Orientador: Claudio Chrysostomo Werneck / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-21T14:55:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Braga_GuilhermeGambogi_M.pdf: 40426167 bytes, checksum: 2843f77911936a8afd4b180bb9db3b50 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Fibrilina-1 é um importante componente da rede de microfibrilas da matriz extracelular. As microfibrilas estão presentes nas fibras elásticas que são responsáveis pela elasticidade e resistência de tecidos dos pulmões, pele e grandes vasos. Mutações no gene da Fibrilina-1 estão associadas com a síndrome de Marfan. Pacientes com esta síndrome apresentam muitas manifestações clínicas nos pulmões, sistema cardiovascular e olhos. Modelos de síndrome de Marfan tem sido criados no sentido de obter informações sobre o desenvolvimento desta doença. Estudos recentes em modelos de camundongos tem sugerido a importância da atividade exacerbada do TGF ? promovendo a quase totalidade das alterações fenotípicas encontradas nestes camundongos, o que pode ser revertido pelo tratamento com o Losartan. O principal objetivo deste projeto foi avaliar a formação de fibras elásticas em cultura de células obtidas de animais deficientes em fibrilina-1, bem como o possível efeito do tratamento destas células com losartan. Os fibroblastos derivados de animais deficientes em fibrilina- 1 foram estudados usando imunofluorescência, western blotting, microscopia eletrônica de varredura e transmissão e real-time PCR. Assim, a deficiência em fibrilina-1 ocasionou uma redução conjunta da deposição de fibrilina-2, MAGP-1 e tropoelastina na matriz extracelular em cultura de fibroblastos de derme. Foi possível verificar aumento no níveis de expressão das metaloproteinases MMP-2 e MMP-9. O tratamento dos fibroblastos derivados de animais deficientes em fibrilina-1 com o fármaco losartan levou a recuperação parcial da deposição das proteínas Fibrilina-2, MAGP-1 e tropoelastina na matriz extracelular de cultura in vitro. Porém, o tratamento dos fibroblastos derivados de animais deficientes em fibrilina-1 com fármaco Captopril e os peptídeos de Angiotensina I e II não influenciaram na deposição das mesmas na matriz extracelular de cultura in vitro / Abstract: Fibrillin-1 is an important microfibril network component. Microfibrils are present in elastic fiber responsible for resilience and elastic properties from structures like lungs, skin and large vessels. Mutations in Fibrillin-1 gene are associated with Marfan's Syndrome. Marfan's Syndrome patients shown many different clinical manifestations in lungs, cardiovascular system and eyes tissues. Marfan's models have been created to get better insights about this disease development. Recent studies from mice models have suggested an important role to unbalanced TGF ? activity promoting almost whole alterations found in those mice which might be rescued by losartan treatment. Our main goal were evaluate elastic fiber formation in cell culture obtained from fibrillin-1 defficient mice as well as losartan's treatment effect on those cells. The fibroblasts derived from deficient animals in fibrillin-1 were studied using immunofluorescence, western blotting, scanning electron microscopy and transmission and real-time PCR. Thus, the deficiency in fibrillin-1 led to a joint reduction of the deposition of fibrillin-2, MAGP-1 and tropoelastin in the extracellular matrix in culture of fibroblasts in the dermis. It was possible to observe an increase in levels of expression of metalloproteinases MMP-2 and MMP-9 were found. The treatment of the fibroblasts derived from deficient animals in fibrillin-1 with the drug losartan has led to the partial recovery of the deposition of protein fibrillin-2, MAGP-1 and tropoelastin in the extracellular matrix of culture in vitro. However, the treatment of fibroblasts derived from deficient animals in fibrillin-1 with drug Captopril and the peptides of Angiotensin I and II not influenced in the deposition of the same in the extracellular matrix of culture in vitro / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

The Angiotensin II Type 1 (AT1) receptor is the main receptor responsible for the effects of the renin-angiotensin system, and its expression pattern is altered in several diseases. [11C]Methyl-Losartan has been developed based on the clinically used AT1 receptor antagonist Losartan. The aim of this work is to characterize the pharmacokinetics, repeatability and reliability of measurements, binding specificity and selectivity of [11C]Methyl-Losartan in rats using in vivo small animal positron emission tomography (PET) imaging, ex vivo biodistribution and in vitro autoradiography methods. Also, we aim to measure the presence of metabolites in the kidney and plasma using high-performance liquid chromatography. We have demonstrated in vivo that [11C]Methyl-Losartan is taken up in the AT1 receptor-rich kidneys and that it is displaceable by selective AT1 receptor antagonists. Using ex vivo biodistribution, we have confirmed these results and demonstrated that [11C]Methyl-Losartan binds selectively to the AT1 receptor over the AT2, Mas and β-adrenergic receptors. In vitro autoradiography results confirmed these renal binding selectivity studies. [11C]Methyl-Losartan was also shown to have one and two C-11 labeled metabolites in the plasma and kidneys, respectively. In conclusion, [11C]Methyl-Losartan is a promising agent for studying the AT1 receptor in rat models with normal and altered AT1 receptor expression using small animal PET imaging.

Orientador: Ney Carter do Carmo Borges / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T16:31:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moreira_RobertoFernandes_M.pdf: 9049271 bytes, checksum: da0d5e2ef677c3ea82ea931de845e3f8 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O presente trabalho avaliou o perfil farmacocinético de dois medicamentos anti-hipertensivos, contendo associação de losartana 100 mg + hidroclorotiazida 25 mg na forma farmacêutica de comprimidos revestidos. Foi utilizado um método bioanalítico, apropriado e validado, de determinação simultânea de ambos fármacos para avaliação da biodisponibilidade relativa, de acordo com os critérios de bioequivalência. O estudo foi aberto, randomizado, cruzado, com dois tratamentos, duas seqüências e dois períodos. Os voluntários receberam, em cada período, a formulação teste ou a formulação referência. Vinte e oito voluntários adultos, sadios, de ambos os sexos foram incluídos. Amostras de sangue venoso foram coletadas em tempos pré-determinados. O plasma foi obtido por centrifugação a 3000 rpm por 10 min, e armazenado a -20 °C até a determinação das concentrações de losartana e hidroclorotiazida. O método bioanalítico utilizou a extração líquido-líquido, seguido pela Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada a Espectrometria de Massa (HPLC-MS-MS). Com base no intervalo de confiança de 90% dos índices individuais para Cmax e ASC0-t, estabelecidos pela ANVISA e FDA, concluiu-se que a formulação teste é bioequivalente a formulação referência Hyzaar® para extensão e taxa de absorção de losartana e hidroclorotiazida / Abstract: This study evaluated the pharmacokinetic profile of two antihypertensive drugs containing a combination of 100mg losartan plus 25mg hydrochlorothiazide formulated in coated tablets. Appropriate and validated bioanalytical methods for simultaneous determination of both drugs were used to evaluate the relative bioavailability, based on the bioequivalence criteria. This was an open-label, randomized, crossover, two treatments, two sequences, two periods trial. The volunteers received in each period, either the test or the reference formulation. Twenty-eight healthy adults volunteers, of both sexes were enrolled. Venous blood samples were collected at predeterminated times. The plasma was obtained by centrifugation at 3000 rpm for 10 min and stored at -20° C until the determination of concentrations of losartan and hydrochlorothiazide. The bioanalytical method used the liquid-liquid extraction, followed by High Performance Liquid Chromatography with tandem mass spectrometry (HPLC-MS-MS). Based on the confidence interval of 90% of the individual indexes for Cmax and AUC0-t, established by ANVISA and FDA, it was concluded that the test formulation is bioequivalent to the reference formulation Hyzaar® for the extent and rate of absorption of losartan and hydrochlorothiazide / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Losartan is a selective antagonist of the angiotensin II type 1 receptor (AT1R). Several reports have highlighted the AT1R expression in several cancers enhancing tumor development and cancer progression. The aim of this thesis is the synthesis and evaluation of [18F]fluoroethyl-losartan ([18F]FEtLos) and [18F]ammoniomethyltrifluoroborate-losartan ([18F]AMBF3Los) as two novel losartan analogs to image AT1R-positive tumors using the positron emission tomography (PET). Initially, the cold compounds FEtLos and AMBF3Los were synthetized by alkylation and click chemistry reactions respectively, and characterized by spectroscopic techniques. Then, radiosynthesis of 2-[18F]fluoroethyl-tosylate was optimized from a radiation safety point of view. Next, [18F]FEtLos was manually synthetized by [18F]fluoroethylation of losartan with low molar activity and greater than 99% radiochemical purity. [18F]AMBF3Los was easily synthetized with greater than 97% radiochemical purity by one step 18F-19F isotopic exchange approach using low and high activities of [18F]fluoride that afforded molar activities ranging from 2 to 139 GBq/μmol. In vitro competition binding assays showed that FEtLos and AMBF3Los have low and high binding affinity to human AT1R, respectively. AT1R expression was confirmed in breast, ovarian and gastric derived-tumors implanted on Nude mice. In spite of the low affinity, [18F]FEtLos was specific for renal AT1R. However, [18F]FEtLos did not showed specificity for tumor AT1R binding. μPET imaging, autoradiography and ex vivo biodistribution studies showed the specificity of [18F]AMBF3Los for both kidney and tumor AT1R binding. However, [18F]AMBF3Los was not able to reach the tumor site once injected intravenously probably because of its rapid metabolism and very fast clearance. Nonetheless our results demonstrate that 18F-Angiotensin II Receptor Blockers (ARBs) derivatives could be suitable tracers to cancer imaging AT1R-expressing tumor microenvironment, however, radiolabeled ARBs that possess better pharmacokinetics profile may be required. / O losartan é um antagonista seletivo do receptor tipo 1 de angiotensina II (AT1R). Vários reportes têm destacado a expressão do AT1R em vários cânceres favorecendo o desenvolvimento tumoral e progressão do câncer. O objetivo desta tese é a síntese e avaliação do [18F]fluoroetil-losartan ([18F]FEtLos) e [18F]amoniometiltrifluoroborato-losartan ([18F]AMBF3Los) como dois novos análogos do losartan para imagem de tumores AT1R-positivos usando a tomografia por emissão de pósitrons (PET). Inicialmente, os compostos padrões FEtLos e AMBF3Los foram sintetizados por reações de alquilação e química click respetivamente, e caraterizados por técnicas espectroscópicas. A seguir, a radiosíntese do 2-[18F]fluoroetil-tosilato foi otimizada do ponto de vista de seguridade radiológica. O [18F]FEtLos foi depois sintetizado por alquilação do losartan utilizando o grupo prostético 2-[18F]fluoroetil-tosilato, com baixa atividade molar, e pureza radioquímica maior do 99%. [18F]AMBF3Los foi facilmente sintetizado com pureza radioquímica maior do 97% por troca isotópica 18F-19F usando baixas e altas atividades de [18F]fluoreto o que providenciou atividades molares entre 2 e 139 GBq/μmol. Ensaios de ligação por competição in vitro mostraram que FEtLos e AMBF3Los têm baixa e alta afinidade de ligação ao AT1R humano respetivamente. A expressão do AT1R foi confirmada em tumores de mama, ovário e gástrico, implantados em camundongos Nude. A pesar da baixa afinidade, o [18F]FEtLos foi específico pelo AT1R renal. Não entanto, [18F]FEtLos não mostrou especificidade pela ligação ao AT1R no tumor. A imagem μPET, autoradiografia, e os estudos de biodistribuição ex vivo mostraram a especificidade do [18F]AMBF3Los pela ligação ao AT1R nos rins e no tumor. O radiotraçador [18F]AMBF3Los não foi capaz de ligar no tumor quando injetado intravenosamente, provavelmente devido ao seu rápido metabolismo e rápida depuração sanguínea. Apesar disso, nossos dados demonstram que os derivados de Bloqueadores do Receptor de Angiotensina II (ARBs) radiomarcados com 18F podem ser potenciais radiofármacos para o imageamento do microambiente tumoral positivo para AT1R, no entanto o perfil farmacocinético dos ARBs radiomarcados ainda precisa ser melhorado.

Este trabalho teve como objetivo aplicar técnicas de análise térmica no estudo de compatibilidade fármaco-excipiente de losartano potássico (LST) - um antihipertensivo, da classe dos antagonistas dos receptores de angiotensina II, empregado no tratamento da hipertensão. Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Termogravimetria (TG), Difração de raios X em pó, Espectrometria de Absorção na Região do Infravermelho Médio e Microscopia Eletrônica de Varredura foram empregadas na caracterização de losartano potássico. Com a finalidade de avaliar possíveis interações existentes entre os componentes de cada mistura binária 1:1 losartano-excipiente, os excipientes e cada mistura foram avaliados por Difração de raios X em pó, TG, DSC e Espectroscopia Raman. Os excipientes estudados foram o amido, lactose monohidratada (LAC), estearato de magnésio (EM), hidroxipropilcelulose (HPC), croscarmelose sódica (CS), polivinilpirrolidona (PVP), talco, celulose microcristalina (CM), talco, hidroxietilcelulose (HEC), carboximetilcelulose (CMC) e povidona (PD). Os resultados de DSC e TG sugeriram que os excipientes HEC, LAC, CS, HPC, EM, PVP apresentam possíveis interações com LST que foi confirmado através do desaparecimento ou do deslocamento do evento de transição cristalina do fármaco. O estudo de compatibilidade empregando Difração de raios X em pó indicou que LST se manteve na forma polimórfica I mesmo na presença dos excipientes analisados, exceto quando mistura ao talco. As análises por Espectroscopia Raman evidenciaram incompatibilidade química com os excipientes EM, CMC, LAC e HEC. Foram preparados comprimidos contendo a forma I e II que apresentaram perfil de dissolução significativamente diferente. Além disso, pode-se demonstrar, com a construção de uma curva analítica, que o DSC é uma técnica útil também na quantificação polimórfica. / This study aimed to apply thermal analysis techniques in the study of drug-excipient compatibility losartano potassium (LST) - an antihypertensive, class of antagonists of angiotensin II, used to treat hypertension. Differential Scanning Calorimetry (DSC), thermogravimetry (TG), X-ray diffraction powder Absorption Spectrometry in the Infrared Region East and scanning electron microscopy were used to characterize the losartano potassium. For the purpose of evaluating possible interactions between the components of each binary mixture 1:1 losartano-carriers, excipients and each mixture were evaluated by X-ray diffraction powder, TG, DSC and Raman spectroscopy. The excipients were studied starch, lactose monohydrate (LAC), magnesium stearate (EM), hydroxypropylcellulose (HPC), croscarmellose sodium (CS), polyvinylpyrrolidone (PVP), talc, microcrystalline cellulose (MC), talc, hydroxyethylcellulose (HEC) , carboxymethylcellulose (CMC) and povidone (PD). The results of DSC and TG suggested that the excipients HEC, LAC, CS, HPC, EM, PVP show possible interactions with LST was confirmed by the disappearance of the event or shift transition of crystalline drug. The compatibility study using X-ray diffraction powder indicated that LST remained in the same polymorphic form I in the presence of excipients analyzed, except when mixed with the talc. The analysis by Raman spectroscopy showed chemical incompatibility with excipients EM, CMC, LAC e HEC. Tablets were prepared containing the form I and II which exhibited significantly different dissolution profile. Furthermore, it can be shown, with the construction of a calibration curve, the DSC is a useful technique for quantifying also polymorphic. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Orientador: Roberta Okamoto / Coorientador: Cristina Antoniali Silva / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Nicolas Homsi / Banca: Élio Hitoshi Shinohara / Banca: Luiz Guilherme Brentegani / Resumo: A hipertensão arterial sistêmica é uma condição clínica de etiologia multifatorial, com altos índices de complicações, como doenças cardiovasculares e renais, que tornam essa entidade um dos maiores problemas de saúde pública mundial. Sabe-se que esta patologia altera o padrão de regulação de cálcio induzindo a perda óssea. O objetivo deste estudo foi avaliar comparativamente o processo de reparo alveolar em ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e Wistar e o efeito do losartan, droga inibidora dos receptores AT1 da angiotensina II na dinâmica óssea. Um total de 60 ratos foram divididos em 4 grupos com 3 períodos de avaliação: A. Wistar; B. SHR; C. Wistar tratado com losartan (30 mg/kg/dia); D:SHR tratado. Submetidos a exodontia do incisivo superior direito com eutanásia no 7º, 14º e 28º dia de pós-operatório. A análise dos mecanismos biológicos envolvidos no processo de reparo alveolar foi obtida pela histomorfometria e imunoistoquímica por meio da expressão das proteínas OPG, RANKL, TRAP e PECAM envolvidos na dinâmica do metabolismo ósseo. Os resultados foram submetidos a teste não paramétricos de Kruskal Wallis, seguido de Mann Whitney para comparação das amostras nos diferentes períodos. O grupo SHR apresentou atraso na cronologia do reparo alveolar. O losartan influenciou processo de reparo em Wistar e SHR, acarretando maior formação óssea, assim como maior espessura do trabeculado. Além disso, pode-se constatar que as referidas proteínas marcadas participam ativamente da dinâmica óssea, sofrendo ação do medicamento anti-hipertensivo proposto. Assim, sugere-se que o sistema renina-angiotensina interfere no metabolismo ósseo por meio da ação da angiotensina II / Abstract: Hypertension is a multifactorial clinical condition, with high rates of complications, such as cardiovascular and renal disease, that make this organization one of the greatest public health problems worldwide. It is known that this disease alters the pattern of calcium regulation by inducing bone loss. The aim of this study was to comparatively evaluate the process of alveolar repair in spontaneously hypertensive rats (SHR) and Wistar and the effect of losartan (30 mg / kg / day), a drug inhibiting the angiotensin II AT1 receptors in bone dynamics. A total of 60 rats were divided into 4 groups with 3 evaluation periods: A. Wistar; B. SHR; C. Wistar treated; D: SHR treated. The rats underwent dental extraction of the upper right incisor, was proceeded euthanasia on the 7th, 14th and 28th day after surgery. The analysis of the biological mechanisms involved in alveolar repair was obtained by histomorphometry and immunohistochemistry through the expression of OPG protein, RANKL, TRAP and PECAM dynamics involved in bone metabolism. Results were submitted to nonparametric test of Kruskal Wallis followed by Mann Whitney test for comparison of samples in different periods. The SHR was late in the chronology of alveolar repair. Losartan influenced repair process in Wistar and SHR, resulting in increased bone formation, as well as greater trabecular thickness. Moreover, it can be seen that these tagged proteins actively participate in the dynamic bone, suffering the action of the antihypertensive drug proposed. Thus, it is suggested that losartan and the renin-angiotensin interfere with bone metabolism through the action of angiotensin II / Doutor

Orientador: Roberta Okamoto / Coorientador: Leonardo Perez Faverani / Banca: Francisley Ávila Souza / Banca: Carlos Ferreira dos Santos / Resumo: Introdução: A hipertensão está associada a doenças cardiovasculares, mas também com alterações na qualidade óssea. A hipertensão, portanto, pode ser um fator de risco para a osseointegração. Estudos pré-clínicos sugerem que o losartan, um bloqueador dos receptores da angiotensina II amplamente utilizado para tratar a hipertensão, tem um efeito benéfico na consolidação do enxerto. No entanto, o efeito da hipertensão e do losartan na osteointegração permanece desconhecido. Material e Métodos: Aqui utilizamos ratos ratas espontaneamente hipertensivos (SHR) e ratos Wistar albinus normotensos que receberam losartan (30 mg / kg, p.o.) ou não tratados. Após uma semana, mini-implantes de titânio foram inseridos na tíbia. Sessenta dias após a implantação, a estabilidade do implante foi avaliada pela medição de torque de remoção considerada o ponto final primário. A tomografia computadorizada micro e a análise histomorfométrica foram parâmetros secundários. Resultados: o Losartan aumentou o torque de remoção no grupo SHR hipertenso para os níveis dos controles Wistar. Enquanto os parâmetros corticais da osseointegração permaneceram inalterados, losartan aumentaram a formação do osso medular. A micro tomografia computorizada revelou maior volume ósseo por volume de tecido e espessura trabecular nos ratos SHR tratados com losartan. A análise histomorfométrica mostrou ainda que o losartan aumentou significativamente a espessura do osso recém-formado na área medular em ratos SHR hipertensos. O losartan não alterou significativamente os parâmetros de osseointegração em ratos normotensos. Conclusões: Os dados apresentados sugerem que o antagonista dos receptores da angiotensina II losartan aumenta os parâmetros medulares da osseointegração no modelo da tíbia de ratos espontaneamente hipertensos. / Abstract: Background: Hypertension is associated with cardiovascular diseases but also with alterations in bone quality. Hypertension therefore might be a risk factor for osseointegration. Preclinical studies suggest that losartan, an angiotensin II receptor blocker widely used to treat hypertension, has a beneficial effect in graft consolidation. However, the effect of hypertension and losartan on osseointegration remains unknown. Methods: Here we used spontaneously hypertensive rats (SHR) and normotensive Wistar albinus rats receiving losartan (30 mg/kg, p.o.) or left untreated. After one week, titanium miniscrews were inserted into the tibia. Sixty days after implantation, implant stability was evaluated by removal torque measurement considered the primary endpoint. Micro computed tomography and histomorphometric analysis were secondary endpoints. Results: Losartan increased the removal torque in the hypertensive SHR group to levels of the Wistar controls. While the cortical parameters of osseointegration remained unchanged, losartan increased medullary bone formation. Micro computed tomography revealed a higher bone volume per tissue volume and trabecular thickness in the SHR rats treated with losartan. Histomorphometric analysis further showed that losartan significantly increased the thickness of newly formed bone in medullary area in hypertensive SHR rats. Losartan did not significantly alter the parameters of osseointegration in normotensive rats. Conclusions: The data presente... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

L'hypertension est une maladie qui, avec le vieillissement de la population, touche de plus en plus de gens. L'hypertension artérielle est généralement bien contrôlée par l'administration d'antihypertenseurs tels que les antagonistes des récepteurs AT[indice inférieur 1] .Ceux-ci sont très utilisés en clinique, puisqu'ils sont généralement très efficaces et présentent moins d'effets secondaires que les autres classes. Mais il y a parfois des patients pour qui les antagonistes (comme le Cozaar ou le Diovan) des récepteurs AT[indice inférieur 1] se montrent inefficaces ou présentent une efficacité réduite. Ces patients nécessitent alors une médication alternative ou une combinaison de médicaments, ce qui augmente alors les effets indésirables. Lors de précédentes études, il a été démontré que le récepteur AT[indice inférieur 1] du furet avait une affinité réduite pour le Losartan et que c'est la différence dans la position 163 du récepteur (Ala chez l'homme, Thr chez le furet) qui en était responsable. Récemment l'occurrence d'un SNP A163T hAT[indice inférieur 1] a été répertorié chez l'humain et afin de déterminer l'importance physiologique de la mutation d'une alanine pour une thréonine en position 163 du récepteur humain AT[indice inférieur 1] , des essais de liaison et de production de second messager ont été effectués. Cela a permis de démontrer que le récepteur humain muté, tout comme le récepteur du furet, présente une affinité réduite pour le Losartan et son métabolite actif. Notre hypothèse de travail était donc qu'un échec ou une efficacité réduite d'un traitement anti-hypertenseur avec Losartan ou un autre antagoniste de l'AT[indice inférieur 1] pourrait être dû à un changement pharmacodynamique s'ils portent le SNP (A163T hAT[indice inférieur 1] ). Un protocole de recherche clinique a été élaboré afin de vérifier si des patients hypertendus n'ayant pas répondu à une monothérapie à l'aide d'un antihypertenseur de la classe des antagonistes des récepteurs AT[indice inférieur 1] présentent une mutation dans la séquence de leur récepteur AT[indice inférieur 1] . Une dizaine de patients caucasiens du CHUS correspondant à ce profil ont été sélectionnés. Des patients contrôles ont aussi été choisis au hasard. En tout, l'analyse de la séquence AT[indice inférieur 1] de 26 patients du Centre Hospitalier de l'Université de Sherbrooke et de 14 patients Afro-Américains de l'hôpital Sacré-Coeur a été effectuée. Malheureusement la mutation recherchée n'a été retrouvée chez aucun des sujets de l'étude. Nous n'avons donc pu confirmer ou refuter notre hypothèse.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karolinska institutet, 2002. / Härtill 5 uppsatser.

Thèse (M.Sc.) -- Université Laval, 1998. / Bibliogr. Publ. aussi en version électronique.