Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2018-06-04T16:46:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tese_carlos_ferreira.pdf: 752331 bytes, checksum: 1791efb2b3372ab1fb6e88d0ec2a0e2f (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2018-06-05T11:53:24Z (GMT) No. of bitstreams: 2 tese_carlos_ferreira.pdf: 752331 bytes, checksum: 1791efb2b3372ab1fb6e88d0ec2a0e2f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-05T11:53:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tese_carlos_ferreira.pdf: 752331 bytes, checksum: 1791efb2b3372ab1fb6e88d0ec2a0e2f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / A fertilidade dos reprodutores é de suma importância para a maximização das taxas de prenhez e melhoramento genético. O exame andrológico é uma importante ferramenta para a identificação de reprodutores sub férteis e para o monitoramento da qualidade seminal. Porém, poucas características do exame estão correlacionadas com a fertilidade in vivo. Assim, é fundamental a identificação de métodos que possam auxiliar na seleção mais precisa dos futuros reprodutores. Os objetivos do primeiro trabalho foram avaliar as acurácias e o viés das predições genômicas, utilizando diferentes métodos, para a característica perímetro escrotal ajustado à idade e ajustado à idade e peso em touros das raças Hereford e Braford. Os valores estimados para a herdabilidade apresentaram magnitude moderada a alta (0,39 a 0,48), demonstrando que é possível a obtenção de ganhos genéticos a partir da seleção. A predição de valores genéticos utilizando informações genômicas pelos métodos índice de seleção e single-step possibilitou o aumento de acurácia (em torno de 30%) para as características estudadas. Os ganhos de acurácia obtidos com os métodos, combinando as informações tradicionais com a genômica em relação ao método BLUP tradicional indicam que as predições genômicas podem ser usadas como ferramenta para melhorar os ganhos genéticos e reduzir o intervalo de gerações. Já o segundo artigo teve como objetivos: determinar a expressão de RNAm das paraoxonases (PON) 1, 2 e 3 no parênquima testicular, vesículas seminais e epidídimo de touros, avaliar a atividade de PON1 na circulação sanguínea e no plasma seminal; e correlacionar esta atividade com características avaliadas durante o exame andrológico. A caracterização da expressão dos genes foi realizada por qRT-PCR e a determinação da atividade de PON1 foi realizada em amostras de soro e plasma seminal provenientes de 110 touros. As PON 1, 2 e 3 foram expressas no parênquima testicular dos animais analisados. Observou-se uma correlação positiva entre a atividade sérica e seminal de PON1 com diversos indicadores de fertilidade. / Male fertility is important to optimize pregnancy rates and genetic improvement. Breeding soundness evaluations are key tools to identify sub fertile males and to survey characteristics of sperm quality. However, few sperm quality traits are correlated with fertility in vivo. Thus, it is essential to identify methods that can assist in more precise selection of future bulls. The goals of the first study were to evaluate the accuracy and the bias of the genomic predictions, using different methods, for the characteristic scrotal perimeter adjusted to age and adjusted to age and weight in Hereford and Braford bulls. The estimates for the heritability showed moderate to high magnitude (0.39 to 0.48), demonstrating that it is possible to obtain genetic gains from selection. The prediction of genetic values using genomic information by methods of selection index and single-step made possible the increase of accuracy (around 30%) for the characteristics studied. The gains in accuracy obtained with the methods, combining the traditional with the genomic information compared to traditional BLUP method indicate that the genomic predictions can be used as a tool to improve the genetic gains and reduce the range of generations. The second article had as its objectives: to determine the mRNA expression of paraoxonases (PON) 1, 2 and 3 in the testicular parenchyma, seminal vesicles, and epididymis of bulls, to evaluate the activity of PON1 in the bloodstream and in seminal plasma; and to correlate that activity with characteristics of breeding soundness. Characterization of gene expression by qRT-PCR and the determination of PON1 activity were performed in serum and seminal plasma from bulls 110. The PON 1, 2 and 3 were expressed in testicular parenchyma of the animals examined. There was a positive correlation between activity and serum PON1 seminal with different breeding soundness estimators.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_daniel_savio.pdf: 201214 bytes, checksum: f8921438dab6324aed14b7b44d06de38 (MD5) Previous issue date: 2011-12-15 / The use of artificial insemination (AI) with heterospermic doses (Het) in swine may benefit reproductive performance by diluting individual differences among boars. However, such practice may also mask the true reproductive potential of some individuals, which can be measured through homospermic AI (Hom). This study evaluated boar reproductive performance after AI with Hom and Het doses. Ejaculates were collected from 4 boars and combined in 10 treatments: 4 with Hom doses (boars A, B, C and D) and 6 with Het doses (AB, AC, AD, BC, BD and CD) all having concentration of 3 billion spermatozoa in 80 mL doses with equal contribution of each boar. The in vitro analyses of sperm quality were: sperm membrane, DNA and acrossome integrity; mitochondrial functionality; and in vitro oocyte penetration. Thereafter, 511 females having parities from 1 to 6 were inseminated and the farrowing rate (FR) and total litter size (TB) were recorded. Both FR (Hom = 90.5% and Hem = 89.9%), and TB (Hom = 12.4 ± 0.4 and Het = 12.7 ± 0.7) did not differ (P>0,05). Some differences were observed among treatments, such as: the maximum FR (98.0%) for treatment AC and the minimum (87.0) for boar B; and a difference of two piglets among the maximum (for the CD treatment) and the minimum observed value (for the AC treatment). The only difference observed on the in vitro evaluations (P<0.05), occurred for the in vitro oocyte penetration by sperm from boars B (56.4%) and C (29.0%). No differences were detected in reproductive performance after AI using homospermic and heterospemic doses. / A utilização de inseminação artificial (IA) com doses heterospérmicas (Het) pode ser benéfica para a suinocultura, por diluir deficiências individuais entre o desempenho reprodutivo de machos. No entanto, esta prática pode mascarar o potencial reprodutivo de outros reprodutores, o que poderia ser avaliado com o uso de inseminação artificial com doses homospérmicas (Hom). Este trabalho avaliou o desempenho reprodutivo de machos suínos após IA com doses Hom e Het. Ejaculados colhidos de 4 machos foram combinados em 10 tratamentos: 4 com doses Hom (machos A, B, C e D) e 6 com doses Het (AB, AC, AD, BC, BD, e CD), todos com concentração de 3 bilhões de espermatozóides em doses de 80 mL, com contribuição igual de cada macho. Realizaram-se testes para analise de integridade da membrana, do DNA espermático e do acrossoma, da funcionalidade da mitocôndria e da penetração ovocitária in vitro. Foram inseminadas 511 fêmeas de ordem de parto de 1 a 6. A taxa de parição (TP) e o número total de leitões nascidos por parto (TN) foram registrados. Tanto a TP (Hom = 90,5% e Het = 89,9%), quanto o TN (Hom = 12,4 ± 0,4 e Het = 12,7 ± 0,7), não diferiram (P>0,05). Foram observadas algumas diferenças entre os tratamentos, como a TP máxima ocorrendo para o tratamento AC (98.0%) e uma TP mínima de 87.0% para o macho B (P<0.05). Quanto ao TN, uma diferença de 2,0 leitões foi observada entre o valor máximo (tratamento CD) e o mínimo (tratamento AC). Quanto às avaliações in vitro, foram observadas diferenças apenas quanto ao teste de penetração in vitro (P<0,05), entre os machos B (56,4%) e C (29,2%). Não foram detectadas diferenças no desempenho reprodutivo com IA com doses homo e heterospérmicas.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_simone_halfen.pdf: 955737 bytes, checksum: 7d2e65aa98a74306ae8fbeea421563a7 (MD5) Previous issue date: 2012-02-27 / The essential fatty acids alpha-linolenic acid (α-LNA 18:3 n-3) and linoleic acid (LA 18:2 n-6) fatty acids are precursors of polyunsaturated very long chain (PUFA-VLC) families omega-3 and omega-6. These fatty acids when consumed during pregnancy are important for brain development and adaptation of the retina and fetal tissues, influencing the metabolic pathways of fatty acids in the offspring. Based on this, we seek to verify the relationship of the influence of the ratio of omega 6/3 in the diet of pregnants with the metabolic profile of fatty acids and liver tissue in subsequent generations. For this we used 48 rats (Rattus norvegicus) Wistar, 36 females and 18 males for the founder generation (G0) with the control group (CONT) received a diet with fat source as soybean oil and omega group (OM) received the diet with linseed oil. From these groups, the animals were selected for the training of two generations (F1 and F2). The animals receiving the CONT followed the control diet while the OM group was divided into two new groups, one receiving control diet (OM/CONT) and the other keeping the feed omega (OM/OM). The incorporation of fatty acids (FA) of omega-3 was higher in liver of rats in the group OM, while the FA of omega-6 had a greater uptake of the liver tissue of the CONT group. A major change can be observed in the amount of oleic AG in liver tissue, since the merger occurred higher in the group CONT and the lowest in OM/CONT, demonstrating that the diet provided to the G0 may have somehow influenced the incorporation of generations F1 and F2. This remodeling enzyme was also sufficient to change the outcome of NEFA, which demonstrated decreased lower lipid mobilization in the same group. / Os ácidos graxos essenciais alfa-linolênico (α-LNA 18:3n-3) e linoléico (LA 18:2n-6) são precursores de ácidos graxos poli-insaturados de cadeia muito longa (AGPI-CML) das famílias ômega-3 e ômega-6. Estes ácidos graxos quando consumidos durante a gestação são importantes para o desenvolvimento do cérebro e retina e na adaptação de tecidos fetais, influenciando as vias metabólicas dos ácidos graxos na prole. Baseado nisso, buscou-se verificar a relação da influência da proporção ômega 6/3 na dieta da gestante com o perfil metabólico e de ácidos graxos do tecido hepático nas gerações subsequentes. Para isso foram utilizados 48 ratos (Rattus norvegicus) da cepa Wistar/UFPel, sendo 36 fêmeas e 12 machos para a geração fundador (G0), com o grupo controle (CONT) recebendo uma dieta tendo como fonte lipídica o óleo de soja e o grupo ômega (ÔM) que recebeu a dieta com óleo de linhaça. A partir destes grupos, os animais foram selecionados para a formação de mais duas gerações (F1 e F2). Os animais do CONT seguiram recebendo a dieta controle enquanto o grupo ÔM foi dividido em dois novos grupos, um recebendo dieta controle (ÔM/CONT) e o outro mantendo a dieta ômega (ÔM/ÔM). A incorporação de ácidos graxos (AGs) da família ômega-3 foi superior no fígado das ratas do grupo ÔM, enquanto os AGs da família ômega-6 tiveram uma maior incorporação do tecido hepático do grupo CONT. Uma mudança importante pode ser observada na quantidade do AG oléico no tecido hepático, pois a incorporação maior aconteceu no grupo CONT e a menor no ÔM/CONT, demonstrando que a dieta fornecida para a G0 pode ter influenciado de alguma forma a incorporação das gerações F1 e F2. Esta remodelação enzimática foi suficiente também para mudar o resultado do NEFA, que demonstrou menor mobilização lipídica no mesmo grupo.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_carlos_ferreira.pdf: 649296 bytes, checksum: 99fb2b37d32c0a7abfe862b1269cfdbf (MD5) Previous issue date: 2013-03-26 / The common use of pooled sperm doses (composed of sperm of two or more boars) in artificial insemination (AI) in swine limits the precise evaluation of individual boar fertility. Thus, marginal differences in potential fertility among boars are clouded by the use of heterospermic AI. This study had the objective of identifying the contribution of individual boars for the paternity of progeny generated by heterospermic AI. Four boars were used as sperm donors (A, B, C and D). After collection, ejaculates from those boars were used to compose homospermic and heterospermic doses (AB, AC, AD, BC, BD and CD), all including 3.0 x 109 spermatozoa in 80 ml. A total of 511 females were inseminated. The paternity of 4.119 piglets was determined through the use of SNP (Single nucleotide polymorphism) markers : 3.558 from heterospermic AI; and 461 from homospermic AI. The comparison of paternity per pool showed that the pool AC was the only one in which each boar contributed similarly for paternity (P > 0.05), whereas differences between boars occurred in all other pools (P < 0.05). The greatest contribution for paternity of piglets occurred for boar D, which sired nearly 60% of all piglets boar in the pools in which that boar took part. These results indicate that in most of the heterospermic AI, individual boars contribute distinctly for the paternity of the piglets, even though each boar contributes with the same sperm concentration in the pooled sperm doses. Key / O uso generalizado de pool de sêmen (dois ou mais machos compondo a dose) em inseminações artificiais comerciais limita a análise dos dados de fertilidade dos reprodutores. Pequenas diferenças no potencial fecundante dos machos doadores são ocultadas pelo uso de doses heterospérmicas. Este trabalho teve por objetivo identificar a contribuição individual de reprodutores suínos para a composição da progênie gerada por inseminação artificial heterospérmica. Foram utilizados quatro reprodutores suínos. Após a coleta dos ejaculados foram elaboradas doses inseminantes (DI) homospérmicas (A, B, C e D) e DI heterospérmicas, formando os pools (AB, AC, AD, BC, BD e CD) contendo 3,0 x 109 espermatozoides em 80 ml. Foram inseminadas 511 fêmeas. A determinação da paternidade foi através de marcadores SNP (Single nucleotide polymorphism). Foram genotipadas amostras de um total de 4.019 leitões, 3.558 provenientes de IA heterospérmicas e 461 provenientes de IA homospérmicas. Durante a análise do percentual de paternidade por pool, constatou-se que AC foi o único grupo em cada macho contribuiu igualmente para o tamanho das leitegadas (P > 0,05), nos demais pools foi observada diferença estatística significativa (P<0,05). A avaliação das doses heterospérmicas revelou que as médias mais elevadas foram de pools formados pelo reprodutor D, que contribuiu com aproximadamente 60% do total de nascidos (TN) em seus pools. Conforme os resultados obtidos, na maioria dos casos estudados não há contribuição semelhante na quantidade de leitões nascidos, ainda que a concentração de células espermáticas de cada um dos machos seja idêntica na formação das DIs.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:37:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_jorgea_pradiee.pdf: 964026 bytes, checksum: e100969ef5fb9f72ec9bf73b616695fd (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / In an attempt to diminish the structural damage to the plasma membrane, due to free radicals and reactive oxygen species (ROS), the antioxidants β-mercaptoethanol (BME) and cysteine (CIS) were tested for semen cryopreservation and in vitro maturation (IVM) and culture (IVC) of ovine embryos. Semen samples from four rams of the Crioula Lanada breed were collected with artificial vagina twice weekly (n = 23). Samples of four rams were pooled and split in six treatments: T1, control without antioxidant, T2, with 2mM BME, T3, with 5mM BME, T4, with 2mM BME and 5mM cysteine; T5, with 5 mM BME and 5mM cysteine, and T6 with 5 mM cysteine. Semen was diluted in tris-egg yolk-glycerol and stored in straws of 0.25 mL containing 100 x 106 spermatozoa. Cooling and freezing were performed using a TK3000 and thawing was performed at 37°C for 20 s. Sperm motility, membrane integrity and mitochondrial activity and acrosome, before freezing and after thawing, did not differ between treatments (P> 0.05). Quantification of ROS and total antioxidant activity after thawing were similar between treatments (P> 0.05). At the tested concentrations, the inclusion of BME, and cysteine did not affect sperm viability after thawing. In the first experiment of IVP, the inclusion of 20 mM of BME in IVM and IVC of embryos was compared to a control treatment without antioxidants. There was no deleterious effect of antioxidant on the cleavage rate (control: 70.0%; BME: 69.8%). However, the rate of development to the blastocyst stage with BME (5.2%) was lower (P <0.001) than with the control (16.9%). In the second experiment, we tested the association of 50 mM BME and 600 mM of CIS in IVM and IVC. There was no difference between control and BME/CIS (P> 0.05), for cleavage (60.3% and 64.3%, respectively) and embryonic development rates (33.6% and 36.6 %, respectively). The addition of 20 mM of isolated BME in IVM and IVC sheep embryos was associated with decreased embryonic development to blastocyst. However, the addition of antioxidants BME, and cysteine in combination, did not affect the rates of cleavage and embryo development to blastocyst. Therefore, the combination of antioxidants and CIS BME used in freezing ram semen and PIV, did not improve the treatments that have been added, albeit at different concentrations. / Na tentativa de diminuir os danos estruturais na membrana plasmática, devido aos radicais livres e espécies reativas de oxigênio (ROS), os antioxidantes β-mercaptoetanol (BME) e cisteína (CIS) foram testados na criopreservação de sêmen e na maturação (MIV) e cultivo (CIV) in vitro de embriões de ovinos. Amostras de sêmen de quatro carneiros da raça Crioula Lanada foram coletadas com vagina artificial, duas vezes por semana (n = 23). As amostras dos quatro machos foram combinadas em pool e divididas em seis tratamentos: T1, Controle, sem antioxidante; T2, com 2mM BME; T3, com 5mM BME; T4, com 2mM BME e 5mM de cisteína; T5, com 5mM BME e 5mM de cisteína; e T6 com 5mM de cisteína. O sêmen foi diluído em tris-gema-glicerol e estocado em palhetas de 0,25 mL contendo 100 x 106 espermatozoides. O resfriamento e o congelamento foram realizados em máquina TK3000 e o descongelamento foi realizado a 37ºC por 20 s. A motilidade, a integridade da membrana espermática e do acrossoma e a atividade mitocondrial, antes do congelamento e após o descongelamento, não diferiram entre os tratamentos (P> 0,05). A quantificação de ROS e da atividade antioxidante total pós-descongelamento foram semelhantes entre os tratamentos (P> 0,05). Nas concentrações testadas, a inclusão de BME e cisteína não influenciou a viabilidade espermática pós-descongelamento. No primeiro experimento de PIV, a inclusão de 20 μM de BME na MIV e CIV de embriões foi comparada a um tratamento controle sem antioxidantes. Não houve efeito deletério do antioxidante sobre a taxa de clivagem (Controle: 70,0%; BME: 69,8%). Porém, a taxa de desenvolvimento até o estágio de blastocisto no tratamento BME (5,2%) foi inferior (P<0,001) à do controle (16,9%). No segundo experimento, foi testada a associação de 50 μM de BME e 600 μM de CIS, na MIV e CIV. Não houve diferença entre os tratamentos controle e BME/CIS (P>0,05), quanto às taxas de clivagem (60,3% e 64,3%, respectivamente) e de desenvolvimento embrionário (33,6% e 36,6%, respectivamente). A adição isolada de 20 μM de BME na MIV e CIV de embriões ovinos foi associada com redução no desenvolvimento embrionário até blastocisto. Porém, a adição dos antioxidantes BME e cisteína, em associação, não afetou as taxas de clivagem e desenvolvimento embrionário até blastocisto. Assim, a associação dos antioxidantes BME e CIS usados no congelamento de sêmen ovino e na PIV, não promoveu melhora dos tratamentos em que foram adicionados, ainda que em concentrações diferentes.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_bruna_curcio.pdf: 7472121 bytes, checksum: b7f2b517d0687e52e051d45e308fb2eb (MD5) Previous issue date: 2006-12-05 / The aim of the study was to investigate: 1) the ultrastructural morphologic characteristics in equine oocytes subjected to different times of exposure to cryoprotectant solutions and 2) the effect of initial cumulus morphology and cryoprotectants in the nuclear in vitro maturation (IVM) of the vitrified immature equine oocytes. The oocytes were obtained from ovaries from a slaughterhouse. In the first study 30 oocytes where divided in three groups: Control group (G1, n=10); Group 2 (G2, n=10), the oocytes were vitrified for exposure to VS-1 for 3min and VS-2 for 1min; Group 3 (G3, n=10), exposure to VS1 for 1.5min and VS-2 for 30sec. The oocytes were vitrified in open-pulledstraws (OPS). The ultrastructural characteristics where observed using a transmission electron microscope. The oocytes were classified as: I) oocytes morphologically normal; II) oocytes which presented intermediate damage but had completed organelles, and III) oocytes with severe morphological abnormalities. In the second study, compact (Ccp; n=248) and expanded (Cex; n=264) cumulus oocyte complexes were divided in three groups: Control, Treatment-1 (T1 - Ethylene glycol-EG + Dimetyl sulfoxide-DMSO + SIB) and Treatment-2 (T2 - Formamide + EG + DMSO + Polyvinylpyrrolidone + SIB). The control group was immediately matured in vitro, the other immature oocytes were vitrified in OPS and then matured in vitro. The maturation stage was observed under a fluorescence microscope (Hoechst 33342). The results of ultrastructural morphology were rated as Class I: 80% oocytes of G1, 30% of G2 and 60% of G3; Class II: 0% oocytes of G1, 20% of G2 and 30% of G3 30%, and Class III: 20% oocytes of G1, 50% of G2 and 10% of G3. The maturation rates (metaphase II - MII) were: 41% Control group, 38,3% T1 and 33,3% T2 (P>0,05). In the control group, the MII rates were higher in Cex oocytes (53,2%) than those Cco oocytes (29,3%; P<0,05). The initial cumulus morphology didn t significantly affect MII rates after vitrification (P>0,05). However, Cex oocytes had higher MII rates than Ccp oocytes in T1 (50% vs 27,3%) and T2 (45,7% vs 21,6%). It can be concluded that the reduction in time of exposure to cryoprotectant solutions resulted in better preservation of ultrastructural characteristics of equine oocytes submitted to vitrification. Immature equine oocytes can be IVM after vitrification/re-warming, and satisfactory MII rates can be obtained. The initial cumulus morphology did not affect nuclear in vitro maturation of equine oocytes after vitrification. / Os objetivos do presente estudo foram: 1) analisar características morfológicas ultra-estruturais em oócitos eqüinos submetidos à vitrificação; 2) avaliar a maturação nuclear in vitro (MIV) de oócitos eqüinos vitrificados em soluções contendo bloqueadores sintéticos da formação de gelo (SIB); 3) considerar a influência das características das células do cumulus-oophorus no momento da coleta sobre a maturação nuclear in vitro. Foram utilizados complexos cumulusoócito obtidos de ovários provenientes de éguas de abatedouro. No primeiro experimento 30 oócitos foram divididos em 3 grupos: Grupo controle (G1, n=10); Grupo 2 (G2, n=10), vitrificados após exposição de 3min em VS-1 e 1min em VS-2; Grupo 3 (G3, n=10), exposição por 1,5min à VS-1 e 30s à VS-2. A vitrificação foi realizada em palhetas abertas estiradas (OPS). As características ultra-estruturais foram observadas em microscópio eletrônico de transmissão, sendo os oócitos classificados em três categorias: I) Oócitos sem alterações; II) oócitos com alterações intermediárias e III) oócitos com alterações severas. No segundo experimento, oócitos cumulus compacto (Ccp; n=248) e cumulus expandido (Cex; n=264) foram divididos em três grupos: Controle, Tratamento-1 (T1 - Etilenoglicol-EG + Dimetilsulfóxido-DMSO + SIB) e Tratamento-2 (T2 - formamida + EG + DMSO + Polivinilpirrolidona + SIB). O grupo controle foi MIV imediatamente após a coleta, o restante foi vitrificado imaturo em OPS e submetido a MIV após o reaquecimento. O estágio de maturação após incubação foi avaliado em microscópio de fluorescência (Hoechst 33342). Na avaliação de ultra-estrutura foram classificados no escore I 80% oócitos G1, 30% do G2 e 60% do G3; Classificação II: 0% dos oócitos G1, 20% do G2 e 30% do G3; e Classificação III: 20% dos G1; 50% do G2 e 10% do G3. Na avaliação da maturação, o índice de oócitos que atingiram MII foi 41% Controle, 38,3% T1 e 33,3% T2 (P>0,05). Nos oócitos do grupo controle, o índice de MII foi superior em oócitos Cex (53,2%) do que oócitos Ccp (29,3%; P<0,05). A avaliação da influência das características das células do cumulus na vitrificação não detectou diferença (P>0,05). Contudo oócitos Cex obtiveram maiores índices de MII do que oócitos Ccp em T1 (50% vs 27,3%) e T2 (45,7% vs 21,6%). Pode-se concluir que a diminuição do período de exposição às soluções de vitrificação resultou em melhor preservação das características ultra-estruturais de oócitos eqüinos submetidos à vitrificação. Oócitos eqüinos imaturos podem ser MIV após vitrificação/reaquecimento, obtendo índices satisfatórios de MII. As características das células do cumulus, no momento da coleta, não interferem no índice de maturação nuclear in vitro de oócitos eqüinos após vitrificação.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_ivan_bianchi.pdf: 495717 bytes, checksum: 66978c47d9c193a45f85b5cad5be6c3f (MD5) Previous issue date: 2007-02-27 / Although boar semen is available in the frozen format since 1975, its use has been restricted to very specific situations for many reasons: it requires spermatozoa concentration per dose twice to three times higher than that for cooled semen; semen processing is labor intensive; and farrowing rate and litter size are reduced. Thus, most of the artificial inseminations in swine are performed at the day of semen collection or at most at the following day, using liquid semen conditioned between 15 and 18 ºC. The aims of this thesis were: to evaluate distinct extenders for cooling semen, methods for freezing, centrifugation temperatures, the use of amides as penetrating cryoprotectants and of low density lipoprotein as nonpenetrating cryoprotectants, and the presence of specific protein factors in seminal plasma in the results that could be associated with boar semen freezability. Five experiments have been executed: four with evaluations in vitro (motility and cell membrane integrity); and one with fertilization in vivo. The control treatment was the freezing with glycerol at 3% concentration. The semen processing method that provide more efficient results consisted of semen cooling during 120 min up to a centrifugation temperature of 15 °C. We also identified a 26 kDa factor in the seminal plasma that is associated with maintenance of the integrity of the sperm cell membrane post-thawing. Additionally, parameters of semen quality in vitro with the use of dimetilacetamide at 5% were better than those observed with the most used penetrating cryoprotectant (glycerol 3%) as control, although no difference between those cryoprotectants was observed in vivo. This study demonstrated the association of components in the seminal plasma with the sperm quality, and presenting an alternative protocol of semen freezing-thawed boar semen based in the use of dimetilacetamide at 5%. / Apesar do sêmen suíno congelado estar disponível comercialmente deste 1975, o seu uso tem ocorrido somente em ocasiões específicas, pois, em relação ao uso de sêmen refrigerado, requer duas a três vezes maior número de espermatozóides por dose, o processamento do sêmen é trabalhoso, o tamanho da leitegada é diminuído em um a três leitões por parto e a taxa de parição é menor. Dessa forma, a grande maioria das inseminações artificiais nessa espécie utiliza sêmen diluído e acondicionado no estado líquido entre 15 e 18 ºC. Os objetivos desta tese foram: avaliar diferentes diluidores de resfriamento, metodologias de congelamento, temperaturas de centrifugação, uso de crioprotetores intracelulares a base de amidas e extracelulares baseados em lipoproteína de baixa densidade, além do estudo de fatores protéicos presentes no plasma seminal nos resultados de avaliações in vitro e in vivo de sêmen suíno congelado-descongelado. Foram executados cinco experimentos com avaliações da qualidade do sêmen congeladodescongelado, quatro experimentos com avaliações in vitro (motilidade e integridade de membrana) e um experimento com fertilização in vivo. O tratamento utilizado como controle foi o congelamento com glicerol na concentração de 3%. A melhor curva de resfriamento após a coleta até 15 °C, foi atingida com o tempo de 120 min. Foi identificado um fator de 26 kDa no plasma seminal, cuja ausência proporcionou melhores resultados de integridade de membrana plasmática após o descongelamento. O uso do crioprotetor intracelular dimetilacetamida na concentração de 5%, proporcionou nas avaliações in vitro, resultados superiores ao tratamento controle (glicerol 3%), não diferindo na avaliação in vivo. O presente estudo demonstrou a relação de componentes do plasma seminal com a qualidade espermática, além de apresentar um novo protocolo de congelamentodescongelamento de sêmen suíno baseado no uso de dimetilacetamida 5%.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_erico_kunde.pdf: 287917 bytes, checksum: c139b1164d4ea5a2964a48d21cf91781 (MD5) Previous issue date: 2007-02-28 / Deep litter systems (DLS) have lower facility cost and less environmental impact than conventional swine production systems, but the animal thermal comfort may not be ideal, during warm seasons. This thesis studied the effect of the use of litters having different depths on indicators of environmental comfort, animal growth performance and physical, chemical and microbiological characteristics of the litter. Three treatments were compared: solid concrete floor (control); litter of rice husk with depth of 0.25 (L25) and 0.50 m (L50). The first liter was used in two lots and replaced by a second litter used in other two lots. The environmental conditions were determined by the relative humidity of the air (RH), atmospheric temperature (AT) and litter temperature at the center of the pen, both in the surface (TSF) and at half of the depth (THD). Feed intake, weight gain and feed conversion for the pigs raised on DLS were also estimated. Concentrations of thermophilic and mesophilic bacteria, fungi and actinomycetes were determined by the most probable number method. TSF was lowest in the control group (P < 0.05), but it did not differ between C25 and C50 (P > 0.05). TSF was higher for new than for used litters and for the first than for the second litters (P < 0.05). The highest levels of N, P and K found in the L25 indicate that its compost has greater agronomical values. The concentration of mesophilic bacteria was higher in L50 than in L25 (P < 0.05). Although no statistical comparison was performed for growth performance parameters, feed conversion was similar for pigs in the control and DLS groups, with an apparent advantage for L25. This thesis also studied the effect of the addition of inoculums, in a pilot scale, on litters similar to those used in DLS, on the parameters mentioned above. The experimental units were boxes having area equal to 1 m2., on which litter of rice husk was added at the depths of 0.25 (L25) and 0.50 m (L50). On a daily basis, 6.4 l of swine dejects were added to the boxes, which consisted of three treatments: control without inoculums (T1); inoculation of 250 g of Bacillus cereus var. tyoii with 8,4 x 107 UFC/g (T2); and inoculation of 250 g of EnziLimp with 8,4 x 107 UFC/g (T3). Concentration of mesophilic and thermophilic bacteria, fungi and actinomycetes were determined and the chemical characteristics of the litter were evaluated. The addition of inoculums allowed higher concentration of thermophilic bacteria than in the control group (P < 0.05), so it would not be recommended for DLS. There was a higher concentration of thermophilic bacteria and fungi in the first lot of L50 (P < 0.05). Increased N level had a negative association with the concentration of all the thermophilic microbial populations (P < 0.05). Therefore, L25 can be recommended as a feasible option for DLS because it is associated with reduced concentration of thermophilic microbial populations in the litter, which leads to better thermal comfort for the pigs, without negative effects for growth performance, also generating compost having high agronomical value. / Em comparação com sistemas convencionais de criação de suínos, o sistema de produção sobre cama (SPC) utiliza edificações de menor custo e menor impacto ambiental, mas pode prejudicar o conforto térmico dos animais, em climas quentes. Esta tese estudou os efeitos das camas usadas para SPC, com diferentes profundidades, sobre indicadores de condicionamento ambiental da edificação, desempenho de crescimento dos animais, e características físicas, químicas e microbiológicas das camas. Três tratamentos foram comparados: piso de concreto (controle) e camas de casca de arroz com profundidade de 0.50 (C50) e 0.25 m (C25). A primeira cama foi usada em duas repetições e substituída por uma segunda cama usada em outras duas. A condição ambiental foi determinada através da umidade relativa do ar (UR) e das temperaturas atmosférica (TA) e no centro da baia, tanto na superfície (TCS), como na metade da profundidade (TCI). Também foram estimados o consumo de alimento, o ganho de peso e a conversão alimentar dos animais. Através de NMP, determinaram-se as concentrações de bactérias, fungos e actinomicetos, mesófilos e termófilos. A TCS foi mais baixa para o controle (P < 0,05), mas sem diferença entre C25 e C50 (P > 0,05). A TCS foi maior nas camas novas do que nas usadas e para as primeiras do que nas segundas camas (P < 0,05). Os maiores teores de N, P e K presentes na C25 indicaram que o composto produzido nesta profundidade possui melhor valor agronômico. A concentração de bactérias termófilas foi maior na C50 do que na C25 (P < 0,05). Ainda que não tenham sido feitas comparações estatísticas, a conversão alimentar foi similar para os animais no grupo controle e no SPC, com aparente benefício na C25. Esta tese também estudou o efeito da adição de inóculos, em escala piloto, sobre camas similares as usadas no SPC, sobre os parâmetros mencionados acima, em experimento realizado em uma granja comercial. As unidades experimentais foram caixas com 1 m2 de área, nas quais foi adicionada cama de casca de arroz, em profundidades de 0,25 (C25) e 0,50 m (C50). Diariamente, foram adicionados 6,4 l de dejetos por caixa, formando três tratamentos: controle sem inoculo (T1); inoculação de 250 g de Bacillus cereus var. tyoii com 8,4 x 107 UFC/g (T2); e inoculação de 250 g de EnziLimp com 8,4 x 107 UFC/g (T3). Foram determinadas as concentrações de bactérias, fungos e actinomicetos, mesófilos e termófilos e analisadas as características químicas das camas. A adição dos inóculos propiciou uma maior concentração de bactérias termófilas (P < 0,05), em relação ao controle, não sendo recomendável para animais em crescimento e terminação. Houve maior concentração de bactérias e fungos termófilos na primeira repetição da C50 (P < 0,05). A elevação do teor de N influenciou negativamente todas as concentrações microbianas termófilas (P < 0,05). Em conclusão, a C25 é uma opção viável para SPC, por apresentar um maior valor agronômico e possibilitar uma melhor conversão alimentar dos animais quando comparada com a C50.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_carolina_goncalves_serret.pdf: 168487 bytes, checksum: 39c57bfb4f44c9b01a747705b7e0e4a1 (MD5) Previous issue date: 2005-03-31 / Artificial insemination (AI) is a technique intensively used in the swine farms nowadays, due to its benefits related to genetic improvement and health status, allowing the industry to market high-quality healthy products. The post-cervical AI (PCAI) allows the deposition of semen in the uterine body, using 1 x 10 9 spermatozoa dose. Thus, with PCAI the fertility of one particular boar can influence the reproductive performance of a much higher number of females than in ICAI-based systems. The objective of this study was to compare the subsequent reproductive performance of swine breeding females submitted to either intra-cervical artificial insemination (ICAI) with sperm concentrations of 3.5 x 10 9 spermatozoa per dose or post-cervical artificial insemination (PCAI) with 2, 1, or 0.5 x 10 9 spermatozoa per dose. The study was conducted in a commercial farm including 338 F1 females. Among them, 232 were first inseminated 12 h after estrus detection, receiving the subsequent doses after 12 h intervals, whereas 106 were inseminated right after ovulation diagnosis through real-time ultrasound. Conception and farrowing (FR) rates for ICAI (98.9% e 97.9%, respectively) did not differ (P < 0,001) from those observed for PCAI (87.1% e 84.3%, respectively). Total litter size did not differ across treatments (P = 0.09). Although TP did not differ (P = 0,40) for different parities, total litter size for primiparous females (9.1 ± 0.4) was lower (P = 0,0004) than for parity-2 and -3 females (11.5 ± 0.5 e 11.5 ± 0.2, respectively). There was a significant effect of an interaction between treatment and parity on total litter size (P < 0.05), generally characterized by the occurrence of lower litter sizes for PCAI in primiparous females than for other treatment by parity combinations. In conclusion, reproductive performance for PCAI and ICAI were similar with sperm concentrations up to 1 x 10 9 spermatozoa per dose. / A inseminação artificial (IA) é uma biotécnica reprodutiva que vem sendo intensamente utilizada na suinocultura, em função dos benefícios genéticos e sanitários, permitindo que as agroindústrias coloquem no mercado produtos saudáveis e de qualidade. A técnica de IA pós-cervical (IAPC) possibilita a deposição do sêmen no corpo do útero, utilizando doses inseminantes com de 1 x 10 9 espermatozóides/dose. Portanto, com a IAPC, a fertilidade do reprodutor utilizado como doador de sêmen, passa a influenciar o desempenho reprodutivo de um número três vezes maior de fêmeas, quando comparado a IA convencional. Este estudo teve como objetivo comparar o desempenho reprodutivo de fêmeas suínas submetidas a IAIC, com dose inseminante convencional com a IAPC com 3 diferentes concentrações (2; 1; e 0,5 x 10 9 espermatozóides/ dose). O estudo incluiu 338 fêmeas F1, sendo que, 232 fêmeas receberam a primeira dose inseminante 12 h após a detecção de cio e as doses subseqüentes em intervalos de 12 h, enquanto 106 fêmeas foram inseminadas imediatamente após a ovulação, confirmada por ultra-sonografia em tempo real. Taxas de concepção e parição (TPAR) para a IAIC (98,9% e 97,9%, respectivamente), foram maiores (P < 0,001) às observadas para a IAPC (87,1% e 84,3%, respectivamente). Tanto para taxa de concepção como TPAR, os índices observados para o T8 foram numericamente inferiores aos demais tratamentos, porém sem diferença significativa ( P > 0,05). O total de leitões nascidos por parto não diferiu entre os tratamentos (P = 0,09). Para as fêmeas com 1, 2 , 3 ou mais partos, a TPAR foi igual a 90,2%, 82,7% e 88,9% (P = 0,40). No entanto, o total de leitões nascidos foi influenciado pela ordem de parto (OP) das matrizes, sendo inferior (P = 0,0004) para fêmeas primíparas (9,1 ± 0,4) do que para fêmeas com 2 e 3 ou mais partos (11,5 ± 0,5 e 11,5 ± 0,2, respectivamente). Também houve interação entre o efeito dos tratamentos e a OP com relação ao tamanho de leitegada, pois a resposta foi inferior (P < 0,05) em fêmeas primíparas em alguns dos tratamentos com IAPC. Com isso, podemos concluir que o método de IAPC, em condições de rotina em uma granja comercial, atingiu índices de desempenho reprodutivo semelhantes quando comparado com o IAIC, com doses de até 1 x 10 9 espermatozóides.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_milton_carvalho_macedo_junior.pdf: 497444 bytes, checksum: 51c0892c0419a147e202b85034bef566 (MD5) Previous issue date: 2007-01-30 / The knowledge of the reproductive potential of a male is of economic and reproductive importance, mainly if used in programs of artificial insemination. The conventional tests for semen quality evaluation do not have the capacity to measure the fertilizing potential of a sample, although they indicate if that one is fertile or not. The in vitro penetration test, appears in this context as an alternative laboratorial test to categorize of males capacity of fecundation, as mimics in vitro what happens in vivo. However this test has its use limited for for difficult execution and high cost. With the objective to simplify the test, the present work evaluated alternatives for reduction of the execution time, use of cryopreserved oocytes in different methods and its association with in vivo fertility through heterospermic insemination and following diagnostic fertility. It was concluded that: 1) It is possible to use the incubation system BOTTLE, to replace the conventional incubation system, eliminating the need for using expansive CO2 incubator; 2) Oocytes can be cryopreserved in CRIOVIAL, together with the medium of fecundation and mineral oil, eliminating the use of stereoscopic lupa to manipulate oocytes in the day of the execution of the test; 3) It is viable to reduce co-incubation time of oocytes and sperm for 6 hours, if sperm concentration is of 2 X 106 per ml of way of used fecundation; 4) The paternity diagnosis disclosed that when inseminating females swine with one pool of semen of four males, using a dose of 2,8 X 109 spermatozoa, all the males had the same participation in the paternity of the produced pigs / O conhecimento do potencial reprodutivo de um macho é de importância econômica e reprodutiva, principalmente se ele é utilizado em programa de inseminação artificial. Os testes convencionais que avaliam a qualidade seminal não possuem a capacidade de medir o potencial fertilizante de uma amostra e, apenas indicam se a mesma é fértil ou não. O teste de penetração espermática in vitro, aparece neste contexto como um teste laboratorial alternativo para categorizar os machos férteis, quanto a sua capacidade de fecundação, pois mimetizam in vitro o que acontece in vivo. No entanto, este teste tem seu uso limitado por ser de difícil execução e por utilizar equipamentos de alto custo. Com o objetivo de simplificar o teste, o presente trabalho avaliou alternativas para diminuição do tempo de execução, utilização de oócitos criopreservados de diferentes maneiras e sua associação com fertilidade in vivo através de inseminação heterospérmica e diagnóstico de paternidade dos leitões nascidos. Foi concluído que: 1) É possível utilizar o sistema de incubação FRASCO, em substituição ao sistema de incubação convencional, eliminando a necessidade de uso da onerosa incubadora de CO2; 2) Pode-se congelar oócitos em CRIOTUBO, juntamente com o meio de fecundação e óleo mineral, eliminado a utilização de lupa esteriomicrocópica para manipular oócitos no dia da execução do teste; 3) É viável reduzir o tempo de co-incubação de oócitos e espermatozóides para 6 horas, desde que a concentração espermática utilizada seja de 2 X 106 espermatozóide para cada ml de meio de fecundação utilizado; 4) O diagnóstico de paternidade revelou que ao inseminar fêmeas suínas com um pool de sêmen de quatro machos, utilizando dose inseminante de 2,8 X 109 espermatozóides, todos os machos tiveram participação semelhante na taxa de paternidade dos leitões nascidos