Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 701042 bytes, checksum: b85885438fd65389b8e2f78343e8a481 (MD5) Previous issue date: 2012-02-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Ex situ conservation strategies aim to assist in maintaining a genetically viable population through strategies of assisted reproduction and cryopreservation of genetic resources. We aimed to validate the combination of fluorescents probes and the egg-sperm binding assay using cryopreserved oocytes in the qualification of fresh and frozen-thawed ocelot semen. Were used three captive ocelots for semen collection by electroejaculation. The semen was evaluated by conventional tests routine. Through those tests (motility and sperm progressive motility, hypoosmotic sweling test and morphology) a decrease (p <0.05) of the quality standards of the frozen-thawed semen compared to fresh semen was observed. The combination of the probes propidium iodide, Hoechst 33342 and Pisum sativum Agglutinin lectin conjugated to fluorescent (FITC-PSA) allowed the identification of sperm subpopulations according to the specific location of cell damage and at the same time allowed a more accurate detection of the deleterious effect of semen cryopreservation in ocelots. The use of cryopreserved oocytes of domestic cats allowed the observation of a decreasing on the binding capacity (p <0.05) of frozen-thawed sperm compared to fresh ocelot spermatozoa, and there was a correlation between total binding in fresh semen with the quality standards in frozen-thawed semen. The combination of fluorescent probes used and the use of sperm-egg binding assay were more specific and reliable in detecting the decrease in ocelot s sperm quality after thawing. The ocelot sperm were also able to bind the perivitelline membrane, in both treatments. Although there is no difference in the amount of bound sperm in treatments (p>0.05), there was a positive correlation (r=0.91; p<0.05) between they. Correlation was also observed between bound sperm to periviteline membrane, in fresh and frozen=thawed semen, and bent tail spermatozoa in frozen-thawed semen (r=0.81; p<0.05 and r=-0.86; p<0.05, respectively). There was correlation (r=-0.71; p<0.05) between the proportion of tightly bent tail (major defect) and the bound sperm to periviteline membrane, both in frozen-thawed semen. Although ocelots spermatozoa have bound satisfactorily to periviteline membrane, the small number of sample could not demonstrate correlation with the sperm fertility. However, the device developed for the membrane allowed the upkeep of its stretch during processing and defined an evaluation area. Thus, futures studies, with a larger sample are needed for effective validation of this technique. / Estratégias de conservação ex situ objetivam auxiliar na manutenção de populações geneticamente viáveis, por meio de estratégias de reprodução assistida e criopreservação de materiais genéticos. Objetivou-se a validação do uso de combinação de sondas fluorescentes e do teste de ligação à zona pelúcida de ovócitos heterólogos criopreservados na qualificação de sêmen fresco e descongelados de jaguatiricas. Foram usadas três jaguatiricas mantidas em cativeiro, sendo obtidos ejaculados por meio de eletroejaculação e avaliados por testes clássicos de rotina. Através destes testes (vigor e motilidade espermáticos, hiposmótico e morfologia) observou-se queda (p<0,05) dos padrões qualitativos do sêmen descongelado em relação ao sêmen fresco. A associação das sondas Iodeto de Propídeo, Hoechst 33342 e Pisum Sativum Agglutinin conjugada com Lectina Fluorescente (FITC-PSA), permitiu a identificação de subpopulações espermáticas de acordo com a localização específica de lesões celulares e detectou de forma mais acurada o efeito deletério da criopreservação no sêmen. O uso de ovócitos criopreservados de gatas domésticas permitiu a observação da queda da capacidade ligante (p<0,05) dos espermatozoides descongelados em relação aos espermatozoides a fresco de jaguatiricas, havendo ainda correlação entre o total de ligantes nas amostras de espermatozoides a fresco com padrões qualitativos no sêmen após o descongelamento. A combinação de sondas fluorescentes utilizadas e o uso de ensaio de ligação a ovócitos heterólogos criopreservados de gatas domésticas foram mais específicos e confiáveis na detecção da queda na qualidade espermática de jaguatiricas após o descongelamento. Os espermatozóides de jaguatiricas também foram capazes de se ligar à membrana perivitelínica em ambos os tratamentos. Apesar de não observada diferença na quantidade de espermatozóides ligados nos tratamentos (p>0,05), houve correlação positiva (r= 0,91; p<0,05) entre eles. Foi observada ainda correlação negativa entre a taxa de espermatozoides ligados na membrana perivitelínica no sêmen a fresco e no descongelado com a população de espermatozóides com cauda dobrada no sêmen descongelado (r= -0,81; p<0,05 e r= -0,86; p<0,05, respectivamente) e correlação negativa (r= -0,71; p< 0,05) entre a população de espermatozóides com cauda fortemente dobrada (defeito maior) com a quantidade de espermatozóides ligados na membrana perivitelínica, ambos no sêmen descongelado. Apesar dos espermatozoides de jaguatirica terem se ligado de forma satisfatória à membrana perivitelínica, o reduzido número de amostras avaliadas não permitiu demonstrar correlação com a fertilidade do espermatozoide. No entanto, o mecanismo suporte desenvolvido para a membrana permitiu a manutenção do seu estiramento durante o processamento e a definição de uma área de avaliação. Sendo assim, estudos futuros, com uma maior amostragem, são necessários para a efetiva validação desta técnica.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 769007 bytes, checksum: 123ccd2617d8acc65ce78c0ab0679b66 (MD5) Previous issue date: 2012-05-09 / Several populations of wild carnivores are threatened with extinction, mainly due to fragmentation of habitats and low genetic variability of geographically isolated populations. Ex situ conservation strategies, like assisted reproduction and cryopreservation of gametes intended to assist the maintenance of viable populations. Cryopreservation process of male gametes, however, causes damages to cells, which are measured in order to evaluate methodologies and handling techniques to, therefore, increase the viability of reproduction with endangered species in captivity, using assisted reproduction. The study aimed to assess qualitatively the fresh and thawed semen of oncilla (Leopradus tigrinus) using a combination of fluorescent probes and tests of sperm binding to heterologous oocytes of domestic cats and the perivitelline layer of chicken egg. It was used a single individual of oncilla which was anesthetized by anesthesic of ketamine (10 mg / kg) and xylazine (1.2 mg / kg). The semen was collected by electroejaculation and evaluated to the physical aspects (color, appearance and volume) and were also carried out routine tests as follows: sperm motility, spermatic vigor, concentration of spermatozoa in the ejaculate, morphology and hypoosmotic test. Subsequently, the semen was cryopreserved in French straws at a concentration of 20 x 106 motile sperm / ml in TRIS medium based on citrate, 20% of egg yolk and final concentration of 6% glycerol and 0.5% Equex. To asses the integrity of the plasma and acrosomal membrane it was used a combination of three fluorescent probes, propidium iodide, Hoechst 33342 and agglutinin Pisium sativum isoticionato conjugated (FITC-PSA). For binding tests of sperm it was used oocytes of domestic cat and perivitelline layer of chicken eggs, semen was co-incubated at 0.5 x 106 mobile spermatozoa / ml in maintenance medium TCM 199 modified and incubated at 38 ° C at atmospheric pressure of 5% CO 2 for one hour. The ejaculates obtained presented satisfactory medial values for vigor and motility (4.33% and 80.0%, respectively), however, decreased this values in frozen-thawed semen (p <0.05). The fresh ejaculate was presented with values of sperm pathologies below in relation of values observed in other studies with fresh semen of oncilla (19%), the thawed semen increased values of defective cells (p <0.05), due exclusively to the increase in larger defects. The percentage of cells reactive to the hypoosmotic test was lower (p <0.05) in frozen-thawed semen compared to fresh semen (13.0% and 71.66%, respectively). The probes association of propidium iodide, Hoescht 33342 and FITC-PSA was effective to distinguish different subpopulations of sperm in one ejaculation, but there was a difficulty in identifying the staining by FITC-PSA in combination with H342. The population with the intact plasmatic and acrosomal layers decreased (p <0.05) in frozen-thawed semen compared to fresh semen and increased the population with damaged plasmatic layer and intact acrosome layer, which was inversely proportional to motility between these two treatments. For binding tests of oncilla sperm to heterologous oocyte and periviteline layer, both fresh and thawed semen showed adhesion to the substrates and decrease (p <0.05) in number of sperm adhered to the oocyte membrane of the thawed semen. The qualitative methods of sperm evaluation using fluorescent probes associations and binding assays of sperm with heterologous oocytes and perivitelline layers of chicken´s egg proved useful in the evaluation of fresh and thawed semen of oncilla. / Diversas populações de carnívoros silvestres encontram-se ameaçados de extinção, principalmente devido à descaracterização de habitats e a baixa variabilidade genética de populações geograficamente isoladas. Estratégias de conservação ex situ, dentre as quais se encontram a reprodução assistida e criopreservação de gametas visam auxiliar a manutenção de populações viáveis. O processo de criopreservação de gametas masculinos, porém, gera danos às células, os quais devem ser mensurados a fim de se avaliar metodologias e técnicas de manipulação e consequentemente aumentar a viabilidade de reprodução de espécies ameaçadas mantidas em cativeiro, a partir da utilização de reprodução assistida. O estudo teve por objetivo avaliar de forma qualitativa o ejaculado a fresco e descongelado de gato-do-mato-pequeno (Leopardus tigrinus) utilizando-se a combinação de sondas fluorescentes e testes de ligação de espermatozoides a ovócitos heterólogos de gatas domésticas e à membrana perivitelina do ovo de galinha. Foi utilizado um gato-do-mato-pequeno, que foi anestesiado por meio de protocolo anestésico de cloridrato de quetamina (10 mg/kg) e cloridrato de xilazina (1,2 mg/kg). O sêmen foi coletado pelo uso de eletroejaculação e foi avaliado quanto aos aspectos físicos (cor, aspecto e volume) e também foram realizados os testes de rotina a seguir: motilidade espermática, vigor espermático, concentração de espermatozoides no ejaculado, morfologia e teste hiposmótico. Posteriormente o sêmen foi criopreservado em palhetas francesas na concentração de 20 x 106 espermatozoides móveis/mL, em meio à base de TRIS citrato, 20% de gema de ovo e concentração final de 6% de glicerol e 0,5% de Equex. Para a avaliação da integridade das membranas plasmática e acrossomal foi usada a combinação de três sondas fluorescentes, iodeto de propídio (IP), Hoescht 33342 (H342) e a aglutinina Pisium sativum conjugada com isoticionato de fluoresceína (FITC-PSA). Para os testes de ligação de espermatozoides à zona pelúcida de ovócito de gata doméstica e à membrana perivitelina de ovos de galinha, o sêmen foi coincubado na concentração de 0,5 x 106 espermatozoides móveis/mL, em meio de manutenção TCM 199 modificado e mantido em estufa a 38ºC com pressão atmosférica de 5% de CO2 durante uma hora. Os ejaculados obtidos apresentaram valores médios satisfatórios para vigor e motilidade (4,33% e 80,0%, respectivamente), porém, diminuíram no sêmen descongelado (p<0,05). O ejaculado a fresco apresentou-se com valores de patologias espermáticas abaixo do observado em outros estudos com sêmen a fresco de gato-do-mato (19%), no sêmen descongelado houve aumento de espermatozoides defeituosos (p<0,05), devido exclusivamente ao aumento nos defeitos maiores. O percentual de células reativas ao teste hiposmótico foi menor (p<0,05) no sêmen descongelado em relação ao sêmen a fresco (13,0% e 71,66%, respectivamente). A associação das sondas IP, H342 e FITC-PSA mostrou-se eficaz para a distinção de diferentes subpopulações de espermatozoides em um mesmo ejaculado, porém houve dificuldade em se identificar a coloração pelo FITC-PSA em associação com o H342. Houve redução (p<0,05) da população com membrana plasmática e acrossomal íntegras no sêmen descongelado em relação ao sêmen a fresco e aumento na população com membrana plasmática lesionada e acrossomal íntegra, que foi inversamente proporcional à motilidade entre estes dois tratamentos. Em relação aos testes de ligação de espermatozoides a ovócitos heterólogos e a membranas perivitelina, tanto o sêmen a fresco quanto o descongelado de gato-do-mato-pequeno apresentaram adesão aos substratos testados e ocorreu redução (p<0,05) na quantidade de espermatozoides aderidos nos ovócitos e nas membranas no sêmen descongelado. As metodologias de avaliação qualitativa de associação de sondas fluorescentes e testes de ligação de espermatozoides a ovócitos e membrana perivitelina de ovo de galinha se mostraram úteis na avaliação de sêmen a fresco e descongelado de gato-do-mato-pequeno.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 524795 bytes, checksum: 0873b041c5809637498054f107922416 (MD5) Previous issue date: 2012-03-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study was carried out to evaluate the effect of the follicle diameter at the moment of the application of the oestradiol (E2), on the gestation rate of cows that received hormonal protocol of prostaglandin F2&#945;, followed by E2 for subsequent FTAI. Forty seven crossbred cows Bos taurus x indicus presenting luteal cyclical activity ovarian and in lactation were used. The cows were given two mL (150&#956;g) of the synthetic analogous of PGF2&#945; (D+chloprostenol) through intramuscular (i.m.). The diameter of the highest follicle present (dominant) was measured by ultrasonographic exam. After 24 hours, the cows were given a treatment with two mL (2mg) of oestradiol (oestradiol Benzoate) via i.m., and they were again evaluated through ultrasound examination for measuring and certifying the follicular dominance. Then, they were divided into two treatments: Treatment 1 (cows from which the diameter of the dominant follicle was lower than 13mm) and Treatment 2 (cows from which the diameter of the dominant follicle was with dominant follicle of diameter &#8804; 13mm). After 48h from application of E2, the cows were artificially inseminated. The gestation diagnosis was accomplished at 30 and 100 days after AI by ultrasound via transrectum. Differences (P<0,05) of 76% (19/25) and 45.5% (10/22) were observed in the gestation rates for the animals of the Treatments 1 and 2, respectively. At the 10th day after AI, the serum concentrations of progesterone were 1.34 ± 0.49 and 2.16 ± 1.17 for the Treatments 1 and 2 respectively, as showing differences between them (P<0.01). However, there was a low correlation (r = 0.45) between the serum progesterone concentration at ten days after AI and the gestation presence. It is concluded the follicular diameter at the moment of the E2 application to affect the fertility of the dairy cows, with diameter lower than 13mm presented better results than those &#8805;13mm. In addition, the follicles with diameter &#8805;13mm formed the corpus luteum that produce higher amount of progesterone after the artificial insemination, what did not affected the gestation rate. / Objetivou-se neste estudo, avaliar o efeito do diâmetro folicular no momento da aplicação do estradiol (E2), na taxa de gestação de vacas, que receberam protocolo hormonal de prostaglandina F2&#945;, seguida de E2 para posterior IATF. Foram utilizadas 47 vacas mestiças Bos taurus x indicus apresentando atividade ovariana luteal cíclica e em lactação. As vacas receberam dois mL (150&#956;g) de análogo sintético de PGF2&#945; (D+cloprostenol), via intramuscular (i.m.). Foi mensurado o diâmetro do maior folículo presente (dominante) por meio de exame ultrassonográfico. Após 24h, as vacas receberam um tratamento com dois mL (2mg) de estradiol (Benzoato de estradiol) via i.m., e foram novamente avaliadas por meio de exame com ultrassom para mensuração e certificação da dominância folicular, quando então foram divididas em dois tratamentos: Tratamento 1 (vacas com folículo dominante de diâmetro menor que 13mm) e Tratamento 2 (vacas com folículo dominante de diâmetro &#8805;13mm). Após 48h da aplicação do E2, as vacas foram inseminadas artificialmente. O diagnóstico de gestação foi realizado aos 30 e 100 dias após a IA por meio de ultrassonografia via transretal. Observou-se diferença (P<0,05) de 76% (19/25) e 45,5% (10/22) nas taxas de gestação para os animais dos Tratamentos 1 e 2, respectivamente. As concentrações séricas de progesterona no décimo dia pós IA foram 1,34 ± 0,49 e 2,16 ± 1,17, respectivamente, para os Tratamentos 1 e 2, mostrando diferença entre si (P<0,01). Entretanto, houve uma baixa correlação (r = 0,45) entre a concentração sérica de progesterona dez dias após a IA e presença de gestação. Conclui-se que o diâmetro folicular no momento da aplicação do E2 tem influência na fertilidade de vacas leiteiras, com diâmetro menor que 13mm apresentaram melhores resultados que os &#8805;13mm. Além disto, folículos com diâmetro &#8805;13mm formaram corpos lúteos que produzem maior quantidade de progesterona após a inseminação artificial, o que não influenciou na taxa de gestação.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 269793 bytes, checksum: 7ace1f379fb4f111e4dbe56c3e1179e0 (MD5) Previous issue date: 2006-12-18 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The objective of the present study was to evaluate the effect of the administration, of 500 mg rbST (recombinant bovine somatotropin) in the moment of estrous of recipient heifers and cows inovulation with fresh embryos and 250 and 500 mg rbST in recipient inovulated with defrosted embryos, in progesterone serum concentration (P4) on the day of the inovulation and at the pregnancy rate at day 30. Blood samples were collected in the day of the inovulation by puncture of the coccygeal vein or artery for assaying of the serum P4 concentration. 259 crossbred recipients, appraised as able for reproduction, were used and divided in two studies. In the first study 144 recipient heifers received fresh embryos, randomly sorted among the experiments. The control (T1) was composed by 77 recipients, and the treated (T2) 67 recipients that received 500mg rbST at the moment of estrous. In a second study, it was used 115 recipients that receive defrosted embryos subdivided in 3 treatments. 53 recipient heifers composed the control (T1), the treated 2 (T2) was composed by 22 recipients that received 250 mg of rbST and the treated 3 (T3) was composed by 40 recipients that received 500 mg of rbST. The pregnancy rate of the first study was 65.7% (44 pregnant recipients) among the animals of T2 and 32.5% (25 pregnant recipients) at T1, which demonstrates the positive effect (P<0.01) from the use of rbST on pregnancy rate. However, the average concentrations of serum P4 in the day of the inovulation was 2.54±0.19 mg/ml for the animals of T1 and 2.27±0.20 mg/ml for the T2, there was no difference (P>0.05). The pregnancy rate of the second study recipients was 45.3% (24 recipients) among the animals of the group T1, 50.0% (11 recipient) for T2 and 52.5% (21 recipient) for T3. The average concentrations of serum P4 in the day of the inovulation were: T1 (control) = 5.41±2.33 mg/ml, T2 (250 mg rbST) = 5.77±2.19 mg/ml and T3 (treated - 500 mg rbST) = 4.77 ± 1.78 mg/ml. The results of the second study demonstrate the absence of effect (P>0.05) on the rbST use over the pregnancy rate and the serum P4 concentration. We can conclude that the administration of 500 mg rbST in recipient inovulation that receive fresh embryo at the moment of the estrous was able to improve the pregnancy rate, but not the concentration of progesterone serum P4. However, when administered 250 or 500 mg rbST in recipient inovulated that receive defrosted embryos, we are able to conclude that there was no positive effect on the pregnancy rate and on the progesterone serum concentration. / O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da administração, no dia do estro, de 500 mg de rbST (somatotropina bovina recombinante) em receptoras inovuladas com embriões transferidos à fresco e de 250 e 500 mg de rbST em receptoras inovuladas com embriões descongelados, sobre a concentração sérica de progesterona (P4) no dia da inovulação e a taxa de gestação aos 30 dias. As amostras de sangue foram coletadas no dia das inovulações por punção da veia ou artéria coccígea para análise da concentração sérica de P4. Foram utilizadas 259 receptoras mestiças, avaliadas como aptas a reprodução e divididas em dois estudos. No primeiro estudo foram utilizadas 144 receptoras, inovuladas com embriões à fresco, distribuídas aleatoriamente entre os tratamentos. O controle (T1) foi constituído por 77 receptoras e o tratado (T2) por 67 receptoras que receberam a administração de 500 mg de rbST no momento do estro. Em um segundo estudo utilizou-se 115 receptoras inovuladas com embriões descongelados subdivididas em três tratamentos. O controle (T1) foi constituido por 53 receptoras, o tratado 2 (T2) por 22 receptoras submetidas a administração de 250 mg de rbST e o tratado 3 (T3) por 40 receptoras que receberam a administração de 500 mg de rbST. As fêmeas do primeiro estudo apresentaram taxas de gestações de 65,7% (44 receptoras gestantes) entre os animais do grupo T2 e 32,5% (25 receptoras gestantes) para os do grupo T1, o que demonstra o efeito positivo (P<0,01) do uso da rbST sobre a taxa de gestação. Entretanto, as concentrações médias de P4 sérica no dia da inovulação foram de 2,54±0,19 ng/mL para os animais do T1 e 2,27±0,20 ng/mL para os do T2, não sendo observada diferença (P>0,05). No segundo estudo as taxas de gestações encontradas foram de 45,3% (24 receptoras) para T1, 50% (11 receptoras) para T2 e 52,5% (21 receptoras) para T3. As concentrações médias de P4 sérica no dia da inovulação foram de T1 (controle) = 5,41±2,33 ng/mL, T2 (250 mg rbST) = 5,77±2,19 ng/mL e T3 (500 mg rbST) = 4,77±1,78 ng/mL. Os resultados obtidos neste segundo estudo demonstram a ausência de efeito (P>0,05) do uso da rbST sobre as taxas de gestações e as concentrações séricas de P4. Concluiu-se que a aplicação de 500 mg de rbST em receptoras inovuladas com embriões à fresco no momento do estro, foi capaz de melhorar a taxa de gestação, mas não a concentração sérica de progesterona. No entanto, ao serem administradas 250 ou 500 mg de rbST receptoras inovuladas com embriões descongelados conclui-se a ausência de efeito positivo nas taxas de gestações e nas concentrações séricas de progesterona.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 568384 bytes, checksum: 3f28da52ad1ef87aa0545fb76b3263ef (MD5) Previous issue date: 2010-04-07 / Aiming to study the effect of different estrus synchronization protocols on the pregnancy rate in Bos taurus indicus x Bos taurus taurus recipient cattles, transferred with in vitro produced embryos, this study used 1,933 recipients (3,649 treatments) divided into 6 groups. In the first group, recipients received 2.0 mg of estradiol benzoate (EB) and 500 mg of cloprostenol, in addiction to an intravaginal device (1.9 g of progesterone) that remained for 8 days. Upon withdrawal of the intravaginal device each recipient received a single dose of 0.5 mg of estradiol cypionate (EC), 500 mg of cloprostenol and 400 IU of equine chorionic gonadotropin (eCG). In the second group, recipients received the same treatment as the first group, but without the 500 mg dose of cloprostenol at the placement of the progesterone intravaginal device. In the third group, recipients received at the time of intravaginal progesterone device placement a single dose of 500 mg cloprostenol and 2.0 mg of EB, and the device remained for 9 days. Two days before the intravaginal device removal (day 7) females received a single dose of 500 mg cloprostenol, and at the time of device removal, received a single dose of 0.5 mg of EC and 400 IU of eCG. In the fourth group, the recipients received the same treatment as the third group, but without cloprostenol in the intravaginal progesterone device placement. In the fifth group, recipients received 2.0 mg of EB, and an intravaginal progesterone device that remained for 8 days. Upon withdrawal of the intravaginal device, each recipient received 0.5 mg of EC, 500 mg of cloprostenol and 300 IU of eCG. In the sixth group, recipie nts received 2.0 mg of EB and an intravaginal progesterone device for 9 days. Two days before the withdrawal, (day 7), received 500 mg of cloprostenol and at the time of device removal received 0.5 mg of EC and 300 IU of eCG. All recipients that had corpus luteum were transferred on average 10 days after implant removal, in other words, about 8 days after estrus, and evaluated by ultrasonography 58 days after embryo transfer to pregnancy diagnosis. Data were subjected to descriptive statistics analysis (means, standard deviations and frequency distribution) and qualitative data were arranged in contingency tables and analyzed by chi-square at 5% of probability. Fourth group showed the best recovery rates (84.9%). However, the number of treatments performed (n=86) in group 4 was reduced in comparison with other protocols. Recipients who received Prostaglandin F2&#945; (PGF2&#945;) 48 hours before device removal showed better recovery rates than others and protocol 4 females had better pregnancy rates. The recipients that were in estrus longer than 91 days before device placing had worse recovery rates than recipients in estrus earlier (p<0.05), although did not influence pregnancy rate (p>0.05) . Despite some recipients peculiarities who presented estrus less than 16 days, the interval form estrus day to device placement did not influence positively these assessments (p>0.05). The uterus classified as normal in protocol 4 showed the best percentages of recovering and pregnancy rates (p<0.05) compared to the values of other protocols. However, comparing all protocols, the uterus classified as flaccid showed better recovery responses and classification did not influence uterine pregnancy rate. As the ovarian activity, the presence of corpus luteum influenced recipients recovery rates (p<0.05), whereas the follicles presence only interfered with the pregnancy rate of protocol 4 animals (p<0.05). The number of uses of the device did not influence the recipients recovery pregnancy rates (p>0.05). The reproductive status and protocol number in the history did not affect the recipients recovery rate (p>0.05). However, recipients who did not received PGF2&#945; before intravaginal device placing, had better results than those who received (p<0.05). The recipients which were transferred with expanded blastocyst had better pregnancy rates than they which were transferred with blastocyst (p<0.05). No differences were found in the cow and heifer categories in recipient donor estrus synchrony in relation to pregnancy rate (p>0.05). No influence of the time trial on the pregnancy rate (p>0.05). The protocols which employed PGF2&#945; 48 hours before the withdrawal had better recipients recovery rates than the protocols that applications were made on intravaginal device removal (p<0.05). Protocol 4 recipients had higher pregnancy rates, although it was a group of low numbers of animals. The used protocols interfered with the recipients recovery rate, and the applications of PGF2&#945; 48 hours before intravaginal device removal, resulted in improved estrus synchronization responses, so the answer was more pronounced when females were cyclical in occasion of the beginning of synchronization; intervals from the last estrus to intravaginal device placement over 90 days (anestrus) influence negatively the responses to estrus and ovulation synchronization protocols. However, the classes of interval from estrus to intravaginal device placement (CLAPROT), the covariates showed no marked effect on the recipients recovery response; The female categories (cows and heifers) did not influence the responses to estrus synchronization treatments, although heifers in the pre-puberty are less responsive to PGF2&#945; application in the beginning of the protocol. Regardless of the females category, the presence of the corpus luteum and flaccid uterine tone at the time of intravaginal device placement proved to be positively related to the recipients recovery response; Reusing intravaginal device has no influence on the recovery and pregnancy rates in embryo recipients; Females with histories of prior use of synchronization protocols with the use of PGF2&#945; become less responsive to new synchronization protocols, while not presenting the same behavior with respect to protocols with progesterone associated with PGF2&#945;. / Com o objetivo de estudar o efeito de diferentes protocolos de sincronização de estro (Uso de cloprostenol no momento da colocação do implante intravaginal e sua permanência por período de oito e nove dias) sobre a taxa de prenhez em receptoras bovinas Bos taurus indicus x Bos taurus taurus, inovuladas com embriões de PIV, o presente estudo utilizou 1933 receptoras (3.649 tratamentos) divididas em 6 protocolos. No protocolo 1, as receptoras receberam 2,0 mg de Benzoato de estradiol (BE) e 500 &#956;g de cloprostenol, e um dispositivo intravaginal (1,9 g de Progesterona) que permaneceu por 8 dias. No momento da retirada do dispositivo intravaginal cada receptora recebeu uma dose única de 0,5 mg de Cipionato de estradiol (CE), 500 &#956;g de Cloprostenol e 400 UI de gonadotrofina coriônica eqüina (eCG). No protocolo 2, as receptoras receberam o mesmo tratamento que o primeiro grupo, porém sem a dose de 500 &#956;g de Cloprostenol na colocação do dispositivo intravaginal de progesterona. No protocolo 3, as receptoras receberam no momento da colocação do dispositivo intravaginal de progesterona uma dose única de 500 &#956;g de Cloprostenol e 2,0 mg de BE, sendo que o dispositivo permaneceu por 9 dias. Dois dias antes da retirada do dispositivo intravaginal (dia 7) as fêmeas receberam uma dose única de 500 &#956;g de Cloprostenol, e no momento da retirada do implante, receberam uma dose única de 0,5 mg de CE e 400 UI de eCG. No protocolo 4, as receptoras receberam o mesmo tratamento que o protocolo 3, porém sem Cloprostenol na colocação do dispositivo intravaginal de progesterona. No protocolo 5, as receptoras receberam 2,0 mg de Benzoato de estradiol, e um dispositivo intravaginal de progesterona por 9 dias. Dois dias antes da retirada, no dia 7, receberam 500 &#956;g de Cloprostenol e no momento da retirada do implante 0,5mg de CE e 300 UI de eCG. No protocolo 6, as receptoras receberam 2,0 mg de BE, e um dispositivo intravaginal de progesterona que permaneceu por 8 dias. No momento da retirada do dispositivo intravaginal, cada receptora recebeu 0,5 mg de CE, 500 &#956;g de Cloprostenol e 300 UI de eCG. Todas as receptoras que apresentaram corpo lúteo foram inovuladas em média 10 dias após a retirada do dispositivo, ou seja, por volta de 8 dias após estro; e avaliadas por meio de ultrassonografia aos 58 dias após inovulação para o diagnóstico de gestação. Os dados foram submetidos a análises estatísticas descritivas (distribuição de freqüência) e os dados qualitativos foram arranjados em tabelas de contingência e analisados pelo teste de qui-quadrado a 5 % de probabilidade de erro. As receptoras do quarto protocolo apresentaram as melhores (p<0,05) taxas de aproveitamento (84,9%). No entanto, o número de tratamentos realizados (n=86) para o protocolo 4 foi reduzido em relação aos demais protocolos, mais estudos tornam-se necessários para confirmar a eficácia desse protocolo. Receptoras que receberam PGF2&#945; 48 horas antes da retirada do dispositivo apresentaram melhores índices de aproveitamento de receptoras (p<0,05) e as fêmeas do protocolo 4 apresentaram melhores índices de prenhez (p<0,05). As receptoras que apresentaram estro em período superior a 91 dias antes da colocação do dispositivo apresentaram piores taxas de aproveitamento que receptoras que apresentaram estro mais recente (p<0,05). Apesar de algumas particularidades das receptoras que apresentaram estro em período inferior a 16 dias, o intervalo dia do estro a colocação do implante não influenciou positivamente nessas avaliações (p>0,05). O útero classificado como normal no protocolo 4 foi o que apresentou melhores valores percentuais de taxa de aproveitamento e de prenhez em relação aos valores dos demais protocolos (p<0,05). Entretanto, comparando todos os protocolos, o útero classificado como flácido apresentou melhores respostas de aproveitamento de receptoras (p>0,05) e a classificação uterina não influenciou a taxa de prenhez (p>0,05). Quanto a atividade ovariana, a presença do CL influenciou na taxa de aproveitamento de receptoras (p<0,05), já a presença de folículos só interferiu na taxa de prenhez dos animais do protocolo 4 (p<0,05). O número de utilização do dispositivo não influenciou na taxa de aproveitamento de receptoras e na taxa de prenhez (p>0,05). O status reprodutivo e o número de protocolo no histórico não interferiram na taxa de aproveitamento de receptoras (p>0,05). No entanto, receptoras que não receberam PGF2&#945; antes da colocação do dispositivo intravaginal, apresentaram melhores resultados que as receptoras que receberam PGF2&#945; (p<0,05). As receptoras que foram inovuladas com blastocisto expandido apresentaram melhores taxas de prenhez do que as receptoras que foram inovuladas com blastocisto (p<0,05). Não houve diferença nas categorias vacas e novilhas na sincronia do estro receptora doadora, em relação à taxa de prenhez (P>0,05). Não houve influência da época experimental sobre a taxa de prenhez (p>0,05). Os protocolos que empregaram PGF2&#945; 48 horas antes da retirada apresentaram melhores taxas de aproveitamento de receptoras do que os protocolos em que as aplicações foram feitas no momento da retirada do dispositivo intravaginal (p<0,05). As receptoras do protocolo 4 apresentaram melhores taxas de prenhez, embora tenha sido um grupo de baixo número de animais. Os protocolos utilizados interferiram na taxa de aproveitamento de receptoras, sendo que, as aplicações de PGF2&#945; 48 horas antes da retirada do dispositivo intravaginal, resultaram em melhores respostas de sincronização de estro, sendo a resposta mais acentuada quando as fêmeas estavam cíclicas na ocasião do início das sincronizações; Os intervalos do ultimo estro à colocação do dispositivo intravaginal superiores a 90 dias (anestro) influenciam negativamente as respostas aos protocolos de sincronização de estro de ovulaç ão. No entanto, as classes de intervalo do estro à colocação do dispositivo intravaginal (CLAPROT), as co-variáveis estudadas não apresentaram efeito marcante sobre a resposta de aproveitamento de receptoras; As categorias de fêmeas (vacas e novilhas) não influenciam a respostas aos tratamentos de sincronização de estro (p>0,05), embora novilhas na fase pré-puberal são menos responsivas a aplicação de PGF2&#945; no início do protocolo. Independente da categoria de fêmeas, a presença do corpo lúteo e tonicidade uterina flácida no momento da colocação do dispositivo intravaginal mostraram-se positivamente relacionado à resposta de aproveitamento de receptoras; A reutilização de dispositivo intr avaginal não apresenta influencia sobre a taxa de aproveitamento e prenhez em receptoras de embriões; Fêmeas com históricos prévios de uso de protocolos de sincronização com uso de PGF2&#945; a apresentam-se menos responsíveis a novos protocolos de sincronização, embora não apresentam o mesmo comportamento com relação aos protocolos com progestagenos associado a PGF2&#945;.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 260808 bytes, checksum: 2d330596bdb4ed51fa6db5548e88da14 (MD5) Previous issue date: 2012-08-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study was carried out to evaluate the aspects related with discarding of sows in swine commercial farms in the State of Minas Gerais. A total of 29,568 events such as breeding, calvings, abortions and estrus repetitions among others, in four farms (A, B, C and D) located in the State of Minas Gerais. The biennia 2008-2009 and 2010-2011, whose data were stored in database of the management program PigChamp ® were evaluated. The annual discarding rates were high, as totalizing 55.10, 40.63, 56.12 and 43.44% in the first biennium and 58.37; 37.15; 42.18 and 48.32% in the second biennium, on farms A, B, C and D, respectively. The highest discarding rate in both biennia on farms A, B and D refers to sows without evident problems and presenting good production indexes, as totalizing 39.02, 13.02 and 17.77% in the first biennium and 40.00, 7.95 and 16.09% discarded animals in the second biennium, respectively. However, this condition occupied the second prominence position in Farm C during the first biennium. During this biennium, it was distinguished the total low average of piglets born (15.5%), as being 11.4% discarding rate of sows without obvious problems. In the second biennium, however, several disposal causes were higher than the one found for matrices presenting no evident problems (4.22%), such as abortion (18.67%), vulvar discharge (13.56%) and injuries (12.44%). The anestrus was not highlighted as reason for disposal in both two biennia under evaluation. Thus, the rates for this condition were: 0 and 1.07% in farm A; 0.15% and 0.76 in B; 1.70 and 0.22% in C and 0.0 and 1.73% in farm D, for both biennia under evaluation, respectively. Moreover, the repetition of the estrus as cause for discarding presented variable rates, as depending on the farm under evaluation. So, the rates for this condition were 1.40 and 0.27%; 10.50 and 11.93%; 8.28% and 3.56; 4.56 and 7.96% on farms A, B, C and D, in both biennia, respectively. Besides the causes for discarding previously related, other ones with variable incidence were also found among farms, given that they are dependent on general and reproductive managements of each herd. In all farms under evaluation, there were records on discarding causes that were not according to animal real condition. It is concluded that the high discarding rate observed in sows could be reduced, as taking into account that animals with excellent productivity indexes and without obvious problems are discarded. It is also concluded that, sometimes, the true cause for discarding is not properly recorded, as taking into account that the results are not subsequently used for making decision concerning to possible management corrections in the farm and better use of the stock sows. / Objetivou-se avaliar aspectos relacionados ao descarte de matrizes em granjas comerciais de suínos em Minas Gerais. Foram analisados 29.568 eventos ocorridos como coberturas, parições, abortamentos e repetição de estros dentre outros, em quatro granjas (A, B, C e D) situadas no estado de Minas Gerais. Foram avaliados os biênios 2008-2009 e 2010-2011, cujos dados encontravam-se armazenados em bancos de dados do programa de gerenciamento Pigchamp®. As taxas de descartes anuais foram elevadas, perfazendo um total de 55,10; 40,63; 56,12 e 43,44% no primeiro e 58,37; 37,15; 42,18 e 48,32% no segundo biênio, nas granjas A, B, C e D, respectivamente. A maior taxa de descarte nos dois biênios nas granjas A, B e D foi de matrizes sem problemas evidentes e apresentando bons índices produtivos, totalizando 39,02; 13,02 e 17,77% no primeiro e 40,00; 7,95 e 16,09% dos animais descartados no segundo biênio, respectivamente. Entretanto, esta condição ocupou o segundo lugar de destaque na granja C durante o primeiro biênio. Neste biênio, destacou-se nesta granja a baixa média de nascidos totais (15,5%), sendo 11,4% a taxa de descarte de matrizes sem problemas evidentes. Já no segundo biênio, várias causas de descartes foram mais elevadas nesta granja do que a encontrada para matrizes sem problemas evidentes (4,22%), como o abortamento (18,67%), a descarga vulvar (13,56%) e ferimentos (12,44%). O anestro não teve destaque como causa de descarte nos dois biênios avaliados. Assim, as taxas encontradas para esta condição foram 0 e 1,07% na granja A; 0,15 e 0,76% na B; 1,70 e 0,22% na C e 0,0 e 1,73% na granja D, nos dois biênios avaliados, respectivamente. Por outro lado, a repetição de estro como causa de descarte apresentou taxas variáveis, dependendo da granja avaliada. Assim, as taxas encontradas para esta condição foram 1,40 e 0,27%; 10,50 e 11,93%; 8,28 e 3,56%; 4,56 e 7,96% nas granjas A, B, C e D, nos dois biênios avaliados, respectivamente. Além das causas de descartes anteriormente relacionadas, foram também encontradas outras com incidência variável entre as granjas, tendo em vista que são dependentes dos manejos reprodutivo e geral de cada rebanho. Verificou-se ainda, em todas as granjas avaliadas, registros de causas de descartes que não condiziam com a real condição do animal. Conclui-se que a elevada taxa de descarte observada em matrizes suínas poderia ser reduzida, tendo em vista que são descartados animais sem problemas evidentes e com excelentes índices de produtividade. Conclui-se ainda que a verdadeira causa de descarte algumas vezes não é corretamente registrada, tendo em vista que os resultados não são posteriormente utilizados para a tomada de decisões, visando efetuar possíveis correções de manejo na granja e um melhor aproveitamento das matrizes do plantel.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 765049 bytes, checksum: dcb0cc188aa67726f24e856817503e00 (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to evaluate the fertilizing capacity, acrosomal integrity, and qualify and quantify by chromatographic techniques the incorporation of cholesterol to the sperm membrane by cyclodextrin in different diluents on cryopreservation of goat sperm. Four males, Saanen (2) and Parda Alpine (2) breeds were used. It was performed a completely randomized design, with each semen sample divided into the following treatments: TG - Tris-glycerol diluent; TGCCC - Cyclodextrin-cholesterol complex (CCC) + Tris-glycerol diluent; TG15CCC - CCC diluted in isosmotic solution (saline) to semen with 15 minutes of incubation before addition of the Tris-glycerol diluent; EE - egg yolk + ethylene glycol diluent; EECCC - CCC + egg yolk + ethylene glycol diluent; EE15CCC - CCC diluted in isosmotic solution (saline) to semen with 15 minutes of incubation before addition of the egg yolk + ethylene glycol diluent. Fresh semen, after its examination, was submitted to the cryopreservation process and stored in a cryogenic cylinder for 10 days. After thawing, the following analysis were performed: acrosomal integrity, sperm fertilizing capacity through perivitelline membrane of hen egg yolk binding test (MPEY) and analysis of sperm motility and vigor. Besides, techniques of gas and thin layer chromatography were conducted to evaluate the incorporation of cholesterol to the sperm membrane. Data were submitted to Lilliefors and Cochran and Bartlett tests to verify normality and homogeneity of variances, respectively. The characteristics that met the assumptions of these tests were submitted to ANOVA and means were compared by Duncan s test at 5% of probability. When data did not meet the assumptions of normality and homogeneity of variances, the means were compared by Kruskal-Wallis test. Pearson s correlation coefficient was calculated in all features.Addition of cyclodextrin-cholesterol complex did not increase binding of sperm to MPEY (P > 0.05). The EE15CCC treatment was superior to EECCC treatment in maintaining the acrosomal integrity but did not differ from control (EE; P > 0.05). In Tris-glycerol diluent, the values observed in the control treatment were higher (P < 0.05) than values of the other treatments (TGCCC and TG15CCC) in maintaining the acrosomal integrity. There was a negative correlation between the binding assay and acrosomal integrity (r = -0.25) and positive correlation between the binding assay and sperm motility (r = 0.20). The sperm motility and acrosomal integrity were negatively correlated (r = -0.26). In quantitative and qualitative evaluation of cholesterol by chromatographic techniques (gas and thin layer) there was no difference between the samples of semen in different treatments (P > 0.05). Both techniques showed no incorporation of cholesterol to spermatozoa. It was concluding that addition of cholesterol-cyclodextrin complex to the medium did not improve the physical aspects of goat semen, or the sperm binding capacity. Pre-incubation of semen with CCC for 15 minutes before addition of ethylene + egg yolk diluent (EE15CCC) did not enhance the integrity of the acrosome in relation to control (EE). The gas and thin layer chromatography showed, respectively, an efficient method for quantitatively and qualitatively determining the cholesterol present in the cryopreserved goat sperm. The concentration of 1 mg of cholesterol-cyclodextrin complex added to the goat semen was not effective for increasing the concentration of cholesterol in sperm. / O objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade fecundante, integridade acrossomal, além de qualificar e quantificar por técnicas cromatográficas a incorporação do colesterol à membrana plasmática do espermatozoide pela ciclodextrina em diferentes diluentes na criopreservação de espermatozoides caprinos. Foram utilizados quatro machos caprinos das raças Saanen (2) e Parda Alpina (2) seguindo um delineamento inteiramente casualizado, dividido nos seguintes tratamentos: TGcontrole negativo para o diluente a base de Tris-glicerol; TGCCC- Complexo ciclodextrina-colesterol (CCC) + diluente Tris glicerol; TG15CCC- CCC diluído em solução isosmótica ao sêmen (soro fisiológico) com 15 minutos de incubação antes da adição do diluente Tris glicerol; EE- controle negativo para o diluente a base de Gema de ovo + etilenoglicol; EECCC- CCC + diluente Gema de ovo + etilenoglicol; EE15CCC- CCC diluído em solução isosmótica ao sêmen (soro fisiológico) com 15 minutos de incubação antes da adição do diluente Gema de ovo + etilenoglicol. O sêmen fresco, após realização de sua análise física foi submetido ao processo de criopreservação e estocado em botijão de nitrogênio por 10 dias. Após o descongelamento realizou-se análise da integridade acrossomal, capacidade fecundante do espermatozoide por meio do teste de ligação à membrana perivitelina da gema do ovo de galinha (MPGV) e as análises de motilidade progressiva e vigor espermático. Além destes testes foi realizada a avaliação da incorporação do colesterol à membrana plasmática dos espermatozoides pelas técnicas de cromatografia gasosa e de camada delgada. Para verificação da normalidade e homogeneidade dos dados foi empregado, respectivamente, o teste de Lilliefors e Cochran e Bartlett. As características que atenderam as premissas destes testes foram submetidas à ANOVA e as médias foram comparadas pelo teste de Duncan com 5% de probabilidade de erro. Quando as distribuições não atenderam as premissas de normalidade e homogeneidade, as médias foram comparadas pelo teste de Kruskal-Wallis. Realizou-se a correlação simples de Pearson entre todas as características. A adição do complexo ciclodextrina-colesterol não aumentou a ligação dos espermatozoides a MPGV (P>0,05). O tratamento empregando o complexo ciclodextrina-colesterol (CCC) diluído em solução isosmótica ao sêmen com 15 minutos de incubação antes da adição do diluente a base gema de ovo + etilenoglicol (EE15CCC) foi superior aos valores médios do tratamento EECCC na manutenção da integridade acrossomal, porém não diferiu dos valores do tratamento controle para este diluente (EE; P >0,05). No diluente Tris-Glicerol, os valores observados no tratamento controle foi superior (P<0,05) aos valores médios dos demais tratamentos (TGCCC e TG15CCC) na manutenção da integridade acrossomal. Houve correlação negativa entre o teste de ligação e a integridade do acrossoma (r= -0,25) e positiva entre o teste de ligação e a motilidade espermática progressiva (r= 0,20). A motilidade espermática progressiva e a integridade do acrossoma apresentaram correlação negativa (r= -0,26). Na avaliação quantitativa e qualitativa do colesterol pelas técnicas cromatográficas (gasosa e camada delgada) não se verificou diferença entre as amostras do sêmen nos diferentes tratamentos (P>0,05). Ambas as técnicas demonstraram que não houve incorporação do colesterol aos espermatozoides. Conclui-se que o complexo ciclodextrina-colesterol no meio diluidor não melhorou os aspectos físicos do sêmen caprino pós-descongelamento e a capacidade de ligação à membrana perivitelina da gema do ovo de galinha. A pré-incubação do sêmen com o CCC por 15 minutos antes da adição do diluente a base de Etilenoglicol+ gema de ovo (EE15CCC) não proporcionou um aumento na integridade do acrossoma a ponto de diferir dos valores do tratamento controle (EE). A cromatografia gasosa e de camada delgada demonstraram, respectivamente, um eficiente método quantitativo e qualitativo para determinar o colesterol presente no espermatozoide caprino criopreservados. A concentração de 1 mg do complexo ciclodextrina-colesterol adicionada ao sêmen caprino não foi eficaz em aumentar a concentração de colesterol presente no espermatozoide.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 596420 bytes, checksum: 244f5747a0a2c2654b4871663ed784e4 (MD5) Previous issue date: 2013-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study was aimed to evaluate the productive and reproductive performance of dairy cows, in free stalls, immediately after postpartum. The herd was composed of 51 Holstein primiparous and multiparous cows, aged 3 to 7 years and mean body weight of 594.4±65.1 kg. The dairy farm managed all the nutrition, leasing, health, as well as milking times. After calving, cows were supplemented with 6 kg of concentrate/cow/day and corn silage for the 1st 20 days of lactation. Subsequently 1 kg of concentrate was supplied for every 3 kg milk/day, taking in consideration the average of the animals. Corn silage was supplemented ad-libitum. The variables studied were: birth intervals until first ovulation, first service or first IA; pregnancy rate to first service, number of services per conception and service period, parity, body condition score, body weight at calving, calf sex, absence or presence of retained placenta, uterine infection, total milk yield, days in milk, and daily milk production. The statistical program SAEG-2007 was used to analyze the descriptive data (means and standard deviations), and ANOVA for quantitative data and chi-square for a categorical variable (pregnancy rate). Not normal and homologous data was analyzed by nonparametric analysis and compared by Kruskall Wallis test or Wilcoxon test. A 5% significance level was adopted for all analyses. The mean values obtained were: body condition score at calving of 3.47±0.4; calving interval to first ovulation of 5.89±3.4 weeks postpartum, first artificial insemination of 112.5±57.0 days postpartum, no difference was found in these parameters between delivery times of parturition (P>0.05). The pregnancy rate to first service was 43.6% and pregnancy rate in the experimental period was of 76.4%, with no difference between delivery times of parturition (P>0.05). Milk production accumulated in conception was of 3335.6±1488.4 liters and an average accumulated in conception was of 25.8±5.4 liters per day and Milk production adjusted to 305 days was of 7424.0±1877.8 liters. Management of production employed in free-stalls for all reproductive and productive traits observed was considered satisfactory. Detection of estrus, measured here by the number of first insemination estrus, might have been the biggest limiting factor to achieve lower values of service period and reproductive efficiency. / Este trabalho teve como objetivo avaliar os parâmetros produtivos e reprodutivos em vacas de aptidão leiteira no pós-parto imediato, criados em manejo de free-stall. O grupo estudado foi composto por 51 vacas da raça holandês entre primíparas e pluríparas, com idade entre 3 a 7 anos e peso corporal médio de 594,4±65,1 kg. O manejo nutricional, sanitário e manejo de locação e de ordenha das vacas foram os mesmos adotados pela granja leiteira. Após o parto, as vacas foram suplementadas com 6 kg de concentrado/vaca/dia e silagem de milho a vontade foi fornecidos até completar 20 dias de lactação. Posteriormente foi fornecido 1 kg de concentrado para cada 3 kg de leite/dia, considerado a média do lote e silagem de milho a vontade para todos os animais. As variáveis estudadas foram: intervalos do parto à primeira ovulação, ao primeiro serviço ou primeira IA; taxa de gestação ao primeiro serviço; número de serviços por concepção e período de serviço, ordem de parto, escore de condição corporal, peso corporal ao parto, sexo do bezerro, presença ou ausência de retenção de placenta, infecção uterina, produção de leite total, dias de lactação e produção de leite diária. O programa estatístico SAEG-2007 foi empregado para analisar os dados, onde se efetuou a estatística descritiva (médias e desvios-padrão) e ANOVA para os dados quantitativos e Qui-Quadrado para a variável categórica (taxa de gestação). Os dados que não apresentaram normalidade e homocidacidade foram analisados por analise não paramétrica e comparadas pelos testes de Kruskall Wallis ou Wilcoxon. Adotou-se 5% de significância para todas as analises. Os valores médios obtidos foram: escore de condição corporal ao parto de 3,47±0,4; intervalo de parto a primeira ovulação de 5,89±3,4 semanas pós-parto; primeira inseminação artificial aos 112,5±57,0 dias pós-parto, não sendo observada diferença destes parâmetros entre as ordens de parto (P>0,05). A taxa de gestação ao primeiro serviço foi de 43,6% e taxa de gestação no período experimental de 76,4%, não havendo diferença entre as ordens de parto (P>0,05). A produção de leite acumulada à concepção, produção diária leite até a concepção e produção de leite ajustado para 305 (PRODL305) foi respectivamente de 3.335,6±1.488,4; 25,8±5,4 e 7.424,0±1.877,8 litros. Conclui-se que no manejo de produção empregado Free-Stall, os valores observados para todas as características reprodutivas e produtivas são consideradas satisfatórias; a detecção de estro, aqui avaliado pelo numero de estro a primeira inseminação, talvez possa ter sido o maior fator limitante para alcançar valores menores de período de serviço e eficiência reprodutiva.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 929339 bytes, checksum: fddfad690cd5f53dd8bcd64c3c0e07a5 (MD5) Previous issue date: 2012-12-20 / In vitro production of pig embryos has yet taken unsatisfactory results due to low production blastocyst, the percentage of embryos produced from oocytes matured in vitro is lower than those matured in vivo. Several factors affect the success of maturation, however, the oocyte competence is one of the most important factors. Only competent oocytes are able to undergo fertilization and have normal embryonic development. The oocyte competence can be evaluated from various parameters such as morphology of the oocyte, follicle size, stained with cresyl brilliant blue (BCB), the time of cleavage and age of the donor. In recent years these parameters have been used for studies of gene expression associated with the task. This study aimed to evaluate differences in gene expression BMP15, RYBP, MATER, ZAR1 and using the constitutive gene GAPDH as endogenous control in immature oocytes of different morphological classes which are: 1, 2, 3 and 4 to elucidate the mechanisms required for oocyte acquires competence and provide important molecular markers linked to the development capability. Oocytes total RNA was extracted and used as a template for synthesis of cDNA first tape. The results of gene expression were analyzed using a mixed model, considering the gene expression data dependent and independent variables oocyte classes. Genes BMP15, RYBP ZAR1 and showed similar expression oocyte in categories 1, 2 and 3, only 4 categories differ in their expression (P <0.05). The MATER gene was expressed similarly in all categories oocyte studied (P> 0.05). The qPCR technique, in this work, was efficient to detect these transcripts in oocytes of different categories. However, to better understand the involvement of these transcripts in the acquisition of oocyte competence are needed most studies evaluating different morphological classes of oocytes at different stages of development and implication of other genes involved in oocyte competence. / A produção in vitro de embriões suínos ainda tem tidos resultados insatisfatórios devido a baixa de produção de blastocisto, a porcentagem de embriões produzidos de ovócitos maturados in vitro é inferior àqueles maturados in vivo. Diversos fatores interferem no sucesso da maturação, entretanto, a competência ovocitária é um dos fatores mais importantes. Somente ovócitos competentes são capazes de sofrer a fecundação e ter desenvolvimento embrionário normal. A competência ovocitária pode ser avaliada a partir de vários parâmetros, tais como morfologia do ovócito, tamanho do folículo, coloração com brilliant cresyl blue (BCB), momento da clivagem e idade da doadora. Nos últimos anos esses parâmetros têm sido utilizados para os estudos da expressão dos genes associados com a competência. Este trabalho teve por objetivo avaliar diferenças na expressão dos genes BMP15, RYBP, MATER, ZAR1 e como controle endógeno o gene constitutivo GAPDH em ovócitos imaturos de diferentes classes morfológicas sendo elas: 1, 2, 3 e 4. Como finalidade elucidar os mecanismos necessários para que o ovócito adquira competência e proporcionar importantes marcadores moleculares relacionados com a capacidade de desenvolvimento. O RNA total ovócitos foi extraído e utilizado como molde para a síntese da primeira fita de cDNA. Os resultados da expressão gênica foram analisados utilizando um modelo misto, considerando os dados de expressão gênica variável dependente e as classes ovocitárias variáveis independentes. Os genes BMP15, ZAR1 e RYBP apresentaram expressão semelhante nas classes ovocitárias 1, 2 e 3, somente a categoria 4 diferiu na expressão desses genes (P<0,05). O gene MATER foi expresso de forma semelhante em todas as classes ovocitárias estudadas (P>0,05). A técnica de qPCR, no presente trabalho, foi eficiente para detecção destes transcritos em ovócitos de diferentes classes. No entanto, para melhor entendimento do envolvimento desses transcritos na aquisição da competência ovocitária são necessários mais estudos avaliando ovócitos de diferentes classes morfológicas, em diferentes fases de desenvolvimento e implicação de outros genes envolvidos com a competência ovocitária.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 758192 bytes, checksum: 7d08ae26d20f3239be31bb31bc6ab288 (MD5) Previous issue date: 2003-08-20 / Embryo transfer (ET) in mares has been performed by transcervical or surgical methods. Pregnancy rates resulting from the transcervical method are more variable; however this is the more routine ET technique used nowadays. The surgical method has resulted in higher and less variable pregnancy rates. Although, this technique is much more invasive than the transcervical method and it demands a surgical environment and specialized personnel. In 1998, GASTAL et al. developed a transvaginal ultrasound-guided intra-uterine injection (IUI) technique and suggested it as a possible method for ET in mares. This technique would likely avoid cervical manipulation, one of the disadvantages of the transcervical ET technique. The objective of this study was to evaluate the efficiency of the IUI technique as an alternative method to the transcervical technique for ET in mares. In addition, dynamics of the uterus, corpus luteum, and embryonic vesicle were also studied. A real-time ultrasound scanner, equipped with a 5.0 MHz sector-array convex transducer, placed in a plastic extension for transvaginal procedures, a plastic epidural catheter (1.05 x 0.6 x 1000 mm), and a 16-ga needle (56 cm) were used. Immediately prior to ET, mares were sedated using detomidine (1 mg, i.v.). The right uterine horn was positioned transrectally against the vaginal wall over the transducer face. The needle with the catheter was introduced through the needle-guide of the transducer extension and inserted into the uterine lumen. The position of the catheter was verified by ultrasound and the embryo was placed into the uterus. Pregnancy diagnosis was done by ultrasound on Day 15. In Experiment 1, 33 IUI of 0.9% sterile saline (20 mL) were performed in 15 cyclic mares. The success of injection, indicated by the presence of fluid within the uterine lumen, was confirmed by transrectal ultrasonography. In Experiment 2, 77 embryos were transferred on Day 7 (Day 0 = ovulation) by IUI (n=39) or transcervical method (n=38). In Experiment 3, 31 embryos were transferred on Day 7 by IUI (n=16) or transcervical method (n=15). The control group consisted of inseminated mares (n=16) which were subjected to the same protocol of data collection as the ET groups. In Experiment 1, the operator successfully deposited saline into the uterus in 97% (32/33) of the IUI procedures. The overall embryo recovery rate in Experiments 2 and 3 was 71.8% (122/170). In Experiment 2, the pregnancy rates resulting from IUI (76.9%) and transcervical (78.9%) ET techniques were not different (P>0.05). In Experiment 3, the pregnancy rates obtained from IUI (75.0%, 12/16), transcervical (73.3%, 11/15), and control (68.7%, 11/16) groups were similar. On Day 7, mares treated by transcervical ET displayed increased (P<0.0001) uterine contractility from 5 to 60 min following the procedure compared to the other groups. No changes in uterine contractility were observed between control and IUI treated mares. No differences in uterine tone or echotexture were detected among groups. From Days 6 to 16 there were no differences in daily uterine contractility, tone, and echotexture between ET treated and control mares. In addition, similar luteal lifespan was observed among treatments. Patterns of transuterine embryonic vesicle mobility and the day of embryo fixation were not different among groups. Results of the present study suggest that the ultrasound-guided IUI ET technique may be a suitable alternative to the traditional transcervical method of ET in mares. In addition, the IUI ET technique may be a valuable tool for future studies involving ET in other species. / Embriões eqüinos têm sido comumente transferidos por dois métodos: transcervical ou cirúrgico. As taxas de prenhez originadas pelo primeiro oscilam bastante, embora seja de mais fácil aplicação. O método cirúrgico tem originado taxas de prenhez mais elevadas e mais homogêneas. No entanto, é mais oneroso por demandar condições e pessoal especializados. Em 1998, GASTAL et al. desenvolveram uma técnica ultra-sonográfica de injeção intra-uterina (IIU) em eqüinos e a sugeriram como método alternativo para transferência de embriões (TE), pois evitaria algumas desvantagens da técnica transcervical advindas da manipulação cervical. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficiência da técnica ultra-sonográfica de IIU como método alternativo de TE em eqüinos, comparando-a com a técnica transcervical (TC), assim como estudar a dinâmica uterina, do corpo lúteo e da vesícula embrionária. Para as injeções intra-uterinas foram utilizados transdutor setorial de 5 MHz, agulha de 16-ga e cateter colocados em uma extensão plástica para procedimentos transvaginais. A extensão foi introduzida na vagina e o operador tracionou o corno uterino contra a parede vaginal via transretal, posicionando-o frente à face do transdutor transvaginal. A IIU foi realizada quando o operador visualizou a ponta da agulha, do cateter e movimentos de vai-e-vem do cateter no lúmen uterino, por ultrasonografia. As TE foram realizadas no Dia 7 (Dia 0 = ovulação). Diagnósticos de gestação foram realizados no Dia 15, por ultrasonografia transretal. No Experimento 1, 33 IIU foram realizadas com 20 mL de solução estéril de NaCL a 0,9%. A eficiência da técnica foi verificada por pesquisa de fluido uterino imediatamente após as injeções, por meio de exame ultra-sonográfico transretal. No Experimento 2, 77 embriões foram transferidos por IIU (n=39) ou via TC (n=38), em duas estações reprodutivas. No Experimento 3, três grupos foram estudados: TE por IIU, TE via TC e Controle. O grupo Controle foi formado com éguas previamente inseminadas e submetidas ao mesmo protocolo de coleta de dados dos grupos de TE. No Experimento 1, obteve-se taxa de sucesso de 97% (32/33) na deposição de solução salina no lúmen uterino por IIU. Adicionalmente, verificou-se que os parâmetros ultrasonográficos de visualização da ponta da agulha, da ponta do cateter, dos movimentos de vai-e-vem e da ejeção de fluido, foram fundamentais na avaliação da eficiência da técnica de IIU. A taxa de recuperação embrionária total nas duas estações foi de 71,8% (122/170). No Experimento 2, as taxas de prenhez obtidas pelas técnicas de TE por IIU (76,9%; 30/39) e TE via TC (78,9%; 30/38), não diferiram (P>0,05). No Experimento 3, as taxas de prenhez das técnicas de TE por IIU (75,0%; 12/16), TE via TC (73,3%; 11/15) e do grupo Controle (68,7%; 11/16) foram similares (P>0,05). Nas TE por IIU e no grupo Controle não foram detectadas alterações na contratilidade uterina no Dia 7. No entanto, efeito estimulatório na contratilidade uterina foi detectado entre 5 a 60 minutos após TE via TC (P<0,0001). Não foram detectadas diferenças entre tônus e ecotextura uterina no Dia 7 entre as técnicas de TE e o grupo Controle. Entre os Dias 6 e 16 as éguas receptoras de embriões e do grupo Controle apresentaram o mesmo padrão diário de tônus e ecotextura uterina. Não foram detectadas alterações na vida média do corpo lúteo entre os grupos estudados. Os padrões de mobilidade da vesícula embrionária e o dia de fixação da mesma foram similares entre os grupos. Os resultados do presente estudo indicam que a técnica ultra-sonográfica de IIU é um método alternativo de TE, originando taxas de prenhez similares ao método transcervical. Esta pode ser uma opção valiosa para éguas com histórico de dificuldade de transposição cervical durante o procedimento de inovulação. Além disso, esta técnica poderá colaborar para estudos futuros de utilização de TE em outras espécies de animais domésticos e silvestres.