Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-03-28T15:53:13Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Elisangela_Madeira.pdf: 846007 bytes, checksum: 5c12f30cc3a07b37c0ca5584d498bd95 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-03-28T21:00:21Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Elisangela_Madeira.pdf: 846007 bytes, checksum: 5c12f30cc3a07b37c0ca5584d498bd95 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-28T21:00:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Elisangela_Madeira.pdf: 846007 bytes, checksum: 5c12f30cc3a07b37c0ca5584d498bd95 (MD5) Previous issue date: 2015-03-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Os protocolos de vitrificação para produção in vitro de embriões (PIV) bovinos ainda são limitados. Portanto o objetivo desta tese foi identificar um novo protocolo para vitrificação de embriões bovinos PIV. No primeiro estudo (E1), foram determinadas as características de toxicidade do etilenoglicolmonometiléter (EGMME) na solução de vitrificação, com uma pré-exposição dos embriões em soluções contendo EGMME. No primeiro experimento do E1, as taxas de eclosão observadas para embriões expostos a soluções contendo EGMME em concentrações de 5, 10 e 15% durante 5 min a 39°C (30,5, 33,9 e 26,3%, respectivamente) foram semelhantes (P>0,05) à taxa observada para embriões não expostos ao EGMME (46,9%). No segundo experimento do E1, as taxas de eclosão de embriões não expostos a crioprotetores (33,4%) ou expostos ao EGMME a 10 ou 15% (32,9 e 25,1%, respectivamente) foram superiores (P<0,05) à observada para embriões expostos ao etilenoglicol (EG) a 20%,um crioprotetor comumente usado (17.0%). A expressão dos genes Bcl-2 (inibidor de apoptose), Bax (promotor de apoptose) e CCND2 (marcador de proliferação celular) não diferiu entre os grupos (P>0,05). No segundo estudo (E2), o EGMME foi testado em protocolos de vitrificação, em associação com o dimetilsulfóxido (DMSO), com avaliação das taxas de eclosão, da expressão gênica e da implantação dos embriões PIV em fêmeas bovinas previamente sincronizadas. No primeiro experimento do E2, embriões não expostos ao EGMME (controle) foram comparados com cinco tratamentos com exposição a soluções contendo: EG a 20% e DMSO a 20%; EGMME a 20% e DMSO a 15%; EGMME a 15% e DMSO a 15%; EGMME a 15% e DMSO a 20%; e EGMME a 10% DMSO a 20%. As taxas de eclosão não diferiram entre os tratamentos (P>0,05). No segundo experimento do E2, a taxa de eclosão de embriões não vitrificados (63.8%) foi superior (P<0,05) às taxas observadas para embriões vitrificados em soluções contendo EG a 20% e DMSO a 20% (T2) e EGMME a 20% e DMSO 20% (T3) (37.6% e 22.0% respectivamente). As taxas observadas em T2 e T3 foram similares (P>0,05), porém maiores que a taxa de 10.3%observada em T4 (EGMME a 15% e DMSO a 20%). A expressão dos genes BAX (promotor de apoptose) e CCND2 (marcador de proliferação celular) foram semelhantes para todos os grupos (P>0,05), mas a expressão do gene Bcl-2 (inibidor de apoptose) foi inferior no T4 (P<0,05), em comparação com os demais tratamentos. Trinta dias após a implantação dos embriões PIV em T2 e T3, as taxas de prenhez foram de 26,6% para ambos os grupos. Não foram implantados embriões PIV no T4. Esta tese Concluiu se que o EGMME pode ser usado como crioprotetor em protocolos de vitrificação de embriões bovinos PIV, pois não apresentou toxicidade nas concentrações avaliadas. / Vitrification protocols for in vitroproduction (IVP) of bovine embryos are limited. The objective of this thesis was to identify a novel protocols for vitrification of IVP bovine embryos. In the first study (S1), the toxicity characteristics of the Ethylene glycol monomethyl ether (EGMME) were determined after pre-exposure of embryos to solutions containing that cryoprotectant. In the first experiment of S1, hatching rates for embryos exposed to solutions including 5%, 10%and 15% EGMME for 5 min at 39 °C (30.5%, 33.9% and 26.3% respectively) were similar (P<0.05) to those for unexposed embryos (46.9%). In the second experiment of S1, hatching rates for unexposed embryos (33.4%) and for embryos exposed to 10% EGMME (32.9%)and 15% EGMME (25.1%) were greater (P <0.05) than the rate for embryos exposed to 20% ethylene glycol (EG), a commonly used cryoprotectant (17.0%).The expression of the Bcl-2 (inhibitor of apoptosis), Bax (apoptosis promoter) and CCND2 (cell proliferation marker) genes did not differ amongthe groups (P> 0.05). In the second study (S2), EGMME was tested in vitrificationprotocolos, associated with Dimethyl sulfoxide (DMSO), with evaluation of hatching rates, gene expression and implantation vitrified of embryos in previously synchronized cows. In the first experiment of S2, embryos unexposed to EGMME were compared against five treatments with exposure to solutions containing: 20%EG and 20%DMSO; 20% EGMME and 15%DMSO; 15% EGMME and 15% DMSO; 15% EGMME and 20% DMSO; and 10%EGMME and 20% DMSO. Hatching rates were similar across all those treatments (P>0.05). In the second experiment of S2, the hatching rate of non-vitrified embryos (63.8%) was greater (P<0.05) than the rates observed for vitrified embryos conditioned in solutions containing 20% EG and 20% DMSO (T2)and 20% EGMME and 20% DMSO (T3) (37.6% and 22.0%, respectively). The rates of T2 and T3 were similar (P>0.05), but were greater than the 10.3% rate observed for T4 (15% EGMME and 20% DMSO). The expression of the BAX (apoptosis promoter) and CCND2 (cell proliferation marker) genes were similar across treatments (P>0.05). but the Bcl-2 gene (inhibitor of apoptosis) had lower expression in T4 than in the other treatments (P<0.05). Thirty days after implantation of embryos from T2 and T3, pregnancy rates of previously synchronized cows were equal to 26.6% for both groups (no embryos from T4 were used). This thesis concluded thatEGMME can be used as cryoprotectant in vitrificationprotocolos for IVP of cattle embryos because no toxicity was observed at the tested concentrations.

Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-15T16:46:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Stela_Gheller.pdf: 569023 bytes, checksum: a5e2134d6233755fa80a8cad9319a551 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-16T16:45:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Stela_Gheller.pdf: 569023 bytes, checksum: a5e2134d6233755fa80a8cad9319a551 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-16T16:45:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Stela_Gheller.pdf: 569023 bytes, checksum: a5e2134d6233755fa80a8cad9319a551 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Na refrigeração a sobrevivência da célula espermática é dependente da sua orientação espacial no meio diluidor não devendo essas se aglutinarem e nem sedimentarem. Em diluentes mais sólidos como os suplementados com gelatina, essa disposição pode ser beneficiada, além de ocorrer uma redução na demanda metabólica celular devido a redução da motilidade quando refrigerado. Em decorrência disto, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da adição de gelatina ao diluente para sêmen ovino acondicionado a 50, através de parâmetros de qualidade seminal realizados por teste in vitro durante um período de até 72hs.. Foram utilizados 8 carneiros, realizando-se 4 coletas de sêmen para cada macho, totalizando 32 ejaculados. Dois diluentes foram utilizados neste estudo, E1 (leite integral 10%, 0,2 g de D-gligose, 50 mg de estreptomicina e 100 ml de água mili Q), e a E2 (E1 acrescido de 1,5% de gelatina). Foram avaliados os parâmetros de motilidade, morfologia espermática, integridade de membrana, DNA e acrossoma durante os períodos de 0, 24, 48 e 72h de armazenado a 5ºC. Durante as primeiras 48 horas de armazenamento, não houve diferença estatística na motilidade entre E1 e E2, no entanto, a E2 nas 72 horas (51,9%) foi mais eficaz (P <0,05) na manutenção dos parâmetros de motilidade do que o E1 (31,1%). A integridade do acrossoma foi semelhante em ambos os extensores a 0, 24 e 48 horas, mas às 72h a E2 foi maior (P <0,05) da qualidade neste parâmetro (E1= 42,9 e E2 = 66,9). As variáveis, integridade de membrana, DNA, e morfologia espermática, não apresentaram diferença entre os tratamentos (P>0,05). Com os resultados encontrados pode-se concluir que a adição de gelatina na concentração de 1,5% ao diluente melhorou a motilidade e integridade do acrossoma em sêmen ovino armazenado por até 72hs, a 5ºC aumentando assim o período de armazenamento das doses em 24 horas, sem perda de qualidade do espermática em testes realizado in vitro. / Under refrigeration, the spermatic cell survivability depends upon its spatial orientation in the extender medium and the agglutination or sedimentation of these cells should not occur. In more solid extenders like the one supplemented with gelatin, the spatial disposition can be improved, and also the metabolic demand is lower by the reduced motility provoked by more solid medium. The main aim of this work was evaluate the qualitative effect provoked by addition of gelatina to the ram semen extender stored at 5ºC. There were used 8 rams being accomplished 4 semen collections for each, totalizing 32 ejaculates. Two extenders were used in this study, E1 (whole milk 10%, 0.2g D-Glugose, 50 mg streptomycin and 100 ml of mili Q water), and the E2 (E1 plus 1.5% of gelatin). There were evaluated motility, cell morphology, DNA, membrane and acrosome integrity, during the period of 0h, 24hs, 48hs, and 72 hours of storage under refrigeration at 5°C. During the first 48hs of storage the spermatic motility remained the same in the E1 and E2, however, at 72hs the E2 (51,9%) was more efficient in the maintenance of the motility parameters (P<0.05) than the E1 (31,1%). The acrosome integrity was similar in both extenders at 0h, 24hs and 48h of storages, but at 72hs the E2 showed the best result (P<0.05) in this parameter (E1=42,9% and E2=66,9%). The viability, morphology and membrane and DNA integrity had not shown statistical difference comparing the treatments (P>0.05). With the results there is possible to conclude that the addition of gelatin to the extender increased the motility and acrosome integrity in ram semen stored at 5ºC, increasing through this the possibility of extending the storage time under refrigeration of the semen doses to more than 24hs.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-08T13:12:12Z No. of bitstreams: 1 Elizabeth Hortencio Ferreira Lima.pdf: 1462177 bytes, checksum: 77d2db37110891a6e2a4fd1fdafe1015 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-08T13:12:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Elizabeth Hortencio Ferreira Lima.pdf: 1462177 bytes, checksum: 77d2db37110891a6e2a4fd1fdafe1015 (MD5) Previous issue date: 2013-02-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / This study aimed to investigate the effect of administration of sodium monensin in the diet on blood metabolites and rumen of ewes before, during and pospartum, due to the complexity that this period is due to anatomical changes, physiological and metabolic changes in female to meet the higher demand for energy growth of the fetus and lactation. A prospective study was conducted involving 13 sheep, in order to evaluate the effect of monensin supplemented from 60 days before calving (dap), on the hormonal and metabolic profile in periods of antepartum and postpartum. We used 13 Santa Inês sheep, pregnant, clinically healthy. Two groups were formed randomly, a control group receiving bulky, balanced feed and mineral salt and another group that received beyond bulky, balanced ration containing 30 mg monensin / day and mineral salt with monensin. Blood and ruminal fluid were collected at 60, 50, 40, 30, 20, 10 days before delivery, at birth and at 10, 20 and 30 days postpartum. We conducted the CBC and biochemical measurement of the following variables: glucose, non-esterified fatty acids (NEFA), β-hydroxybutyrate, cholesterol, triglycerides, fructosamine, total protein, albumin, urea, creatinine and research ketone bodies in urine. Enzyme activity by aspartate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (ALP), gamma glutamyl transferase (GGT), creatine kinase (CK) and hormonal determinations of cortisol and insulin. In the analysis of ruminal fluid pH were determined, proof of reduction of methylene blue (PRAM), the infusoria, the chloride content and the concentration of volatile fatty acids (VFA) (acetic, propionic and butyric). Statistical analysis was employed ANOVA and correlation study (P<0,05). With regard to haematological values in different physiological periods studied, there was no significant difference (P> 0,05), except for the white blood count revealed a mild leukocytosis with neutrophilia at birth significantly (P <0,05) in two groups. The enzymatic activity of AST levels were more elevated in the control group (P<0,05) during the postpartum period and significant differences were also recorded between groups, no 10 dpp and 20 dpp (P<0,05) and higher in the control group compared to monensin. There was no difference in cholesterol (P>0,05). Effect of time (P<0,05) was observed with respect to triglycerides in both groups, being higher in the pre-partum. Monensin significantly (P<0,05) increased concentration of propionate in the rumen, fructosamine and insulin. Little effect was observed for glucose, NEFA and BHB. No treatment effect (P>0,05) was observed for pH, chloride and diatomaceous the rumen, and the protein profile. The administration of monensin in ewe in the period before the birth did not influence the indicators hematologic and enzymatic activity, but caused improvement in some indicators of energy balance, this result is considered important for the prevention of metabolic diseases associated with energy deficit that occurs this period, such as toxemia of pregnancy. / Este estudo teve por objetivo estudar o efeito da administração da monensina sódica na dieta sobre os metabólitos sanguíneos e ruminais de ovelhas antes, durante e após o parto, em razão da complexidade que representa este período devido às modificações anatômicas, fisiológicas e metabólicas na fêmea para atender a maior demanda energética para o crescimento dos fetos e a lactação. Um estudo prospectivo foi realizado envolvendo 13 ovelhas, com o intuito de avaliar o efeito da monensina, suplementada a partir de 60 dias antes do parto (dap), sobre o perfil metabólico e hormonal nos períodos do pré-parto e pós-parto. Foram utilizadas 13 ovelhas da raça Santa Inês, prenhes, clinicamente sadias. Dois grupos foram formados aleatoriamente, um grupo controle recebendo volumoso, ração balanceada e sal mineral e outro grupo que recebeu além do volumoso, ração balanceada contendo 30 mg de monensina/dia e sal mineral com monensina. Amostras de sangue e fluido ruminal foram colhidas aos 60, 50, 40, 30, 20, 10 dias antes do parto, no momento do parto e aos 10, 20 e 30 dias pós-parto. Foi realizado o hemograma e mensuração das seguintes variáveis bioquímicas: glicose, ácidos graxos não esterificados (AGNE), β-hidroxibutirato, colesterol, triglicerídeos, frutosamina, proteína total, albumina, uréia, creatinina e pesquisa de corpos cetônicos na urina. Atividade enzimática através da aspartato aminotransferase (AST), fosfatase alcalina (FA), gama glutamiltransferase (GGT), creatino quinase (CK) e determinações hormonais de cortisol e a insulina. Na análise do fluido ruminal foram determinados o pH, a prova de redução do azul de metileno (PRAM), os infusórios, o teor de cloretos e a concentração dos ácidos graxos voláteis (AGV) (acético, propiônico e butírico). A análise estatística foi empregada a ANOVA e um estudo de correlação (p<0,05). Com relação aos valores hematológicos nos diferentes períodos fisiológicos estudados, não foi observado diferença significativa (P>0,05), com exceção do leucograma que revelou uma discreta leucocitose por neutrofilia no momento do parto de forma significativa (P<0,05) nos dois grupos. A atividade enzimática da AST apresentou-se mais elevada no grupo controle (P<0,05) durante o pós-parto e diferenças significativas também foram registradas entre os grupos, no10 dpp e 20 dpp (P<0,05) sendo mais elevada no grupo controle quando comparada ao monensina. Não houve diferença nos valores de colesterol (P>0,05). Efeito de momento (P<0,05) foi observado com relação aos triglicerídeos nos dois grupos, sendo mais elevados no período pré-parto. A monensina influenciou significativamente (P<0,05) elevando a concentração do propionato no rúmen, frutosamina e insulina. Pouco efeito foi constatado para a glicose, BHB e AGNE. Nenhum efeito do tratamento (P>0,05) foi observado para o pH, teor de cloretos e os infusórios do rúmen, e para o perfil proteico. A administração da monensina nas ovelhas no período que antecede ao parto não influenciou os indicadores hematológicos e a atividade enzimática, porém provocou melhora em alguns indicadores do balanço energético, este resultado é considerado importante para a prevenção de doenças metabólicas, associadas ao déficit energético que ocorre neste período, como a toxemia da prenhez.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T12:03:21Z No. of bitstreams: 1 Flavia Camila Siqueira Pereira Ramalho.pdf: 838412 bytes, checksum: e92375da22d319dd80763723a0bdbfbf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T12:03:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Flavia Camila Siqueira Pereira Ramalho.pdf: 838412 bytes, checksum: e92375da22d319dd80763723a0bdbfbf (MD5) Previous issue date: 2015-02-09 / In vitro embryo production (IVP) in cattle became an important commercial tool in genetic improvement programs of the world herd, being widely used for this purpose. However in vitro fertilization (IVF) can cause generation of reactive oxygen species that can affect embryo viability. Coenzyme Q10, an important cofactor in the transport chain of mitochondria has antioxidant function on lipid membrane and it was proved a direct correlation between the presence of Coenzyme Q10 and normal spermatozoa parameters such as density, motility, morphology and volume. The objective of this study was to evaluate the effect of Coenzyme Q10 on sperm function in IVF using conventional or sexed semen; also if the addition of this cofactor can improve embryo IVP in bovine oocytes. In experiment 1 was evaluated the effect of sperm function during incubation periods of sexed and conventional semen samples. In experiment 2, IVF medium was supplemented with 0 (control group), 5 μM, 10 μM, 20 μM of Coenzyme Q10. Bovine oocytes were collected from a slaughterhouse located 20 minutes from the lab. It was observed a negative effect of Coenzyme with significant differences in the rates of cleavage or in the production of blastocyst (p< 0.05) at a concentration of 20 μM when compared with all other groups with either sexed as conventional semen. These results demonstrate that supplementation of the Coenzyme Q10 in the IVF medium, do not alter spermatozoa function. We can also infer that there is a tendency to improve embryo production in the concentration of 5 μM in IVF medium. / A produção de embriões in vitro (PIV) em bovinos tornou-se importante ferramenta comercial nos programas de melhoramento genético do rebanho mundial como técnica de multiplicação, sendo amplamente utilizada para esse fim. Entretanto a Fertilização in vitro (FIV) provoca geração de espécies reativas de oxigênio que podem afetar a viabilidade embrionária. A Coenzima Q10, um cofator de importância na cadeia de transporte das mitocôndrias tem função antioxidante na membrana lipídica e foi verificado uma correlação direta entre a Coenzima e os parâmetros normais de sêmen tais como, densidade, motilidade, morfologia e o volume. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da Coenzima Q10 na função espermática em FIV utilizando-se sêmen convencional e sexado; e se a adição desse cofator pode melhorar a produção embrionária in vitro de oócitos bovinos. No Experimento o meio de FIV foi suplementado com 0 (grupo controle), 5 μM, 10 μM, 20 μM da Coenzima Q10. Os Oócitos foram coletados de um abatedouro localizado a 20 minutos do laboratório. Foi observado um efeito deletério da coenzima com diferença significativa nas taxas de clivagem ou na produção de blastocisto (p<0,05) na concentração de 20 μM quando comparado com os demais grupos tanto com sêmen sexado como convencional. Estes resultados demonstram que a suplementação da Coenzima Q10 no meio FIV não altera a função espermática, entretanto tem um efeito deletério a partir da concentração de 20 μM. Podemos ainda inferir que na concentração de 5 μM no meio FIV há uma tendência na melhoria da produção embrionária.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-09T13:17:15Z No. of bitstreams: 1 Izildo Ferreira da Silva Neto.pdf: 850238 bytes, checksum: 4039b570d51165ae86b4f8afb20d7ab8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-09T13:17:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Izildo Ferreira da Silva Neto.pdf: 850238 bytes, checksum: 4039b570d51165ae86b4f8afb20d7ab8 (MD5) Previous issue date: 2011-12-07 / In order to evaluate the metabolic response of native sheep and goats fed Tifton 85 hay (Cynodon dactylon) or Maniçoba hay (Manihot pseudoglaziovii) associated with cactus pear (Nopalea cochenillifera), with a total of 32 animals (16 sheep and 16 goats Morada Nova Moxotó) in randomized block design. Blood samples were collected every two weeks, divided into four samples. Were analyzed creatinine, urea, total protein, albumin, globulin, glucose, fructosamine, AST, GGT, alkaline phosphatase, sodium, potassium and chlorine. Sheep consuming Tifton hay had a higher blood urea concentration and goats consuming maniçoba hay had higher total protein and fructosamine concentration and higher GGT activity when consumed Tifton hay. The animals of both species had increased plasma concentration glucose and serum alkaline phosphatase activity, and decreased serum sodium concentration. It was observed a positive linear effect in serum urea (P <0.0007), plasma glucose (P <0.0129), serum fructosamine (P <0.0001), serum alkaline phosphatase activity (P <0.0001) and serum sodium (P <0.0001), but with a quadratic effect on serum potassium (P <0.0012) in the sheeps. It was observed a linear effect in the activity of serum GGT (P <0.0001) and serum potassium (P <0.0272), whereas a quadratic effect was recorded for serum urea (P <0.0007) in the goats. Sheep and goats respond satisfactorily to the diets with replacement of Tifton 85 by Maniçoba hay, associated with the cactus. Greater alkaline phosphatase activity was observed in sheep and goats receiving both diets throughout time. These data serve as reference values for nutrition and metabolic profile studies of sheep and goats, particularly in relation to the values of fructosamine for goats. / Objetivou-se avaliar a resposta metabólica de ovinos e caprinos nativos, alimentados com feno de Tifton 85 (Cynodon dactylon) ou feno de Maniçoba (Manihot pseudoglaziovii) associados à palma forrageira (Nopalea cochenillifera). Foram utilizados 32 animais (16 ovinos Morada Nova e 16 caprinos Moxotó) em delineamento em blocos casualizados. Amostras de sangue foram coletadas quinzenalmente, constituindo-se quatro coletas. Foram analisados creatinina, uréia, proteína total, albumina, globulina, glicose, frutosamina, aspartato aminotransferase (AST), γ-glutamil transferase (GGT), fosfatase alcalina, sódio, potássio e cloro. Ovinos consumindo feno de tifton tiveram maior concentração de uréia no sangue e caprinos consumindo feno de maniçoba tiveram maior concentração de proteína total, frutosamina e GGT quando consumiram feno de tifton. Os animais de ambas as espécies tiveram aumento da glicose plasmática e de fosfatase alcalina, e diminuição da concentração de sódio sérico. No grupo dos ovinos, efeito linear positivo foi observado na concentração sérica de uréia (P<0,0007), glicose plasmática (P<0,0129), frutosamina (P<0,0001), atividade da fosfatase alcalina (P<0,0001) e sódio (P<0,0001), porém com efeito quadrático para o potássio (P<0,0012). No grupo dos caprinos, efeito linear negativo foi observado na atividade da GGT (P<0,0001) e concentração de potássio (P<0,0272), enquanto que efeito quadrático foi registrado para a concentração sérica de uréia (P<0,0007). Ovinos e caprinos respondem satisfatoriamente às dietas com substituição do feno de Tifton 85 pelo feno de Maniçoba, associado à palma forrageira. Grande atividade da fosfatase alcalina é observada em ovinos e caprinos recebendo tais dietas ao longo do tempo. Os dados servem como valores de referência para estudos sobre nutrição e perfil metabólico de ovinos e de caprinos, particularmente em relação aos valores de frutosamina para caprinos.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-10T14:31:41Z No. of bitstreams: 1 Vania Freire Lemos.pdf: 1507844 bytes, checksum: cbb75eb979bd39586c08dadf5aea6579 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-10T14:31:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vania Freire Lemos.pdf: 1507844 bytes, checksum: cbb75eb979bd39586c08dadf5aea6579 (MD5) Previous issue date: 2013-02-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The objective of this work was to evaluate dynamics of the proteinogram of blood serum and whey protein of Santa Ines sheep breed following the antipartum period and during lactation, and to compare/to quantify proteins detected at eletrophoresis of the whey protein from healthy and infectious mammary glands in different phases of lactation. Thrirty four sheeps submitted to half-intensive system with same sanitary and nutritional management has been followed. For accomplishment of proteinogram of the sheep, they had been investigated during approximately 10 days from antipartum and 15, 30, 60 and 90 days postpartum, moments where clinical examination of mammary gland was carried through. Blood serum was evaluated at antipartum moment and proteinogram of whey protein at subsequent moments. Bacteriological culture and biochemist characterization of milk samples for confirmation of healthy and infected glands was performed. Separation of protein fractions was carried through using sodium dodecil sulphate polyacrylamide gel eletrophoresis (SDS-PAGE). For the blood serum it was observed quantification of nine proteins with significant influence in IgG. At whey protein, influence of the phases of lactation was identified eigth proteins, having albumin, IgG and β - lactoglobulin.. Comparing healthy and infected glands it was verified that hatptoglobin and α-1 acid glycoprotein, lactoferrin, albumin and immunoglobulins IgA and IgG in whey protein act as potentials biomarkers of infection in mammary gland of ovine species. / Objetivou-se neste trabalho avaliar a dinâmica do proteinograma do soro sangüíneo e lácteo de ovelhas da raça Santa Inês acompanhadas no período que antecedeu o parto e durante a lactação e comparar/quantificar as proteínas detectadas no traçado eletroforético do soro lácteo de glândulas mamárias sadias e infectadas em diferentes fases da lactação. Foram acompanhadas 34 ovelhas submetidas ao sistema de criação semi-intensivo, com mesmo manejo higiênico, sanitário e nutricional. Para a realização do proteinograma as ovelhas foram investigadas durante, aproximadamente 10 dias que precedeu o parto e 15, 30, 60 e 90 dias após o parto, momentos em que foi realizado o exame clínico da glândula mamária. O proteinograma sangüíneo foi efetuado a partir do momento pré parto e o proteinograma do soro lácteo nos momentos subseqüentes. Realizou-se o cultivo bacteriológico e a caracterização bioquímica das amostras de leite para confirmação de glândulas sadias e infectadas. A separação das frações protéicas foi realizada utilizando-se eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Para o soro sanguíneo observou-se a quantificação de nove proteínas observando influência significativa somente na IgG; no soro lácteo identificou-se oito proteínas havendo influência das fases de lactação na albumina, IgG e β - lactoglobulina. Ccomparando glândulas sadias e infectadas verificou-se que a hatptoglobina, α-1 glicoproteína ácida, lactoferrina, albumina e as imunoglobulinas IgA e IgG presentes no soro lácteo atuam como biomarcadores de infecção na glândula mamária na espécie ovina.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-10-09T12:50:08Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline Luciana Rodrigues - 2011.pdf: 1902000 bytes, checksum: f7591f34d543c33bcea4f08d4cb14fa8 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-10-09T14:43:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline Luciana Rodrigues - 2011.pdf: 1902000 bytes, checksum: f7591f34d543c33bcea4f08d4cb14fa8 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:43:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Aline Luciana Rodrigues - 2011.pdf: 1902000 bytes, checksum: f7591f34d543c33bcea4f08d4cb14fa8 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2011-04-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The interest in the preservation of species threatened of extinction has increased the attention for cryopreservation of semen from the epididymis tail of animals that have died. Determination of the time in which the sperm is still viable for preservation represents a benefit for future research and use in animal-assisted breeding programs. In addition, the sperm cryopreservation process results in the production of radical free by the metabolism of the cell causing damage. The objectives of this study were: 1) to determine the viable time interval for cryopreservation of the epididymis tail sperm in cattle, 2) to test the addition of two antioxidants in the freezing media, 3) to determine the viability of semen samples from the tail of the epididymis in the production of embryos by in vitro fertilization. To guarantee the quality of freezing, the parameters: motility, vigor and sperm pathology in the pre-freezing were analyzed. After these assessments the material was divided into three treatments: tris-egg yolk diluent (TTG), Tris-egg yolk diluent catalase (TCAT) and tris-egg yolk diluent trolox (TTROL) and frozen in determined curve by pre-freezing automated process. After thawing, the motility and vigor were evaluated using CASA. Analysis of plasma membrane integrity and acrosome, test resistance thermometer (TTR), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), oxidation of 3,3 'diaminobenzidine (DAB) and in vitro fertilization (IVF) were also evaluated. According to the movement patterns analyzed using CASA, the analysis of data generated by the study allow us to conclude the characteristics of sperm in each treatment and it change on the different times of cooling (0h, 24h, 48h and 72h). In the assessment of integrity (INT) and injured sperm (LS), no statistical differences between the moments or between treatments were observed. Rates of cleavage D7 and D8 were statistically different, at 72 hours the trolox showed negative action. The results shown indicate that this procedure is important for conservation of animals of high genetic value or animals endangered that die suddenly. Further studies should be performed testing associations of antioxidants directly in the middle of fertilization and embryo culture, especially in production systems of embryos with high oxygen tension, as used in this experiment. xxii / O interesse pela preservação de espécies em risco de extinção tem aumentado a atenção pela criopreservação de sêmen da cauda do epidídimo de animais que morrem subitamente. A determinação do momento até quando os espermatozóides estão viáveis para preservação representa um benefício para pesquisas futuras e sua utilização em programas de reprodução animal assistida. Além disso, o processo de criopreservação dos espermatozóides resulta na produção de radicais livres pelo próprio metabolismo desta célula e causando danos. Os objetivos deste estudo foram: 1) determinar o intervalo de viabilidade de resfriamento de espermatozóides da cauda do epidídimo de bovinos, 2) testar o efeito da adição de dois antioxidantes nos meios de congelação, 3) determinar a viabilidade das amostras de sêmen da cauda do epidídimo na produção de embriões por fertilização in vitro. Para garantia da qualidade da congelação foram realizadas análises de motilidade, vigor, patologia espermática, no momento pré-congelação. Após estas avaliações o material foi dividido em três tratamentos: diluente tris-gema-glicerol (TTG), diluente tris-gema-glicerol com catalase (TCAT) e diluente tris-gema-glicerol com trolox (TTROL) e congelados em curva pré-determinada por processo de congelação automatizada. Após a descongelação foram avaliadas a motilidade e vigor com auxílio do CASA, análises de integridade de membrana plasmática e acrossoma, teste de termorresistência (TTR), substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARs), oxidação da 3,3’ diaminobenzidina (DAB) e fertilização in vitro (FIV). De acordo com os padrões de movimentos observados pelo CASA, a análise dos dados gerados pelo estudo nos possibilitam concluir as características dos espermatozóides em cada tratamento e como se comportaram nos momentos de resfriamento logo após o abate, 24 horas, 48 horas e 72 horas após resfriamento à 5ºC ( 0h, 24h, 48h e 72h). O uso dos antioxidantes não garantiu melhor proteção e nem auxílio na funcionalidade dos espermatozóides do epidídimo nos diferentes períodos de resfriamento. lulas imóveis) não houve diferenças estatísticas. Nas taxas de clivagem D7 e D8 foram observadas diferenças estatísticas, o α-tocoferol no momento 72 h demonstrou ação negativa. Os resultados demonstrados revelaram que tal procedimento é de suma importância para conservação de animais de alto xx valor genético ou animais em risco de extinção que morrem subitamente. Novos estudos devem ser realizados testando associações de antioxidantes ou o uso de antioxidantes diretamente no meio de fecundação e cultivo embrionário, especialmente em sistemas de produção de embriões com alta tensão de oxigênio, como o utilizado neste experimento.

Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-07-29T11:27:56Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_PrevalenciaAlteracoesClinicas.pdf: 2928353 bytes, checksum: 6b700b17c1697cc16689d63072f31639 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2014-08-28T14:58:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_PrevalenciaAlteracoesClinicas.pdf: 2928353 bytes, checksum: 6b700b17c1697cc16689d63072f31639 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-28T14:58:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_PrevalenciaAlteracoesClinicas.pdf: 2928353 bytes, checksum: 6b700b17c1697cc16689d63072f31639 (MD5) Previous issue date: 2007 / Com o objetivo de se verificar a prevalência das enfermidades causadoras da infertilidade, examinaram-se clinicamente 895 búfalas, procedentes do município de Cutias do Araguari, Estado do Amapá. Realizaram-se exames ginecológicos e testes para detecção de tuberculose e brucelose, e analisaram-se 1000 peças de genitais de búfalas abatidas em matadouro. A prevalência de tuberculose e brucelose a nível de campo foi de 9,33% e 9,11%, respectivamente. Das 895 búfalas examinadas, 299 (33,41%) encontravam-se gestantes, sendo que 188 (62,88%) no corno direito e 111 (37,12%) no corno esquerdo. No grupo de búfalas com alterações, foram constatadas os seguintes distúrbios: a) alterações ovarianas: ovários afuncionais, 75 (8,37%); cisto folicular, 6 (0,67%); b) alterações no oviduto: aderências focais, 24 (2,9%); aderências difusas, 22 (2,46%); hidrossalpinge, 8 (0,9%); c) alterações no útero e cérvice: endometrite crônica suave, 5 (0,56%); endometrite crônica moderada, 7 (0,78%); cérvice irregular, 14 (2,9%); d) alterações da vulva e da vagina: vulva dilacerada, 9 (1,1%) num total de 172 (19,21%) vacas com alguma alteração. Nas análises realizadas em matadouro foram evidenciadas 661 (66,10%) animais gestantes, sendo que destes 86 (8,6%) apresentavam alguma alteração e 339 (33,9%) animais não gestantes, sendo 74 (7,4%) com alguma alteração. Das 661 gestantes, 412 (62,3%) foram do corno direito e 249 (37,7%) do corno esquerdo. As alterações encontradas foram: a) alterações ovarianas: ovários afuncionais, 16 (1,6%); cisto para-ovárico, 5 (0,5%); cisto de inclusão epitelial, 8 (0,8%); cisto folicular, 1 (0,1%); b) alterações da tuba uterina: hidrossalpinge, 18 (1,8%); cisto tubo-ovárico, 5 (0,5%); aderências focais, 70 (7,0%); aderências difusas, 21 (2,1%); c) alterações do útero e cérvice: endometrites, 9 (0,9%); perimetrite, 3 (0,3%); adenomiose, 1 (0,1%); aplasia segmentar do útero, 1 (0,1%); gestação gemelar, 1 (0,1%); cérvice irregular, 1 (0,1%). A maior porcentagem de fetos estavam no terço final da gestação com 236 (35,65%) casos. Pode-se concluir que inúmeros são os problemas que podem afetar a fertilidade das búfalas e que cabe uma identificação destes para resolver problemas de produtividade do rebanho. / Objecting to find out the prevalence of infertility diseases, 895 buffalo cows were submitted to clinical examination with main emphasis on the gynecological aspects and tuberculosis and brucellosis tests, located in Cutias do Araguari country, Amapá State, and analyzed 1000 genitals slaughtered buffalo cows. The prevalence of tuberculosis and brucellosis on clinical analysis were 9,33 and 9,11% respectively. On 895 clinical examined buffalos cows, 299 (33,41%) were pregnant, 188 (62,88%) on the right horn and 111 (37,12%) on left horn. On the buffalo cows group with some alteration, were discovered the following disorders: a) abnormal ovaries: non-functional ovaries, 75 (8,37%); follicular cysts, 6 (0,67%); b) oviduct abnormalities cases: slight adhesions, 24 (2,9%); severe adhesions, 22 (2,46%); hydrosalpinge, 8 (0,9%); c) uterine and cervical abnormalities cases: slight chronic endometrititis, 5 (0,56%); moderate chronic endometritis, 7 (0,78%); irregular cervix, 14 (2,9%); d) Vaginal and vulvar abnormalities cases: lacerated vulva, 9 (1,1%); totalizing 172 (19,21%) buffalo cows with some abnormalities. On the slaughtered buffalo cows were evidenced 661 (66,10%) of pregnancy buffalo cows, that 86 (8,6%) with some reproductive disorder and 339 (33,90%) not pregnancy buffalo cows with 74 (7,4%) with some reproductive disorder. In 661 pregnancy, 412 (62,3%) were in right horn and 249 (37,7%) on left horn. The reproductive abnormalities found were: a) ovarian abnormalities cases: non-functional ovaries, 16 (1,6%); para-ovarian cysts, 5 (0,5%), epithelial inclusion cysts, 8 (0,8%); follicular cysts, 1 (0,1%); b) oviductal abnormalities cases: hydrosalpinge, 18 (1,8%); tubo-ovarian cysts, 5 (0,5%); slight adhesions, 70 (7,0%); severe adhesions 21 (2,1%); c) uterine and cervical abnormalities: entometritis, 9 (0,9%); perimetritis, 3 (0,3%); adenomiosis, 1 (0,1%); segmental aplasia of uterus, 1 (0,1%); twining, 1 (0,1%); irregular cervix, 1 (0,1%). The major percentage of fetus were found on final third of gestation with 236 (35,65%) cases. Several are the problems that can affect the fertility of buffaloes cows and we need to identify it to solve the problems of productivity.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-05T11:40:59Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_EfeitoCortisolProducao.pdf: 2760412 bytes, checksum: a1460a5384d94a66d0634ae0ee2cb14d (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-09T20:48:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_EfeitoCortisolProducao.pdf: 2760412 bytes, checksum: a1460a5384d94a66d0634ae0ee2cb14d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-09T20:48:49Z (GMT). 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A fim de verificar a funcionalidade de GR no desenvolvimento embrionário préimplantacional, a tradução do RNAm para GR foi silenciada em zigotos pela técnica de RNAi, e o desenvolvimento embrionário subsequente foi analisado. A diminuição de transcrito e proteínas de GR pela técnica de RNAi prejudicou o desenvolvimento embrionário (p<0,05. A presença de GR em oócito e células do cumulus nos indica que essas células são sensíveis ao uso de GC. Visto isso, no ARTIGO 2 foi avaliado o efeito de diferentes concentrações do cortisol durante a maturação in vitro (MIV) de oócitos bovinos sobre o desenvolvimento embrionário, índice de apoptose e expressão de gênica (NRF1, COX, TFAM, GLUT1, FASN e HSP70). As concentrações de cortisol utilizadas foram 0,01; 0,1 e 1 μg/mL.. Não houve diferença estatística em relação ao número de células e taxa de clivagem, porém a concentração de 0,1 μg/ml de cortisol aumentou a taxa de blastocisto quando comparada ao grupo controle (sem cortisol na MIV) (41 ± 10 versus 21 ± 1,2; p<0,05; respectivamente). A taxa de apoptose e a expressão gênica em oócitos, células do cumulus, e blastocistos foi avaliada apenas na concentração de 0,1 μg/ml de cortisol. Não houve diferença estatística com relação ao índice apoptótico, e nem com relação à expressão gênica em oócitos e células do cumulus para os genes COX, NRF1, HSP70 e FASN (p>0,05). Em relação à expressão gênica embrionária, apenas as quantificações relativas de RNAm para FASN, GLUT1 e HSP70 estavam aumentadas nos blastocistos tratados com 0,1μg/mL durante a MIV quando comparados aos embriões do grupo Controle (p<0,05), os demais genes não mostraram alteração (p>0,05). No ARTIGO 3 foi analisado o uso do cortisol durante o cultivo in vitro (CIV) de embriões bovinos. Visto que no Capítulo 1 foi identificado GR em todos os estádios de desenvolvimento embrionário e quando a expressão de GR foi silenciada o desenvolvimento embrionário foi prejudicado. Sendo assim, no experimento 3 foram adicionadas diferentes concentrações (0,01; 0,1 e 1 μg/mL) de cortisol na CIV e o desenvolvimento embrionário foi avaliado, mesmos parâmetros do Capítulo 2. Não houve diferença estatística nos embriões tratados com Cortisol em diferentes concentrações quando comparados com o Controle para nenhum dos parâmetros analisados (p>0.05). A concentração de 0,1 μg/mL foi escolhida para avaliar outros parâmetros de qualidade embrionária. Sendo assim, embriões CIV Com ou Sem 0,1 μg/mL de Cortisol, foram analisados quanto à taxa de apoptose e expressão gênica, não sendo observada diferença estatística em nenhuma das análises (p>0,05). Após estes estudos concluímos que oócitos e embriões são responsivos a GC, que a adição de cortisol na MIV melhora a competência oocitária, porém a suplementação com cortisol na CIV não influenciou o desenvolvimento embrionário. / The aim of this thesis was to evaluate the effect of cortisol in oocyte maturation and bovine embryo culture. In Chapter 1 we analyzed the distribution and location of glucocorticoid receptor (GR) by immunocytochemistry in oocytes, cumulus cells, embryonic cells 2-4, 8-16 cell, morula and blastocyst, and was also verified the presence of mRNA (qualitative RT-PCR) for GR in the stages. The results showed that the GR is present in all cells analyzed. In order to verify the functionality GR in preimplantation embryo development, translation of mRNA for GR zygotes was silenced in the RNAi technique, and subsequent embryo development was analyzed. The embryonic development decreased (P <0.05) after silencing of GR mRNA. The presence of GR oocyte and the cumulus cells indicates that these cells are sensitive to the use of CG. Given this, in Chapter 2, the effects of different cortisol concentrations during in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes and embryonic development, apoptosis rate and gene expression (NRF1, COX, TFAM, GLUT1, FASN and HSP70) were analiyzed. The concentrations of cortisol used were 0.01, 0.1 and 1 mg / mL . There was no statistical difference in the number of cells and cleavage rate, but the concentration of 0.1 mg/ml of cortisol increased the blastocyst rate when compared to the control group (without cortisol in IVM) (41 ± 10 versus 21 ± 1.2; p <0.05, respectively). The rate of apoptosis and gene expression in oocytes, cumulus cells and blastocysts was only assessed at a concentration of 0.1 mg / ml of cortisol. There was no statistical difference in the apoptotic index, and not with respect to gene expression in oocytes and cumulus cells for COX genes, NRF1, HSP70 and FASN (p> 0, 05). Regarding embryonic gene expression, only the measurements relative mRNA FASN, GLUT1 and HSP70 were increased in blastocysts treated with 0.1 g/ml during IVM when compared to embryos of the Control group (p <0.05), the other genes showed no change (p> 0.05). In Chapter 3, we investigated the use of cortisol during in vitro culture (IVC) of bovine embryos. As in Chapter 1 was identified GR in all embryonic stages and when the GR expression was silenced and embryonic development was impaired. Thus, in the experiment three different concentrations (0.01, 0.1 and 1 mg / mL) of cortisol in IVC and embryonic development was evaluated same parameters of Chapter 2. There was no statistical difference in the embryos treated with cortisol in different concentrations when compared to the control for the parameters analyzed (p> 0.05). The concentration of 0.1 mg/ml was chosen to evaluate other parameters of embryo quality. Thus, IVC embryos with or without 0.1 mg/mL of cortisol, were analyzed for apoptosis rate and gene expression, not being statistically significant difference in any of the analyzes (p> 0.05). After these studies conclude that oocytes and embryos are responsive to GC, and the addition of cortisol in IVM improves oocyte competence, but the supplementation of IVC with cortisol may not have influence on embryo development.

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