e relativos de linfócitos atípicos foram maiores no grupo LP. Em relação aos linfócitos atípicos, os linfócitos sombra de Gümprecht, linfócito monocitóide e linfócito com núcleo duplo, foram encontrados nos três grupos de estudo, porém mais comumente em animais infectados pelo VLEB, predominantemente no grupo manifestando linfocitose persistente. Este trabalho demonstrou uma menor proliferação de linfócitos nos animais infectados pelo VLEB manifestando LP, associado a uma menor apoptose de células CD5+. Na análise da correlação entre a apoptose de células CD5+ e a porcentagem das populações linfocitárias entre os 15 animais, observou-se que a apoptose tem uma correlação positiva com os linfócitos com núcleo duplo, o que não ocorreu nas demais populações celulares. Na correlação entre a proliferação, foi observado nos 15 animais, que quanto maior a porcentagem de linfócitos menor é a proliferação e quanto maior a porcentagem de linfócitos monocitóides menor a proliferação, o que não ocorreu nas demais populações celulares. Portanto, a manifestação da LP em animais naturalmente infectados pelo VLEB, pode ser associada ao aumento de linfócitos atípicos do tipo sombra de Gümprecht, linfócito monocitóide e linfócito núcleo duplo e da menor apoptose das células CD5 + e da menor proliferação de linfócitos / Among the diseases that cause hematological changes in cattle can cite the enzootic bovine leukemia (EBL). And in some animals, to determine tumor formations by infiltration of mononuclear cells (lymphocytes, pro-lymphocytes and atypical lymphocytes) in different tissues. The disease has symptoms very pleomorphic and hematological changes, evidenced by leukocytosis, and persistent lymphocytosis, an increase of atypical lymphocyte forms. Thus this study aims to evaluate the atypical lymphocyte in Holstein Black and White in seropositive animals with or without the presence of persistent lymphocytosis and animals seronegative LEB and correlate them with apoptosis of cells CD5 + and lymphocyte proliferation. Thus, we selected 56 animals, divided according to the WBC and serodiagnosis of LEB by agar gel immunodiffusion and by enzyme immunoassay in: negative (n = 25), non- lymphocytic (AL, n = 12) and with persistent lymphocytosis (PL, n = 19). Of these, 15 animals had their blood samples evaluated for lymphocyte proliferation and apoptosis. The results of this study showed that in total leukocytes and absolute and relative values of atypical lymphocytes were higher in group LP. Regarding atypical lymphocytes, lymphocytes Gumprecht shadow, lymphocyte and monocytoid lymphocytes with dual core, were found in the three study groups, but more commonly in animals infected VLEB, predominantly in the group with persistent lymphocytosis. This study demonstrated a reduced proliferation of lymphocytes in animals infected VLEB expressing LP, associated with lower apoptosis of CD5 + cells. In analyzing the correlation between apoptosis of cells and the percentage of CD5 + lymphocyte populations among the 15 animals, we observed that apoptosis has a positive correlation with lymphocytes with dual core, which did not occur in other cell populations. Correlation between proliferation, was observed in 15 animals, the higher the percentage of lymphocyte proliferation and lower the higher the percentage of monocytoid lymphocytes less proliferation, which did not occur in other cell populations. Therefore, the expression of LP in animals naturally infected VLEB may be associated with increased atypical lymphocytes of the type of shadow Gumprecht, lymphocyte and lymphocyte monocytoid dual-core and reduced apoptosis of CD5 + cells and reduced lymphocyte proliferation

A Leucose Enzoótica Bovina é uma doença crônica de ocorrência mundial que acomete bovinos. Seu agente etiológico é um retrovírus do mesmo grupo dos que causam a leucemia linfocítica crônica e a AIDS, importantes doenças que acometem humanos. Os retrovírus são vírus que se integram ao DNA do hospedeiro e desta forma são potencialmente mutagênicos. Os bovinos infectados podem desenvolver uma linfocitose persistente e/ou linfoma. A gênese das neoplasias está nas mutações de classes de genes como os proto-oncogenes, genes supressores de tumor, genes de reparo do DNA e genes que controlam a apoptose. O gene p53 acumula algumas funções como de parada do ciclo celular, estimulo ao reparo do DNA ou indução da célula a apoptose. O gene bcl-2 é conhecidamente um gene que regula a apoptose. A interferência no processo de apoptose através de mutações provocadas pelos retrovírus nos genes p53 e bcl-2 é um dos mecanismos carcinogênicos associados a LEB. As mutações no gene p53 acabam promovendo o aumento de sua meia vida e em bcl-2 o aumento em sua expressão. Devido a essas alterações o aumento na expressão do gene bcl-2 e o aumento da meia vida da p53 podem ser avaliadas pela técnica de imunoistoquímica. O presente trabalho avaliou as proteínas p53 e bcl-2 em amostras de bovinos infectados pelo VLB através da técnica de imunoistoquímica. Foram pré-definidos escores de imunomarcação em amostras de animais não infectados. Os escores apresentados pelos animais infectados pelo VLB foram significativamente maiores que os animais do grupo controle. Os valores percentuais de imunomarcação apresentados para bcl-2 foram de 50,26 ± 12,25 do grupo afetado contra 10,86 ± 3,30 do grupo controle. Para p53 somente o grupo afetado apresentou imunomarcação, ficando em zero a imunomarcação do grupo controle. O valor percentual médio do grupo afetado foi de 55,95 ± 7,07. A diferença significativa entre os percentuais dos grupos controle e afetado confirma que os genes p53 e bcl-2 podem estar envolvidos no processo de linfomagênese da LEB. / The Enzootic Bovine Leukosis (EBL) is a chronic disease with mundial occurrence in bovines. Its etiologic agent is a retrovirus of the same group that promotes the chronic lymphocytic leukemia and HIV, that wich are important diseases in humans. The retrovirus integrates into the host DNA and thus they are potential mutagenic. The infected bovines can develop a persistent lymphocytosis and/or lymphoma. The neoplasm genesis is associated with genes mutation like the protooncogenes, tumor suppressor, DNA repair and apoptosis control. The p53 gene has some functions how cell cycle arrest, DNA repair stimulus or apoptosis induced. The interference in the apoptosis process through mutations stimulates about the retrovirus in the p53 and bcl-2 genes are the carcinogenic mechanisms associated to EBL. The mutations in the p53 gene promote the increase in its half life and increase of bcl-2 expression. Due this alterations the increase of bcl-2 gene expression and p53 half-life can be evaluate by immunohistochemistry. This work evaluated the bcl-2 and p53 proteins in EBL infected bovines tissue samples by immunohistochemistry. We determined scores of immunomarked in non-infected animal\'s samples. The scores showed by the EBL infected animals were significantly higher than in control group. The infected bovines showed 50.26 ± 12.25% of positive cells to bcl-2 while the control group showed 10.86 ± 3.3%. Only the infected animals presented reactivity against p53, whereas the control group no showed reaction. These results confirm that the p53 and bcl-2 genes can be involved in a process of EBL leukemogenesis.